Содержание

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ)

Основные факты
  • Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) – третья причина смерти по всем мире, от которой в 2019 г. умерло 3,23 млн человек. [1]
  • Более 80% этих случаев смерти приходятся на долю стран с низким и средним уровнем дохода (СНСД).
  • ХОБЛ вызывает стойкие и прогрессирующие респираторные симптомы, к которым относятся одышка, кашель и/или выделение мокроты.
  • Причиной развития ХОБЛ является хроническое воздействие вредных газов и мелкодисперсных частиц в сочетании с индивидуальными факторами, в том числе обстоятельствами, влияющими на развитие легких в детстве, а также генетическими факторами.
  • Важными факторами риска развития ХОБЛ являются воздействие табачного дыма, загрязнение воздуха в помещениях, а также вдыхание пыли, дыма и химических веществ на рабочем месте.

Для замедления прогрессирования симптомов и уменьшения частоты обострений необходимы ранняя диагностика и лечение, включая помощь в отказе от курения.

Что такое ХОБЛ?

ХОБЛ – распространенное, предотвратимое и поддающееся лечению хроническое заболевание легких, от которого страдают как мужчины, так и женщины во всем мире.

Поражение мелких дыхательных путей в легких приводит к нарушению  входящего и выходящего воздушного потока. Сужение просвета дыхательных путей является следствием ряда процессов. Могут иметь место частичное разрушение тканей легкого, облитерация дыхательных путей мокротой, воспалительный процесс и отек слизистой оболочки дыхательных путей.

Иногда для обозначения ХОБЛ используют термины «эмфизема» или «хронический бронхит». Как правило, понятие «эмфизема» означает разрушение мелких воздушных полостей легкого, которыми заканчиваются дыхательные пути. Хронический бронхит – это хронический кашель с выделением мокроты, вызванный воспалением дыхательных путей.

У ХОБЛ и астмы есть ряд общих симптомов (кашель, свистящее дыхание и одышка), и оба заболевания могут протекать параллельно.

Воздействие ХОБЛ на качество жизни

Распространенные симптомы ХОБЛ начинают проявляться в среднем возрасте и включают в себя:

  • одышку или затрудненное дыхание;
  • хронический кашель, часто с выделением мокроты; и/или
  • утомляемость.

По мере прогрессирования ХОБЛ больному становится все труднее выполнять нормальные повседневные действия, часто вследствие одышки. Связанные с этим снижение производительности труда и бытовые ограничения, а также расходы на лечение приводят к значительному финансовому бремени.

Во время обострений симптомы ХОБЛ становятся намного более тяжелыми, в связи с чем больным может требоваться дополнительное лечение на дому или госпитализация для оказания экстренной медицинской помощи. Тяжелые обострения могут угрожать жизни больного.

Часто у людей, страдающих ХОБЛ, отмечаются сопутствующие заболевания, такие как сердечно-сосудистые заболевания, остеопороз, нарушения опорно-двигательной системы, рак легкого, депрессия и тревожные расстройства.

Причины ХОБЛ

Для ХОБЛ характерно постепенное развитие, часто в результате воздействия комбинации факторов риска:

  • вдыхание табачного дыма при активном и пассивном курении;
  • профессиональное ингаляционное воздействие пыли, дыма или химических веществ;
  • загрязнение воздуха в помещениях: в странах с низким и средним уровнем дохода при приготовлении пищи или для отопления часто применяются топливо на основе биомассы (древесина, навоз, пожнивные остатки) или уголь, с чем связан высокий уровень воздействия дыма в жилых помещениях;
  • особенности первых лет жизни, например нарушения внутриутробного развития, недоношенность, а также частые или тяжелые респираторные инфекции в детском возрасте, препятствующие полноценному росту и развитию легких;
  • астма в детском возрасте; и/или
  • редкое генетическое нарушение – дефицит альфа-1-антитрипсина – может привести к развитию ХОБЛ в раннем возрасте.

Снижение бремени ХОБЛ

ХОБЛ не поддается излечению, однако ранняя диагностика и лечение очень важны и могут помочь замедлить прогрессирование симптомов и снизить риск обострений.

Болезнь можно заподозрить при наличии характерных симптомов, и для подтверждения диагноза проводятся функциональные дыхательные пробы, называемые спирометрией, которые позволяют измерить работу легких. В странах с низким и средним уровнем дохода часто возможности для проведения спирометрии отсутствуют, в результате чего заболевание может остаться недиагностированным.

Больные ХОБЛ могут принять ряд мер для улучшение своего общего состояния и сдерживания прогрессирования заболевания:

  • прекращение курения – лицам с ХОБЛ следует обеспечить помощь в отказе от курения;
  • регулярная физическая активность; и
  • вакцинация против пневмонии, гриппа и коронавирусной инфекции.

Для облегчения симптомов и снижения интенсивности обострений могут назначаться ингаляционные препараты. Существует множество различных ингаляционных препаратов с разным механизмом действия, некоторые из которых могут быть комбинированными.

Некоторые ингаляционные препараты способствуют расширению дыхательных путей; они могут назначаться как на регулярной основе в целях предупреждения или смягчения симптомов, так и для облегчения симптомов во время сильных обострений. Иногда для снижения воспаления тканей легких в комбинации с этими препаратами назначаются ингаляционные кортикостероиды.

Использование ингаляционных препаратов требует правильной техники, и в некоторых случаях применяются так называемые спейсерные устройства, позволяющие более эффективно доставлять препарат в дыхательные пути. Во многих странах с низким и средним уровнем дохода доступ к ингаляционным препаратам ограничен; так, в 2019 г. ингаляционный сальбутамол имелся в наличии в лечебных учреждениях первичного звена только в половине стран с низким уровнем дохода [2].

Нередко обострения бывают спровоцированы респираторной инфекцией; в этих случаях в дополнение к ингаляционным препаратам или небулайзерам по мере необходимости могут назначаться антибиотики и/или пероральные стероидные препараты.

Людям, живущим с ХОБЛ, следует предоставлять информацию об их заболевании, необходимом лечении и правилам оказания самопомощи, что поможет им вести максимально активную и здоровую жизнь. 

Стратегия ВОЗ по профилактике и контролю  ХОБЛ

Проблема ХОБЛ отражена в Глобальном плане действий ВОЗ по профилактике неинфекционных заболеваний (НИЗ) и борьбе с ними и в Повестке дня Организации Объединенных Наций в области устойчивого развития на период до 2030 г.

ВОЗ предпринимает ряд мер для расширения диагностики и лечения ХОБЛ.

Для помощи в борьбе с НИЗ на уровне первичной медико-санитарной помощи в условиях ограниченных ресурсов ВОЗ разработала комплекс основных мер борьбы с неинфекционными заболеваниями. Этот комплекс включает в себя протоколы для оценки, диагностики и ведения хронических респираторных заболеваний (астмы и хронической обструктивной болезни легких), а также модули, касающиеся консультирования по вопросам здорового образа жизни, включая отказ от курения и самопомощь.

«Реабилитация 2030» – это новый стратегический подход, призванный способствовать приоритетному развитию и укреплению реабилитационных услуг в рамках систем здравоохранения. В настоящее время в рамках этой инициативы ВОЗ разрабатывает комплекс мероприятий по реабилитации, который кроме прочего включает в себя легочную реабилитацию при ХОБЛ.

Снижение воздействия табачного дыма крайне важно как для первичной профилактики ХОБЛ, так и в контексте ведения больных. Прогрессу в этой области способствует Рамочная конвенция по борьбе против табака, а также такие инициативы ВОЗ, как MPOWER и mTobacco Cessation.

К числу других действий в сфере профилактики относится разработка Набора инструментов для обеспечения чистой энергии в быту (CHEST), который направлен на продвижение чистых и безопасных бытовых энергетических технологий и содействие разработке политики, способствующей внедрению чистых источников энергии в быту на местном, программном и национальном уровнях.

Глобальный альянс по борьбе с хроническими респираторными болезнями

Глобальный альянс по борьбе с хроническими респираторными болезнями (GARD) содействует работе ВОЗ по профилактике и контролю хронических респираторных заболеваний. GARD представляет собой широкий добровольный альянс национальных и международных организаций и учреждений, работающих над достижением общей цели по уменьшению глобального бремени хронических респираторных болезней.  

Полезно знать о ХОБЛ (kols)

Факты о хронической обструктивной болезни лёгких (ХОБЛ) (kols)

По подсчётам около 370 000 человек в Норвегии страдает от ХОБЛ. Предполагается, что целых 280 000 из них не знают о своей болезни. ХОБЛ это болезнь, которая стремительно прогрессирует во всём мире и к 2020 ожидается, что именно эта болезнь будет третьей в списке причин смертности в мире.

Что такое ХОБЛ?

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) характеризуется прогрессирующим ухудшением функции легких. Это ведёт к вынужденному усилению дыхательных движений и ощущению одышки. Наблюдается хроническое сужение дыхательных путей и дыхание становится тяжёлым. Кроме того, типичными симптомами болезни являются свист в груди, кашель и отхаркивание мокроты. Симптомы ухудшаются при физической активности. При серьёзной степени заболевания становится тяжело дышать даже в спокойной обстановке.

Кто может заболеть ХОБЛ?

Курение табака является основной причиной ХОБЛ, и ею объясняется два из трёх случаев болезни в Норвегии. От шести до восьми процентов больных никогда не курили и не менее 15 процентов случаев никогда бы не возникли, если бы не воздействие раздражителей на дыхательные пути в условиях труда. Отдельную роль также играет наследственность.

Мировая статистика показывает, что 95% больных хронической обструктивной болезнью лёгких являются курильщиками, часто с более чем 20-летним стажем ежедневного курения.

Современные исследования также показывают, что вероятность приобретения ХОБЛ во взрослом возрасте увеличивается в три раза среди людей, которые болели астмой в детстве, чем среди людей, которые курили ежедневно, но не страдали от астмы.

По данной ссылке можно прочитать результаты проведённых исследований.

Диагностика ХОБЛ

ХОБЛ развивается постепенно, и может пройти 30-40 лет до появления первых симптомов. Воспаление дыхательных путей приводит к их сужению и образованию в них рубцов, что невозможно обнаружить с помощью обычной рентгенографии. Наличие ХОБЛ можно легко определить путём исследования функции лёгких, проводимого врачом. Симптомы ХОБЛ похожи на симптомы астмы, что может затруднить постановку диагноза.

Интенсивность симптомов ХОБЛ может варьироваться. У кого-то болезнь может протекать легко, без особых неудобств в повседневной жизни, тогда, как другие могут быть инвалидизированы и зависимы от постоянного кислородного питания. В некоторых случаях больные могут страдать и ХОБЛ и астмой.

Распространённость

Предполагается, что свыше 370000 норвежцев старше 18 лет страдают ХОБЛ, и каждый год число новых случаев составляет 20 000. Менее половины больных был поставлен диагноз. Количество больных существенно увеличивается с возрастом. В мировом масштабе темпы роста заболеваемости ХОБЛ являются самыми быстрыми. Всемирная организация здравоохранения поставила ХОБЛ на четвёртое место среди причин смертности в мире. По рассчётам ожидается, что к 2020 именно эта болезнь будет третьей в списке причин смертности в мире.

Что происходит в дыхательных путях?

  • Увеличивается количество слизи в бронхах.
  • Воспалительные изменения (инфламация) в слизистой оболочке.
  • Спазмы (сокращение) мышечных тканей вокруг бронхов.
  • Разрушение эластических волокон тканей малых и больших дыхательных путей.        При ХОБЛ наблюдается повреждение и постепенное разрушение эластических тканей вокруг бронхов. Это приводит к тенденции коллапса дыхательных путей при выдохе.

На данном рисунке проиллюстрирована дыхательная трубка в лёгких. Верхний рисунок показывает нормальный вариант. Нижний рисунок показывает утолщённую ткань, которая приводит к сужению трубки, что является типичным симптомом ХОБЛ. Кроме того, элементы, задачей которых является поддержание дыхательных путей открытыми, потеряли свою жёсткость, что приводит к тенденции коллапса при выдохе.

На данном рисунке Вы видите иллюстрацию нормальной дыхательной трубки сверха справа. Внизу показана дыхательная трубка с ХОБЛ – утолщённая ткань, которая сужает трубку, ослабленные элементы, что является обычным при ХОБЛ. Кроме того, вырабатывается большое количество слизи. Слизь ещё более сужает пути, содействует развитию кашля, что, в свою очередь, приводит к ещё более затруднительному дыханию.

Различие между астмой и ХОБЛ

При астме симптомы возникают в виде приступов, часто с изменениями функций лёгких на протяжении суток. При ХОБЛ симптомы развиваются постепенно и с меньшими вариациями, чем при астме. Между приступами лёгкие астматика работают нормально. Функции легких больного ХОБЛ постепенно ухудшаются от года к году.

Обучение и просвещение

Обучение является важным моментом для увеличения количества знаний о ХОБЛ, необходимых для улучшения состояния больных. Данный вид обучения предоставляется в школах ХОБЛ или во время прохождения реабилитации. Центры обучения, расположенные по всей стране, проводят такие курсы. В некоторых центрах также проводятся курсы для родственников людей, страдающих от ХОБЛ. Такие центры часто расположены при больницах. Единого реестра центров нет, следует обратиться в больницу по месту проживания.

 

лечение и диагностика причин, симптомов в Москве

Лечение хронической обструктивной болезни легких

Это серьезное, угрожающее жизни заболевание, при котором дыхательные пути неуклонно сужаются на фоне хронического воспаления бронхов или эмфиземы (разрушения тканей легких, затрудняющие газообмен). Обструкция — это буквально прекращение, препятствие в нормальном функционировании легких, доступе кислорода в организм и выведении углекислого газа.

Причины

  • курение (активное и пассивное вдыхание табачного дыма),
  • регулярное вдыхание пыли, продуктов сгорания (вредные производства)

К сожалению, данное заболевание неизлечимо, именно поэтому Всемирная организация здравоохранения активно призывает страны бороться с курением табака, проводить профилактические и просветительские программы для населения. Ведь предотвратить угрозу возникновения ХОБЛ можно, бросив курить.

И даже если заболевание неизлечимо можно справиться с его проявлениями и перевести его течении в контролируемое русло, главное не заниматься самолечением и вовремя обратиться к квалифицированным специалистам.

Не стоит забывать, что практически все случаи ХОБЛ предотвратимы. И обезопасить себя можно, отказавшись от вредной привычки курения табака. Ввиду того, что ранее мужчины курили много больше женщин, то и заболевание считалось по большей части мужским, но с широким распространением этой вредной привычки среди женщин, увеличилось и число выявленных случаев ХОБЛ среди них. Поэтому в наше время гендерное разделение не прослеживается так четко. В зоне риска курящие люди 40-50 лет и старше.

Симптомы хронической обструктивной болезни легких

  • одышкакоторая медленно нарастает с прогрессированием заболевания,
  • постоянный кашель,
  • отделение мокроты при кашле.

Диагностика

Диагностика ХОБЛ является одной из самых актуальных тем для врача-пульмонолога: заболевание широко распространено, при несвоевременном диагностировании есть высокий риск перетекания заболевания в тяжелую форму с высокой смертностью. Основной метод диагностики, применяемый повсеместно, — спирометрия — врач замеряет объем и скорость потока воздуха, выдыхаемого при максимальном усилии. Но в пульмонологическом отделении ФНКЦ ФМБА России помимо спирометрии специалисты проводят и другие обследования функциональности легких, которые позволяют уточнить диагноз и впоследствии подобрать эффективное лечение: бодиплетизмография, измерение диффузионной способности легких, кардиореспираторные нагрузочные тесты, исследование дыхания во время сна, определение оксида азота в выдыхаемом воздухе и др. Также может потребоваться и лабораторная диагностика — анализы крови и выделяемой мокроты для уточнения стадии заболевания.

Лечение хронической обструктивной болезни легких

Общепринятые схемы лечения ХОБЛ направлены на облегчение симптомов и недопущение прогрессирования заболевания.

Пульмонологическое отделение ФНКЦ ФМБА России по праву считается одним из ведущих в стране, благодаря современному лечебно-диагностическому оснащению и составу команды специалистов: наши врачи разрабатывают уникальные программы лечения и реабилитации, проводят обучение коллег из других лечебных учреждений, публикуют результаты своих исследований в ведущих международных изданиях.

В отделении доступны все возможные средства диагностики и лечения заболеваний легких: как современные, так и проверенные временем. Более того, в нашем центре, единственном в России, проводятся клинические испытания, и именно нашими специалистами подтверждается эффективность новой диагностической и лечебной аппаратуры, проходящей регистрацию для использования в дальнейшем во всех пульмонологических отделениях страны. Это большое доверие квалификации центра, которое мы оправдываем из года в год в первую очередь перед нашими пациентами.

Записаться на консультацию вы можете через специальную форму на сайте или по телефону.

ХОБЛ - xроническая обструктивная болезнь легких

2019.12.17

Хроническая обструктивная болезнь легких является прогрессирующим и смертельным заболеванием

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) представляет собой заболевание, характеризующееся прогрессирующей неполной обструкцией дыхательных путей (сужение воздушного потока в легких, что приводит к недостаточной оксигенации всех тканей и органов), связанной с аномальной воспалительной реакцией легких на вдыхаемые вредные частицы или газы. в частности курение табака. Наиболее важным фактором риска ХОБЛ является длительное курение. На возникновение заболевания также влияют загрязнение окружающей среды и работа в загрязненной (пыльной или дымной) среде, частые респираторные инфекции в анамнезе и, в очень редких случаях, дефицит определенного белка (альфа-1-антитрипсина).

Данные различных исследований показывают, что заболеваемость и смертность от ХОБЛ увеличивается с каждым годом. В Европе заболеваемость этим заболеванием составляет от 5% до 10%, особенно среди пожилых людей. ХОБЛ в настоящее время занимает четвертое место по уровню смертности, но согласно прогнозам ВОЗ на 2030 год. она станет третьей по значимости причиной смерти в мире (сердечно-сосудистые заболевания останутся на первом месте, а онкология - на втором). ХОБЛ является прогрессирующим заболеванием, которое означает, что если его не лечить, оно ухудшится и изменения будут необратимыми. ХОБЛ часто усугубляет течение сопутствующих заболеваний и операций, и его частыми «сопровождающими» являются депрессия, сердечные заболевания, атрофия скелетных мышц, снижение выносливости, истощение, хроническое заболевание сердца, вторичная полицитемия (увеличение количества клеток крови) и рак легких.

