Сколько белков нужно вашему организму и откуда их лучше брать
- Джессика Браун
- BBC Future
Автор фото, iStock
Некоторые эксперты заявляют, что покупать продукты с повышенным содержанием белков (и по повышенной цене) — это все равно, что спускать деньги в унитаз. Правы ли они?
Сколько белков нам на самом деле нужно? Помогают ли они избавиться от лишнего веса? И кому они вообще помогают?
В начале ХХ века канадский исследователь Арктики, этнограф и писатель Вильялмур Стефанссон принял решение в течение пяти лет есть только мясо. Соответственно, его рацион в те годы состоял примерно на 80% из жиров и на 20% из белков.
Двадцать лет спустя, в 1928 году, он повторил эксперимент под наблюдением специалистов из знаменитой нью-йоркской больницы Бельвью, но ограничился одним годом.
Стефанссон хотел опровергнуть мнение, что на одном мясе человек не выживет.
Но в ходе обоих экспериментов ему быстро становилось плохо, если он какое-то время потреблял только нежирное мясо.
У него развивалось так называемое белковое отравление, которое прозвали «истощением от крольчатины».
Симптомы исчезали, когда он изменял рацион — начинал есть меньше белков и больше жиров.
После тех экспериментов, живя в Нью-Йорке и потребляя типичный американский рацион со средним содержанием белков, Стефанссон начал жаловаться на ухудшение здоровья.
Он вернулся к своей диете — с ограничением углеводов и высоким содержанием жиров и белков — и прожил на ней до 83 лет.
Так или иначе, его первые эксперименты — одни из немногих формальных научных доказательств того, что высокобелковая диета может быть очень вредной.
Автор фото, Getty Images
Подпись к фото,Производители протеиновых добавок советуют выпивать после тренировки протеиновый коктейль, чтобы мышечные ткани восстанавливались и росли
Несмотря на большую популярность протеиновых пищевых добавок, многие из нас до сих пор точно не знают, сколько белков нам нужно, как именно их потреблять и чем грозит их дефицит или избыток в организме.
Белки на авансцене
За последние двадцать лет уровень ожирения среди британцев повысился вдвое, и многие начинают более сознательно подходить к питанию. Мы заменяем белый хлеб черным и цельнозерновым, а обычное молоко — обезжиренным.
В маркетинговом шоу о здоровом образе жизни белки исполняют главную роль: полки супермаркетов пестрят протеиновыми батончиками, протеиновыми шариками и повседневными продуктами, обогащенными белками — от зерновых хлопьев до супов.
В 2016 году объем глобального рынка протеиновых пищевых добавок составлял примерно 12,4 млрд долларов. Очевидно, нас убедили, что чем больше белков — тем лучше.
А сколько их надо?
Впрочем, некоторые эксперты сейчас заявляют, что покупать продукты с повышенным содержанием белков (и по повышенной цене) — это выбрасывать деньги на ветер.
Давайте разберемся. Белки необходимы для роста и восстановления клеток тела.
Белковая пища — мясо, рыба, яйца, молочные продукты и бобовые — в желудке расщепляется на аминокислоты и поглощается тонким кишечником; потом печень решает, какие из аминокислот нужны организму. Остальные вымываются с мочой.
Автор фото, iStock
Подпись к фото,Покупаете белковые добавки? Рискуете выбросить деньги на ветер
Взрослым, чей образ жизни не особо активен, советуют ежедневно потреблять примерно 0,75 г белков на килограмм массы тела.
В среднем это 55 г для мужчин и 45 г для женщин. Их можно получить из двух порций (размером в ладонь) таких продуктов как мясо, рыба, тофу, орехи или бобовые.
Если белков недостаточно, у человека могут выпадать волосы, появляться сыпь на коже или снижаться вес из-за потери мышечной массы.
Но такие побочные эффекты встречаются очень редко, в основном у тех, кто страдает от пищевых расстройств.
Белки для шварценеггеров
Для большинства из нас белки ассоциируются с бодибилдингом.
Так и есть.
Силовые упражнения приводят к расщеплению белков в мышцах. Чтобы мышцы крепли, белки должны возобновляться.
Особенно важную роль в запуске процессов синтеза белков играет аминокислота под названием лейцин.
Автор фото, Getty Images
Подпись к фото,Многие потребляют продукты спортивного питания, например, протеиновые батончики и коктейли
Некоторые специалисты даже считают, что, если не поесть после тренировки богатой белками пищи или специальных добавок, мышцы не вырастут.
Производители добавок советуют выпивать после тренировки протеиновый коктейль — обычно на основе богатого лейцином сывороточного белка, побочного продукта производства сыра.
Потребители, судя по всему, соглашаются. Согласно отчету, опубликованному в 2017 году исследовательской компанией Mintel, 27% британцев потребляют продукты спортивного питания — такие как протеиновые батончики и коктейли.
Эта цифра возрастает до 39% среди тех, кто тренируется чаще одного раза в неделю.
Но более половины (63%) из тех, кто потребляет упомянутые продукты, не могут точно сказать, есть ли от них польза.
Так помогают или нет?
Исследования того, насколько протеиновые добавки помогают нарастить мышцы, показывают неоднозначные результаты.
В частности, в 2014 году ученые проанализировали 36 научных статей на эту тему и пришли к выводу: протеиновые добавки не влияют на нежировую массу тела и силу мышц в течение первых нескольких недель силовых тренировок у людей, которые ранее не занимались спортом.
Со временем, когда тренировки становятся интенсивнее, добавки действительно могут способствовать наращиванию мышц. Однако авторы отмечают, что такие изменения не исследовались в долгосрочной перспективе.
Другое исследование за 2012 год говорит, что протеин «улучшает результативность тренировок, способствует восстановлению и увеличивает нежировую массу тела», но в нем отмечается: для лучших результатов белки следует потреблять вместе с быстрыми углеводами.
Обычные сладкие батончики?
И — внимание! — если спортсменам и посетителям тренажерных залов полезно быстрое «вливание» белков в организм сразу после тренировки, это не значит, что обязательно употреблять добавки и коктейли.
Большинство людей и так получает основную часть рекомендованного дневного количества белков из обычной пищи, говорит Кевин Типтон, преподаватель физической культуры из Университета Стерлинга.
«В добавках нет необходимости. Это удобный способ получить протеин, но в них нет ничего такого, чего не получишь из обычной еды. Протеиновые батончики — это обычные сладкие батончики с несколько большим содержанием белков».
Автор фото, Getty Images
Подпись к фото,В 2016 году объем всемирного рынка протеиновых пищевых добавок составлял 12,4 млрд долларов
Типтон добавляет, что даже для культуристов сывороточный белок и другие подобные вещества не столь важны, как это нам пытаются подать.
«Внимание слишком смещено на то, какие добавки употреблять, но на самом деле важнее идти в зал и тренироваться. Важное значение для результата имеют и другие переменные, такие как сон, диета и уровень стресса», — подчеркивает он.
