Содержание

Публикации в СМИ

Дисплазия эпителия шейки матки — неинвазивные неопластические изменения эпителия шейки матки в зоне перехода однослойного цилиндрического эпителия цервикального канала в многослойный неороговевающий влагалищной части шейки матки, часто возникающие после инфицирования ВПГ и ВПЧ • Лёгкая дисплазия (цервикальная интраэпителиальная дисплазия I, плоскоклеточное интраэпителиальное повреждение малой степени) — умеренная пролиферация эпителиальных клеток базального и парабазального слоёв • Умеренная дисплазия (цервикальная интраэпителиальная дисплазия II, сквамозное интраэпителиальное повреждение средней степени) — патологические изменения захватывают всю нижнюю половину эпителиального пласта • Тяжёлая дисплазия (цервикальная интраэпителиальная дисплазия III, carcinoma in situ) — клеточные изменения захватывают всю толщу ороговевающего эпителия; значительная пролиферация клеток базального и парабазального слоёв, появление гиперхромных клеток, нарушение в клетках ядерно-цитоплазматического соотношения в сторону увеличения ядра.

Статистические данные. Распространённость в возрасте 27–28 лет составляет 3 600:100 000 населения. Средний возраст для карциномы in situ 34,5 лет. Частота перехода в преинвазивный рак — от 40 до 64%.

Этиология. Выявлена тесная связь с ВПГ и ВПЧ типов 6, 11, 16, 18, 31, 33 и 35.

Факторы риска • Неоднократные беременности и/или роды до 20 лет • Ранний возраст первого полового сношения • Наличие остроконечных кондилом • Курение • Беспорядочные половые связи • Низкое социально-экономическое положение • Хронический цервицит • Заболевания, передаваемые половым путём.

Патоморфология • Глыбки из ядерного хроматина • Изменение ядерно-цитоплазматического отношения • Койлоцитоз.

Клиническая картина • Часто протекает бессимптомно • Иногда выявляют остроконечные кондиломы вульвы, влагалища или заднего прохода • Часто диагностируют ЗППП (например, хламидиоз, гонорею).

Лабораторные исследования. Мазок по Папаниколау.

Специальные исследования • Осмотр с помощью гинекологических зеркал • Кольпоскопия и прямая биопсия • Выскабливание канала шейки матки • При отрицательном кольпоскопическом исследовании и положительных результатах выскабливания цервикального канала характер и степень дисплазии шейки матки можно адекватно оценить лишь с помощью конусовидной биопсии (конизации) и гистологического исследования эндоцервикальных желёз • Типирование вирусной ДНК.

Дифференциальная диагностика • Инвазивный рак шейки матки • Остроконечные кондиломы.

ЛЕЧЕНИЕ

Консервативное — при лёгкой степени дисплазии, при тяжёлой — конизация шейки матки электропетлёй или лазером.

Режим амбулаторный. После электроконизации ограничение физической нагрузки в течение 4 нед.

Тактика ведения. Врачебный осмотр, оценка результатов онкоцитологического или гистологического исследований, решение вопроса о виде хирургического вмешательства.

Хирургическое лечение • Создание термического повреждения на глубину 5–7 мм для уничтожения потенциально диспластического эпителия, лежащего под зоной трансформации • Местные деструктивные способы лечения при дисплазии шейки матки или раке in situ •• Электрокаутеризация •• Криотерапия •• Конизация диатермической петлёй.

Лекарственная терапия — вспомогательный метод лечения. Фторурацил 1–2 р/сут внутривлагалищно в виде 5% мази. После нанесения мази руки необходимо немедленно вымыть; следует избегать попадания мази в глаза, нос или рот.

Наблюдение • Мазок по Папаниколау и кольпоскопия через 3 мес после лечения • В дальнейшем мазок по Папаниколау каждые 6 мес • Ежегодная кольпоскопия в течение первых 2 лет • Зондирование цервикального канала для подтверждения его проходимости • Гистерэктомия показана женщинам со стойкими тяжёлыми поражениями, несмотря на повторное лечение местными деструктивными методами.

Профилактика • Воздержание от случайных половых связей или использование барьерных методов контрацепции • Отказ от курения • Ежегодное проведение исследования мазков по Папаниколау • При необходимости проведение кольпоскопии.

Осложнения • Тяжёлая форма дисплазии может прогрессировать в рак шейки матки • Осложнения конизации шейки матки: кровотечение, инфицирование, стеноз шейки матки, недостаточность шейки матки, бесплодие, неполное иссечение поражённой ткани (обусловливает возникновение рецидива).

Течение и прогноз • Прогноз благоприятный •• Частота излечения после хирургического вмешательства составляет 85–96% •• Вероятность рецидивов — 5–15%, из них 85% выявляют в течение 2 лет после лечения • Возможен рецидив вследствие неполного иссечения, в т.ч. обусловленный персистированием ВПЧ в организме пациентки.

Беременность • Дисплазия может прогрессировать • Очень важно определить степень дисплазии и исключить инвазивный рак • Необходимости в проведении лечения дисплазии во время беременности нет • Дисплазию не считают показанием для кесарева сечения.

МКБ-10 • N87 Дисплазия шейки матки

Примечания • Койлоцит — клетка плоского эпителия, часто двуядерная с перинуклеарным просветлением; характерна для остроконечной кондиломы.

Появление койлоцитов обусловлено ВПЧ • Отношение ядерно-цитоплазматическое — отношение объёма ядра клетки к объёму цитоплазмы • Повреждение плоскоклеточное интраэпителиальное — термин относят только к мазкам по Папаниколау.

Плоская дисплазия гортани — MyPathologyReport.ca

Что такое плоскоклеточная дисплазия?

Плоскоклеточная дисплазия гортани — предраковое заболевание. Его называют предраковым, потому что со временем он может превратиться в инвазивный вид рака, который называется плоскоклеточный рак. Плоскоклеточная дисплазия может начаться в любой части гортани, хотя наиболее распространенным местом является голосовая связка.

Риск, связанный с превращением плоскоклеточной дисплазии в рак, зависит от того, насколько ненормально плоские клетки выглядят под микроскопом. Риск рака наиболее высок, если ваш патолог описывает изменения как серьезные (см. «Степень» ниже).

Гортань

Когда мы дышим, воздух перемещается из нашего рта и носа в легкие.

На своем пути к легким воздух проходит через часть горла, называемую гортань. Вы не можете видеть свою гортань, потому что она начинается у самой задней части языка.

Большая часть гортани представляет собой полую трубку, наполненную воздухом. Гортань помогает нам дышать и издавать звук, когда мы говорим. По этой причине заболевания гортани часто затрудняют нормальное дыхание или разговор. Внутренняя поверхность гортани выстлана специализированными клетками, называемыми плоские клетки. Эти клетки образуют барьер, называемый эпителий. Ткань под эпителием называется строма.

Гортань делится сверху вниз на три части, каждая из которых состоит из более мелких частей. В большинстве отчетов о патологии описываются исследуемые участки или части гортани.

Надгортанник

Надгортанник — это первый отдел гортани. Надгортанная гортань состоит из нескольких более мелких частей, в том числе:

  • Надгортанник.
  • Надгортанные складки.
  • Аритеноиды.
  • Ложные голосовые связки.
  • Желудочек.
голосовая щель

Голосовая щель — это второй отдел, расположенный в середине гортани. Голосовая щель состоит из нескольких более мелких частей, в том числе:

  • Настоящие голосовые связки.
  • Задняя комиссура.
  • Передняя комиссура.
Подсвязочное

Подсвязочный канал — это третий и последний отдел гортани. В отличие от других отделов гортани, подсвязочный канал не состоит из множества более мелких частей. Подсвязочный гортань соединяется с трахеей (дыхательным горлом).

Что вызывает плоскоклеточную дисплазию гортани?

Самая частая причина плоскоклеточной дисплазии гортани — курение. Другие причины включают чрезмерное употребление алкоголя, подавление иммунитета и предшествующее облучение шеи.

Как патологоанатомы ставят этот диагноз?

Диагноз плоской дисплазии обычно ставится после удаления небольшого образца ткани с помощью процедуры, называемой биопсия. Биопсия обычно выполняется, потому что врач во время осмотра вашей гортани увидел участок ткани ненормального вида. В вашем отчете о патологии, вероятно, будет указано, из какой части гортани была взята биопсия.

Диагноз плоской дисплазии может быть поставлен только после исследования образца ткани под микроскопом. По сравнению с нормальным, здоровым плоские клетки, аномальные клетки в области плоской дисплазии больше, темнее и дезорганизованы.

Патологи используют слово гиперхроматический для описания клеток, которые выглядят темнее, чем нормальные клетки. Большие скопления генетического материала, называемые ядрышки также может быть замечено в ядре аномальных клеток. Эти плоские клетки также обычно претерпевают аномальный паттерн развития, который приводит к процессу, называемому ороговение.

Аномальные клетки при плоскоклеточной дисплазии видны только в эпителий, Это отличается от плоскоклеточный рак где аномальные клетки также видны в строма ниже эпителия. Движение аномальных клеток из эпителия в строму называется вторжение. Ваш патолог внимательно изучит ваш образец ткани, чтобы убедиться в отсутствии признаков инвазии, прежде чем поставить диагноз плоской дисплазии.

Класс

Патологи используют термин класс описать разницу между аномальными клетками в области плоскоклеточной дисплазии и нормальными плоские клетки которые обычно находятся в гортани. Патологи используют размер, цвет и форму клетки для определения степени. Используя эти особенности, плоскоклеточную дисплазию гортани обычно делят на три уровня:

  • Легкая дисплазия — Патологические плоские клетки очень похожи на нормальные плоскоклеточные клетки.
  • Умеренная дисплазия — Аномальные плоские клетки темнее и больше, чем нормальные плоские клетки, и нормальная организация эпителия может быть нарушена.
  • Тяжелая дисплазия — Аномальные плоские клетки похожи на раковые клетки, но они все еще видны только в эпителии. Другое название тяжелой дисплазии — плоскоклеточная карцинома in situ.

Некоторые отчеты о патологии группируют дисплазию средней и тяжелой степени вместе и называют их дисплазией высокой степени. Легкая дисплазия называется дисплазией низкой степени.

класс очень важно, потому что это связано с риском развития инвазивного рака в будущем. Легкая (слабая) дисплазия имеет очень низкий риск превращения в рак и часто остается без лечения. Умеренная и тяжелая (высокая степень) дисплазия связана с гораздо более высоким риском развития рака, и пациентам с этим состоянием обычно предлагается лечение по удалению пораженной ткани.

Поля

A маржа любая здоровая ткань, разрезанная хирургом для удаления аномального участка ткани с вашего тела. По возможности, хирурги будут стараться вырезать здоровую ткань за пределами аномальной области, чтобы снизить риск того, что после удаления ткани останутся какие-либо аномальные клетки.

Ваш патолог внимательно изучит все края образца ткани, чтобы увидеть, насколько близко аномальные клетки находятся к краю разрезанной ткани. Поля будут описаны в вашем отчете только после удаления всей аномальной области ткани. Поля не описываются в отчете после биопсия было выполнено.

Отрицательный край означает, что плоскоклеточная дисплазия не наблюдалась на самом краю разрезанной ткани. Если все поля отрицательные, в большинстве отчетов о патологии будет указано, как далеко до среза ткани находились ближайшие аномальные клетки. Расстояние обычно указывается в миллиметрах.

Предел считается положительным, если плоскоклеточная дисплазия видна на самом краю разрезанной ткани. Положительный запас связан с более высоким риском того, что болезнь вернется (рецидивирует) на том же участке после лечения.

Джейсон Вассерман, доктор медицинских наук, FRCPC (обновлено 28 июля 2021 г.)

лечение, цены и отзывы в клинике Оксфорд Медикал


Дисплазия шейки матки — это изменения в эпителии шейки матки, характеризующиеся наличием нетипичных клеток. Это бессимптомное опасное заболевание, часто трансформирующееся в рак шейки матки. Чаще других от этого заболевания страдают молодые женщины. Часто дисплазия начинается из-за поражения организма вирусом герпеса или папилломы.

ПРИЧИНЫ ВОЗНИКНОВЕНИЯ ДИСПЛАЗИИ

Заболевание возникает вследствие гиперплазии клеток плоского эпителия. Происходит нарушение в процессе созревания клеток, что приводит к их атипии — изменению строения клеток.


Толчком к развитию дисплазии шейки матки могут стать:

  • паппиломовирусная инфекция;
  • отклонения от нормы при взятии цитологических анализов;
  • заболевания имунной системы;
  • наследственная предрасположенность;
  • нездоровый образ жизни;
  • рак головки полового члена у сексуального партнера;
  • полипы, лейкоплакия, эктопия.

СТЕПЕНИ ДИСПЛАЗИИ ШЕЙКИ МАТКИ

  1. 1-я степень: легкая — нарушение базального и парабазального слоев клеток.
  2. 2-я степень: умеренная — нижняя половина эпиталиального пласта подвергается патологическим изменениям.
  3. 3-я степень: тяжелая — стадия преинвазионного рака, когда поражается весь многослойный плоский эпителий.

Чтобы предотвратить данное заболевание, необходимо:

  • своевременно диагностировать и лечить гинекологические заболевания;
  • проходить профилактические осмотры у гинеколога;
  • ежегодно сдавать ПАП-тест — исследование клеток слизистой оболочки шейки матки.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ

Дисплазия шейки матки диагностируется на основании результатов цитологического исследования биоматериала, видеокольпоскопии и гистологического исследования. Методы, применяемые для лечения болезни, зависят от степени ее развития и возраста пациентки. Дисплазия 1-й степени лечится защитными силами организма в 50-60% случаев. 2-я степень дисплазии лечится удалением при помощи радиоволнового метода, лазером либо прижиганием жидким азотом.

При лазерном или радиоволновом лечении измененный эпителий устраняется с помощью энергии, передаваемой, соответственно, лазерным лучом или радиоволнами высокой частоты. Для лазерного лечения используется современный немецкий лазер Biolitec, а для радиоволнового – аппарат Сургитрон. Как при лазерном, так и при радиоволновом лечении возникает коагулирующий эффект, благодаря которому отсутствует кровотечение и устраняется риск заражения, и развития в дальнейшем воспалительного процесса.

После лазерного или  радиоволнового лечения период реабилитации проходит легче и быстрее, чем при использовании альтернативных методик. В результате заживления не образовываются шрамы и рубцы, потому как лазерная, так и радиоволновая терапия показаны всем пациенткам, нуждающимся в лечении.

По завершении лечения тяжелой стадии дисплазии, необходимо диспансерное наблюдение 1 раз в полгода.

Стоимость лечения и операции по устранению дисплазии шейки матки напрямую зависит от стадии заболевания, наличия осложнений и различных гинекологических проблем у пациентки, а также особенностей организма. С ценовой политикой клиники «Оксфорд Медикал» вы можете ознакомиться в разделе «Цены» либо позвонив нам по телефону.

ДИСПЛАЗИЯ ШЕЙКИ МАТКИ И БЕРЕМЕННОСТЬ

Дисплазия, в большинстве случаев, не оказывает никакого патологического влияния на процесс вынашивания и рождения ребенка. В то время, как сама беременность может способствовать развитию дисплазии. Связано это с тем, что в организме беременной женщины происходит множество изменений: ослабевает иммунная защита, что необходимо для нормального вынашивания беременности, изменяется гормональный фон.

В совокупности эти факторы могут дать толчок к дальнейшему развитию дисплазии. Потому специалисты  гинекологического отделения рекомендуют обследоваться на этапе планирования беременности, чтобы была возможность пройти курс лечения до её наступления, а не после разрешения.

КАК ЛЕЧАТ ДИСПЛАЗИЮ ШЕЙКИ МАТКИ В «ОКСФОРД МЕДИКАЛ»

Лечение в клинике начинается с консультации гинеколога, и обследования: осмотра на кресле, расширенной кольпоскопии, мазка на цитологию, анализа выделений и других обследований, назначаемых в случае необходимости. В случае подтверждения диагноза врач назначает лечение и определяется с методом его проведения.

Мы проводим широкий спектр диагностических и лабораторных исследований в пределах клиники, без необходимости отправлять пациентов в сторонние лаборатории. Врачи-гинекологи анализируют результаты используемых методов терапии, чтобы улучшить методы диагностики и лечения. Чуткость, внимательное отношение к пациенткам и высокий профессионализм гинекологов клиники «Оксфорд-Медикал» убедят вас обратиться к ним не только для решения незначительных проблем. После лечения в нашей клинике, вы наверняка выберете одного из специалистов в качестве своего постоянного врача и медицинского консультанта.

Определение онкопротеина р16ink4a

Иммуноцитохимическое исследование, позволяющее выявить экспрессию белка р16 (p16INK4a) на поверхности эпителиальных клеток. Белок р16 является биологическим маркером начала канцерогенеза – повышение его экспрессии наблюдается при предраковых изменениях и может рассматриваться как непрямой маркер активной онкогенной экспрессии ВПЧ высокого онкологического риска (выявляется при переходе ВПЧ из эписомальной формы в интегрированную). Определение экспрессии белка р16 позволяет с высокой точностью обнаружить риск развития рака шейки матки, своевременно поставить диагноз и назначить лечение. Определение уровня экспрессии позволяет выявить степень нарушения пролиферации, сопутствующей опухолевому росту, способность опухоли к инвазии и метастазированию.