Симптомы, характерные для ХОБЛ

  • Одышка и нехватка воздуха. Первоначально это происходит во время повышенной физической нагрузки, например, торопиться в автобус или подниматься по лестнице, а затем, во время простых ежедневных действий (уборка дома, одеваться), и, наконец, сидеть или лежать в постели;
  • Кашель разных видов, кашель, особенно по утрам. Курильщик обычно связывает кашель с курением, привыкает кашлять по утрам, поэтому он часто не замечает, что кашель изменился, стал постоянным и появилась мокрота;
  • Регенерация мокроты. Мокрота имеет тенденцию быть слизистой и удлиненной, с обострением заболевания и вовлечением гнойной инфекции;
  • Увеличение усталости, общая слабость;
  • Общие респираторные инфекции;
  • Потеря веса и др.


Диагностика и лечение ХОБЛ

Хроническая обструктивная болезнь легких диагностируется пульмонологом (пульмонологом), который оценивает жалобы пациента, имеет историю болезни, клиническое обследование и спирометрическое исследование. Объем легких и скорость воздушного потока во время выдоха измеряются с помощью спирометрии. Пациенты с ХОБЛ имеют пониженную скорость выдоха, что приводит к тому, что не весь воздух удаляется из легких, и в конечном итоге развивается эмфизема легких (другими словами, «выпуклость»), и грудная клетка напоминает бочку.

После постановки диагноза ХОБЛ проводится лечение. К сожалению, до сих пор нет лекарства от хронической обструктивной болезни легких, но следование рекомендациям врача может замедлить его прогрессирование и улучшить качество жизни, снизить риск смерти и предотвратить обострения.

Чем раньше диагностируется заболевание, тем легче прогрессировать и тем проще лечение. При диагностике ХОБЛ легкой стадии достаточно следовать рекомендациям врача и использовать быстродействующие бронходилататоры при одышке. Однако для лечения хронической обструктивной болезни легких вдыхаемые бронхолитические препараты подбираются пульмонологом индивидуально для каждого пациента. В дополнение к правильному использованию ингаляционных лекарств (ингаляторов) следует соблюдать рекомендации другого врача.

Рекомендации врача для больных

  • Не курите, потому что курение продолжает ухудшать функцию легких, а лекарства менее эффективны.
  • Еда здоровая и балансированная: Ешьте 3-4 раза в день, употребляйте много свежих продуктов, фруктов и овощей, ограничьте потребление алкоголя.
  • Поддерживайте физическую активность и улучшайте физическую форму: от 20 до 30 минут аэробных упражнений не менее 2-3 раз в неделю - особенно нордическая ходьба, подъем по лестнице. Для тех, кто не любит активные виды спорта, прогулки на природе с домашним животным, игры с детьми или внуками могут стать приятной физической нагрузкой. Быстродействующий бронходилататор можно вдыхать перед физической подготовкой.
  • Избыточный вес рекомендуется для тех, кто имеет избыточный вес, так как потеря веса значительно повысит физическую работоспособность и уменьшит одышку.
  • Избегайте простудных заболеваний, всегда носите соответствующую одежду для сезона и поддерживайте температуру ниже 19 градусов
  • Предотвращение заражения вирусными респираторными инфекциями от больных близких, поскольку любая респираторная инфекция может затруднить дыхание и еще больше повредить ткани легких, а вирусные и бактериальные респираторные инфекции являются наиболее частой причиной обострения ХОБЛ. 
  • Если в вашем доме насморк или холод, рекомендуется использовать одноразовые маски и часто мыть руки.
  • Грипп и пневмония могут быть защищены прививками, которые бесплатны для пациентов с болезнью и должны проводиться ежегодно, как только начинается осенний сезон.
  • Правильное использование лекарств (ингаляторов) очень важно при заболеваниях дыхательных путей, иначе они не попадут в нижние дыхательные пути и окажутся неэффективными. После ингаляционного лечения ваш пульмонолог научит вас правильно их использовать и даст вам подробные инструкции по использованию вашего ингалятора. Если вы не чувствуете какого-либо улучшения или чувствуете, что ваши лекарства не действуют, внимательно прочитайте инструкцию или обратитесь за советом к фармацевту.


Когда вызывать пульмонолога?

Посещение пульмонолога по поводу хронической обструктивной болезни легких рекомендуется не реже одного раза в год, для пациентов с тяжелой ХОБЛ - 3 раза в год. Во время визита оценивается легочная функция и ее изменения во время лечения и разъясняется техника использования ингаляторов. Запись на консультацию пульмонолога также рекомендуется, если назначенное лечение не улучшается. Во время консультации врач выберет наиболее подходящее лекарство и ингалятор.

Если вам за 40, жалуйтесь на одышку с легкой или умеренной физической нагрузкой, одышку, сопровождающуюся утренним кашлем, мокротой, «одышкой», изменениями в характере дыхания, чувством одышки, усилением дыхания и пульса, особенно если вы курите Посетите своего пульмонолога для проверки спирометрии, чтобы видеть, есть ли у Вас обструктивное заболевание легких.

Сотрудничество между пациентом и врачом имеет важное значение для успеха лечения ХОБЛ

Следование рекомендациям врача и регулярное использование препарата могут помочь остановить прогрессирование заболевания, сохранить способность работать дольше, продолжать полноценную социальную жизнь. Однако, собственное отношение и усилия пациента здесь очень важны. Несоблюдение режима и лечения ухудшит состояние и вызовет необратимые изменения. На более тяжелых стадиях ХОБЛ физическая активность значительно снижается, и даже такие, казалось бы, легкие действия, как одевание или стирка, ставятся под сомнение. Такие пациенты могут получать непрерывную кислородную терапию, как определено пульмонологом, который выполнил пульсоксиметрию и мониторинг газов артериальной крови.

 

 

Лекарственная терапия депрессии у пациентов с хронической обструктивной болезнью легких

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) - это термин, который в основном описывает два состояния легких: хронический бронхит и эмфизему. Основные симптомы ХОБЛ - одышка, персистирующий кашель, шумное/хриплое дыхание и/или частые инфекции дыхательных путей. Невозможно вылечить ХОБЛ, но терапия способна замедлить прогрессирование болезни и облегчить симптомы заболевания. Депрессия распространена среди пациентов с ХОБЛ, но её часто не лечат. Исследования показывают, что депрессия без специфического лечения у пациентов с ХОБЛ может снижать качество жизни, увеличивает частоту обострений ХОБЛ и госпитализаций, а также приводит к усложнению плана лечения ХОБЛ. Лечение депрессии может включать антидепрессанты, психотерапию или то и другое вместе. Однако, в настоящее время отсутствуют основанные на доказательствах рекомендации для терапии пациентов с ХОБЛ антидепрессантами.

Почему этот обзор важен?

До сих пор нет четкого обзора существующих доказательств, показывающих, могут ли антидепрессанты эффективно и безопасно уменьшать симптомы депрессии у пациентов с ХОБЛ, поэтому важно оценить существующие экспериментальные исследования.

Кто может быть заинтересован в этом обзоре?

Работники здравоохранения, люди с ХОБЛ и депрессией, исследователи, политики будут заинтересованы в результатах этого обзора.

На какие вопросы стремится ответить этот обзор

Нашей главной целью было оценить, может ли фармакологическое лечение (например, антидепрессантами) эффективно и безопасно лечить депрессию, связанную с ХОБЛ.

Какие исследования были включены в этот обзор?

Этот обзор включал экспериментальные исследования, а именно рандомизированные контролируемые испытания (исследования, в которых участников в случайном порядке распределяют в группы лечения), в которых сравнивали эффективность фармакологических вмешательств (антидепрессантов) с плацебо (неактивное лечение в той же самой форме, что и активное лечение, например таблетка). Среди участников исследований были взрослые пациенты с диагностированной ХОБЛ и депрессией.

О чём говорят нам доказательства из этого обзора?

Мы обнаружили только четыре исследования, соответствующих критериям включения нашего обзора. Это говорит об ограниченности доказательств, поддерживающих использование антидепрессантов для лечения депрессии у пациентов с ХОБЛ. Только в одном исследовании оценивали эффективность трициклического антидепрессанта нортриптилина. Было установлено, что это лекарство уменьшает симптомы депрессии в сравнении с плацебо. В трех исследованиях оценивали эффективность более нового класса антидепрессантов, называемых селективными ингибиторами обратного захвата серотонина (СИОЗС). Не было обнаружено доказательств их эффективности в уменьшении симптомов депрессии. В связи с ограниченными доказательствами, мы не можем сделать определенные выводы об эффективности или безопасности применения антидепрессантов при лечении пациентов с депрессией, связанной с ХОБЛ. Однако, СИОЗС могут улучшать способность переносить физическую нагрузку у пациентов с ХОБЛ.

Учитывая, что полученные результаты основываются только на четырех небольших исследованиях с очень низким качеством доказательств, важно интерпретировать эти результаты с осторожностью.

Что должно произойти дальше?

Недостаточные доказательства не дают возможности нам сделать четкие рекомендации для врачей, других работников здравоохранения, исследователей или политиков. Необходимо больше исследований с улучшенным методологическим качеством и большим числом участников.

Что необходимо знать про ХОБЛ ?

Этой осенью корреспондент студии «Здоровье» на ОРТ задал вопрос прохожим на московских улицах: Что такое ХОБЛ? И только 1 из 10 опрошенных дал относительно правильный ответ. А тем не менее это весьма распространённое заболевание. По данным Всемирной организации здравоохранения число пациентов с ХОБЛ непрерывно растёт. В России по данным эпидемиологических исследований их количество может превышать 11 миллионов человек. В нашей стране уже сегодня , по официальным данным докладов Министерства здравоохранения, ХОБЛ занимает 4-5 место среди всех причин смертности (после сердечно-сосудистых заболеваний, диабета, травм).

Так что же такое ХОБЛ?
ХОБЛ (хроническая обструктивная болезнь легких) - заболевание, при котором сочетаются два недуга: 1. Бронхит хронического течения, при котором воспалены пути попадания воздуха в легкие. Сопровождается это большим количеством слизи. Бронхиальные стенки становятся более толстыми, при этом сужается их просвет. Это называется обструкцией. Отсюда и соответствующий термин в названии болезни.
2. Эмфизема легких. Этот недуг (в отличие от бронхита) характерен тем, что при нём повреждаются альвеолы легких. Теряя эластичность, они способствуют уменьшению площади легких. В итоге нарушается газообмен между вдыхаемым человеком воздухом и его кровью. У больного появляется одышка.

Таким образом, заболевание характеризуют следующие симптомы:
1. длительный (хронический) кашель;
2. слизь (мокрота), которая появляется при кашле;
3. одышка , усиливающаяся при нагрузках.

ХОБЛ развивается в результате взаимодействия генетических факторов и факторов окружающей среды. Почти всегда болезнь провоцирует курение, потому что вдыхание табачного дыма раздражает дыхательные пути и разрушает эластические волокна в легких. В то же время к ХОБЛ может приводить длительное вдыхание химикатов ( пары и дымы), производственной пыли, а так же «пассивное» курение.

«Коварство» ХОБЛ заключается в том, что она начинается незаметно и, пока человек только кашляет по утрам (и обычно ещё не лечится), успевает привести к значительному поражению бронхов и легких. Появление одышки говорит о выраженном сужении бронхов , которое полностью вылечить уже невозможно. Впоследствии присоединяются и обострения болезни , чаще на фоне респираторных инфекций или других неблагоприятных воздействий. Обострения ХОБЛ ещё более усугубляют собой нарушения дыхания. Именно прогрессирующий и малообратимый характер поражения дыхательной системы составляет столь неприятный «портрет» ХОБЛ.

Чтобы уточнить, болен или нет человек таким недугом, как хроническая обструктивная болезнь легких, следует обратиться к специалисту, занимающемуся проблемами легких, к пульмонологу.

Врач на первом приёме осмотрит пациента, прослушает легкие, уточнит, курит ли человек, как часто соприкасается с различными химическими соединениями, способными негативно воздействовать на лёгкие.

Затем назначается спирометрия ( исследование функции внешнего дыхания) – необходимая диагностическая процедура, позволяющая установить диагноз и оценить степень тяжести болезни. Для этой группы пациентов обязательным обследованием является рентгенография органов грудной клетки, а в отдельных случаях и компьютерная томография. Эти виды исследований позволяют оценить степень выраженности эмфиземы лёгких, наличие булл, бронхоэктазов, а так же онкопатологии бронхолегочной системы. Последняя нередко осложняет течение ХОБЛ.

Важно знать, что ХОБЛ – заболевание, которое можно предотвратить и лечить.

Своевременное обращение к врачу при появлении первых симптомов заболевания значительно улучшает его прогноз и эффективность лечения.

ВАМ УСТАНОВЛЕН ДИАГНОЗ ХОБЛ.ЧТО ДАЛЬШЕ?

ХОБЛ – заболевание , которое можно предотвратить и лечить.

Основным способом замедлить развитие ХОБЛ является устранение причин , которые вызвали этот недуг. В первую очередь это отказ от курения – полный и навсегда. Не имеет значение , как долго человек курил и насколько повреждены его лёгкие. Прекращение курения в любом случае поможет замедлить прогрессирование заболевания. Немаловажное значение имеет так же применение индивидуальных средств защиты дыхательной системы, снижение по возможности количества вредных факторов в рабочей зоне, рациональное трудоустройство.

Для контроля заболевания пациент должен принимать активное участие в лечении. Необходимо регулярно обращаться к специалисту, ежегодно 1-2 раза проходить спирометрическое и рентгенологическое обследование. Оптимальным способом самоконтроля является ведение дневника , которое позволит отследить динамику симптомов и предупредить развитие тяжёлых обострений заболевания. Игнорирование признаков обострения может привести к госпитализации и ускорить потерю функции лёгких.

Целью назначения лекарственных препаратов при ХОБЛ является снижение частоты обострений, выраженности симптомов , предупреждение развития осложнений. По мере развития болезни объём лечения только возрастает. Большинство препаратов являются ингаляционными ( вдыхаемыми).

Важно знать, что все препараты должен назначать только врач! Если пациент получает ингаляции, обязательно следовать правилам проведения процедуры. Во время очередного визита к врачу после назначения впервые или нового вида ингалятора необходимо взять его с собой на прием. Врач проверит правильность техники выполнения ингаляции и укажет на вероятные ошибки. По данным исследований процент ошибок при применении различных видов ингаляционных устройств составляет от 30 до 80 процентов. Следовательно эти пациенты фактически не получают назначенную терапию.

В лечении ХОБЛ основную группу препаратов составляют бронхолитики. Это вещества, которые расслабляют мышцы бронхов, расширяют дыхательные пути и улучшают выведение воздуха из легких. При этом уменьшается одышка, кашель, облегчается отхождение мокроты.

Пациенты с ХОБЛ относятся к группе риска по развитию тяжелых осложнений в эпидемию гриппа. Поэтому вакцинация против гриппа обязательно должна быть включена в программу лечения этих больных.

Что ещё, кроме лекарств, может улучшить состояние больных ХОБЛ?

Необходимо избегать того, что может вызвать раздражение лёгких – дыма, холодного или сухого воздуха. В домашних условиях это использование кондиционеров, увлажнителей воздуха.

Основным компонентом реабилитации служат физические упражнения. Естественно, если у человека проблемы с дыханием , то упражнения могут быть последним, что ему захочется делать… Но специальные упражнения при ХОБЛ могут существенно помочь дыханию, что позволит пациенту оставаться максимально активным, насколько это возможно, и значительно улучшит качество жизни. Особенно важен комплексный подход к их проведению, сочетающий в себе упражнения на силу и выносливость: ходьбу, тренировки мышц верхних и нижних конечностей с помощью эспандеров, гантелей, степ-тренажеров. Прежде чем начать заниматься, больной должен обсудить программу упражнений с врачом.

Пациент с ХОБЛ должен следить за своим весом. Избыточная масса тела усиливает одышку. Но часто прогрессирование заболевания приводит к резкой потере веса. В этом случае необходим рацион с повышенным содержанием белка и витаминов. Если нет противопоказаний по сопутствующим заболеваниям рекомендовано ежедневно выпивать 1,2-1,6 л тех или иных напитков без кофеина. Это предупреждает сгущение мокроты и облегчает её отхождение при кашле.

Только в сотрудничестве с пациентом врач в лечении ХОБЛ может добиться положительных результатов, а пациент свести к минимуму симптомы болезни и сделать свою жизнь комфортной.

Хроническая обструтивная болезнь легких (ХОБЛ)

Прогрессирующее заболевание, характеризующееся нарушением бронхиальной проходимости. Сопровождается одышкой – сначала после нагрузок, затем и в покое, кашлем с мокротой. Хронический бронхит.

Общие сведения

Хронический бронхит — это заболевание, которое характеризуется следующими признаками: кашлем с мокротой на протяжении по крайней мере трех месяцев в году в течение двух лет подряд в сочетании с нарушениями по данным спирометрии (исследования функции внешнего дыхания).

Таким образом, основная жалоба при хроническом бронхите — это кашель с мокротой.

Вместе с эмфиземой легких хронический бронхит относится к так называемым хроническим обструктивным болезням (заболеваниям) легких, сокращенно — ХОБЛ (или ХОЗЛ). Эмфизема легких характеризуется их «перерастяжением», увеличением воздушных пространств.  

Главная жалобы при эмфиземе легких — одышка (чувство нехватки воздуха).

Хронический бронхит и эмфизема легких редко встречаются в чистом виде: у большинства больных в той или иной степени сочетаются оба заболевания. В зависимости от преобладающих симптомов различают два типа ХОБЛ: бронхитический и эмфизематозный.

Основная причина ХОБЛ — курение. У некоторых курильщиков ХОБЛ протекают с приступами удушья. Эту форму заболевания необходимо дифференцировать с бронхиальной астмой, при которой тоже возникают приступы удушья, но между приступами, в отличие от ХОБЛ, проходимость дыхательных путей полностью восстанавливается. Эта форма ХОБЛ получила название хронического астматического бронхита.

В развитых странах ХОБЛ — четвертая по частоте причина смерти. Распространенность ХОБЛ увеличивается с возрастом. Среди больных преобладают мужчины, что закономерно, ведь раньше курение было в основном мужской привычкой. По мере приобщения к ней женщин растет их доля среди больных ХОБЛ.

