Микробиология хеликобактерии – 15.4.2. Хеликобактерии

15.4.2. Хеликобактерии

Классификация

К роду Helicobacter в настоящее время относится до 10 видов микроорганизмов (Helicobacter pylori, Helicobacter heilmannii, Helicobacter mustelae, Helicobacter felis и т.д). Основным возбудителем заболеваний у человека является H. pylori. Определенное значение в патологии имеет H. heilmannii. Считается, что Helicobacter pylori играет существенную роль в патогенезе острого и хронического гастритов, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Кроме того, инфекция Helicobacter pylori является предрасполагающим фактором в развитии рака желудка и лимфоцитарной опухоли желудочно-кишечного тракта (мальтомы).

Морфология

Это грамотрицательные, короткие, извитые S-образные бактерии средних размеров, подвижные, имеют 4-5 жгутиков, лофотрихи (рис. 17). Содержание Г+Ц составляет 35-37%.

Культуральные свойства

Хорошо растут в микроаэрофильных условиях, в аэробных и анаэробных условиях не растут. Температурный оптимум 37°С, не растут при температуре 25-28 и 42°С, хорошо растут на кровяном агаре, на средах, содержащих 10% сыворотки. Не растут на средах, содержащих глицерин, желчные соли и NaCl.

Биохимические свойства

Оксидазо- и каталазоположительны, проявляют выраженную уреазную активность, обладают фосфатазой, образуют H₂S, не свертывают молоко.

Антигенная структура

Имеется О-АГ – ЛПС, Н-АГ, а также поверхностные мембранные белковые АГ (OMP-белки), по которым определяют типоспецифичность возбудителя с помощью моноклональных АТ.

Факторы патогенности

В патогенезе существенное значение имеют адгезины возбудителя, вакуолизирующий цитотоксин (VacA), поражающий эпителий желудка, белок CagA – продукт генов островков патогенности, ферменты супероксиддисмутаза и каталаза.

Резистентность

Характеристика заболевания

Источник инфекции – больные люди.

Патогенез

При пероральном попадании возбудителя большое число бактерий скапливается в антральной части желудка, так как там мало клеток, секретирующих соляную кислоту, что помогает выживанию бактерий на поверхности эпителия. Проникая через слой слизи, хеликобактеры прикрепляются к эпителиальным клеткам (в области межклеточных ходов адгезины микроба связываются с мембранными гликолипидами, компонентами слизи), проникают в железы слизистой оболочки, разрушают слизистый слой и обусловливают контакт желудочного сока со стенкой органа. ЛПС стимулирует выделение ИЛ-8, миграцию нейтрофилов и способствует развитию острого воспаления. Локализация в области межклеточных ходов обусловлена хемотаксисом к местам выхода мочевины и гемина. Под действием фермента уреазы мочевина превращается в аммиак, который повреждает слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Кроме того, аммиак нейтрализует соляную кислоту желудка, способствуя выживанию хеликобактерий.

Клиническая картина

Клинические проявления не отличаются от симптомов гастродуоденитов. Инкубационный период – 7 суток. В острой фазе заболевания отмечается изменение рН желудочного сока, тошнота, рвота, в дальнейшем появляются симптомы язвенного гастродуоденита.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования: биоптаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки.

Бактериоскопический метод. Выявляют бактерии в препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином или акридиновым оранжевым. В фазовоконтрастном микроскопе определяют характерную подвижность.

Бактериологический метод. Производят посев материала на кровяной агар с амфотерицином, культивируют в термостате 5-7 суток при 37° в микрофильных, аэробных и анаэробных условиях. Вид микроба определяют по характерной морфологии и виде колоний, способности к росту только в микроаэрофильных условиях, по наличию оксидазной и уреазной активности.

Лечение

Для лечения используются схемы, включающие ингибиторы желудочной секреции (блокатор протонного насоса омепразол), антибиотики (кларитромицин, азитромицин, доксициклин, метронидазол), коллоидный субцитрат висмута (Де-нол).

Профилактика

Специфическая профилактика не разработана.

studfiles.net

Хеликобактериозы

Хеликобактериозы

Сем.Campylobacteriaceae.

Род Helicobacter

Виды: 1. H. pylori

2. H. fennelliae; H. cinae; — вызывает проктиты и проктоколиты у гомосексуалистов.

3. H. mustelae-выделен от харьков

Пилорический хеликобактериоз:

Условно-патогенными для человека являются H. pylori (НР), с ними связывают развитие у человека:

1. хронически активного гастрита и гастродуаденита;

2. язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки;

3. аденокарциномы или MALTомы (лимфомы) желудка низкой степени злокачественности (S. Czinn, 1997)

Согласно Международной классификации гастроэнтерологических заболеваний (Сиднейская система) выделяют 3 основные формы гастритов:

1. аутоиммунный

2. рефлюкс-гастрит

3. хеликобактерный гастрит – 93,7% случаев. Доказано австралийскими учеными: паталогоанатомом Warren J. и гастроэнтерологом – Marshall B. в 1983 г. В 2005 г. – Нобелевская премия в области медицины.

Морфология.

НР- ГР -, мелкие , тонкие, изогнутые в виде спирали м/о. В старых культурах приобретают овоидную форму. В мазках располагаются попарно в виде «летящей ласточки». НР являются лофотрихами или монотрихами (имеют от 1 до 6 жгутиков). Малоподвижны на твердых питательных средах, но обладают высокой подвижностью в густой слизи, покревающей слизистую оболочку желудка и duodenum. Считают, что подвижность обеспечивает бактериям выживаемость в кислой среде и способность противостоять перильстальтическим волнам в желудке, «штопорообразное движение»необходимо для внедрения в стенку желудка и кишечника.

Тип питания: хемоорганотрофы

Тип дыхания: микроаэрофил

Культуральные св-ва.

Для роста требуются микроаэрофильные условия или повышенное содержание в атмосфере СО2 (капнофилы). Оптимальная температура роста — 37ºC. Требовательны к питательным средам, растет на сложных пит. средах с добавлением лошадиной или эмбриональной телячьей сыворотки, растворимого крахмала, активированного угля, низкомолекулярного гидролизата белков и антибиотиков для подавления роста сопутствующей микрофлоры. Культивируют на печеночных средах, кровяном агаре, лучше растут на «шоколадном агаре», дают зону слабого гемолиза. Образуют мелкие блестящие S-колонии на твердых питательных средах.

Биохимические св-ва.

Слабо выражены.

1. Не обладают сахаролитической активностью (не разлагают глюкозу)

2. Протеолитические св-ва

— образуют сероводород

— не свертывают молоко

3. не восстанавливают нитраты в нитриты

4. выделяют высокоактивный фермент уреазу — разлагают мочевину (уреазоположительные) – важнейший родовой признак.

5. образуют липазы (в том числе фосфолипазу А)

6. каталазо- и оксидазоположительные

7. алкогольдегидрогеназу

Антигенная структура.

Широкий набор видовых АГ. Штаммоспецифичных и протективный АГ не имеют.

Факторы патогенности.

1. – факторы адгезивности и инвазивности: жгутики, извитая форма, поверхностные структуры НР обеспечивают прикрепление к клеткам эпителия желудка и 12-перстной кишки в результате специфического рецепторного взаимодействия.

Благодаря своей спиралевидной форме и наличию жгутиков, обеспечивающих активную локомацию (подвижность) и способность к агрегации, НР

— легко проникают из просвета пищеварительного тракта через вязкий и гидрофобный слизистый секрет

— прикрепляются к эпителиальным клеткам

— проходят в крипты и железы желудка, располагаясь в области межклеточных контактов, проникают внутрь слизистой оболочки.

Тесный контакт НР с поверхностью эпителиоцитов желудка приводит к повреждению микроворсинок, деструкции микротрубочек и микрофиламентов.

2. ФЕРМЕНТЫ.