Синонимы русские

Белок p16INK4a; иммуноцитохимическое исследование.

Синонимы английские

Оncoprotein p16INK4ain; immunocytochemical study.

Метод исследования

Иммуноцитохимический метод + жидкостная цитология.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Аспират из полости матки.

Общая информация об исследовании

Одной из самых современных методик ранней диагностики предраковых состояний является иммуноцитохимическое исследование — определение онкопротеина р16ink4a для оценки потенциала дисплазии эпителия.

Было доказано, что экспрессия онкопротеина р16ink4a связана с низкой, умеренной и тяжелой дисплазией (по цитологической классификации ВОЗ (CIN I, CIN II и CIN III) и цитологической классификации Бетесда (ASCUS, LSIL и HSIL), причем экспрессия онкопротеина р16ink4a не встречалась в плоском эпителии без признаков дисплазии. В норме кодируемый геном-супрессором белок p16INK4a блокирует вызываемую фактором роста стимуляцию деления клетки за счет угнетения циклин-зависимой киназы, что приводит к нарушению фосфорилирования белка ретинобластомы (БРБ). В этих условиях БРБ связывается с фактором транскрипции Е2F, блокирует его митотическую активность и останавливает деление клетки. Однако при ВПЧ инфекции встроенная в геном хозяина ДНК вируса начинает синтезировать два онкогена, Е6 и Е7. Онкоген Е7 связывается с белком ретинобластомы, препятствуя ингибированию E2F. Это приводит к неконтролируемому делению клетки и повышенному синтезу белка p16INK4a, что может быть зафиксировано с помощью цитоиммунохимической реакции.

В то же время, хотя отмечается четкая корреляция обнаружения ДНК вируса папилломы человека с дисплазиями, имеется также большое количество ПЦР-позитивных по HPV случаев (с эписомальной локализацией HPV), в которых при последующем гистологическом исследовании отсутствует предрак и рак. Это подтверждается негативной иммуноцитохимической реакцией на р16ink4a в диспластических клетках.

В данном исследовании применяется современная технология приготовления цитопрепаратов — жидкостная цитология. Важная особенность метода, повышающая качество исследования: исследуемый материал берется в специальный стабилизирующий раствор, который обеспечивает его сохранность без разрушения и потери клеток. При этом весь клеточный материал сохраняет без изменения свои морфологические и иммуноцитохимические свойства. В последние пять лет в разных странах проводилось много исследований, в которых сравнивалась эффективность традиционной техники и жидкостной цитологии с использованием для подтверждения диагнозов гистологической экспертизы как «золотого стандарта» и оценки цитопрепаратов согласно классификации TBS (The Bethesda System). Метод жидкостной  цитологии признан надежным лабораторным тестом, который снижает количество ложноотрицательных результатов, неудовлетворительных для анализа препаратов и время, необходимое цитологу для оценки препарата.

Материал для цитологического исследования получают с поверхности слизистой оболочки. Слизь, присутствующая во взятом материале, мешает перенести на мазок клетки, также материал невозможно равномерно перемешать. При переносе материала на стекло традиционным способом клетки области шейки матки могут не попасть в препарат, подсушивание и потеря прилипших к инструменту клеток значительно снижает диагностическую информативность микропрепаратов. Метод жидкостной цитологии позволяет исключить эти негативные факторы. Преимущество жидкостной цитологии состоит в том, что при взятии материала можно получить до 5-6 «серийных» (то есть одинаковых по клеточному составу) мазков. Это дает возможность применения дополнительных методов исследований.

Данное обследование может быть применено в диагностике поражения шейки матки, где это является наиболее частым и востребованным методом исследования. Оно может позволить:

  • достоверно оценивать потенциал дисплазии в отношении развития рака шейки матки и, соответственно, выбирать более консервативную или более агрессивную тактику лечения;
  • уточнять заключения цитолога — дополнительному исследованию на онкопротеина р16ink4a подлежат все случаи атипической цитологии (кроме инвазивного рака шейки матки), неопределенные цитологические заключения (атипические клетки плоского эпителия неясного значения-ASCUS) и все изменения железистого эпителия;
  • разрешать спорные вопросы при выявлении гинекологом высокоаномальной кольпоскопической картины, не сопровождающейся изменениями в цитологическом мазке;
  • во многих случаях обоснованно отказаться от биопсии — у большинства пациенток пожилого возраста с цитологической картиной дисплазии на фоне атрофического цервицита обоснованно избирать выжидательную тактику, отказавшись не только от лечения, но и от биопсий, и увеличить интервалы между диспансерными осмотрами; у небольшого числа р16ink4a-позитивных пациенток этой возрастной группы, напротив, обоснованно избрать более активную тактику;
  • определять индивидуальную тактику в отношении пациенток, инфицированных штаммами вируса папилломы человека  высокого онкогенного потенциала, если у них нет цитологических и кольпоскопических изменений; у женщин с позитивной ПЦР по HPV выделить группу пациенток, у которых уже инициирован канцерогенез в эпителии шейке матки, и направить на них необходимое лечебное воздействие; соответственно, в более многочисленной группе р16ink4a-негативных женщин необходимо продолжить мониторинг;
  • усовершенствовать мониторинг пациенток, прошедших органосохраняющее лечение по поводу «тяжелой дисплазии» или «рака in situ», добавив определение онкопротеина р16ink4a к рутинному цитологическому исследованию, это позволит у пациенток наибольшего риска повысить чувствительность цитологического исследования и тестировать персистирующую папиллома-вирусную инфекцию до появления морфологических изменений.

Для чего используется исследование?

  • Обследование женщин независимо от наличия или отсутствия патологии шейки матки;
  • обследование женщин и мужчин при подозрении на рак шейки матки, рак толстой кишки, рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы;
  • наличие патологии шейки матки;
  • контроль эффективности лечения патологии шейки матки

Когда назначается исследование?

  • При наличии клинико-анамнестических признаков (эрозия, лабораторно подтвержденное инфицирование ВПЧ), позволяющих заподозрить онкологический процесс в шеечной части матки, мочевого пузыря, прямой кишке;
  • все случаи атипической цитологии (кроме инвазивного рака шейки матки), неопределенные цитологические заключения (атипические клетки плоского эпителия неясного значения) и все изменения железистого эпителия;
  • при выявлении высокоаномальной кольпоскопической картины, не сопровождающейся изменениями в цитологическом мазке;
  • при наблюдении за пациентками, прошедшими органосохраняющее лечение по поводу «тяжелой дисплазии» или «рака in situ» в целях повышения чувствительности цитологического исследования.

Что означают результаты?

Референсные значения: отсутствие экспрессии белка р16 в клетках эпителия (негативная реакция).

Заключение включает в себя два подраздела: цитологическое описание и иммуноцитохимическое исследование на р16ink4a.

Цитологическое заключение интерпретируется в зависимости от выявления онкомаркера р16ink4a. В особенности это относится к дисплазиям шейки матки.

Белок р16(INK4a) осуществляет контроль разобщения комплекса E2F-Rb, препятствуя пролиферации клетки. В норме по механизму обратной связи синтез р16 сдерживается, таким образом, концентрация данного белка в нормальной клетке чрезвычайно мала, что проявляется негативной иммуноцитохимической реакцией.

Достоверно показано, что экспрессия р16 связана с низкой, умеренной и тяжелой дисплазией, причем экспрессия р16 практически не встречается в плоском эпителии без признаков дисплазии (0-2% случаев).

Экспрессия белка р16 нарастает с увеличением степени дисплазии и выявляется:

  • в 16% случаев при CIN I – плоскоклеточном интраэпителиальном поражении низкой степени тяжести – воспалительные изменения, характерные для инфекции ВПЧ, слабая дисплазия эпителия;
  • в 64% при CIN II — плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени тяжести – умеренная дисплазия эпителия;
  • в 90% случаев при CIN III — тяжелая дисплазия эпителия и внутриэпителиальный рак шейки матки;
  • в 100% при плоскоклеточном раке шейки матки.

Кто назначает исследование?

Гинеколог, онколог.

Также рекомендуется

[12-134] Определение предиктора изменений эндометрия PTEN, Ki67

[09-106] Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]

Литература

  • Аляутдина О.С., Синицына О.В. ЗНАЧЕНИЕ ТЕСТА НА ОНКОБЕЛОК Р16INK4A В АЛГОРИТМЕ ДИАГНОСТИКИ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2016. – № 11-1. – С. 58-60.
  • Ашрафян Л.А., Харченко Н.В., Огрызкова В.Л., Антонова И.Б. Принципы лечения премикроинвазивного рака шейки матки.// Практическая онкология. — 2002. — Том 3. — С. 173-178;17.
  • Бохман Я.В. Руководство по онкогинекологии./Я.В. Бохман. – С.-Пб. «Фолиант». 2002.
  • Н.В. Данилова, Ю.Ю. Андреева, с соавт. Маркеры апоптоза и белки-регуляторы клеточного цикла при фоновых и предраковых изменениях железистого эпителия шейки матки. Онкология. Журнал им. П.А. Герцена, 1, 2013.
  • Протасова А.Э. Клиническая оценка и фармако-экономический анализ диагностики и лечения основных злокачественных опухолей женских гениталий в амбулаторных условиях.Автореф. дис. д-ра мед. наук. СПб., 2011.
  • Сагайдак В.Н., Комарова Л.Е. Рак шейки матки и цитологический скрининг. – М. 1994.
  • Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2016. – № 11 (часть 1) – С. 58-60.
  • Сергеева Н.С., Маршутина Н.В. Новые серологические и уринологическиеопухолевые маркеры в уточняющей диагностике и мониторинге онкологических больных // Материалы VII Российской онкологической конференции. — М., 2003.
  • Хансон К.П., Имянитов Е.Н. Современные представления о канцерогенезе рака шейки матки.//  Практическая онкология — 2002. — Том 3. — С. 145-155;18.
  • Экспрессия р53 в поверхностных уротелиальных карциномах мочевого пузыря – независимый фактор прогноза. М.В. Ковылина, Е. А. Прилепская, О.А. Цыбуля, Н.В. Тупикина, И.В. Рева.ОНКОУРОЛОГИЯ 2’2016. ТОМ 12.
  • Bibbo M., Klump W.J., DeCecco J., Kovatish A.J. Procedure for immunocytochemical detection of p16INK4A antigen in thin-layer, liquid-based specimens.// ActaCytol. — 2002. — V.46 — P. 25-29;15.
  • Jenison S.A., Yu X.P., Valentine J.M., Galloway D.A. Characterization of human antibody-reactive epitopes encoded by human papillomavirus types 16 and 18. //  J Virol. 1991 — V.65(3) — P. 1208-1218;1.
  • Klaes R., Froedrich T., Spitkovsky D. et al. Overexpression of p16(INK4A) as a specific marker for dysplastic and neoplastic epithelial cells of the cervix uteri.// Int J Cancer. 2001 — V.92(2) — P.276-84;4.
  • Meyer J.L., Hanlon D.W., Andersen B.T. et al. Evaluation of p16INK4a expression in ThinPrep cervical specimens with the CINtec p16INK4a assay: correlation with biopsy follow-up results.// Cancer. — 2007. — V. 111(2). — P. 83-92;20.
  • Nieh S., Chen S. F., Chu T.Y. et al. Expression of p16 INK4A in Papanicolaou smears containing atypical squamous cells of undetermined significance from the uterine cervix. // Gynecol Oncol. — 2003. — V.91(1) — P.201-8;5.

Обзор плоскоклеточной дисплазии | Iowa Head and Neck Protocols

Обзор плоскоклеточной дисплазии

Вернуться к: Белые бляшки при лейкоплакии гортани на голосовых связках

Перейти к: Легкая плоскоклеточная дисплазия, вызывающая лейкоплакию гортани

Перейти к: Умеренная плоскоклеточная дисплазия, вызывающая лейкоплакию гортани

Перейти к: Тяжелая плоскоклеточная дисплазия или карцинома in situ, вызывающая лейкоплакию гортани

Перейти к: Инвазивная плоскоклеточная карцинома, вызывающая лейкоплакию гортани

см. также: Карцинома in situ против тяжелой дисплазии

Плоскоклеточная дисплазия определяется ВОЗ как «измененный эпителий с повышенной вероятностью прогрессирования в плоскоклеточный рак (SCC). Он может показать различные как архитектурные, так и цитологические аномалии (таблица 1), которые рассматриваются в комбинации для определения степени поражения слизистой оболочки. Степень связана с относительным риском развития инвазивной карциномы. В Университете Айовы мы используем классификационную схему ВОЗ 2005 г. для классификации предшествующих поражений (таблица 2).

 

Таблица 1. Архитектурные и цитологические аномалии, присутствующие при дисплазии

Архитектурные изменения

Цитологические изменения

Нарушение клеточной стратификации

Анизонуклеоз (изменчивость размеров ядер)

Потеря сотовой полярности

Ядерный плеоморфизм (изменение формы ядра)

Митотические фигуры над базальной зоной

Анизоцитоз (вариабельность размера клеток)

Дискератоз (преждевременное ороговение)

Повышенное ядерно-цитоплазматическое (N/C) соотношение

Глубокое кератиновое жемчужное образование

Атипичные митозы

 

Изменения ядерного хроматина (гиперхромазия)

 


  Таблица 2. Схемы классификации предраковых плоскоклеточных поражений головы и шеи

Плоскоклеточная интраэпителиальная неоплазия (SIN)

Люблянская классификация плоскоклеточных интраэпителиальных поражений (SIL)

Легкая дисплазия

СИН 1

Базально-/парабазально-клеточная гиперплазия

Умеренная дисплазия

СИН 2

Атипическая гиперплазия

Тяжелая дисплазия

СИН 3

Атипическая гиперплазия

Карцинома in situ

СИН 3

Карцинома in situ

 

Обычно мы используем следующую рубрику для определения степени дисплазии:

Легкая дисплазия: Архитектурное нарушение, как правило, ограниченное нижней третью слизистой оболочки с минимальными цитологическими аномалиями. Если митозы присутствуют, они ограничены базальным/парабазальным слоями. Также отсутствует разрастание слизистой оболочки. См. пример легкой дисплазии ниже.

Умеренная дисплазия: Архитектурное нарушение распространяется на среднюю треть слизистой оболочки с сопутствующими более значительными цитологическими аномалиями. Митозы обычно ограничиваются нижними участками слизистой оболочки. На этой стадии слизистая оболочка может иметь аномальный эпителиально-стромальный интерфейс и может иметь место разрастание слизистой оболочки вниз.Является ли это ранним вторжением, может быть чрезвычайно трудно определить. Важно помнить, что если цитологические изменения явно ненормальны, умеренная дисплазия может перейти в тяжелую дисплазию/карциному in situ. См. пример умеренной дисплазии ниже.

Тяжелая дисплазия/карцинома in situ: В то время как другие пытаются разделить эти две степени дисплазии, мы предпочитаем рассматривать их как синонимы, поскольку оба имеют значительно повышенный потенциал быть последним наблюдаемым этапом перед стромальной инвазией. Архитектурное расстройство обычно распространяется на верхнюю треть слизистой оболочки и сопровождается выраженной вариабельностью размера ядер, аномальной формой ядер и ядерной гиперхромазией. Митозы обычно локализуются в верхних слоях слизистой оболочки и могут быть даже атипичными формами. На этой стадии наблюдается более очевидный нисходящий, выпуклый или почковательный характер роста, указывающий на наличие измененного эпителиально-стромального интерфейса. Особое внимание к этому соединению имеет решающее значение для исключения ранней инвазивной карциномы.См. пример тяжелой плоскоклеточной дисплазии/карциномы in situ ниже.

При рассмотрении всех форм дисплазии мы подчеркиваем необходимость развития и поддержания прочных коллегиальных отношений между хирургом головы и шеи и хирургическим патологоанатомом, чтобы при биопсии и исследовании лейкоплакического поражения возникала соответствующая клинико-патологическая корреляция, поскольку последствия для пациента могут быть значительным. Если когда-либо обнаруживается несоответствие между клиническим впечатлением и патоморфологическим диагнозом, рекомендуется совместное рассмотрение, например, в комиссии по опухолям.

Примеры плоскоклеточной дисплазии

Легкая дисплазия: Архитектурное расстройство, обычно ограниченное нижней третью слизистой оболочки с легким ядерным плеоморфизмом и гиперхроматизмом. Отмечены митоз (черная стрелка) и пара дискератотических клеток (белые стрелки).

Умеренная дисплазия: архитектурные изменения распространяются на среднюю треть этой биопсии с умеренным ядерным плеоморфизмом, аномалиями ядерного хроматина (грубыми и гиперхроматическими) и митозом среднего слоя (черная стрелка).

Тяжелая дсплазия/карцинома in situ: архитектурное нарушение почти полной толщины с выраженным ядерным плеоморфизмом и гиперхроматизмом, дискератозом (белые стрелки) и митозами верхнего слоя (черные стрелки).