Главный фактор риска ХОБЛ — курение. Вероятность заболевания увеличивается пропорционально стажу курения и числу выкуриваемых сигарет. У курящих сигары или трубки риск тоже повышен, но в значительно меньшей степени, чем у курящих сигареты. Решающую роль в развитии ХОБЛ, по-видимому, играет индивидуальная восприимчивость к действию табачного дыма, поскольку ХОБЛ развиваются только у 15% курящих. 

Больные с недостаточностью альфа1-антитрипсина чрезвычайно предрасположены к эмфиземе легких, правда, на их долю приходится менее 2% случаев этого заболевания. Причиной хронического бронхита могут быть профессиональные вредности, прежде всего контакт с неорганической пылью (цементной, угольной), зерновой пылью и парами серной кислоты. У некурящих развитию ХОБЛ могут способствовать общее загрязнение атмосферы, загрязнение воздуха в помещениях и рецидивирующие инфекции дыхательных путей в детстве, но роль этих факторов не ясна.

Диагностика

Болеют в основном люди старше 50 лет, курящие или курившие ранее (стаж курения — более 20 пачко-лет). Заподозрить ХОБЛ можно при сборе анамнеза, но для подтверждения диагноза необходима спирометрия (исследование функции внешнего дыхания). Основной симптом — прогрессирующая одышка. Обычно ей сопутствуют кашель с мокротой и приступы удушья. Кашель, как правило, либо предшествует одышке, либо появляется одновременно с ней. Мокрота имеет бледно-серый цвет и выделяется по утрам, но может откашливаться и в течение дня.

Многолетний кашель с мокротой и слабо выраженная одышка характерны для бронхитического типа ХОБЛ. При эмфизематозном типе ХОБЛ, напротив, беспокоят редкий кашель со скудной мокротой и выраженная одышка. Изменение характера мокроты со слизистого (бледно-серый цвет) на гнойный свидетельствует о присоединении инфекции — остром бактериальном бронхите. Свистящее дыхание и приступы удушья — результат спазма бронхов или сужения дыхательных путей за счет воспаления. ХОБЛ у близких родственников означает, что причиной заболевания может быть недостаточность альфа1-антитрипсина, особенно если первые симптомы появились до 50 лет. Кровохарканье обычно обусловлено острой бактериальной инфекцией (бронхитом или пневмонией), однако надо исключить рак легкого. Если заболевание началось с прогрессирующей одышки на фоне бронхиальной астмы, особенно у некурящего, вероятен хронический астматический бронхит. 

При бронхитическом типе ХОБЛ жалоб в покое обычно нет. Со временем неизбежно развивается гипоксемия (снижение уровня кислорода в крови), которая ведет к изменениям в сердце (легочное сердце) и к сердечной недостаточности (которая проявляется, в частности, отеками). 

При ХОБЛ, особенно тяжелых, возможны жалобы, не связанные напрямую с поражением органов дыхания: быстрая утомляемость, похудание, снижение аппетита. Возможны также нарушения сна и психические расстройства: депрессия, нарушения концентрации внимания и памяти. 

Лабораторные и инструментальные исследования

Единственный достоверный критерий ХОБЛ — нарушения, выявленные при спирометрии (исследовании функции внешнего дыхания). Любые изменения спирометрических показателей, как в лучшую, так и в худшую сторону, однако, ни о чем не говорят, пока не подтверждены повторными исследованиями. При бронхиальной астме, в отличие от ХОБЛ, обструктивные нарушения обратимы.

Функциональный резерв легких оценивают с помощью нагрузочных проб с исследованием функции внешнего дыхания и газообмена. Кроме того, нагрузочные пробы позволяют установить, чем обусловлена плохая переносимость физической нагрузки: нарушением газообмена или вентиляции либо сердечно-сосудистой патологией. У больных ХОБЛ ограничивающим фактором часто оказывается сердечно-сосудистая патология. 

Если выявлены обструктивные нарушения, спирометрию обычно дополняют определением чувствительности к бронходилататорам: для этого дают пациенту сделать несколько вдохов через ингалятор и повторяют исследование. Однако реакция на однократное применение бронходилататоров не всегда отражает их эффективность, и низкая чувствительность к бронходилататорам при спирометрии еще не означает, что длительное их применение не улучшит состояние больного. Следовательно, независимо от реакции, выявленной при спирометрии, не стоит отказываться от пробного лечения бронходилататорами. 

Рентгенография грудной клетки может помочь в диагностике эмфиземы легких. Наиболее важный ее признак — перераздувание легких. Можно обнаружить буллы в верхних долях и очаговое повышение прозрачности легочных полей. Рентгенография лишь приблизительно характеризует тяжесть эмфиземы легких и наиболее информативна при тяжелых формах заболевания. В выявлении таких изменений, как мелкие буллы, гораздо большей чувствительностью обладает компьютерная томография (КТ). Однако ни рентгенография, ни КТ не заменяют ключевого метода диагностики — спирометрии.

При первичном обследовании целесообразны также микроскопия мокроты, общий анализ крови с определением лейкоцитарной формулы, электрокардиография (ЭКГ) и часто — эхокардиография (ультразвуковое исследование сердца). Кроме того, при подозрении на недостаточность альфа1-антитрипсина определяют его уровень в сыворотке, а при подозрении на хронический астматический бронхит проводят кожные пробы с аллергенами и определяют уровень IgE в сыворотке.

Лечение

Отказ от курения

Большинство больных ХОБЛ (85%) курят или курили ранее. Отказ от курения не только замедляет скорость снижения показателей внешнего дыхания (она становится такой же, как у некурящего), но и благоприятно сказывается на состоянии сердечно-сосудистой системы и снижает риск рака легкого. С включением в комплексные программы борьбы с курением препаратов никотина (жевательной резинки с никотином, пластыря с никотином, аэрозоля с никотином для интраназального введения, ингалятора с никотином) частота стойкого воздержания от курения достигла 50%. С помощью жевательной резинки в плазме и тканях поддерживается примерно такой же уровень никотина, как при выкуривании пачки сигарет в день. Отменять лечение можно как постепенно, так и резко. Из недостатков следует отметить горький вкус жевательной резинки, что может привести к несоблюдению предписаний врача, и недостаточное поступление никотина в организм при низкой эффективности жевания. 

Курению способствуют многие факторы: привычка, влияние окружающих, зависимость. Следовательно, для достижения хороших отдаленных результатов, помимо препаратов никотина в программе борьбы с курением должны быть учтены и эти стороны. Важную роль играют помощь и участие врача.

Профилактика обострений

Обострение ХОБЛ, прежде всего хронического астматического бронхита, нередко вызывают загрязнители воздуха на рабочем месте или в быту. Выявив и устранив их, можно снизить частоту и тяжесть обострений. Обострение ХОБЛ может вызвать сильный смог.

Физиотерапия

Удаление мокроты из дыхательных путей может заметно улучшить самочувствие больного, особенно при бронхитическом типе ХОБЛ. Существует множество способов очищения дыхательных путей от мокроты и предотвращения ее накопления. Кашель у больных ХОБЛ, как правило, не обеспечивает удаление мокроты и лишь изматывает. Таким больным можно посоветовать простой и эффективный способ откашливания мокроты, которым, к сожалению, часто пренебрегают. Суть его заключается в следующем: после пары медленных глубоких вдохов надо задержать дыхание на 5—10 с для повышения внутригрудного давления и затем, на выдохе, откашляться с открытой голосовой щелью.

Постуральный дренаж, вибрационный и перкуссионный массаж облегчают выведение мокроты из нижних отделов легких благодаря действию силы тяжести и колебательным движениям грудной клетки, сообщаемым ей при перкуссии или с помощью вибратора. По завершении процедуры больной должен хорошо откашляться, как описано выше. 

Все описанные методы тем или иным образом облегчают удаление мокроты, но переместить мокроту в трахею и крупные бронхи, откуда она может быть удалена при кашле или с помощью аспирации, по-прежнему может только кашель с открытой голосовой щелью.

Реабилитация

ХОБЛ существенно ухудшают качество жизни. В комплексные программы реабилитации входят обучение больных, физические упражнения и восстановление тренированности, надлежащее питание, психотерапия и социальная адаптация для устранения тревожности и других эмоциональных расстройств, вызванных ХОБЛ.

Медикаментозное лечение

Медикаментозное лечение эмфиземы легких и хронического бронхита направлено на ослабление симптомов заболевания и улучшение показателей функции легких. Предпочтение отдается ингаляционным препаратам в виде дозированных аэрозолей, поскольку при введении препарата непосредственно в дыхательные пути риск системных побочных эффектов меньше. Для введения ингаляционных препаратов необходима буферная насадка (спейсер). Она играет роль резервуара для аэрозоля и избавляет от необходимости согласовывать по времени вдох и нажатие на ингалятор-дозатор. Буферная насадка позволяет глубже ввести препарат в дыхательные пути, препятствует его оседанию в ротоглотке.

Основные группы лекарственных средств, используемых при ХОБЛ — это M-холиноблокаторы (ипратропия бромид). Ипратропия бромид обладает более сильным, чем  бета-адреностимуляторы или теофиллин, расширяющим действием на бронхи, а также более продолжительным действием. Все это ставит его во главу угла лечения ХОБЛ. Если в обычной дозе (по 2 вдоха 4 раза в сутки) ипратропия бромид недостаточно эффективен, дозу можно безбоязненно увеличить до 3—6 вдохов 4 раза в сутки. 

Бета-адреностимуляторы улучшают проходимость дыхательных путей, облегчают отхождение мокроты и ослабляют одышку. Для усиления бронходилатирующего эффекта можно увеличить дозу с 2 вдохов 4 раза в сутки до 2—6 вдохов 4—6 раз в сутки, не опасаясь осложнений. Однако под влиянием сообщений о гибели больных бронхиальной астмой в связи с передозировкой бета-адреностимуляторов специалисты не приветствуют повышение дозы. 

Роль глюкокортикоидов для приема внутрь в лечении ХОБЛ остается неопределенной отчасти из-за отсутствия доводов в пользу их применения и тяжелых побочных эффектов. Глюкокортикоиды для приема внутрь показаны амбулаторным больным при недостаточной эффективности бета-адреностимуляторов, ипратропия бромида и, возможно, теофиллина. При длительном применении глюкокортикоиды для приема внутрь оказывают тяжелые побочные действия. Среди них надпочечниковая недостаточность, остеопороз, артериальная гипертония, катаракта, миопатия, сахарный диабет. 

Несмотря на то что обоснований для применения ингаляционных глюкокортикоидов при ХОБЛ недостаточно, эти препараты применяют часто. Они содержат меньшие дозы, чем препараты для приема внутрь, почти не всасываются и поэтому вызывают лишь легкие осложнения. 

Польза от муколитических и отхаркивающих средств при хроническом бронхите пока под вопросом. Считается, что муколитические средства, например йодированный глицерин и ацетилцистеин, уменьшают вязкость мокроты. Отхаркивающие препараты разжижают мокроту и способствуют ее выведению.

Инфекции провоцируют обострения ХОБЛ, поэтому антибактериальные препараты назначают часто — как с профилактической, так и с лечебной целью. Во время инфекционных обострений (на них указывают усиление одышки и кашля и появление гнойной мокроты) функция легких ухудшается (не исключено, что необратимо). При частых обострениях (4 и более в год) сократить их число может ежемесячная профилактическая антибактериальная терапия в течение недели со сменой препаратов.

Профилактика гриппа и пневмококковой пневмонии

Поскольку легочная инфекция у больных ХОБЛ встречается часто и грозит ухудшением функции легких и дыхательной недостаточностью, больным, не страдающим аллергией на яичный белок, рекомендуется ежегодная вакцинация против гриппа. Эффективность ее достигает 60—80%. Невакцинированным больным с высоким риском гриппа A и на ранней его стадии назначают амантадин. Больным старше 50 лет, кроме того, рекомендуется однократная иммунизация пневмококковой вакциной. Ревакцинацию сейчас проводят по прошествии пяти и более лет, если на момент вакцинации возраст больного не превышал 65 лет.

Длительная кислородотерапия

Польза постоянных ингаляций кислорода (длительной кислородотерапии) при ХОБЛ научно доказана. Кислородотерапия существенно снижает частоту осложнений и летальных исходов при тяжелых ХОБЛ, а также улучшает психические функции и переносимость физической нагрузки.

Короткоцепочечный полиглутамат метотрексата как параметр исхода у пациентов с ревматоидным артритом, получающих метотрексат

Цели: Метотрексат (МТ) - краеугольный камень в лечении ревматоидного артрита (РА). Хотя в целом метотрексат очень эффективен, основным недостатком является большая вариабельность клинического ответа у разных пациентов. Предполагается, что циркулирующие уровни полиглутаматов метотрексата (MTXPG) коррелируют с клинической эффективностью, поэтому они могут играть потенциальную роль в мониторинге лекарственных средств.Тем не менее, существует противоречивая дискуссия о важности полиглутаматов метотрексата в качестве исходных параметров терапии ревматоидного артрита. Целью настоящего исследования было изучить образование и фармакокинетику MTXPG и сопоставить их концентрацию с клиническим ответом у пациентов, ранее не получавших метотрексат.

Методы: Фармакокинетику МТХПГ в эритроцитах определяли в образцах девятнадцати пациентов, ранее не получавших метотрексат, с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ВЭЖХ) с использованием постколоночного фотоокисления и флуориметрического обнаружения.Связь между концентрацией MTXPG в эритроцитах и ​​параметром первичного исхода DAS-28 оценивали с использованием коэффициента корреляции Спирмена.

Полученные результаты: Короткоцепочечный полиглутамат MTXPG2 оказался потенциальным маркером клинического исхода при ревматоидном артрите со статистически значимой положительной корреляцией между уровнями Cmax MTXPG2 и улучшением DAS-28 (+0.518, p = 0,023) в течение 16 недель. Кроме того, уровни Cmax MTXPG2 отрицательно коррелировали с базофилами (-0,478, p = 0,038) и эозинофилами (-0,531, p = 0,019), которые являются провоспалительными клетками, участвующими в заболевании.

Выводы: MTXPG2, по-видимому, является потенциальным индикатором клинического ответа и может служить маркером для мониторинга лекарств.

RibR, возможный регулятор оперона биосинтеза рибофлавина Bacillus subtilis, in vivo взаимодействует с 5'-нетранслируемым лидером мРНК rib | Письма о микробиологии FEMS

Абстрактные

RibR представляет собой минорную криптическую флавокиназу (EC 2.7.1.26) грамположительной бактерии Bacillus subtilis с неизвестной клеточной функцией. Активность флавокиназы, по-видимому, локализована в N-концевом домене белка. Используя дрожжевую трехгибридную систему, было показано, что RibR специфически взаимодействует in vivo и с нетранслируемым лидером дикого типа мРНК оперона биосинтеза рибофлавина. Это взаимодействие частично теряется при тестировании лидера, содержащего известные дерегулирующие мутации cis в так называемом элементе RFN .Элемент RFN представляет собой последовательность внутри мРНК лидера rib , которая, как сообщается, служит рецептором для FMN-зависимого «рибопереключателя». В самом RibR взаимодействие было локализовано в части белка с карбокси-концом, сегменте неизвестной функции, который не обнаруживает сходства с другими белками в общедоступных базах данных. Анализ штамма с дефектом ribR выявил умеренное нарушение регуляции биосинтеза флавинов (рибофлавин, FMN и FAD). Результаты показывают, что РНК-связывающий белок RibR может участвовать в регуляции генов rib .

Введение

Рибофлавин (витамин B 2 ) является прямым предшественником флавинмононуклеотида (FMN) и флавинадениндинуклеотида (FAD). FMN и FAD служат коферментами флавопротеинов, ферментов, которые катализируют широкий спектр биологических реакций (Fischer & Bacher, 2005). Наиболее изученной системой биосинтеза рибофлавина является бактерия Bacillus subtilis (Perkins & Pero, 2001). В этом организме рибофлавин синтезируется в серии ферментативных реакций, начиная с GTP и рибулозо-5-фосфата.Соответствующие гены сгруппированы в оперон 4,3 т.п.н. ( ribGBAHT ). FMN образуется из рибофлавина с помощью флавокиназы (EC 2.7.1.26), а FAD образуется из FMN с помощью FAD-синтетазы (EC 2.7.7.2). В B. subtilis бифункциональный фермент RibC катализирует образование FMN и FAD (Mack et al. , 1998). Соответствующий ген ribC не связан с опероном rib . Регуляция генов rib и до конца не изучена (Perkins & Pero, 2001).Предполагается, что транскрипт эволюционно консервативной последовательности (140 нуклеотидов) в лидере rib будет укладываться на in vivo в раза в стабильную вторичную структуру, названную элементом RFN (Vitreschak et al. , 2002). Было показано, что FMN напрямую взаимодействует с образующимся RFN и после связывания прекращает транскрипцию генов rib («рибосвитч») (Миронов и др., , 2002; Винклер и др., , 2002). Модель рибопереключателя согласуется с выводом о том, что снижение продукции FMN в штаммах, дефицитных по флавокиназе / FAD-синтетазе (RibC), приводит к нарушению регуляции оперона rib (Mack et al., 1998). Кроме того, модель может объяснить, почему конкретные мутации в RFN ( 39 G 40 G 41 G до 39 A 40 A 41 A или ' RFN mutAAA ' , нумерация согласно Миронову и др. , 2002) приводит к перепроизводству рибофлавина (Kil et al. , 1992). Регулирующая система не может ограничиваться перечисленными выше элементами (Perkins & Pero, 2001). Ген ribR также описан как участвующий в регуляции генов rib .Однако его точная роль остается неясной (Соловьева, и др., , 1999). N-концевая половина RibR (аминокислоты 1–120) имеет большое сходство с флавокиназами. RibR обладает активностью флавокиназы in vitro . Сверхэкспрессия ribR подавляет сверхпродуцирующий рибофлавин фенотип с дефектом ribC . С-концевая половина RibR (аминокислоты 121–230) не обнаруживает сходства последовательностей с каким-либо другим известным белком и вызывает интерес к клеточной функции этого белка.Другие кластеры биосинтетических генов в B. subtilis , как сообщается, регулируются механизмами ослабления, включающими специфические метаболиты, связывающие мРНК-связывающие белки (Switzer et al. , 1999; Hobl & Mack, 2007). Такая роль для RibR предполагалась, и дрожжевую трехгибридную систему (Putz et al. , 1996; SenGupta et al. , 1996) использовали для анализа возможного взаимодействия in vivo RibR с область лидера ( RFN ) транскрипта rib .