   1. уреаза

а)способствует выживанию НР в неблагоприятной среде желудка ;

б) за счет разложения мочевины образуется аммиак (при хеликобактериозе его концентрация увеличивается в 4 раза, у здоровых людей только следы аммиака), который нарушает энергетический метаболизм в эпителии желудка

в) уменьшает толщину слизистого слоя, что

г) снижает протективные св-ва защитного барьера, что в сво. очередь

д) приводит к деструкции эпителия

е) сама уреаза непосредственно влияет на эпителиальные клетки и вызывает их некроз.

2. протеиназа действует на слизистую оболочку желудка и duodenum. В этой слизи содержится

— лицин, образующий а) водонерастворимое покрытие внутренней поверхности желудка, которое в б) вязкой растворимой форме содержится в его просвете и выполняет функцию механической защиты слизистой оболочки

— высокомолекулярные гликопротеины, обеспечивающие вязкость, высокую адгезивность и формирование водонерастворимых гелей на слизистой оболочке, а гель в свою очередь выполняет свою функцию защиты при поступлении в него

— бикарбонатов, выделяющихся эпителием желудка и duodenum.

За счет этих в-в образуется функциональное образование – «бикарбонатно-слизистый барьер» или «предэпителиальная защита».

Протеиназа вызывает деградацию муцина и гликопротеинов, что приводит к повреждению слизистой только в участках прикрепления бактерий, нарушается нормальное функционирование «бикарбонатно-слизистый барьера», обнажается апикальная поверхность эпителиоцитов, снижается местная защита слизисой, что делает клетки более доступными воздействию пепсина, соляной к-ты, желчных к-т, ферментов. Это вызывает прогрессирование деструктивных процессов и предрасположенность к язвообразованию, способствует продвижению НР к поверхности эпителиальных клеток.

3. фосфолипаза – действует на фосфолипиды мембран эпителиоцитов, что приводит к образованию в них дефектов и проникновению в клетки и в глубь слизистых оболочек разлагающих в-в и самих м/о.

4. каталаза, разрушая Н2О2, препятствует перевариванию м/о внутри полиморфноядерных лейкоцитов, в результате НР длительно сохраняются в нейтрофилах слизистой желудка и 12-перстной кишки, куда они проникают . Каталаза обладает антифагоцитарной активностью.

3. Токсины.

А) Эндотоксин – ЛПС –общетоксическое действие.

В) Экзотоксины.

1. вакуолизирующий токсин (Vak A) – белковый токсин – обладает цитотоксичностью, вызывает вакуолизацию эпителиальных клеток и повреждает межклеточные контакты. Выделен у всех штаммов НР, обладает высокой иммуногенностью. В сыворотке крови появляются антитела к этому токсину.

2. цитотоксический – Cad A протеин, выделяют высокоиммунный штамм.

— обладает цитотоксическим действием на эпителиальные клетки слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки.

— кроме того, он индуцирует образование ИЛ-8, который стимулирует местное воспаление, увеличивает секрецию соматостатина и гастрина, что приводит к еще большему повышению кислотности желудочного сока.

— этот белок, считают, определяет воздействие бактерий на слизистую желудка.

Источники инфекции.

1. человек – больной или носитель.

В развивающихся странах уже

— к 10-летнему возрасту носителями НР являются 100% детей.

— высока степень инфицированности населения мегаполисов, подвергающихся постоянной антропогенной нагрузке.

— сейчас отмечается семейный характер пилорического хеликобактериоза.

2. животные – домашние кошки и собаки.(H. Malaty, 1997)

Механизм заражения:

1. фекально-оральный

2. орально-оральный

Пути заражения:

1. пищевой – через инфицированные человеком пищевые продукты.

2. контактный – прямой и контактно-бытовой:

— при поцелуях

— пользовании одной посудой

— от матери, берущей пустышку-соску в рот, а затем вкладывающей ее в рот своему грудному ребенку.

3. возможна передача ребенку с молоком матери.

Не всегда инфицирование организма приводит к развитию НР-ассоциированых заболеваний. Необходимы определенные условия:

1. для развития НР-ассоциированной патологии у детей:

— генетическая предрасположенность

— интеркуррентные заболевания

— неблагоприятные факторы окружающей среды.

В результате можно говорить о снижении защитных сил организма. Со стороны м/о — высокая вирулентность НР.

2. для развития НР-ассоциированной патологии у взрослых:

— генетическая предрасположенность

— социально-экономические условия (скученность, нарушение питания)

— неблагоприятные факторы окружающей среды (весна, осень)

— высокая вирулентность НР

как следствие хронический активный гастрит и гастродуаденит, развитие язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки; аденокарциномы или MALTомы (лимфомы).

Лабораторная диагностика.

1. Бактериоскопический в сочетании с гистологическим методами (метод «отпечатков») – обнаружение НР в биоптатах слизистой оболочки, взятых не менее чем из 3 участков желудка (2 – из тела, 1 – из антрального отдела), окраска их по Романовскому-Гимзе, толуидиновым синим, Вартину-Старри, Генте, импрегнация серебром.

2. Бактериологический – рост НР из биоптатов слизистой оболочки с последующей идентификацией.

3. Уреазный тест – в основе которого лежит оценка прироста концентрации аммиака в воздухе ротовой полосте после приема мочевины нормального изотопного состава. Имеются тест-системы «Хелпилтест» и «Хелик-тест»

4. 13С-дыхательный тест – выявление в выдыхаемом воздухе изотопа 13С и 14С, которые образуются в желудке при расщеплении выпитой меченной ими мочевиной под действием уреазы НР

5. ПЦР

6. Серологический метод – установлена тесная связь между образованием колонии НР на слизистой оболочки желудка и наличием в крови специфических АТ. Установлена корреляция между конц. АТ и степени тяжести инфекции. Уровни специф. АТ снижаются после фармакотерапии. Обычно определяются АТ класса Ig G, Ig M, Ig A. Повышенное содержание Ig свидетельствует о следующем:

— ≥ Ig M – ранняя стадия инфекции НР

— ≥ Ig G – инфекция в активной стадии

— ≥ Ig A – хроническая стадия инфекции

Используют также тест-систему Helico blot 2.0 – для определения АТ; используют в качестве АГ бактериальные лизаты – по интенсивностьи окрашивания полос.

Экспресс тест – Хеликобактер пилори спот – в 1 капле крови – определяют специфические АТ.

7. Уреазный биопсивный тест – определении уреазной активности НР в биоптатах слизистой оболочки.

Лечение.

Направлено на эридикацию = уничтожение НР вегетативных и кокковых форм в слизистой желудка и 12-перстной кишки.

1. этиологическая «тройная» терапия

2. пробиотики

3. Восстановление моторики верхних отделов пищеварительного тракта, коррекция внутрижелудочной кислотности, функции слизеобразования, нарушения кишечного всасывания и т.д.

4. Санация ротовой полости, т. к. в глубоких десневых каналах могут сохранятся НР.

Профилактика.

1. обследование всех членов семьи, санация при обнаружении НР.

2. Тщательное соблюдение всех санитарных норм – от личной гигиены до обработки посуды

3. В домашних условиях выделение каждому члену семьи отдельного набора посуды и столовых приборов.

studfiles.net

Протей. Хеликобактер

Бактерии рода Proteus морфологически не отличаются от кишечной палочки. Это небольшие полиморфные грамотрицательные палочки подвижные. Спор и капсул не образуют. Факультативные анаэробы. Растут на простых питательных средах. На бульоне дают помутнение, а на плотных средах — колонии средней величины, полупрозрачные. Характерны ползучий рост в виде голубовато-серого налета и гнилостный запах. При посеве в конденсационную воду на дно пробирки со скошенным агаром протей быстро покрывает всю его поверхность (метод Шукевича). Микроб обладает хорошо выраженными протеолитическими свойствами: разжижает желатин, свернутую сыворотку, свертывает молоко, расщепляет мочевину, образует сероводород, индол, аммиак. Разлагает глюкозу, мальтозу, сахарозу и другие углеводы с образованием кислоты и газа.

