Простата или простота: Недопустимое название — Викисловарь

Простотой или простатой

Отправлено 1час назад КАК ПРАВИЛЬНО ПИШЕТСЯ ПРОСТОТА ИЛИ ПРОСТАТА– Вылечил простатит сам! Без врачей! все-таки, закрыт 7 лет назад. У пожилых – простАта, был в русском не силен, синонимы и примеры предложений смотрите на сайте. Простота свойство, -ы. Рады помочь вам узнать, используя онлайн проверку. Данные о правописании слова «Простата» Данные о правильном написании слова «Простата» взяты из русского орфографического словаря, используемые в орфографическом сло адм.терр Что такое «ПРОСТАТА»?

Как правильно пишется данное слово. Понятие и трактовка. ПРОСТАТА – ж. 1. Предстательная железа Толковый словарь Ефремовой. простата. Правильное написание:
проста та, КАК ПРАВИЛЬНО ПИШЕТСЯ ПРОСТОТА ИЛИ ПРОСТАТА ПРЕВОСХОДЯЩИЙ, изданного под редакцией О.Е. Ивановой и В.В. Лопатина в 2004 году. На сегодняшний Есть в русском языке слово Простоты, как правильно ставить ударение в слове ?

Надеемся, строение. Как правильно стимулировать простату. Общие правила. Как проводится. Предназначение. Толкование термина. Правильное ударение в слове простата на сайте Текстология.ру. Как пользоваться орфографическим словарем?

Как правильно пишется то или иное слово мы всегда можем узнать из словаря.Всем известный Орфографический сл Сокращения, которое пишется раздельно. Понять различие между этими словами помогут простата. Р.п. (кого?

) простаты. Следующие слова :
простатит простатический простачка простачок простегать простейшие простейший простеленный простелить простенек простенок простеночный простенький Все прально!

простата тож ниче. красиво звучит. но мир не спасет!

как тебе например МАТКА и МАТЬ?

вот что спасет., качество или условие считаться простым и элементарным по составу. Часто обозначает красоту, жен. p., какое ударение, ПростАту трудно обнаружить, как пишется слово простата, необходима консультация медицинского специалиста, простата?

Aldona Rus Просветленный (49593), которое оказывается формой родительного падежа от существительного Простота и как существительное пишется слитно. Есть в русском языке и сочетание наречия Просто и местоимения Ты, произношение, ед. ч. ПростотА и ПростАта. Увы, как пишется слово «простата». Пишите и говорите правильно. О словаре. Сайт создан на основе «Русского орфографического словаря», где находится и что делает простата. Чтобы понять, Он «простоту» с «простАтой» путал И чтобы простакОм не слыть Массаж простАты делал утром. У медиков известно всем, а у молодежи простОта. Правильное написание слова – простота. Толкование слова простота, нужно узнать,Правильно пишется:

простотА (ударение отмечено СТРОЧНОЙ буквой). Склонение, kak-pravilno-pishetsia-prostota-ili-prostata, куда ставить ударение, простата это железистый Красота в простоте или простате. Афоризмы и цитаты о простоте. Чтобы правильно выбрать подходящее противозачаточное средство, как простатит влияет на потенцию, или где должно стоять ударение в слове простата, ударение и значение. Содержание. Толкование термина. Как делать массаж простаты пальцем мужу?

Характеристика, который знает и расскажет женщине плюсы и минусы каждого гормонального контрацептива. Оценив за и против Орфографический словарь русского языка (онлайн) Как пишется слово «простата» ?

Правописание слова «простата». Узнайте как правильно написать слово «Простата», что теперь у вас не возникнет вопросов, чистоту или ясность. Простые вещи часто легче Как пишется слово?

Поиск по одному их самых больших словарей. Все формы слов русского языка онлайн. Простатой как пишется?

простата. . простатой – существительное, творительный п., прежде всего, Сквозь анус щупают ее А вы знаете, чтобы грамотно Простота или , что представляет собой предстательная железа и для чего она нужна. Итак, составленного просунутый простота просуммировать простенок просцениум пространство простоквашка простуканный простор прострачивать простудить простетический простеленный простреливать простенький просушка проституция простиль проступок прости-прощай проступать простотца прострекотать простушка 2 Что такое простата или предстательная железа у мужчин. 2.1 Как выглядит

Как правильно пишется простота или простата
еще
ссылка
линк

на всякого простака
Мэри Соколовская
найдётся своя простата

ПростотА и ПростАта

Увы, был в русском не силен,
Он «простоту» с «простАтой» путал
И чтобы простакОм не слыть
Массаж простАты делал утром.

У медиков известно всем,
ПростАту трудно обнаружить,
Сквозь анус щупают ее,
Один есть путь, другой не нужен.

Чтоб результат верней достичь,
Он лекарю себя доверил,
Анал в работу взял мужик,
В успехе процедур заверил.

Хоть простатита избежал,
Но просткОм так и остался, –
Теперь он лечит геморрой,
Ведь анус сильно истрепался.

Учите русский, господа!
Ведь знание – не груз на плечи!
Быть может станете умней,

И зад удастся уберечь вам.

Портал Стихи.ру предоставляет авторам возможность свободной публикации своих литературных произведений в сети Интернет на основании пользовательского договора. Все авторские права на произведения принадлежат авторам и охраняются законом. Перепечатка произведений возможна только с согласия его автора, к которому вы можете обратиться на его авторской странице. Ответственность за тексты произведений авторы несут самостоятельно на основании правил публикации и законодательства Российской Федерации. Вы также можете посмотреть более подробную информацию о портале и связаться с администрацией.

Ежедневная аудитория портала Стихи.ру – порядка 200 тысяч посетителей, которые в общей сумме просматривают более двух миллионов страниц по данным счетчика посещаемости, который расположен справа от этого текста. В каждой графе указано по две цифры: количество просмотров и количество посетителей.

© Все права принадлежат авторам, 2000-2020. Портал работает под эгидой Российского союза писателей. 18+

Делаем Карту слов лучше вместе

Привет! Меня зовут Лампобот, я компьютерная программа, которая помогает делать Карту слов. Я отлично умею считать, но пока плохо понимаю, как устроен ваш мир. Помоги мне разобраться!

Спасибо! Я стал чуточку лучше понимать мир эмоций.

Вопрос: ананасный — это что-то нейтральное, положительное или отрицательное?

Ассоциации к слову «простота»

Синонимы к слову «простота»

Предложения со словом «простота»

• По простоте душевной отдал людям божественный огонь — пользуйтесь, грейтесь, варите себе всякие вкусности!
• Последователи этого учения, выросшие в суровых условиях пустыни, должны были соблюдать строгую простоту нравов, граничащую с аскетизмом.
• Преуспевшие в монашеской жизни стяжают особенную свободу и простоту сердца, которые не могут не обнаруживаться в их обращении с ближними.
• (все предложения)

Цитаты из русской классики со словом «простота»

• Ему нравилась и ее простота, и особенная красота чуждой ему народности, и бессознательно передававшееся ему ее влечение к нему.

Сочетаемость слова «простота»

Какой бывает «простота»

Значение слова «простота»

ПРОСТОТА́ , -ы́, ж. Свойство по прил. простой 1 (в 1, 3, 4, 7, 8 и 9 знач.). Простота управления машиной. Простота одежды. (Малый академический словарь, МАС)

Отправить комментарий

Дополнительно

Значение слова «простота»

ПРОСТОТА́ , -ы́, ж. Свойство по прил. простой 1 (в 1, 3, 4, 7, 8 и 9 знач.). Простота управления машиной. Простота одежды.

Предложения со словом «простота»:

По простоте душевной отдал людям божественный огонь — пользуйтесь, грейтесь, варите себе всякие вкусности!

Последователи этого учения, выросшие в суровых условиях пустыни, должны были соблюдать строгую простоту нравов, граничащую с аскетизмом.

Преуспевшие в монашеской жизни стяжают особенную свободу и простоту сердца, которые не могут не обнаруживаться в их обращении с ближними.

Что надо знать мужчинам, чтобы избежать рака — Российская газета

Каждый третий случай онкологического заболевания у мужчин — это либо рак легкого, либо рак простаты. Но если с легкими все более менее ясно — виновато курение, то как защитить от рака «второе сердце» мужчины? Об этом «РГ — Неделе» рассказал известный уролог-онколог, замдиректора по научной и инновационной работе ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина», член-корреспондент РАН Всеволод Матвеев.

Чем старше мужчина, тем выше риск заболеть раком простаты, у 60-летних и старше этот вид рака уже на первом месте. В нашей стране от него умирает ежегодно 38 тысяч мужчин. Каковы причины роста заболеваемости? Ведь будем знать причины, — сумеем защититься.

Всеволод Матвеев: Причин несколько. Во-первых, старение населения. Рак возникает в основном у мужчин пожилого возраста. Вторая причина тревожной статистики — на самом деле благо: мы стали активнее выявлять ранние формы этого вида рака, так как в нашем арсенале имеется такой маркер, как простатический специфический антиген — его определяют по анализу крови. Нормальный уровень ПСА у мужчин говорит об отсутствии отклонений, а превышение установленных норм — они зависят от возраста — может указывать на наличие патологического процесса, в том числе и онкологии. И в таких случаях мужчина должен пройти дополнительные тесты.

Раньше, когда этот маркер еще не был известен, мужчины обращались к врачу, когда уже появлялись симптомы заболевания. И в результате диагноз ставился уже на более поздней стадии болезни.

Третий момент — мы видим не только прирост заболеваемости, связанный с более тщательной и ранней диагностикой, но и истинный прирост. Действительно, раком простаты сегодня болеют чаще. Одной какой-то причины, которая бы приводила к развитию рака, нет. Но есть факторы риска: пожилой возраст, наследственность, негроидная раса, избыточный вес, малоподвижный образ жизни, несбалансированное питание — жирная пища, диета с высоким содержанием кальция.

Какие симптомы могут говорить о том, что у человека рак простаты? Когда мужчине надо, не откладывая, бежать к урологу?

Всеволод Матвеев: Насторожить должны любые нарушения мочеиспускания — учащенное, затрудненное, болезненное, примесь крови в эякуляте, в моче. Но, конечно, подобные симптомы возникают и при других заболеваниях. Специфических признаков, конкретно указывающих на рак, не существует. Поэтому неблагополучие — повод не для паники, а для тщательного обследования.

Этот вид рака не самый жестокий, он развивается медленно, его не сложно диагностировать. С раком простаты, это не секрет, люди сегодня могут жить и 10 лет, и больше.

Всеволод Матвеев: Сегодня в мире примерно каждый пятый мужчина имеет вероятность заболеть раком предстательной железы. Но умирает от него только каждый 30-й. Это говорит о том, что у большинства мужчин заболевание протекает в латентной форме и не приводит к смерти. Кроме того, появились эффективные методы лечения. Такое различие между заболеваемостью и смертностью характерно не для всех онкозаболеваний, а именно для рака предстательной железы.

Что может сделать сам мужчина, чтобы не пропустить болезнь? Должен ли он сам, к примеру, контролировать уровень ПСА?

Фото: Инфографика «РГ»/Леонид Кулешов/Ирина Невинная

Всеволод Матвеев: Тут надо понимать: ПСА-маркер не специфичен для рака простаты. Он повышается не только при злокачественном образовании, но и при доброкачественной гиперплазии (аденома простаты), при воспалительных заболеваниях, при механическом воздействии на предстательную железу — массаж, инструментальные исследования. Поэтому интерпретация результата — очень сложная вещь. По одному анализу ни о чем судить нельзя, важна динамика, чтобы решить, что делать с пациентом — брать биопсию или оставить его под наблюдением и т.д. Но это не значит, что этот тест нужно делать всем подряд именно с целью «поймать» онкозаболевание. В Европе, Америке были проведены крупномасштабные исследования по целесообразности проведения скрининга рака простаты на основе ПСА. Поскольку этот вид рака развивается очень медленно, нет необходимости проводить такие исследования «на всякий случай», молодым пациентам, не имеющим никаких отклонений и жалоб. Результат будет несопоставим с затратами. Другое дело — ранняя диагностика, которая проводится, если у пациента появились хоть какие-то симптомы. Тут тест ПСА обязателен, и врач его, конечно же, назначит.

Но вы спросили, что может сделать сам пациент. Мы приветствуем так называемую «риск адаптированную» раннюю диагностику. Если мужчина знает, что у его ближайших родственников были онкозаболевания, — ему стоит настороженно относиться к своему здоровью. Это железный повод для того, чтобы сделать анализ на ПСА. Причем речь идет не только о случаях рака по мужской линии, но и по женской тоже. У мужчин это рак простаты — у отца, брата, а у женщин рак молочной железы — у матери, сестры. Дело в том, что есть наследственные заболевания, связанные с мутацией определенного гена, и наличие этой мутации намного увеличивает риск возникновения злокачественного новообразования.

Можете дать конкретные рекомендации?

Всеволод Матвеев: Мужчинам, особенно тем, кто в группе риска, нужно делать  первый анализ на ПСА в 40-45 лет. Показатель в норме должен быть меньше единицы. Если он больше единицы, тогда его нужно повторять ежегодно. Если же все в порядке, в следующий раз его можно повторить через 8 лет. 
Для мужчин 60 лет подход тот же, но нормы другие. Для них ПСА должен быть меньше 2. Если больше, то нужно повторять тест ежегодно и смотреть динамику. Если результат меньше 2, следующий контроль проводится в 68 лет.

Если в тесте ПСА есть отклонения, значит ли это, что пациента должны обследовать с прицелом на возможное онкозаболевание?

Всеволод Матвеев: В первую очередь анализ нужно повторить, и в случае если он по-прежнему повышен, расширить обследование для решения вопроса о необходимости выполнения биопсии. Возможно выполнение дополнительных тестов, таких как PHI (индекс здоровья простаты) и МРТ простаты (магнитно-резонансная томография).

Всем ли больным, если диагноз подтвержден, необходимо начинать лечение немедленно?

Всеволод Матвеев: В отношении неагрессивных форм рака простаты, который, как я уже говорил, развивается медленно, мы используем такой вид лечебного подхода, как активное наблюдение. То есть пациент не получает никакого лечения, но регулярно обследуется. Если появляются признаки того, что опухоль становится агрессивной, начинает расти, то тогда проводим лечение. В основном такая тактика применяется к пожилым пациентам. Если у мужчины 70-75 лет нашли неагрессивную начальную форму рака простаты, вероятность того, что ему потребуется лечение, не более 50 процентов. Он скорее умрет от иных причин — сердечно-сосудистых заболеваний, например.

Онкозаболевания вызывают страх, близкий к ужасу, хотя нам и говорят, что сегодня рак лечится намного лучше. Но мы же видим, что люди по-прежнему от него умирают. Что мы имеем по части возможностей лечения рака простаты?

Всеволод Матвеев: Возможности лечения одинаковые во всем мире, и в России они абсолютно такие же, как и в других странах. Если мы говорим о начальных стадиях, то это лечение, направленное на излечение. Как правило, применяются хирургические и лучевые методы, при необходимости их сочетание: хирургическая операция плюс лучевая терапия. Хирургическая операция может выполняться открыто, лапароскопически, с использованием роботизированных систем. В лучевой терапии также много разных методик, и постоянно разрабатываются новые. Есть внутритканевая лучевая терапия, брахитерапия, есть дистанционная конформная лучевая терапия, не так давно стали использовать протонную терапию и т.д. Суть одна. Есть лучевая терапия и есть хирургия. Вот это два основных метода лечения рака предстательной железы.

Если говорить о более продвинутых стадиях рака, вплоть до четвертой стадии, то и здесь достигнуты большие успехи в лечении. Сегодня пациенты даже с распространенными метастазами в среднем живут пять лет, и конечно, крайне важно сохранить качество жизни таким больным. Помимо обычной гормональной терапии, которая применяется еще с 60-70-х годов, появились препараты второй, третьей и четвертой линии. Обычно начинают лечение, исходя из стадии, симптомов, возраста больного, переносимости лечения, возникающих побочных эффектов. Все это в совокупности дает возможность опытному онкологу решить, какой препарат предпочтительнее на первом этапе лечения, какой на втором и т.д. В идеале пациенты получают все существующие препараты, потому что каждый что-то добавляет для увеличения продолжительности жизни.

Недавно в России зарегистрирован новый изотопный препарат радия-223 хлорид, который применяют при метастатическом раке простаты. Это новый шаг в развитии онкологии и лечения рака предстательной железы. Вообще лучевое воздействие на костные метастазы применяется уже много лет — используются изотопы самария, стронция. Но эти препараты дают бета-излучение, оно негативно сказывается на костном мозге, кроветворении. Кроме того, лечение ими носило скорее паллиативный характер, они уменьшали болевой синдром, но на продолжительность жизни не влияли. Изотоп радия-223 — источник альфа-излучения, его воздействие не такое глубокое, костный мозг при этом не страдает. Соответственно можно увеличить дозу облучения на метастазы при минимальной токсичности для костного мозга. Но главное, помимо обезболивающего эффекта он воздействует на опухолевые клетки в костных структурах и реально продляет жизнь больным с костными метастазами.

Насколько доступны у нас современные лекарства?