Материалы и методы

Условия выращивания, штаммы бактерий и анализ флавинов

Среду

Лурия – Бертани (LB) использовали для культивирования Escherichia coli . Минимальную среду Спизизена использовали для роста B. subtilis Marburg 168 ( trpC2 ) (Spizizen, 1958). Штамм с делецией B. subtilis 168 ribR (BFS69) был получен с использованием плазмиды pMutin (Kobayashi et al., 2003) и выращивали в присутствии 0,3 мкг эритромицина на мл -1 . Продукцию флавина (рибофлавина, FMN и FAD) штаммами B. subtilis контролировали с помощью флюоресцентной системы считывания микропланшетов: образцы отбирали из супернатантов трех независимых жидких культур (инокулированных с одинаковой OD , 600 нм, ) и непосредственно анализировали. в микротитровальных планшетах (NUNC F96 MicroWell ™). Определения флуоресценции проводили с использованием флуоресцентного ридера для микропланшетов GENios Pro ™ (Tecan).Производство флавина контролировали с использованием полосы пропускания 485, 20 нм, фильтра возбуждения и фильтра излучения, шириной полосы 535, 25 нм.

Процедуры клонирования и другие манипуляции с ДНК

Конструирование плазмиды, трансформация / рост E. coli и секвенирование ДНК проводили в соответствии со стандартными протоколами (Sambrook et al. , 1989). Сайт-направленный мутагенез проводили с использованием набора QuikChange II XL от Stratagene (Ла-Хойя, США). Плазмиды были амплифицированы в E.coli Top 10F ′ (Invitrogen GmbH, Карлсруэ, Германия).

Дрожжевая трехгибридная система

Все использованные конструкции были основаны на плазмидах системы RNA-Protein Hybrid Hunter от Invitrogen. Плазмиды pRh4'-IRE и pYESTrp3-IRP (Invitrogen) служили в качестве положительного контроля. Плазмиду pYESTrp3 использовали для получения слияния B. subtilis RibR (и его вариантов) и N-концевого домена активации VP16 (VP16AD) в трансформантной дрожжевой клетке (таблица 1).Ген ribR из B. subtilis лигировали с pYESTrp3 в виде фрагмента EcoRI / XhoI. Ген ribR был получен с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием геномной ДНК из B. subtilis Marburg 168 (штамм дикого типа) и олигонуклеотидов ribR fw 5'-GCGCGAATTCTGTTGACGATCATTGCCGCCGGT-3 'и ribRTC rp 5'-CTGCCCC -3 ′. Соответственно, pYESTrp3 использовали для получения слияния B. subtilis RibC и VP16AD (ribC fw 5'-GCGCGAATTCGGTGAAGACGATACATATTACA-3 'и ribC rp 5'-GCGCCTCGAGTTATTTCCGCAAATTGCTGAA-3').Усеченные слияния RibR и VP16AD (N-концевая часть VP16AD-RibR) были созданы с использованием олигонуклеотидных пар ribR fw (см. Выше) и ribR INT (5'-GCGCCTCGAGTTACCCAATCAGCTCAAAGC-3 '). С-концевую часть слияния VP16AD-RibR получали с использованием ribR rp (см. Выше) и ribR ICT (5'-GCGCGAATTCTGAGGTTTGATTCTTGGAGT-3 '). Гибридные РНК, подлежащие тестированию, были продуцированы как выше, так и ниже MS2-РНК с использованием плазмид pRH5 'и pRh4': B. subtilis дикого типа rib -ведущая область ( RFN ) была получена с помощью ПЦР с использованием олигонуклеотидных пар rfn wt fw 5'-AGCTTTGTTTAAACATTGTATCTTCGGGGCAGGG-3 'и rfn wt rp 5'-TCCCCCCGGGGCATAGCGGCTCATCATCCTTCTCCC-3'.Продукт ПЦР обрабатывали PmeI / XmaI и лигировали с pRH5 ', расщепленной PmeI / XmaI, а также с pRh4', обработанной PmeI / XmaI. Лидер дерегуляции RFN mutAAA (Kil et al. , 1992) был получен из полученных двух плазмид путем сайт-направленного мутагенеза с использованием мутагенных праймеров rfn mut fw 5'-AAACATTGTATCTTCGGGGCAAAATGGAAATCCCGACCG-3 rp 5'-CGCCGGTCGGGATTTCCATTTTGCCCCGAAGATACAATGTTT-3 '(три замены лидера нуклеотида rib были G> A в подчеркнутых положениях).

1

Дрожжевые трехгибридные конструкции

Плазмида (на основе) Размер (п.о.) Описание
pAA1 (pRH5 ′) 8078 wt
pAA2 (pRh4 ′) 8078 RFN wt -MS2
pAA3 (pRH5 ′) 8078 Mut2 8078 mut2
pAA4 (pRh4 ′) 8078 RFN mutAAA -MS2
pYh2 (pYESTrp3) 6499 pYESTrp2 6499 VP201 VP202 6757 VP16AD-RibC
pYh4 (pYESTrp3) 6177 VP16AD-RibR N-конец (AA 1-123)
pYh5 (pYESTrp3) 6211 С-конец VP16AD-RibR (AA 97–230)
9020 pAA2 9020 8078 90hp202 9020 VP16AD-RibR
Плазмида (на основе) Размер (т. 8078 MS2- RFN wt
pAA2 (pRh4 ′) 8078 RFN wt -MSA2
MS2- RFN mutAAA
pAA4 (pRh4 ′) 8078 RFN mutAAA -MS2
pYh3 (pYESTrp3) 6757 VP16AD-RibC
pYh4 (pYESTrp3) 6177 VP16AD-Rib A 1-123)
pYh5 (pYESTrp3) 6211 С-конец VP16AD-RibR (AA 97–230)
1

Дрожжевые трехгибридные конструкции на основе

9020 ) 9023) mutAAA -MS2 2
Размер (bp) Описание
pAA1 (pRH5 ′) 8078 MS2- RFN wt
pAA2 pAA2 pAA2 RFN wt -MS2
pAA3 (pRH5 ′) 8078 MS2- RFN mutAAA
pAA4 (pRh202 80200 pAA4
pYh2 (pYESTrp3) 6499 VP16AD-RibR
pYh3 (pYESTrp3) 620757 VPC
pYh4 (pYESTrp3) 6177 N-конец VP16AD-RibR (AA 1-123)
pYh5 (pYESTrp3) 6211 VP16AD-Rib
pYEST )
Плазмида (на основе) Размер (п.
pAA2 (pRh4 ′) 8078 RFN wt -MS2
pAA3 (pRH5 ′) 8078 MS2- RFN

1

2

mutA

2

2 pAA4 (pRh4 ′)

8078 RFN mutAAA -MS2
pYh2 (pYESTrp3) 6499 VP16AD-RibR
6757 VP16AD-RibC
pYh4 (pYESTrp3) 6177 VP16AD-RibR N-конец (AA 1-123)
pY201 pYhpAD2 VP201 pYhpAD3 С-конец (AA 97–230)

Трехгибридный анализ дрожжей

Дрожжевой трехгибридный анализ проводили на штамме Saccharomyces cerevisiae L40- ura3 [ MAT α, ura3-52 , leu2-3112 , his3 Δ 200 , trp1 Δ 1 , ade2 , LYS2 : 🙁 LexA op ) 4 −HIS3 , ura3 : 🙁 LexA-op ) 8 −LacZ ] (Invitrogen), несущий pHybLexA / Zeo-MS2 (Zeocin R ).Конструкции экспрессии гибрид-РНК и конструкция, экспрессирующая слияние активационного домена VP16AD / RibR или только активационный домен, были совместно введены в клетки S. cerevisiae L40- ura3 , несущие pHybLexA / Zeo-MS2. Трансформанты выращивали на синтетической полной среде (YC) без урацила, триптофана и гистидина и содержащей Zeocin ™ (100 мкг / мл -1 ) для селекции маркерных генов URA3 , TRP1 и HIS3 .

Тестирование активации репортерного гена в дрожжевой трехгибридной системе

Растущие колонии были качественно проанализированы на предмет продукта репортерного гена β-галактозидазы (LacZ) с использованием оверлейного анализа с окрашиванием X-gal (Duttweiler, 1996).Для количественной оценки уровня экспрессии lacZ , активность β-галактозидазы измеряли в клетках S. cerevisiae L40- ura3 , несущих pHybLexA / Zeo-MS2, продуцирующих как слияние ADVP16 / RibR, так и гибридные РНК, которые необходимо тестировать. Измерения проводили с клетками, полученными из двух независимых трансформантов. Для каждого трансформанта проводили три независимых анализа. Активности LacZ, приведенные в таблицах 2–4, представляют собой средние значения, рассчитанные на основе полученных данных. Клеточный материал был взят из колонии недавно трансформированного штамма дрожжей и использован в качестве инокулята для 5 мл синтетической полной среды (YC), не содержащей урацила и триптофана и содержащей Zeocin ™ (100 мкг мл -1 ).Клетки выращивали в течение ночи при 30 ° C. Жидкие культуры (15 мл) инокулировали до OD 600 нм 0,15–0,2, используя ночные культуры, и выращивали при 30 ° C до OD 600 нм 0,5–0,8. Анализ β-галактозидазы проводили, как описано ранее (Schneider et al. , 1996).

2

Активность β-галактозидазы (LacZ) в трансформантах дрожжей

MS000 mutN201 -MS2
Гибридный белок 1 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
9201 LexA- RFN wt -MS2 AD-RibR 7.3 (± 2,1)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibR 7,3 (± 1,9)
Lex -MS2 AD-RibR 0,2 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- AD-RibR 0,520 90x 90A 0,520 90A 9 -MS2 IRE-MS2 AD-RibR 0.2 (± 0,07)
LexA-MS2 RFN wt -MS2 AD- 0,7 (± 0,02)
LexA MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,1)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD- 0,1
LexA-MS2 - AD-RibR 0.0 (± 0,01)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 23,0 (± 3,4)
LexA-MS2 AD-RibR 0,6 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- RFN mutAAA

03 AD4

03 AD42 (± 1,2)

N wt -MS2 AD2 RibR MS 9) Lex4A 9
Гибридный белок 1 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA-MS2

4

AD-RibR 7,3 (± 2,1)
LexA-MS2 MS2- RFN wt

03 AD-4 7.3 (± 1,9)

LexA-MS2 -MS2 AD-RibR 0,2 (± 0,05)
LexA-MS2 0,5 (± 0,03)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-RibR 0,2 (± 0,07)

Lex вес -MS2

AD- 0.7 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,1)

9203 LexA-9020 IRE-MS2

AD- 0,1 (± 0,03)
LexA-MS2 - AD-RibR 0,0 (± 0,01 MS
IRE-MS2 AD-IRP 23.0 (± 3,4)
LexA-MS2 RFN mutAAA -MS2 AD-RibR 0,6 (± 0,05)
MS2- RFN mutAAA AD-RibR 3,2 (± 1,2)
2

Активность β-галактозидазы (LacZ) в трансформантах дрожжей

3 (± 2,1) MS000 mutN201 -MS2
99 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA-MS2 RFN wt -MS2

03 AD-R

LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibR 7,3 (± 1,9)
Lex -MS2 AD-RibR 0,2 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- AD-RibR 0,520 90x 90A 0,520 90A 9 -MS2 IRE-MS2 AD-RibR 0.2 (± 0,07)
LexA-MS2 RFN wt -MS2 AD- 0,7 (± 0,02)
LexA MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,1)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD- 0,1
LexA-MS2 - AD-RibR 0.0 (± 0,01)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 23,0 (± 3,4)
LexA-MS2 AD-RibR 0,6 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- RFN mutAAA

03 AD4

03 AD42 (± 1,2)

N wt -MS2 AD2 RibR MS 9) Lex4A 9
Гибридный белок 1 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA-MS2

4

AD-RibR 7,3 (± 2,1)
LexA-MS2 MS2- RFN wt

03 AD-4 7.3 (± 1,9)

LexA-MS2 -MS2 AD-RibR 0,2 (± 0,05)
LexA-MS2 0,5 (± 0,03)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-RibR 0,2 (± 0,07)

Lex вес -MS2

AD- 0.7 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,1)

9203 LexA-9020 IRE-MS2

AD- 0,1 (± 0,03)
LexA-MS2 - AD-RibR 0,0 (± 0,01 MS
IRE-MS2 AD-IRP 23.0 (± 3,4)
LexA-MS2 RFN mutAAA -MS2 AD-RibR 0,6 (± 0,05)
MS2- RFN mutAAA AD-RibR 3,2 (± 1,2)
3

Активность β-галактозидазы (LacZ) в трансформантах дрожжей

-ADR 9019,0 (4,5202) -РибРН -ADR
Гибридный белок 1 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единиц)

0 LexA RFN wt -MS2

AD-RibRN 0.1 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRN 0,0 (± 0,01)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- RFN

2

Mut -РибРН

0.1 (± 0,08)
LexA-MS2 - AD-RibRN 0,2 (± 0,11)
LexA-MS2 ADMSib 0,3 (± 0,16)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRN 0,7 (± 0,09)
900 LexA-MSN 900 wt -MS2 AD- 0.7 (± 0,36)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,16)

LexA IRE-MS2

AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP
Гибридный белок 1 Гибридный белок Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA-MS2 RFN wt2 0.1 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRN 0,0 (± 0,01)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- RFN

2

Mut -РибРН

0.1 (± 0,08)
LexA-MS2 - AD-RibRN 0,2 (± 0,11)
LexA-MS2 ADMSib 0,3 (± 0,16)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRN 0,7 (± 0,09)
900 LexA-MSN 900 wt -MS2 AD- 0.7 (± 0,36)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,16)

LexA IRE-MS2

AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 9029,0 (4,5202) 9029,0 (4,5202)

Активность β-галактозидазы (LacZ) в трансформантах дрожжей

-ADR 9019,0 (4,5202) -РибРН -ADR
Гибридный белок 1 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA RFN wt -MS2 AD-RibRN 0.1 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRN 0,0 (± 0,01)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- RFN

2

Mut -РибРН

0.1 (± 0,08)
LexA-MS2 - AD-RibRN 0,2 (± 0,11)
LexA-MS2 ADMSib 0,3 (± 0,16)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRN 0,7 (± 0,09)
900 LexA-MSN 900 wt -MS2 AD- 0.7 (± 0,36)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,16)

LexA IRE-MS2

AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP
Гибридный белок 1 Гибридный белок Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA-MS2 RFN wt2 0.1 (± 0,05)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRN 0,0 (± 0,01)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- RFN

2

Mut -РибРН

0.1 (± 0,08)
LexA-MS2 - AD-RibRN 0,2 (± 0,11)
LexA-MS2 ADMSib 0,3 (± 0,16)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRN 0,7 (± 0,09)
900 LexA-MSN 900 wt -MS2 AD- 0.7 (± 0,36)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,16)

LexA IRE-MS2

AD-RibRN 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 9029,0 (4,5202) 9029,0 (4,5202) 4

Активность β-галактозидазы (LacZ) в трансформантах дрожжей

Lex Lex
Гибридный белок 1 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
9201 LexA- RFN wt -MS2 AD-RibRC 2.8 (± 1,1)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRC 5,5 (± 0,9)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRC 0,5 (± 0,6)
LexA-MS2 MS2- RFN mutA -RibRC 4.8 (± 1,1)
LexA-MS2 - AD-RibRC 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 -20MS2 RibRC 0,0 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRC 0,1 (± 0,03)

LexA-9023 MS2 RF

wt -MS2
AD- 0.7 (± 0,09)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,40)

LexA IRE-MS2

AD-RibRC 0,2 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 23,0 (± 2,799) 9019 9019 9019 9019 902
Гибридный белок 1 Гибридный белок Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA-MS2 RFN wt

2 AD-MS1 -RibRC

2.8 (± 1,1)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRC 5,5 (± 0,9)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRC 0,5 (± 0,6)
LexA-MS2 MS2- RFN mutA -RibRC 4.8 (± 1,1)
LexA-MS2 - AD-RibRC 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 -20MS2 RibRC 0,0 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRC 0,1 (± 0,03)

LexA-9023 MS2 RF

wt -MS2
AD- 0.7 (± 0,09)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,40)

LexA IRE-MS2

AD-RibRC 0,2 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 23,0 (± 2,799) 4,799

Активность β-галактозидазы (LacZ) в трансформантах дрожжей

Lex Lex
Гибридный белок 1 Гибридная РНК Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
9204 9020 MS RFN wt -MS2 AD-RibRC 2.8 (± 1,1)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRC 5,5 (± 0,9)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRC 0,5 (± 0,6)
LexA-MS2 MS2- RFN mutA -RibRC 4.8 (± 1,1)
LexA-MS2 - AD-RibRC 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 -20MS2 RibRC 0,0 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRC 0,1 (± 0,03)

LexA-9023 MS2 RF

wt -MS2
AD- 0.7 (± 0,09)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,40)

LexA IRE-MS2

AD-RibRC 0,2 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 23,0 (± 2,799) 9019 9019 9019 9019 902
Гибридный белок 1 Гибридный белок Гибридный белок 2 β-Gal (единицы)
LexA-MS2 RFN wt

2 AD-MS1 -RibRC

2.8 (± 1,1)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD-RibRC 5,5 (± 0,9)
RFN mutAAA -MS2 AD-RibRC 0,5 (± 0,6)
LexA-MS2 MS2- RFN mutA -RibRC 4.8 (± 1,1)
LexA-MS2 - AD-RibRC 0,1 (± 0,02)
LexA-MS2 -20MS2 RibRC 0,0 (± 0,02)
LexA-MS2 MS2- AD-RibRC 0,1 (± 0,03)

LexA-9023 MS2 RF

wt -MS2
AD- 0.7 (± 0,09)
LexA-MS2 MS2- RFN wt AD- 0,4 (± 0,40)