Большинство экспертов согласно с Типтоном: белки лучше получать из пищи, а не из добавок. Но есть определенные исключения — в частности, спортсмены, которым трудно достигать ежедневной цели в потреблении белков, отмечает Грэм Клоуз, профессор физиологии Ливерпульского университета имени Джона Мурса.
«По моему мнению, потребности большинства из них превышают рекомендованную дневную норму, и этому есть доказательства», — говорит он. В таком случае коктейль может быть полезным.
Кому еще необходимы белки?
Какой еще демографической группе не помешают дополнительные белки? Пожилым людям. Потому что с возрастом мы нуждаемся в большем количестве белков для поддержания той же мышечной массы.
В то же время пожилые люди склонны потреблять меньше белков, потому что их вкусы часто сдвигаются в сторону расположения к сладкому.
Автор фото, Getty Images
Подпись к фото,Мы как правило получаем большую часть рекомендованного дневного количества белка из своего обычного рациона
Эмма Стивенсон, профессор физической культуры с Ньюкаслского университета, пытается договориться с производителями продуктов питания о повышении содержания белков в изделиях, которые часто покупают пожилые люди, например, в печенье.
«С возрастом нам нужно особенно тщательно сохранять свою мышечную массу, ведь мы становимся слабыми и менее активными», — говорит она.
Клоуз утверждает, что пожилые люди должны повысить потребление белков до 1,2 г на килограмм массы тела.
Можно ли их переесть?
К счастью, употребить слишком много белков очень сложно. Хотя верхний лимит существует, его «практически невозможно» достичь, считает Типтон.
«Некоторые диетологи обеспокоены, что высокобелковая диета может навредить почкам и костям, но доказательств тому очень мало, если речь идет о вполне здоровых людях».
«Возможно, проблемы и возникнут, если человек с больными почками будет есть большое количество белков; но любые плохие последствия очень маловероятны».
Впрочем, хотя белки сами по себе не вредны, белковые добавки часто содержат значительное количество углеводов из группы FODMAP, а те в свою очередь вызывают расстройства пищеварения: вздутие живота, метеоризм, боль в желудке.
Стивенсон советует внимательно читать информацию на этикетках пищевых добавок, батончиков и шариков.
«Часто они очень калорийны и содержат огромное количество углеводов, нередко в форме сахара. Не следует думать, что «высокое содержание протеина» автоматически означает здоровую пищу», — говорит она.
Помогают ли они похудеть?
Белки давно связывают с похудением; высокобелковые и низкоуглеводные диеты (например, палеодиета или диета Аткинса) обещают продлить ощущение сытости.
Людям часто не удается похудеть, потому что они чувствуют голод и едят. Как показали исследования с использованием МРТ, высокобелковый завтрак способствует уменьшению аппетита в течение дня.
Есть достаточно доказательств того, что белки хорошо утоляют голод, говорит Алекс Джонстоун с Абердинского университета. Если вы пытаетесь похудеть, то важнее есть высокобелковые завтраки (например, тост с фасолью или молочный коктейль), чем принимать добавки.
Но она не защищает диету Аткинса и обнаружила в своем исследовании, что исключение из рациона углеводов негативно сказывается на здоровье кишечника (а мы знаем, что здоровый кишечник критически важен для многих аспектов нашего здоровья и благополучия).
Автор фото, Getty Images
Подпись к фото,Протеиновые шарики часто высококалорийны и содержат огромное количество углеводов
Джонстоун рекомендует людям с избыточным весом поддерживать рацион, богатый белками и умеренно богатый углеводами: 30% белков, 40% углеводов и 30% жиров.
Для сравнения: людям без лишнего веса рекомендуют потреблять в среднем 15% белков, 55% углеводов и 30% жиров.
Конечно же, вы не похудеете, если только увеличите потребление белков. Важный ключ к успеху — есть курятину, другое нежирное мясо или рыбу.
Есть ли риски и как их избежать?
Исследования также показывают, что потребление большого количества животных белков способствует набору веса, а красное мясо повышает риск рака и сердечных заболеваний.
Однако существуют полезные белки не мясного происхождения, например, микопротеин — грибной белок.
На его основе в Британии выпустили заменитель мяса под маркой Quorn — в нем много не только белков, но и клетчатки. Сейчас исследователи изучают, как эта уникальная комбинация влияет на ощущение сытости и уровень инсулина, связанный с диабетом второго типа.
Автор фото, iStock
Подпись к фото,Употребить слишком много белков трудно.
Но нужно ли это вам вообще?
Одна исследовательская группа сравнила микопротеиновую диету с диетой на основе курятины и установила: у тех, кто ел Quorn, контроль над содержанием сахара был такой же, но при этом от поджелудочной железы требовалось производить меньше инсулина.
Риск употребить избыточное количество белков небольшой. Но лучше не обольщаться эффективностью продуктов с завышенной ценой, в которых предлагается больше белков, чем нам нужно.
«Некоторые продукты, обозначенные как «высокобелковые», на самом деле таковыми не являются, но стоят довольно дорого», — говорит Джонстоун.
«Как бы там ни было, потреблять больше белков, чем вам нужно, — это расточительство. Это все равно, что спускать деньги в унитаз».
Прочитать оригинал этой статьи на английском языке можно на сайте BBC Future.
Диетолог объяснила, чем грозит избыток белка в организме
https://rsport.ria.ru/20200623/1573362235.
html
Диетолог объяснила, чем грозит избыток белка в организме
Диетолог объяснила, чем грозит избыток белка в организме — РИА Новости Спорт, 26.06.2020
Диетолог объяснила, чем грозит избыток белка в организме
Высокобелковая диета может стать причиной нарушения работы внутренних органов и сердечно-сосудистой системы, заявила диетолог Елена Кален. РИА Новости Спорт, 26.06.2020
2020-06-23T14:00
2020-06-23T14:00
2020-06-26T11:26
зож
питание
здоровье
/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content
/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content
https://cdnn21.img.ria.ru/images/97329/75/973297575_0:126:2500:1532_1920x0_80_0_0_eb0985d853e24aba17a1e1b38763f73a.jpg
МОСКВА, 23 июн — РИА Новости. Высокобелковая диета может стать причиной нарушения работы внутренних органов и сердечно-сосудистой системы, заявила диетолог Елена Кален.Она отмечает, что в этом случае сводится к минимуму потребление углеводов и жиров, а основную часть рациона составляет белковая пища.