 

 

    Сообщается, что конверсия рака голосовой щели in situ в инвазивный рак голосовой щели произошла у 5,4% из 3738 пациентов, идентифицированных в базе данных SEER с 1988 по 2012 год (Khaja 2016).Когда инвазивный рак впоследствии обнаруживается после лечения с помощью биопсии или удаления CIS, трудно отличить персистенцию от неполной резекции от продолжающейся трансформации «полевой раковой слизистой оболочки» (Gailey 2015). В других ретроспективных когортных исследованиях, проведенных в одном учреждении, прогрессирование до инвазивного рака описано у 11% (Sengupta, 2010) и 9,6% (Karatayli-Ozgurosoy, 2015). Объединенный метаанализ 9 исследований Weller et al (2010) сообщил о 30% злокачественной трансформации тяжелой дисплазии/CIS.Считается, что влияние продолжительного курения и употребления алкоголя является важной переменной, повышающей риск злокачественной трансформации.

Каталожные номера:

Хаджа С. Ф., Хоффман Х.Т. и Пейдждар Н.А.: Тенденции лечения и выживания при карциноме голосовой щели in situ и раке Satge I с 1988 по 2012 год Анналы отологии, ринологии и ларингологии 125(4) 2016

Сенгупта Н., Моррис К.Г., Кирван Дж., Амдур Р.Дж., Менденхолл В.М. Окончательная лучевая терапия рака in situ истинных голосовых связок.Am J клин Oncol. 2010;33(1):94-95

Weller MD, Nankivell PC, Mcconkey C, Paleri V, Mehanna HM. Риск и интервал малигнизации больных с дисплазией гортани; систематический обзор серии случаев и метаанализ. Клин Отоларингол. 2010;35(5):364-372

Каратайли-Озгурсой с, Пачеко-Лопес П, Гилель А.Т., Бест С.Р., Бишоп Ю.А., Акст Л.М. Дисплазия гортани, демография и лечение: одно учреждение, 20-летний обзор. JAMA Otolaryngol Head Neck Surg. 2015;141(4):313-318

«Лейкоплакия» (глава книги) Гейли М. и Хоффмана Х. в «Учебнике отоларингологии Саталоффа» под редакцией доктораРоберт Саталофф 2015

 

Эпителиальная дисплазия — общий обзор

Патологические признаки

Эндоскопически ГЭД может казаться абсолютно нормальным или демонстрировать неровности слизистой оболочки, такие как бляшки, узелки, полипы, эрозии, язвы, 390 и рубцы слизистой оболочки, 389 либо с или без диффузных воспалительных изменений. 389 , 423 Полиповидные диспластические поражения часто неправильно интерпретируются как спорадическая аденома желудка, но наличие хронического гастрита с ИМ на фоне слизистой оболочки является ключом к пониманию истинной природы опухолевого поражения.

ГЭД характеризуется сочетанием цитологической и архитектурной атипии. Различают два общих гистологических подтипа. Аденоматозная (или кишечного типа) Дисплазия , названная так из-за сходства с аденомами толстой кишки, является более частым типом. Микроскопически аденоматозная дисплазия характеризуется наличием скученных трубчатых желез, выстланных атипичными столбчатыми клетками с перекрывающимися, карандашными, гиперхромными ядрами, псевдостратификацией и незаметными ядрышками. 425 Второй, менее распространенный гистологический вариант, называемый некоторыми авторитетами фовеолярным (желудочным типом) дисплазией (или типом II), развивается в неметапластическом желудочном эпителии. 425 Микроскопически фовеолярная дисплазия состоит из эпителия фовеолярного типа с цитологической и архитектурной атипией. Фовеолы ​​различаются по размеру и форме, иногда обнаруживаются папиллярные складки и просветные зазубрины. Диспластические клетки обычно имеют кубовидную или низкостолбчатую форму, содержат прозрачную или эозинофильную цитоплазму и имеют круглые или овальные везикулярные ядра с ядрышками.Другие общие цитологические особенности, которые более выражены при аденоматозной ГЭД, включают истощение муцина, скученность, потерю полярности, усиление митозов, ядерный плеоморфизм и отсутствие созревания поверхности. Генетические различия существуют между двумя различными подтипами GED. 426–428

Аденоматозную и фовеолярную (желудочного типа) дисплазию также можно различить на основе их муцинового фенотипа. Например, аденоматозный тип в большинстве случаев экспрессирует MUC2 и CD10. Напротив, фовеолярный (желудочный) тип чаще всего экспрессирует MUC5AC, но не CD10. Однако встречаются гибридные случаи. 426

В клинической практике чаще всего используется двухуровневая система оценок GED (низкая и высокая степень) (табл. 12-9). 389,393,425,429–432 Этот метод оценки GED оказался более воспроизводимым, чем трехуровневая система, состоящая из легкой, средней и тяжелой степени тяжести. 371 Он также предоставляет клинически значимый метод стратификации риска, который используется для принятия решений о лечении. 433

Низкая степень ГЭД характеризуется отсутствием или минимальным архитектурным нарушением эпителия (рис.12-60). Клетки демонстрируют атипию от легкой до умеренной степени, плотно упакованы и имеют ядра, которые обычно располагаются в базальной половине клеточной цитоплазмы. 371,433–435 Дисплазия высокой степени характеризуется эпителием с цитологическими и структурными изменениями, такими как скученность, ветвление и почкование (рис. 12-61). Внутрипросветный некротический мусор обычно присутствует при дисплазии высокой степени (см. рис. 12-61). 436 Клетки при дисплазии высокой степени обычно имеют кубовидную форму, а не столбчатую, и содержат высокое соотношение ядра и цитоплазмы.Обычны большие и неправильные ядра со слипшимся хроматином и заметными ядрышками. Митозы более многочисленны, а атипичные митозы более заметны по сравнению с дисплазией низкой степени. 371 , 433 , 435 Диспластические ядра часто проникают в люминальную часть клеточной цитоплазмы, и ядерная полярность обычно утрачивается, по крайней мере, частично, если не полностью.

Несмотря на попытку Всемирной организации здравоохранения заменить термин GED на внутриэпителиальная неоплазия желудка (низкой или высокой степени), термин дисплазия остается прочно закрепленным в клинической практике и в опубликованной литературе. 437

Известны расхождения в интерпретации дисплазии между японскими и западными патологоанатомами. Например, неинвазивные внутрислизистые неопластические поражения с высокой степенью клеточной и архитектурной атипии часто называются внутрислизистой карциномой японскими патологоанатомами, тогда как западные патологоанатомы обычно интерпретируют те же самые поражения как дисплазию высокой степени (рис. 12-62). В ответ на различия в интерпретации схема консенсуса (т.э., Венская классификация). 438 В системе Венской классификации, которая также основана на последствиях лечения, предраковые поражения высокой степени злокачественности, но без инвазии собственной пластинки, и инвазивные аденокарциномы, ограниченные собственной пластинкой (внутрислизистые аденокарциномы), считаются одной неопластической категорией, потому что оба обычно поддаются эндоскопической резекции слизистой оболочки.

Плоскоклеточная дисплазия полости рта

Что такое плоскоклеточная дисплазия?

Плоскоклеточная дисплазия в полости рта является предраковым заболеванием.Он начинается со специализированных плоскоклеточных клеток, которые покрывают внутреннюю часть полости рта, включая язык, слизистую оболочку щек, дно рта, твердое небо и десны (см. рисунок ниже).

Плоскоклеточная дисплазия считается предраковым заболеванием, поскольку со временем превращается в тип рака, называемый плоскоклеточным раком. Он может начаться в любой части полости рта, хотя наиболее частая локализация — боковая граница языка.

Риск, связанный с превращением плоскоклеточной дисплазии в рак, зависит от того, насколько аномальными выглядят плоскоклеточные клетки под микроскопом.Риск рака является самым высоким, когда ваш патологоанатом описывает изменения как тяжелые (см. Степень ниже).

Полость рта

Ротовая полость является началом воздушно-пищеварительного тракта. Полость рта начинается у губ и заканчивается там, где рот встречается с глоткой. Полость рта состоит из нескольких частей, включая губы, язык, дно рта, десны, слизистую оболочку щек, твердое небо и ретромолярный треугольник.

Внутренняя поверхность полости рта покрыта специализированными плоскими клетками.которые образуют барьер, называемый эпителием. Ткань под эпителием называется стромой. Патологи используют слово слизистая оболочка для описания ткани, которая включает как эпителий, так и строму.

Что вызывает плоскоклеточную дисплазию в полости рта?

Наиболее частой причиной плоскоклеточной дисплазии полости рта является курение. Другие причины включают чрезмерное употребление алкоголя, подавление иммунитета и предшествующее облучение головы и шеи.

Как патологоанатомы ставят этот диагноз?

Диагноз плоскоклеточной дисплазии обычно ставится после взятия небольшого образца ткани в ходе процедуры, называемой биопсией.Биопсия обычно выполняется, потому что вы или ваш врач увидели аномально выглядящий участок ткани в полости рта. В вашем отчете о патологии, вероятно, будет указано, какая часть полости рта была взята для биопсии.

Диагноз плоскоклеточной дисплазии можно поставить только после исследования образца ткани под микроскопом. По сравнению с нормальными, здоровыми плоскоклеточными клетками, аномальные клетки в области плоскоклеточной дисплазии обычно крупнее и темнее. Патологи используют слово «гиперхроматический» для описания клеток, которые выглядят темнее, чем нормальные клетки.Большие скопления генетического материала, называемые ядрышками, также можно увидеть в ядре аномальных клеток. Эти плоскоклеточные клетки также обычно подвергаются аномальному развитию, что приводит к процессу, называемому кератинизацией.

Аномальные клетки при плоскоклеточной дисплазии видны только в эпителии. Это отличается от плоскоклеточной карциномы, где аномальные клетки также видны в строме под эпителием. Перемещение аномальных клеток из эпителия в строму называется инвазией.Ваш патологоанатом тщательно изучит образец ткани, чтобы убедиться в отсутствии признаков инвазии, прежде чем ставить диагноз плоскоклеточной дисплазии.

Марка

Патологи используют слово «степень» для описания разницы между аномальными клетками в области плоскоклеточной дисплазии и нормальными, здоровыми плоскоклеточными клетками, которые обычно обнаруживаются в ротовой полости. Патологи используют размер, цвет и форму клетки для определения степени. По этим признакам плоскоклеточную дисплазию в полости рта обычно делят на три уровня.

  • Легкая дисплазия. Аномальные плоскоклеточные клетки очень похожи на нормальные плоскоклеточные клетки.
  • Умеренная дисплазия. Аномальные плоскоклеточные клетки темнее и крупнее нормальных плоскоклеточных клеток, и нормальная организация эпителия может быть нарушена.
  • Тяжелая дисплазия. Аномальные плоскоклеточные клетки похожи на раковые клетки, но по-прежнему видны только в эпителии. Другое название тяжелой дисплазии — плоскоклеточный рак in situ.

Некоторые отчеты о патологии объединяют умеренную и тяжелую дисплазию и называют их дисплазией высокой степени.Легкая дисплазия называется дисплазией низкой степени.

Степень плоскоклеточной дисплазии очень важна, поскольку она связана с риском развития инвазивного рака в будущем. Плоскоклеточная дисплазия легкой степени (низкой степени) имеет очень низкий риск превращения в рак и часто не лечится. Умеренная и тяжелая (высокая степень) плоскоклеточная дисплазия связана с гораздо более высоким риском развития рака, и пациентам с этим заболеванием обычно предлагается лечение по удалению пораженной ткани.

Поля

Край — это любая ткань, которую хирург разрезал, чтобы удалить область плоскоклеточной дисплазии с вашего тела. Типы полей, описанные в вашем отчете, будут зависеть от вовлеченного органа и типа выполненной операции. Границы будут описаны в вашем отчете только после того, как вся аномальная область ткани будет удалена.

Отрицательный край означает, что дисплазия не была обнаружена ни на одном из краев разреза ткани. Край называется положительным, когда имеется умеренная или выраженная плоскоклеточная дисплазия по самому краю разреза ткани.Положительный край связан с более высоким риском рецидива плоскоклеточной дисплазии в том же месте после лечения.

, Джейсон Вассерман, доктор медицинских наук, доктор медицинских наук FRCPC (обновлено 21 июля 2021 г.)

Плоскоклеточный рак верхних отделов пищеварительного тракта: дисплазия и отдельные варианты

  • 1

    Crissman JD, Zarbo RJ . Дисплазия, карцинома in situ и прогрессирование до инвазивной плоскоклеточной карциномы верхних дыхательных путей. Am J Surg Pathol 1989; 13 (доп. 1): 5–16.

    ПабМед Google Scholar

  • 2

    Криссман Д.Д., Гнепп Д.Р., Гудман М.Л. и др. . Преинвазивные поражения верхних отделов пищеварительного тракта. Гистологические определения и клинические последствия (симпозиум). Патол Анну 1987; 22 :311–353.

    ПабМед Google Scholar

  • 3

    Гейл Н., Хилле Дж., Джордан Р. и др. , Предшествующие поражения.Дисплазия В: El-Naggar AK, Grandis JR, Slootweg PJ и др. (ред.). Классификация ВОЗ опухолей головы и шеи , 4-е изд. Международное агентство по изучению рака (IARC): Лион, Франция, 2017 г. (в печати).

  • 4

    Nucci MR, Lee KR, Crum CP Опухоли женских половых путей В: Fletcher CDM (ed.). Диагностическая гистопатология опухолей 4-е изд. Эльзевир Сондерс: Филадельфия, 2013 г., стр. 814–871.

    Google Scholar

  • 5

    Friedmann I, Ferlito A Предшественники плоскоклеточного рака В: Ferlito A (ed. ). Новообразования гортани . Черчилль Ливингстон: Эдинбург, 1993, стр. 97–111.

    Google Scholar

  • 6

    Гейл Н., Камбич В., Майклс Л. и др. . Люблянская классификация: практическая стратегия диагностики предраковых поражений гортани. Adv Anat Pathol 2000; 4 :240–251.

    Артикул Google Scholar

  • 7

    Гейл Н., Благус Р., Эль-Мофти С.К. и др. .Оценка новой системы классификации плоскоклеточных интраэпителиальных поражений гортани — предлагаемая унифицированная классификация. Гистопатология 2014; 65 : 456–464.

    Артикул Google Scholar

  • 8

    Бастюрк О., Хонг С.М., Вуд Л.Д. и др. . Пересмотренная система классификации и рекомендации Балтиморского консенсусного совещания по предраковым новообразованиям в поджелудочной железе. Am J Surg Pathol 2015; 39 :1730–1741.

    Артикул Google Scholar

  • 9

    Криссман Д.Д. Кератоз гортани и последующая карцинома. Head Neck Surg 1979; 1 :386–391.

    КАС Статья Google Scholar

  • 10

    McGavran MH, Bauer WC, Ogura JH . Изолированный кератоз гортани: его связь с раком гортани на основе клинико-патологического исследования 87 последовательных случаев с длительным наблюдением. Ларингоскоп 1960; 70 :932–951.

    Артикул Google Scholar

  • 11

    Норрис К.М., Пил А.Р. Кератоз гортани. Ж Ларынгол Отол 1963; 77 :635–647.

    КАС Статья Google Scholar

  • 12

    Габриэль К.Э., Джонс Д.Г. Гиперкератоз гортани. Ж Ларынгол Отол 1973; 87 : 129–134.

    КАС Статья Google Scholar

  • 13

    Генри Р. К. Трансформация лейкоплакии гортани в рак. Ж Ларынгол Отол 1979; 93 : 447–459.

    КАС Статья Google Scholar

  • 14

    Barnes L Заболевания гортани, гортаноглотки и пищевода В: Barnes L (ред.). Хирургическая патология головы и шеи . Марсель Деккер: Нью-Йорк, 2001, стр. 127–237.

    Google Scholar

  • 15

    Ву С.-Б., Кэшман Э.К., Лерман М.А. Интраэпителиальная неоплазия ротовой полости, ассоциированная с вирусом папилломы человека. Мод Патол 2013; 26 :1288–1297.

    КАС Статья Google Scholar

  • 16

    McCord C, Xu J, Xu W и др. . Ассоциация папилломавирусной инфекции высокого риска с дисплазией эпителия полости рта. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 2013; 115 :549.

    Артикул Google Scholar

  • 17

    Чернок Р. Д., Нуссенбаум Б., Торстад В.Л. и др. . Обширная связанная с ВПЧ карцинома in situ верхних отделов пищеварительного тракта с «неороговевающими» гистологическими признаками. Голова шеи Pathol 2014; 8 :322–328.

    Артикул Google Scholar

  • 18

    Миллер А.Х., Фишер Х.Р. Ключи к истории жизни карциномы in situ гортани. Ларингоскоп 1971; 81 :1475–1480.

    КАС Статья Google Scholar

  • 19

    Crissman JD, Zarbo RJ, Drozdowicz S и др. . Карцинома in situ и микроинвазивная плоскоклеточная карцинома голосовой щели гортани. Arch Otolaryngol Head Neck Surg 1988; 114 : 299–307.

    КАС Статья Google Scholar

  • 20

    Gillis TM, Incze MS, Vaughan CW и др. .Естественное течение и лечение кератоза, атипии, карциномы in situ и микроинвазивного рака гортани. Am J Surg 1983; 146 : 512–516.