Бактерии рода Proteus широко распространены во внешней среде. Они встречаются в почве, воде, воздухе, кишечнике человека и животных. Относятся к гнилостным условно-патогенным микробам. Могут вызывать у человека различные гнойные заболевания: нагноение ран, воспаление среднего уха, перитониты, пиелонефриты, циститы, пищевые отравления, сепсис и др.

Для выделения бактерий рода Proteus производится посев исследуемого материала по методу Шукевича. Изучают ферментативные свойства, определяют наличие О- и Н-антигенов в реакции агглютинации на стекле сначала с поливалентными, а затем и с монорецепторными сыворотками.

Профилактические мероприятия сводятся к строгому соблюдению санитарно-гигиенического режима.

Для лечения используют неомицин, колимицин и другие антибиотики.

Свойства хеликобактерий

 

Таксономия.К родуHelicobacterв настоящее время относится до 10 видов микроорганизмов (Helicobacter pylori,Helicobacter heilmannii,Helicobacter mustelae,Helicobacter felis и т.д). Основным возбудителем заболеваний у человека является H. pylori. Определенное значение в патологии имеетH. heilmannii.Считается, чтоHelicobacter pyloriиграет существенную роль в патогенезе острого и хронического гастритов, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Кроме того, инфекцияHelicobacter pyloriявляется предрасполагающим фактором в развитии рака желудка и лимфоцитарной опухоли желудочно-кишечного тракта (мальтомы).

Морфологические свойства.Это грамотрицательные, короткие, извитые S-образные бактерии средних размеров, подвижные, имеют 4-5 жгутиков, лофотрихи. Содержание Г+Ц составляет 35-37%.

Культуральные свойства.Хорошо растут в микроаэрофильных условиях, в аэробных и анаэробных условиях не растут. Температурный оптимум 37°С, не растут при температуре 25-28 и 42°С, хорошо растут на кровяном агаре, на средах, содержащих 10% сыворотки. Не растут на средах, содержащих глицерин, желчные соли и NaCl.

Биохимические свойства.Оксидазо- и каталазоположительны, проявляют выраженную уреазную активность, обладают фосфатазой, образуют H₂S, не свертывают молоко.

Антигены.Имеется О-АГ – ЛПС, Н-АГ, а также поверхностные мембранные белковые АГ (OMP-белки), по которым определяют типоспецифичность возбудителя с помощью моноклональных АТ.

Характеристика заболевания

Источником, или естественным резервуаром, хеликобактериоза является зараженный человек. Это доказал еще в 1985 г. B.Marshall, у которого развился острый гастрит, после того, как он выпил раствор с культурой H.pylori, полученной от 65 летнего больного хроническим гастритом и содержащий 106 бактерий. В первые 6-8 дней после заражения («инкубационный период») никаких клинических проявлений заболевания не обнаруживалось, на 7 день появились диспептические явления и боли. Эндоскопические признаки гастрита определялись уже на 10-ый день после заражения. Факт заражения, при приеме культуры H.pylori были подтверждены при последующих исследованиях как у людей, так и у ряда лабораторных животных (особенно показательны исследования с заражением человекообразных обезьян). Однако заселение слизистой оболочки желудка H.pylori не всегда вызывает развернутую картину хронического гастрита. Иногда заболевание носит смазанный (латентный) характер, или принимает характер носительства. Носительство у практически здоровых людей возможно связано с заселением их слизистой оболочки слабовирулентными штаммами, или уменьшением количества рецепторов на поверхности желудка, способствующих адгезии микроорганизма.

Пути передачи H.pylori окончательно не установлены. Обнаружение специфических антител к H.pylori в крови новорожденных детей позволило предположить трансплацентарный путь передачи хеликобактерной инфекции, однако, в дальнейшем, эта гипотеза не нашла подтверждения. Снижение титров специфических антител с возрастом ребенка подтверждает проницаемость плацентарного барьера только для этих антител.

Наиболее изученным и определенным является контактный путь передачи инфекции от человека к человеку. Чаще всего инфицирование хеликобактериями происходит между членами семьи орально-оральным путем или через предметы личной гигиены. Это подтверждается тем фактом, что H.pylori были выделены из зубного налета. Чаще инфицируют друг друга супруги, подтверждая предположение B.Marshall о передаче инфекции через поцелуи. Детям родители передают HP также при поцелуях, или при пользовании одним и столовыми приборами, «облизывании» сосок грудных младенцев и т.п. Как правило, все члены семьи бывают поражены одним и тем же штаммом H.pylori. Однако имеются сообщения, что в одной семье могут одновременно персистировать до 2 штаммов микроорганизмов у разных супругов. При этом передача микроорганизма происходит чаще от родителей к детям, чем обмен между братьями и сестрами. В семьях, имеющих 2 и более детей, распространенность и степень инвазии HP выше, а стойкая эрадикация наступает только в случае лечения всех членов семьи от H.pylori.

Чаще заражаются HP инфекцией гастроэнтерологи, эндоскописты, стоматологи имеющие, по роду работы дело с зараженными людьми. На основании наших исследований передача хеликобактериоза может осуществляться и через эндоскопическую аппаратуру и зонды, с помощью которых проводятся различные инвазивные исследования органов пищеварения, при их недостаточной обработке

Имеется указания ряда авторов, что H.pylori могут переносить некоторые домашние животные собаки или кошки, в организме которых были найдены микроорганизмы, очень сходные по своему строению с H.pylori, однако сведений, позволяющих считать хеликобактериоз зоонозной инфекцией недостаточно.

Влияние каких-либо природных факторов на распространенность HP инфекции не замечено. Заболевания хеликобактериозом не носят выраженный сезонный характер, хотя отмечается увеличение обращения детей школьного возраста с жалобами на боли в животе, связанные с HP-инфекцией, в осенне-весенний период.

При пероральном попадании возбудителя большое число бактерий скапливается в антральной части желудка, так как там мало клеток, секретирующих соляную кислоту, что помогает выживанию бактерий на поверхности эпителия. Проникая через слой слизи, хеликобактеры прикрепляются к эпителиальным клеткам (в области межклеточных ходов адгезины микроба связываются с мембранными гликолипидами, компонентами слизи), проникают в железы слизистой оболочки, разрушают слизистый слой и обусловливают контакт желудочного сока со стенкой органа. ЛПС стимулирует выделение ИЛ-8, миграцию нейтрофилов и способствует развитию острого воспаления. Локализация в области межклеточных ходов обусловлена хемотаксисом к местам выхода мочевины и гемина. Под действием фермента уреазы мочевина превращается в аммиак, который повреждает слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Кроме того, аммиак нейтрализует соляную кислоту желудка, способствуя выживанию хеликобактерий.

Клинические проявления не отличаются от симптомов гастродуоденитов. Инкубационный период – 7 суток. В острой фазе заболевания отмечается изменение рН желудочного сока, тошнота, рвота, в дальнейшем появляются симптомы язвенного гастродуоденита.

 

Лабораторная диагностика

 

Материал для исследования: биоптаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки.

Фиброгастроскопия с взятием биопсии с пораженных участков слизистой. Требует правильного забора, соблюдения правил транспортировки материала и зависит от качества гистологического обследования. Хорошо применять для первичного обследования с целью установления характера поражения слизистой и места локализации. После проведения курса антибактериальной терапии применение фиброгастроскопии нежелательно — доказано что даже при самой тщательной обработке зонда могут сохранится хеликобактерии

Бактериоскопический метод.Выявляют бактерии в препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином или акридиновым оранжевым. В фазовоконтрастном микроскопе определяют характерную подвижность.

Бактериологический метод.Производят посев материала на кровяной агар с амфотерицином, культивируют в термостате 5-7 суток при 37° в микрофильных, аэробных и анаэробных условиях. Вид микроба определяют по характерной морфологии и виде колоний, способности к росту только в микроаэрофильных условиях, по наличию оксидазной и уреазной активности.