В результате создается переизбыток белка и дефицит углеводов, из-за чего, по мнению специалиста, такой режим питания нельзя назвать полезным и сбалансированным.Кроме того, при избытке белка страдает центральная нервная система, увеличивается отложение жира в печени, нарушается витаминный обмен, повышается риск развития подагры, вымывается кальций, что приводит к остеопорозу, а также ухудшается состояние ногтей и волос.Елена Кален предупреждает, что при недостатке клетчатки, которая содержится в медленных углеводах, перистальтика желудка снижается, а процесс окисления приводит к «гниению в толстом кишечнике и интоксикации».
https://rsport.ria.ru/20200623/1573350200.html
https://rsport.ria.ru/20200622/1573289952.html
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
2020
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.
xn--p1ai/awards/
Новости
ru-RU
https://rsport.ria.ru/docs/about/copyright.html
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
https://cdnn21.img.ria.ru/images/97329/75/973297575_146:0:2354:1656_1920x0_80_0_0_6e1e4b04a37daa7dd0043fb6d10e770f.jpgРИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
питание, здоровье
МОСКВА, 23 июн — РИА Новости. Высокобелковая диета может стать причиной нарушения работы внутренних органов и сердечно-сосудистой системы, заявила диетолог Елена Кален.
Она отмечает, что в этом случае сводится к минимуму потребление углеводов и жиров, а основную часть рациона составляет белковая пища. В результате создается переизбыток белка и дефицит углеводов, из-за чего, по мнению специалиста, такой режим питания нельзя назвать полезным и сбалансированным.
23 июня 2020, 11:50ЗОЖВрач рассказал, способствует ли употребление молока развитию рака«При большом количестве белка организм в первую очередь расщепляет белки для поддержания энергообмена. При этом образуются свободные аминокислоты, которые окисляют организм. В результате метаболизм замедляется, что в дальнейшем будет способствовать набору веса», — объясняет диетолог.
Кроме того, при избытке белка страдает центральная нервная система, увеличивается отложение жира в печени, нарушается витаминный обмен, повышается риск развития подагры, вымывается кальций, что приводит к остеопорозу, а также ухудшается состояние ногтей и волос.
22 июня 2020, 12:00ЗОЖ»Медленный яд»: доктор Ковальков перечислил самые вредные продуктыЕлена Кален предупреждает, что при недостатке клетчатки, которая содержится в медленных углеводах, перистальтика желудка снижается, а процесс окисления приводит к «гниению в толстом кишечнике и интоксикации».
«Поскольку источник белка — это в основном продукты животного происхождения, то вместе с переизбытком белка возрастает и поступление животных жиров в организм, что повышает уровень холестерина и подрывает здоровье сердечно-сосудистой системы», — пишет в своем Instagram диетолог.
Анализ мочи | Центр неврологии и реабилитации
Стандартное лабораторное исследование, которое входит в комплексную диагностику многих заболеваний. Сдать анализ мочи можно в нашем центре. Возможен выезд медсестры на дом по Домодедово и ближайшим районам.
28.09.2017
На основании полученных данных специалисты делают выводы о наличии или отсутствии нарушений в работе органов и назначают дальнейшие профильные обследования.
В каких случаях назначается анализ мочи?
Этот вид обследования проводится:
при профилактических осмотрах;
для выявления патологий почек и мочевыводящей системы;
при подозрении на нарушения в работе сердечно-сосудистой и иммунной систем
и во многих других случаях, когда необходимо получить максимально полные данные о состоянии организма.
В ходе изучения образцов специалисты оценивают их цвет и прозрачность, замеряют уровень кислотности и удельный вес. Далее жидкость анализируется по концентрации в ней таких веществ, как глюкоза, белок, гемоглобин, желчные пигменты и прочие. Полученные показатели сравниваются с нормативными.
Чтобы полученные в ходе анализа мочи данные были максимально достоверными, для изучения предоставляется порция утренней жидкости. Перед сбором образца рекомендуется провести гигиенические процедуры, а сама жидкость должна попасть непосредственно в стерильный контейнер, в котором и предоставляется в лабораторию.
Показатели:
ОБЩИЙ АНАЛИЗ МОЧИ (НОРМА)
| Общий анализ мочи | Мужчины | Женщины |
|
Цвет мочи Прозрачность Запах Реакция мочи или рН Плотность мочи Белок в моче Глюкоза в моче Кетоновые тела в моче Билирубин в моче Гемоглобин в моче Эритроциты в моче Лейкоциты в моче Эпителиальные клетки в моче Цилиндры в моче Соли в моче Бактерии в моче Грибы в моче Паразиты в моче |
соломенно-желтая прозрачная нерезкий Н больше 4 и меньше 7 1012 г/л – 1022 г/л отсутствует, до 0,033 г/л до 0,8 ммоль/л отсутствуют отсутствуют В пределах 5-10 мг/л отсутствует единичные в поле зрения до 3-х в поле зрения до 10-и в поле зрения отсутствуют, единичные гиалиновые отсутствуют отсутствуют отсутствуют |
соломенно-желтая прозрачная нерезкий Н больше 4 и меньше 7 1012 г/л – 1022 г/л отсутствует, до 0,033 г/л до 0,8 ммоль/л отсутствуют В пределах 5-10 мг/л отсутствует до 3-х в поле зрения до 6-и в поле зрения до 10-и в поле зрения отсутствуют, единичные гиалиновые отсутствуют отсутствуют отсутствуют |
Причины изменения цвета мочи
В норме моча имеет соломенно-желтый цвет, прозрачная
На цвет мочи могут оказывать влияние потребленные продукты, медикаменты, жидкости.
Но так же темный цвет мочи может свидетельствовать о заболеваниях печени (гепатит, желчекаменная болезнь) или крови (гемолитическая анемия, болезнь Виллебранда ).
| Темная моча (цвета крепкого черного чая) | Заболевания печени (гепатит, цирроз, печеночная недостаточность, желчекаменная болезнь), массивное разрушение эритроцитов (после переливания крови, ряд инфекций, малярия). |
| Темно-желтый цвет | Обезвоживание организма на фоне рвоты, диареи, снижения потребляемой жидкости, сердечная недостаточность. |
| Бледная или бесцветная моча | Сахарный диабет, несахарный диабет, обильное питье, патология почек (нарушенная концентрационная функция почек). |
| Красноватый цвет мочи |
Употребление в пищу пигментированных фруктов и овощей (свекла, морковь, черника, виноград).
|
| Красный цвет мочи | Насыщенный красный цвет может свидетельствовать о наличии крови в моче. Этот симптом может наблюдаться при: мочекаменной болезни, раке мочевого пузыря, инфаркте почки, пиелонефрите, гломерулонефрите. |
| Цвет мясных помоев | Моча мутная, с взвесью коричнево-серой мути.Возможные причины: острый гломерулонефрит, хроническом гломерулонефрит, камни в почках, инфаркт почки, туберкулез почек и мочевыводящих путей, ускоренное разрушение эритроцитов, применение препаратов (стрептоцид, сульфонал, антипирин, пирамидон, трионал). |
| Красно-коричневый цвет | Применение препаратов: метронидазол, сульфониламидных препаратов, препаратов из толокнянки. |
| Черный цвет | Может наблюдаться при таких болезнях как: болезнь Макиафава Микелли, Алкаптонурия, Меланома |
Причины изменения прозрачности мочи
В норме моча в течение нескольких часов после наполнения контецнера (пробирки) должна оставаться прозрачной.