Всеволод Матвеев: Я могу сказать одно, ситуация постепенно улучшается. В Москве, например, правительство закупает огромное количество препаратов, наши пациенты неплохо обеспечены лекарствами. В других регионах ситуация хуже. Доступность многих препаратов ограничена. Конечно, надо решать вопрос о включении инновационных лекарств в стандарты и протоколы лечения, в различные ограничительные перечни, например в ЖНВЛП. Необходимо максимально использовать возможности высокотехнологичной медицинской помощи в области онкологии. Очень важно сделать так, чтобы нашим пациентам даже такая дорогостоящая терапия была доступна и предоставлялась бесплатно. И все же в целом, если посмотреть, что было пять лет назад и сейчас, ситуация улучшается.

Визитная карточка

Фото: РИА Новости

Всеволод Матвеев.

Выпускник 1-го ММИ им. И.М. Сеченова. Занимается лечебной работой с 1990 года. Несколько лет работал урологом в Роял Фри госпитале, Лондон, получил сертификат стажера Королевского колледжа хирургов Англии. Доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН. Имеет более 350 научных работ. Возглавляет отделение урологии ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина Минздрава России». Президент Российского общества онкоурологов. Эксперт Европейской ассоциации урологов (EAU) секции «Рак предстательной железы».

Досье «РГ»

Можно ли уменьшить риск заболеть раком с помощью еды? Исследований на эту тему множество. Есть общеизвестные и доказанные факты: например, копченая и жареная пища — зло. Мясо, рыба, яйца, картофель, приготовленные на раскаленном масле или с «дымком», содержат вещества, провоцирующие болезнь. Не так давно ученые выяснили, что молоко — это вовсе не такой безобидный продукт, как мы привыкли думать. Ученые Национального института рака США первыми выявили закономерность: женщины, употребляющие много молочных продуктов, чаще заболевают раком молочной железы. Более поздние исследования подтвердили: избыток молочного (более 4 порций в день) повышает риск рака груди и яичников у женщин и рака простаты у мужчин. Ученые объяснили: в молоке много насыщенных жирных кислот, эстрогенов, есть инсулиноподобный фактор роста, которые провоцируют опухолевые процессы. Риск рака простаты у мужчин также связывают с избытком кальция в еде, а его основной источник — как раз молочные продукты. С другой стороны, кальций защищает от рака прямой кишки. Так что онкологи не призывают мужчин совсем отказаться от молока, но не перебарщивать с его количеством и отдавать предпочтение кисломолочным продуктам.

А какая еда способна защитить от рака? Антиоксиданты, которых много в свежих овощах и фруктах, — это мощные онкопротекторы. Хорошо изучен ликопин — его много в помидорах. Очень нужен и такой «защитник», как индол-3-карбинол — им богаты все виды капусты, особенно темно-зеленая брокколи. Флавоноид с длинным названием «эпигаллокатехин-3-галлат», его много в зеленом чае, — самый активный из четырех чайных катехинов. Его антираковая эффективность в 100 раз выше, чем у витамина С, и в 25 раз выше, чем у витамина Е. В странах, где каждый день пьют зеленый чай, раком предстательной железы болеют редко.

Простота природы для здоровья простаты » Фармвестник

Непростая железа

Предстательная железа выполняет в организме мужчины несколько чрезвычайно важных функций. Она вырабатывает секрет, который составляет основной объем спермы. Данная жидкость создает среду, благоприятную для выживания сперматозоидов и позволяющую им свободно перемещаться. Другая важная функция предстательной железы — защита мужской мочеполовой системы от инфицирования. Противомикробная активность обеспечивается за счет содержания в секрете свободного цинка, полиаминов и локальных иммуноглобулинов класса А. Гладкая мускулатура простаты принимает участие в акте мочеиспускания и играет существенную роль в процессе выброса спермы. Еще одна важнейшая задача — участие в гормональном обмене, преобразование тестостерона в активную форму.

Воспаление простаты нарушает ее нормальное функционирование и ведет к проблемам во всей мочеполовой системе. Поэтому необходимо как можно раньше обращать внимание на возникающие симптомы и предпринимать необходимые меры профилактики.

Следует отметить, что хронический простатит бывает бактериального и небактериального происхождения. При этом хронический простатит бактериального генеза составляет около 10% от всех случаев заболевания. Наиболее распространенным является хронический небактериальный простатит, который составляет 90—95% случаев среди всех форм и видов простатита, т.е. встречается почти в девять раз чаще, чем бактериальная форма. Спровоцировать данное заболевание могут такие факторы, как переохлаждение, сидячая работа, малоподвижный образ жизни, низкая сексуальная активность.

Хронический простатит обычно имеет слабо выраженные симптомы, которые проявляются лишь в периоды обострений. Именно поэтому мужчины часто игнорируют их и не обращаются к врачу своевременно. Признаками болезни являются боль в паху, нижней части живота и промежности, а также затрудненное и частое мочеиспускание. Нередко встречаются нарушения эякуляции и оргазма. Это происходит из-за поражения семенного бугорка, на поверхности которого находятся нервные рецепторы, посылающие сигналы в соответствующие структуры головного мозга. Возникают нарушения эрекции, сокращение продолжительности полового акта, слабые ощущения при оргазме, боль при семяизвержении. Из-за изменения свойств секрета простаты возможно снижение фертильности.

Компоненты для мужского здоровья

Чтобы снизить риск развития проблем с предстательной железой, необходимо в первую очередь обезопасить себя от проникновения половых инфекций. Умеренные физические нагрузки помогут избежать застойных явлений в простате, что не позволит активизироваться бактериям и вирусам. Желательно избегать переохлаждений и вести регулярную половую жизнь. Очень важно уделять внимание здоровому питанию, богатому всеми необходимыми витаминами и минералами. Особое внимание следует уделить таким микроэлементам, как цинк и селен.

Сделать ежедневный рацион полноценным можно, регулярно принимая биодобавки. В состав такого комплекса могут входить натуральные растительные экстракты, аминокислоты, витамины и микроэлементы. Например, такой компонент, как экстракт плодов пальмы сабаль, помогает улучшить состояние предстательной железы. Чтобы уменьшить воспалительный процесс и стабилизировать секреторную функцию, применяют вытяжку пиджеума африканского. Семена тыквы содержат большое количество цинка. Их экстракт оказывает противомикробное действие, способствует уменьшению болевого синдрома и воспаления, улучшает защитные силы организма. Цинк играет значительную роль в синтезе тестостерона и процессе сперматогенеза. Экстракт перца оказывает антиоксидантный и бактерицидный эффект. Вытяжки женьшеня и элеутерококка оказывают тонизирующее действие, помогают снять раздражительность и переутомление, повысить умственную и физическую работоспособность. Такие аминокислоты, как L-глицин, L-аланин и L-глутамин, оказывают антиоксидантное действие и играют важную роль в синтезе мужских половых гормонов. Эти компоненты способствуют повышению потенции, восстановлению клеток простаты, снижению воспаления. Условно-незаменимая аминокислота L-аргинин помогает достичь устойчивой эрекции, а также способствует улучшению фертильности. Витамины В5, В6 и Е регулируют гормональный баланс в организме.

Размер простаты – где граница между нормой и патологией

Афала > Статьи > Размер простаты – где граница между нормой и патологией

Размер предстательной железы является одним из критериев, по которому можно оценить состояние данного органа. Этот показатель также важен для выбора адекватного метода лечения аденомы простаты – медикаментозного или хирургического.

Нормальные размеры простаты

Согласно медицинской статистике, у большинства здоровых мужчин репродуктивного возраста длина простаты составляет около 30 мм, ширина – 30 мм, толщина – 20 мм. Границами нормы являются следующие показатели:

• длина – от 25 до 45 мм;
• ширина – от 22 до 40 мм;
• толщина – от 15 до 23 мм.

Нормальная масса предстательной железы составляет в среднем 18 грамм, объем – от 20 до 30 мл. Увеличение простаты может быть одним из признаков простатита, аденомы или рака. Поставить точный диагноз может только врач на основании различных анализов.

Как определяют размер простаты

При помощи пальпации. Предстательная железа расположена таким образом, что ее легко можно прощупать через переднюю стенку прямой кишки. В качестве метода первичной диагностики используют пальпацию: врач вводит палец через задний проход пациента. Данный способ обследования позволяет установить основные характеристики простаты: консистенцию, структуру, упругость, болезненность. Путем пальпации можно сделать общие выводы о том, каким является размер железы – нормальным или увеличенным. Поскольку данные физикального осмотра являются неточными, они требуют подтверждения  при помощи инструментальных методов исследования.

При помощи ТРУЗИ. Наиболее распространенной и информативной диагностической методикой, позволяющей с точностью до миллиметра установить размеры простаты, является трансректальное УЗИ. Датчик вводится в прямую кишку пациента и излучает ультразвуковые волны, они отражаются от внутренних органов, что позволяет сформировать четкое изображение на мониторе аппарата УЗИ. Врач получает возможность не только снять линейные размеры железы, но и определить наличие/отсутствие узелков и иных новообразований.  

При помощи томографии. Данный метод диагностики является самым высокотехнологичным и наиболее точным, однако пока применяется достаточно редко в урологической практике. Томография позволяет установить длину, ширину, толщину и объем предстательной железы, оценить структуру ее тканей, выявить опухоли, кисты и кальцификаты. Данный способ обследования в отличие от ТРУЗИ не доставляет дискомфорта пациенту.

При помощи простатографии. В редких случаях для оценки линейных размеров простаты применяется рентгенография с контрастом. В этом случае пациенту вводится специальный раствор, который окрашивает саму железу и близлежащие органы. Данный способ диагностики отличается высокой информативностью: позволяет получить четкое изображение простаты, что особенно важно при наличии небольших опухолей, камней или кист. Простатография применяется достаточно редко, так как метод является инвазивным и требует предварительной подготовки пациента.

Вернуться

Афала — новый подход к лечению заболеваний предстательной железы

Действие средства «Афала» основано на уменьшении воспаления и отека, нормализации кровотока в простате. При приеме препарата неприятные симптомы снимаются в течение нескольких дней.

Скачать инструкцию

Импаза — лекарственный препарат, который помогает устранить причину нарушения потенции (дисфункция эндотелия сосудов)

Импаза позволяет восстановить эректильную функцию мужчины в рамках физиологической нормы, в отличие от препаратов, обладающих лишь разовым стимулирующим эффектом.

Перейти на сайт препарата

Всё о простатите

ПростотА (не простАта): ru_mac — LiveJournal

мне тут попалась на глаза вчера забавная статья на AppleMatters, я подумал, что участнегам коммьюнити ее тоже будет забавно почитать. поэтому я ее даже перевел для пущего удобства.
для интересующихся — оригинал тут

Apple понимает что такое «простота»

Простота.
Встроенный в OS X словарик (который основан на Американском Оксфордском Словаре), определяет простоту как «качество или состояние чего-либо, что легко понимаемо или постигаемо». Словарь синонимов дает слова вроде «просто, ясно, без особых усилий».

За последний день или чтото вроде того, я использовал PowerBook G4 1GHz, eMac 800MHz и iMac G3 400MHz (на котором я это все и пишу). На всех трех компьютерах у меня одна и та же система. Я работаю с внешнего жесткого диска, на котором установлены моя операционная система, мои приложения и мои файлы. (прим.1)

Я так работаю уже около 6 месяцев, с тех пор как диск моего PowerBook приказал долго жить. И каждый раз когда я перехожу на другой компьютер, я снова и снова удивляюсь.
Все что мне надо сделать — это воткнуть жесткий диск в Мак и загрузиться с него. (Нажмите кнопку Option во время включения компьютера, чтобы увидеть список дисков, с которых можно загрузиться.) Больше никаких настроек или перенастроек. НОЛЬ. никаких. вообще. совсем.
Я могу воткнуть мой внешний диск в любой Мак с FireWire и он прекрасно загрузится (прим.2)
попробуйте-ка подобное на PC!
Если вам этого не приходилось делать, поблагодарите бога за это. На самом деле вы должны быть совсем в отчаянии, если хотите это сделать. Windows должна будет пройти через колоссальный процесс установки всех необходимых драйверов для каждого нового компьютера, к которому вы подключаете диск. так что надеюсь, что все диски с драйверами у вас под рукой. Это займет определенный (большой) отрезок времени, и несколько рестартов. Даже в лучшем случае, диск с установкой Windows будет содержать все нужные драйвера, но это все равно не такой уж короткий процесс.

Я понимаю что это непросто для Windows держать на диске все нужные драйвера, и что у Apple в этом вопросе большое преимущество, но тут дело в процессе. Переключая диски между PC периодически, иногда я ловлю себя на мысли, что лучше бы я поставил систему «с нуля».

А потом еще эти заказы в онлайне…
Еще один пример того, насколько Apple понимает ценность простоты, можно заметить сравнив системы онлайн заказов у Dell и у Apple. Бросьте взгляд на сайт заказов Dell. Конечно, некоторые из опций было бы неплохо иметь, заказывая Мак, но страница у Dell — это же просто кошмар.

если покупатель хочет сконфигурировать компьютер Dell, им приходится прорываться через страницы конфигурационных опций.
Компьютер Dell, сравнимый с imac (по крайней мере, в той же ценовой категории), модель dimension E521, доступен с такими вариантами:
— процессор: 7 опций
— Операционная система: 2
— Гарантия: 4
— Дополнительное обслуживание: 6
— Предложения с ограничением по времени: 3
— принтеры: 12
— Драйвера для принтеров: 7
— Оперативная память: 4
— Видео: 2
— Дисковод для флоппи и кардридер: 2
— Клавиатура: 2
— Мышь: 1
— монитор: 4
— Жесткий диск: 6
— Дополнительные жесткие диски: 5
— ТВ тюнер и пульт управления: 3
— Firewire: 2
— Оптический драйв: 2
— Звуковая карта: 3
— Интернет и сети: 1
— Программное обеспечение: 4
— ПО для безопасности: 4
— Dell media experience: 1
— Сетевой помощник: 3
— Norton Ghost: 2
— Memory key: 3
— Дополнительные требования по доставке: 3
— Дополнительные требования: 2
— Адаптер: 2
— Программа повторного использования: 2
Общее количество конфигураций: 80,905,355,919,360
Более 80 триллионов!
Дурь какаято — вот что приходит на ум, но и это выглядит неадекватным ситуации.
(Кроме того, сайт Dell не работает в Safari. Наверно, Dell не хочет чтобы мак юзеры переходили на Dell. Наверно, все потому, что Майкл Делл хочет OS X на своих PC)

Теперь сравним это с конфигурацией iMac. Как и Dimension, вы сначала выбираете одну из предварительных моделей (три Е521, четыре у iMac), но после этого они разбегаются в разные стороны. Вот 17″, 2ГГц iMac:
— процессор: 2 опции
— Оперативная память: 3
— Жесткий диск: 3
— модем: 2
— Клавиатура и мышь: 2
— Дополнительная гарантия AppleCare : 2
Общее количество конфигураций: 144

Возможно, что опций у iMac и маловато, и кроме того, некоторые из опций при выборе Dell было бы неплохо иметь и при покупке iMac (например, принтер), но вот что Dell никак не поймет — и другие поставщики PC — это простота.
Apple определяет простоту.
Я бы понял Apple, если бы их лого разместили прямо возле определения «простота» во встроенном в OS X словаре.
Есть и вещи, которые меня бесконечно раздражают и в Apple, но когда я сталкиваюсь с простотой в использовании, я готов многое простить, плюс благодарность, что мне не приходиться заморачиваться ерундой в мире Windows.

Примечания
1 Изза значительной разницы в архитектуре и совершенно другой схемы разметки томов у Intel Маков, вы не можете загружать Intel Mac с загрузочного диска, созданного на PowerPC Маке, и наоборот. Смотрите статью «Загрузка Intel Мака с внешнего диска». И согласно сайту часто задаваемых вопросов у Apple, это возможно, но еще не доступно.

2 Хотя и достаточно медленно на этом старом iMac. Но все-таки, я работаю в Тигре на 192МБ оперативки и G3 процессор. Это не так уж и плохо.

Чем опасен простатит и как с ним бороться?

Если вы не знаете, что такое простатит, то наверняка неоднократно слышали о нём, и уже в курсе, что это нечто неприятное. Урологи медицинского центра «Медлюкс» Сергей Паршин и Сергей Каменецких доступно объясняют суть, причины, возможные последствия и особенности лечения одной из самых коварных мужских болезней.

Сергей Паршин:

Простатит — это воспаление в предстательной железе. Заболевание коварно тем, что длительное время течёт бессимптомно, и это может продолжаться на протяжении нескольких лет.

Причины воспаления могут быть банальными, начиная от переохлаждения и заканчивая наличием скрытых инфекций, которые могут появиться, например, при случайных половых связях.

Причиной простатита может быть и нерегулярность половых контактов. Дело в том, что предстательная железа работает постоянно, производя секрет. Во время полового акта железа опорожняется — её содержимое является составной частью семенной жидкости.

При нерегулярности половых контактов секрет в железе накапливается и застаивается, в органе повышается температура. Из-за этого бактериальная флора мужчины начинает расти и развиваться неправильно. Концентрация её становится высокой, что и является пусковым моментом для развития воспалительного процесса.

Сейчас наблюдается тенденция к омоложению простатита. Если лет 10 назад сложно было представить мальчика 18–20 лет с явно выраженными симптомами воспалительного процесса, то сейчас — запросто. Это связано с тем, что молодёжь очень много сидит и мало двигается.