    КАС Статья Google Scholar

  • 21

    Панвар А., Линдау Р. 3-й, Виланд А. . Лечение предраковых поражений гортани. Expert Rev Anticancer Ther 2013; 13 :1045–1051.

    КАС Статья Google Scholar

  • 22

    ДеСанто Л.В.Рак надсвязочного отдела гортани: обзор 260 больных. Отоларингол Head Neck Surg 1985; 93 : 705–711.

    КАС Статья Google Scholar

  • 23

    Криссман Д.Д., Кессис Т., Шах К.В. и др. . Плоско-папиллярная неоплазия верхних дыхательных путей. Хум Патол 1988; 19 :1387–1396.

    КАС Статья Google Scholar

  • 24

    Томпсон ЛДР, Вениг Б.М., Хеффнер Д.К. и др. .Экзофитный и папиллярный плоскоклеточный рак гортани: клинико-патологическая серия из 104 случаев. Отоларингол Head Neck Surg 1999; 120 : 718–724.

    КАС Статья Google Scholar

  • 25

    Suarez PA, Adler-Storthz K, Luna MA и др. . Папиллярные плоскоклеточные карциномы верхних дыхательных путей: клинико-патологическое и молекулярное исследование. Шея головы 2000; 22 :360–368.

    КАС Статья Google Scholar

  • 26

    Джо В.Ю., Миллс С.Е., Столер М.Х. и др. . Папиллярно-плоскоклеточный рак головы и шеи: частая ассоциация с папилломавирусной инфекцией и инвазивной карциномой. Am J Surg Pathol 2009; 33 :1720–1724.

    Артикул Google Scholar

  • 27

    Рассел Д.О., Хошар А.П., Шарпф Дж.Папиллярный плоскоклеточный рак головы и шеи: клинико-патологический ряд. Am J Отоларингол. 2011; 32 : 557–563.

    Артикул Google Scholar

  • 28

    Эль-Мофти SK . Варианты плоскоклеточного рака головы и шеи, связанные с ВПЧ. Голова шеи Pathol 2012; 6 (Дополнение 1): S55–S62.

    Артикул Google Scholar

  • 29

    Мехрад М., Карпентер Д.Х., Чернок Р.Д. и др. .Папиллярный плоскоклеточный рак головы и шеи: клинико-патологические и молекулярные особенности с особым упором на вирус папилломы человека. Am J Surg Pathol 2013; 37 :1349–1356.

    Артикул Google Scholar

  • 30

    Yang CH, Huang CC, Ko MT и др. . Папилломавирусная инфекция и папиллярно-плоскоклеточный рак в области головы и шеи. Тумор Биол 2013; 34 :301–307.

    Артикул Google Scholar

  • 31

    Дин Ю, Ма Л, Ши Л и др. . Папиллярный плоскоклеточный рак слизистой оболочки полости рта: клинико-патологическое и иммуногистохимическое исследование 12 случаев и обзор литературы. Энн Диагн Патол 2013; 17 :18–21.

    Артикул Google Scholar

  • 32

    Фитцпатрик С.Г., Нойман А.Н., Коэн Д.М. и др. .Папиллярный вариант плоскоклеточной карциномы, возникающий на деснах: 61 случай зарегистрирован из более крупной серии плоскоклеточной карциномы десны. Голова шеи Pathol 2013; 7 :320–326.

    Артикул Google Scholar

  • 33

    Аккерман Л.В. Веррукозная карцинома полости рта. Хирургия 1948; 23 :670–678.

    КАС пабмед Google Scholar

  • 34

    Батсакис Дж.Г., Хайбелс Р., Криссман Дж.Д. и др. .Патология опухолей головы и шеи: Веррукозная карцинома, часть 15. Head Neck Surg 1982; 5 : 29–38.

    КАС Статья Google Scholar

  • 35

    Ферлито А., Речер Г. . Опухоль Аккермана (веррукозный рак) гортани. Клинико-патологическое исследование 77 случаев. Рак 1980; 46 :1617–1630.

    КАС Статья Google Scholar

  • 36

    Медина Дж.Э., Дихтел В., Луна М.А.Веррукозно-плоскоклеточный рак полости рта. Клинико-патологическое исследование 104 случаев. Арка Отоларингол 1984; 110 : 437–440.

    КАС Статья Google Scholar

  • 37

    Валвекар Р.Р., Чаукар Д.А., Дешпанде М.С. и др. . Веррукозная карцинома полости рта: клинико-патологическое исследование 101 случая. Онкол для полости рта 2009; 45 : 47–51.

    Артикул Google Scholar

  • 38

    дель Пино М., Бликер М.С., Квинт В.Г. и др. .Всесторонний анализ распространенности вируса папилломы человека и потенциальной роли типов низкого риска в веррукозной карциноме. Мод Патол 2012; 25 :1354–1363.

    КАС Статья Google Scholar

  • 39

    Одар К., Коцян Б.Дж., Хошняк Л. и др. . Веррукозная карцинома головы и шеи — не опухоль, связанная с вирусом папилломы человека? J Cell Mol Med 2014; 18 :635–645.

    КАС Статья Google Scholar

  • 40

    Дайсон Н., Хоули П.М., Мюнгер К. и др. .Онкобелок Е7 вируса папилломы человека-16 способен связываться с продуктом гена ретинобластомы. Наука 1989; 243 : 934–937.

    КАС Статья Google Scholar

  • 41

    Шир М., Пиндборг Дж.Дж. Веррукозная гиперплазия слизистой оболочки полости рта. Рак 1980; 46 : 1855–1862.

    КАС Статья Google Scholar

  • 42

    Хансен Л.С., Олсон Дж.А., Сильверман С. .Пролиферативная веррукозная лейкоплакия. Долгосрочное исследование тридцати пациентов. Oral Surg Oral Med Oral Pathol 1985; 60 : 285–298.

    КАС Статья Google Scholar

  • 43

    Муррах В.А., Бацакис Дж.Г. Пролиферативная бородавчатая лейкоплакия и веррукозная гиперплазия. Энн Отол Ринол Ларингол 1994; 103 :660–663.

    КАС Статья Google Scholar

  • 44

    Gillenwater AM, Vigneswaran N, Fatani H и др. .Пролиферативная бородавчатая лейкоплакия (ПВЛ): обзор неуловимого патологического образования!. Adv Anat Pathol 2013; 20 :416–423.

    Артикул Google Scholar

  • 45

    Батсакис Дж.Г., Суарес П., Эль-Наггар А.К. Пролиферативная веррукозная лейкоплакия и родственные ей поражения. Онкол для полости рта 1999; 35 :354–359.

    КАС Статья Google Scholar

  • 46

    Патель К. Р., Чернок Р.Д., Чжан Т.Р. и др. .В веррукозных карциномах головы и шеи, в том числе с ассоциированным плоскоклеточным раком, отсутствует транскрипционно активный вирус папилломы человека высокого риска. Хум Патол 2013; 44 :2385–2392.

    КАС Статья Google Scholar

  • 47

    Левентон Г.С., Эванс Х.Л. Саркоматоидный плоскоклеточный рак слизистых оболочек головы и шеи: клинико-патологическое исследование 20 случаев. Рак 1981; 48 :994–1003.

    КАС Статья Google Scholar

  • 48

    Томпсон Л.Д., Винеке Дж.А., Миеттинен М. и др. . Веретеноклеточный (саркоматоидный) рак гортани: клинико-патологическое исследование 187 случаев. Am J Surg Pathol 2002; 26 :153–170.

    Артикул Google Scholar

  • 49

    Вишванатан С., Рахман К., Паллави С. и др. . Саркоматоидная (веретенообразная) карцинома области слизистой оболочки головы и шеи: клинико-патологический обзор 103 случаев из третичного онкологического центра. Голова шеи Pathol 2010; 4 :265–275.

    Артикул Google Scholar

  • 50

    Джерри Д., Фрич В.А., Ленч Э.Дж. Веретеноклеточная карцинома верхних дыхательных путей: анализ 341 случая по сравнению с обычной плоскоклеточной карциномой. Энн Отол Ринол Ларингол 2014; 123 : 576–583.

    Артикул Google Scholar

  • 51

    Лассер К.Х., Наим Ф., Хиггинс Дж. и др. .«Псевдосаркома» гортани. Am J Surg Pathol 1979; 3 : 397–404.

    КАС Статья Google Scholar

  • 52

    Ларсен Э.Т., Дагган М.А., Иноуэ М. . Отсутствие ДНК вируса папилломы человека в веретенообразных плоскоклеточных карциномах ротоглотки. Am J Clin Pathol 1994; 101 : 514–518.

    КАС Статья Google Scholar

  • 53

    Watson RF, Chernock RD, Wang X и др. .Веретеноклеточные карциномы головы и шеи редко содержат транскрипционно-активный вирус папилломы человека. Голова шеи Pathol 2013; 7 :250–257.

    КАС Статья Google Scholar

  • 54

    Ансари-Лари MA, Hoque MO, Califano J и др. . Иммуногистохимические паттерны экспрессии р53 при саркоматоидных карциномах верхних дыхательных путей. Am J Surg Pathol 2002; 26 :1024–1031.

    Артикул Google Scholar

  • 55

    Мариони Г., Альтавилла Г., Марино Ф. и др. . Плоскоклеточный рак гортани с остеосаркомоподобной стромальной метаплазией. Акта Отоларингол 2004; 124 :870–873.

    Артикул Google Scholar

  • 56

    Рой С. , Пургина Б., Ситала Р.Р. Веретеноклеточный рак гортани с рабдомиобластным гетерологичным элементом: редкая форма дивергентной дифференцировки. Голова шеи Pathol 2013; 7 : 263–267.

    Артикул Google Scholar

  • 57

    Эллис Г., Ланглосс Дж. М., Enzinger FM . Коэкспрессия кератина и десмина при карциносаркоме, поражающей верхнечелюстной альвеолярный гребень. Oral Surg Oral Med Oral Pathol 1985; 60 :410–416.

    КАС Статья Google Scholar

  • 58

    Zarbo RJ, Crissman JD, Venkat H и др. .Веретеноклеточный рак слизистой оболочки пищеварительного тракта: иммуногистологическое и ультраструктурное исследование 18 двухфазных опухолей и сравнение с семью монофазными веретеноклеточными опухолями. Am J Surg Pathol 1986; 10 :741–753.

    КАС Статья Google Scholar

  • 59

    Эллис Г. Л., Ланглосс Дж.М., Хеффнер Д.К. и др. . Веретеноклеточная карцинома аэропищеварительного тракта: иммуногистохимический анализ 21 случая. Am J Surg Pathol 1987; 11 :335–342.

    КАС Статья Google Scholar

  • 60

    Офир Д, Маршак Г, Чернобыльский Б . Отличительная иммуногистохимическая маркировка эпителиальных и мезенхимальных элементов при псевдосаркоме гортани. Ларингоскоп 1987; 97 :490–494.

    КАС пабмед Google Scholar

  • 61

    Льюис Дж. Э., Олсен К. Д., Себо Т. Дж. .Веретеноклеточная карцинома гортани: обзор 26 случаев, включая содержание ДНК и иммуногистохимию. Хум Патол 1997; 28 :664–673.

    КАС Статья Google Scholar

  • 62

    Епископ JA, Montgomery EA, Westra WH . Использование иммуногистохимии p40 и p63 и тестирования на вирус папилломы человека в качестве вспомогательных инструментов для распознавания саркоматоидной карциномы головы и шеи и ее отличия от доброкачественных и злокачественных мезенхимальных процессов. Am J Surg Pathol 2014; 38 : 257–264.

    Артикул Google Scholar

  • 63

    Наклех Р.Э., Зарбо Р.Дж., Юинг С. и др. . Миогенная дифференцировка при веретеноклеточном (саркоматоидном) раке верхних дыхательных путей. Appl Immunohistochem 1993; 1 : 58–68.

    Google Scholar

  • 64

    Вениг Б.М., Девани К., Бишелья М. .Воспалительные миофибробластические псевдоопухоли гортани: клинико-патологический отчет о восьми случаях, включая иммуногистохимический и ультраструктурный анализ. Рак 1995; 76 :2217–2229.

    КАС Статья Google Scholar

  • 65

    Лоуренс Б., Перес-Атайде А., Хиббард М.К. и др. . Онкогены TPM3-ALK и TPM4-ALK в воспалительной миофибробластной опухоли. Am J Pathol 2000; 157 : 377–384.

    КАС Статья Google Scholar

  • 66

    Гроб К. М., Патель А., Перкинс С. и др. . Экспрессия ALK и p80 и хромосомные перестройки с участием 2p23 при воспалительной миофибробластной опухоли (IMT). Мод Патол 2001; 14 : 569–576.

    КАС Статья Google Scholar

  • 67

    Уэйн С.Л., Кир Р., Фоллмер Р.Т. и др. .Базалоидно-плоскоклеточный рак языка, гортаноглотки и гортани. Хум Патол 1986; 17 :1158–1166.

    КАС Статья Google Scholar

  • 68

    Banks ER, Frierson HF Jr, Mills SE и др. . Базалоидный плоскоклеточный рак головы и шеи: клинико-патологическое и иммуногистохимическое исследование 40 случаев. Am J Surg Pathol 1992; 16 :939–946.

    КАС Статья Google Scholar

  • 69

    Эреньо С., Гаафар А., Гармендиа М. и др. .Базалоидный плоскоклеточный рак головы и шеи: клинико-патологическое и последующее исследование 40 случаев и обзор литературы. Голова шеи Pathol 2008; 2 : 83–91.

    Артикул Google Scholar

  • 70

    Фрич В.А., Ленч Э.Дж. Базалоидный плоскоклеточный рак ротоглотки: анализ 650 случаев. Отоларингол Head Neck Surg 2013; 148 : 611–618.

    Артикул Google Scholar

  • 71

    Бегум С, Вестра ВХ .Базалоидная плоскоклеточная карцинома головы и шеи представляет собой смешанный вариант, который в дальнейшем может быть разрешен при наличии ВПЧ-статуса. Am J Surg Pathol 2008; 32 :1044–1050.

    Артикул Google Scholar

  • 72

    Чернок Р.Д., Льюис Дж.С. мл., Чжан К. и др. . Папилломавирус-положительные базалоидные плоскоклеточные карциномы верхних отделов пищеварительного тракта: отдельный клинико-патологический и молекулярный подтип базалоидной плоскоклеточной карциномы. Хум Патол 2010; 41 :1016–1023.

    КАС Статья Google Scholar

  • 73

    Вайнеке Дж., Томпсон ЛДР, Вениг Б.М. Базалоидный плоскоклеточный рак полости носа и околоносовых пазух. Рак 1999; 85 :841–854.

    Артикул Google Scholar

  • 74

    Морис В.Г., Феррейро Х.А. Отличие базалоидного плоскоклеточного рака от аденоидно-кистозного и мелкоклеточного недифференцированного рака с помощью иммуногистохимии. Хум Патол 1998; 29 :609–612.

    КАС Статья Google Scholar

  • Трахеальная дисплазия предшествует бронхиальной дисплазии в мышиной модели плоскоклеточного рака легкого, индуцированного N-нитрозотрисхлорэтилмочевиной

    Abstract

    Плоскоклеточный рак легкого (SCC) является второй ведущей причиной смерти от рака легкого в США и имеет 5-летнюю выживаемость всего 16%. Гистологические изменения в бронхиальном эпителии, называемые дисплазией, являются предшественниками инвазивного плоскоклеточного рака. Однако клеточные механизмы, вызывающие дисплазию, неизвестны. Чтобы восполнить этот пробел в знаниях, мы использовали местное применение N-нитрозо-трис хлорэтилмочевины (NTCU) в течение 32 недель, чтобы вызвать плоскоклеточную дисплазию и плоскоклеточный рак у мышей. Через 32 недели преобладающим типом клеток в диспластических дыхательных путях были базальные клетки, экспрессирующие кератин (К) 5 и К14. Примечательно, что базальные клетки крайне редко встречаются в нормальном эпителии бронхов мышей, но их много в трахее. Поэтому мы оценили зависящие от времени изменения гистопатологии трахеи и бронхов после воздействия NTCU (4, 8, 12, 16, 25 и 32 недели).Мы показываем, что дисплазия трахеи возникает значительно раньше, чем дисплазия бронхиального эпителия (12 недель против 25 недель). Это было связано с увеличением числа K5 + /K14 + базальных клеток трахеи и полной потерей секреторных (секреторный белок клеток Club, экспрессирующих CCSP + ) и реснитчатых клеток. Окрашивание TUNEL тканей, обработанных NTCU, подтвердило, что потеря CCSP + и реснитчатых клеток не была связана с апоптозом. Однако митотический индекс (измеряемый по включению бромодезоксиуридина) показал, что лечение NTCU увеличивало пролиферацию базальных клеток K5 + в трахее и изменяло митотическое население бронхов с CCSP + на базальные клетки K5 + .Таким образом, мы демонстрируем, что NTCU-индуцированная дисплазия эпителия легких начинается в эпителии трахеи и сопровождается базально-клеточной метаплазией бронхиального эпителия. Этот анализ расширяет наши знания о модели NTCU-SCC, определяя ранние изменения фенотипов эпителиальных клеток в различных местах дыхательных путей, и это может помочь в определении новых целей для будущих исследований химиопрофилактики.