Небольшое помутнение возможно за счет наличия в ней умеренного количества эпителиальных клеток или слизи.Причины мутной мочи:
- Наличие в ней эритроцитов (мочекаменная болезнь, пиелонефрит, гломерулонефрит, рак мочевого пузыря, простатит)
- Наличие лейкоцитов (пиелонефрит, цистит)
- Высокое содержание бактерий в моче (пиелонефрит, цистит)
- Наличие белка в моче (пиелонефрит, гломерулонефрит, амилоидоз)
- Большое количество эпителия в моче (пиелонефрит)
- Выпадение в осадок солей (ураты, фосфаты, оксалаты)
Белок в моче (причины)
Не всегда появление белка связано с заболеванием или повреждением почек.Белок в моче (альбуминурия) может появляться при воспалении в мочеточниках, мочевом пузыре и уретре.
Случается, белок в моче появляется у здоровых людей после сильных физических нагрузок, долгой ходьбы пешком, холодного душа, при обильном потоотделении.
Альбуминурия не почечного происхождения :
- аллергических реакциях,
- лейкозе,
- эпилепсии,
- сердечной недостаточности.
Почечная альбуминурия:
Она всегда свидетельствует о заболевании почек.
- Альбуминурия 3-5% характерна для острого гломерулонефрита,
- 0,5-1% — для хронических пиелонефритов и гломерулонефритов.
- При нефрозах (сифилисном, нефропатии беременных) количество белка в моче достигает высоких цифр (больше 3%).
Протеинурия: основы практики, патофизиология, этиология
Glassock RJ, Fervenza FC, Hebert L, Cameron JS. Редукс нефротический синдром. Циферблат нефрола .
2015 30 января (1): 12-7. [Медлайн].
Леви А.С., Беккер К., Инкер Л.А. Скорость клубочковой фильтрации и альбуминурия для выявления и определения стадии острого и хронического заболевания почек у взрослых: систематический обзор. JAMA . 2015 24 февраля. 313 (8): 837-46. [Медлайн].
Springberg PD, Garrett LE Jr, Thompson AL Jr.Фиксированная и воспроизводимая ортостатическая протеинурия: результаты 20-летнего наблюдения. Энн Интерн Мед. . 1982 Октябрь 97 (4): 516-9. [Медлайн].
Уэхара К., Томинага Н., Шибагаки Ю. Ортостатическая протеинурия у взрослых. Клин Почки J . 2014 июн. 7 (3): 327-8. [Медлайн]. [Полный текст].
Надери АС, Рейли РФ. Первичный подход к протеинурии. J Am Board Fam Med . 2008 ноябрь-декабрь.
21 (6): 569-74. [Медлайн].
Дурвасула Р.В., Петерманн А.Т., Хиромура К., Блонски М., Пиппин Дж., Мундель П. и др.Активация местной тканевой ангиотензиновой системы в подоцитах механическим напряжением. Почки Инт . 2004 г., 65 (1): 30-9. [Медлайн].
Еремина В, Баелде HJ, Quaggin SE. Роль VEGF — сигнального пути в клубочках: свидетельство перекрестного взаимодействия между компонентами барьера клубочковой фильтрации. Нефрон Физиол . 2007. 106 (2): p32-7. [Медлайн].
Schlöndorff D, Banas B. Снова о мезангиальной клетке: ни одна клетка не является островом. Дж. Ам Соц Нефрол . 2009 июн.20 (6): 1179-87. [Медлайн].
Бертон С., Харрис К.П. Роль протеинурии в прогрессировании хронической почечной недостаточности. Am J Kidney Dis .
1996, 27 июня (6): 765-75. [Медлайн].
Хладуневич М.А., Троянов С., Калафати Дж. И др. Естественное течение пациента с нефротической мембранозной нефропатией. Clin J Am Soc Nephrol . 2009 6 августа [Medline]. [Полный текст].
Hebert LA, Birmingham DJ, Shidham G, et al.Соотношение протеин / креатинин в моче, полученное методом случайной выборки, не является надежным для оценки суточной протеинурии у отдельных пациентов с системным красной волчанкой, нефритом.
Масани Н., Джавери К.Д., Фишбейн С. Обновленная информация о мембранопролиферативных ГН. Clin J Am Soc Nephrol . 2014 марта 9 (3): 600-8. [Медлайн]. [Полный текст].
Чжан В.
, Фэн Л.Дж., Тэн Ф., Ли Й.Х., Чжан Х, Ран Ю.Г.Частота и риск протеинурии, связанной с недавно одобренными ингибиторами тирозинкиназы рецептора сосудистого эндотелиального фактора роста у онкологических больных: современный метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Эксперт Рев Клин Фармакол . 2020 5. 1-10 марта. [Медлайн].
Jones CA, Francis ME, Eberhardt MS, Chavers B, Coresh J, Engelgau M, et al. Микроальбуминурия у населения США: третье национальное исследование здоровья и питания. Am J Kidney Dis .2002 г., 39 (3): 445-59. [Медлайн].
Брайсон К.Л., Росс Х.Дж., Бойко Э.Дж., Янг Б.А. Расовые и этнические различия в альбуминурии в популяции третьего национального исследования здоровья и питания США (NHANES III): ассоциации с диабетом и уровнем ХБП. Am J Kidney Dis . 2006 ноябрь 48 (5): 720-6. [Медлайн].
webmd.com»> Coresh J, Selvin E, Stevens LA, Manzi J, Kusek JW, Eggers P, et al. Распространенность хронической болезни почек в США. JAMA . 2007, 7 ноября. 298 (17): 2038-47. [Медлайн].Friedman DJ, Kozlitina J, Genovese G, Jog P, Pollak MR. Оценка популяционного риска APOL1 при заболеваниях почек. Дж. Ам Соц Нефрол . 2011 22 ноября (11): 2098-105. [Медлайн].
Ruggenenti P, Perna A, Mosconi L. Протеинурия предсказывает терминальную стадию почечной недостаточности при недиабетических хронических нефропатиях. «Группа итальянских исследований по эпидемиологии в нефрологии» (GISEN). Почки Int Suppl . 1997 декабрь 63: S54-7. [Медлайн].
Hsu CY, Chinchilli VM, Coca S, Devarajan P, Ghahramani N, Go AS и др. Пост-острая травма почек. Протеинурия и последующее прогрессирование заболевания почек: оценка, серийная оценка и последующие последствия в исследовании острой почечной недостаточности (ASSESS-AKI).
JAMA Intern Med . 2020 27 января. [Medline].
Джексон К.Э., Соломон С.Д., Герштейн Х.С. и др. Альбуминурия при хронической сердечной недостаточности: распространенность и прогностическое значение. Ланцет . 2009 15 августа. 374 (9689): 543-50. [Медлайн].
Yuyun MF, Khaw KT, Luben R, Welch A, Bingham S, Day NE и др. Микроальбуминурия, факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний и заболеваемость сердечно-сосудистыми заболеваниями в британском населении: популяционное исследование EPIC-Norfolk. Eur J Cardiovasc Назад Rehabil . 2004 июн.11 (3): 207-13. [Медлайн].