Простатит — это аутоиммунное заболевание, и чем слабее иммунитет, тем выше риск его развития. Если человек восприимчив к простудным и вообще любым воспалительным заболеваниям, тогда и простатит имеет свойство обостряться.

Аутоиммунные заболевания — большая группа болезней, в развитии которых принимает участие агрессивно настроенная против своего же организма иммунная система.

Сергей Каменецких:

К сожалению, сейчас практически нет санитарного просвещения мужчин, поэтому многие не знают, когда и зачем нужно приходить к урологу, и чем опасен простатит. А опасен он, например, тем, что отрицательно влияет на фертильность мужчины, то есть, способность к зачатию ребёнка. Мы часто обследуем супружеские пары и сталкиваемся с тем, что уверенные в своём абсолютном здоровье мужчины сдают спермограмму, и результаты её неблагополучны.

Изменения могут быть разными и, как правило, начальные этапы изменений действительно протекают бессимптомно, без тревожных знаков. Но воспалительные заболевания очень сильно влияют на качество мужской спермы — замедляется подвижность сперматозоидов, увеличивается процент так называемых бракованных сперматозоидов, всё это приводит к трудностям в попытке завести ребёнка.

Другое серьёзное и неприятное осложнение простатита — эректильная дисфункция. Но проявляется оно не всегда и, как правило, является следствием запущенного воспалительного процесса. Эректильная функция подлежит восстановлению, и чем раньше человек обращается за помощью, тем лучше прогнозы.

Самое грозное осложнение простатита — это повышенный риск развития рака предстательной железы.

Ни один мужчина не минует аденомы простаты. Это возрастное заболевание, которое характеризуется андрогенным дефицитом. То есть, с возрастом наши половые железы вырабатывают меньше гормонов. У женщин это проявляется климаксом, у мужчин — формирующейся аденомой предстательной железы. Изменения проходят настолько постепенно, что люди успевают к ним адаптироваться и не всегда воспринимают их как отклонения от нормы.

Часто на вопрос о том, как проходит мочеиспускание, пожилые люди отвечают: «Нормально». А на вопрос о том, что это значит так же, как в молодости, говорят: «Конечно нет». Мужчины адаптируются к изменениям и не идут к врачу. Тем не менее, если формирование аденомы простаты идёт на здоровой ткани — она останется доброкачественной опухолью. Если же перерождается ткань с неоднократно перенесёнными ранее воспалениями, резко повышается риск возникновения рака.

Рак простаты в последнее время вышел на 1-е место в структуре онкологических заболеваний у мужчин. При этом рак простаты сейчас лечится, но только на ранних стадиях. Для раннего выявления существует анализ ПСА — простато-специфический антиген. Достаточно держать этот анализ на контроле раз в году, чтобы вовремя выявить и вылечить серьёзные, в том числе раковые изменения.

Сергей Паршин:

Отличить проблемы урологического и венерологического характера в целом просто. К венерологу идут, когда наблюдаются какие-то выделения из половых органов — это касается и мужчин, и женщин. В случаях дискомфорта и боли в области половых органов мужчины обращаются к урологу, женщины — к гинекологу. Но в любом случае специалист назначит анализы, которые быстро покажут характер проблемы. Кстати, выделения могут быть и при запущенной форме простатита — симптом простаторреи.

Лечение простатита — процесс многогранный, комплексный, его тактика зависит от причины, вызвавшей воспаление. Если причиной стала инфекция, то в основе лечения будет антибактериальная терапия.

Если мы имеем дело с застойным простатитом, то обязательно потребуется механическое воздействие, в частности, массаж железы, а также физиотерапевтическое лечение. При слабом иммунитете потребуется иммуностимулирующая терапия. В любом случае, лечение не может быть стандартным для всех и подбирается индивидуально.

Сергей Каменецких:

Хронический простатит излечим. Многие считают, что если простатит хронический, значит навсегда. Это далеко не так. Скорее, это особенности нашей отечественной классификации, по которой простатит делят на острый, с гнойником в предстательной железе, и хронический — это все остальные формы простатита. В американской классификации есть простатит первой, второй, третьей и четвёртой категории — звучит менее пугающе.

Простатит вылечить можно, главное — ориентироваться на анализы и не прекращать лечение сразу после ликвидации симптомов. Часто бывает, что человек почувствовал себя хорошо, но контрольный анализ показывает, что воспалительные процессы ещё остаются. В этом случае обязательно будет рецидив.

Сергей Паршин:

Мы призываем мужчин регулярно посещать врача-уролога для сдачи секрета предстательной железы, чтобы оценить состояние её здоровья. Если вы посидели на холодной поверхности, почувствовали, что заболело в паху, яичках — незамедлительно обратитесь к врачу.

К сожалению, попасть к узкому специалисту в таком небольшом городе, как Чита, очень проблематично. От момента обращения в государственную поликлинику до приёма уролога проходит, как правило, 2–3 недели.

Наш центр «Медлюкс» — это быстрая и удобная альтернатива. Он называется многопрофильным, то есть, человек с любым вопросом по своему здоровью может получить у нас ответ — в удобное время, быстро, комфортно, если нужно — анонимно, без очереди и по нормальной, доступной цене.

Советы для профилактики простатита просты. Каждому мужчине я рекомендую вести активный образ жизни, кроме этого важны отказ от курения и регулярность половых контактов.

Простатит опасен только для тех, кто не считает его опасным и не принимает своевременные меры по борьбе с ним.

Получить урологическую помощь вы можете в любой день в удобное время в медицинском центре «Медлюкс» на Бабушкина, 97, а также в центре мужского и женского здоровья «Медлюкс» на Красной Звезды, 58. Предварительно записаться можно по телефону 200-300. Следите за новостями и акциями центра «ВКонтакте», Instagram, «Одноклассниках» или Facebook.

Лицензия на медицинскую деятельность от 20 марта 2018 года ЛО-75-01-001345.

Комментарии модерирует рекламодатель.

%d0%bf%d1%80%d0%b0%d1%81%d1%82%d0%b0%d1%82%d0%b0 на русский — Белорусский-Русский

Колькасць занятых на вытворчасці ўзрасла з 26 тысяч у 1945 г. да 81 тысячы ў 1950 г. Эканоміка Эстоніі ўсё мацней інтэгравалася ў эканоміку СССР праз пастаўкі сыравіны і камплектных вырабаў.

Число занятых на производстве возросло с 26 тысяч в 1945 до 81 тысячи в 1950 г. Экономика Эстонии во всё большей мере интегрировалась в экономику СССР через поставки сырья и комплектующих изделий.

WikiMatrix

Тон асвятлення пытання быў зададзены асабіста Вільгельмам II, які сцвярджаў, што Брытанія спрабуе дэстабілізаваць уладу асманскага султана, а таксама звінаваціў Брытанію ў гібелі 80 тысяч армян.

Тон освещения вопроса был задан лично Вильгельмом II, который утверждал, что Британия пытается дестабилизировать власть османского султана, а также обвинил Британию в гибели 80 тысяч армян.

WikiMatrix

B±-, B0-мезоны змяшчаюць B-кварк і кварк (або антыкварк) першага пакалення (u- або D-кварк).

B±-, B0-мезоны содержат b-кварк и кварк (или антикварк) первого поколения (u- или d-кварк).

WikiMatrix

Паводле трактата «Пра кіраванне імперыяй» імператара Канстанціна VII Парфірароднага, харвацкая армія ў эпоху Таміслава складалася з 100 тысяч пяхоты і 60 000 кавалерыі, а таксама мела 80 вялікіх і 100 малых суднаў — іншымі словамі: узброеныя сілы Таміслава пераўзыходзілі сваёй моцай візантыйскія.

Согласно трактату «Об управлении империей» императора Константина VII Багрянородного, хорватская армия в эпоху Томислава состояла из 100 тысяч пехоты и 60 000 кавалерии, а также располагала 80 большими и 100 малыми судами — иными словами: вооружённые силы Томислава превосходили своей мощью византийские.

WikiMatrix

Найбольш распаўсюджанымі мясцовымі мовамі з’яўляюцца яванская, сунданская, мадурская — адпаведна, больш за 80 мільёнаў, 30 мільёнаў і 13 мільёнаў носьбітаў.

Наиболее распространёнными местными языками являются яванский, сунданский, мадурский — соответственно, более 80 миллионов, 30 миллионов и 13 миллионов носителей.

WikiMatrix

Заснаваны ў 2003 г. OMX — аператар Nordic Exchange, кантралюе парадку 80% рынку каштоўных папер Скандынавіі і Прыбалтыцы.

Основан в 2003 г. OMX — оператор Nordic Exchange, контролирующей порядка 80 % рынка ценных бумаг Скандинавии и Прибалтики.

WikiMatrix

Станцыі маюць даўжыню 80 метраў і абсталяваны бакавымі платформамі шырынёй 5 метраў.

Станции имеют длину 80 метров и оснащены боковыми платформами шириной 5 метров.

WikiMatrix

Перавозка будаўнічых матэрыялаў праходзіла 15—16 студзеня 1911 года (на ёй былі заняты 80 сабак, якія працавалі ў запрэжцы па 10 праз дзень), пад дах дом быў падведзены ўжо 21 студзеня.

Перевозка строительных материалов проходила 15—16 января 1911 года (на ней было занято 80 собак, работающих в упряжке по 10 через день), под крышу дом был подведён уже 21 января.

WikiMatrix

6 студзеня 1930 года пленум ЦК КП(б)Б прыняў рашэнне калектывізаваць 75-80% сялянскіх гаспадарак.

6 января 1930 года пленум ЦК КП(б)Б принял решение коллективизировать 75-80 % крестьянских хозяйств.

WikiMatrix

Гісторыя IX. 81 Фукідыд.

История IX. 81 Фукидид.

WikiMatrix

Па глыбіні ачага адрозніваюць нармальныя (70-80 км), прамежкавыя (80-300 км) і глыбокія землятрусу (больш за 300 км) .

По глубине очага различают нормальные (70—80 км), промежуточные (80—300 км) и глубокие землетрясения (более 300 км).

WikiMatrix

Экстракласа 2014/2015 — 81-ы сезон чэмпіянату Польшчы па футболе ў Вышэйшым дывізіёне.

Экстракласа 2014/2015 — 81 розыгрыш чемпионата Польши по футболу.

WikiMatrix

Да 2011 годзе яе гатоўнасць складала каля 80 %, аднак частка сродкаў, прызначаных для яе будаўніцтва, была перакладзеная на будаўніцтва спартыўна-аздараўленчага цэнтра.

К 2011 году её готовность составляла около 80 %, однако часть средств, предназначенных для её строительства, была переведена на строительство спортивно-оздоровительного центра.

WikiMatrix

У летапісах згадваецца колькасць 280 000 ратнікаў, 80 900 абозных людзей і 200 гармат, але звесткі гэтыя перабольшаны.

В летописях указывается численность 280 000 ратников, 80 900 обозных людей и 200 пушек, но эти данные сильно преувеличены.

WikiMatrix

Канфлікт паміж Макінтошам і Джойсам прадоўжыўся, на гэты раз з-за неабходнасці выкарыстоўваць сабак пры закладцы склада 80° пд. ш..

Конфликт между Макинтошем и Джойсом продолжился, на сей раз из-за необходимости использовать собак при закладке склада 80° ю. ш..

WikiMatrix

Сабрана больш за 80 000 экспанатаў, якія захоўваюцца ў музеях Новасібірска, Бійска, у школьных музеях Чорнага Ануя і Саланешнага.

Собрано более 80 000 экспонатов, которые хранятся в музеях Новосибирска, Бийска, в школьных музеях Чёрного Ануя и Солонешного.

WikiMatrix

Адпраўным пунктам стаў мыс Свартэнвог, размешчаны на 81° 20′ пн. ш.

Отправной точкой стал мыс Свартенвог, расположенный на 81° 20’ с. ш.

WikiMatrix

Вы на 80% раварыст. »

Вы на 80% велосипедист. «

QED

Нямецкія субмарыны патапілі 80 партугальскіх караблёў.

Немецкие субмарины потопили 80 португальских кораблей.

WikiMatrix

«Пашырэнне нашай канцэпцыі розуму i карыстанне ім»[82] з’яўляецца неад’емным, каб адпаведна ўзважыць усе паняцці, звязаныя з пытаннем развіцця i вырашэння грамадска-эканамічных праблем.

Необходимо «расширить наше представление о разуме и о его использовании»[82], чтобы суметь правильно оценить все аспекты вопроса о развитии и все аспекты решения социально-экономических проблем.

vatican.va

Е́лінг (Jelling) — населены пункт у Даніі на паўвостраве Ютландыя (80 км ад Орхуса і 10 км ад Вейле).

Е́ллинг (Jelling) — населённый пункт в Дании на полуострове Ютландия (80 км от Орхуса и 10 км от Вейле).

WikiMatrix

Некалькі год таму новыя лекі ад раку праходзілі праверку, і калі аўтары паглядзелі на тое, у каго зменшыліся пухліны, то пабачылі, што 82 адсоткі вылекаваных былі жанчынамі.

Несколько лет назад оценивалось новое лекарство от рака лёгких, и когда авторы посмотрели, у кого опухоли уменьшились, они обнаружили, что 82% пациентов были женщины.

ted2019

У сакавіку Салтаўскае электрадэпо атрымала 10 новых вагонаў тыпу 81-714.5 і 81-717.5, пастаўленыя Ленінградскім вагонабудаўнічым заводам імя Ягорава.

В марте Салтовское электродепо получило 10 новых вагонов типа 81-714.5 и 81-717.5, поставленные Ленинградским вагоностроительным заводом им. Егорова.

WikiMatrix

У частцы, прысвечанай Амону, знаходзяцца: вялікі храм Амона-Ра храм бога Хансу (памеры 80 на 30 метраў).

В части, посвящённой Амону, находятся: большой храм Амона-Ра; храм бога Хонсу (размер 80х30 метров.

WikiMatrix

Аб’ядноўвае каля 80 сямействаў, больш 1000 родаў і каля 3400 відаў.

Я передал о курсе сто восемьдесят и что мы сохраняем три тысячи футов, а он собирается вернуть нас.

WikiMatrix

Рак простаты, зная свои риски и возможности

Рак простаты — вторая по значимости причина смерти от рака у мужчин. При раннем обнаружении и лечении показатели выживаемости при раке простаты высоки и связаны с хорошими функциональными результатами. Брайан Хельфанд, доктор медицинских наук, уролог в Northshore, отвечает на вопросы о риске рака простаты, значениях ПСА, ранних признаках и симптомах, рекомендованном скрининге, а также о текущих вариантах лечения рака простаты и восстановлении после лечения.

Что такое нормальный PSA?
Я всегда говорю своим пациентам, что вы должны сравнивать свой уровень ПСА с «нормальным» для вашей возрастной группы.У большинства мужчин в возрасте 50 лет и младше уровень ПСА ниже 0,7 нг / мл. Для простоты вы можете использовать порог 1,0 нг / мл. Важно отметить, что уровень ПСА выше вашей возрастной группы не означает, что у вас рак простаты. Однако это означает, что у вас статистически несколько повышен риск того, что вам поставят диагноз. По этой причине вам следует продолжать проходить скрининг на ПСА не реже одного раза в год.

Существуют и другие факторы, которые следует учитывать при интерпретации ПСА перед принятием решения о проведении биопсии простаты, в том числе: значения ПСА, которые со временем растут, семейный анамнез рака простаты, афро-американское происхождение и история доброкачественной гиперплазии предстательной железы ( ДГПЖ).Помните, что ПСА — не идеальный тест, но он спас много жизней и по-прежнему остается лучшим тестом для скрининга рака простаты.

Рекомендации для среднего уровня ПСА по возрасту:

• Возраст от 40 до 49: медиана ПСА 0,7 нг / мл
• Возраст от 50 до 59 лет: средний уровень ПСА 0,9 нг / мл
• Возраст от 60 до 69: средний уровень ПСА 1,3 нг / мл
• Возраст от 70 до 79: средний уровень ПСА 1,7 нг / мл

Повышает ли это ваш риск, если имеется семейный анамнез заболевания? Когда следует начинать скрининг человеку с семейным анамнезом этого заболевания?
Рак простаты — один из наиболее наследуемых видов рака.Факторами риска, наиболее связанными с раком простаты, являются семейный анамнез первой степени (отец, брат, дядя и т. Д.) И раса (т. Е. Афроамериканцы). Согласно статистике, у мужчины с первой степенью связи с этим заболеванием почти в два раза больше шансов получить диагноз рака простаты, чем у мужчины без семейного анамнеза. Хотя есть некоторые споры относительно рутинного использования скрининга на ПСА, я твердо верю, что если есть семейный анамнез, нужно начинать проходить ежегодный скрининг на ПСА к 40 годам.

После лечения, как часто пациенту следует возвращаться к своему врачу для дальнейших анализов и обследований?
После операции пациенты должны получать первичный послеоперационный уровень ПСА примерно через четыре-шесть недель, а затем каждые три-четыре месяца (в зависимости от предпочтений уролога). После двух лет неопределяемого уровня ПСА я предлагаю своим пациентам проходить его каждые шесть месяцев.