    Образец цитирования: Гош М., Дуайер-Нилд Л.Д., Квон Дж.Б., Бартель Л., Янссен В.Дж., Меррик Д.Т. и др.(2015)Трахеальная дисплазия предшествует бронхиальной дисплазии в мышиной модели плоскоклеточного рака легкого, индуцированного N-нитрозотрихлорэтилмочевиной. ПЛОС ОДИН 10(4): е0122823. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823

    Академический редактор: Владимир В. Калиниченко, Медицинский центр детской больницы Цинциннати, США

    Поступила в редакцию: 26 сентября 2014 г.; Принято: 17 февраля 2015 г.; Опубликовано: 10 апреля 2015 г.

    Авторское право: © 2015 Ghosh et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в пределах документ и его вспомогательные информационные файлы.

    Финансирование: Эта работа была поддержана следующим финансированием: (HL107686, MG), FAMRI (YCSA 113259, MG), NCI R01 CA132552-05 (LDD), NIH SPORE при раке легкого (P50-CA058187, RLK, DTM), награда за профилактику рака легких (AWD 120560, DTM) и программа оценки заслуг Министерства по делам ветеранов (RLK). Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Плоскоклеточный рак легкого (SCC) является вторым наиболее распространенным типом рака легкого, на долю которого в 2013 г. в США пришлось около 40 000 смертей [1]. Пятилетняя выживаемость при плоскоклеточном раке составляет всего 16%, что является крайне разочаровывающей статистикой [1].Предраковые бронхиальные дисплазии являются первыми выявляемыми гистологическими маркерами ПКР [2, 3], а гистологическое улучшение этих поражений служит конечной точкой в ​​исследованиях химиопрофилактики ПКР [4, 5]. Однако процессы, приводящие к дисплазии, изучены недостаточно. Целью данного исследования является определение последовательности клеточных изменений, которые приводят к плоскоклеточной дисплазии, предшествующей плоскоклеточному раку.

    Для этой работы требуется мышиная модель плоскоклеточного рака, точно воспроизводящая человеческое заболевание. Существуют три установленные мышиные модели плоскоклеточного рака легкого: 1) местное лечение N-нитрозотрисхлорэтилмочевиной (NTCU) [6–9]; 2) инактивация опухолевого супрессора LKB1 [10]; и 3) подавление IKKα [11].Важно отметить, что воздействие NTCU является единственной моделью, которая вызывает плоскоклеточную дисплазию бронхиального эпителия мышей, которая патологически эквивалентна дисплазии, встречающейся у курильщиков [6]. Зависимое от дозы и времени возникновение дисплазии высокой степени и SCC делает модель NTCU оптимальной системой для исследования ранних фенотипических изменений в эпителиальных клетках центральных дыхательных путей во время развития дисплазии.

    Респираторный эпителий млекопитающих делится на трахейную, бронхиальную, бронхиолярную и альвеолярную области [12].У человека базальные клетки, содержащие псевдомногослойный эпителий, простираются от трахеи до терминальной бронхиолы. Напротив, этот псевдомногослойный эпителий в значительной степени ограничен трахеей у мышей (S1 Fig), и эпителий переходит в простой столбчатый эпителий без базальных клеток в главных стволовых бронхах [13]. Нормальный бронхиальный эпителий состоит из секреторных клеток, которые определяются экспрессией секреторного белка клеток Club (CCSP + ), и реснитчатых клеток, определяемых подвижными ресничками, которые экспрессируют ацетилированный тубулин (ACT + ).В этом эпителии отсутствуют экспрессирующие кератин (К) 5/14 базальные клетки [13, 14]. Поэтому появление базальных клеток в бронхиальном эпителии мышей является аномальным и называется базальноклеточной метаплазией [13].

    Чтобы исследовать механизмы, ведущие к эпителиальной дисплазии, мы оценили влияние лечения NTCU на трахеальные и бронхиальные области дыхательных путей мышей, выполнив анализ динамики. Дисплазия трахеи была обнаружена между 8-12 неделями воздействия NTCU. Это характеризовалось увеличением числа K5 + , K14 + и p63, экспрессирующих базальные клетки, потерей клеток CCSP + и ACT + , повышенной пролиферацией базальных клеток и экспрессией маркера плоскоклеточной дифференцировки инволюкрина. Бронхиальная дисплазия впервые наблюдалась в 25 недель и была связана с метаплазией базальных клеток и замещением митотического пула клеток Club высокопролиферативными базальными клетками. На основании этих данных мы делаем вывод, что фенотипические изменения эпителиальных клеток трахеи, вызванные NTCU, предшествуют дисплазии бронхов и плоскоклеточному раку.

    Материалы и методы

    Материалы

    Подробная информация о материалах, использованных в исследовании, описана в разделе вспомогательной информации (S).

    Животные.

    Самки мышей FVB/n были приобретены в Harlan Laboratories в возрасте 8 недель.

    Заявление об этике.

    Животные содержались в Денверском медицинском центре по делам ветеранов в помещении, свободном от патогенов. Это исследование было проведено в строгом соответствии с рекомендациями Руководства по уходу и использованию лабораторных животных Национального института здоровья. Протокол был рассмотрен и одобрен Комитетом по уходу и использованию животных Медицинского центра по делам ветеранов Денвера (номер утверждения: MR1304M). Все операции проводились под анестезией пентобарбиталом натрия, и были предприняты все усилия, чтобы свести к минимуму страдания.

    Методы

    Администрация НТКУ.

    Штамм FVB/n был выбран из-за его известной чувствительности к NTCU-индуцированному SCC [9]. Местное применение NTCU было начато в возрасте 10 недель и проводилось два раза в неделю в течение максимум 32 недель при концентрации NTCU 20 мМ/л в ацетоне. Двадцать пять мкл NTCU наносили на выбритую кожу спины. Мыши контрольной группы получали только ацетоновый носитель.В 4, 8, 12, 16, 25 и 32 недели легкие и трахею/пищевод инсуффлировали, консервировали в формалине и заливали в парафин для гистологического и иммунофлуоресцентного анализа.

    Для определения митотического индекса эпителиальных клеток нуклеотидный аналог бромдезоксиуридин (BrdU) растворяли в концентрации 5 мг/мл в физиологическом растворе и вводили внутрибрюшинно в дозе 10 мкл/г массы тела за 2 часа до забора ткани.

    Гистология и иммунофлуоресцентный анализ.

    Срезы ткани (5 мкм) из трахеи и правой нижней доли легкого были получены из ткани, залитой в парафин.Срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Патологоанатом-исследователь (DTM) оценил уровни дисплазии и выполнил все гистологические анализы.

    Для иммунофлуоресцентных исследований антигены выявляли антителами к К5, К14, CCSP, ACT, BrdU, p63, NGFR и инволюкрину с использованием ранее описанных методов окрашивания [15]. Изображения были получены с использованием вертикального флуоресцентного микроскопа Zeiss Imager Z1 и программного обеспечения AxioVision (Carl Zeiss).

    Окрашивание
    TUNEL для выявления апоптотических клеток.

    TUNEL-окрашивание эпителия трахеи и бронхов, обработанного NTCU, проводили с использованием флуорометрической системы DeadEnd TM TUNEL от Promega в соответствии с инструкциями производителя. Положительные контроли для окрашивания TUNEL получали путем обработки среза ткани ДНКазой.

    Морфометрический анализ.

    Изменения частоты типов эпителиальных клеток трахеи анализировали морфометрическими методами [15, 16]. В общей сложности 9 областей на трахею были случайным образом выбраны и визуализированы (200-кратное увеличение).Вкратце, объемную плотность (Vv) рассчитывали путем подсчета количества точек, пересекающих интересующую структуру, деленного на общее количество точек, пересекающих эталонное пространство, с использованием сетки с равномерно расположенными точками. Поверхностная плотность (Зв) рассчитывалась путем подсчета числа пересечений между циклоидной сеткой и базальной мембраной, деленного на длину тестовой линии в эпителии. Значения Vv/Sv представляют собой объем определенного типа клеток на единицу площади базальной мембраны [17].

    Статистический анализ.

    Количество мышей, использованных для каждого эксперимента, указано в результатах и/или в подписях к рисункам. Данные анализировали с использованием программного обеспечения GraphPad Prism v. 6.01. В статистическом анализе использовали t тестов и однофакторный дисперсионный анализ с постанализом по методу множественных сравнений Бонферрони.

    Результаты

    32-недельное лечение NTCU вызывает бронхиальную дисплазию высокой степени и легочный SCC

    Ранее мы сообщали, что местное применение 40 мМ NTCU раз в две недели у мышей FVB/n в течение 32 недель вызывало серию плоскоклеточных эндобронхиальных поражений, классифицируемых как плоская атипия, дисплазия низкой и высокой степени, а также инвазивный плоскоклеточный рак [6].Поскольку обработка 40 мМ NTCU вызывала высокую смертность, мышей лечили 4 и 8 мМ NTCU и исследовали гистопатологию бронхиального эпителия. Эти более низкие дозы хорошо переносились, но патология в основном ограничивалась плоской атипией [6]. Напротив, применение 20 мМ NTCU два раза в неделю в течение 32 недель (используется в этом исследовании) приводило к бронхиальной дисплазии всех степеней и плоскоклеточному раку легкого без значительной смертности (рис. 1 и S2 A и S2 B).

    Мы подтвердили, что опухоли, образованные 20 мМ NTCU, были SCC, путем иммунофлуоресцентного обнаружения маркеров SCC в легких (положительные для K5, K14, p63 и отрицательные для фактора транскрипции щитовидной железы 1) (S2 C–S2 F Fig). Дисплазии высокой степени чаще выявляли у животных, у которых развился инвазивный ПКР. Эти поражения наблюдались в бронхиальном эпителии и ограничивались более крупными дыхательными путями (S2G и S2H на рис.).

    Рис. 1. Лечение NTCU в течение 32 недель вызывает бронхиальную дисплазию высокой степени и плоскоклеточный рак легкого.

    Окрашенные H&E изображения нормального эпителия (A) (ацетоновый носитель) и предраковых поражений (B-D) , индуцированных NTCU, и инвазивной карциномы (E&F) . (A) Нормальный эпителий: базально расположенные ядра и апикальные реснички (стрелки и вставка). (B) Плоская атипия: один слой клеток, но увеличенные гиперхроматические ядра (стрелка) и нечастая потеря ресничек. (C) Дисплазия низкой степени: многослойный нереснитчатый эпителий, горизонтальная ориентация ядер и снижение ядерно-цитозольного отношения. (D) Дисплазия высокой степени: многослойный плоский нереснитчатый эпителий с отсутствием ориентации и повышенным ядерно-цитозольным соотношением. (E) SCC легкого: инвазивная плоскоклеточная карцинома со стрелками, показывающими центральное ороговение в гнезде опухоли. (F) SCC образуется из дыхательных путей с высокой степенью дисплазии (указатели). На каждой панели указаны исходные увеличения. Изображения, показанные здесь, являются репрезентативными изображениями от 10 мышей для каждой группы транспортных средств и NTCU.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g001

    Молекулярный фенотип клеток, присутствующих при NTCU-индуцированной бронхиальной дисплазии

    Для исследования молекулярного фенотипа клеток, населяющих диспластический бронхиальный эпителий, мы сравнили частоту появления базальных, Club и реснитчатых клеток у мышей, которым в течение 32 недель вводили носитель или NTCU (n = 10 мышей/группу).Бронхиальный эпителий мышей, получавших носитель, содержал клетки CCSP + и ACT + и отсутствовал базальные клетки K5 + (фиг. 2А и 2В).

    Рис. 2. Молекулярный фенотип клеток, присутствующих при NTCU-индуцированной бронхиальной дисплазии.

    Бронхиальный эпителий мышей, получавших в течение 32 недель носитель (A-B) или NTCU (C-F). Ткани окрашивали антителами против (А), CCSP (зеленый), АСТ (красный) и (В и С) К5 (зеленый).Экспрессию других маркеров базальных клеток определяли путем окрашивания (D ) K14 (красный), (E) p63 (красный) и K5 (зеленый) и (F) рецептора фактора роста нервов (NGFR, красный). ). Окрашивание DAPI (синий цвет) на всех изображениях изображает ядра. Репрезентативные изображения от 10 мышей, получавших носитель или NTCU.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g002

    Напротив, эпителий мышей, получавших NTCU, содержал базальные клетки K5 + (рис. 2C).Чтобы выяснить, экспрессируют ли клетки в диспластических областях другие маркеры базальных клеток, 32-недельные срезы окрашивали K14, базально-клеточным фактором транскрипции p63 и рецептором фактора роста нервов (NGFR) [18] (рис. 2 D–2 F). Эти анализы показали, что хроническое лечение NTCU вызывало появление клеток, которые экспрессировали множественные маркеры базальных клеток в бронхиальном эпителии.

    Чтобы определить, совпадает ли появление базальных клеток в диспластическом бронхиальном эпителии с потерей нормальных бронхиальных эпителиальных клеток, мы иммуноокрашивали смежные серийные срезы легочной ткани для K5, CCSP или ACT (n = 10 срезов/мышь).Эти анализы показали, что эпителиальная дисплазия связана с появлением базальных клеток K5 + и потерей клеток CCSP + и ACT + (S3 A и S3 B Fig). Эти исследования показывают, что бронхиальная дисплазия включает метаплазию базальных клеток и истощение резидентных клеток Club и реснитчатых клеток.

    Развитие бронхиальной дисплазии с течением времени

    Чтобы исследовать последовательность событий, которые приводят к NTCU-индуцированным изменениям в бронхиальном эпителии, мы провели временной анализ.Мышей подвергали воздействию NTCU в течение 4, 8, 12, 16, 25 или 32 недель и анализировали гистопатологию бронхиального эпителия (рис. 3А).

    Рис. 3. Развитие бронхиальной дисплазии с течением времени.

    (A) Дизайн исследования для временного анализа воздействия NTCU. Стрелки указывают моменты времени, когда ткани были собраны. (B-C) Окрашенные H и E бронхиальные ткани после 25 недель лечения NTCU. Иммунофлуоресцентное окрашивание диспластического бронхиального эпителия (D-G) . (E) Увеличенное изображение области в рамке, показанной на (D). Используемые антигены и масштабные линейки указаны на соответствующей панели. Репрезентативные изображения получены от 5 мышей, получавших NTCU.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g003

    Удивительно, но никаких диспластических изменений не наблюдалось до 25 недель воздействия. В это время в бронхиальном эпителии были обнаружены плоскоклеточные поражения различной степени, от плоской атипии до фокальной дисплазии высокой степени (рис. 3В и 3С). Примечательно, что развитие бронхиальной дисплазии также совпало с первым появлением клеток, экспрессирующих базальные клеточные маркеры (K5 + , K14 + , p63 и NGFR) в диспластических областях (рис. 3 D–3 G, стрелка на D показывает). дистальный эпителий трахеи). Эти изменения были прогрессирующими, и через 32 недели клетки K5 + заселили весь бронхиальный эпителий (S4 A и S4 B на фиг.).

    Лечение НТКУ, вызванной плоскоклеточной дисплазией эпителия трахеи

    Поскольку базальные клетки в норме не обнаруживаются в бронхиальном эпителии мышей (рис. 2В), мы затем оценили влияние лечения NTCU на базальные клетки, содержащие эпителий трахеи.Дисплазия трахеи низкой степени наблюдалась через 4 недели, и степень дисплазии становилась более обширной при более длительном времени воздействия (S5 A–S5 D, рис.). Сравнение гистопатологии трахеи между 32-недельными мышами, получавшими носитель, и мышами, получавшими NTCU (n = 10 мышей/группа), показало дисплазию эпителия трахеи высокой степени (рис. 4А и 4В). Подобно бронхиальной дисплазии, она характеризовалась отсутствием мерцательного эпителия и наличием клеток с горизонтально ориентированными ядрами и повышенным ядерно-цитозольным соотношением.На молекулярном уровне лечение NTCU увеличивало частоту экспрессии K5, K14, p63 и NGFR базальных клеток в трахее (рис. 4C, 4E и 4G по сравнению с 4D, 4F и 4H). Чтобы определить, вызывает ли лечение NTCU плоскоклеточную дифференцировку эпителия трахеи, мы окрашивали ткани трахеи инволюкрином, маркером многослойного плоского эпителия [19, 20]. Высокий уровень экспрессии инволюкрина подтвердил, что псевдомногослойный эпителий трахеи трансформировался в многослойный плоский эпителий (рис. 4 I и 4 J).Эти результаты показывают, что эпителиальные клетки трахеи реагируют на лечение NTCU намного раньше, чем бронхиальные эпителиальные клетки.

    Рис. 4. Плоскоклеточная дисплазия эпителия трахеи, индуцированная NTCU: Эпителий трахеи мышей, получавших носитель (левый столбец), и мышей, получавших NTCU (правый столбец), в возрасте 32 недель.