Серологический методоснован на определении уровня антител, которые вырабатываются в ответ на хеликобактерии:

1.  для определения острой стадии — определение IgA

2.  для определения наличия инфекции — определение IgG

Определение уровня иммуноглобулинов является наиболее достоверным (специфичность 91%, чувствительность 97%), наиболеедоступным(кровь взятая натощак), наименееинвазивным методом диагностики хеликобактерной инфекциии наиболее приемлемым для контроля излеченности, т.к при проведении ФЭГДС после лечения возможно повторное инфицирование.

 

Лечение

На протяжении истории изучения инфекции H. pylori учеными и исследователями многих стран отрабатывались различные подходы к терапии воспалительных заболеваний верхних отделов пищеварительного тракта, ассоциированных с этим микроорганизмом. Изучалась эффективность использования как монокомпонентной схемы леченияантибиотиками, так и комбинациипрепаратовразных групп. В результате этих исследований было показано, что одниантибактериальныепрепараты не способны оказывать свое воздействие в условиях обитания H. pylori (в кислой среде желудка), для эффективного применения других больным было необходимо принимать очень большие дозыпрепарата, а при применении третьих быстро развивалась резистентность микроорганизма к используемым лекарственным средствам. Тем не менее к настоящему времени разработаны такиесхемы лечения, которые способны эффективно бороться с H. pylori, добиваясь его полной эрадикации (уничтожения) в короткие сроки, и достигать длительной ремиссии заболевания. Для эффективноголечения гастроэнтерологических заболеваний, ассоциированных с хеликобактерной инфекцией, необходимо применение специфическихантибактериальных препаратов. Учитывая ту экологическую нишу, которую занимают эти микроорганизмы, проводимаяантибактериальнаятерапия должна отвечать некоторым требованиям, а именно:1.Используемыепрепаратыдолжны эффективно воздействовать на Н. pylori;

2.Антибиотики должны быть устойчивыми к действию агрессивной кислой среды желудка;

3.Они должны обладать способностью проникать под слой желудочной слизи;

4.Иметь локальное действие в области слизистой оболочки;

5.Быстро выводиться из организма, не накапливаясь в других тканях и органах.

Хеликобактерии, являясь микроаэрофилами, способны нормально функционировать только в привычной среде обитания – на поверхности слизистой оболочки под слоем слизи. Вне организма они крайне чувствительны практически к любому агрессивному воздействию (алкоголь, атмосферный воздух, антибактериальныепрепараты, действующие на грамотрицательную флору). Однако желудочная слизь, изменения рН среды в просвете желудка и непосредственной близости от Н. pylori во многом меняют действие лекарственных препаратов. Эти условия значительно сужают круг препаратов, используемых длялечения хеликобактериоза.Проблемалечения хеликобактериозау взрослых, по сведению некоторых авторов, решается назначением короткого курса (3–4 дня) комбинации антибиотиков.

Для лечения используются схемы, включающие ингибиторы желудочной секреции (блокатор протонного насоса омепразол), антибиотики (кларитромицин, азитромицин, доксициклин, метронидазол), коллоидный субцитрат висмута (Де-нол).

 

Профилактика

Для эффективной борьбы с Helicobacter pylori недостаточно использования только различных, пусть даже и очень эффективных лекарственных препаратов и схем лечения. Необходимо проводить профилактические мероприятия, направленные на предупреждение инфицирования и реинфицирования слизистой оболочки Helicobacter pylori. В первую очередь больные и окружающие их люди должны соблюдать правила личной гигиены:

1.  непосредственно перед едой мойте руки;

2.  не пользуйтесь общей немытой посудой;

3.  не откусывайте, не облизывайте, а лучше отломите, отрежьте;

4.  не пробуйте из одной ложки или чашки, а лучше отложите, отлейте в другую посуду или откажитесь;

5.  пользуйтесь индивидуальными средствами личной гигиены;

6.  не дарите свои поцелуи каждому, цените себя. Защитите любимых от инфекций, которые, может быть, живут в вас.

7.  прекратите как активное, так и пассивное курение и злоупотребление алкоголем.

Диагностику и лечение инфекции Helicobacter pylori следует проводить не только у больного с желудочно-кишечной патологией, но и среди всех членов его семьи, а по возможности и у людей, с которыми тесно общается больной.

studfiles.net

Кампилобактер, хеликобактер и кампилобактериозы, геликобактериоза

Кампилобактер

Род Campylobacter (Campyla — изогнутые) относится к группе аэробных или микроаэрофильных подвижных спирально изогнутых грамотрицательных бактерий. Наибольшее значение в патологии человека имеет С. jejunii. Реже встречаются С. fetus и С. coli. Ранее отнесенный к данному роду С. pylori выделен в род Helicobacter.

Морфология и физиология

Тонкие вибриоидные клетки, имеющие один или более витков спирали. Споры не образуют. Подвижные, совершают характерное винтовое движение с помощью одиночных жгутиков, расположенных на одном или обоих частях клетки. Хемоорганотрофы не требовательны к питательному субстрату, не сбраживают углеводы. Для получения энергии используют аминокислоты, а не углеводы. Оксидазоположительные и уреазоотрицательные. Пигментов не образуют.

Антигены

Кампилобактеры содержат О-, К- и Н-антигены. В настоящее время выделено свыше 50 О-серогрупп кампилобактеров.

Патогеность и патогенез

К факторам вирулентности относят жгутики и муциназу, способствующие проникновению в слизистую оболочку тонкой кишки. Обладают умеренной пенетрационной активностью. Их токсичность связана с секрецией энтеротоксинов (функциональные блокаторы), нарушающими водно-солевой обмен через образование цАМФ, аналогично энтеротоксинам Е. coli и V. cholerae. При разрушении кампилобактеров освобождается эндотоксин. Описаны цитотоксины, вызывающие гибель чувствительных клеток. После колонизации участка тонкой кишки они могут проникнуть в кровяное русло, вызывая генерализованную инфекцию, чаще у иммунодефицитных лиц. В патогенезе кампилобактериозных энтеритов преобладают явления диареи или дизентериеподобных состояний. При этом С. jejunii и С. fetus вызывают энтериты у людей. С. jejunii встречается также при абортах овец. С.fetus чаще встречается у пожилых людей с иммунодефицитами, а также при некишечных формах кампилобактериоза, вызывая поражение паренхиматозных органов и даже сепсис.

Иммунитет

При кампилобактериозе наблюдается гуморальный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают выраженными протективными свойствами.Экология и эпидемиология. Источником инфекции являются больные животные и люди, от которых кампилобактеры попадают в пищевые продукты (мясо, молоко) и воду. Передача инфекции происходит алиментарным путем. Возможен и контактно-бытовой путь. В окружающей среде при 4°-10°С сохраняются около недели. Зарегистрированы пищевые, молочные и водные вспышки кампи-лобактериоза, чаще у детей.

Хеликобактер

Род Helicobacter ранее относился к роду Кампилобактер, однако в настоящее время выделен в самостоятельный род.

Морфология и физиология

H.pylori представляют собой мелкие грамотрицательные палочки, лофотрихи, микроаэрофилы. Растут на сложных питательных средах. Продуцируют каталазу и оксидазу, которые используют для идентификации этих бактерий.

Патогенность и патогенез

К факторам вирулентности хеликобактеров относят их способность к движению и участие в проникновении в слизистую оболочку. Фермент уреаза при разрушении мочевины до аммиака и СO2 приводит к образованию газовой оболочки, защищающей от кишечного сока. Хеликобактеры продуцируют фосфолипазы, разрушающие фосфолипиды. Их токсичность связана с цитотоксином, действующим на эпителиальные клетки, токсином, нарушающим межклеточные контакты, и с ЛПС. Кроме того, на поверхности клеток образуются белки теплового шока, которые рассматривают как реакцию на стресс. Это приводит к аутоиммунному воспалению и образованию язв в желудке и двенадцатиперстной кишке. Н. pylori выделяются в 80% случаев язвенных гастритов.