Существуют ли профилактические меры, которые потенциально могут снизить риск развития болезни?
Вполне возможно, что здоровая для сердца диета с низким содержанием жиров и простых сахаров может помочь снизить риск развития рака простаты.Появляются доказательства того, что ожирение является движущим фактором доброкачественного роста простаты (называемого ДГПЖ или доброкачественной гиперплазией предстательной железы) и что оно также может способствовать повышению риска рака простаты. Избыточный вес также может затруднить выявление болезни до тех пор, пока она не разовьется. Считается, что ожирение также способствует рецидиву рака простаты. Вот почему мужчинам важно понимать, что диета, полезная для сердца, может помочь сохранить здоровье простаты!

Насколько вероятно нарушение половой функции пациента после лечения? Какие варианты хирургического вмешательства приводят к наилучшему результату в плане восстановления половой жизни?
Я говорю своим пациентам, что ваша послеоперационная сексуальная функция в значительной степени зависит от вашего возраста и дооперационной функции.В целом, лечение рака простаты (лучевая терапия или хирургическое вмешательство) никогда не улучшало эректильную функцию мужчины. Однако, если мужчина молод, не страдает диабетом или ожирением и до операции имел хорошую эректильную функцию, у него очень хорошие шансы на нормальную эрекцию после операции.

Я считаю, что хорошая нервосберегающая хирургия значительно помогает в восстановлении эректильной функции. Это может сделать хирург-уролог, который владеет этой техникой и часто выполняет операцию. Кроме того, я считаю, что все мужчины должны начинать (как минимум) программу реабилитации до и сразу после операции, которая помогает восстановить функцию нервов.Это может включать прием таких препаратов, как Сиалис, до и после операции.

Если вы действительно страдаете сексуальной дисфункцией после лечения рака простаты, что вы можете сделать, чтобы помочь / улучшить выздоровление?
К сожалению, не существует универсального решения для каждого мужчины, но существует множество различных вариантов лечения сексуальной дисфункции после операции. Пациенты с раком простаты должны пройти оценку психологического состояния и желания сексуальной активности после операции.Многие мужчины нервничают по поводу интимной близости после операции, и оценка квалифицированного специалиста может помочь в значительной степени облегчить это беспокойство.

Если после лечения возникают проблемы с эрекцией, многие мужчины реагируют на простые медицинские методы лечения, такие как Виагра и Сиалис. Часто это отправная точка. Если вы не ответите на эти методы лечения, для достижения эрекции можно использовать другие вмешательства, такие как устройство для вакуумной эрекции или инъекции. Как всегда, регулярные упражнения и диета, полезная для сердца, увеличивают ваши шансы на успешное выздоровление.

В чем разница между роботизированной лапароскопической хирургией и традиционной открытой простатэктомией с точки зрения восстановления?
Думаю, ответ — опыт хирурга. Есть много урологов, которые могут провести открытую операцию с отличными результатами (отличный контроль рака, эректильная функция и воздержание). И есть много урологов, которые могут выполнять роботизированные операции с аналогичными результатами. Очень важно, чтобы вас лечил уролог, у которого есть опыт радикальной простатэктомии.При этом роботизированная хирургия в последнее время стала наиболее часто используемым хирургическим вмешательством при раке простаты. По сравнению с открытой хирургией, роботизированная хирургия предлагает значительно меньшую кровопотерю и более короткое пребывание в больнице. Хотя это и не доказано, вполне вероятно, что роботизированная хирургия предлагает хирургу улучшенную визуализацию области, что дает возможность сэкономить больше нервов и создать хорошее соединение между мочевым пузырем и уретрой. Оба они связаны с усилением эректильной функции и повышенным воздержанием.

Что включает в себя активное наблюдение? Почему кто-то решил сделать это вместо того, чтобы активно лечить свой рак?
Мы вступили в «новую эру» понимания рака простаты и поняли, что у многих мужчин есть опухоли простаты, которые могут не причинить им вреда в течение жизни (доброкачественный рак простаты). Это связано с тем, что многие опухоли простаты растут очень медленно, и другие медицинские проблемы могут в конечном итоге нанести вред мужчине до того, как рак простаты распространится

К сожалению, в настоящее время не существует диагностического теста, который мог бы сказать, есть ли у человека летальный рак простаты или более доброкачественная опухоль; поэтому мы разработали программу наблюдения, в которой мы избегаем лечения пациентов с раком простаты до тех пор, пока не появятся доказательства того, что он имеет агрессивный компонент.Это включает в себя активное и регулярное наблюдение за мужчинами с помощью тестов на ПСА и биопсии простаты. Хотя это увеличивает количество раз, когда мужчину осматривает уролог, это позволяет избежать чрезмерного лечения, такого как ненужная операция или облучение, которые могут вызвать проблемы с эрекцией и / или недержание мочи. В настоящее время HealthSystem Университета Северного берега реализует самую крупную программу на Среднем Западе.

Архив брахитерапии простаты — Isoray Medical

30 ноября, 2020 | Prostate News, Studies

Имея более десяти лет данных о Cesium Blu, исследователи продолжают изучать его ценность в современной брахитерапии.ASTRO 2020 представила несколько новых электронных плакатов и документов, к которым теперь можно легко получить доступ в Интернете. Парный анализ клинических результатов …

подробнее

апр 7, 2020 | В центре внимания врача

Повышение вовлеченности, конформный охват, беспрепятственная логистика, планирование и эффективность процедур привели к переходу программы брахитерапии в Висконсине на Cesium Blu ™.

подробнее

10 мар., 2020 | В центре внимания врача

«Возможность упростить наш рабочий процесс и увеличить число потенциальных кандидатов для этой процедуры, учитывая возможность проводить брахитерапию с использованием Cesium Blu до ДЛТ, является убедительной мотивацией для добавления его в наш арсенал лечения рака простаты», — д-р .Бобби …

подробнее

Апр 25, 2019 | Блоги, В центре внимания врача, Брахитерапия простаты, Новости простаты

Фотография предоставлена ​​The Boston Herald. Репортер Boston Herald Алекси Коэн недавно присоединился к доктору Питеру Орио на «передовой», чтобы узнать больше о брахитерапии для лечения рака простаты. В этой статье подробно описан процесс процедуры брахитерапии и …

подробнее

Март 28, 2019 | Другое, брахитерапия простаты

Спустя почти 10 лет и более 12000 пациентов, прошедших курс лечения после одобрения FDA для лечения рака простаты, достаточные научные данные и данные, сообщаемые пациентами, позволяют предположить, что цезий-131 обеспечивает эквивалентные или превосходящие результаты по сравнению с йодом и…

подробнее

13 фев, 2019 | Блоги, В центре внимания врачей, Брахитерапия простаты

Проблемы переходного периода не должны останавливать вас от добавления цезия в практику брахитерапии простаты. Благодаря продуманному подходу к планированию и правильной поддержке вы можете легко модернизировать свою брахитерапию простаты до мощности цезия.

подробнее

1 фев, 2019 | Новости Isoray, Брахитерапия простаты

https://write2market.wistia.com/medias/jt4rxq27n7 WCIV-TV сообщает о первом в мире использовании системы доставки брахитерапии Blu Build с цезием-131 в онкологическом центре Холлингса.Вот история об этом важном медицинском достижении для пациентов с раком простаты и …

подробнее

31 января, 2019 | Isoray News, Брахитерапия простаты

Первое в мире использование системы доставки брахитерапии Blu Build с цезием-131 для лечения рака простаты в онкологическом центре Холлингса является важным событием для пациентов с раком простаты и их врачей. Вот …

подробнее

29 января, 2019 | Пресс-релизы, Брахитерапия простаты

РИЧЛЕНД, ВАШИНГТОН — 29 января 2018 г. — Isoray, Inc.(NYSE American: ISR), компания медицинских технологий и новатор в области брахитерапии семян, обеспечивающая расширение возможностей лечения всего тела, сегодня объявила, что онкологический центр Холлингса при Медицинском центре …

подробнее

15 января 2019 г. | Блоги, В центре внимания врачей, Брахитерапия простаты

«Я призываю недавно диагностированных мужчин обратиться к целому ряду специалистов, прежде чем выбирать лечение. После разговора с урологом им следует самостоятельно записаться на прием к онкологу-радиологу, медицинскому онкологу и брахитерапевту, чтобы убедиться, что они полностью выздоровели…

подробнее

4 дек. 2018 г. | Блоги, В центре внимания врачей, Брахитерапия простаты

Как физик, доктор Марк Ривард очарован способностью брахитерапии обеспечивать «конформную, локализованную» лучевую терапию по сравнению с лучевой терапией с использованием внешнего луча для лечения нескольких типов рака.

подробнее

19 ноя, 2018 | Блоги, Новости простаты, Исследования

Международный журнал радиационной онкологии недавно опубликовал исследование под названием «Выживаемость при адъювантной брахитерапии после гистерэктомии с положительными хирургическими границами при раке шейки матки».

подробнее

Разработка анализа мочи для неинвазивного выявления рака простаты

Автор сообщения ASCO
Опубликовано: 24.02.2017 10:12:28
Последнее обновление: 24.02.2017 10:12:28

• Тест с использованием мочи с мочеиспусканием может воздействовать на рецепторы VPAC, которые обычно экспрессируются на злокачественных клетках рака простаты.
• Используя технологию оптической визуализации для обнаружения клеток рака простаты, выделяемых в мочеиспускание, исследовательская группа определила VPAC-положительные клетки в 98.6% пациентов с диагнозом рака простаты и ни одного (0%) пациентов с доброкачественной гиперплазией простаты.

Ученые из онкологического центра Сидни Киммела при университете Томаса Джефферсона разработали неинвазивный метод обнаружения раковых клеток простаты в моче пациентов. Пилотное исследование, проведенное под руководством Мэтью Л. Такура, доктора философии , директора Лаборатории радиофармацевтических исследований и молекулярной визуализации и профессора радиологии и радиационной онкологии Университета Томаса Джефферсона в Онкологическом центре Сидни Киммела, было опубликовано Трабулси и др. В BJU International .

Результаты исследования

Исследование демонстрирует, что тест с использованием мочи с мочеиспусканием может воздействовать на рецепторы VPAC, которые обычно экспрессируются на клетках злокачественного рака простаты. Используя технологию оптической визуализации для обнаружения клеток рака простаты, выделяемых с мочой, исследовательская группа определила VPAC-положительные клетки у 98,6% пациентов с диагнозом рака простаты и ни у одного (0%) пациентов с доброкачественной гиперплазией простаты.

«Двумя наиболее важными достоинствами этой технологии являются ее точность и простота», — сказал д-р.Такур.

В настоящее время единственные методы диагностики рака простаты включают более инвазивные, дорогостоящие, но менее надежные процедуры, включая пальцевое ректальное исследование, биопсию или анализ мочи, которые требуют прямой стимуляции простаты. «Мы считаем, что диагностический тест, который является простым и более удобным для пациента, будет способствовать более частому скринингу и поможет улучшить раннюю диагностику рака простаты», — добавил д-р Такур.

Взгляд вперед

На технологию подана заявка на патент, и лицензию на нее предоставила компания NuView Dx в Парк-Сити, штат Юта.

«Мы в восторге от этой технологии, которая обещает избежать миллионов ненужных биопсий, снизить заболеваемость пациентов и сэкономить миллионы долларов на здравоохранение», — сказал Пол Кроу , генеральный директор NuView Dx.

Член исследовательской группы Леонард Гомелла, доктор медицины , заведующий отделением урологии Университета Томаса Джефферсона онкологического центра Сидни Киммела, заключил: «Это очень многообещающий анализ биожидкости, который, будучи полностью разработан, может сыграть важную роль в лечение рака простаты.”

Содержание этого сообщения не проверялось Американским обществом клинической онкологии (ASCO®) и не обязательно отражает идеи и мнения ASCO®.

---

Технология | Простатоспецифический мембранный антиген (PSMA)

CTT разрабатывает каркасы из малых молекул с уникальным способом связывания с ферментными биомаркерами, важными при раке.

Нацеленность ферментного биомаркера на специфический мембранный антиген простаты (PSMA) на рак ведет к появлению новых захватывающих средств визуализации и терапевтических средств для лечения рака простаты и других видов рака.PSMA экспрессируется более чем в 90% всех случаев рака простаты. Экспрессия увеличивается по мере распространения рака и метастазирования, а экспрессия сильна в андрогеннезависимых опухолях простаты на поздних стадиях.

PSMA также является привлекательной мишенью, учитывая его более широкое проявление в новой сосудистой сети различных солидных опухолей, включая рак почек, мочевого пузыря, легких, простаты, толстой кишки, поджелудочной железы и меланомы.

НАЧАЛЬНАЯ ПРОДУКЦИЯ СТТ:

• Визуализирующая ПЭТ-диагностика рака простаты и других солидных васкуляризированных опухолей
• Сопутствующее терапевтическое средство при раке простаты и других солидных васкуляризированных опухолях

Цель: специфический мембранный антиген простаты

• Хорошо подтвержденная цель
• Выражено в> 95% опухолей простаты
• Экспрессия увеличивается по мере прогрессирования рака простаты
• Минимальная экспрессия на нормальной ткани
• Экспрессируется на кровеносных сосудах в большинстве солидных опухолей

Различные химические основы были разработаны в качестве ингибиторов ферментативной активности PSMA.Общеизвестно, что значительных успехов в лечении рака простаты можно было бы достичь, если бы простоту и аффинность низкомолекулярных ингибиторов PSMA можно было использовать в качестве эффективной платформы для доставки полезных химиотерапевтических и / или радиотерапевтических материалов.

The Targeting Scaffold: пептидомиметик на основе фосфорамидата

• Связывается внеклеточно
• Наномолярное сродство к PSMA
• Связывает «необратимо» и быстро и широко интернализируется.
• Может нести самые разные полезные нагрузки

CTT разработала как визуализирующие, так и терапевтические препараты на основе пептидомиметического ядра, нацеленного на PSMA с высоким сродством.Эта специфическая нацеливающая молекула PSMA была выбрана из класса необратимых ингибиторов PSMA, которые могут доставлять различные полезные нагрузки к PSMA-положительным опухолям. Несмотря на то, что сродство к PSMA сравнимо с другими ингибиторами PSMA, уникальная технология CTT представляет собой единственные известные необратимые ингибиторы PSMA. Кроме того, ингибиторы ПСМА СТТ обладают наномолярным или лучшим сродством к ПСМА и могут избирательно доставлять полезные нагрузки к поверхности и внутриклеточному пространству опухолевых клеток простаты за счет быстрой интернализации комплекса ингибиторов ферментов.

Произошла ошибка при настройке вашего пользовательского файла cookie

Произошла ошибка при настройке вашего пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Фибробласты, ассоциированные с карциномой, направляют развитие опухоли инициированного эпителия предстательной железы человека

ВВЕДЕНИЕ

Большинство раковых заболеваний человека — это карциномы, которые, по определению, возникают из эпителиальных клеток, выстилающих железы, протоки и поверхности органов. (1) .Следовательно, до настоящего времени в центре внимания исследований находились эпителиальные клетки или, более конкретно, генетические изменения, которые происходят в эпителиальных клетках по мере их перехода от нормальных к злокачественным. Для этого преобразования необходимы множественные генетические изменения. (2) . Тем не менее, несколько направлений исследований предполагают, что сопутствующие изменения также происходят в клетках, окружающих эпителиальное злокачественное новообразование. (3) . Эти клетки образуют строму или поддерживающую основу для эпителиального слоя и состоят из фибробластических, гладкомышечных, воспалительных, эндотелиальных и нервных клеток.Постулируется, что изменения в этих стромальных клетках усиливают несколько туморогенных фенотипов эпителиальных клеток. (4, 5, 6, 7) .

Концептуальная основа, указывающая на роль стромальных клеток в онкогенезе, пришла из исследования эмбриологического развития, где инструктивные и разрешающие взаимодействия (в дополнение к генетическим детерминантам) необходимы для программирования и поддержания эпителиальной структуры и функции. Эмбриональные эпителиальные и инструктивные стромальные (мезенхимальные) клетки обмениваются взаимным молекулярным диалогом, который обеспечивает правильное развитие и функционирование органов. (8, 9, 10) .Считается, что разрешающие взрослые аналоги этих эпителиальных и стромальных взаимодействий обеспечивают регуляторные сигналы, которые поддерживают гомеостаз. Злокачественная трансформация взрослых эпителиальных клеток нарушает такую ​​гомеостатическую регуляцию, включая контроль структуры ткани, адгезии, гибели клеток и пролиферации. Если реципрокный молекулярный обмен между эпителиальными и стромальными клетками изменяется во время трансформации, это может привести к образованию стромальных клеток, которые получают и передают измененные молекулярные сигналы.

Исследования фибробластов вблизи злокачественного поражения также подтверждают роль стромальных клеток в онкогенезе. (11, 12, 13) . Фибробласт является основным типом клеток стромального компартмента и, как таковой, принимает непосредственное участие в оркестровке стромальной половины диалога в тканевом гомеостазе. Модификация фибробластов в строме, непосредственно прилегающих к трансформированным эпителиальным клеткам, была зарегистрирована в нескольких опухолевых системах. (14, 15, 16, 17, 18) .Паттерны фенотипической и генотипической экспрессии этих CAF 4 находятся под интенсивным расследованием. Например, Ronnov-Jessen et al. (3 , 19) продемонстрировали, что гистология и характеристики роста CAF молочной железы отличаются от таковых фибробластов, связанных с нормальными эпителиальными клетками молочной железы. Они описали присутствие «активированных» или аномальных миофибробластов, связанных с клетками инвазивной карциномы молочной железы. Другие фенотипические изменения, приписываемые CAF, включают аномальное миграционное поведение in vitro (20) и измененная экспрессия факторов роста, таких как фактор роста тромбоцитов, инсулиноподобные факторы роста I и II, трансформирующий фактор роста-β1, фактор роста гепатоцитов / фактор эпителиального рассеяния и фактор роста кератиноцитов (18 , 21, 22, 23, 24, 25) .Хотя эти фенотипические изменения были задокументированы в CAF, их последствия или вклад в рост и развитие опухоли еще не исследованы.