LexA IRE-MS2

AD-RibRC 0,2 (± 0,02)
LexA-MS2 IRE-MS2 AD-IRP 23,0 (± 2,799) Результат

Дрожжевой трехгибридный анализ

В данной работе дрожжевая трехгибридная система (Putz et al., 1996; SenGupta et al. , 1996) был использован для анализа in vivo взаимодействия белка RibR из B. subtilis с лидером rib мРНК rib ( RFN ) (рис. 1). Кроме того, вариантная форма лидера rib ( RFN mutAAA ), полученная из штамма B. subtilis , избыточно продуцирующего рибофлавин, была протестирована на связывание RibR. RFN mutAAA содержит трехточечные мутации, которые, согласно анализу in silico (Markham & Zuker, 2005), существенно не изменяют вторичную структуру лидера РНК (Mironov et al., 2002). Однако эти мутации могут нарушить связывание модулирующего белкового фактора. Молекулы мРНК анализировали как гибриды с РНК бактериофага MS2. Поскольку относительный порядок РНК MS2 и тестируемых РНК может влиять на силу сигнала (SenGupta et al. , 1996), молекулы гибридной РНК были получены в обеих возможных ориентациях. Одна из тестируемых гибридных РНК-кодирующих плазмид MS2 (pAA1-4, Таблица 1) и pYh2 (Таблица 1, продуцирующая слияние VP16AD-RibR) были совместно введены в S.cerevisiae L40- ura3 клетки, несущие pHybLexA / Zeo-MS2. Полученные трансформанты анализировали на активность репортерного гена ( HIS3 и lacZ ). Штаммы дрожжей, которые были способны расти на чашках без гистидина и которые продуцировали LacZ, как показывает окрашивание X-gal, показали взаимодействие in vivo между RFN и RibR. Сила взаимодействия между RibR и RFN была определена количественно с использованием жидкостного анализа LacZ. Результаты этих экспериментов суммированы в таблице 2: трансформанты, несущие слияние белка оболочки LexA DBD-MS2 и слитого белка VP16AD-RibR вместе с гибридными РНК RFN wt -MS2, показали сильную активность β-gal.Активность была обнаружена с сайтами РНК RFN wt, и MS2 в любой ориентации по отношению друг к другу (7,3 U для обеих ориентаций, линии 1 и 2). Гибридные РНК без последовательностей RFN продуцировали слабую активность LacZ (0,2 и 0,5 ед., Линии 3 и 4) в сочетании с VP16AD-RibR. Гибридная РНК железо-чувствительного элемента (IRE) и MS2 (IRE-MS2) вырабатывала слабую активность LacZ в комбинации с VP16AD-RibR (0,2 ед., Линия 5). Таким образом, активация дрожжевых репортерных генов зависела от присутствия последовательностей RFN в гибридных РНК, показывая, что взаимодействия RFN с RibR были специфичными.Один домен активации не был способен значительно стимулировать экспрессию lacZ в присутствии гибридных РНК (0,7, 0,4 и 0,1 ед., Линии 6, 7 и 8). Кроме того, одно слияние активационного домена и RibR не могло значительно стимулировать экспрессию lacZ в отсутствие гибридных РНК (0,0 ед., Линия 9). Взаимодействие между IRE и железо-регуляторным белком (IRP) обеспечивает сравнительно высокую активность β-гал (23,0 ед., Линия 10) и служит положительным контролем.Взаимодействие RibR с дерегулирующим лидером RFN mutAAA перед MS2 было очень слабым (0,6 U, линия 11) и находилось в пределах диапазона отрицательных контролей. Когда RFN mutAAA был ориентирован ниже MS2, была измерена значительная активность LacZ (3,2 ед., Линия 12). Однако эта активность была ниже, чем активность, обнаруженная для комбинации RibR / RFN wt (7.3U, линия 2).

1

Экспериментальный подход для анализа in vivo взаимодействия RibR из Bacillus subtilis с лидером rib ( RFN ) мРНК rib с использованием дрожжевой трехгибридной системы и Saccharomyces cerevisiae L40- ura3 (Invitrogen). Гибридный белок, содержащий ДНК-связывающий домен (LexA DBD) и РНК-связывающий домен (белок оболочки MS2), локализуется в промоторе репортерных генов HIS3 / lacZ посредством оператора LexA.Этот гибридный белок продуцируется pHybLexA / Zeo-MS2. Второй гибридный белок, кодируемый плазмидами pYh2, pYh3, pYh4 или pYh5 (таблица 1), содержащий домен активации транскрипции VP16AD и RibR, RibR (N-концевую часть), RibR (C-концевую часть) или RibC из B. subtilis активирует транскрипцию репортерных генов, когда находится в непосредственной близости от вышестоящих регуляторных последовательностей гена. RibX обозначает RibR, RibC, RibR (N-концевую часть) или RibR (C-концевую часть). Плазмиды pAA1-4 используются для продукции in vivo и различных молекул гибридной РНК, которые должны быть протестированы на связывание слитых белков.Гибридные РНК состоят из тандемных повторов MS2 (представленных двумя петлями) и ребра дикого типа - лидера RFN wt или мутантного ребра - лидера RFN mutAAA (представленный большой петлей и малой петлей) происходит из штамма B. subtilis с нарушенной регуляцией избыточного продуцирования рибофлавина. «NNN» в малой петле указывает, где расположены дерегулирующие мутации 39 G 40 G 41 G до 39 A 40 A 41 A.Гибридная РНК содержит сайты, которые распознаются двумя РНК-связывающими белками. Полученный трехчленный комплекс приводит к экспрессии репортерных генов ( HIS3 / lacZ ). Только если происходит взаимодействие между тестируемыми белками и мРНК RFN , соответствующие трансформанты дрожжей могут расти на среде без гистидина. Сила взаимодействия между тестируемыми белками и лидерами ребра может быть определена количественно с использованием второго репортера lacZ .

1

Экспериментальный подход для анализа in vivo взаимодействия RibR из Bacillus subtilis с лидером rib ( RFN ) мРНК rib с использованием дрожжевой трехгибридной системы и Saccharomyces cerevisiae L40- ura3 (Invitrogen). Гибридный белок, содержащий ДНК-связывающий домен (LexA DBD) и РНК-связывающий домен (белок оболочки MS2), локализуется в промоторе репортерных генов HIS3 / lacZ посредством оператора LexA.Этот гибридный белок продуцируется pHybLexA / Zeo-MS2. Второй гибридный белок, кодируемый плазмидами pYh2, pYh3, pYh4 или pYh5 (таблица 1), содержащий домен активации транскрипции VP16AD и RibR, RibR (N-концевую часть), RibR (C-концевую часть) или RibC из B. subtilis активирует транскрипцию репортерных генов, когда находится в непосредственной близости от вышестоящих регуляторных последовательностей гена. RibX обозначает RibR, RibC, RibR (N-концевую часть) или RibR (C-концевую часть). Плазмиды pAA1-4 используются для продукции in vivo и различных молекул гибридной РНК, которые должны быть протестированы на связывание слитых белков.Гибридные РНК состоят из тандемных повторов MS2 (представленных двумя петлями) и ребра дикого типа - лидера RFN wt или мутантного ребра - лидера RFN mutAAA (представленный большой петлей и малой петлей) происходит из штамма B. subtilis с нарушенной регуляцией избыточного продуцирования рибофлавина. «NNN» в малой петле указывает, где расположены дерегулирующие мутации 39 G 40 G 41 G до 39 A 40 A 41 A.Гибридная РНК содержит сайты, которые распознаются двумя РНК-связывающими белками. Полученный трехчленный комплекс приводит к экспрессии репортерных генов ( HIS3 / lacZ ). Только если происходит взаимодействие между тестируемыми белками и мРНК RFN , соответствующие трансформанты дрожжей могут расти на среде без гистидина. Сила взаимодействия между тестируемыми белками и лидерами ребра может быть определена количественно с использованием второго репортера lacZ .

В самом RibR взаимодействие было локализовано на карбоксиконцевой части белка: N-концевая часть RibR (RibRN) была протестирована на взаимодействие с RFN wt и RFN mutAAA (таблица 3). Взаимодействия обнаружено не было, о чем свидетельствует практически отсутствие активности LacZ в соответствующих рекомбинантных штаммах дрожжей (строки 1–4). Показаны данные для отрицательного контроля (строки 5–10) и положительного контроля (строка 11).С-концевая часть RibR (RibRC) взаимодействовала с RFN wt в обеих возможных ориентациях (таблица 4; 2.8 и 5.5 U, линии 1 и 2). Находясь выше MS2, RFN mutAAA не являлся мишенью для связывания С-концевой части RibR (0,5 ед., Линия 3). Взаимодействие с RFN mutAAA было обнаружено только тогда, когда RFN mutAAA располагалось ниже MS2 (4.8 U, строка 4). Однако это кажущееся взаимодействие было все же слабее, чем для комбинации RibRC / RFN wt (5.5 U, линия 2). Отрицательные контроли (строки 5–10) не вырабатывали активности LacZ. Положительный контроль вызывал сильную активность LacZ (линия 11).

С-концевая флавокиназная часть RibC (аминокислоты 192–303) из B. subtilis имеет значительное сходство последовательности (41% идентичных аминокислот) с N-концевой частью RibR (Соловьева et al., 1999). Поэтому RibC был также протестирован на связывание RFN . RibC не взаимодействовал ни с RFN wt , ни с RFN mutAAA или IRE, что было выведено из практически отсутствующей активности LacZ во всех штаммах (данные не показаны).

Мониторинг продукции флавинов в

ribR -дефектный штамм B. subtilis

Нокаут-штамм ribR BFS69 (Kobayashi et al., 2003) анализировали в отношении нарушения регуляции биосинтеза флавинов по сравнению с контролем дикого типа ( B. subtilis Marburg 168). Скорость роста на минимальной среде у всех штаммов была одинаковой. Супернатанты активно растущих периодических культур анализировали на содержание флавинов (рибофлавин, FMN и FAD) в разное время (рис. 2). В супернатанте нокаутного штамма ribR было обнаружено значительно (на 25%) больше флавина (рибофлавина, FMN и FAD) в стационарной фазе роста по сравнению со штаммом дикого типа, что указывает на умеренное нарушение регуляции.

2

Мониторинг секреции флавина (рибофлавина, FMN и FAD) штаммов Bacillus subtilis , растущих на минимальной среде Спизизена в отсутствие экзогенного рибофлавина. Штамм дикого типа - это B. subtilis 168 Marburg. Штамм BFS69 представляет собой нокаут-штамм B. subtilis 168 Marburg ribR (Kobayashi et al. , 2003).

2

Мониторинг секреции флавина (рибофлавина, FMN и FAD) штаммов Bacillus subtilis , растущих на минимальной среде Спизизена в отсутствие экзогенного рибофлавина.Штамм дикого типа - это B. subtilis 168 Marburg. Штамм BFS69 представляет собой нокаут-штамм B. subtilis 168 Marburg ribR (Kobayashi et al. , 2003).

Обсуждение

Активности LacZ рекомбинантных штаммов дрожжей однозначно показывают, что RibR in vivo способен связываться с мРНК RFN . Отрицательные контроли давали слабую активность LacZ, показывая только то, что связывание RibR было специфическим.Кроме того, активность связывания явно может быть приписана С-концевой части RibR с еще неизвестной функцией. N-концевая часть RibR, о котором сообщается, флавокиназный домен не участвует в связывании с ведущей мРНК rib .

RibR, по-видимому, менее эффективно связывается с мутантной формой RFN ( RFN mutAAA ). Однако значительно сниженное связывание наблюдалось только в том случае, если RFN был помещен перед MS2. Когда он расположен ниже по течению, RibR, по-видимому, все еще связывается с RFN mutAAA .Эти расхождения, как известно, возникают при использовании дрожжевой трехгибридной системы и являются причиной рутинного анализа двух возможных гибридов (SenGupta et al. , 1996). В целом, на данном этапе неясно, как именно три мутации в пределах RFN mutAAA влияют на связывание RibR.

Эксперимент по выращиванию штамма ribR -дефектный B. subtilis проводили с целью дальнейшего анализа функции ribR .Штамм BFS69 с делецией ribR секретировал примерно на 25% больше флавина (рибофлавина, FMN и FAD) в культуральную среду (по сравнению со штаммом дикого типа), что указывает на умеренное нарушение регуляции. Ранее было показано, что RibR не участвует во внутриклеточных пулах FMN в штамме дикого типа или в мутантах с дефектом ribC с пониженной активностью флавокиназы / FAD-синтетазы (RibC) (Solovieva et al. , 2005). Таким образом, очень маловероятно, что соотношение рибофлавин: FMN смещено в сторону рибофлавина после делеции RibR и что фенотип сверхпродуцирующего рибофлавина штамма ribR -дефектного является следствием прямого механизма терминации, чувствительного к метаболитам, который был описан ранее ( Миронов и др., 2002).

Согласно модели рибопереключателя, белковый фактор не участвует в регуляции генов rib (Mironov et al. , 2002). В этой работе было показано, что RibR специфически связывается с RFN лидера rib оперона биосинтеза рибофлавина и что мутант с дефектом ribR нарушает регуляцию синтеза флавина. Оба открытия предполагают, что, по аналогии с системой регуляции pyr - B.subtilis (Switzer et al. , 1999), РНК-связывающий белок RibR может непосредственно участвовать в регуляции генов rib . Возможно, RibR продуцирует комодулятор FMN за счет своей собственной N-концевой флавокиназной активности. FMN-активированный RibR может стабилизировать анти-антитерминаторную (терминаторную) структуру мРНК RFN , вызывая терминацию транскрипции rib генов в транс-. Мутации 39 G 40 G 41 G до 39 A 40 A 41 A в RFN (рис.1), как сообщалось, вызывают нарушение регуляции оперона rib (Kil et al. , 1992). Нуклеотиды дикого типа 39 G 40 G 41 G являются частью малой петли внутри большой вторичной структуры RFN (Миронов и др. , 2002; Винклер и др. , 2002) . Эти три мутации могут нарушать связывание RibR, что, в свою очередь, может объяснять нарушение регуляции фенотипа штамма, несущего эти мутации.

Нарушение регуляции биосинтеза рибофлавина у RibR-дефектного мутанта BFS69 было очевидным только в стационарной фазе и определялось путем измерения количества рибофлавина в культуральной среде.Поскольку рибофлавин не выводится активно из организма B. subtilis , должно присутствовать высокое внутриклеточное количество рибофлавина, чтобы обеспечить диффузию этого метаболита через цитоплазматическую мембрану в культуральную среду. Такая высокая концентрация, вероятно, достигается только в стационарной фазе, что может объяснить зависимость этого фенотипа от фазы роста.

Таким образом, это исследование является отправной точкой для дальнейших исследований функции RibR и регуляции биосинтеза рибофлавина у B.subtilis .

Благодарности

Кадзуо Кобаяши благодарит за предоставление штамма BSF69 с дефектом ribR .

Список литературы

(

1996

)

Высокочувствительный и нелетальный планшетный анализ бета-галактозидазы для дрожжей

.

Trends Genet

12

:

340

-

341

.

(

2005

)

Биосинтез флавокоферментов

.

Nat Prod Rep

22

:

324

-

350

.

(

2007

)

Регуляторный белок pyrr Bacillus subtilis специфически взаимодействует in vivo с тремя нетранслируемыми областями в пределах pyr мРНК биосинтеза пиримидина

.

Микробиология

153

:

693

-

700

.

(

1992

)

Рибофлавиновый оперон Bacillus subtilis : необычное симметричное расположение регуляторной области

.

Мол Генет

233

:

483

-

486

.

и другие. . (

2003

)

Essential Bacillus subtilis гены

.

Proc Natl Acad Sci USA

100

:

4678

-

4683

.

(

1998

)

На регуляцию биосинтеза рибофлавина в Bacillus subtilis влияет активность флавокиназы / флавинадениндинуклеотидсинтетазы, кодируемой ribC

.

Дж Бактериол

180

:

950

-

955

.

(

2005

)

Веб-сервер Dinamelt для прогнозирования плавления нуклеиновых кислот

.

Nucleic Acids Res

33

:

W577

-

W581

.

(

2002

)

Восприятие малых молекул формирующейся РНК: механизм контроля транскрипции у бактерий

.

Ячейка

111

:

747

-

756

.

(

2001

)

Биосинтез рибофлавина, биотина, фолиевой кислоты и кобаламина

.

Bacillus subtilis и его ближайшие родственники: от генов к клеткам

(, ред.), Стр.

271

-

286

.

ASM Press

,

Вашингтон, округ Колумбия

.

(

1996

)

Тригибридная система для анализа и обнаружения РНК-белковых взаимодействий

.

Nucleic Acids Res

24

:

4838

-

4840

.

(

1989

)

Молекулярное клонирование: лабораторное руководство

,

Лаборатория Колд-Спринг-Харбор

,

Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк

.

(

1996

)

Анализ in vitro бета-галактозидазы из дрожжей

.

Biotechniques

20

:

960

-

962

.

(

1996

)

Трехгибридная система для обнаружения взаимодействий РНК-белок in vivo

.

Proc Natl Acad Sci USA

93

:

8496

-

8501

.

(

1999

)

Ген ribr кодирует монофункциональную рибофлавин киназу, которая участвует в регуляции рибофлавинового оперона Bacillus subtilis

.

Микробиология

145

: ():

67

-

73

.

(

2005

)

Ген ribr , кодирующий рибофлавинкиназу, из Bacillus subtilis является частью оперона размером 10 т.п.н., который негативно регулируется продуктом гена yrzc

.

FEMS Microbiol Lett

243

:

51

-

58

.

(

1958

)

Трансформация биохимически дефицитных штаммов Bacillus subtilis дезоксирибонуклеатом

.

Proc Natl Acad Sci USA

44

:

1072

-

1078

.

(

1999

)

Регулирование оперона биосинтеза пиримидина Bacillus subtilis путем ослабления транскрипции: контроль экспрессии гена с помощью мРНК-связывающего белка

.

Prog Nucleic Acid Res Mol Biol

62

:

329

-

367

.

(

2002

)

Регуляция биосинтеза рибофлавина и транспортных генов в бактериях путем ослабления транскрипции и трансляции

.

Nucleic Acids Res

30

:

3141

-

3151

.

(

2002

)

Структура мРНК, которая контролирует экспрессию гена путем связывания FMN

.

Proc Natl Acad Sci USA

99

:

15908

-

15913

.