    (A&B) Окрашенное H&E изображение, показывающее дисплазию эпителия трахеи высокой степени, индуцированную NTCU. (C&D) Двойное окрашивание K5 (зеленый) и K14 (красный), (E&F) K5 (зеленый) и p63 (красный), стрелки показывают двойные положительные клетки.Неспецифическое окрашивание под эпителием показано белым символом *. (G&H) Окрашивание рецептора фактора роста нервов NGFR и (I & J) Маркер плоскоклеточной дифференцировки, инволюкрин. Окрашивание DAPI (синий цвет) на всех изображениях указывает на ядра, а масштабная линейка указана на каждой панели. Репрезентативные изображения от 10 мышей для группы транспортных средств и NTCU.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g004

    Дисплазия трахеи была связана с зависящим от времени увеличением количества базальных клеток, экспрессирующих K5, K14, p63 и NGFR, и уменьшением количества клеток CCSP

    + и ACT +

    Базальные клетки составляют 30% всех эпителиальных клеток, присутствующих в трахее, и экспрессируют K5 [15, 21, 22]. В эпителии, обработанном носителем, подгруппа клеток K5 + (20%) коэкспрессирует K14, а меньшая подгруппа (7–10%) коэкспрессирует p63 (рис. 4C и 4E). Напротив, базальные клетки трахеи равномерно экспрессируют NGFR (рис. 4G). Чтобы определить, вызывает ли воздействие NTCU зависящее от времени увеличение субпопуляций базальных клеток, мы окрашивали срезы трахеи для маркеров базальных клеток, описанных выше. Морфометрический анализ [15, 16] тканей трахеи (n = 3–4 трахеи/момент времени) выявил достоверное (p < 0,05) увеличение числа как клеток K5 + , так и K14 + , начиная с 12-й недели после инициации. лечения NTCU (рис. 5 A–4 E).Аналогичное увеличение наблюдалось как для базальных клеток p63 + (p < 0,05 через 12 недель), так и для NGFR + (p < 0,05 через 16 недель) (S6 Fig A и S6 B).

    Рис. 5. NTCU-индуцированное увеличение экспрессирующих K5 и K14 базальных клеток и снижение CCSP и ACT-положительных клеток в эпителии трахеи.

    (A-C) Иммуноокрашивание эпителия трахеи антителами к К5 (зеленый), К14 (красный) и DAPI (синий). Желтые стрелки обозначают двойные положительные клетки K5/K14. (D&E) Количественная оценка частоты клеток K5, K14 с течением времени с использованием морфометрического анализа. (F-H) Иммуноокрашивание эпителия трахеи против антител к CCSP (зеленый), ACT (красный), DAPI (синий) и (I&J) Количественное определение частоты положительных клеток CCSP и ACT. Каждая точка на графиках D, E, I и J представляет отдельную мышь, и для каждой временной точки использовали n = 3–4 мыши. Vv/Sv представляет объемную плотность конкретных типов клеток (Vv) как функцию поверхностной плотности (Sv) с эпителием, используемым в качестве эталонного объема.Для статистического анализа использовались однофакторный дисперсионный анализ и пост-тест с использованием методов множественного сравнения Бонферрони. Достоверная разница (p<0,05) между контрольной группой с носителем и другими группами сравнения показана звездочками (****, p<0,0001, ***, p<0,001, ** p<0,01 и * p<0,05).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g005

    Количественное определение клеток трахеи CCSP + и ACT + продемонстрировало зависящую от времени потерю этих типов клеток после лечения NTCU (рис. 5 F–5). Дж).Мы использовали TUNEL-окрашивание эпителия трахеи, чтобы выяснить, связано ли уменьшение количества клеток CCSP + и ACT + с усилением апоптоза. Мы не обнаружили увеличения количества клеток TUNEL + в эпителии трахеи в любой момент времени после воздействия NTCU, что позволяет предположить, что снижение количества клеток CCSP + и ACT + не связано с усилением апоптоза (S7 A–S7 D Fig. ). Важно отметить, что значительное увеличение (p<0,05) общего числа эпителиальных клеток или эпителиальная гиперплазия были обнаружены только через 32 недели (S6C Fig).Эти результаты предполагают, что в ранние сроки потеря секреторных и реснитчатых клеток уравновешивалась увеличением числа базальных клеток.

    Митотический индекс эпителиальных клеток трахеи при NTCU-индуцированной дисплазии

    Анализ дисплазии человека показывает, что увеличение степени дисплазии положительно коррелирует с повышенной пролиферацией эпителиальных клеток дыхательных путей (по результатам измерения Ki-67) [23, 24]. Мы использовали нуклеотидный аналог BrdU, чтобы определить, коррелирует ли NTCU-индуцированная дисплазия трахеи с повышенной пролиферацией эпителиальных клеток (n = 4 трахеи/момент времени/группа).У мышей, получавших носитель, только 0,79 ± 0,34% клеток были BrdU + (рис. 6А), демонстрируя низкую скорость обновления эпителия трахеи при отсутствии повреждения [25].

    Рис. 6. Лечение NTCU увеличивало митотический индекс базальных клеток трахеи.

    (A-B ) Срезы ткани трахеи мышей, получавших носитель или NTCU в течение 32 недель, окрашивали на K5 (зеленый), BrdU (красный) и DAPI (синий). Были использованы репрезентативные фотографии от n = 4 мышей на группу. (C) Количественную оценку проводили путем подсчета ядер BrdU + по всей трахее от проксимальной к дистальной оси и представляли в виде % ядер DAPI + .Статистический анализ проводили, как описано на рис. 5.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g006

    Важно отметить, что 82,35 ± 7,63% клеток BrdU + коэкспрессируют K5, что указывает на то, что базальные клетки являются основным типом митотических клеток в трахее. эпителий. Хроническое воздействие NTCU приводило к зависящему от времени увеличению количества клеток BrdU + с увеличением в 3,5 раза (p<0,05) через 16 недель, в 6 раз через 25 недель (p<0,05).001) и 10-кратное (p<0,001) увеличение через 32 недели (рис. 6 B–6 C). Эти результаты показали, что повторное воздействие NTCU увеличивает пролиферацию базальных клеток трахеи.

    Митотический индекс клеток бронхиального эпителия после лечения NTCU

    Количественное определение клеток BrdU + в бронхиальном эпителии мышей, получавших носитель (n = 4), показало, что только 0,25 ± 0,06% клеток были BrdU + . Эти результаты подтверждают предыдущие сообщения о том, что стационарная скорость обновления бронхиального эпителия медленнее, чем у эпителия трахеи [25-27].Однако, в отличие от трахеи, митотический индекс клеток бронхиального эпителия существенно не изменился до 25 недель воздействия NTCU. В 25 недель частота клеток BrdU + составила 2,04 ± 0,65%, 8-кратное (p<0,01) увеличение митотического индекса. Митотический индекс после 32 недель лечения NTCU составил 3,82 ± 0,72%, что выше, чем у мышей, получавших носитель, в 15 раз (p<0,001) (фиг. 7A). Однако эта скорость пролиферации оставалась намного ниже, чем наблюдаемая в трахее.

    Рис. 7.Лечение NTCU увеличивало митотический индекс клеток бронхиального эпителия.

    (A) Митотический индекс клеток бронхиального эпителия измеряли путем подсчета количества ядер BrdU + в % от ядер DAPI + (все эпителиальные клетки). Количественная оценка была ограничена основным осевым путем, и изображения были получены с 200-кратным увеличением из 6 областей эпителия на ткань. (B) Ткани легких мышей, получавших носитель в течение 32 недель, окрашивали на CCSP (зеленый), BrdU (красный) и DAPI (синий). (C) Ткани, обработанные NTCU через 32 недели, окрашены K5 (зеленый), BrdU (красный) и DAPI (синий). Стрелки на B и C показывают ядра BrdU + . Вставка в C показывает присутствие клеток BrdU + в области гиперплазии (D) Вклад каждой из клеток, экспрессирующих CCSP и K5, в митотическом пуле был количественно определен как процент двойных положительных результатов CCSP-BrdU/CCSP + клеток или K5-BrdU двойной положительный/K5 + клеток.Статистический анализ проводили, как описано на рис. 5.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g007

    Чтобы определить тип митотических клеток в бронхиальном эпителии после лечения NTCU, мы совместно обнаружили BrdU и специфические маркеры типа клеток CCSP или K5. Эти анализы показали, что 100% митотических клеток у мышей, получавших носитель, а также у мышей, получавших NTCU в течение 4–16 недель; коэкспрессировать CCSP (рис. 7B). Эти данные согласуются с предыдущими сообщениями о том, что клетки CCSP + являются основным типом митотических клеток в бронхиальном эпителии мышей [28-30].После 16 недель лечения NTCU наблюдалось отчетливое изменение митотического типа клеток с CCSP + на клетки K5 + (рис. 7 C и 7 D). Вклад клеток CCSP + в митотический пул составлял менее 1% как при обработке носителем, так и в любое время после обработки NTCU (рис. 7D). Напротив, 11,5 ± 1,4% вновь экспрессированных клеток K5 + пролиферировали через 25 недель и 18,6 ± 2,5% этих клеток пролиферировали через 32 недели (рис. 7D). Важно отметить, что изменение типа митотических клеток было ограничено более крупными дыхательными путями, где легко наблюдалась индуцированная NTCU дисплазия.Не было значительного изменения митотического индекса мелких дыхательных путей, где сохранялось нормальное распределение клеток CCSP + и ACT + . Эти результаты демонстрируют, что базальные клетки K5 + , которые заселили бронхиальный эпителий мышей после NTCU, обладают высокой пролиферативностью.

    Обсуждение

    В этом исследовании мы используем модель NTCU для определения клеточных процессов, предшествующих эндобронхиальной плоскоклеточной дисплазии и плоскоклеточному раку. Этот анализ привел к следующим результатам (обобщенные на рис. 8): 1) диспластические изменения в эпителии трахеи произошли значительно раньше, чем в бронхиальном эпителии; 2) Дисплазия трахеи включала повышенную частоту K5, K14 и p63, экспрессирующих базальные клетки, и потерю Club (CCSP + ) и мерцательных (ACT + ) клеток; 3) Хроническое лечение NTCU превращает псевдомногослойный эпителий трахеи в многослойный эпителий, экспрессирующий инволюкрин; 4) NTCU-индуцированная дисплазия трахеи вызывает повышенную пролиферацию базальных клеток трахеи; 5) дисплазия бронхиального эпителия впервые наблюдалась в 25 недель и включала появление клеток К5 + / К14 + и потерю резидентных клеток CCSP + и АСТ + ; и 6) воздействие NTCU изменило бронхиальный митотический пул с клеток CCSP + на клетки K5 + .

    Рис. 8. Сводка событий после NTCU.

    Графическое представление изменения частоты типов клеток в трахее (сплошная линия) и бронхиальном эпителии (пунктирная линия) во время NTCU. Моменты времени, когда изменения являются статистически значимыми, отмечены символом *.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.g008

    Базальные клетки, содержащие области нормальных дыхательных путей мыши, ограничены трахеей и проксимальными бронхами [13].Однако опосредованное повреждением истощение бронхиальных клеток CCSP + привлекает базальные клетки трахеи к участию в процессах репарации [28]. Кроме того, опосредованное вирусом гриппа h2N1 повреждение легких вызывает появление клеток K5 + в дистальном эпителии легких [31]. Эти исследования предполагают, что в зависимости от повреждения базальные клетки могут участвовать в восстановлении бронхов и альвеол. В отличие от этих исследований острого повреждения, NTCU-опосредованное хроническое повреждение показало устойчивое увеличение частоты клеток K5 + (первоначально в трахее, но позже в бронхиальном эпителии). Важно отметить, что появление новых клеток К5 + в бронхиальном эпителии сопровождалось потерей резидентных клеток CCSP + и АСТ + . Эти результаты свидетельствуют об уникальных клеточных реакциях при острых и хронических повреждениях и могут помочь в моделировании развития дисплазии у человека, возникающей при хронических повреждениях (например, при воздействии сигаретного дыма).

    Повторное воздействие NTCU также увеличивало количество клеток K5 + /K14 + сначала в трахее, а затем в бронхиальном эпителии.Предыдущие исследования нашей группы показали, что повреждение трахеи увеличивает частоту этих двойных положительных клеток, и это возвращается к норме после восстановления эпителия [15]. Поэтому клетки K5 + /K14 + называются репаративными базальными клетками (15). При дисплазии человека стойкое увеличение клеток K14 + связано с неблагоприятным прогнозом ПКР [32]. Конститутивная экспрессия гена К14 человека в легком мыши вызывает предраковые поражения и плоскоклеточную дифференцировку [33]. В многослойном плоском эпителии повышенная экспрессия K14 способствует пролиферации, а нокдаун K14 значительно снижает онкогенность [34]. Эти результаты в сочетании с нашими выводами о том, что увеличение количества клеток K5 + /K14 + в трахее произошло задолго до развития бронхиальных поражений; предполагают, что эти клетки могут инициировать процесс повреждения, вызванный NTCU.

    В отличие от активации K14 во всех клетках K5 + ; Лечение NTCU увеличивало экспрессию p63 только в подмножестве клеток K5 + .В бронхиальном эпителии 25-недельных мышей, получавших NTCU, 5,1 ± 1,3% клеток K5 + коэкспрессировали p63, и этот показатель увеличился до 25,2 ± 3,6% через 32 недели. В нескольких исследованиях клетки K5 + /p63 + описаны как регенеративные стволовые клетки как для трахеального, так и для дистального эпителия легких [18, 31, 35]. Увеличение этой популяции регенеративных клеток после лечения NTCU предполагает, что аберрантное восстановление эпителия может играть роль в развитии и прогрессировании бронхиальной дисплазии.

    Интересно, что базальные клетки K5 + / K14 + демонстрировали равномерный характер распределения по всему диспластическому эпителию, тогда как базальные клетки p63 + и NGFR + были ограничены эпителиальным слоем, прилегающим к базальной мембране. Наши предыдущие исследования эпителия дыхательных путей мыши и человека показали фенотипическую и функциональную гетерогенность в популяции базальных клеток [36, 37]. Анализы дисплазии дыхательных путей человека выявили меньшее количество клеток Ki67 + в эпителиальном слое, прилегающем к базальной мембране, по сравнению с несмежными слоями [38].Мы ожидаем, что функциональный анализ субпопуляций базальных клеток из диспластического эпителия поможет определить тип клеток, участвующих в прогрессировании заболевания.

    Популяции с двумя предшественниками, базальные клетки K5 + и секреторные клетки CCSP + необходимы для поддержания стационарного состояния эпителия трахеи. Опосредованное повреждением истощение предшественников CCSP + приводит к тому, что предшественники K5 + восстанавливают эпителий, генерируя все типы клеток эпителия трахеи [22, 39].Впоследствии мы показали, что субпопуляция клеток K5 + функционирует как стволовые клетки, эти клетки остаются в состоянии покоя в стационарном состоянии, но пролиферируют после повреждения трахеи и участвуют в репарации [40]. Однако в ответ на повторное повреждение NTCU стволовые клетки трахеи не смогли восстановить нативный эпителий. Функциональный анализ стволовых клеток трахеи в разные моменты времени лечения NTCU предоставит важную информацию о роли базальных стволовых клеток K5 + в развитии и прогрессировании дисплазии.

    В отличие от трахеи, клетки CCSP + являются основным типом митотических клеток бронхиального эпителия нормальных мышей [29, 30]. В соответствии с этими результатами мы также показали, что митотические клетки BrdU + в бронхиальном эпителии мышей, получавших носитель, коэкспрессируют CCSP. Однако при NTCU-индуцированной дисплазии митотические клетки представляли собой базальные клетки K5 + . Эти результаты свидетельствуют о том, что базальные клетки играют существенную роль в развитии дисплазии и ее прогрессировании в плоскоклеточный рак.

    В совокупности наши результаты показали ранний ответ базальных клеток трахеи при NTCU-индуцированной дисплазии и плоскоклеточном раке. Используя временной анализ лечения NTCU, мы обнаружили новую серию гистологических и фенотипических изменений в эпителии трахеи, о которых ранее не сообщалось. Улучшение понимания этих клеточных механизмов, особенно вклада базальных клеток трахеи в развитие дисплазии дистальных отделов дыхательных путей, может обеспечить новые цели для будущих химиопрофилактических усилий.

    Вспомогательная информация

    S1 Рис. Базальная клетка, содержащая область респираторного дерева мыши.

    Респираторный эпителий мышей делится на трахейный, бронхиальный, бронхиолярный и альвеолярный сегменты. Базальные клетки (желтые) заселяют эпителий трахеи и проксимальные отделы бронхов. Это также хрящевая область респираторного дерева мыши (синие кольца). Зеленая стрелка показывает основной осевой путь, где наблюдались плоскоклеточные дисплазии, индуцированные NTCU.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.s001

    (TIF)

    S2 Рис. 20 мМ NTCU вызывали плоскоклеточную дисплазию бронхиального эпителия мышей и SCC легкого.