Rein P, Saely CH, Zanolin D, Vonbank A, Drexel H. Альбуминурия достоверно предсказывает сердечно-сосудистые события у пациентов с диабетом 2 типа независимо от исходного состояния коронарной артерии.Европейский журнал сердца.
Доступно по адресу http://eurheartj.oxfordjournals.org/content/34/suppl_1/P5175. Август 2013; Дата обращения: 24 марта 2020 г.
Ruggenenti P, Porrini E, Motterlini N, Perna A, Ilieva AP, Iliev IP, et al. Измеряемый уровень альбумина в моче позволяет прогнозировать сердечно-сосудистый риск у пациентов с нормоальбуминурией и диабетом 2 типа. Дж. Ам Соц Нефрол . 2012 23 октября (10): 1717-24. [Медлайн]. [Полный текст].
Чиу Ю.В., Адлер С.Г., Будофф М.Дж. и др.Кальцификация коронарной артерии и смертность у больных сахарным диабетом с протеинурией. Почки Инт . 2010 17 марта [Medline].
Sandsmark DK, Messé SR, Zhang X, Roy J, Nessel L, Lee Hamm L и др. Протеинурия, но не рСКФ, предсказывает риск инсульта при хроническом заболевании почек: когортное исследование хронической почечной недостаточности.
Инсульт . 2015 Август 46 (8): 2075-80. [Медлайн].
Ix JH, Wassel CL, Stevens LA, Beck GJ, Froissart M, Navis G и др.Уравнения для оценки скорости экскреции креатинина: сотрудничество по эпидемиологии ХБП. Clin J Am Soc Nephrol . 2011 6 января (1): 184-91. [Медлайн].
Viswanathan G, Upadhyay A. Оценка протеинурии. Adv Хроническая болезнь почек . 2011 июл.18 (4): 243-8. [Медлайн].
Methven S, Macgregor MS, Traynor JP, et al. Оценка протеинурии при хронической болезни почек: соотношение белок-креатинин и соотношение альбумин-креатинин. Циферблат нефрола . 2010 17 марта [Medline].
Cirillo M. Оценка скорости клубочковой фильтрации и альбуминурии / протеинурии. Дж Нефрол . 2010 март-апрель. 23 (2): 125-32.
[Медлайн].
Авасаре Р.С., Радхакришнан Дж. Протеинурия как суррогатный маркер почечного исхода: мы еще не достигли цели ?. Почки Инт . 2015 декабрь 88 (6): 1228-1230. [Медлайн]. [Полный текст].
Kee YK, Yoon CY, Kim SJ, Moon SJ, Kim CH, Park JT, et al.Определение оптимального целевого уровня протеинурии при ведении пациентов с гломерулярными заболеваниями с использованием различных определений протеинурии. Медицина (Балтимор) . 2017 ноябрь 96 (44): e8154. [Медлайн]. [Полный текст].
Дэвидсон JA. Ингибиторы SGLT2 у пациентов с диабетом 2 типа и почечной недостаточностью: обзор текущих данных. Постградская медицина . 2019 май. 131 (4): 251-260. [Медлайн].
Фэн Ц., Ву М, Чен З, Ю Икс, Ни З, Чжао И и др.Влияние ингибитора SGLT2 на функцию почек у пациентов с сахарным диабетом 2 типа: систематический обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых исследований.
Инт Урол Нефрол . 2019 Апрель, 51 (4): 655-669. [Медлайн].
Кренский AM, Ingelfinger JR, Grupe WE. Перитонит при детском нефротическом синдроме: 1970-1980 гг. Ам Дж. Дис Детский . 1982 августа 136 (8): 732-6. [Медлайн].
Чепмен С., Таубе Д., Браун З., Уильямс Д.Г. Нарушение трансформации лимфоцитов при минимальном изменении нефропатии в стадии ремиссии. Клин Нефрол . 1982 июл.18 (1): 34-8. [Медлайн].
Рекомендации по пневмококковой вакцине ACIP. Центры по контролю и профилактике заболеваний. Доступно по адресу http://www.cdc.gov/vaccines/hcp/acip-recs/vacc-specific/pneumo.html. 8 сентября 2015 г .; Доступ: 28 апреля 2018 г.
Рузбех Дж., Банихашеми М.А., Гезлоу М. и др. Каптоприл и комбинированная терапия каптоприлом и пентоксифиллином в снижении протеинурии при диабетической нефропатии.
Ren Fail . 2010 января, 32 (2): 172-8. [Медлайн].
Роблес Н.Р., Ромеро Б., де Винуэса Э.Г. и др. Лечение протеинурии лерканидипином в сочетании с препаратами, блокирующими ренин-ангиотензиновую ось. Ren Fail . 2010 января, 32 (2): 192-7. [Медлайн].
Льюис EJ, Hunsicker LG, Bain RP. Влияние ингибирования ангиотензин-превращающего фермента на диабетическую нефропатию. The Collaborative Study Group [опубликованная ошибка появляется в N Engl J Med 1993, 13 января; 330 (2): 152]. N Engl J Med . 1993 г. 11 ноября. 329 (20): 1456-62. [Медлайн].
Giatras I, Lau J, Levey AS. Влияние ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента на прогрессирование недиабетической почечной недостаточности: метаанализ рандомизированных исследований. Группа изучения ингибирования ангиотензин-превращающего фермента и прогрессирующего заболевания почек.
АЛИЗ . 1997 сен 1. 127 (5): 337-45. [Медлайн].
Bakris GL, et al; Исследование переносимости антагонистов минералокортикоидных рецепторов — группа по изучению диабетической нефропатии (ARTS-DN).Влияние Финеренона на альбуминурию у пациентов с диабетической нефропатией: рандомизированное клиническое испытание. JAMA . 2015, 13 сентября. 314 (9): 884-94. [Медлайн].
Поцци С. Лечение IgA нефропатии. Дж Нефрол . 2016 29 февраля (1): 21-5. [Медлайн].
[Рекомендации] Заболевание почек: улучшение глобальных результатов. KDIGO 2012 г. Руководство по клинической практике для оценки и лечения хронической болезни почек. KDIGO. Доступно по адресу http: // kdigo.org / wp-content / uploads / 2017/02 / KDIGO_2012_CKD_GL.pdf. Января 2013; Дата обращения: 24 марта 2020 г.
webmd.com»> Carmines PK, Navar LG. Несопоставимые эффекты блокады Са-канала на афферентные и эфферентные реакции артериол на АНГ II. Am J Physiol . 1989 июн 256 (6, часть 2): F1015-20. [Медлайн].Смит А.С., Тото Р., Бакрис Г.Л. Дифференциальные эффекты блокаторов кальциевых каналов на размерную селективность протеинурии при диабетической гломерулопатии. Почки Инт .1998 Сентябрь 54 (3): 889-96. [Медлайн].