Заметки автора

© 2007 Федерация европейских микробиологических обществ

504104: Метотрексат Полиглутаматы | Лабкорп

1.Данила М.И., Хьюз Л.Б., Браун Е.Е. и др. Измерение уровней метотрексата и полиглутамата в эритроцитах: готовы к клиническому применению при ревматоидном артрите? Curr Rheumatol Rep. Октябрь 2010 г .; 12 (5): 342-347. 20665136

2. Хендель Дж., Найфорс А. Фармакокинетика метотрексата в эритроцитах при псориазе. Eur J Clin Pharmacol. 1984; 27 (5): 607-610. 6519167

3. Kremer JK. К лучшему пониманию метотрексата. Arthritis Rheum. 2004 May; 50 (5): 1370-1382.15146406

4. Фэрбенкс Л.Д., Рюкеманн К., Цю Ю. и др. Метотрексат подавляет первую предопределенную стадию биосинтеза пурина в митоген-стимулированных Т-лимфоцитах человека: метаболическая основа эффективности при ревматоидном артрите? Biochem J. 1999 Aug 15; 342 (Pt 1): 143-152. 22309614

5. Angelis-Stoforidis P, Vajda FJ, Christophidis N. Уровни полиглутамата метотрексата в циркулирующих эритроцитах и ​​полиморфных модификациях коррелируют с клинической эффективностью при ревматоидном артрите. Clin Exp Rheumatol. 1999 май-июнь; 17 (3): 313-320. 10410264

6. de Rotte MC, den Boer E, de Jong PH, et al. Метотрексат и полиглутаматы в эритроцитах связаны с более низкой активностью заболевания у пациентов с ревматоидным артритом. Ann Rheum Dis. 2015 фев; 74 (2): 408-414. 24297383

7. Woolf RT, West SL, Arenas-Hernández M, et al. Полиглутаматы метотрексата как маркер соблюдения пациентом режима лечения и клинического ответа при псориазе: одноцентровое проспективное исследование. Br J Dermatol. 01 июля 2012 г .; 67 (1): 165-173. 22309614

8. Hobl EL, Jilma B, Erlacher L, et al. Короткоцепочечный полиглутамат метотрексата как параметр исхода у пациентов с ревматоидным артритом, получающих метотрексат. Clin Exp Rheumatol. март-апрель 2012 г .; 30 (2): 156-163. 22152098

9. Штамп Л.К., О'Доннелл Дж. Л., Чепмен П. Т. и др. Концентрации метотрексата и полиглутамата не связаны с контролем заболевания у пациентов с ревматоидным артритом, получающих длительную терапию метотрексатом. Arthritis Rheum. февраля 2010 г .; 62 (2): 359-368. 20112376

10. Singh Ja, Furst DE, Bharat A, et al. Обновление 2012 г. рекомендаций Американского колледжа ревматологов 2008 г. по использованию модифицирующих болезнь противоревматических препаратов и биологических агентов при лечении ревматоидного артрита. Arthritis Care Res. Май 2012 г .; 64 (5): 625-639. 22473917

11. Сааг К.Г., Тенг Г.Г., Паткар Н.М. и др. Рекомендации Американского колледжа ревматологии, 2008 г., по использованию небиологических и биологических модифицирующих заболевание противоревматических препаратов при ревматоидном артрите. Arthritis Rheum. 15 июня 2008 г .; 59 (6): 762-784. 18512708

Морфин снижает концентрацию и эффекты клопидогреля

Тимир К. Пол, MD, PhD, MPH, FACC

Review

J Am Coll Cardiol.

Hobl EL, Stimpfl T, Ebner J, et al. Морфин снижает концентрацию и эффекты клопидогреля: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование, 2013 г. DOI: 0.1016 / j.jacc.2013.10.068.

Подробности исследования

Это рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое перекрестное исследование было проведено для оценки взаимодействия между морфином и клопидогрелом, антагонистом рецепторов P2Y 12 .Критериями включения в исследование были небеременные пациенты в возрасте ≥18 лет, способные полностью понять характер и цель исследования. Пациенты, принимавшие нестероидные противовоспалительные препараты или ингибиторы тромбоцитов, у которых были выявлены нарушения свертывания крови, соответствующие нарушения функции почек или печени, хронические инфекционные заболевания (ВИЧ, гепатит B и C) или у которых были противопоказания к клопидогрелю или морфину, были исключены из исследования. изучение.

Морфин (5 мг в / в болюс) или плацебо (0.9% NaCl) вводили слепые врачи. Был выбран минимальный период вымывания 14 дней, потому что он превышает выживаемость тромбоцитов in vivo и потому что эффект ингибирования P2Y 12 ослабевает в течение 5 дней. В исследовании приняли участие двадцать четыре здоровых субъекта; 12 пациентов были рандомизированы в группу морфина, а 12 пациентов были рандомизированы в группу плацебо и пересмотрены после 14-дневного периода вымывания. Все пациенты получали ударную дозу клопидогреля 600 мг после инъекции плацебо или морфина.Фармакокинетику определяли с помощью тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии, а эффекты клопидогреля измеряли с помощью тестов функции тромбоцитов.

Средний возраст здоровых испытуемых составил 32 ± 9 лет со средним индексом массы тела 24 ± 3 кг / м².

P

P

P

P

P

P

Инъекция морфина задерживала максимальные концентрации клопидогреля в плазме (T max : 105 против 83 мин, морфин против плацебо; = 0,025) и сниженный уровень клопидогреля активный метаболит (от 171 до 113 нг / мл, плацебо против морфина; =.025). Морфин уменьшал общее воздействие его активного метаболита на 52% (= 0,001), измеряемое по площади под уровнями кривой. Морфин увеличивал время, необходимое для максимального ингибирования агрегации тромбоцитов, в среднем в 2 раза (3 часа против 1,25 часа; <0,001). Остаточная агрегация тромбоцитов была выше через 1–4 часа после инъекции морфина (<0,005). Морфин задерживал ингибирование образования тромбоцитарной пробки при высоких скоростях сдвига (n = 21; 75 мин против 45 мин; <0,004).

Авторы пришли к выводу, что морфин замедляет резорбцию клопидогреля и снижает уровни активного метаболита клопидогреля в плазме, вызывая ослабление эффектов клопидогреля на тромбоциты, что может снизить лечебный эффект у восприимчивых людей.

Комментарий Лекарственное средство - лекарственное взаимодействие между морфином и клопидогрелом

T

Использование комбинации аспирина и ингибиторов P2Y 12 является стандартом лечения пациентов с острым коронарным синдромом (ОКС). 1,2 Клопидогрель является антагонистом рецептора P2Y 12 , который подавляет функцию тромбоцитов, индуцированную аденозиндифосфатом. 1,2 Клопидогрель - это пролекарство, которое требует двухэтапной метаболической активации ферментами цитохрома P450, 3 , что объясняет его относительно медленное начало действия.Опиаты замедляют опорожнение желудка, тем самым вызывая замедленное всасывание, что может снизить пиковые уровни пероральных препаратов в плазме. 4 Хотя морфин рекомендуется для обезболивания при инфаркте миокарда (ИМ), 1 имеется мало данных рандомизированных контролируемых исследований, подтверждающих его чистую пользу. Было показано, что использование морфина связано с более высокой смертностью у пациентов с ИМ без подъема сегмента ST (ИМбпST). 5 Кроме того, было показано, что морфин задерживает активность прасугреля или тикагрелора у пациентов с ИМ с подъемом сегмента ST (ИМпST). 6

Это испытание показало потенциальное лекарственное взаимодействие между морфином и клопидогрелом. Морфин снижает исходную концентрацию активного метаболита в плазме за счет уменьшения его резорбции, что может отрицательно сказаться на лечении у восприимчивых людей. Остаточная реактивность тромбоцитов была значительно выше после инъекции морфина. Морфин снижает концентрацию активного метаболита, вызывая фармакокинетический профиль, аналогичный нагрузочной дозе 300 мг, несмотря на то, что он был загружен 600 мг 7,8 ; это может привести к большему риску серьезных сердечно-сосудистых событий. 9 У пациентов с ОКС быстрое подавление тромбоцитов необходимо для уменьшения первичных исходов, что подтверждается в течение первых часов, когда прасугрел проявляет быстрое начало действия по сравнению с клопидогрелом. 10

Это исследование включало только здоровых субъектов и имело небольшой размер выборки. Таким образом, я был бы осторожен при внедрении этого результата у пациентов с ОКС в целом. Необходимы более масштабные исследования с участием пациентов с ОКС. Хотя это исследование показало связь снижения эффективности клопидогреля при одновременном назначении с морфином, оно не выявило причинно-следственной связи.

До тех пор, пока не появятся дополнительные доказательства, следует по возможности избегать одновременного введения морфина и клопидогреля, например, в условиях ИМпST, когда немедленный инвазивный подход является ключевым методом лечения. Если требуется обезболивание, в этом случае следует использовать нитроглицерин, а не морфин, за исключением случаев, когда у пациента наблюдается инфаркт правого желудочка, связанный с нижним ИМпST. Если во время ИМбпST применяется отсроченное ЧКВ или поздняя инвазивная стратегия, при необходимости все равно будет применяться морфин.Но нитроглицерин будет первым препаратом выбора для всех пациентов с сердечной болью в груди.

Было показано, что начало ингибирования тромбоцитов задерживается при приеме прасугрела и тикагрелора у пациентов, перенесших первичное чрескожное коронарное вмешательство, и что морфин дополнительно снижает эффект ингибирования тромбоцитов при одновременном применении с этими агентами. 6 Данные показывают, что эта связь снижения эффективности ингибирования тромбоцитов не ограничивается клопидогрелом, но также применима к другим мощным ингибиторам P2Y 12 .Следовательно, более сильные ингибиторы P2Y 12 , такие как прасугрель или тикагрелор, могут не быть альтернативой и могут не обеспечивать большей эффективности при одновременном применении морфина, хотя в этом отношении необходимы дополнительные доказательства.

У пациентов, уже принимающих клопидогрель, морфин можно использовать с меньшими опасениями, поскольку препарат уже введен в систему. Но пациенты, которые не привыкли к клопидогрелу, будут уязвимыми людьми с ИМ и могут нуждаться в морфине для облегчения боли, а также для немедленного подавления более высоких тромбоцитов.Возможно, нам все еще придется использовать морфин у некоторых пациентов, которые испытывают сокрушительную боль в груди. Но если бы таких пациентов можно было немедленно доставить в лабораторию катетеризации, мы минимизировали бы использование морфина. В любом случае, если пациенты испытывают такую ​​сильную неконтролируемую боль в груди при максимальном медикаментозном лечении, включая нитроглицерин, показан немедленный инвазивный подход.

Врачи должны знать о связи ингибирования тромбоцитов с антагонистами P2Y 12 и морфином.Лучшим подходом, вероятно, было бы минимизировать использование морфина у пациентов с коронарной ишемией и при необходимости использовать нитроглицерин.

Ссылки

J Am Coll Cardiol.

1. О’Гара П.Т., Кушнер Ф.Г., Ашейм Д.Д. и др. Рекомендации ACCF / AHA по ведению инфаркта миокарда с подъемом сегмента ST, 2013: отчет Фонда Американского колледжа кардиологов / Целевой группы Американской кардиологической ассоциации по практическим рекомендациям. 2013; 61: e78-e140.

J Am Coll Cardiol.

2. Андерсон Дж. Л., Адамс С. Д., Антман Е. М. и др. Обновление 2012 года, посвященное ACCF / AHA, включено в рекомендации ACCF / AHA 2007 по ведению пациентов с нестабильной стенокардией / инфарктом миокарда без подъема сегмента ST: отчет Фонда Американского колледжа кардиологов / Целевой группы Американской кардиологической ассоциации по практическим рекомендациям. 2013; 61: e179-e347.

J Am Coll Cardiol.

3. Бейтс Э.Р., Лау В.С., Анджолилло Д.Д. Клопидогрел-лекарственные взаимодействия. 2011; 57: 1251-1263.

Br J Clin Pharmacol.

4. Nimmo WS, Heading RC, Wilson J, Tothill P, Prescott LF. Подавление опорожнения желудка и всасывания наркотиков наркотическими анальгетиками. 1975; 2: 509-513.

Am Heart J

5. Майне Т.Дж., Роу М.Т., Чен А.Й. и др. Связь между внутривенным введением морфина и исходами при острых коронарных синдромах: результаты Инициативы по улучшению качества CRUSADE. . 2005; 149: 1043-1049.

J Am Coll Cardiol.

6. Пароди Дж., Валенти Р., Белланди Б. и др. Сравнение нагрузочных доз прасугрела и тикагрелора у пациентов с инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST: первичное ЧКВ исследование RAPID (Rapid Activity of Platelet Inhibitor Drugs).2013; 61: 1601-1606.

J Pharm Biomed Anal.

7. Такахаши М., Панг Х., Кавабата К., Фарид Н.А., Курихара А. Количественное определение активного метаболита клопидогреля в плазме человека с помощью ЖХ-МС / МС. 2008; 48: 1219-1224.

Clin Pharmacol Ther.

8. Фарид Н.А., Пейн С.Д., Смолл Д.С. и др. Ингибирование цитохрома P450 3A кетоконазолом по-разному влияет на фармакокинетику и фармакодинамику прасугрела и клопидогреля. 2007; 81: 735-741.

Сердце.

9.Силлер-Матула Дж. М., Хубер К., Крист Дж. И др. Влияние ударной дозы клопидогреля на клинический исход у пациентов, перенесших чрескожное коронарное вмешательство: систематический обзор и метаанализ. 2011; 97: 98-105.

N Engl J Med.

10. Wiviott SD, Braunwald E, McCabe CH, et al. Прасугрел в сравнении с клопидогрелом у пациентов с острыми коронарными синдромами. 2007; 357: 2001-2015.

Об авторе

T

imir

K. P

aul

, MD, P

h

D, MPh, FACC

, доцент кафедры кардиологии Медицина, и директор отделения кардиологической реабилитации и профилактики в Медицинском колледже Квиллен, Государственный университет Восточного Теннесси, Джонсон-Сити, Теннесси.Он получил степень доктора медицины в Медицинском колледже Дакки, Университет Дакки, Дакка, Бангладеш, а также степени доктора философии и магистра здравоохранения в Университете Тулейна. Доктор Пол стажировался по кардиологии в клинике Окснера, Новый Орлеан, Лос-Анджелес, и по интервенционной кардиологии в Университете Северной Каролины, Чапел-Хилл. Он опубликовал множество оригинальных исследовательских статей и обзоров.

Влияние диеты с низким гликемическим индексом на инсулинорезистентность среди подростков с ожирением и неалкогольной жировой болезнью печени: рандомизированное контролируемое исследование

  • Fan Y, Zhang C, Bu J.Связь между отдельными металлическими элементами сыворотки и ожирением у детей и подростков в США. 2017; 9 (2): 104. https://doi.org/10.3390/nu

  • 04

  • Schwingshackl L, Hobl LP, Hoffmann G. Влияние диеты с низким гликемическим индексом / низкой гликемической нагрузкой по сравнению с диетами с высоким гликемическим индексом / высокой гликемической нагрузкой на избыточный вес / ожирение и связанные с ним факторы риска у детей и подростков: систематический обзор и метаанализ . Нутр Дж. 2015; 14: 87. https://doi.org/10.1186 / s12937-015-0077-1

  • Гупта А., Сачдева А., Махаджан Н., Гупта А., Сарин Н., Панди Р.М. и др. Распространенность педиатрического метаболического синдрома и связанных с ним факторов риска среди детей школьного возраста 10-16 лет, проживающих в округе Шимла, Химачал-Прадеш, Индия. Индийский J Endocrinol Metab. 2018; 22 (3): 373-8. https://doi.org/10.4103/ijem.IJEM_251_17

  • Mohameda AA, Sabry S, Abdallah AM, Elazeem NA, Refaey D, Algebaly HA, et al.Циркулирующие адипокины у детей с неалкогольной жировой болезнью печени: возможные неинвазивные диагностические маркеры. Энн Гастроэнтерол. 2017; 30 (4): 457-63. https://doi.org/10.20524/aog.2017.0148

  • Mexitalia M, Utari A, Sakundarno M, Yamauchi T., Subagio HW, Soemantri A. Sindroma метаболик пада ремая ожирение. M Med Индонезия. 2009; 43 (6): 300-5.