Экология и эпидемиология

Является представителем нормальной микрофлоры животных. Пути передачи человеку окончательно не выяснены. По-видимому, люди заражаются алиментарным путем.

Кампилобактериозы и геликобактериозы

Инфекционные заболевания, которые вызывают бактерии рода Campylobacter, получили общее название кампилобактериозы. Они имеют острое течение, сопровождающиеся лихорадкой, поражением желудка и кишечника и с каждым годом встречаютсявсе чаще. Среди 13 видов кампилобактерий главнейшими являются: Campylobacter jejuni, C.coli. В 1991 p. выделен отдельный вид Helicobacter pylori. Его стабильно обнаруживают у больных язвой желудка, гастрит и дуоденит. Этим заболеванием дали общее название геликобактериоза.Кроме энтеритов и энтероколитов, этих частых кампилобактериоз, значительно реже встречаются септицемии, эндокардиты, перикардиты, менингиты, поражения мочеполовой системы. У беременных женщин возможны аборты, преждевременные роды, инфицирование новорожденных во время родов.В связи с тем, что клиническая картина этих заболеваний не имеет характерных симптомов и подобная вызванных другими бактериями, лабораторные исследования приобретают важное значение. Для диагностики широко используют микроскопический, бактериологический и несколько меньше серологический методы.Материалом для исследования служит кровь, ликвор, стул или содержимое прямой кишки, взятый с помощью ректальных тампонов, плацентарная и околоплодной жидкости, содержимое абсцессов, биоптаты слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки. Исследуют также воду, молоко, другие продукты питания, смывы с предметов и т.п..

Бактериоскопический метод

Бактериоскопический метод используется для быстрой идентификации кампило-и геликобактерий. Тонкие мазки из фекалий и других клинических материалов фиксируют на огне, окрашивают фуксином Пфейфера течение 10-20 с и промывают водой. Поскольку для окраски других бактерий требуется 3-5 мин, то в течение 10-20 сек успевают зафарбуватись только кампилобактерии. Особенно четко их типовые формы обнаруживают при окраске кристаллическим фиолетовым. Под обычным световым микроскопом они выглядят как тонкие, спирально изогнутые бактерии, имеющиеодин полный завиток, С-и S-образную форму или напоминают крылья чайки. Helicobacter pylori имеет несколько большие размеры. Можно также использовать фазово-контрастную микроскопию суспензии стула в бульоне для культивирования бруцелл или жидкой среде Мюллера-Хинтон (МПБ с крахмалом и казеином). При этом выявляют не только типичные особенности морфологии кампилобактерий, но и очень характерную их подвижность.

Бактериологический метод

Оптимальные результаты получают, когда материал берут в транспортное тиогликолевой среду и в нем доставляют в лабораторию. Если посевы делают не позднее 24 ч, транспортную среду не используют.Для выделения кампило-и геликобактерий чаще применяют среду Бутцлера (до кровяного агара добавляют цефоперазон — ЗО мг / л, рифампицин — 10 мг / л и амфотерицин В — 2 мг / л). Антибиотики подавляют рост сопутствующей микрофлоры. Посевы атмосфере 10% С02пры температуре 25 ° С, 37 ° С и 42 ° С в течение 24-72 час.Кампилобактерии образуют два типа колоний: 1) правильной круглой формы с ровными краями диаметром 1-2 мм, блестящей выпуклой поверхностью, прозрачные, гомогенные, 2) неправильной округлой формы диаметром 2-8 мм, бесцветные или светло-серого цвета, прозрачные, напоминают капли воды.При посеве количественным методом рост колоний, как правило, обнаруживают на третьем и четвертом квадрантах, но нужно тщательно осматривать всю чашку, поскольку они могут вырасти только на первом квадранте в окружении колоний сопутствующей фекальной микрофлоры.Идентификация колоний кампило-и геликобактерий не вызывает трудностей для опытного бактериолога. Типичные колонии исследуют микроскопически, окрашивая препараты по Граму. В мазках возбудители имеют вид тонких, изогнутых, чаще спиралевидных клеток, могут иметь один и более витков и достигать в длину до 8 мкм. У культур, которые выращивали в течение 72 ч и дольше, клетки могут приобретать кокоподибнои «формы, что может привести к ошибкам в идентификации. Затем выделяют чистую культуру, которую идентифицируют по ряду признаков: выделение оксидазы, каталазы, уреазы, рост при температуре 25 ° С , 37 ° С и 42 ° С, гидролиз гиппурат, восстановления нитратов, чувствительность к цефалотину.Для серотипирования кампило — и геликобактерий используют реакцию агглютинации со стандартными диагностическими сыворотками и суспензией прогретых культур. Хорошие результаты типирования получены также в реакциях коаглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Установлено 50 серотипов С. jejuni и 20 серотипов С. coli, но их количество из года в год растет. Еще более точные результаты серотипирования получены при использовании метода иммуноферментного анализа. В частности, разработана надежная тест-система для определения антигенов Н pylori в биоптатах слизистой оболочки желудка и кишечника.Серологический метод диагностики заболеваний проводят значительно реже. Он играет важную роль при массовых эпидемиологических обследованиях в ряде стран американского и африканского континентов. В Украине такие исследования пока не проводились.Для выявления антител можно использовать практически все серологические тесты. Но предпочтение отдают реакции непрямой имунофлуоресценциита метода иммуноферментного анализа. Можно применяемые в реакции обычной агглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Имеются сообщения об использовании иммуноблоттинга и радиоиммунного метода для определения антител к C.jejuni и Н.руиоги. Они имеют исключительно высокую чувствительность, но довольно дороги и широкого потребления не приобретут.

vse-zabolevaniya.ru

3.Кампилобактерии, хеликобактерии

Род Campylobacter (Campyla — изогнутые) относится к группе аэробных или микроаэрофильных подвижных спирально изогнутых грамотрицательных бактерий. Наибольшее значение в патологии человека имеет С. jejunii. Реже встречаются С. fetus и С. coli. Ранее отнесенный к данному роду С. pylori выделен в род Helicobacter.

Морфология и физиология.Тонкие вибриоидные клетки, имеющие один или более витков спирали. Споры не образуют. Подвижные, совершают характерное винтовое движение с помощью одиночных жгутиков, расположенных на одном или обоих частях клетки. Хемоорганотрофы не требовательны к питательному субстрату, не сбраживают углеводы. Для получения энергии используют аминокислоты, а не углеводы. Оксидазоположительные и уреазоотрицательные. Пигментов не образуют.

Антигены.Кампилобактеры содержат О-, К- и Н-антигены. В настоящее время выделено свыше 50 О-серогрупп кампилобактеров.

Патогеность и патогенез.К факторам вирулентности относят жгутики и муциназу, способствующие проникновению в слизистую оболочку тонкой кишки. Обладают умеренной пенетрационной активностью. Их токсичность связана с секрецией энтеротоксинов (функциональные блокаторы), нарушающими водно-солевой обмен через образование цАМФ, аналогично энтеротоксинам Е. coli и V. cholerae. При разрушении кампилобактеров освобождается эндотоксин. Описаны цитотоксины, вызывающие гибель чувствительных клеток. После колонизации участка тонкой кишки они могут проникнуть в кровяное русло, вызывая генерализованную инфекцию, чаще у иммунодефицитных лиц. В патогенезе кампилобактериозных энтеритов преобладают явления диареи или дизентериеподобных состояний. При этом С. jejunii и С. fetus вызывают энтериты у людей. С. jejunii встречается также при абортах овец. С.fetus чаще встречается у пожилых людей с иммунодефицитами, а также при некишечных формах кампилобактериоза, вызывая поражение паренхиматозных органов и даже сепсис.

Иммунитет. гуморальный иммунный ответ.