    (A) График средней массы тела мышей, получавших носитель или NTCU, в зависимости от времени. (B) Процент выживаемости для мышей, получавших носитель и NTCU. (C) Инвазивный SCC экспрессировал маркеры базальных клеток K5 (зеленый), (D) K14 (красный), (E) транскрипционный фактор p63 (ядерное окрашивание, красная стрелка) и (F) не экспрессировал фактор транскрипции щитовидной железы 1 (TTF1).SSC развился из дисплазии высокой степени, показанной белыми стрелками на C и D. (G) Дисплазия, вызванная NTCU, возникает в бронхиальном эпителии вдоль основного осевого пути (синяя стрелка). (H) Увеличенное изображение области, заключенной в рамку, показывающей дисплазию высокой степени. Оригинальные увеличения указаны на каждой панели. Репрезентативные изображения от n = 10 мышей, получавших носитель и NTCU.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.s002

    (TIF)

    S3 Рис.Дисплазия, вызванная NTCU, связана с потерей CCSP-ACT и появлением клеток, экспрессирующих K5.

    Смежные серийные срезы тканей легкого от 32-недельных мышей, получавших NTCU, (A) Ткань, окрашенная CCSP (зеленый) и ACT (красный), и (B) с K5 (зеленый). Белыми пунктирными линиями обозначены малые дыхательные пути, которые сохраняли нормальное окрашивание CCSP/ACT, тогда как диспластический эпителий заселен только клетками K5 + . Стрелки показывают различие между нормальной и диспластической областью. Репрезентативные изображения 10 срезов/мышь от 10 мышей, получавших NTCU. Окрашивание DAPI (синий цвет) на всех изображениях указывает на ядра, а масштабная линейка указана на каждой панели.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.s003

    (TIF)

    S4 Рис. Экспрессия клеток K5

    + в бронхиальном эпителии мыши.

    (A) Наличие экспрессирующих K5 (зеленые) базальных клеток в бронхиальном эпителии мышей, получавших NTCU в возрасте 32 недель. (B) Увеличенное изображение области в рамке A показывает наличие плоской атипии и дисплазии рядом друг с другом.(*) под эпителием видны инфильтрирующие иммунные клетки. Окрашивание DAPI (синий цвет) на всех изображениях указывает на ядра, а масштабная линейка указана на каждой панели. Репрезентативные изображения от n = 10 мышей.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.s004

    (TIF)

    S5 Рис. Изменения гистологии трахеи в зависимости от времени.

    Окрашенные H & E срезы трахеи мышей (A) через 4 недели, (B) через 8 недель, (C) через 16 недель и (D) через 25 недель, получавших NTCU.Здесь показаны репрезентативные изображения от 5-7 мышей в момент времени.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.s005

    (TIF)

    S7 Рис. TUNEL-окрашивание эпителия трахеи.

    (A) Положительный контроль, показывающий TUNEL-положительные клетки (зеленые ядра), ( B ) 16 недель, ( C ) 25 недель и ( D ) 32 недели Трахеи, обработанные NTCU. Клетки TUNEL + (зеленые стрелки) были обнаружены под эпителием, но не на эпителии.Репрезентативные изображения из n = 3 трахеи каждый раз.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0122823.s007

    (TIF)

    Благодарности

    Авторы признают Drs. Сьюзен Рейнольдс и Йорк Миллер за научный вклад, г-ну Расселу Смиту за техническую помощь и д-ру Саре Мазилли за помощь в моделировании мыши.

    Вклад авторов

    Инициатор и спроектировал эксперименты: М. Г. РЛК. Выполнены опыты: MG LDD JBK LB WJJ DTM.Проанализированы данные: MG LDD JBK DTM RLK. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: MG LDD DTM WJJ RLK. Написал статью: MG LDD JBK DTM RLK.

    Каталожные номера

    1. 1. Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Статистика рака, 2013. CA Cancer J Clin. 2013;63(1):11–30. пмид:23335087
    2. 2. Банерджи АК. Преинвазивные поражения бронхов. Дж. Торак Онкол. 2009;4(4):545–51. пмид:19279508
    3. 3. Николсон А.Г., Перри Л.Дж., Кюри П.М., Джексон П., Маккормик К.М., Коррин Б. и др.Воспроизводимость системы оценок ВОЗ/IASLC для прединвазивных плоскоклеточных поражений бронхов: исследование различий между наблюдателями и внутри наблюдателей. Гистопатология. 2001;38(3):202–8. пмид:11260299
    4. 4. Келли К., Киттельсон Дж., Франклин В.А., Кеннеди Т.С., Кляйн К.Е., Кит Р.Л. и др. Рандомизированное исследование фазы II химиопрофилактики 13-CIS ретиноевой кислоты с альфа-токоферолом или без него или наблюдение за субъектами с высоким риском рака легких. Рак Prev Res (Фила). 2009;2(5):440–9.пмид:19401528
    5. 5. Lam S, McWilliams A, LeRiche J, MacAulay C, Wattenberg L, Szabo E. Фаза I исследования мио-инозитола для химиопрофилактики рака легких. Эпидемиологические биомаркеры рака Prev. 2006;15(8):1526–31. пмид:16896044
    6. 6. Hudish TM, Opincariu LI, Mozer AB, Johnson MS, Cleaver TG, Malkoski SP, et al. N-нитрозо-трис-хлорэтилмочевина индуцирует предраковую плоскоклеточную дисплазию у мышей. Рак Prev Res (Фила). 2011;5(2):283–9.
    7. 7. Evans MJ, Fanucchi MV, Baker GL, Van Winkle LS, Pantle LM, Nishio SJ, et al.Реконструированная зона базальной мембраны трахеи у детенышей макаки-резус после 6 месяцев выздоровления. Клин Эксперт Аллергия. 2004;34(7):1131–6. пмид:15248862
    8. 8. Рем С., Лиджински В., Сингх Г., Катял С.Л. Канцерогенез бронхиолярных клеток мыши. Гистологическая характеристика и экспрессия клеточного антигена Клара в поражениях, вызванных N-нитрозобис-(2-хлорэтил)мочевиной. Ам Джей Патол. 1991;139(2):413–22. пмид:1651059
    9. 9. Wang Y, Zhang Z, Yan Y, Lemon WJ, LaRegina M, Morrison C, et al.Химически индуцированная модель плоскоклеточного рака легкого у мышей: гистопатология и восприимчивость к деформации. Рак рез. 2004;64(5):1647–54. пмид:14996723
    10. 10. Ji H, Ramsey MR, Hayes DN, Fan C, McNamara K, Kozlowski P, et al. LKB1 модулирует дифференцировку и метастазирование рака легких. Природа. 2007; 448(7155):807–10. пмид:17676035
    11. 11. Сяо З., Цзян К., Уиллетт-Браун Дж., Си С., Чжу Ф., Беркетт С. и др. Ключевая роль IKKalpha в развитии спонтанного плоскоклеточного рака легкого.Раковая клетка. 2013;23(4):527–40. пмид:23597566
    12. 12. Рэкли Ч.Р., Стрипп Б.Р. Строительство и поддержание эпителия легкого. Джей Клин Инвест. 2012;122(8):2724–30. пмид:22850882
    13. 13. Рок-Дж.Р., Рэнделл С.Х., Хоган Б.Л. Базальные стволовые клетки дыхательных путей: взгляд на их роль в эпителиальном гомеостазе и ремоделировании. Dis Model Mech. 2010;3(9–10):545–56. пмид:20442204
    14. 14. Рок-младший, Хоган Б.Л. Эпителиальные клетки-предшественники в развитии, поддержании, восстановлении и заболеваниях легких.Annu Rev Cell Dev Biol. 2011 г.; 27:493–512. пмид:21639799
    15. 15. Коул Б.Б., Смит Р.В., Дженкинс К.М., Грэм Б.Б., Рейнольдс П.Р., Рейнольдс С.Д. Базальные клетки трахеи. Пул факультативных клеток-предшественников. Ам Джей Патол. 2010 г.; 177(4):2145.
    16. 16. Van Winkle LS, Fanucchi MV, Miller LA, Baker GL, Gershwin LJ, Schelegle ES, et al. Распределение и количество эпителиальных клеток в дыхательных путях макак-резусов во время постнатального роста и развития легких. J Appl Physiol. 2004;97(6):2355–63; обсуждение 4.пмид:15298983
    17. 17. Ся С.К., Хайд Д.М., Окс М., Вейбель Э.Р. Официальное заявление о политике исследований Американского торакального общества/Европейского респираторного общества: стандарты количественной оценки структуры легких. Am J Respir Crit Care Med. 2010;181(4):394–418. пмид:20130146
    18. 18. Рок Дж. Р., Онайтис М. В., Роулинз Э. Л., Лу Ю., Кларк С. П., Сюэ Ю. и др. Базальные клетки как стволовые клетки трахеи мыши и эпителия дыхательных путей человека. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009;106(31):12771–5.пмид:19625615
    19. 19. Джеттен АМ. Многоэтапный процесс плоскоклеточной дифференцировки клеток трахеобронхиального эпителия in vitro: аналогия с эпидермальной дифференцировкой. Перспектива охраны окружающей среды. 1989; 80: 149–60. пмид:2647475
    20. 20. Исида-Ямамото А., Иидзука Х. Структурная организация ороговевших клеточных оболочек и изменения при наследственных кожных заболеваниях. Опыт Дерматол. 1998;7(1):1–10. пмид:9517915
    21. 21. Brechbuhl HM, Ghosh M, Smith MK, Smith RW, Li B, Hicks DA, et al.Доза бета-катенина является критическим фактором, определяющим судьбу базальных клеток трахеи. Ам Джей Патол. 2011;179(1):367–79. пмид:21703416
    22. 22. Гош М., Брехбул Х.М., Смит Р.В., Ли Б., Хикс Д.А., Титчнер Т. и др. Контекстно-зависимая дифференцировка мультипотенциальных экспрессирующих кератин 14 базальных клеток трахеи. Am J Respir Cell Mol Biol. 2011;45(2):403–10. пмид:21131447
    23. 23. Меррик Д.Т., Киттельсон Дж., Винтерхолдер Р., Котантулас Г., Ингеберг С., Кит Р.Л. и др.Анализ экспрессии c-ErbB1/эпидермального фактора роста и экспрессии c-ErbB2/HER-2 при бронхиальной дисплазии: оценка потенциальных мишеней для химиопрофилактики рака легких. Клин Рак Рез. 2006; 12 (7 часть 1): 2281–8. пмид:16609045
    24. 24. Миллер Ю.Э., Блатчфорд П., Хьюн Д.С., Кит Р.Л., Кеннеди Т.С., Вольф Х. и другие. Бронхиальный эпителиальный индекс ki-67 связан с гистологией, курением и полом, но не с раком легких или хронической обструктивной болезнью легких. Эпидемиологические биомаркеры рака Prev.2007;16(11):2425–31. пмид:18006932
    25. 25. Роулинз Э.Л., Хоган Б.Л. Продолжительность жизни реснитчатых эпителиальных клеток в трахее и легких мыши. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2008;295(1):L231–4. пмид:18487354
    26. 26. Роулинз Э.Л., Хоган Б.Л. Эпителиальные стволовые клетки легких: привилегия немногих или возможности для многих? Разработка. 2006 г.; 133 (13): 2455–65. пмид:16735479
    27. 27. Роулинз Э.Л., Островски Л.Е., Рэнделл С.Х., Хоган Б.Л. Развитие и ремонт легких: вклад мерцательной линии.Proc Natl Acad Sci U S A. 2006;104(2):410–7. пмид:17194755
    28. 28. Хонг Ку, Рейнольдс С.Д., Уоткинс С., Фукс Э., Стрип Б.Р. Базальные клетки являются мультипотентными предшественниками, способными обновлять бронхиальный эпителий. Ам Джей Патол. 2004;164(2):577–88. пмид:14742263
    29. 29. Роулинз Э.Л., Окубо Т., Сюэ Ю., Брасс Д.М., Аутен Р.Л., Хасегава Х. и др. Роль клеток Scgb1a1+ Clara в долгосрочном поддержании и восстановлении эпителия дыхательных путей легких, но не альвеолярного. Клеточная стволовая клетка.2009;4(6):525–34. пмид:19497281
    30. 30. Рейнольдс С.Д., Малкинсон AM. Клетка Клара: предшественник бронхиолярного эпителия. Int J Biochem Cell Biol. 2010 г.; 42(1):1–4. пмид:19747565
    31. 31. Kumar PA, Hu Y, Yamamoto Y, Hoe NB, Wei TS, Mu D, et al. Стволовые клетки дистальных отделов дыхательных путей дают альвеолы ​​in vitro и во время регенерации легких после инфицирования гриппом h2N1. Клетка. 2011;147(3):525–38. пмид:22036562
    32. 32. Ooi AT, Mah V, Nickerson DW, Gilbert JL, Ha VL, Hegab AE, et al.Наличие предполагаемой популяции клеток-предшественников, инициирующих опухоль, предсказывает плохой прогноз у курильщиков с немелкоклеточным раком легкого. Рак рез. 2010;70(16):6639–48. пмид:20710044
    33. 33. Дакир Э.Л., Фейгенбаум Л., Линнойла Р.И. Конститутивная экспрессия гена кератина 14 человека в легком мыши индуцирует предраковые поражения и плоскоклеточную дифференцировку. Канцерогенез. 2008;29(12):2377–84. пмид:18701433
    34. 34. Алам Х., Сегал Л., Кунду С.Т., Далал С.Н., Вайдья М.М.Новая функция кератинов 5 и 14 в пролиферации и дифференцировке многослойных эпителиальных клеток. Мол Биол Селл. 2011;22(21):4068–78. пмид:210
    35. 35. Zuo W, Zhang T, Wu DZ, Guan SP, Liew A, Yamamoto Y, et al. Стволовые клетки дистальных отделов дыхательных путей p63Krt5 необходимы для регенерации легких. Природа. 2015 г.; 517 (7536): 616–20. пмид:25383540
    36. 36. Гош М., Ахмад С., Цзянь А., Ли Б., Смит Р.В., Хелм К.М. и др. Базальные клетки трахеобронхиала человека. Нормальные фенотипы в сравнении с ремоделированием/восстановлением in vivo и in vitro.Am J Respir Cell Mol Biol. 2013;49(6):1127–34. пмид:23927678
    37. 37. Гош М., Смит Р.В., Ранкл К.М., Хикс Д.А., Хелм К.М., Рейнольдс С.Д. Регуляция размера пула специфических стволовых клеток трахебронхиальной ткани. Стволовые клетки. 2013;31(12):2767–78. пмид:23712882
    38. 38. Khojasteh M, Buys TP, LeRiche J, Lam S, Guillaud M, MacAulay C. Система количественной оценки распределения Ki67 в предраковых поражениях бронхиального эпителия. Анальный Quant Cytol Histol. 2012;34(3):120–38.пмид:23016458
    39. 39. Хонг Ку, Рейнольдс С.Д., Уоткинс С., Фукс Э., Стрип Б.Р. Потенциал дифференциации in vivo базальных клеток трахеи: данные о мультипотентных и унипотентных субпопуляциях. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2003 г.; 286(4):L643–9. пмид:12871857
    40. 40. Гош М., Хелм К.М., Смит Р.В., Джорданенго М.С., Ли Б., Шен Х. и др. Одна клетка функционирует как тканеспецифическая стволовая клетка и клетка, образующая нишу in vitro. Am J Respir Cell Mol Biol. 2011;45(3):459–69.пмид:21131442

    Понимание вашего отчета о патологии: рак легких на месте

    Когда у вас была биопсия легкого, взятые образцы были изучены под микроскопом врачом-специалистом с многолетней подготовкой, называемым патологоанатомом . Патологоанатом отправляет вашему врачу отчет, в котором ставится диагноз для каждого взятого образца. Информация в этом отчете будет использоваться для управления вашим обслуживанием. Следующие вопросы и ответы призваны помочь вам понять медицинский язык, который вы можете найти в отчете о патологии, который вы получили после биопсии легкого.

    Каково нормальное строение легкого?

    Когда вы вдыхаете, воздух входит через рот или нос и попадает в легкие через трахею (дыхательное горло). Трахея делится на трубки, называемые бронхами (единственный бронх), которые делятся на более мелкие ветви, называемые бронхиолами. В конце бронхиол находятся крошечные воздушные мешочки, известные как альвеол или ацинусов .

    В альвеолах проходит множество крошечных кровеносных сосудов. Они поглощают кислород из воздуха, которым вы дышите, в кровь и пропускают углекислый газ из организма в альвеолы.Это удаляется из тела, когда вы выдыхаете. Поглощение кислорода и избавление от углекислого газа являются основными функциями ваших легких.

    Что такое карцинома in situ (карцинома in situ)?

    Карциномы могут начинаться в клетках, которые выстилают внутреннюю часть бронхов, бронхиол или альвеол. Если клетки карциномы находятся только в верхнем слое клеток бронхов, бронхиол или альвеол, не прорастая в более глубокие слои ниже, это называется карциномой in situ (также называемой карциномой in situ или CIS) .Это считается предраковым состоянием.

    Как только эти клетки вырываются из внутренней оболочки бронхов, бронхиол или альвеол, они больше не находятся на месте и могут быть отнесены к инвазивной или инфильтрирующей карциноме . Инвазивная карцинома считается истинным раком легких, поскольку клетки могут распространяться (метастазировать) за пределы легких в лимфатические узлы и другие части тела.