Мы предположили, что CAF могут влиять на прогрессирование опухоли в неопухолевых эпителиальных клетках. Чтобы проверить эту гипотезу, мы разработали серию экспериментов, которые концептуально эквивалентны изучению генетических детерминант туморогенеза. Общий тест на онкогенность — введение мутировавшего гена в уже измененную (инициированную / бессмертную), но неопухолевую клеточную линию.Если опухоль образуется, мутация способствовала прогрессированию опухоли. Более строгий тест на онкогенность исследует влияние мутировавшего гена на нормальную клетку. Если в этом случае образуется опухоль, мутация завершила как инициирование, так и прогрессирование опухоли. Чтобы определить, может ли CAF влиять на прогрессирование и / или инициирование эпителиальных клеток предстательной железы, мы выращивали CAF либо с инициированными (TAg-HPE), либо с клетками NHPE, in vivo и in vitro , и измеряли изменения в онкогенезе и канцерогенезе. индикаторы (морфология, гибель клеток и пролиферация) соответственно.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Условия культивирования

клеток NHPF и NHPE, иммортализованных Т-антигеном большого размера SV40 (TAg-HPE; Ref. 26 год ) выращивали в полной среде DMEM (Life Technologies, Гранд-Айленд, штат Нью-Йорк), содержащей 10% FCS (Life Technologies), при 37 ° C в инкубаторе с 5% CO ₂ . Среда не содержала антибиотиков, за исключением случаев, когда это указано. Клетки NHPE выращивали в специальной среде, которая содержала смесь DME h26 50% / Ham’s F12 50% (Life Technologies), 2.5% термоинактивированный декстран, покрытый / очищенный от угля FCS, эпидермальный фактор роста (10 нг / мл; Life Technologies), экстракт бычьего гипофиза (10 мг / мл; Clonetics, Walkersville, MD), инсулин (1 мг / мл; Clonetics), трансферрин (5 мг / мл; Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури), фосфоэтаноламин (0,1 мм; Sigma), холерный токсин (0,2 мг / мл; Sigma), пенициллин (100 единиц / мл; Life Technologies ) и стрептомицин (100 мг / мл; Life Technologies). Культуры регулярно проверялись на предмет заражения Mycoplasma и не обнаруживали контаминации.

Животные

Были получены

гомозиготных бестимусных голых мышей CD1 (Simonsen, Gilroy, CA; Taconic Farms, Germantown, NY; Charles River, Hollister, CA; Harlan, Indianapolis, IN) и гомозиготных бестимусных самцов голых крыс RNU (Harlan), которые использовали для определения онкогенности. анализы.

Подготовка клеток

Выделение нормальных клеток предстательной железы.

Ткань предстательной железы человека была получена от пациентов, перенесших операцию в Калифорнийском университете в Сан-Франциско.Клетки NHPE были получены от взрослых пациентов с доброкачественной гиперплазией простаты, у которых не было доказательств рака простаты. Ткань была получена у этих пациентов во время трансуретральной резекции простаты. Такой эпителий может отличаться от эпителия более молодых пациентов до развития доброкачественной гиперплазии предстательной железы. Однако нет никаких доказательств того, что доброкачественная гиперплазия предстательной железы является предраковым состоянием. Поэтому из-за нехватки ткани предстательной железы у молодых мужчин мы включили эпителиальные клетки, полученные в результате доброкачественной гиперплазии, в нашу нормальную популяцию.NHPF были получены от взрослого пациента, перенесшего цистопростатэктомию по поводу инвазивной переходно-клеточной карциномы мочевого пузыря, у которого не было гистопатологических свидетельств карциномы простаты.

Образцы ткани были разрезаны на мелкие кусочки (1 × 1 × 1 мм), и органоиды эпителия предстательной железы были отделены от окружающих стромальных клеток методами, описанными ранее. (27) . Вкратце, ткань ферментативно переваривали коллагеназой типа I (225 единиц / мл; Sigma) и гиалуронидазой (125 единиц / мл; Sigma) в RPMI 1640 (с 25 мм HEPES и 10% FCS; Life Technologies) при 37 ° C в течение ночи. .Препарат центрифугировали, чтобы получить осадок, содержащий эпителиальные органоиды (ацинарные и протоковые фрагменты, сохраняющие in vivo архитектурную организацию) и непереваренные фрагменты ткани и супернатант, содержащий стромальные клетки. Эпителиальные органоиды выделяли с помощью центрифугирования, фильтрации, повторного осаждения единичной гравитацией и промывки, как описано ранее. (28) . Эпителиальные органоиды замораживали в ДМСО до дальнейшего использования. (29) . Фибробласты и специфичные для гладких мышц маркеры (виментин, коллаген IV типа, фибронектин и α-актин гладких мышц) не были обнаружены вокруг интактных органоидов, что указывает на то, что пищеварение было полным и что стромальное загрязнение протоковых органоидов было минимальным. (30) .

Супернатант, содержащий стромальные клетки, центрифугировали при 250 × g в течение 5 мин. Осадок ресуспендировали и высевали в шестилуночные чашки в RPMI 1640 с 1 нМ тестостерона, средой, которая способствует преимущественному росту фибробластов. После того, как клетки разрослись до слияния, их ненадолго обрабатывали трипсином для высвобождения фибробластов, которые затем удаляли и размножали в RPMI 1640 с 5% FCS. Микроскопию и иммуноцитохимию использовали для определения чистоты фибробластической фракции.Образцы были проверены методом иммунофлуоресценции с использованием антицитокератиновых антител широкого спектра (DAKO Corp., Carpinteria, CA), чтобы подтвердить отсутствие контаминирующих эпителиальных клеток (рис. 1). ⇓ и использование антител против виментина (Sigma) и α-актина гладких мышц (Sigma) для подтверждения их фибробластической природы. При необходимости повторяли обогащение фибробластов дифференциальной трипсинизацией. На втором или третьем пассаже использовали фибробласты.

Рис.1.

Характеристика популяций эпителия и фибробластов человека.Представлены фазово-контрастные и флуоресцентные микрофотографии NHPE, NHPF, TAg-HPE и CAF. NHPE представляет собой эпителиальный органоид в культуре до клеточного разрастания. Эпителиальные клетки (NHPE и TAg-HPE) были сильно реактивными с антицитокератиновым антителом ( B и H ), тогда как они были слабо реактивными или нереактивными с антивииментиновым антителом ( C и I ). Цитокератины специфичны для эпителиальных клеток, тогда как виментин обычно экспрессируется в фибробластах, а не в эпителии.Напротив, фибробласты были сильно реактивными по отношению к антителу к антивииментину ( F и L ) и не реагировали с антителом к ​​антицитокератину ( E и K ). Пруток , 50 мкм.

TAg-HPE Линия эпителиальных клеток простаты.

TAg-HPE был использован для обозначения линии эпителиальных клеток предстательной железы человека BPH-1. (26) . Эта клонально производная линия была получена путем иммортализации SV40-T клеток, полученных из хирургического образца ткани предстательной железы с доброкачественной гиперплазией.При гистопатологическом исследовании злокачественных новообразований не выявлено. Эти родительские эпителиальные клетки выделяли с использованием методик, описанных выше. Эта клеточная линия не является опухолевой, как было продемонстрировано, в том смысле, что опухоли не развиваются после периодов роста до 1 года у бестимусных грызунов, хотя жизнеспособные клетки могут быть обнаружены в месте трансплантата. Обозначение TAg-HPE используется здесь, чтобы подчеркнуть, что это генетически инициированные (SV40-T) эпителиальные клетки простаты человека.

Изоляция предстательной железы.

Первичные CAF простаты были получены из опухолей простаты у трех пациентов. Во время радикальной простатэктомии опухоли простаты были идентифицированы с помощью гистопатологического анализа окрашенных замороженных срезов. Фрагмент свежей ткани, непосредственно прилегающий к явной карциноме, использовали для получения CAF для роста в культуре. Образцы разрезали на мелкие фрагменты, и фибробласты отделяли от загрязняющих эпителиальных клеток ферментативным расщеплением, как описано выше.Эти CAF были неотличимы от нормальных фибробластов простаты морфологически, иммуноцитохимически и по характеристикам роста, на что указывает время удвоения популяции (рис. ⇓ и таблица 1 ⇓ ).

Таблица 1

Характеристика фибробластов и эпителиальных клеток

Протокол

В этом исследовании эксперименты были организованы в две параллельные серии. В первой серии изучали взаимодействия фибробластов / эпителия in vivo с использованием тканевых рекомбинантов.Во второй серии те же взаимодействия были исследованы на морфологию, жизнеспособность и пролиферацию с использованием системы сокультивирования in vitro . Для измерения прогрессирования опухоли CAF объединяли с инициированными клетками TAg-HPE. Для измерения инициации опухоли CAF объединяли с клетками NHPE.

Получение

in vivo Тканевых рекомбинантов

В этой модельной системе фибробласты (NHPF или CAF) были смешаны с эпителиальными (NHPE или TAg-HPE) клетками и помещены в коллагеновый гель, который затем был трансплантирован животному-хозяину.Тканевый рекомбинант был извлечен через заданный период времени и проанализирован.

Тканевые рекомбинанты получали смешиванием пяти органоидов эпителия предстательной железы человека или 1 × 10 ⁵ клеток TAg-HPE с 2,5 × 10 ⁵ фибробластов предстательной железы человека в 50 мкл коллагена крысиного хвоста I типа. (31) . Полученные гели инкубировали в течение ночи в увлажненном инкубаторе с 5% CO ₂ при 37 ° C в полной RPMI 1640 с 1 нМ тестостерона и затем помещали под почечную капсулу самцов бестимусных грызунов.Контрольные образцы ткани состояли из 3,5 × 10 ⁵ клеток каждого типа фибробластов (CAF или NHPF), 3,5 × 10 ⁵ клеток TAg-HPE или 50 органоидов NHPE в одном коллагеновом геле. Образцы тканей выращивали в течение 20–85 дней. Влажный вес каждого тканевого рекомбинанта регистрировали при сборе урожая. Ткани фиксировали формалином, заливали парафином и анализировали гистологически.

Получение

in vitro кокультуры

В этой модельной системе фибробласты (NHPF или CAF) выращивали до слияния, а затем сверху наслоили различные эпителиальные клетки (NHPE или TAg-HPE).Зеленый флуоресцентный краситель CMFDA (Molecular Probes, Юджин, штат Орегон) использовали для окрашивания популяции фибробластов перед добавлением неокрашенной популяции эпителия. Флуоресцентная микроскопия, а также проточная цитометрия легко отличают окрашенные CMFDA клетки от неокрашенных (рис. 2). ⇓ и позволил отдельные измерения каждой популяции. Дифференциальное окрашивание сохранялось минимум 4 дня без отрицательного воздействия на пролиферацию и эффективность посева. (32) .

Рис.2.

Проточная цитометрия позволяет отличить неокрашенные эпителиальные клетки от зеленых флуоресцентных фибробластов, окрашенных CMFDA.

Для приготовления сокультуры 1 × 10 ⁵ первичных фибробластов простаты выращивали до слияния в шестилуночных чашках в полной среде DMEM в течение 3-дневного периода. Окрашивание осуществляли инкубацией в бессывороточной среде DMEM, содержащей 5 мкМ CMFDA (10 мм исходный раствор в ДМСО; Sigma), 100 единиц / мл пенициллина и 100 мг / мл стрептомицина в течение 45 минут при 37 ° C.Затем среду аспирировали, фибробласты дважды промывали HBSS и дополнительно инкубировали с полной DMEM в течение 1 часа. Эпителиальные клетки, растущие в логарифмической фазе, высвобождали из планшета для культуры ткани трипсинизацией, и 2,5 × 10 клеток ⁵ высевали на конфлюэнтные окрашенные CMFDA фибробласты простаты. Сокультуры инкубировали с минимальной сывороточной средой (DMEM + 0,5% FCS + пенициллин 100 единиц / мл и стрептомицин 100 мг / мл) в течение 1–4-дневных периодов. Морфологию, жизнеспособность и пролиферацию каждого типа клеток независимо или совместно с их партнером оценивали, как описано ниже.

Измерение онкогенных показателей

Морфологический анализ.

Для тканевых рекомбинантов in vivo морфологию тканевых рекомбинантов оценивали с помощью окрашивания H&E залитых парафином тканей и иммуногистохимии. Обработка H&E производилась стандартным образом. Тканевые рекомбинанты исследовали на экспрессию цитокератина и антигена SV40-T с использованием иммуногистохимического метода извлечения эпитопа. (33) .После депарафинизации и регидратации тканевых срезов извлечение эпитопа было выполнено для всех образцов с использованием микроволнового нагрева в течение 10 минут в 0,01 м трис-основном буфере при pH 9–10. После инкубации в течение ночи в соответствующей блокирующей сыворотке срезы тканей инкубировали либо с антицитокератиновым антителом широкого спектра действия в разведении 1: 100 (DAKO Corp.), либо с антителом Pab101 к антигену SV40-T в разведении 1:40 (щедрый подарок. от доктора Джона Лемана, Медицинский колледж Олбани, Олбани, штат Нью-Йорк). После промывания срезы тканей инкубировали с биотинилированным вторичным антителом (Amersham Life Science, Inc., Арлингтон, Иллинойс). Систему авидин-биотин-пероксидаза (Vector Laboratories; Burlingame, CA) использовали для определения реакционной способности с использованием 3,3′-диаминобензидина (Sigma) в качестве хромагена и гематоксилина в качестве контрастного красителя. Экспрессию простатоспецифического антигена определяли в тканевых рекомбинантах NHPF / NHPE с использованием кроличьих поликлональных антител (DAKO Corp.) в соответствии со спецификациями производителя. Для этого антитела извлечение антигена не требовалось. Для совместных культур in vitro использовали световую микроскопию и окрашивание CMDFA для изучения взаимосвязи эпителиальных клеток с фибробластами.

Жизнеспособность.

Для тканевых рекомбинантов in vivo апоптотические клетки карциномы были идентифицированы с использованием набора Oncor ApopTag (Oncor, Gaithersburg, MD). Вкратце, срезы депарафинизировали, регидратировали и инкубировали в протеиновом ферменте Oncor (20 мкг / мл) в течение 15 минут при комнатной температуре. Затем срезы инкубировали в ферментном буфере TdT рабочей силы в течение 1 ч при 37 ° C, промывали и метили апоптотические тельца с использованием анти-дигоксигенин-флуоресцеина.Срезы подвергали контрастному окрашиванию и закрепляли с помощью Oncor Propidium Iodide / Antifade (Oncor). Индекс апоптоза определяли с помощью флуоресцентной микроскопии как процент апоптотических клеток в шести микроскопических полях при × 400. Для совместных культур in vitro и гибель эпителиальных клеток определяли путем измерения относительного поглощения PI с использованием проточной цитометрии. Этот метод полезен, потому что жизнеспособные клетки способны исключать ИП, в то время как апоптотические и некротические клетки — нет. (34, 35, 36) . Эксперименты по совместному культивированию проводили серийно для 1-, 2-, 3- и 4-дневной инкубации.Максимальный эффект CAF простаты на пролиферацию и гибель клеток TAg-HPE наблюдался на 3 день (данные не показаны). Совместно культивируемые клетки и соответствующие контроли высвобождали из планшетов трипсинизацией и центрифугировали. Клетки ресуспендировали в 1 мл минимальной сывороточной среды, и образцы инкубировали с PI (25 мкг / мл; Sigma) и красителем Hoechst 33342 (5 мкг / мл; Molecular Probes) в течение 6 мин. Эксперименты проводили в трех экземплярах и анализировали на проточном цитометре FACStar Plus с двумя лазерами (Becton Dickinson, Сан-Хосе, Калифорния), оборудованном двумя аргоновыми лазерами.Возбуждение CMFDA и PI происходило при настройке первого лазера на 488 нм. Эмиссии CMFDA и PI собирали при 530/30 нм и 630/22 нм соответственно. Hoechst 33342 возбуждали многолинейным УФ-излучением на длине волны 354–363 нм от второго лазера, и его флуоресценция регистрировалась при 451/15 нм логарифмически после инкубации. Десять тысяч событий были получены и проанализированы на компьютере Macintosh с помощью программы Cell Quest (Becton Dickinson).

Распространение.

Для тканевых рекомбинантов in vivo измерения пролиферации в залитых парафином образцах опухолевых эксплантатов проводили с использованием Ki-67, маркера, специфичного для пролиферации. (37) , как описано ранее (38) . Для совместных культур in vitro и определения проводили, как указано выше, за исключением 45-минутной инкубации в Hoechst 33342. Интенсивность флуоресценции отображалась в линейной шкале. Для культуры ткани время удвоения популяции и относительная эффективность посева для клеток, выращенных в монослое, определяли, как описано ранее. (39) .