Kohan DE, Pollock DM. Антагонисты эндотелина при диабетической и недиабетической хронической болезни почек. Br J Clin Pharmacol . 2013 Октябрь 76 (4): 573-9. [Медлайн].
Венцель Р.Р., Литтке Т., Куранофф С., Юргенс С., Брук Н., Ритц Э и др. Авозентан снижает выведение альбумина у диабетиков с макроальбуминурией. Дж. Ам Соц Нефрол . 2009 20 марта (3): 655-64. [Медлайн].
de Zeeuw D, Agarwal R, Amdahl M, Audhya P, Coyne D, Garimella T и др.Селективная активация рецепторов витамина D парикальцитолом для снижения альбуминурии у пациентов с диабетом 2 типа (исследование VITAL): рандомизированное контролируемое исследование. Ланцет . 6 ноября 2010 г. 376 (9752): 1543-51. [Медлайн].
de Borst MH, Hajhosseiny R, Tamez H, Wenger J, Thadhani R, Goldsmith DJ. Лечение активным витамином D для уменьшения остаточной протеинурии: систематический обзор. Дж. Ам Соц Нефрол . 2013 24 ноября (11): 1863-71. [Медлайн]. [Полный текст].
Накамура Т., Сато Э., Фудзивара Н. и др. Совместное введение эзетимиба усиливает эффекты питавастатина по снижению протеинурии у пациентов с хроническим заболеванием почек, частично за счет холестерин-независимого действия. Pharmacol Res .
7 августа 2009 г. [Medline].
Bianchi S, Bigazzi R, Caiazza A, Campese VM. Контролируемое проспективное исследование влияния аторвастатина на протеинурию и прогрессирование заболевания почек. Am J Kidney Dis .2003 г., 41 (3): 565-70. [Медлайн].
Vegter S, Perna A, Postma MJ и др. Потребление натрия, ингибирование АПФ и прогрессирование до ТПН. Дж. Ам Соц Нефрол . 2012 23 января (1): 165-73. [Медлайн].
Klahr S, Levey AS, Beck GJ. Влияние ограничения пищевого белка и контроля артериального давления на прогрессирование хронического заболевания почек. Модификация диеты в группе изучения заболеваний почек. N Engl J Med . 1994 31 марта.330 (13): 877-84. [Медлайн].
Робертсон Л., Во Н., Робертсон А. Ограничение белка при диабетической почечной недостаточности.
Кокрановская база данных Syst Rev . 17 октября 2007 г. CD002181. [Медлайн].
Уоллер К.В., Уорд К.М., Махан Дж.Д., Висматт, округ Колумбия. Современные концепции протеинурии. Clin Chem . 1989 Май. 35 (5): 755-65. [Медлайн].
Бертон С., Харрис К.П. Роль протеинурии в прогрессировании хронической почечной недостаточности. Am J Kidney Dis . 1996, 27 июня (6): 765-75. [Медлайн].
Friedman DJ, Kozlitina J, Genovese G, Jog P, Pollak MR. Популяционная оценка риска APOL1 при почечной недостаточности. Дж. Ам Соц Нефрол . 2011 22 ноября (11): 2098-105. [Медлайн]. [Полный текст].
Gorriz JL, Martinez-Castelao A. Протеинурия: выявление и роль в прогрессировании нативной почечной недостаточности. Transplant Rev (Орландо) .
2012 26 января (1): 3-13. [Медлайн].
Shamseddin MK, Knoll GA. Посттрансплантационная протеинурия: подход к диагностике и лечению. Clin J Am Soc Nephrol . 2011 июл.6 (7): 1786-93. [Медлайн].
Шахтер JH. Состав базальной мембраны клубочков и фильтрационный барьер. Педиатр Нефрол . 2011 26 сентября (9): 1413-7. [Медлайн].
Comper WD, Hilliard LM, Nikolic-Paterson DJ, Russo LM. Болезнезависимые механизмы альбуминурии. Am J Physiol Renal Physiol . 2008 г., декабрь 295 (6): F1589-600. [Медлайн].
Inker LA, Astor BC, Fox CH, Isakova T, Lash JP, Peralta CA, et al. Комментарий KDOQI в США к руководству KDIGO по клинической практике 2012 г. по оценке и лечению ХБП. Am J Kidney Dis . 2014 май. 63 (5): 713-35. [Медлайн].
Коднер С. Диагностика и лечение нефротического синдрома у взрослых. Am Fam Врач . 2016 15 марта.93 (6): 479-85. [Медлайн].
Абэ М., Окада К., Маруяма Н., Мацумото С., Маруяма Т., Фудзита Т. и др. Сравнение антипротеинурических эффектов блокаторов кальциевых каналов бенидипина и цилнидипина в сочетании с блокаторами рецепторов ангиотензина у пациентов с артериальной гипертензией и хронической болезнью почек. Заключение эксперта по расследованию наркотиков . 2010 сентября 19 (9): 1027-37. [Медлайн].
24-часовой белок в моче
Определение
24-часовой белок в моче измеряет количество белка, выделяемого с мочой за 24-часовой период.
Альтернативные названия
Белок в моче — 24 часа; Хроническая болезнь почек — белок в моче; Почечная недостаточность — белок в моче
Как проводится анализ
adam.com»> Требуется 24-часовой образец мочи:- В первый день мочиться в туалет, когда вы встаете утром.
- После этого соберите всю мочу в специальный контейнер в течение следующих 24 часов.
- На 2 день помочитесь в контейнер, когда встанете утром.
- Закройте контейнер крышкой.В период сбора храните в холодильнике или прохладном месте.
- Наклейте на контейнер свое имя, дату и время завершения и верните его в соответствии с инструкциями.
Для младенцев: тщательно промойте область вокруг уретры. Откройте пакет для сбора мочи (пластиковый пакет с липкой бумагой на одном конце) и поместите его на младенца. Для мужчин поместите весь пенис в сумку и прикрепите клей к коже. У женщин наденьте сумку на половые губы. Подгузник, как обычно, поверх закрытой сумки.
Эта процедура может занять несколько попыток. Активные младенцы могут двигать сумку, в результате чего подгузник впитывает мочу.
Младенца следует часто проверять и менять сумку после того, как ребенок помочился в сумку. Слейте мочу из пакета в емкость, предоставленную вашим врачом.
Доставьте его в лабораторию или вашему поставщику как можно скорее после завершения.
Как подготовиться к тесту
Ваш врач скажет вам, если необходимо, прекратить прием любых лекарств, которые могут повлиять на результаты теста.
Ряд лекарств может изменить результаты теста. Убедитесь, что ваш врач знает обо всех лекарствах, травах, витаминах и добавках, которые вы принимаете.