Источником инфекции являются больные животные и люди, от которых кампилобактеры попадают в пищевые продукты (мясо, молоко) и воду. Передача инфекции происходит алиментарным путем. Возможен и контактно-бытовой путь. В окружающей среде при 4°-10°С сохраняются около недели. Зарегистрированы пищевые, молочные и водные вспышки кампи-лобактериоза, чаще у детей.

Род Helicobacter

Морфология и физиология.H.pylori представляют собой мелкие грамотрицательные палочки, лофотрихи, микроаэрофилы. Растут на сложных питательных средах. Продуцируют каталазу и оксидазу, которые используют для идентификации этих бактерий.

Патогенность и патогенез.К факторам вирулентности хеликобактеров относят их способность к движению и участие в проникновении в слизистую оболочку. Фермент уреаза при разрушении мочевины до аммиака и СO2 приводит к образованию газовой оболочки, защищающей от кишечного сока. Хеликобактеры продуцируют фосфолипазы, разрушающие фосфолипиды. Их токсичность связана с цитотоксином, действующим на эпителиальные клетки, токсином, нарушающим межклеточные контакты, и с ЛПС. Кроме того, на поверхности клеток образуются белки теплового шока, которые рассматривают как реакцию на стресс. Это приводит к аутоиммунному воспалению и образованию язв в желудке и двенадцатиперстной кишке. Н. pylori выделяются в 80% случаев язвенных гастритов.

Экология и эпидемиология.Является представителем нормальной микрофлоры животных. Пути передачи человеку окончательно не выяснены. По-видимому, люди заражаются алиментарным путем.

Кампилобактериозы и геликобактериозы

Инфекционные заболевания, которые вызывают бактерии рода Campylobacter, получили общее название кампилобактериозы. Они имеют острое течение, сопровождающиеся лихорадкой, поражением желудка и кишечника и с каждым годом встречаются все чаще. Среди 13 видов кампилобактерий главнейшими являются: Campylobacter jejuni, C.coli. В 1991 p. выделен отдельный вид Helicobacter pylori. Его стабильно обнаруживают у больных язвой желудка, гастрит и дуоденит. Этим заболеванием дали общее название геликобактериоза.Кроме энтеритов и энтероколитов, этих частых кампилобактериоз, значительно реже встречаются септицемии, эндокардиты, перикардиты, менингиты, поражения мочеполовой системы. У беременных женщин возможны аборты, преждевременные роды, инфицирование новорожденных во время родов.В связи с тем, что клиническая картина этих заболеваний не имеет характерных симптомов и подобная вызванных другими бактериями, лабораторные исследования приобретают важное значение. Для диагностики широко используют микроскопический, бактериологический и несколько меньше серологический методы.Материалом для исследования служит кровь, ликвор, стул или содержимое прямой кишки, взятый с помощью ректальных тампонов, плацентарная и околоплодной жидкости, содержимое абсцессов, биоптаты слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки. Исследуют также воду, молоко, другие продукты питания, смывы с предметов и т.п..

Бактериоскопический метод используется для быстрой идентификации кампило-и геликобактерий. Тонкие мазки из фекалий и других клинических материалов фиксируют на огне, окрашивают фуксином Пфейфера течение 10-20 с и промывают водой. Поскольку для окраски других бактерий требуется 3-5 мин, то в течение 10-20 сек успевают зафарбуватись только кампилобактерии. Особенно четко их типовые формы обнаруживают при окраске кристаллическим фиолетовым. Под обычным световым микроскопом они выглядят как тонкие, спирально изогнутые бактерии, имеющие один полный завиток, С-и S-образную форму или напоминают крылья чайки. Helicobacter pylori имеет несколько большие размеры. Можно также использовать фазово-контрастную микроскопию суспензии стула в бульоне для культивирования бруцелл или жидкой среде Мюллера-Хинтон (МПБ с крахмалом и казеином). При этом выявляют не только типичные особенности морфологии кампилобактерий, но и очень характерную их подвижность.

Бактериологический метод

Оптимальные результаты получают, когда материал берут в транспортное тиогликолевой среду и в нем доставляют в лабораторию. Если посевы делают не позднее 24 ч, транспортную среду не используют.Для выделения кампило-и геликобактерий чаще применяют среду Бутцлера (до кровяного агара добавляют цефоперазон — ЗО мг / л, рифампицин — 10 мг / л и амфотерицин В — 2 мг / л). Антибиотики подавляют рост сопутствующей микрофлоры. Посевы атмосфере 10% С02пры температуре 25 ° С, 37 ° С и 42 ° С в течение 24-72 час.Кампилобактерии образуют два типа колоний: 1) правильной круглой формы с ровными краями диаметром 1-2 мм, блестящей выпуклой поверхностью, прозрачные, гомогенные, 2) неправильной округлой формы диаметром 2-8 мм, бесцветные или светло-серого цвета, прозрачные, напоминают капли воды.При посеве количественным методом рост колоний, как правило, обнаруживают на третьем и четвертом квадрантах, но нужно тщательно осматривать всю чашку, поскольку они могут вырасти только на первом квадранте в окружении колоний сопутствующей фекальной микрофлоры.Идентификация колоний кампило-и геликобактерий не вызывает трудностей для опытного бактериолога. Типичные колонии исследуют микроскопически, окрашивая препараты по Граму. В мазках возбудители имеют вид тонких, изогнутых, чаще спиралевидных клеток, могут иметь один и более витков и достигать в длину до 8 мкм. У культур, которые выращивали в течение 72 ч и дольше, клетки могут приобретать кокоподибнои «формы, что может привести к ошибкам в идентификации. Затем выделяют чистую культуру, которую идентифицируют по ряду признаков: выделение оксидазы, каталазы, уреазы, рост при температуре 25 ° С , 37 ° С и 42 ° С, гидролиз гиппурат, восстановления нитратов, чувствительность к цефалотину.Для серотипирования кампило — и геликобактерий используют реакцию агглютинации со стандартными диагностическими сыворотками и суспензией прогретых культур. Хорошие результаты типирования получены также в реакциях коаглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Установлено 50 серотипов С. jejuni и 20 серотипов С. coli, но их количество из года в год растет. Еще более точные результаты серотипирования получены при использовании метода иммуноферментного анализа. В частности, разработана надежная тест-система для определения антигенов Н pylori в биоптатах слизистой оболочки желудка и кишечника.Серологический метод диагностики заболеваний проводят значительно реже. Он играет важную роль при массовых эпидемиологических обследованиях в ряде стран американского и африканского континентов. В Украине такие исследования пока не проводились.Для выявления антител можно использовать практически все серологические тесты. Но предпочтение отдают реакции непрямой имунофлуоресценциита метода иммуноферментного анализа. Можно применяемые в реакции обычной агглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Имеются сообщения об использовании иммуноблоттинга и радиоиммунного метода для определения антител к C.jejuni и Н.руиоги. Они имеют исключительно высокую чувствительность, но довольно дороги и широкого потребления не приобретут.

Билет 29

studfiles.net

Хеликобактерии

Введение

Среди многочисленных факторов возникновения хронических воспалительных заболеваний верхних отделов пищеварительного тракта в настоящее время одно из основных мест занимает инфекционный.

В течение длительного времени считалось, что слизистая оболочка желудка практически стерильна. Бактерии, попадающие в желудок вместе с пищевыми массами, слюной в большом количестве (105 в 1 мл), быстро погибают под воздействием соляной кислоты, лизоцима и иммуноглобулина. Было также известно, что при повышении рН желудочного содержимого на поверхности слизистой оболочки желудка наблюдается рост микроорганизмов. Однако наличие микробов считалось не причиной, а следствием гипохлоргидрии. Различные представители микрофлоры часто выделялись из некротических масс дна язв, но их значение в этиологии и патогенезе язвенной болезни не признавалось. Некоторые исследователи допускали возможность микробной природы возникновения острого гастрита, но предпочтение отдавали микроорганизмам, поражающим желудок гематогенным путем.