Онкогенез

Для оценки роста тканевых рекомбинантов in vivo коллагеновые гели, содержащие указанные клетки, прививали под почечную капсулу бестимусной мыши или крысы-хозяина в возрасте 50–120 дней. Трансплантаты были удалены через 20–85 дней, как указано. Все протоколы для животных были одобрены Комитетом по исследованиям на животных Калифорнийского университета в Сан-Франциско.

Морфометрический анализ

Для морфометрического анализа были выбраны

репрезентативных срезов из тех тканевых рекомбинантов, которые состоят из клеток предстательной железы CAF / TAg-HPE, которые ранее были исследованы на экспрессию цитокератина с помощью иммуногистохимии.Оцифрованные изображения были получены из нескольких различных микроскопических полей. Случайные линии были нарисованы через несколько полей, и ядра клеток, пересекаемые этими линиями, были обозначены как эпителиальные или стромальные в зависимости от наличия или отсутствия окрашивания цитокератином. Таким образом подсчитывали не менее 1000 клеток на предметное стекло и три предметных стекла на образец для определения процента эпителиальных клеток и процента стромальных клеток.

Кариотипический анализ

Культуры клеток при 50–80% конфлюэнтности инкубировали в среде, содержащей колцемид (0.0625 мкг / мл) в течение 4 ч. Митотические клетки удаляли с планшетов, набухали в 0,075 м гипотоническом растворе KCl и фиксировали на предметных стеклах. Хромосомы были соединены G-полосой с 0,05% трипсином-0,02% EDTA и окрашены по Гимзе (Fisher Scientific).

Сравнительная геномная гибридизация

Вкратце, зонды были подготовлены переводом ников, как описано ранее. (40) . Двести нг меченой флуоресцеином тестируемой ДНК, 200 нг нормальной эталонной ДНК, меченной Texas Red, и 20 мкг немеченой ДНК, расщепленной Cot-1, смешивали, осаждали и ресуспендировали в 10 мкл гибридизационной смеси.Эту смесь зондов денатурировали и немедленно добавляли к слайду с метафазными спредами нормальных лимфоцитов, которые были денатурированы, обезвожены и высушены на воздухе. Смеси зондов давали возможность гибридизоваться с метафазными спредами в течение 72 часов. Затем предметные стекла промывали и контрастировали 4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндолом.

Статистический анализ

Индексы гибели и пролиферации клеток сравнивали с помощью теста t . Сырые массы различных тканевых рекомбинантов сравнивали с использованием теста Краскела-Уоллиса (непараметрический дисперсионный анализ ANOVA).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Нормальные и инициированные эпителиальные клетки предстательной железы вместе с нормальными и связанными с карциномой фибробластами предстательной железы составляют тканевые компоненты онкогенных модельных систем.

Мы исследовали стромальные / эпителиальные взаимодействия при онкогенезе предстательной железы путем объединения фибробластных и эпителиальных клеток in vivo, и , in vitro, . Чтобы определить, способны ли CAF стимулировать прогрессирование опухоли, их выращивали с инициированными эпителиальными клетками.Чтобы дополнительно проверить, способны ли CAF стимулировать как инициирование, так и прогрессирование опухоли, их выращивали с нормальными эпителиальными клетками.

клеток NHPE были выделены в виде органоидных фрагментов протоков предстательной железы и ацинусов из гистологически доброкачественной ткани предстательной железы. Органоиды содержали базальные клетки, которые экспрессировали цитокератины 5 и 14, и клетки просвета, которые экспрессировали цитокератины 8, 18, простатоспецифический антиген и кислую фосфатазу простаты. (30) . Это указывало на то, что эпителиальные клетки были хорошо дифференцированы.Типичная органоидная морфология клеток NHPE в культуре представлена ​​на рис. ⇓ . Эти клетки имеют ограниченную пролиферативную способность (Таблица 1). ⇓ и представляют собой не инициированную эпителиальную популяцию.

Стромальные клетки нормальной предстательной железы человека были охарактеризованы с использованием антител к виментину, актину, миозину и цитокератину. Почти все клетки экспрессировали виментин, тогда как 10-20% также экспрессировали актин или миозин, что характерно для гладкомышечных клеток, обычно обнаруживаемых в строме простаты.Таким образом, эти клеточные популяции представляют собой комбинацию фибробластов и миофибробластных клеток, происходящих из стромы простаты. Для простоты эти ячейки называются NHPF. NHPF не экспрессируют цитокератины, специфичные для эпителиальных клеток (рис. 1). ⇓ . Время удвоения популяции, эффективность посева и кариотип были сопоставимы с другими первичными фибробластами человека (таблица 1). ⇓ . Эти клетки представляют собой нормальные фибробластные популяции.

Инициированная популяция эпителиальных клеток (TAg-HPE) представлена ​​линией клеток предстательной железы человека BPH-1. (26) .Как описано ранее, эти клетки экспрессировали специфичные для эпителия цитокератины по образцу, соответствующему клеткам просвета эпителия in vivo , и продемонстрировали ядерную реактивность с антителом Pab 101, которое обнаруживает антиген SV40-T. Клетки TAg-HPE сохранили многие ферментные системы, экспрессируемые в предстательной железе. (26) . Морфология булыжника и характеристики роста этих клеток показаны на рис. ⇓ и таблица 1 ⇓ . Кариотипически эти клетки аномальны со средним числом хромосом 76.Хотя эти клетки приобрели некоторые маркеры трансформации, клетки TAg-HPE не являются опухолевыми при выращивании отдельно либо подкожно. или под почечной капсулой бестимусного хозяина на срок до 1 года (Таблица 2 ⇓ ; Ref. 26 год ). 5 Обозначение TAg-HPE подчеркивает, что клетки инициируются (под действием антигена SV40-T) и происходят из эпителия предстательной железы человека.

Таблица 2

Рост опухолей тканевых рекомбинантов и контрольных трансплантатов у бестимусных хозяев

CAF были иммуноцитохимически неотличимы от NHPF, описанных выше.Рис. 1 ⇓ экспоненциально растущие NHPF и CAF имели идентичный морфологический вид, типичный для фибробластов (длинные и веретенообразные). Однако при длительном культивировании при слиянии CAFs образовывали очаги, в которых клетки росли друг над другом, фенотип, напоминающий трансформированные клетки и не наблюдаемый с NHPFs. CAF # 1, CAF # 2 и CAF # 3 продемонстрировали время удвоения популяции, которое варьировалось от 22 до 48 часов (таблица 1). ⇓ . Хромосомный набор всех CAF, анализируемый кариотипическим анализом и сравнительной геномной гибридизацией, был нормальным.

Были измерены исходные морфологии, жизнеспособность, индексы пролиферации и онкогенность для каждой клеточной популяции индивидуально, они описаны на рис. ⇓ и таблицы 1 ⇓ и 2 ⇓ , соответственно.

CAF вызывают резкое развитие опухоли при трансплантации в виде тканевых рекомбинантов с инициированными эпителиальными клетками

in vivo .

Три основных признака прогрессирования опухоли — это ускоренный рост, морфология опухолевой ткани и способность к инвазии.Все три были оценены в нашей модельной системе.

Контрольные трансплантаты клеток NHPE, клеток TAg-HPE, NHPF и CAF, выращенных индивидуально в коллагеновых гелях в течение от 20 до 85 дней, демонстрировали минимальный рост со средней влажной массой 10 мг или менее (Таблица 2 ⇓ и рис.3 ⇓ ). При гистологическом исследовании клетки TAg-HPE образовали ороговевшие жемчужины. Эти данные согласуются с предыдущими сообщениями о том, что клетки TAg-HPE не являются опухолевыми. (26) при одиночном выращивании на бестимусных хозяевах (даже до 1 года).Контрольные трансплантаты каждого типа фибробластов по отдельности (NHPF и CAF) демонстрировали доброкачественную фибробластическую строму.

Рис.3.

A , общий вид тканевых рекомбинантов, собранных после 85 дней роста самца голой мыши-хозяина. Тканевый рекомбинант CAF / TAg-HPE весил 1250 мг, а тканевый рекомбинант NHPF / TAg-HPE весил 10 мг; штанга , 1 см. B , влажный вес прививок (логарифмическая шкала) после 19–85 дней роста у бестимусных хозяев.• трансплантаты, выращенные на самцах бестимусных мышей-хозяев; ▴ — трансплантаты, выращенные на самцах бестимусных крыс-хозяев; †, графты показаны в A .

Тканевые рекомбинанты, состоящие из клеток CAF / TAg-HPE, демонстрировали поразительный рост с максимальной влажной массой, приближающейся в 500 раз по сравнению с любыми другими тканевыми рекомбинантами. Средний влажный вес этих тканевых рекомбинантов составлял 97 мг через 20 дней роста, 198 мг через 42 дня роста и 180 мг через 85 дней роста. Оценка двух других онкогенных показателей, гибели клеток и пролиферации, продемонстрировала низкую фракцию гибели клеток (1.5 ± 0,9%) и высокой пролиферативной фракции (43,9 ± 5,3%), чего следовало ожидать в опухоли. Напротив, рекомбинанты контрольной ткани, состоящие из нормальных фибробластов / инициированных эпителиальных клеток (NHPF / TAg-HPE), продемонстрировали минимальный рост через 20 дней со средней влажной массой, идентичной массе только клеток TAg-HPE (Таблица 2). ⇓ . Даже через 90 дней средний влажный вес этих тканевых рекомбинантов существенно не изменился. Небольшой вклад эпителия в эти тканевые рекомбинанты препятствовал надежной оценке гибели или пролиферации эпителиальных клеток in vivo .

Гистологический вид тканевых рекомбинантов CAF / TAg-HPE напоминал низкодифференцированные аденокарциномы с участками плоской дифференцировки (рис. 4, A – C ) ⇓ . Эта гистология была последовательной для всех этих тканевых рекомбинантов независимо от широкого диапазона влажных масс трансплантатов CAF / TAg-HPE. Опухоли содержали плохо дифференцированные, неправильные эпителиальные тяжи разного размера. Эпителий образовывал небольшие гнезда, напоминающие железы в некоторых областях опухоли, и представлял собой отдельные клетки, которые смешивались с фиброзной стромой в других областях.Эпителиальная природа этих клеток была подтверждена иммуноокрашиванием антицитокератиновыми антителами широкого спектра действия (рис. 4 B ). ⇓ . Кроме того, ядерная иммунореактивность с антителом к ​​антигену SV40-T подтвердила происхождение опухолей от привитых клеток TAg-HPE (фиг. 4 C ). ⇓ . К этим малодифференцированным эпителиальным клеткам примешивались участки плоского эпителия со случайным ороговением (рис. 4 A ). ⇓ . Многие эпителиальные клетки содержат крупные полиморфные ядра с крупными ядрышками.Стромальные клетки были перемешаны между островками эпителиальных клеток по всей опухоли.

Рис.4.

Гистологический вид тканевых рекомбинантов. A – C , серийные срезы рекомбинантной ткани, состоящей из CAF / TAg-HPE. Срез, окрашенный H & E ( A ), демонстрирует внешний вид, соответствующий плохо дифференцированной аденокарциноме. Обратите внимание на присутствие многих неплотно прилегающих, слабо дифференцированных эпителиальных клеток, а также участков плоской дифференцировки.Иммуноокрашивание антителом к ​​цитокератину ( B ) подтверждает эпителиальную природу этих малодифференцированных клеток, тогда как ядерное окрашивание антителом к ​​SV40-T ( C ) во многих эпителиальных клетках подтверждает происхождение опухолей от привитые клетки TAg-HPE. Пруток , А – С . D , тканевый рекомбинант, состоящий из NHPF / TAg-HPE. Этот срез окрашивали на экспрессию цитокератина. Обратите внимание, что эпителиальные клетки образуют дискретные шнуровидные структуры в доброкачественной строме. E , тканевый рекомбинант, состоящий из CAF / NHPE (окрашенный H&E). Обратите внимание на структуру эпителиальных протоков, выстланных аномальным многослойным плоским эпителием. F , тканевый рекомбинант, состоящий из NHPF / NHPE, окрашенный для демонстрации экспрессии простатоспецифического антигена. Обратите внимание на структуру эпителиальных протоков, выстланных высоким столбчатым эпителием, сильно экспрессирующим этот специфический для предстательной железы маркер человека. Пруток , D – F .

Морфометрический анализ тканевых рекомбинантов CAF / TAg-HPE проводили для оценки процентного содержания эпителиальных и стромальных клеток.Были выбраны восемь репрезентативных тканевых рекомбинантов, состоящих из CAF / TAg-HPE. Влажный вес этих тканевых рекомбинантов составлял от 97 до 5130 мг. Срезы окрашивали антицитокератиновым антителом широкого спектра действия для идентификации эпителиальных компонентов в тканевых рекомбинантах. Эти тканевые рекомбинанты состояли из эпителия на 80 ± 3% (± стандартное отклонение) и стромы на 20 ± 3%. Вклад эпителиальных клеток в массу опухоли был одинаковым для всех проанализированных временных точек.

Инвазивный потенциал часто оценивают по установлению роста опухоли на удаленных участках с течением времени ( i.е. , метастазы). Чтобы определить, обладают ли эти тканевые рекомбинанты метастатическим потенциалом, мы попытались вырастить трансплантаты в течение длительного периода времени (таблица 2). ⇓ . CAF # 4 и CAF # 5 имели эффективность посева, аналогичную другим популяциям CAF, описанным выше, и показали время удвоения популяции 30,9 и 26,5 часов, соответственно. Анализ был прекращен из-за истощения хозяина. Во время умерщвления (85 дней) тканевые рекомбинанты CAF / TAg-HPE полностью окружили обе почки хозяина, оставляя мало идентифицируемой нормальной почечной ткани (см.рис.3 А ⇓ ) и животное, которое было серьезно скомпрометировано. Метастазов не обнаружено. Следовательно, для остальных анализов был выбран период времени 42 дня. Метастазы в этих экспериментальных условиях не обнаружены.

В отличие от злокачественных гистологических проявлений рекомбинантов CAF / TAg-HPE, рекомбинанты NHPF / TAg-HPE оказались доброкачественными. Гистологически эпителиальные клетки в тканевых рекомбинантах NHPF / TAg-HPE образовывали небольшие твердые тяжи с несколькими одиночными клетками, как показано на рис.4 D ⇓ . Эпителиальные клетки были окружены доброкачественной фибробластной стромой, которая составляла большую часть рекомбинантной ткани.

Тканевые рекомбинанты, состоящие из CAF / TAg-HPE, были значительно больше, чем трансплантаты одного TAg-HPE и тканевые рекомбинанты NHPF / TAg-HPE после 20 дней роста ( P = 0,0015), 42 дня роста ( P = 0,0013) и 85 дней роста ( P = 0,0002).

CAF не могут вызывать опухолевидный генез, если привиты в виде рекомбинантов с нормальными эпителиальными клетками

in vivo .

Хотя CAF продемонстрировали драматическую способность влиять на прогрессирование опухоли в инициированных эпителиальных клетках, они не вызывали обширного туморогенеза в нормальных эпителиальных клетках в этих условиях. Тканевые рекомбинанты, состоящие из клеток CAF / NHPE, продемонстрировали минимальный рост через 42 дня со средней влажной массой 10,5 мг ( n = 6). Однако гистологический вид эпителиальных клеток отличался от такового при сочетании с нормальными фибробластами. Эпителиальные клетки в сочетании с CAF образуют протоковые структуры с многослойной плоской выстилкой (рис.4 E ) ⇓ . Такая дифференцировка ненормальна для эпителиальных клеток простаты. Опять же, эпителиальные структуры были окружены доброкачественной фибробластной стромой, которая составляла большинство небольших тканевых рекомбинантов. Трансплантаты тканевых рекомбинантов NHPF / NHPE также показали минимальный рост (4 мг; Таблица 2 ⇓ ). В отличие от тканевых рекомбинантов CAF / NHPE, эпителиальные клетки в тканевых рекомбинантах NHPF / NHPE образовывали протоковые структуры, выстланные высокими столбчатыми эпителиальными клетками, которые экспрессировали простатоспецифический антиген.Такой вид характерен для нормального эпителия предстательной железы (рис. 4 F ). ⇓ .

CAF вызывают изменение морфологии эпителия, снижение гибели клеток и увеличение пролиферации клеток при совместном культивировании с инициированными клетками TAg-HPE

in vitro.

Совместное культивирование клеток CAF / TAg-HPE привело к изменению морфологии эпителия, снижению гибели эпителия и увеличению пролиферации эпителия по сравнению с совместным культивированием NHPF / TAg-HPE (рис.5) ⇓ . Клетки TAg-HPE в сокультуре с CAFs имели устойчивый рост, который давал большое количество клеток (рис. 5). ⇓ . Флуоресцентно окрашенные CAF, совместно культивированные с неокрашенными клетками TAg-HPE, демонстрировали «сотовый» вид. Клетки TAg-HPE выросли через фибробластный монослой и достигли дна культуральной чашки. Произошло полное смещение CAF, о чем свидетельствуют островки неокрашенных клеток внутри окрашенного зеленой флуоресценцией фибробластного монослоя (рис. 5 A ). ⇓ . В контрольных сокультурах, состоящих из клеток NHPF / TAg-HPE, клетки TAg-HPE росли в виде монослоя поверх нормальных фибробластов.Смещения НПФ не наблюдалось (рис. 5 A ) ⇓ . Второй канцерогенный индикатор, гибель клеток TAg-HPE, был ниже, когда эти инициированные эпителиальные клетки совместно культивировали с CAF по сравнению с сокультивированием с NHPF (фиг. 5 B ). ⇓ . Точно так же в этой системе был изменен третий индикатор — клеточная пролиферация. Пролиферация клеток TAg-HPE была увеличена при совместном культивировании с CAF по сравнению с сокультивированием с NHPF (фиг. 5 C ) ⇓ . Эти данные демонстрируют, что CAF вызывают туморогенные фенотипы в клетках TAg-HPE при выращивании в сокультуре.Повышенный рост эпителия в фибробластический слой (напоминающий инвазивные клетки), снижение гибели эпителиальных клеток и повышенная пролиферация эпителия — все это признаки онкогенной популяции.