Следующее может также повлиять на результаты теста:
- Отсутствие жидкости (обезвоживание)
- Любой вид рентгеновского исследования с красителем (контрастным веществом) в течение 3 дней до анализа мочи
- Жидкость из влагалища, которая попадает в мочу
- Сильный эмоциональный стресс
- Физические нагрузки
- Инфекция мочевыводящих путей
Как будет выглядеть тест
adam.com»> Тест включает только нормальное мочеиспускание и не вызывает дискомфорта.Почему проводится тест
Ваш поставщик медицинских услуг может назначить этот тест, если тесты крови, мочи или визуализации обнаруживают признаки нарушения функции почек.
Чтобы избежать сбора мочи в течение 24 часов, ваш поставщик медицинских услуг может заказать анализ только одного образца мочи (соотношение протеина и креатинина).
Нормальные результаты
Нормальное значение составляет менее 100 миллиграммов в день или менее 10 миллиграммов на децилитр мочи.
Приведенные выше примеры являются общими измерениями результатов этих тестов.Нормальные диапазоны значений могут незначительно отличаться в разных лабораториях. Некоторые лаборатории используют разные измерения или тестируют разные образцы. Поговорите со своим врачом о значении ваших конкретных результатов теста.
Что означают аномальные результаты
Аномальные результаты могут быть вызваны:
- Группа заболеваний, при которых белок, называемый амилоидом, накапливается в органах и тканях (амилоидоз)
- Опухоль мочевого пузыря
- Сердечная недостаточность
- Высокая кровь давление во время беременности (преэклампсия)
- Заболевание почек, вызванное диабетом, высоким кровяным давлением, аутоиммунными заболеваниями, закупоркой почечной системы, некоторыми лекарствами, токсинами, закупоркой кровеносных сосудов или другими причинами
- Множественная миелома
Здоровый у людей может быть уровень белка в моче выше нормы после физических упражнений или обезвоживания.Некоторые продукты могут влиять на уровень белка в моче.
Риски
Тест показывает нормальное мочеиспускание. Рисков нет.
Ссылки
adam.com»> Чау К., Хаттон Х., Левин А. Лабораторная оценка заболевания почек: скорость клубочковой фильтрации, общий анализ мочи и протеинурия. В: Skorecki K, Chertow GM, Marsden PA, Taal MW, Yu ASL, ред. Бреннер и Ректор Почка . 10-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Эльзевьер; 2016: глава 26.Ландри Д.В., Базари Х. Подход к пациенту с почечной недостаточностью.В: Goldman L, Schafer AI, ред. Гольдман-Сесил Медицина . 25-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Эльзевьер Сондерс; 2016: глава 114.
Протеом мочи человека содержит более 1500 белков, в том числе большую часть мембранных белков
Идентификация белков мочи
Нормальная концентрация общего белка в моче очень низкая и обычно не превышает 10 мг / 100 мл в любом отдельном образце (нормальная экскреция белка менее 150 мг / день). Для концентрирования и удаления солей белков мочи использовались различные процедуры подготовки образцов, такие как ультрафильтрация, центрифугирование, разделение с обращенной фазой, диализ, лиофилизация, обогащение белков с помощью аффинной колонки или шариков и осаждение с использованием органических растворителей [9-13, 19-21].
Как показано на рисунке, мы использовали установку ультрафильтрации, потому что она позволяет нам концентрировать и обессоливать образцы мочи стандартизированным способом и минимизировать потерю белка. Кроме того, отсечка по молекулярной массе ультрафильтрационной мембраны составляет 3 кДа, что приводит к удалению низкомолекулярных полипептидов, которых много в образцах мочи человека [22,23]. Используя установку ультрафильтрации, моча была сконцентрирована примерно в 50 раз. Концентрированный белок из единственного образца мочи отделяли с помощью одномерного электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ) и высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой (ВЭЖХ).Мы наносили неочищенные концентраты на одномерный SDS-PAGE (рисунок) и разрезали гель на 14 или 10 частей. Белковые смеси подвергали триптическому расщеплению в геле (подгруппы в геле 1 и в геле 2). Мы также нанесли неочищенные концентраты на новую макропористую колонку с обращенной фазой (колонка с высоким выходом белка mRP-C18), но изначально разрешение было плохим (данные не показаны).
Поэтому мы удалили человеческий сывороточный альбумин из концентратов мочи, используя иммуноаффинную колонку, и нанесли обедненную альбумином белковую смесь на колонку, что привело к хорошему разрешению с 22 фракциями (рисунок).Разделенные белки денатурировали 2,2,2-трифторэтанолом (ТФЭ) [24,25] или мочевиной и тиомочевиной и впоследствии расщепляли, как описано в разделе «Материалы и методы» (ниже; подмножества в растворе 1 и в растворе 2. ). Концентрированный белок мочи из объединенных образцов отделяли с помощью одномерного SDS-PAGE и вырезали на 10 срезов (подмножество пула). Дайджесты из каждого набора обессоливались и концентрировались на обращенно-фазовых C 18 StageTips [26] и анализировались с помощью ЖХ в режиме онлайн в сочетании с МС с электрораспылением.
Обзор процедуры анализа протеома мочи. 1D, одномерный; ВЭЖХ, высокоэффективная жидкостная хроматография; HSA, человеческий сывороточный альбумин; MW, молекулярная масса; ЖХ, жидкостная хроматография; МС, масс-спектрометрия; SDS, додецилсульфат натрия.
Разделение белков в моче с помощью одномерного геля SDS и обращенно-фазовой ВЭЖХ. (a) 150 мкг белка мочи (25 мкг / дорожка) из одного образца и объединенного образца наносили на 4-12% гель Бис-Трис. Гель окрашивали коллоидным кумасси и разрезали на 14 частей (набор в геле 1) или 10 частей (набор в геле 2) для одного образца мочи и разрезали на 10 частей для объединенного образца мочи. (b) В набор Vivapure Anti-HSA Kit наносили 250 мкг белка мочи для истощения сывороточного альбумина. Обедненную альбумином смесью белков растворяли в 6 моль / л мочевины и 1,0% растворе уксусной кислоты и разделяли на колонке с белками mRP-C18 High-Recovery при 80 ° C с использованием линейного многосегментного градиента, как описано в разделе «Материалы и методы». раздел. ВЭЖХ, высокоэффективная жидкостная хроматография; SDS, додецилсульфат натрия.
Для наборов единичных проб мочи градиенты ЖХ продолжались либо 100, либо 140 мин.Масс-спектрометр (LTQ-FTICR) был запрограммирован для выполнения обзорных сканирований всего диапазона масс пептидов, выбора трех наиболее распространенных пептидных сигналов и выполнения SIM-сканирования для измерений с высокой точностью масс в FTICR.