  • Кескин М., Куртоглу С., Кендирчи М., Атабек М.Э., Язычи С. Оценка модели гомеостаза более надежна, чем соотношение глюкоза / инсулин натощак и количественный индекс проверки чувствительности к инсулину для оценки инсулинорезистентности среди детей и подростков с ожирением.Педиатрия. 2005; 115 (4): e500-3. https://doi.org/10.1542/peds.2004-1921

  • Joslowski G, Halim J, Goletzke J, Gow M, Ho M, Louie JC и др. Пищевая гликемическая нагрузка, инсулиновая нагрузка и потеря веса у тучных и инсулинорезистентных подростков: исследование RESIST. Clin Nutr. 2015; 34 (1): 89-94. https://doi.org/10.1016/j.clnu.2014.01.015

  • Schwarz JM, Noworolski SM, Erkin-Cakmak A, Korn NJ, Wen MJ, Tai VW и др. Влияние диетического ограничения фруктозы на жир в печени, липогенез de novo и кинетику инсулина у детей с ожирением.Гастроэнтерология. 2017; 153 (3): 743-52. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2017.05.043

  • Scinta W, Bayes H, Smith N. Инсулинорезистентность и голод при детском ожирении: взгляд пациента и врача. Adv Ther. 2017; 34 (10): 2386-91. https://doi.org/10.1007/s12325-017-0606-8

  • Romualdo MC, Nóbrega FJ, Escrivà o MA. Инсулинорезистентность у детей и подростков с ожирением. J Pediatr (Рио Дж). 2014; 90 (6): 600-7. https: // doi.org / 10.1016 / j.jped.2014.03.005

  • Ma J, Fox CS, Jacques PF, Speliotes EK, Hoffmann U, Smith CE и др. Подслащенные сахаром напитки, диетические газированные напитки и ожирение печени в когортах Фрамингемского исследования сердца. J Hepatol. 2015; 63 (2): 462-9. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2015.03.032

  • тен Хор Г.А., Пласки Г., Шолс А.М., Кок Г. Борьба с подростковым ожирением: комплексная физиологическая и психологическая перспектива. Curr Opin Clin Nutr Metab Care.2014; 17 (6): 521-4. https://doi.org/10.1097/MCO.0000000000000099

  • Kaya A, Koçyiğit C, atli G, Özkan EB, Dündar BN. Связь между гликемической вариабельностью и воспалительными маркерами у детей с ожирением, инсулинорезистентностью и метаболическим синдромом. J Clin Res Pediatr Endocrinol. 2017; 9 (3): 202-7. https://doi.org/10.4274/jcrpe.4031

  • Mariman EC. Адипобиологическая модель восстановления веса после похудания. Адипобиология.2011; 3: 9-15. https://doi.org/10.14748/adipo.v3.265

  • Рануччи С., Пиппи Р., Буратта Л., Айелло С., Джанфреди В., Пиана Н. и др. Эффекты интенсивного вмешательства в образ жизни для лечения детей и подростков с избыточным весом / ожирением. Biomed Res Int. 2017; 2017: 8573725. https://doi.org/10.1155/2017/8573725

  • Сингхал Н., Мисра А., Шах П., Гулати С., Бхатт С., Шарма С. и др. Влияние интенсивного школьного просвещения по вопросам питания и изменения образа жизни на инсулинорезистентность, функцию ²-клеток, индекс предрасположенности и субклиническое воспаление среди азиатских индийских подростков: исследование с контролируемым вмешательством.Metab Syndr Relat Disord. 2011; 9 (2): 143-50. https://doi.org/10.1089/met.2010.0094

  • Mager DR, Iñiguez IR, Gilmour S, Yap J. Влияние диетического вмешательства с низким содержанием фруктозы и низким гликемическим индексом / нагрузкой (ХРУПКОЕ) на показатели функции печени, кардиометаболические факторы риска и состав тела у детей и подростков, употребляющих неалкогольные напитки. жировая болезнь печени (НАЖБП). JPEN J Parenter Enteral Nutr. 2015; 39 (1): 73-84. https://doi.org/10.1177/0148607113501201

  • Кокрофт Э.Дж., Уильямс Калифорния, Томлинсон О.В., Влахопулос Д., Джекман С.Р., Армстронг Н. и др.Интервальные упражнения высокой интенсивности являются эффективной альтернативой упражнениям средней интенсивности для улучшения толерантности к глюкозе и чувствительности к инсулину у мальчиков-подростков. J Sci Med Sport. 2015; 18 (6): 720-4. https://doi.org/10.1016/j.jsams.2014.10.001

  • Botero D, Ebbeling CB, Blumberg JB, Ribaya-Mercado JD, Creager MA, Swain JF, et al. Острое влияние пищевого гликемического индекса на антиоксидантную способность в исследовании кормления с контролируемым питанием. Ожирение (Серебряная весна).2009; 17 (9): 1664-70. https://doi.org/10.1038/oby.2009.203

  • Соломон Т.П., Хаус Дж. М., Келли К. Р., Кук М. Д., Риккарди М., Рокко М. и др. Рандомизированное исследование влияния 7-дневной диеты с низким гликемическим индексом и упражнений на инсулинорезистентность у пожилых людей с ожирением1–3. Am J Clin Nutr. 2009; 90 (5): 1222-9. https://doi.org/10.3945/ajcn.2009.28293

  • Марсон ЕС, Делеватти Р.С., Прадо А.К., Нетто Н., Круэль Л.Ф. Влияние аэробных тренировок, тренировок с отягощениями и комбинированных тренировок на маркеры инсулинорезистентности у детей и подростков с избыточным весом или ожирением: систематический обзор и метаанализ.Предыдущая Мед. 2016; 93: 211-8. https://doi.org/10.1016/j.ypmed.2016.10.020

  • Ballerini MG, Bergadá I, Rodríguez ME, Keselman A, Bengolea VS, Pipman V, et al. Уровень инсулина и показатели чувствительности к инсулину у здоровых детей и подростков. Arch Argent Pediatr. 2016; 114 (4): 329-36. https://doi.org/10.5546/aap.2016.eng.329

  • маркеров терапевтического ответа на метотрексат при ревматоидном артрите: где мы находимся?

    Метотрексат (MTX) является наиболее часто используемым модифицирующим заболевание противоревматическим препаратом (DMARD) для лечения ревматоидного артрита (RA).Однако, несмотря на их эффективность и доступность, часто требуются дополнительные БПВП или биологические агенты для достижения рекомендуемых целей - низкой активности заболевания или ремиссии. Несмотря на то, что он хорошо переносится большинством, у некоторых пациентов развиваются важные побочные эффекты, такие как цитопения, нежелательные явления со стороны желудочно-кишечного тракта (стоматит, тошнота) или аномальные функциональные тесты печени, что может ограничить его использование и может привести к дополнительным расходам на здравоохранение. Учитывая клинические последствия широкого использования метотрексата при РА, в различных исследованиях оценивалась роль потенциальных биомаркеров в прогнозировании эффективности лечения метотрексатом.Эти биомаркеры включают уровни полиглутамата (PG) RBC MTX; генетическая изменчивость генов соответствующих биологических и метаболических путей; профили экспрессии генов; сывороточные белки. В этом документе представлены обновленные данные о биомаркерах ответа на лечение метотрексатом.

    1. Введение

    Метотрексат известен как мощное противовоспалительное и иммунодепрессантное средство, которое действует, уменьшая пролиферацию клеток, увеличивая высвобождение аденозина и ингибируя ферменты метаболизма фолиевой кислоты [1].Метотрексат также изменяет экспрессию молекул клеточной адгезии, изменяет продукцию цитокинов и влияет на гуморальные реакции, формирование и отложение костей [2]. Метотрексат является якорным DMARD для лечения РА и других типов воспалительного артрита (псориатический артрит, ювенильный идиопатический артрит и т. Д.) Из-за его эффективности в уменьшении суставного воспаления и предотвращении повреждения суставов [3]. С тех пор, как в 1980-х годах его стали широко использовать, метотрексат значительно улучшил исходы РА [4].Несмотря на доступность [5], метотрексат не всегда эффективен и у некоторых пациентов ассоциируется с клинически значимыми побочными эффектами, такими как цитопения, отклонения в тестах функции печени и, в редких случаях, лимфома и другие серьезные состояния. Внедрение биологических БПВП за последние 15 лет произвело дальнейшую революцию в лечении РА и ювенильного идиопатического артрита (ЮИА), но эти новые препараты более дороги, чем метотрексат, а также имеют потенциальные побочные эффекты.

    Из-за сложности патогенеза РА и неоднородности проявлений и тяжести заболевания [6] существует значительная вариабельность реакции пациентов на каждое DMARD, будь то метотрексат или биологическое DMARD.Например, примерно у 30–40% пациентов не наблюдается хорошего ответа на метотрексат, несмотря на оптимальные режимы дозирования [7]. Несмотря на большой интерес к открытию биомаркеров терапевтического ответа и токсичности БПВП при РА и других типах воспалительного артрита, существует нехватка надежных клинических маркеров ответа на лечение или токсичности для метотрексата и других БПВП, доступных в клиническая практика [8]. Множественные факторы, такие как продолжительность заболевания RA, статус аутоантител [ревматоидный фактор (RF) или антитело к циклическому цитруллинированному пептиду (ACPA)] или статус курения, могут влиять на реакцию на лечение различных лекарств у пациентов с RA.На основе анализа генетических вариантов, биохимических анализов и протеомических подходов было предложено несколько многообещающих биомаркеров токсичности и реакции на лечение, включая уровни полиглутамата метотрексата в эритроцитах (RBC), однонуклеотидные полиморфизмы (SNP) и другие генетические варианты, а также экспрессию генов. уровни в клетках периферической крови, а также уровни сывороточных белков, таких как цитокины, факторы роста и аутоантитела. В этом документе представлены обновленные данные о биомаркерах ответа на лечение метотрексатом.

    Идеальный биомаркер ответа на лечение и токсичности должен быть широко доступным, легко измеряемым, точным, воспроизводимым и недорогим. Лучшее понимание биологических маркеров ответа на лечение метотрексатом и механизма действия метотрексата может быть полезным не только для выявления пациентов с РА, которые с наибольшей вероятностью будут реагировать на метотрексат, но также и тех, кто может реагировать неблагоприятно, например, тех, у кого могут развиться инфекции. или другие токсические эффекты.

    2. Клинические, радиографические и биохимические корреляты ответа на метотрексат

    Из-за относительной легкости доступа к клиническим и демографическим параметрам многие исследователи оценили, можно ли использовать клинические факторы для прогнозирования ответа на метотрексат, но в исследованиях сообщалось противоречивые результаты.Недавний систематический обзор предикторов ремиссии РА показал, что демографические и клинические характеристики РА (такие как мужской пол; молодой возраст; позднее начало РА; низкая активность заболевания; статус RF; статус ACPA; статус некурящих; короткая продолжительность заболевания; легкая функциональная активность. ухудшение; низкие исходные рентгенографические повреждения) коррелировали с более высокой скоростью ремиссии у пациентов с РА [10]. В недавнем исследовании 124 японских пациентов с РА, получавших различные БПВП (чаще всего метотрексат), у 40% пациентов развилась устойчивость к БПВП в течение 2-летнего периода наблюдения.После корректировки на возраст начала заболевания, статус RF и использование преднизолона было обнаружено, что два фактора связаны с резистентностью к лечению: аллели HLA DRB1 * 04, кодирующие общий эпитоп (OR, 2,89; 95% CI, 1,28–6,53;), и статус ACPA (OR, 6,31; 95% ДИ, 1,23–32,34;) [11]. Однако исследование 309 пациентов с воспалительным полиартритом, принимающих метотрексат, из Норфолкского регистра артритов, показало, что клинические и лабораторные факторы, такие как возраст, пол, возраст начала заболевания, исходный РФ и СРБ, являются плохими предикторами ответа на лечение метотрексатом [12] .

    При вторичном анализе участников шведского исследования фармакотерапии (SWEFOT), в которое вошли 487 пациентов с РА с продолжительностью симптомов менее 1 года, получавших монотерапию метотрексатом [13], плохой ответ на метотрексат коррелировал с большей продолжительностью симптомов и младший возраст. Кроме того, текущий статус курения и женский пол также были связаны с субоптимальным ответом на метотрексат [14]. В исследовании Международной организации исследований детской ревматологии (PRINTO) с участием пациентов с полиартикулярным ЮИА, принимающих метотрексат [15], участников с более длительной продолжительностью заболевания, более высокой инвалидностью (количественно с использованием ориентированных на пациента показателей инвалидности), активным артритом запястья и без антинуклеарных антител на исходном уровне. с большей вероятностью имели субоптимальный ответ после 6-месячного курса метотрексата [16].

    Неконтролируемое воспаление при РА приводит к повреждению костей и появлению околосуставной остеопении и краевых эрозий. Обычные рентгенограммы кистей и стоп обычно используются для оценки степени повреждения суставов у пациентов с РА и для оценки прогрессирования заболевания как в текущей клинической практике, так и в клинических испытаниях новых терапевтических агентов. Фактически, Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) требует, чтобы для того, чтобы заявить о предотвращении структурных повреждений на своей коммерческой этикетке, новые исследуемые агенты, предлагаемые для лечения РА, должны быть оценены на предмет их способности замедлять рентгенологическое прогрессирование, измеряемое с помощью подтвержденный рентгенологический индекс, такой как шкала Шарпа / Ван дер Хейдже [17–19].

    Хотя рентгенограммы рук и ног традиционно использовались для документирования тяжести РА и оценки реакции на обычные (MTX) и биологические DMARD [20, 21], они относительно нечувствительны к обнаружению ранних эрозий. УЗИ опорно-двигательного аппарата - это динамическое исследование суставов с очень высокой чувствительностью к воспалению и эрозии костей по сравнению с простой рентгенографией при РА, которая не может обнаружить активное воспаление, а скорее является результатом длительного воспаления. Показано, что шкала серого и мощный допплерография опорно-двигательного аппарата являются полезными технологиями для оценки синовита и ответа на лечение метотрексатом при РА [22], а совсем недавно было предложено в качестве вторичного результата в клинических испытаниях [23, 24].

    3. Цитокины

    Принимая во внимание сложность проявлений РА и вариабельность от пациента к пациенту (возраст, пол и сопутствующие заболевания), прогнозирование реакции на лечение у отдельных лиц, что в конечном итоге позволит выбрать целевую терапию для конкретного пациента. вероятно, будут основаны на новых и интегративных подходах к биомаркерам. Таким образом, область интенсивных исследований заключалась в изучении способности цитокинов молекулярно характеризовать ответ на лечение при РА.Цитокины играют ключевую роль в патогенезе РА [6], а их клеточная продукция и метаболизм находятся под влиянием метотрексата. Например, было обнаружено, что метотрексат подавляет продукцию цитокинов в Т-клетках, но не в моноцитах [25]. Кроме того, метотрексат снижает выработку IL-1, IL-4, IL-6, IL-13, TNF- α , IFN- γ и GM-CSF и может снизить клеточную адгезию и регуляцию IL. -15, IL-8, CD69, CD25 и IL-17 [25–27].

    Некоторые воспалительные цитокины были оценены на предмет их способности прогнозировать ответ на лечение метотрексатом, особенно на ранних стадиях заболевания, до развития тяжелого поражения суставов.В исследовании 50 последовательных пациентов с РА у пациентов с хорошим или отличным ответом на лечение метотрексатом было значительно более низкое соотношение IL-1ra / IL-1beta (соотношение <100), цитокинов, конститутивно продуцируемых мононуклеарными клетками периферической крови (PBMC) [ 28]. Кроме того, сывороточные концентрации TNF- α выше 20,1 пг / мл отрицательно коррелировали с ответом на лечение метотрексатом через 6 месяцев у 42 пациентов с РА [29], тогда как сывороточные IL-1 β , IL-6, IL-8 , Уровень IL-10 и IL-12 и экспрессия белка множественной лекарственной устойчивости (кодируемого MDR1 ) в PBMC не коррелировали с ответом на MTX [29].Взятые вместе, эти исследования показывают, что цитокины являются многообещающими кандидатами в качестве биомаркеров ответа на лечение метотрексатом.

    4. Полиглутаматы метотрексата в эритроцитах

    Концентрации полиглутамата метотрексата в эритроцитах (MTX PG) были предложены в качестве биомаркеров ответа на метотрексат у пациентов с РА [30]. Метотрексат проникает в клетки посредством взаимодействия с восстановленным носителем фолиевой кислоты (RFC). Затем метотрексат подвергается полиглутамилированию ферментом FPGS (фолилполиглутаматсинтетаза) (рис. 1). Может быть добавлено различное количество остатков глутамата, давая молекулы разной длины.MTX PG варьируются от MTX PG 1 (MTX моноглутамат) до MTX PG 5 (пентаглутамат) [31] и могут быть классифицированы как MTX PG 1-2 (короткая цепь), MTX PG 3 (длинная цепь) и MTX PG 4-. 5 (очень длинная цепь), причем MTX PG 3 является наиболее распространенной внутриклеточной формой MTX PG [32]. Метотрексатные PG являются активными метаболитами метотрексата, которые оказывают противовоспалительное действие и ингибируют ферменты метаболизма фолиевой кислоты [33, 34]. Уровни метотрексата PG зависят от возраста, функции почек, дозы метотрексата, пути введения и продолжительности лечения, курения, одновременного приема других лекарств, таких как другие DMARDS, а также кортикостероидов и нестероидных противовоспалительных препаратов [31, 35–37].


    Серия исследований, проведенных Dervieux et al. обнаружили, что уровни длинноцепочечных [30, 38, 39] и короткоцепочечных [40] RBC MTX PG коррелируют с улучшенными клиническими исходами, измеренными с помощью 28-суточной оценки активности заболевания (DAS28). Однако другие исследователи обнаружили, что концентрации общего, длинноцепочечного и очень длинноцепочечного MTX PG не были связаны с контролем болезни RA у пациентов, длительно принимавших лечение метотрексатом [41]. В заключение, в настоящее время необходимы дополнительные исследования, прежде чем измерение уровня MTXPG будет готово для рутинного клинического использования для определения дозировки MTX.

    5. Генетические варианты

    Результаты недавних исследований по изучению генетических факторов эффективности метотрексата противоречивы, вероятно, из-за отсутствия достаточной статистической мощности, различных клинических и фармакологических факторов, а также гетерогенности фенотипов [42]. Методологические планы фармакогенетических исследований в основном основаны на генах-кандидатах / SNP, что ограничивает истинную интерпретацию фактических факторов, влияющих на результаты лечения [8]. Было показано, что общий эпитоп (SE) HLA-DRB1 связан с тяжестью РА и прогрессированием заболевания [43–45], но исследования, связанные с ответом на лечение метотрексатом и другими БПВП, дали противоречивые результаты.В исследовании 457 пациентов с РА наличие двух HLA-DRB1 аллелей, кодирующих SE, было связано с хорошим ответом на лечение этанерцептом по сравнению с метотрексатом [46]. В другом исследовании SE-положительные пациенты лучше отвечали на комбинированную терапию метотрексатом, сульфасалазином и гидроксихлорохином по сравнению с одним метотрексатом, в то время как SE-отрицательные пациенты отвечали хорошо независимо от лечения [47]. В японской популяции носители SE-положительных аллелей * 04 с большей вероятностью развивали устойчивость к DMARD, включая MTX, по сравнению с не носителями [11].

    Поскольку метотрексат проявляет свою противовоспалительную и иммунодепрессивную активность за счет ингибирования фолат-зависимых путей и высвобождения аденозина, было высказано предположение, что генетический полиморфизм этих путей может влиять на ответ на метотрексат среди пациентов с РА [48]. В 2007 году Wessels et al. [49] разработали клиническую фармакогенетическую модель, основанную на ранее опубликованных ассоциациях SNP, для прогнозирования эффективности метотрексата на основе данных 205 пациентов с РА. Помимо исходных переменных, авторы проанализировали 17 генетических полиморфизмов в 13 генах, важных для механизма действия метотрексата, включая пути синтеза пурина и пиримидина.Они построили модель, которая включала пол, статус курения, присутствие RF, DAS28 и 4 полиморфизма в AMPD1 (аденозинмонофосфат дезаминаза), ATIC (аминоимидазолкарбоксамид рибонуклеотид трансформилаза), ITPA 939sphat (инозинтрифосфат) (инозинтрифосфатаза). MTHFD1 (метилентетрагидрофолатредуктаза). Они разделили пациентов на три группы: не отвечающие на лечение, пациенты с промежуточным ответом и пациенты с хорошим ответом на терапию метотрексатом. Ответы пациентов оценивались по простой системе баллов от 0 до 11.5. Пациенты с оценкой ≤3,5 имели истинно положительный ответ на уровне 95%; пациенты с оценкой ≥6 имели истинно отрицательный ответ у 86%.