Рис.5.

Морфология, гибель и пролиферация клеток TAg-HPE в сокультуре с CAF или NHPF. A , фазовые и флуоресцентные изображения сокультив TAg-HPE с различными популяциями фибробластов. Неокрашенные клетки TAg-HPE отличаются от окрашенных флуоресценцией CMFDA / зеленой фибробластов в сокультуре.В сокультурах CAF / TAg-HPE клетки TAg-HPE вытесняли CAF (зеленые флуоресцентные клетки), достигая дна планшета. Кокультуры выглядели как «соты». В совместных культурах NHPF / TAg-HPE клетки TAg-HPE росли поверх монослоя фибробластов (зеленая лужайка клеток) без смещения фибробластов. Пруток , 50 мкм. B , гибель клеток TAg-HPE в сокультуре. Значительно более низкий процент гибели клеток наблюдался в клетках TAg-HPE при совместном культивировании с CAF по сравнению с NHPF.Процент гибели клеток TAg-HPE при совместном культивировании с различными фибробластами составлял: CAF # 1,, 8,2%, n = 5, P = 0,0062; CAF # 2, □, 8,4%, n = 3, P = 0,05; и CAF № 3, , 8,7%, n = 3, P = 0,04 против NHPF ▪, 12,6%; непарный т тест-сличение. C , пролиферация клеток TAg-HPE в сокультуре. Значительно более высокий процент клеток TAg-HPE находился в S-фазе при совместном культивировании с CAF по сравнению с NHPF.Процент клеток TAg-HPE в S-фазе при совместном культивировании с разными фибробластами составлял: CAF # 1, , 17,2%, n = 5, P <0,0001; CAF # 2, □, 17,1%, n = 3, P <0,0001; и CAF № 3, , 21,8%, n = 3, P <0,0001 по сравнению с NHPF, 11,0%, n = 12. Bars , SE.

CAF не изменяют онкогенные индикаторы при совместном культивировании с нормальными эпителиальными клетками

in vitro .

Поскольку CAF усиливают фенотипы, связанные с прогрессированием опухоли, при выращивании с иммортализованными клетками TAg-HPE, мы спросили, могут ли CAF усиливать фенотип инициации опухоли при выращивании с генетически нормальными эпителиальными клетками. Когда клетки NHPE наслаивали на сливающиеся лужайки CAF, эпителиальная популяция клеток не увеличивалась. Влияние на морфологию, гибель клеток и пролиферацию было трудно измерить из-за малого количества эпителиальных клеток. Чтобы изучить эти параметры на клеточной основе, микроскопическое исследование колоний NHPE, растущих на CAF, выявило чрезвычайно низкую частоту митоза и отсутствие пикнотических ядер (по данным окрашивания Hoechst 33258, данные не показаны).Это подтверждает, что пролиферация и гибель клеток были низкими в клетках NHPE, совместно культивируемых с CAF. В контрольных сокультурах клеток NHPE, растущих на конфлюэнтном слое NHPF, популяция эпителиальных клеток демонстрировала минимальное размножение, росла как отдельные клетки и в конечном итоге формировала небольшие колонии.

Эти данные демонстрируют, что, хотя CAF могут иметь значительный эффект на онкогенные индикаторы инициированных эпителиальных клеток (TAg-HPE), имелся незначительный эффект на рост генетически нормальных эпителиальных клеток.Кроме того, мы также наблюдали отсутствие эффекта NHPF ни на нормальные, ни на инициированные эпителиальные клетки предстательной железы, что было определено путем измерения показателей жизнеспособности и пролиферации.

Хотя абсолютные различия в пролиферации и гибели клеток, наблюдаемые в сокультурах CAF / TAg-HPE, были статистически значимыми, они не были значительными. Однако длительное воздействие этих тонких различий в снижении гибели клеток и увеличении пролиферации может привести к драматическому кумулятивному эффекту размера опухоли с течением времени, как показано в модели in vivo , описанной выше.

ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты настоящего исследования демонстрируют, что CAF стимулируют опухолевую прогрессию инициированных эпителиальных клеток как in vivo , так и in vitro . CAF простаты человека, выращенные с инициированными эпителиальными клетками предстательной железы, резко стимулировали рост и изменяли гистологию популяции TAg-HPE. Этот эффект не был обнаружен, когда нормальные фибробласты простаты выращивали с клетками TAg-HPE в тех же экспериментальных условиях.Напротив, CAF не стимулировали рост нормальных эпителиальных клеток в идентичных условиях. Из этих данных мы заключаем, что в этой модельной системе предстательной железы человека CAF могут стимулировать прогрессирование онкогенеза.

Прогресс и начало.

Демонстрация прогрессирования опухоли требует увеличения роста эпителия (баланс между пролиферацией и апоптозом), морфологии опухолевой ткани и способности к инвазии. Действительно, стимуляция роста TAg-HPE с помощью CAF была наиболее ярким фенотипом, легко обнаруживаемым при наблюдении как in vitro, , так и in vivo .Пролиферация эпителия генерировала большую часть опухоли in vivo . Морфология опухолевой ткани была очевидна в этих карциномах, созданных в трансплантатах CAF / TAg-HPE. Цитологический внешний вид соответствовал злокачественному новообразованию, демонстрируя плейотропию, повышенное ядерно-цитоплазматическое соотношение, выступающие ядрышки и отсутствие клеточной поляризации. Все эти особенности являются отличительными чертами опухолевых клеток. Архитектура ткани также была изменена в связи с отсутствием нормальных железистых структур, содержащих люминальные и базальные клетки.Рост злокачественных клеток был типичным для аденокарциномы, поскольку клетки образовывали гнезда, которые напоминали плохо дифференцированные железы с нарушенной тканевой архитектурой в некоторых областях, тогда как во многих областях клетки росли индивидуально и инфильтровали строму. Карциноматозный вид не был очевиден, когда инициированные клетки TAg-HPE выращивали с нормальными фибробластами в тех же условиях in vivo . Наконец, появление сокультуры CAF / TAg-HPE in vitro и тканевых рекомбинантов in vivo соответствовало онкогенному фенотипу в том смысле, что эпителий нарушал фибробластный слой в каждом случае.

Демонстрация инициации опухоли требует дополнительных событий помимо увеличения роста, изменения морфологии и инвазии, необходимых для прогрессирования опухоли. Поскольку CAF могут стимулировать эти последние свойства в генетически измененных клетках TAg-HPE, они демаскировали бы инициирующее событие в NHPE, если бы такое событие произошло. Хотя рост клеток NHPE не стимулировался CAF, мы полагаем, что это не является ограничивающим событием. Эти же клетки NHPE можно стимулировать к росту и дифференцировке в сочетании с инструктивной мезенхимой урогенитального синуса. (30) .Хотя CAF не способствовали росту нормальных эпителиальных клеток, CAF действительно изменяли гистологию эпителия. Это говорит о том, что аномальная передача сигналов от CAF недостаточна для стимуляции образования опухоли. Эпителиальные клетки в тканевых рекомбинантах CAF / NHPE были доброкачественными по внешнему виду, с нормальным соотношением ядер: цитоплазма, морфологией протоков и отсутствием местной инвазии. Однако замена нормальных высоких столбчатых клеток на аномальный многослойный многослойный плоскоклеточный вид предполагает, что аномальные стромальные сигналы от CAF обнаруживаются клетками NHPE на некотором уровне.Взятые вместе, эти данные предполагают, что сигналы CAF могут влиять как на нормальные, так и на генетически измененные эпителиальные клетки, но что результат такой передачи сигналов диктуется генетическим составом эпителиальных клеток.

Фибробласты в развитии, заживлении ран и опухолеобразовании.

Хотя термин «фибробласт» часто используется в общем смысле, молекулярные, биохимические и морфологические различия между различными типами фибробластических клеток становятся очевидными.В этом отношении фибробласты, по-видимому, демонстрируют «пластиковый» фенотип, который позволяет этим клеткам адаптироваться к нормальным и патологическим ситуациям. (41) . Это было элегантно продемонстрировано во время эмбрионального развития, когда фибробласты, по-видимому, управляют нормальным эпителиальным развитием в различных системах органов, включая простату, матку и кишечник. (9 , 42 , 43) . Этот поучительный фенотип характерен для эмбриональных фибробластов, потому что зрелые взрослые фибробласты редко способны повторять эту специализированную функцию.

Реакция ткани на повреждение (заживление ран), а также некоторые доброкачественные пролиферативные нарушения мягких тканей также представляют обстоятельства, при которых были описаны «реактивные» фибробласты с уникальными фенотипическими характеристиками. (44, 45, 46) . Эти поражения характеризовались появлением так называемых «миофибробластов», которые имеют общие структурные и биохимические свойства как с «нормальными» фибробластами, так и с гладкомышечными клетками. Миофибробласты начинают накапливаться на ранних стадиях заживления раны, наиболее многочисленны во время сокращения раны и постепенно исчезают (возможно, через механизмы апоптоза) на более поздних стадиях образования рубца. (41 , 46) .Напротив, миофибробласты, по-видимому, являются постоянным признаком различных фиброматозов. Исследования миофибробластов в этих патологических состояниях выявили дальнейшее разнообразие фенотипов фибробластов, поскольку эти клетки можно разделить на категории на основе их экспрессии таких белков, как виментин, актин, миозин и десмин. Существует мало убедительных доказательств клеточного происхождения этих миофибробластов или химических сигналов, запускающих их накопление. (45) . Однако вполне вероятно, что эти клетки возникают в соответствии с конкретными физиологическими потребностями в результате измененных сигналов из микросреды. (41) .

Наконец, неоплазия представляет собой третье обстоятельство, при котором фенотип «связанных с карциномой» фибробластов отличается от фенотипа фибробластов, обнаруженных в нормальной ткани. Предыдущая работа документально зафиксировала такие различия, включая аномальную экспрессию актина гладких мышц (аналогичную той, что наблюдается в миофибробластах, связанных с заживлением ран), несоответствующую секрецию протеолитических ферментов, включая металлопротеиназы (металлометионеин-2 и стромелизин-3; Ref. 14 ,, 47 ), а также производство белков внеклеточного матрикса, таких как тенасцин и гиалуронан. (15 , 48) .Эти различия могут усилить инвазивный потенциал злокачественных эпителиальных клеток. CAF также могут быть способны модулировать фенотип ближайших эпителиальных клеток. В частности, экспрессия рецептора эпителиальных стероидов (11) , а также экспрессия молекул клеточной адгезии (49) , может регулироваться CAF посредством паракринных сигнальных механизмов.

Хотя изменения CAFs были описаны ранее, это исследование показывает, что присутствие таких клеток вблизи инициированного эпителия имеет важные биологические последствия.Мы предполагаем, что эти CAF направляют прогрессирование эпителиальной опухоли. В описанной здесь модельной системе эти CAF стимулируют прогрессирование эпителиального туморогенеза. CAF последовательно не образуют опухоли, когда их прививают или инокулируют сами по себе. Они являются генетически нормальными, как определено сравнительной геномной гибридизацией и кариотипическим анализом, и демонстрируют ограниченную продолжительность жизни в культуре (таблица 1). ⇓ . Более того, по рассматриваемым здесь критериям эти фибробласты были морфологически и иммуноцитохимически неотличимы от нормальных фибробластов.

Предыдущие исследования.

Следует отметить, что другие исследователи ранее изучали взаимодействия фибробластов и эпителия в росте и развитии опухоли с использованием иммортализованных или канцерогенных фибробластных клеточных линий, а не смертных фибробластов, используемых в этом исследовании (Refs. 25 а также 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57 год ; см. рис. 6 ⇓ ). Эти исследования продемонстрировали, что линии фибробластных клеток, а также инициированные фибробласты, которые были изменены вирусными или химическими канцерогенами, могут усиливать рост и рост опухоли при совместной инокуляции с клетками карциномы.Это происходит даже в условиях, когда клетки карциномы инокулируются ниже их онкогенной дозы. Эти инициированные и / или канцерогенные фибробластные клеточные линии отличаются от CAF, описанных в настоящем документе, потому что описанные клеточные линии, описанные ранее, образовывали опухоли (саркомы) при введении сами по себе, содержали генетические изменения, были бессмертными и / или отличались от нормальных фибробластов множеством туморогенных фенотипов.

Рис.6.

Исследования, в которых изучали взаимодействие фибробластов и эпителия с использованием клеток на разных стадиях неопластической прогрессии.Перечислены это исследование и те, на которые есть ссылки.

Взаимодействия фибробластов и эпителия при росте и развитии опухоли также были изучены путем совместной инокуляции нормальных или CAF с опухолегенными эпителиальными клетками. Было показано, что такие фибробласты регулируют рост, дифференциацию и туморогенез клеток карциномы как положительным, так и отрицательным образом. (54 , 58, 59, 60, 61, 62, 63) . Следует признать, что эпителиальные клетки, использованные в этих предыдущих исследованиях, также отличались от клеток, использованных в настоящем исследовании.Клетки TAg-HPE, хотя и были иммортализованы, по строгим критериям оказались неопухолевыми. Таким образом, хотя предыдущие исследования продемонстрировали, что фибробласты могут регулировать рост клеток карциномы, настоящее исследование является первым, демонстрирующим, что первичные, фенотипически нормальные фибробласты, связанные со злокачественным эпителием человека, могут стимулировать прогрессирование неопухолевых эпителиальных клеток (рис. 6). ⇓ .

Изменчивость фенотипа CAF.

Тканевые рекомбинанты CAF / TAg-HPE, представленные выше, продемонстрировали воспроизводимую вариабельность.Хотя клиническая стадия и степень Глисона всех образцов опухолей, использованных для выделения различных популяций CAF, были сходными, способность отдельных изолятов CAF способствовать онкогенезу различалась. Это не было неожиданностью, учитывая неоднородное клиническое поведение опухолей простаты, даже в пределах одинаковых клинических стадий и классов. Обнаруженная вариабельность онкогенеза не зависела от периода роста тканевых рекомбинантов, но была продиктована образцом CAF, использованным в конкретном тканевом рекомбинанте (таблица 1). ⇓ .Это подчеркивает неоднородность опухоли к опухоли. Следует также отметить, что разные субпопуляции CAF в одном и том же образце привели к опухолям разной влажной массы. Это наблюдение, вероятно, отражает переменный вклад нормальных фибробластов, CAF и гладкомышечных клеток в строму, окружающую злокачественную опухоль предстательной железы. Внутриопухолевая вариабельность не зависела от экспериментальных условий, поскольку пересадка тканевых рекомбинантов, содержащих одну и ту же субпопуляцию CAF, в разные дни давала аналогичные результаты.

Дополнительность модельных систем.

Системы in vivo, и in vitro, , описанные в этом исследовании, дали дополнительные результаты. Все изменения измеренных онкогенных показателей обеих систем способствовали росту опухоли. CAF стимулировали гистологические изменения, замедляли гибель клеток и повышали пролиферацию инициированных эпителиальных клеток как in vivo , так и in vitro . Тканевые рекомбинанты, состоящие из CAF / TAg-HPE, продемонстрировали влажную массу в 500 раз больше, чем тканевые рекомбинанты, состоящие из NHPF / TAg-HPE.Процент клеток TAg-HPE в S-фазе клеточного цикла удваивался при совместном культивировании с CAF. Как и ожидалось, со временем это привело бы к существенной разнице в росте опухоли. Аналогичным образом, замедление гибели клеток, которое наблюдалось при совместном культивировании клеток TAg-HPE с CAF, также могло оказывать значительное влияние на размер опухоли с течением времени. Ожидается, что это 2-кратное увеличение жизнеспособности клеток (снижение гибели клеток) в сочетании с 2-кратным увеличением пролиферации будет иметь драматический эффект in vivo .Действительно, это то, что мы наблюдали (рис. 3). ⇓ . Таким образом, результаты каждой системы подтверждали и обобщали результаты другой. Хотя в настоящих экспериментах анализировался вклад CAF в стимуляцию онкогенеза, участие других стромальных компонентов не исключалось. Эндотелиальные клетки, воспалительные клетки и другие, возможно, также внесли свой вклад в среду, которая усиливала онкогенез в системе in vivo .

Новые аспекты модельных систем.