Одновременно со сканированием SIM линейная ионная ловушка фрагментировала пептид, получила спектр МС / МС, а затем изолировала и фрагментировала наиболее часто встречающийся пик в масс-спектре МС / МС с получением спектра MS 3 . На рисунке показан спектр элюированных пептидов мочи.Выбранный пептид измеряли в режиме SIM (рисунок) и фрагментировали (MS 2 ; рисунок). Для второго раунда фрагментации был выбран наиболее интенсивный фрагмент в спектре МС / МС (рисунок). Как видно на рисунке, высокая точность определения массы, низкий уровень фона и дополнительная информация о пептидной последовательности, полученная из спектров MS 3 , позволили идентифицировать пептиды с высокой степенью достоверности. Файлы списка пиков, полученные из фракций в каждой подгруппе, были объединены, и пептидные последовательности были идентифицированы по их тандемным масс-спектрам с использованием вероятностной поисковой машины, а именно Mascot [27].Поиск в базе данных был выполнен по 15 919, 16 238, 16 312 и 12180 МС / МС спектрам в геле 1, в геле 2, в растворе 1 и в растворе 2, соответственно (таблица).
Идентифицированные спектры MS 3 автоматически оценивались с помощью собственного программного обеспечения с открытым исходным кодом MSQUANT [15,28]. Как описано в разделе «Материалы и методы» (ниже), белки были идентифицированы с использованием критериев, соответствующих уровню ложноположительных результатов P = 0,0005, когда были идентифицированы по крайней мере два пептида, и P = 0.001, когда был идентифицирован один пептид. Мы также вручную проверили спектры MS 2 и MS 3 для всех белков, идентифицированных одним пептидом.
Две последовательные стадии масс-спектрометрической фрагментации (MS 3 ). Предшественник пептида DVPNSQPEMVEAVK (; см. Вставку) был выбран для фрагментации из полного сканирования диапазона отношения массы к заряду. Двухзарядный ион-фрагмент y 12 (b) впоследствии был фрагментирован. Характерный образец заряженной направленной фрагментации наблюдается в спектрах MS 3 (c) и подтверждает идентификацию указанного выше пептида.
См. Steen and Mann [65] для введения в секвенирование пептидов и уверенность в идентификации пептидов. МС, масс-спектрометрия.
Таблица 1
Экспериментальные условия и статистика поиска в базе данных четырех отдельных экспериментов с использованием одного образца мочи
В этом подходе пептиды сопоставляются с базой данных, содержащей ориентированные вперед нормальные последовательности и такие же последовательности с обратными аминокислотными последовательностями. При требовании строгих критериев, упомянутых выше, мы не обнаружили ложноположительных результатов по белку. Таким образом, мы заключаем, что наши критерии поиска по существу исключают все ложные срабатывания.
Масс-спектрометр работал в режиме зависимости от данных. Обзорные МС-спектры полного сканирования (от m / z 300 до 1600) были получены на орбитальной ловушке, и наиболее интенсивные ионы (до пяти, в зависимости от интенсивности сигнала) были последовательно изолированы и фрагментированы в линейной ионной ловушке (МС / МС ).Файлы списка пиков, полученные из 10 фракций, обрабатывали отдельно, и пептидные последовательности идентифицировали, как описано выше. Белки были идентифицированы с критериями, соответствующими уровню ложноположительных результатов P = 0,0025 или 1 из 400, что ниже, чем общее количество белков в каждом срезе. Таким образом, независимый анализ 10 срезов позволил нам использовать более низкий порог без ложных срабатываний идентификации, по оценке базы данных приманок. Всего мы идентифицировали 1055 белков из 10 срезов объединенного образца мочи (таблица).
6%) были обнаружены во всех четырех наборах данных, 856 (10,6%) были обнаружены в трех из четырех наборов данных, 2089 (26,0%) были обнаружены в двух из четырех наборов данных, а остальные 4324 (53,8%) были обнаружены только в один из четырех входных наборов данных (рисунок). Перекрытия между наборами данных в геле и наборами данных в растворе были более глубокими, чем между наборами данных в геле и наборами данных в растворе. Значение гидрофобности идентифицированных пептидов в каждой подгруппе рассчитывали с использованием модели Кайта и Дулиттла [30]. При сравнении пептидов, специфичных для геля, и пептидов, специфичных для раствора, значения гидрофобности составляли -0.24 против -0,54, с общей гидрофобностью -0,33 во всех наборах данных. Разница между наборами данных в геле и в растворе не была значительной, но показывает тенденцию для пептидов, идентифицированных только в наборах данных в геле, быть более гидрофобными, чем пептиды, идентифицированные только в наборах данных в растворе.
Сравнивали (a) перекрывающихся белков, (b) молекулярно-массовое распределение и (c) клеточную локализацию. Соотношение белков мембраны, плазматической мембраны, лизосом и внеклеточной области в каждом наборе данных рассчитывалось с использованием BiNGO, как описано в разделе «Материалы и методы». GO, генная онтология.
13, 57050 белковых последовательностей). Как показано на рисунках и в категории клеточных компонентов, термины GO, относящиеся к внеклеточным белкам, таким как внеклеточная область (обнаружено 308 белков), внеклеточное пространство (94) и внеклеточный матрикс (82), были чрезмерно представлены, как и ожидалось.На этапе подготовки образца мы удалили клетки и мусор из мочи центрифугированием, и поэтому термины GO, относящиеся к внутриклеточным белкам, включая клеточные (824), внутриклеточные (442), внутриклеточные органеллы (302), ядро (74) и рибосомы ( 7) были недопредставлены. Однако неожиданно было слишком много терминов GO, относящихся к белкам плазматической мембраны (225) и лизосомным белкам (62). Эти данные свидетельствуют о том, что отшелушенные эпителиальные клетки и клетки крови не являются основным источником белков плазматической мембраны и лизосом, выявленных в нашем исследовании, но подразумевают наличие пути (путей) экскреции, специфичного для этих белков.
Набор идентифицированных белков мочи сравнивали со всем списком записей IPI (IPI_Human, версия 3.13, 57050 белковых последовательностей), и были показаны значительно избыточно представленные и недостаточно представленные термины GO ( P <0,001). Показанное соотношение представляет собой количество белков IPI в моче и целых IPI, аннотированных для каждого термина GO, деленное на количество белков IPI в моче и целых белков IPI, связанных по крайней мере с одним термином аннотации в рамках указанных категорий клеточного компонента GO, молекулярной функции и биологических процессов.GO, генная онтология; IPI, Международный белковый индекс.
Активность сигнального преобразователя (обнаружено 275 белков) была неожиданной, потому что она не была обогащена анализом исследований родственной жидкости организма, протеома плазмы [34].Связывание рецепторов (80) является основной подкатегорией. В частности, связывание фактора роста (24), включая 11 белков, связывающих инсулиноподобный фактор роста, три латентных белка, связывающих трансформирующий фактор роста, и пять рецепторов интерлейкина, было чрезмерно широко представленным. Кроме того, активность трансмембранной рецепторной протеинкиназы (22) и активность трансмембранной рецепторной протеинтирозинфосфатазы (18) также были чрезмерно представлены. Связывание GTP (55) и связывание гуанилового нуклеотида (55) также были расширенными терминами и имели один и тот же набор белков, включая Ras, Rab, Rho, Arf и родственные Ras белки.