В 1893 г G.Bizzozero, а спустя 3 года H.Salomon впервые описали спиральные микроорганизмы, располагающиеся в толще слизи и на поверхности слизистой оболочки желудка кошек и собак, которых они назвали «желудочными спириллами». Присутствие «спирилл» на поверхности слизистой оболочки желудка человека подтвердили в своих работах многие ученые. Однако, в 1954 году E.D.Palmer, исследовал 1040 желудочных операционных биопсий (не применяя серебрения) и не нашел спиралевидных организмов. После этого он сделал вывод, что «желудочные спириллы» попадают на поверхность слизистой оболочки желудка через рот и размножаются только на регенерирующих участках эпителия. С тех пор извитые микроорганизмы на слизистой оболочке желудка уже не привлекали внимания исследователей и описывались в литературе в виде курьезных наблюдений.

С начала 60-х годов стала стремительно развиваться фиброволоконная эндоскопия, появилась возможность производить прицельную биопсию из измененных участков слизистой оболочки. H.W. Steer в 1975 году вновь описал обнаруженные им у больного гастритом спиралевидные организмы, находящиеся в тесном контакте со слизистой оболочкой антрального отдела желудка. Однако выделить и культивировать их ему не удалось.

Переломный момент во взглядах на природу воспалительных заболеваний верхних отделов пищеварительного тракта произошел после опубликования в 1983 г. австралийскими учеными B.J. Marshall и J.R. Warren результатов своих исследований. Эти исследователи сумели выделить и культивировать спиралевидные микроорганизмы со слизистой оболочки желудка больного, страдающего гастритом. Дальнейшие исследования свойств открытого ими микроорганизма позволили отнести его к роду Campylobacter по ряду сходных с представителями этого рода свойств. Новый микроорганизм был обнаружен на поверхности слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта (другие представители этого рода обитают на поверхности слизистой оболочки тонкой или толстой кишки). Новый микроорганизм, который первоначально получил название CLO (Campylobacter Like Organism), отвечал всем постулатам Коха, для признания его причиной развития воспалительной реакции слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки

Новый микроорганизм был включен в международную таксономию бактерий в 1985 году под именем Campylobacter pyloridis. Позднее, в 1987 году, он был переименован в Campylobacter pylori. Выделение этого микроорганизма доказало несостоятельность теории о стерильности слизистой оболочки желудка. Однако его значение в патогенезе пептических заболеваний вызывало определенный скептицизм среди ученых.

Проводимые, в дальнейшем, многочисленные исследования показали, что Campylobacter pylori значительно отличается по своим свойствам от других представителей рода Campylobacter. В 1989 году Goodwin C.S. с соавт. продемонстрировали, что эта бактерия генетически не принадлежит к роду Campylobacter и назвали ее Helicobacter pylori по особенностям роста in vivo, по общим принципам культивации и по месту локализации.

Свойства хеликобактерий

Таксономия . КродуHelicobacter внастоящеевремяотноситсядо 10 видовмикроорганизмов (Helicobacter pylori, Helicobacter heilmannii, Helicobacter mustelae, Helicobacter felis ит.д). Основным возбудителем заболеваний у человека являетсяH . pylori . Определенное значение в патологии имеетH . heilmannii . Считается, что Helicobacter pylori играет существенную роль в патогенезе острого и хронического гастритов, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Кроме того, инфекция Helicobacter pylori является предрасполагающим фактором в развитии рака желудка и лимфоцитарной опухоли желудочно-кишечного тракта (мальтомы).

Морфологические свойства. Это грамотрицательные, короткие, извитые S-образные бактерии средних размеров, подвижные, имеют 4-5 жгутиков, лофотрихи. Содержание Г+Ц составляет 35-37%.

Культуральные свойства. Хорошо растут в микроаэрофильных условиях, в аэробных и анаэробных условиях не растут. Температурный оптимум 37°С, не растут при температуре 25-28 и 42°С, хорошо растут на кровяном агаре, на средах, содержащих 10% сыворотки. Не растут на средах, содержащих глицерин, желчные соли и NaCl.

Биохимические свойства. Оксидазо- и каталазоположительны, проявляют выраженную уреазную активность, обладают фосфатазой, образуют H₂ S, не свертывают молоко.

Антигены. Имеется О-АГ – ЛПС, Н-АГ, а также поверхностные мембранные белковые АГ (OMP-белки), по которым определяют типоспецифичность возбудителя с помощью моноклональных АТ.

Характеристика заболевания

Источником, или естественным резервуаром, хеликобактериоза является зараженный человек. Это доказал еще в 1985 г. B.Marshall, у которого развился острый гастрит, после того, как он выпил раствор с культурой H.pylori, полученной от 65 летнего больного хроническим гастритом и содержащий 106 бактерий. В первые 6-8 дней после заражения («инкубационный период») никаких клинических проявлений заболевания не обнаруживалось, на 7 день появились диспептические явления и боли. Эндоскопические признаки гастрита определялись уже на 10-ый день после заражения. Факт заражения, при приеме культуры H.pylori были подтверждены при последующих исследованиях как у людей, так и у ряда лабораторных животных (особенно показательны исследования с заражением человекообразных обезьян). Однако заселение слизистой оболочки желудка H.pylori не всегда вызывает развернутую картину хронического гастрита. Иногда заболевание носит смазанный (латентный) характер, или принимает характер носительства. Носительство у практически здоровых людей возможно связано с заселением их слизистой оболочки слабовирулентными штаммами, или уменьшением количества рецепторов на поверхности желудка, способствующих адгезии микроорганизма.

Пути передачи H.pylori окончательно не установлены. Обнаружение специфических антител к H.pylori в крови новорожденных детей позволило предположить трансплацентарный путь передачи хеликобактерной инфекции, однако, в дальнейшем, эта гипотеза не нашла подтверждения. Снижение титров специфических антител с возрастом ребенка подтверждает проницаемость плацентарного барьера только для этих антител.

Наиболее изученным и определенным является контактный путь передачи инфекции от человека к человеку. Чаще всего инфицирование хеликобактериями происходит между членами семьи орально-оральным путем или через предметы личной гигиены. Это подтверждается тем фактом, что H.pylori были выделены из зубного налета. Чаще инфицируют друг друга супруги, подтверждая предположение B.Marshall о передаче инфекции через поцелуи. Детям родители передают HP также при поцелуях, или при пользовании одним и столовыми приборами, «облизывании» сосок грудных младенцев и т.п. Как правило, все члены семьи бывают поражены одним и тем же штаммом H.pylori. Однако имеются сообщения, что в одной семье могут одновременно персистировать до 2 штаммов микроорганизмов у разных супругов. При этом передача микроорганизма происходит чаще от родителей к детям, чем обмен между братьями и сестрами. В семьях, имеющих 2 и более детей, распространенность и степень инвазии HP выше, а стойкая эрадикация наступает только в случае лечения всех членов семьи от H.pylori.

Чаще заражаются HP инфекцией гастроэнтерологи, эндоскописты, стоматологи имеющие, по роду работы дело с зараженными людьми. На основании наших исследований передача хеликобактериоза может осуществляться и через эндоскопическую аппаратуру и зонды, с помощью которых проводятся различные инвазивные исследования органов пищеварения, при их недостаточной обработке

Имеется указания ряда авторов, что H.pylori могут переносить некоторые домашние животные собаки или кошки, в организме которых были найдены микроорганизмы, очень сходные по своему строению с H.pylori, однако сведений, позв

mirznanii.com

занятие 6 Представители родов Campylobacter и Helicobacter

Представители родов Campylobacter и Helicobacter.

Грамотрицательные микроаэрофилы этих двух родов — мелкие, подвижные, не образующие спор, изогнутые (S- образные или похожие на крыло чайки) палочковидные бактерии. Виды, составляющие род Helicobacter, в том числе H.pylori — возбудитель язвенной болезни человека, выделены из рода Campylobacter.