    Что означает, если мой предрак называется плоскоклеточным раком in situ или атипичной аденоматозной гиперплазией?

    Плоскоклеточная карцинома in situ является предраковым состоянием, которое может стать инвазивной плоскоклеточной карциномой (разновидностью немелкоклеточного рака легкого).Атипичная аденоматозная гиперплазия является предраковым состоянием, которое может стать аденокарциномой (другой тип немелкоклеточного рака легкого). Если любой из них присутствует в биопсии, это может означать, что в другом месте легкого есть инвазивная карцинома, которая не была взята при биопсии. Если какой-либо из них был обнаружен при эксцизионной биопсии (когда удалялась опухоль или другая аномальная область) или при резекции доли/лобэктомии (когда удалялась вся доля легкого или ее часть) и не было обнаружено инвазивного рака, прогноз (вероятный исход) отличный.Тем не менее, легкие все еще могут содержать другие области предрака, которые не находятся рядом с первой (иногда называемые пропущенными областями ).

    Что такое плоскоклеточная метаплазия?

    Когда дыхательные пути раздражены (например, из-за курения или инфекции), клетки, выстилающие его, могут измениться от прямоугольных, стоящих рядом друг с другом, до более плоских и наложенных друг на друга. Это изменение называется плоскоклеточной метаплазией , потому что клетки теперь выглядят как клетки, называемые плоскоклеточными клетками .Когда раздражение исчезнет, ​​например, когда вы бросите курить или пройдет инфекция, слизистые клетки вернутся к своему нормальному виду. Плоскоклеточная метаплазия не считается предраком, но если раздражение сохраняется, оно может прогрессировать до плоскоклеточной дисплазии.

    Что такое плоскоклеточная дисплазия?

    Дисплазия является ранней формой предрака. Его часто делят на разные категории в зависимости от того, насколько аномальными выглядят клетки и ткани под микроскопом:

    • Когда это наименее аномальное состояние, оно называется легкой дисплазией .
    • Когда это наиболее ненормально, это называется тяжелой дисплазией .
    • Умеренная дисплазия находится между двумя другими.

    Чем тяжелее дисплазия, тем больше она похожа на плоскоклеточный рак in situ, который является предраковым состоянием. Если при биопсии видна плоскоклеточная дисплазия, это может означать, что где-то еще в легком есть что-то более серьезное, например, инвазивная карцинома in situ, которая не была отобрана при этой биопсии.

    Что делать, если в моем отчете о биопсии упоминаются поля или чернила?

    При удалении всей опухоли или аномальной области патологоанатом покрывает внешние края или края ткани чернилами, иногда чернилами разного цвета с разных сторон.Если обнаружен рак (и/или предрак), патологоанатом может сказать, доходит ли он до краев удаленной ткани. Это известно как положительный запас . Если это так, это может означать, что какой-то рак (или предрак) остался позади. Иногда это не вызывает беспокойства, потому что хирург удалил другие ткани в этой области. Тем не менее, если какой-то рак (или предрак) остался позади, вам может потребоваться дополнительное лечение, например, лучевая терапия или дополнительное хирургическое вмешательство. Поговорите со своим врачом о наилучшем подходе для вас, если рак (или предрак) обнаружен на полях.

    Что это означает, если в моем отчете также упоминается любой из следующих терминов: рубцевание, эмфизема, эмфизематозные изменения или воспаление?

    Все это термины для нераковых изменений, которые патологоанатом может увидеть под микроскопом. Обычно они не важны, если их увидеть в образце биопсии, который также имеет предрак или рак.

    Что делать, если в моем отчете упоминается что-либо из следующего: гранулемы, метенамин серебра (GMS), кислотоустойчивые бациллы (КУБ) или периодическая кислота Шиффа (ПАШ)?

    Гранулемы — это видимые под микроскопом структуры, которые часто, хотя и не всегда, вызваны определенными типами инфекций.Иногда микробы, вызывающие инфекцию, можно увидеть только с помощью специальных красителей (таких как GMS, красители для AFB и PAS), которые патологоанатом наносит на предметные стекла. Большинство гранулем вызываются инфекциями, но они могут быть вызваны и другими причинами, такими как болезнь, называемая саркоидозом, аллергические реакции и вызванное пылью заболевание легких (пневмокониоз).

    Лейкоплакия и эритроплакия — предраковые плоскоклеточные поражения полости рта: определение, этиология, эпидемиология

  • Гейл Н., Пилч Б.З., Сидранский Д., и соавт.Предшествующие эпителиальные поражения. В: Барнс Л., Ивсон Дж. В., Рейхарт П., Сидранкси Д., ред. Классификация опухолей Всемирной организации здравоохранения. Патология и генетика опухолей головы и шеи . Лион, Франция: IARC Press; 2005. 177-9.

  • Спейт PM. Обновленная информация о дисплазии эпителия полости рта и прогрессировании рака. Голова Шея Патол . 2007 сен. 1 (1): 61-6. [Медлайн].

  • Sciubba J, Scully C. Лейкоплакия полости рта. BMJ Best Practice (подписка).Доступно на http://bestpractice.bmj.com/best-practice/monograph/621/highlights/summary.html. Обновлено: 8 июля 2016 г.; Доступ: 13 апреля 2017 г.

  • Грир РО. Патология злокачественных и предраковых поражений эпителия полости рта. Отоларингол Clin North Am . 2006 г., 39 апреля (2): 249–75, т. [Medline].

  • Вениг Б.М. Плоскоклеточный рак верхних дыхательных путей: предшественники и проблемные варианты. Мод Патол . 2002 март.15 (3): 229-54. [Медлайн].

  • Эль-Наггар А.К., Рейхарт Пенсильвания. Пролиферативная веррукозная лейкоплакия и предраковые состояния. В: Барнс Л., Ивсон Дж. В., Рейхарт П., Сидранкси Д., ред. Классификация опухолей Всемирной организации здравоохранения. Патология и генетика опухолей головы и шеи . Лион, Франция: IARC Press; 2005. 180.

  • Gillenwater AM, Vigneswaran N, Fatani H, Saintigny P, El-Naggar AK. Пролиферативная бородавчатая лейкоплакия (ПВЛ): обзор неуловимого патологического образования!. Адв Анат Патол . 2013 20 ноября (6): 416-23. [Медлайн].

  • Gillenwater AM, Vigneswaran N, Fatani H, Saintigny P, El-Naggar AK. Пролиферативная бородавчатая лейкоплакия: распознавание и дифференциация от обычной лейкоплакии и имитаторов. Голова Шея . 2014 36 ноября (11): 1662-8. [Медлайн].

  • Ярдымчи Г., Кутлубай З., Энгин Б., Тузун Ю. Предраковые поражения слизистой оболочки полости рта. Чемоданы World J Clin . 2014 16 декабря.2 (12): 866-72. [Медлайн].

  • Пай С.И., Вестра Вайт. Молекулярная патология рака головы и шеи: значение для диагностики, прогноза и лечения. Анну Рев Патол . 2009. 4:49-70. [Медлайн].

  • Джонсон Н., Шмид С., Франчески С. и др. Плоскоклеточная карцинома. В: Барнс Л., Ивсон Дж. В., Рейхарт П., Сидранкси Д., ред. Классификация опухолей Всемирной организации здравоохранения. Патология и генетика опухолей головы и шеи .Лион, Франция: IARC Press; 2005. 168-75.

  • McLemore MS, Haigentz M Jr, Smith RV, et al. Плоскоклеточный рак головы и шеи у ВИЧ-позитивных пациентов: предварительное исследование вирусных ассоциаций. Голова Шея Патол . 2010 4 июня (2): 97-105. [Медлайн].

  • Napier SS, Speight PM. Естественная история потенциально злокачественных поражений и состояний полости рта: обзор литературы. J Oral Pathol Med . 2008 янв.37 (1):1-10. [Медлайн].

  • Швам З.Г., Джадсон Б.Л. Улучшенный прогноз для пациентов с плоскоклеточным раком полости рта: анализ Национальной базы данных по раку за 1998-2006 гг. Оральный онкол . 2016 янв. 52:45-51. [Медлайн].

  • Llewellyn CD, Johnson NW, Warnakulasuriya KA. Факторы риска плоскоклеточного рака полости рта у молодых людей — всесторонний обзор литературы. Оральный онкол . 2001 г. 37 июля (5): 401-18.[Медлайн].

  • Мунде А., Карле Р. Пролиферативная бородавчатая лейкоплакия: обновление. Дж Рак Рес Тер . 2016 апрель-июнь. 12 (2): 469-73. [Медлайн].

  • Спейт П.М., Абрам Т.Дж., Флориано П.Н. и др. Согласие между наблюдателями в классификации дисплазии: на пути к расширенному золотому стандарту клинических испытаний патологии. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol . 2015 окт. 120 (4): 474-82.e2. [Медлайн].

  • Гудсон М.Л., Слоан П., Робинсон К.М., Кокс К., Томсон П.Дж.Предшествующие поражения полости рта и злокачественная трансформация — кто, где, что и когда? Br J Oral Maxillofac Surg . 2015 ноябрь 53 (9): 831-5. [Медлайн].

  • Vered M, Allon I, Dayan D. Maspin, p53, p63 и Ki-67 при поражении эпителия языка: от гиперплазии через дисплазию до карциномы. J Oral Pathol Med . 2009 38 марта (3): 314-20. [Медлайн].

  • Уэйн С., Робинсон Р.А. Плоскоклеточная дисплазия верхних дыхательных путей: корреляция с экспрессией p16, p53, pRb и Ki-67. Медицинская лаборатория Arch Pathol . 2006 сен. 130 (9): 1309-14. [Медлайн].

  • Курокава Х., Мацумото С., Мурата Т. и др. Иммуногистохимическое исследование подавления синдекана-1 и экспрессии белка р53 или антигена Ki-67 при лейкоплакии полости рта с эпителиальной дисплазией или без нее. J Oral Pathol Med . 2003 32 октября (9): 513-21. [Медлайн].

  • Saito T, Nakajima T, Mogi K. Иммуногистохимический анализ белков p16, pRb, p53, p27 и Ki-67, связанных с клеточным циклом, при раке полости рта и предраке с особым упором на бородавчатые карциномы. J Oral Pathol Med . 1999 май. 28 (5): 226-32. [Медлайн].

  • Каннан С., Баларам П., Чандран Г.Дж. и др. Дифференциальная экспрессия белков цитокератина при прогрессировании опухоли в слизистой оболочке полости рта. Эпителиальный клеточный биол . 1994. 3 (2): 61-9. [Медлайн].

  • Рам Прасад В.В., Нирмала Н.Р., Котян М.С. Иммуногистохимическая оценка экспрессии цитокератина 19 при различных гистологических стадиях лейкоплакии и плоскоклеточного рака полости рта. Indian J Dent Res . 2005 январь-март. 16 (1):6-11. [Медлайн].

  • Fillies T, Jogschies M, Kleinheinz J, Brandt B, Joos U, Buerger H. Изменение цитокератина при лейкоплакии полости рта и плоскоклеточной карциноме полости рта. Oncol Rep . 2007 18 сентября (3): 639-43. [Медлайн].

  • Анджеро Ф., Беренци А., Бенетти А. и др. Экспрессия белков p16, p53 и Ki-67 при прогрессировании эпителиальной дисплазии полости рта. Противораковый состав .2008 сен-окт. 28 (5А): 2535-9. [Медлайн].

  • Cruz IB, Snijders PJ, Meijer CJ, et al. Экспрессия p53 над базальным клеточным слоем слизистой оболочки полости рта является ранним событием злокачественной трансформации и имеет прогностическое значение для развития плоскоклеточного рака полости рта. Дж Патол . 1998 Апрель 184 (4): 360-8. [Медлайн].

  • Питияге Г., Тилакаратне В.М., Тавассоли М., Варнакуласурия С. Молекулярные маркеры дисплазии эпителия полости рта: обзор. J Oral Pathol Med . 2009 38 ноября (10): 737-52. [Медлайн].

  • Siebers TJ, Bergshoeff VE, Otte-Holler I, et al. Хромосомная нестабильность предсказывает прогрессирование предраковых поражений полости рта. Оральный онкол . 2013 Декабрь 49 (12): 1121-8. [Медлайн].

  • de Carvalho Fraga CA, Farias LC, de Oliveira MV, et al. Повышенные уровни белков VEGFR2 и MMP9 связаны со степенью эпителиальной дисплазии. Патол Res Pract .2014 Декабрь 210 (12): 959-64. [Медлайн].

  • Кил Т.Дж., Ким Х.С., Ким Х.Дж., Нам В., Ча И.Х. Генетические аномалии при лейкоплакии полости рта и прогрессировании рака полости рта. Asian Pac J Рак Предыдущая . 2016. 17 (6): 3001-6. [Медлайн].

  • Axell T, Pindborg JJ, Smith CJ, van der Waal I. Белые поражения полости рта с особым упором на предраковые состояния и поражения, связанные с табаком: выводы международного симпозиума, состоявшегося в Уппсале, Швеция, 18–21 мая 1994 г.Международная совместная группа по белым поражениям полости рта. J Oral Pathol Med . 1996 25 февраля (2): 49-54. [Медлайн].

  • Silverman S Jr, Gorsky M, Lozada F. Лейкоплакия полости рта и злокачественная трансформация. Последующее исследование 257 пациентов. Рак . 1984 1 февраля. 53 (3): 563-8. [Медлайн].

  • Shafer WG, Waldron CA. Эритроплакия полости рта. Рак . 1975 г., 36 сентября (3): 1021-8. [Медлайн].

  • Варнакуласурия С., Рейбел Дж., Буко Дж., Дабельстин Э.Системы классификации дисплазии эпителия полости рта: прогностическая ценность, полезность, недостатки и возможности для улучшения. J Oral Pathol Med . 2008 37 марта (3): 127-33. [Медлайн].

  • Arduino PG, Surace A, Carbone M и др. Исход дисплазии полости рта: ретроспективное стационарное исследование 207 пациентов с длительным наблюдением. J Oral Pathol Med . 2009 г. 38 июля (6): 540-4. [Медлайн].

  • Хогевинд В.Ф., ван дер Кваст В.А., ван дер Ваал И.Оральная лейкоплакия с акцентом на злокачественную трансформацию. Последующее исследование 46 пациентов. J Краниомаксиллофак Хирург . 1989 17 апреля (3): 128-33. [Медлайн].

  • Holmstrup P, Vedtofte P, Reibel J, Stoltze K. Долгосрочные результаты лечения предраковых поражений полости рта. Оральный онкол . 2006 май. 42 (5): 461-74. [Медлайн].

  • Сюэ С.С., Ван В.К., Чен Ч., Линь К.С., Чен Ю.К., Линь Л.М. Злокачественная трансформация у 1458 пациентов с потенциально злокачественными заболеваниями слизистой оболочки полости рта: последующее исследование, проведенное в тайваньской больнице. J Oral Pathol Med . 2007 36 января (1): 25-9. [Медлайн].

  • Schepman KP, van der Meij EH, Smeele LE, van der Waal I. Злокачественная трансформация лейкоплакии полости рта: последующее исследование больничной популяции 166 пациентов с лейкоплакией полости рта из Нидерландов. Оральный онкол . 1998 г. 34 июля (4): 270-5. [Медлайн].

  • Варнакуласурия С., Ариявардана А. Злокачественная трансформация лейкоплакии полости рта: систематический обзор обсервационных исследований. J Oral Pathol Med . 2016 март 45 (3): 155-66. [Медлайн].

  • Мохд Бакри М., Мохд Хуссаини Х., Рэйчел Холмс А., Дэвид Кэннон Р., Мэри Рич А. Пересмотр связи между кандидозной инфекцией и раком, особенно плоскоклеточным раком полости рта. J Пероральный микробиол . 2010, 21 декабря. 2: [Medline].

  • Гербер С., Генглер С., Гретц К.В., Крузе А.Л. Влияние замороженных срезов на окончательные хирургические края при плоскоклеточном раке полости рта и губ: ретроспективный анализ за 11-летний период. Онкол головы и шеи . 2011 30 декабря. 3:56. [Медлайн].

  • Стотт-Миллер М., Хоук Дж.Р., Лохаваничбутр П. и др. Уровни матриксной металлопротеиназы в опухоли и слюне являются сильными диагностическими маркерами плоскоклеточного рака полости рта. Эпидемиологические биомаркеры рака Предыдущая . 2011 20 декабря (12): 2628-36. [Медлайн].

  • Галлаб Н.А., Шейкер О.Г. Уровни хемерина и ММР-9 в сыворотке и слюне при плоскоклеточном раке полости рта и предраковых поражениях полости рта. Clin Oral Investig . 2017 21 апреля (3): 937-47. [Медлайн].

  • Хван Дж.Т., Гу Ю.Р., Шен М. и др. Индивидуальная пятилетняя оценка риска прогрессирования предраковых поражений полости рта в рак. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol . 2017 март 123 (3): 374-81. [Медлайн].

  • Дисплазия плоского эпителия слабая: Дисплазия шейки матки: Причины, симптомы и методы лечения

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.