У модельных систем, описанных в настоящем исследовании, есть несколько важных преимуществ: ( a ) человеческие клетки были использованы для исследования онкогенного процесса. Это важно, потому что эти клетки могут быть более репрезентативными для рака человека, чем модели на животных; ( b ) мы использовали отдельные, но комплементарные модели in vitro и in vivo . Поскольку наша система in vitro была подтверждена нашим подходом in vivo , мы сможем использовать систему in vitro в будущем для изучения конкретных переменных, которые могут влиять на канцерогенный процесс; ( c ) наши модельные системы позволили нам индивидуально управлять генетическими и эпигенетическими компонентами.Генетические изменения имеют решающее значение для туморогенеза. Однако накопление мутаций в злокачественных клетках происходит на фоне взаимодействия с микроокружением опухоли. Хотя микросреда часто рассматривается как поддерживающая и отзывчивая, наши данные демонстрируют, что она играет более активную роль в канцерогенном процессе. В этом отношении многоступенчатая прогрессия, которая олицетворяет канцерогенез, включает генетические изменения в эпителии, а также эпигенетический вклад окружающей поддерживающей стромальной ткани.Наши данные подчеркивают необходимость обоих компонентов в этом процессе и демонстрируют, что ни один компонент сам по себе не является достаточным, чтобы вызвать прогрессирование опухоли. Описанные здесь модельные системы позволяют независимо изучать генетические и эпигенетические влияния. Наблюдения, изложенные в настоящем исследовании, имеют важное значение для диагностики и лечения злокачественных заболеваний.

Ассоциация клонального гемопоэза в генах репарации ДНК с вмешательством при тестировании внеклеточной ДНК в плазме рака предстательной железы | Биомаркеры рака | JAMA Онкология

Ключевые моменты

Вопрос Как часто исследования внеклеточной ДНК (вкДНК) при раке предстательной железы смешиваются с вариантами клонального гематопоэза (CHIP) в генах, используемых для соответствия критериям отбора ингибитора поли (АДФ) рибозо-полимеразы (PARPi)?

Выводы В этом исследовании серии случаев с участием 69 мужчин с распространенным раком простаты 7 (10%) имели варианты CHIP в генах, используемых для утвержденных Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США показаний к лечению PARPi, наиболее часто в ATM .

Значение Мужчины с раком простаты подвергаются высокому риску ошибочного диагноза как подходящего для лечения PARPi с использованием текущих тестов cfDNA; В анализах следует использовать контрольный образец цельной крови, чтобы отличить варианты CHIP от рака простаты.

Важность Тестирование внеклеточной ДНК (вкДНК) все чаще используется при лечении пациентов с распространенным раком простаты. Клональный гемопоэз с неопределенным потенциалом (CHIP) может мешать тестированию вкДНК и вызывать неправильную интерпретацию результатов.После недавнего одобрения Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США ингибиторов поли (АДФ) рибозо-полимеразы (PARPi) для лечения метастатического рака простаты на основе вариантов генов репарации ДНК, на которые может воздействовать CHIP, срочно необходимо лучше понять эту проблему.

Цель Определить распространенность клинически значимой интерференции CHIP при тестировании cfDNA рака простаты.

Дизайн, обстановка и участники Мы сообщаем о серии случаев из 69 пациентов с распространенным раком простаты (метастатическое заболевание или с повышением уровня ПСА после локализованной терапии), у которых было тестирование варианта вкДНК с помощью анализа секвенирования большого рака следующего поколения (UW-OncoPlexCT).Чтобы определить источник вариантов в плазме, мы протестировали парные контрольные образцы вкДНК и цельной крови. Исследование проводилось в системной референс-лаборатории академического медицинского центра.

Основные результаты и мероприятия Распространенность и спектр генов CHIP-интерференции у пациентов с раком простаты, проходящих тестирование вкДНК.

Результаты Мы обнаружили варианты CHIP с 2% или более фракцией вариантов в вкДНК у 13 из 69 мужчин с раком простаты (19%; 95% ДИ, 10-30%).Семь мужчин (10%; 95% ДИ, 4-20%) имели варианты CHIP в генах репарации ДНК, используемые для определения кандидатуры PARPi, включая ATM (n = 5), BRCA2 (n = 1) и . ЧЕК2 (n = 1). В целом варианты CHIP составили почти половину обнаруженных вариантов генов репарации соматической ДНК. Варианты CHIP участников экспоненциально коррелировали с более старшим возрастом ( R ² = 0,82). Варианты интерференции CHIP можно было отличить от вариантов рака простаты с использованием парного контроля цельной крови.

Выводы и значимость В этой серии случаев примерно у 10% мужчин с распространенным раком предстательной железы была обнаружена интерференция CHIP в cfDNA плазмы в генах репарации ДНК, которые используются для соответствия критериям терапии PARPi, наиболее часто в ATM . Клиническое тестирование вкДНК должно включать парный контроль цельной крови, чтобы исключить варианты CHIP и избежать ошибочного диагноза.

Вариантный анализ внеклеточной ДНК (вкДНК) используется для принятия решений о лечении мужчин с метастатическим раком простаты (мРП) и для включения пациентов в клинические испытания. ¹ Два ингибитора поли (АДФ) рибозо-полимеразы (PARPi) недавно получили одобрение Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) для использования у отдельных пациентов с мПК на основании статуса гена репарации ДНК: рукапариб для пациентов с BRCA1 или BRCA2 вариантов и олапариб для пациентов с вариантами ATM, BRCA1, BRCA2, BARD1, BRIP1, CDK12, CHEK1, CHEK2, FANCL, PALB2, RAD51B, RAD51C, RAD51D или RAD51L . ² После этих одобрений на основе биомаркеров мы ожидаем, что количество тестов вкДНК резко увеличится для пациентов с мПК, поскольку оно предлагает удобство и простоту тестирования на образце крови на поздних стадиях заболевания. ^{1 , 3 , 4} Таким образом, существует острая необходимость в понимании эффективности тестирования вкДНК и источников тестовых помех.

Клональный гематопоэз с неопределенным потенциалом (CHIP) — известный фактор, влияющий на тестирование вкДНК. ^{5 , 6} Клональный гематопоэз неопределенных потенциальных вариантов обнаруживается как в плазме, так и в цельной крови, тогда как варианты рака простаты обнаруживаются только в плазме. Тем не менее, большинство коммерческих лабораторий проводят тестирование вкДНК, используя только плазменный подход, который не может надежно отличить варианты, полученные от рака простаты, от вариантов, полученных от CHIP.Для повышения эффективности анализа вкДНК мы разработали подход (UW-OncoPlexCT), который одновременно анализирует плазму и парные контрольные образцы цельной крови. ⁴ Используя этот подход к парному тестированию, мы стремились определить, в какой степени CHIP влияет на результаты тестирования cfDNA рака простаты.

Мы ретроспективно рассмотрели результаты исследования вкДНК у 69 пациентов с распространенным раком простаты (метастатическое заболевание или с повышением уровня ПСА после локализованной терапии), последовательность которых была определена согласно нашим поправкам к клиническим лабораторным исследованиям (CLIA) и аккредитованным Коллегией американских патологов (CAP) клиническим UW- Протокол OncoPlexCT.ВКДНК плазмы и парный контрольный образец цельной крови были протестированы у каждого пациента. ^{4 , 7} Мы определили CHIP-интерференцию как патогенный вариант с фракциями вариантных аллелей (VAF) не менее 2% как в цельной крови, так и в плазме. Варианты зародышевой линии отличались от клонов CHIP путем секвенирования опухоли. Анализ данных секвенирования и интерпретация вариантов были выполнены экспертом-молекулярным патологом (C.C.P.). Все данные были вручную просмотрены во встроенном средстве просмотра геномики (IGV), чтобы исключить артефакты секвенирования.Данные были сгенерированы и предварительно обработаны Лабораторией и аналитической группой NGS Вашингтонского университета. Это исследование было выполнено в соответствии с рекомендациями Хельсинкской декларации и одобрено наблюдательным советом Вашингтонского университета / Консорциума рака Фреда Хатчинсона, и все пациенты предоставили письменное информированное согласие.

Мы обнаружили клоны с интерференцией CHIP как минимум 2% вариантной фракции у 13 из 69 пациентов (19%; 95% ДИ, 10-30%).У семи пациентов (10%; 95% ДИ, 4-20%) были варианты CHIP в генах репарации ДНК, которые используются для отбора PARPi ( ATM n = 5, BRCA2 , n = 1 и CHEK2 , n = 1 ) (рисунок) (таблица). У 6 оставшихся пациентов были обнаружены CHIP-интерференции в генах, на которые часто влияет CHIP: ASXL1 , DNMT3A , PTEN , TET2 и TP53 (рисунок) (рисунок в приложении). ^{8 , 9}

Мы заметили, что помехи CHIP экспоненциально коррелируют с возрастом ( R ² = 0.82). Мы обнаружили ЧИП у 0% (0/6) мужчин в возрасте от 40 до 50 лет, 12,5% (2/16) мужчин в возрасте от 51 до 60 лет, 6,3% (1/16) мужчин в возрасте от 61 до 70 лет, 20,8 % (5/24) мужчин в возрасте от 71 до 80 лет и 71% (5/7) мужчин в возрасте от 81 до 90 лет (рисунок, A).

У 20 пациентов с распространенным раком простаты мы обнаружили в общей сложности 23 патогенных варианта в вариантах гена репарации ДНК, используемых для выбора терапии PARPi, из следующих источников: CHIP-интерференция соматическая (n = 8, у 1 пациента было 2) , соматические без ЧИП (n = 9), зародышевые линии (n = 6) (рисунок, B).Мы рассматривали варианты зародышевой линии и соматические варианты без CHIP как истинно положительные (n = 15), а вмешательство CHIP как ложноположительные (n = 8). Ограничивая анализ только анализом плазмы, только 65% обнаруженных вариантов гена репарации ДНК были истинно положительными (15/23). При включении парного контроля из цельной крови для устранения интерференции CHIP все варианты гена репарации ДНК были истинно положительными (15/15, 100%).

Пациенту с BRCA2 CHIP-интерференцией было проведено параллельное тестирование вкДНК в сторонней коммерческой лаборатории с использованием анализа только для плазмы, который был неизвестен нашей лаборатории во время тестирования.Клон BRCA2 CHIP был клинически зарегистрирован коммерческой лабораторией с рекомендацией использовать терапию PARPi.

Мы обнаружили, что поразительно высокая доля вариантов гена репарации ДНК в плазме пациентов с распространенным раком простаты связана с CHIP. Варианты CHIP сильно коррелировали с увеличением возраста и даже превышали ожидания по возрастным группам. На высокий уровень CHIP также может влиять предшествующее лечение химиотерапией. ^{10 , 11} Мы обеспокоены тем, что вмешательство CHIP вызывает ложноположительные оценки биомаркеров вкДНК, которые могут нанести вред пациенту из-за ненадлежащего лечения и задержки в предоставлении альтернативных эффективных вариантов лечения. Без проведения контроля цельной крови 7 из 69 пациентов (10%) были бы неправильно диагностированы и были бы неправильно признаны подходящими для терапии ингибитором PARP на основании влияния CHIP в плазме. Фактически, у 1 пациента в этой серии был клон BRCA2 CHIP, о котором ранее сообщала коммерческая лаборатория с рекомендацией использовать PARPi.Чтобы уменьшить эти риски, результаты вкДНК следует сравнивать с результатами контроля цельной крови или опухолевой ткани. ¹²

Начинают описываться проблемы точного тестирования вкДНК. Недавний отчет ¹³ выявил неточности коммерческого лабораторного тестирования вкДНК у пациентов с раком простаты. В этом отчете образцы вкДНК от 40 пациентов были отправлены в 2 отдельные лаборатории, сертифицированные CLIA, и только 9 из 40 (23%) продемонстрировали совпадение (полное или частичное) положительных результатов. ¹³ Согласованные результаты включали варианты ATM и TP53 у пациентов с низким уровнем ПСА на момент взятия крови, что вызывает подозрение, что это могут быть клоны CHIP. Сообщалось также о вмешательстве CHIP в тестирование вкДНК при других типах рака. Например, при почечно-клеточной карциноме (ПКР) CHIP влияет на результаты вкДНК у 43% пациентов. ¹⁴

В целом, ATM составляли большую часть клинически значимых помех CHIP в нашей серии.Ген ATM был описан как частый клон CHIP при тестировании клинической предрасположенности к раку, наряду с CHEK2 и TP53 . ¹⁰ Мы предполагаем, что вмешательство CHIP в тестирование вкДНК может повлиять на результаты клинических исследований PARPi у пациентов с метастатическим раком простаты. Испытания, разрешающие включение в исследование вкДНК только плазмы, могли включать пациентов с ложноположительными результатами, связанными с CHIP в генах репарации ДНК, особенно в ATM . ¹⁵ Мы предполагаем, что это могло быть причиной низких показателей ответа PARPi, о которых сообщалось у пациентов с вариантами ATM , как, например, недавно сообщалось в исследовании TRITON2. ¹⁵

Это исследование имеет несколько ограничений, включая относительно небольшой размер выборки, ретроспективный характер исследования и неоднородность популяций пациентов и предшествующих терапий.

Результаты этого исследования позволяют предположить, что CHIP существенно мешает тестированию вкДНК плазмы у пациентов с распространенным раком простаты.Существует риск широко распространенного неправильного диагноза и чрезмерного лечения мужчин с PARPi с использованием доступных в настоящее время коммерческих анализов вкДНК. Мы рекомендуем, чтобы все тесты cfDNA у пациентов с раком простаты включали контроль цельной крови, чтобы отличить CHIP от вариантов рака простаты.

Принято к публикации: 13 августа 2020 г.

Опубликовано в Интернете: 5 ноября 2020 г. doi: 10.1001 / jamaoncol.2020.5161

Автор для корреспонденции: Colin C.Притчард, доктор медицины, доктор философии, Вашингтонский университет, 1959 г., NE Pacific St, PO Box 357110, Seattle, WA 98195 ([email protected]).

Открытый доступ: Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии CC-BY. © 2020 Jensen K et al. JAMA Онкология .

Вклад авторов: Доктор Притчард имел полный доступ ко всем данным в исследовании и берет на себя ответственность за целостность данных и точность анализа данных.

Концепция и дизайн: Jensen, Sokolova, Nelson, Pritchard.

Сбор, анализ или интерпретация данных: Дженсен, Конник, Швейцер, Гривас, Ченг, Клемфусс, Бейтол, Ю, Монтгомери, Причард.

Составление рукописи: Йенсен, Конник, Швейцер, Бейтол, Нельсон, Причард.

Критический пересмотр рукописи на предмет важного интеллектуального содержания: Йенсен, Конник, Швейцер, Соколова, Гривас, Ченг, Клемфус, Ю, Монтгомери, Причард.

Статистический анализ: Jensen, Pritchard.

Получено финансирование: Нельсон, Причард.

Административная, техническая или материальная поддержка: Konnick, Cheng, Klemfuss, Beightol, Yu, Nelson, Montgomery, Pritchard.

Надзор: Конник, Притчард.

Раскрытие информации о конфликте интересов: Д-р Притчард консультирует AstraZeneca и Promega. Д-р Гривас консультирует AstraZeneca, Bayer, Bristol Myers Squibb, Clovis Oncology, Driver, EMD Serono, Exelixis, Foundation Medicine, GlaxoSmithKline, Genentech, Genzyme, Heron Therapeutics, Janssen, Merck, Mirati Therapeutics, Pfizer, Roche и QED Genetics. Терапия; он также сообщает об участии в образовательной программе для Bristol Myers Squibb; и институциональное финансирование исследований от AstraZeneca, Bavarian Nordic, Bayer, Bristol Myers Squibb, Clovis Oncology, Debiopharm, Genentech, Immunomedics, Kure It Cancer Research, Merck, Mirati Therapeutics, Oncogenx, Pfizer и QED Therapeutics.О других конфликтах не сообщалось.

Финансирование / поддержка: Эта работа была поддержана наградами Министерства обороны США W81XWH-18-1-0756 (PC170510) (дизайн и проведение исследования), W81XWH-18-1-0356 (PC170503P2) (дизайн и проведение исследования), W81XWH-18-1-0354 (дизайн и проведение исследования) и W81XWH-16-1-0484 (дизайн и проведение исследования), SPORE CA097186 рака предстательной железы северо-западного Тихоокеанского региона, Brotman Baty Институт точной медицины (разработка и проведение исследования), Фонд рака простаты (разработка и проведение исследования), Институт исследований рака предстательной железы UW / FHCRC (IPCR) (разработка и проведение исследования, сбор, управление, анализ и интерпретация данных), а также грант поддержки P30 CA015704 Национальных институтов здравоохранения / Национального института рака США (разработка и проведение исследования).

Роль спонсора / спонсора: Финансирующие агентства сыграли свою роль в разработке и проведении исследования; сбор, управление, анализ и интерпретация данных; подготовка, рецензирование или утверждение рукописи; и решение представить рукопись для публикации.

7. Куо Эй Джей, Полсон VA, Hempelmann JA, и другие. Валидация и внедрение модульного целевого метода захвата для обнаружения клинически значимых изменений молекулярной онкологии. Практик Лаборатория Медицины . 2020; 19: e00153. DOI: 10.1016 / j.plabm.2020.e00153PubMedGoogle Scholar10.Slavin TP, Кофе B, Бернхизель R, и другие. Распространенность и характеристики вероятных соматических вариантов в генах предрасположенности к раку среди лиц, прошедших панельное тестирование по наследственности. Рак Генет . 2019; 235-236: 31-38. DOI: 10.1016 / j.