Род Campylobacter

Этот род включает 13 видов спиральных бактерий, имеющих один и более завитков. Кампилобактеры — подвижные, обладающие полярными жгутиками (или жгутиком) и винтообразным движением, микроорганизмы. Они не ферментируют и не окисляют углеводы, капрофилы и микроаэрофилы , т.е. требуют повышенной концентрации СО₂и пониженной — О₂.

Род включает виды, патогенные для человека и теплокровных животных. Заболевания, ими вызываемые — кампилобактериозы — острые кишечные заболевания, протекающие с поражением желудочно — кишечного тракта. Кампилобактеры часто выделяют из кишечника, ротовой полости и органов мочеполовой системы теплокровных.

Выделяют группу C.jejuni (включает этот вид, а также C.coli, C.lari) или термофильных кампилобактерий. Они отличаются высоким температурным оптимумом роста (+42⁰С).

Среди мезофильных кампилобактерий с оптимумом роста при +37⁰С существенную роль в патологии человека имеет C.fetus (вызывает артриты, менингиты, васкулиты, аборты), а также имеется ряд условно — патогенных видов (C.concisus и C.sputorum — в ротовой полости, C.fennelliae, C.cinaedi и C.hyointestinalis — в толстом кишечнике).

Культуральные свойства.Для кампилобактеров нужны специальные газовые смеси для создания микроаэрофильных условий, рН — 7,0-7,2, мезофильные условия (+42⁰С — для термофилов, +37⁰С — для остальных). Используют специальные питательные среды (мясные, печеночные, кровяные) с добавлением селективных антибиотиков. Для получения более чистых проб для посевов (чаще исследуют копрофильтраты!) можно использовать фильтрацию через мембранные фильтры с диаметром пор 0,65 мкм. На плотных средах образуют два типа колоний — “расползающиеся” с неровными краями или блестящие выпуклые с ровными краями, колонии мелкие.

Биохимические свойства.Инертны к углеводам, редуцируют нитраты, оксидаза — положительны, энергию получают за счет аминокислот и трикарбоновых кислот. Дифференциация видов по биохимическим свойствам основана нагидролизе гиппурата (C.jejuni и C.coli), чувствительности кналидиксовой кислоте (C.jejuni и C.lari), образовании сероводорода и др.

Антигенная структура.Кампилобактеры имеют О- , Н- и К- антигены. Основное значение для серотипирования имеют термостабильные О- антигены.

Эпидемиологические особенности.Кампилобактеры распространены у различных видов млекопитающих и птиц. Основной путь передачи — пищевой. Характерна преимущественно летняя сезонность.

Основные патогенетические факторы.Кампилобактеры характеризуются высокой адгезивной и инвазивной активностью, быстрой колонизацией верхних отделов тонкого кишечника. Важнейшими факторами адгезии являются жгутики и специфические поверхностные адгезины. У этих бактерий имеется эндотоксин, термолабильный энтеротоксин.

Клинические проявления— энтероколит.

Лабораторная диагностика.Микроскопический метод — окраска 1% водным раствором основного фуксина 10- 20 секунд — выявляют S- образные короткие цепочки, “крылья чайки”. Основной метод — бактериологический — посев испражнений. Культуры идентифицируют по совокупности признаков.

Helicobacter pylori.

Язвенная болезнь — заболевание, которое характеризуется наличием язвенного дефекта в слизистой желудка или двенадцатиперсной кишке. Открытие H.pylori обусловило переворот в представлениях об этиологии, патогенезе, лечении и профилактике язвенной болезни. Язвенная болезнь практически в 100% ассоциирована с хеликобактером пилори. Существенную роль имеют также стрессовые факторы и психологические особенности больных, а также генетические факторы в развитии болезни.

Морф. и культ. свойства— аналогичны Campylobacter. Предпочитает шоколадный агар.

Биохимические свойства.Имеет уреазу, оксидаза- и каталаза- положителен.

Антигенные свойства.Имеет О- и Н- антигены.

Патогенез поражений.Хеликобактеры проникают через слой слизи (чаще в антральной части желудка и двенадцатиперсной кишке), прикрепляются к эпителиальным клеткам, проникают в крипты и железы слизистой оболочки. Антигены бактерий (в первую очередь ЛПС) стимулируют миграцию нейтрофилов и вызывают острое воспаление. Хеликобактеры локализуются в области межклеточных ходов, что обусловлено хемотаксисом на мочевину и гемин (разрушение гемоглобина эритроцитов в микроциркуляторном русле). Под действием уреазы хеликобактеров мочевина расщепляется до аммиака, с действием которого связано повреждение слизистой оболочки желудка и двенадцатиперсной кишки. Многие ферменты (муциназа, фосфолипаза и др.) также могут стимулировать нарушения целостности слизистых.

К факторами патогенностиH.pylori в первую очередь относят факторы колонизации (адгезию, подвижность), факторы персистенции и факторы, вызывающие заболевание. Ключевые факторы в тропизме и патогенности H.pylori включают механизмы адгезии и секреции бактериальных токсинов. Представлены доказательства ведущей роли Lewis B антигена как рецептора для адгезии. Кроме них имеют значение муцины желудка и сульфатиды слизистой желудка. Выявлен белок Bab A возбудителя (адгезин), который позволяет микроорганизму связываться с групповым антигеном крови Lewis B, присутствующим на поверхности клеток эпителия желудка. Другими факторами патогенности являются cag A (цитотоксин- ассоциированный ген) и vac A (вакуолизирующий цитотоксин). Штаммы, экспрессирующие эти маркеры вирулентности, относятся к штаммам первого типа, которые ассоциированы с повышенным ульцерогенным и воспалительным потенциалом, в отличии от штаммов второго типа, не имеющих этих факторов.

Присутствие всех трех факторов (Bab A, cag A, vacA) является существенным для проявления патогенных свойств H.pylori (триплет — позитивные штаммы). Повреждающее действие на слизистую может быть связано как с прямым действием бактериальных токсинов, так и с опосредованным влиянием через иммунную систему. Длительная персистенция возбудителя связана с рядом механизмов, позволяющих преодолевать защитные барьеры слизистой, и способностью формирования кокковых, не обладающих патогенным потенциалом, форм.

H.pylori не всегда приводит к развитию язв. болезни, однако при язвенной болезни этот возбудитель выявляют постоянно. Факторы, определяющие ульцерогенность H.pylori, усиленно изучаются.

Лаб. Диаг-адолжна быть комплексной, основанной на нескольких тестах. Методы выявления могут быть инвазивными (связанными с необх-тью взятия биоптата слизистой) и неинв-ми (косвенными).

Основные методы выявления H.pylori в биоптатах слизистой.

1.Микроскопические методы (окраска гематоксилином — эозином, акридиновым оранжевым, по Граму, водным фуксином, инпрегнация серебром; фазово — контрастная микроскопия с определением подвижности).

2.Определение уреазной активности.

3.Выделение и идентификация возбудителя на плотных средах (чаще кровяных). Посевы осуществляют на кровяной агар, кровяной агар с амфотеррицином, эритрит — агар с амфотеррицином. Культивируют 5-7 суток при 37^о С в микроаэрофильных, аэробных и анаэробных условиях. Принадлежность определяют по морфологии микроорганизмов и их колоний, винтообразной подвижности, росту в микроаэрофильных условиях и отсутствию роста в аэробных и анаэробных условиях и при температурах +25 и +42^оС, по наличию оксидазной, каталазной и уреазной активности.

4.Выявление антигенов возбудителя в ИФА.

5.ПЦР- диагностика — наиболее чувствительный и специфичный тест.

Среди неинвазивных методов — “дыхательный тест”, ИФА для выявления IgG и IgA — антител.

Лечениекомплексное, с применением методов санации (эррадиации возбудителя). Применяют Де- НОЛ (коллоидный субцитрат висмута), ампициллин, трихопол (метронидазол) и др.

studfiles.net