    Генетические исследования эффективности метотрексата также включали детей. SNP 13 генов ( ABCG2, ADORA2A, AMPD1, ATIC, DHFR, FPGS, GGH, ITPA, MTHFD1, MTHFR, SHMT1, SLC19A1, и TYMS в пути MTX были протестированы на эффективность связи с двумя MTX-путями. популяции детей с ЮИА (197 детей из UK CHARMS [Исследование реакции детского артрита на лекарства] и 210 детей из американской когорты).Из этих 13 генов один SNP в ITPA и два SNP в ATIC имели статистически значимые ассоциации с плохим ответом на лечение метотрексатом в когорте UK CHARMS. В когорте из США SNP в гене ATIC (rs12995526, который имеет высокую степень неравновесия по сцеплению с rs13005416) имел значительную связь с плохим ответом на лечение метотрексатом; этот вывод был дополнительно подтвержден метаанализом двух независимых исследований [50]. Ли и др. оценили связь между SNP-кандидатами в ATIC , ITPA, и MTHFR с DAS28 и уровнями C-реактивного белка (CRP) у 556 участников из исследования Brigham and Women’s Hospital Sequential Rheumatoid Arthritis Sequential (BRASS).Они обнаружили, что ATIC SNP rs4673993 был связан с низким показателем DAS28 () у пациентов, которые получали монотерапию метотрексатом или комбинированную терапию. В другом исследовании 281 пациента с РА в Северной Индии были оценены варианты в генах пути биосинтеза пуринов, и FPGS rs1544105, TYMS rs2853539, DHFR rs7387 и ADA rs244076 были определены как потенциальные предикторы ответа MTX. [51, 52].

    6. Паттерны экспрессии генов в ответ на лечение MTX

    Оценка связи между паттернами экспрессии генов и активностью заболевания может быть полезна для мониторинга активности заболевания RA и эффективности лечения MTX у пациентов с RA.Например, изучалась синовиальная экспрессия генов коллагеназы, стромелизина и тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 (TIMP-1) при RA. После лечения метотрексатом у пациентов с РА было обнаружено значительное снижение экспрессии гена коллагеназы, но не стромелизина или TIMP-1 в синовиальной оболочке [53]. Более того, изучение профиля экспрессии выбранных RA-связанных генов в синовиальных фибробластах показало, что введение метотрексата снижает экспрессию гена белка 3, связывающего инсулиноподобный фактор роста, индуцированного ретиноевой кислоты 3 и кавеолина 2 [54].

    Экспрессия генов IL-4 и IL-10 была значительно увеличена в PBMC от пациентов с РА, чем в здоровой контрольной группе после воздействия метотрексата in vitro, в то время как экспрессия генов IL-2 и IFN γ была значительно снижена [55]. Зейтц и др. показали повышенное высвобождение IL-1 β в PBMC от пациентов с РА, которые имели хороший или отличный ответ на метотрексат [28]. В недавнем исследовании Galligan et al. продемонстрировали, что терапия метотрексатом привела к увеличению экспрессии 11 генов: MCTP2, ALDh2A2, CASP1, ESR1, VAV3, MBP, TM4SF12, CPNE3, PCSK1, SLC16A4 и SERPINF1 , а также к снижению экспрессии 26 генов, включая ICAM1. , RGS16 , GATA6, и другие [56].Кроме того, Hobl et al. показали, что монотерапия метотрексатом снижает экспрессию IL-12A в PBMC от пациентов с РА () и что комбинация метотрексата и кортикостероидов снижает экспрессию гена IL18 [57]. В другом исследовании у пациентов с РА, получавших метотрексат, была более высокая экспрессия костного морфогенетического белка-2 (BMP-2) и лиганда медиатора проникновения герпесвируса (LIGHT) по сравнению с контрольной группой [58]. Эти исследования закладывают основу для разработки панелей экспрессии генов, которые могут быть использованы врачами в недалеком будущем.Например, в настоящее время проводится профилирование экспрессии генов для ответа на инфликсимаб и другие биологические агенты [59].

    7. Будущие направления

    Идентификация биомаркеров реакции на лечение и токсичности для метотрексата и других БПВП имеет критически важное значение для развития персонализированной медицины при РА [60, 61]. Таким образом, в последние годы наблюдается повышенный интерес к сосредоточению коллективных исследовательских усилий на открытии биомаркеров активности заболевания и реакции на лечение.В связи с этим разрабатываются высококачественные крупные проспективные фармакогенетические исследования с участием хорошо фенотипированных участников, чтобы изучить и подтвердить роль различных генов-кандидатов в эффективности и токсичности метотрексата.

    Несмотря на большие усилия, ревматологам в настоящее время не хватает надежных и недорогих биомаркеров клинического уровня, чтобы индивидуализировать выбор лечения при лечении РА. Следовательно, необходимы инновационные, хорошо оснащенные и совместные проекты трансляционных исследований, чтобы внедрить доступные, надежные и клинически полезные тесты для индивидуализированного лечения в клиническую сферу.Были созданы большие многоцентровые совместные сети, репозитории и базы данных, такие как База данных по эффективности и токсичности лечения ревматоидного артрита (TETRAD) [62] и другие, чтобы обеспечить основу для будущих исследований биомаркеров реакции на болезнь и обеспечить детальное понимание фенотипов РА. Уникальные ресурсы, предоставляемые этим крупномасштабным сотрудничеством, зависят от постоянных совместных усилий академических кругов, федеральных агентств, промышленности и других донорских организаций.

    Результаты недавних исследований экспрессии генов [28, 54, 56-58], демонстрирующие влияние метотрексата на PBMC и синовиальные клетки, вероятно, будут играть ключевую роль в будущих исследованиях биомаркеров ответа на DMARD и биологические агенты при RA. . Стратификация пациентов с РА с использованием молекулярного фенотипирования, такого как подробное определение подтипов ACPA-ответа [63], профилирование одноклеточной сети [64], генетическое профилирование [65] или другие методы, могут быть полезны для обеспечения более направленной терапии. Существует большая потребность в новых подходах к биоинформатике и более совершенных статистических методах, которые могут интегрировать клинические, генетические и другие данные о биомаркерах и создавать клинически полезные валидные алгоритмы, позволяющие точно прогнозировать ответ на лечение метотрексатом.

    Благодарность

    Эта статья финансируется NIH P60 AR048095 (Многопрофильный клинический исследовательский центр - RP Kimberly, Project 1: DK Arnett, Project PI).

    Метотрексат при ревматоидном артрите: фармакокинетическая, фармакодинамическая и фармакогеномная модель - Ева-Луиза Хобл

    Целью исследования является разработка генетических и клинических моделей прогнозирования эффективности и гепатотоксичности метотрексата метотрексата у пациентов с ревматоидным артритом РА. Среди продольных течений усталости у пациентов с ревматоидным метотрексатом. Руководство по дозировке с лекарственными средствами с осторожностью.com Разделение высоких доз перорального метотрексата улучшает биодоступность: a Метотрексат и смертность у пациентов с ревматоидным артритом: несмотря на быстрые темпы изменений, наиболее часто используемым препаратом при РА остается метотрексат, который считается якорным препаратом при этом состоянии. В этом обзоре мы описываем известные фармакокинетические свойства и предполагаемые механизмы действия метотрексата. Клинические фармакогенетические модели ответа на лечение метотрексатом - это одно из группы лекарств, называемых модифицирующими болезнь противоревматическими препаратами DMARD, и это наиболее распространенное лечение ревматоидного артрита.Метотрексат помогает предотвратить дальнейшее необратимое повреждение, которое может произойти, если ревматоидный артрит не лечить. Что происходит с людьми с ревматоидным артритом, принимающими только метотрексат? Метотрексат является золотым стандартом DMARD при ревматоидном артрите, но часто ассоциируется с «легкими» побочными эффектами, такими как непереносимость или лабораторные отклонения. Несмотря на то, что они не опасны для жизни, они вызывают прекращение приема препарата в 17–50% случаев. Данные о клинических и генетических маркерах, предсказывающих их появление, ограничены.В этом проспективном исследовании участвовали пациенты с активным состоянием. Следовательно, ранее была предложена клиническая фармакогенетическая модель для прогнозирования ответа на метотрексат CP-MTX, которая включает четыре клинические переменные: активность заболевания, пол и ЦЕЛЬ: изучить эффективность клинической фармакогенетической модели для прогнозирования. отсутствия ответа у пациентов с ревматоидным артритом, получавших метотрексат метотрексат в комбинации с другими синтетическими или биологическими модифицирующими заболевание противоревматическими препаратами. Эта модель прогнозирования включает пол, статус курения, положительность ревматоидного фактора и четыре генетических варианта в AMPD1 rs17602729, ATIC rs2372536, ITPA rs1127354 и MTHFD1 rs17850560.МЕТОДЫ: Всего 314 пациентов с РА от Цель Оценить эффективность и безопасность дезернотиниба VX-509, перорального селективного ингибитора JAK-3, у пациентов с ревматоидным артритом, у которых наблюдается ответ на лечение метотрексатом Amazon.it: Метотрексат в Ревматоидный артрит: A

    9783838133058 Kostenlose Zeitschriften für Kindle Fire herunterladen Eva-Luise Hobl Eva-Luise Hobl

    Метотрексат - одно из основных средств лечения воспалительных форм артрита.Это не только уменьшает боль и отек, но и может замедлить повреждение суставов и прогрессирование заболевания с течением времени. Вот почему метотрексат известен как модифицирующее заболевание противоревматическое лекарство DMARD. Многие ревматологи используют метотрексат в качестве терапии первой линии для пациентов с ревматоидным артритом. RA. Метотрексат при ревматоидном артрите. Методы. Фармакокинетический анализ был проведен у 10 пациентов с RA, принимавших стабильную дозу метотрексата 25-35 мг еженедельно. Фармакокинетический анализ проводился с интервалом в одну неделю у каждого пациента после перорального приема однократной дозы и после равной, но разделенной дозы с интервалом в 8 часов.Цель: изучить эффективность клинической фармакогенетической модели для прогнозирования отсутствия ответа у пациентов с ревматоидным артритом, получавших метотрексат метотрексат в сочетании с другими синтетическими или биологическими модифицирующими заболевание противоревматическими препаратами. Эта модель прогнозирования включает пол, статус курения, положительность ревматоидного фактора и четыре генетических варианта в AMPD1 rs17602729, ATIC rs2372536, ITPA rs1127354 и MTHFD1 rs17850560. Лечение ревматоидного артрита метотрексатом: предикторы Проверка клинической фармакогенетической модели для прогнозирования 17.10.2019 Клиническая фармакогенетическая модель для прогнозирования эффективности монотерапии метотрексатом при недавно начавшемся ревматоидном артрите. Rheum артрита. 2007; 56: 1765–75. Rheum артрита. 2007; 56: 1765–75. Прогностические генетические биомаркеры эффективности метотрексата в составе метотрексата и его использования при ревматоидном артрите RA Введение: метотрексат MTX представляет собой терапию первой линии при ревматоидном артрите RA, но примерно 30% пациентов не получают пользы от метотрексата. Прогностическая многомерная модель прогнозирования недостаточного клинического ответа на метотрексат через 3 месяца лечения в рамках лечения в Роттердамской когорте раннего артрита tREACH, включая исходные предикторы 9783838133058 PDF Подтверждение прогнозной многопараметрической модели прогнозирования Метотрексат для лечения ревматоидного артрита. в качестве «золотого стандарта», модифицирующего противоревматический препарат DMARD для борьбы с воспалительным артритом.Чрезмерно активная иммунная система при РА вызывает боль, отек, жар и покраснение в суставах, скованность и другие симптомы, такие как усталость и симптомы гриппа. Актуальность темы: Метотрексат является наиболее частым средством выбора модифицирующей течение заболевания противоревматической терапии ревматоидного артрита. Хотя результаты исследований показали эффективность таких препаратов, включая метотрексат, в отношении показателей заболеваемости ревматоидным артритом, их влияние на смертность пациентов с этим заболеванием остается неизвестным. Оценка клинической фармакогенетической модели для прогнозирования. Модель эффективности метотрексата включала пол, ревматоидный фактор и статус курения, DAS и 4 полиморфизма генов AMPD1, ATIC, ITPA и MTHFD1.Эта модель прогнозирования была преобразована в систему баллов от 0 до 11,5. При оценке ≤3,5 доля истинно положительных ответов составляла 95%. Клиническая фармакогенетическая модель для прогнозирования эффективности метотрексата T1 при ревматоидном артрите. T2 Исследования на животных моделях. AU Kerwar, S. S. AU Oronsky, A. L. PY 1989. Y1 1989. N2 Настоящие исследования показали, что низкие дозы метотрексата могут подавлять воспаление и разрушение суставов, связанные с моделями артрита на животных. Противовоспалительное действие метотрексата. Цели. Метотрексат MTX является препаратом первой линии для лечения ревматоидного артрита RA, но, тем не менее, 30% пациентов испытывают неэффективность MTX.Нашей целью было разработать клиническую фармакогенетическую модель, чтобы предсказать, какие пациенты с РА не ответят на монотерапию метотрексатом. Мы также оценили, можно ли распространить эту модель на другие группы населения, проверив ее на группе сербской фармакокинетики этанерцепта без изменений РА с параллельными моделями генетического и клинического прогнозирования эффективности и метотрексата для РА: побочные эффекты, эффективность. проспективное исследование метотрексата у пациентов с ранним ревматоидным артритом РА, разработанное для характеристики подгруппы пациентов с РА, которые лучше всего реагируют на монотерапию метотрексатом.Подходящие пациенты будут взрослыми с РА, которые ранее не получали метотрексат или комбинированную терапию БПВП антиревматическими препаратами, модифицирующими заболевание. Пациенты будут начинать прием метотрексата в больнице. Метотрексат широко используется в качестве модифицирующего заболевание противоревматического препарата DMARD первого выбора при лечении ревматоидного артрита РА, поскольку он эффективен, имеет приемлемый профиль токсичности и низкую стоимость. За два десятилетия опыта существует значительная вариабельность способов, которыми ревматологи назначают терапию метотрексатом, включая дозировку и путь введения

    Оценка клинической фармакогенетической модели для прогнозирования метотрексата Википедия Механизм метотрексата в лечении ревматоидного артрита - 01.05.2019 Метотрексат используется для лечения ревматоидного артрита РА с 1980-х годов и по сей день часто является препаратом первой линии для лечения РА. В этом обзоре мы исследуем несколько гипотез для объяснения механизма эффективности метотрексата при РА. К ним относятся антагонизм фолиевой кислоты, передача сигналов аденозина, генерация активных форм кислорода ROS, уменьшение молекул адгезии См. Полный список на сайте healthline.com Метотрексат при ревматоидном артрите: A См. Полный список на сайте healthline.com В исследовании по определению дозы фазы IIb NCT02504671, RA Пациентам с неадекватным ответом на метотрексат вводили плацебо или GSK3196165 22.5, 45, 90, 135 и 180 мг подкожно 5 еженедельных доз с последующим введением каждые две недели в течение 50 недель на фоне терапии метотрексатом. Результаты исследования представлены в отдельном аннотации. Этот анализ направлен на определение эффективности воздействия. Оптимальная дозировка и способ введения метотрексата в Механизм действия метотрексата при ревматоидном артрите и метотрексата при ревматоидном артрите: исследования на животных моделях Метотрексат при ревматоидном артрите. : Исследования на животных моделях Проверка клинической фармакогенетической модели для прогнозирования инфликсимаба и метотрексата при лечении ревматоидного воздействия - анализ эффективности при неадекватном ответе на DMARD Cochrane 09.05.2012 Метотрексат при ревматоидном артрите: фармакокинетическая, фармакодинамическая и фармакогеномная модель, автор - Ева-Луиза Хобл, 09 мая 2012 г., на Amazon.com. * БЕСПЛАТНАЯ * доставка соответствующих предложений. Клиническая фармакогенетическая модель для прогнозирования эффективности Евы-Луизы Хобл. Долгосрочная безопасность монотерапии метотрексатом у пациентов, получавших метотрексат фор 2 Таген. модифицируя противоревматические препараты bDMARD, 53 все еще имели клинически значимую усталость через 12 месяцев после начала лечения, и пациенты, у которых наблюдалось улучшение утомляемости, чаще всего делали это в течение первых месяцев, согласно результатам исследования, опубликованным в. Настоящие исследования показали, что низкие дозы метотрексата могут подавляют воспаление и разрушение суставов, связанные с моделями артрита на животных.Противовоспалительные эффекты метотрексата, вероятно, связаны с его ингибирующим действием на хемотаксис. В используемых низких дозах метотрексат не вызывает системной иммуносупрессии. У крыс, получавших метотрексат, улучшение IL-2 Arthritis Foundation Для разработки клинической фармакогенетической модели для прогнозирования эффективности метотрексата MTX при ревматоидном артрите RA. Методы Двести пять пациентов с недавно диагностированным РА и активным заболеванием начали лечение метотрексатом в дозировке 7.5 мг в неделю и увеличена до 15 мг в неделю через 4 недели и фолиевой кислоты 1 мг в день. Метотрексат при ревматоидном артрите: фармакокинетическая, фармакодинамическая и фармакогеномная модель Хобла, Ева-Луиза, AbeBooks.co.uk ISBN 10: 3838133056 ISBN 13: 9783838133058 Südwestdeutscher Verlag für Hochschulschrifinder Успешный ответ на лечение артрита в 2012 году. . Следовательно, ранее была предложена клиническая фармакогенетическая модель для прогнозирования ответа на метотрексат CP-MTX, которая включает четыре клинические переменные: активность заболевания, пол, наличие ревматоидного фактора и статус курения, а также четыре SNP rs2236225, rs17602729, rs1127354 и rs2372536 в генах путь фолиевой кислоты.Он показал хорошие результаты, но не смог привлечь внимание. Компра метотрексат при ревматоидном артрите: фармакокинетико-фармакодинамическая-фармакогеномная модель, автор Eva-Luise Hobl 09.05.2012. SPEDIZIONE GRATUITA su ordini idonei

    .
    Хобл что за болезнь: Хроническая обструктивная болезнь лёгких.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *