Содержание

врач акушер-гинеколог Ишмаева Диляра Адельевна.

03 декабря 2019

Журнал «Здоровье семьи»

Артериальная гипертензия (гипертоническая болезнь) – самое частое хроническое заболевание у взрослых, связанное с повышением артериального давления. Артериальная гипертензия (АГ) в настоящее время является одной из наиболее распространенных форм патологии у беременных. Встречается у 5-30% беременных, и на протяжении последних десятилетий отмечается тенденция к увеличению ее распространенности. В период беременности артериальная гипертензия существенно влияет на ее течение и исход, является основной причиной перинатальных потерь и материнской смертности. По данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), гипертензивные осложнения занимают 3-4 место после тромбоэмболии, кровотечений, экстрагенитальных заболеваний среди причин смерти беременных.

В о время беременности артериальная гипертензия может привести к развитию преждевременной отслойки нормально расположенной плаценты, отслойки сетчатки, эклампсии с нарушением мозгового кровообращения, полиорганной недостаточности, тяжелых форм синдрома ДВС с развитием массивных коагулопатических кровотечений, тромбоэмболии, преждевременным родам. Осложнениями АГ также являются прогрессирующая фетоплацентарная недостаточность и задержка внутриутробного развития плода (ЗВУР), рождение маловесных детей, а в тяжелых случаях – асфиксия и антенатальная гибель плода и новорожденного. Отдаленный прогноз у женщин, имевших АГ в период беременности, характеризуется повышенной частотой развития ожирения, сахарного диабета, сердечно-сосудистых заболеваний. Дети этих матерей подвержены развитию различных метаболических и гормональных нарушений, сердечно-сосудистой патологии. Классификация артериальной гипертензии у беременных:

  1. Хроническая АГ. – гипертоническая болезнь, – симптоматическая АГ.
  2. Гестационная АГ (диагноз на период беременности). – переходящая АГ, – хроническая АГ.
  3. Преэклампсия. – умеренно тяжелая, тяжелая, – критические формы (эклампсия; отек, кровоизлияние и отслойка сетчатки; отек легких; острая почечная недостаточность; преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты; острый жировой гепатоз; HELP- синдром).
  4. Преэклампсия на фоне хронической АГ.Хроническая артериальная гипертензия (ХАГ). Это AГ, диагностированная до наступления беременности или до 20-ой недели гестации. Диагностическим критерием является САД > 140 мм рт. ст. и/или ДАД > 90 мм рт. ст., возникшая АГ после 20 недель гестации, но не исчезнувшая после родов. Это гипертоническая болезнь. АГ может быть симптоматической (вторичная гипертензия) на фоне:
  • Патологии почек.
  • Поражения почечных артерий.
  • Феохромоцитомы, первичного альдостеронизма.
  • Синдрома и болезни Иценко-Кушинга.
  • Коартации аорты.
  • Приема лекарственных препаратов.

Гестационная артериальная гипертензия (ГАГ). Повышение артериального давления (АД) впервые обнаруживается после 20-ой недели и не сопровождается наличием белка в моче (протеинурией). Окончательный диагноз ставится лишь после родов. Если АД возвратилось к норме через 12 недель после родов – «преходящая» (транзиторная) АГ. При сохранении повышенного АД через 12 недель – хроническая АГ. Преэклампсия. Является специфичным для беременности синдромом, возникшим после 20-ой недели беременности и определяется по наличию артериальной гипертензии, протеинурии. Факторами риска при преэклампсии являются:

  • Первая беременность.
  • Юные первородящие.
  • Возраст беременной >30 лет.
  • Преэклампсия в семейном анамнезе, в предыдущие беременности.
  • Экстрагенитальные заболевания (АГ, заболевания почек, органов дыхания, сахарный диабет, ожирение).
  • Многоплодие.
  • Многоводие.
  • Пузырный занос.

В России принят термин «гестоз» – ряд патологических состояний, характеризующихся полиорганной недостаточностью с нарушением функций почек и печени, сосудистой и нервной системы, фетоплацентарного комплекса. Клинические формы гестоза:

  • Водянка (отеки).
  • Нефропатия (АГ, протеинурия, отеки, снижение количества выделяемой мочи).
  • Преэклампсия (присоединение к АГ и протеинурии неврологических, зрительных нарушений, болей в эпигастральной области, рвоты).
  • Эклампсия (возникновение судорог у женщин с преэклампсией).

Опасность припадка эклампсии заключается в том, что во время него может произойти кровоизлияние в сетчатку глаз, или в мозг, или другие жизненно важные органы. В связи с чем возможны потеря сознания и летальный исход. С целью эффективной профилактики и ранней диагностики гестозов должна быть определена группа риска развития гестоза врачом. При каждом посещении обязательны следующие исследования:

  • Взвешивание.
  • Измерение артериального давления на обеих руках.
  • Общий анализ мочи.
  • Выявление скрытых отеков.
  • Контроль за состоянием плода.
  • Консультация терапевта, окулиста, невролога.
  • Анализ крови.
  • Гемостаз, биохимический анализ крови.

Преэклампсия на фоне ХАГ. Это самая неблагоприятная клиническая форма артериальной гипертензии у беременных для прогноза матери и плода. Диагностируется в том случае, если на фоне артериальной гипертензии, существующей до беременности, или диагностируемой до 20- ой недели, появляется протеинурия, резкое повышение артериального давления. Как влияет артериальная гипертензия на организм беременной и плод? Влияние артериальной гипертензии на течение беременности и обратное влияние (беременности на течение артериальной гипертензии) зависит от ее стадии: I стадия артериальной гипертензии мало влияет на течение беременности и роды, осложнения почти не наблюдаются.

II стадия артериальной гипертензии. Беременность ухудшает течение артериальной гипертензии. Характерным является временное снижение артериального давления на сроке 15-16 недель, однако после 22-24 недель артериальное давление непрерывно повышается, и у 50% беременных развивается гестоз. III стадия артериальной гипертензии. Беременность значительно отягощает течение артериальной гипертензии. Такое состояние является показанием к прерыванию беременности. При отказе женщины прервать беременность показана госпитализация в профильное отделение. При наличии артериальной гипертензии в результате связанных патологических изменений нарушается плацентарный кровоток, что увеличивает риск перинатальной заболеваемости и смертности. Лечение гипертензивных состояний у беременных. Цель лечения – предупредить осложнения, обусловленные высоким уровнем артериального давления, обеспечить сохранение беременности, нормального развития плода и успешные роды.

  1. Изменение образа жизни. Соблюдение режима труда и отдыха, психоэмоциональный покой, длительное пребывание на свежем воздухе, увеличение сна до 9-10 часов в сутки за счет дневного.
  2. Рациональное питание. Диета белковая, обогащенная полиненасыщенными жирными кислотами, вегетарианская, малосольная (при повышенной гидрофильности тканей – ограничить поваренную соль до 6-7 г. в сутки, ограничить жидкость), разгрузочные дни (1,5 кг. нежирного творога или яблок, дробно в течение дня, один раз в 7-10 дней).
  3. Витаминотерапия (витамин Е, Р- каротин, фолиевая кислота).
  4. Психотерапия.
  5. Иглорефлексотерапия.
  6. Лечебная физкультура.
  7. Бальнеотерапия (обтирания, минеральные ванны, циркулярный душ, вихревые и ножные ванночки).
  8. УФО, теплые воздушные ванны (t–22°С), общие солнечные ванны.
  9. Физиотерапия. Это электросон, индуктометрия на область стоп и голени, диатермия околопочечной области.
  10. Адаптогены (настойка элеутерококка, валерианы, пустырника).
  11. Фитотерапия. Применять лекарственные травы, обладающие гипотензивными свойствами и регулирующие деятельность нефрона: боярышник кроваво-красный, брусника, валериана лекарственная, мелиса лекарственная, мята перечная, мята полевая, свекла столовая, иван-чай, сушеница (топяная) болотная.
  12. Лекарственная терапия. Пороговым уровнем артериального давления для назначений лекарственных средств при беременности является АД-140/90 мм рт. ст. Используются: сернокислая магнезия, метилдопа, а-р-адреноблокаторы, пролонгированные блокаторы кальциевых каналов, вазодилататоры прямого действия. Противопоказаны: ингибиторы АПФ, препараты раувольфии, диуретики. Конечной целью лечения беременных с артериальной гипертензией должно быть снижение АД до 120- 130/80 мм рт. ст., при котором минимален риск развития осложнений.

В заключение хочется сказать, чем раньше беременная встанет на учет в женскую консультацию, тем раньше будут выявлены факторы риска развития артериальной гипертензии, гестоза или скорректировано лечение уже имеющихся гипертензивных состояний, тем ниже будет риск возникновения нарушений жизнедеятельности плода и акушерской патологии. Профилактика и своевременная диагностика артериальной гипертензии беременных – важнейшая задача врача.

Поделиться в соц.сетях

Диагноз артериальной гипертонии теперь может быть установлен на основании измерений артериального давления вне клиники

Достоинства  так называемых амбулаторных методов измерения артериального давления (АД) – суточного мониторирования (СМАД) и самоконтроля (СКАД) были давно очевидны специалистам. Однако до настоящего времени «официальный» диагноз артериальной гипертонии (АГ) базировался исключительно на традиционных клинических измерениях АД. «Клиническое измерение имеет наибольшую доказательную базу для  обоснования классификации уровней АД, прогноза рисков и оценки  эффективности терапии»,  — так гласили отечественные и международные Рекомендации.

Изменения, внесенные в европейские Рекомендации по лечению артериальной гипертонии ESH 2018 года можно считать если не «революционными», то весьма существенными, — рассказывает руководитель лаборатории применения амбулаторных диагностических методов в профилактике хронических неинфекционных  заболеваний ФГБУ «НМИЦ профилактической медицины» Минздрава России, д. м.н., профессор В.М. Горбунов.  Отныне для диагностики артериальной гипертонии методы СМАД и СКАД могут использоваться на равных с клиническими измерениями основаниях.

Новые Рекомендации призывают прежде всего к более широкому использованию дешевого и доступного метода СКАД. В этом случае измерения проводятся в естественных условиях; пациент более спокоен, чем в кабинете врача. Важное значение имеет активное вовлечение пациента в процесс контроля АД. СКАД несложно проводить в течение длительного времени, что очень удобно для оценки эффективности антигипертензивной терапии. Метод хорошо совместим с современными телемедицинскими технологиями. Считается, что на результаты СКАД практически не влияет тревожная реакция на измерение («эффект белого халата»). Это верно в большинстве случаев. К сожалению, у некоторых пациентов СКАД, напротив,  провоцирует тревожную реакцию. В этом случае домашнее измерение АД проводить не следует; оптимальным методом контроля АД у таких больных является 24-часовое мониторирование.

СМАД дает наиболее объективную информацию об уровне АД и, по мнению, многих экспертов, является «золотым стандартом» в диагностике артериальной гипертонии. Важными специфическими преимуществами СМАД являются чрезвычайно значимая информация о величине ночного АД и больший опыт применения в научных исследованиях и клинической практике. Относительные недостатки СМАД – более высокая стоимость приборов и чувство дискомфорта у небольшого процента пациентов.

В чем же причина «повышения статуса», которого были удостоены амбулаторные методы измерения АД в новых Рекомендациях? По мнению профессора В.М. Горбунова, на позицию экспертов в области лечения артериальной гипертонии повлияло осознание некоторых новых недостатков традиционных клинических измерений АД, которым ранее не придавалось существенного значения.


Новости конгресса AHA 2017 года: новые рекомендации по артериальной гипертензии

Ниже приведены ключевые позиции и изменения в рекомендациях 2017 года:

Часть 1: общие вопросы, скрининг и наблюдение

1.     Новое руководство является комплексными рекомендациями, включающими новые данные исследований, касающихся сердечно-сосудистого риска, ассоциированного с уровнем артериального давления (АД), амбулаторного измерения АД, домашнего измерения АД, граничных уровней #АД, требующих инициации антигипертензивной терапии, целевых значений АД, стратегий улучшения лечения и контроля артериальной гипертензии (АГ), а также прочих важных аспектов.

2.    Критически важным является следование работников здравоохранения стандартам четкого измерения уровня АД. Уровни АД можно разделить на следущие категории: нормальное, повышенное, 1 и 2 степень АГ. Нормальным считается уровень АД менее 120/80 мм рт.ст.; повышенное: уровень систолического АД (САД) 120-129 мм рт.ст., уровень диастолического АД (ДАД) <80 мм рт.ст.; 1 степень АГ: САД 130-139 мм рт.ст. или ДАД 80-89 мм рт.ст.; 2 степень АГ: САД ≥ 140 мм рт.ст., ДАД ≥ 90 мм рт.ст. До того, как выставить пациенту диагноз АГ следует выбрать среднее значение, основанное на как минимум 2 измерениях, полученных как минимум дважды в различные периоды времени. Данные амбулаторного и самоизмерения АД рекомендуется использовать для подтверждения диагноза АГ, а также подбора дозы антигипертензивных препаратов, параллельно с другими медицинскими вмешательствами и телемедицинского консультирования. Соответствующие уровни АД, в зависимости от метода и места измерения составляют: офисное – 140/90 мм рт.ст., домашнее – 135/85 мм рт.ст., дневное АД по данным суточного мониторирования – 135/85 мм рт.ст., ночное АД по данным суточного мониторирования – 120/70 мм рт.ст., среднесуточное АД по данным суточного мониторирования – 130/80 мм рт.ст. У взрослых лиц в случае уровня САД более 130, но менее 160 мм рт.ст., или ДАД более 80, но менее 100 мм рт.ст., до постановки диагноза #АГ обоснованным является дообследование с целью исключения “гипертензии белого халата”, что достигается либо проведением суточного мониторирования АД, либо регистрации домашнего уровня АД. У лиц с уровнями офисного АД, не достигающими значений АГ (120-129/<80 мм рт.ст.), рекомендуется дообследование с помощью оценки дневного амбулаторного или домашнего уровня АД для выявления скрытой гипертензии.

3.    У взрослых лиц в возрасте 45 лет при отсутствии АГ 40-летний риск ее развития составляет 93% у афро-американцев, 92% у латино-американцев и 86% у белых лиц и 84% у китайцев. В 2010 году АГ была основной причиной смерти и показателя инвалидности, скорректированного на годы жизни, во всем мире. У афро-американских женщин АГ являлась более отягощающим фактором неблагоприятных клинических событий, чем у белых женщин. Часто упускается из виду, что зависимость риска сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) от уровня АГ носит логарифмический характер в диапазоне САД от < 115 мм рт.ст. до >180 мм рт.ст. и ДАД от < 75 мм рт.ст. до > 105 мм рт.ст. Каждое повышение уровня САД на 20 мм рт.ст. или ДАД на 10 мм рт.ст. ассоциируется с удвоением риска смерти вследствие инсульта, кардиальной патологии или других сосудистых заболеваний. У лиц от 30 дет и старше более высокие уровни САД и ДАД ассоциированы с повышением риска ССЗ, стенокардии, острого инфаркта миокарда (ОИМ), сердечной недостаточности (СН), инсульта, заболеваний периферических артерий (ЗПА) и аневризмы абдоминального отдела аорты.

4.    Важным является скрининг и влияние на другие сердечно-сосудистые факторы риска у взрослых лиц с АГ: курение, сахарный диабет, дислипидемия, излишняя масса тела, никзий уровень физических нагрузок, нездоровая диета, психо-социальный стресс, синдром сонного апноэ. Базовыми обследованиями у лиц с первичной АГ являются: уровень глюкозы натощак, развернутый общий анализ крови, липидограмма, основная метаболическая панель, уроень тиреотропного гормона, общий анализ мочи, электрокардиограмма и, в случае необходимости, эхокардиография, уровень мочевой кислоты, соотношение уровня альбумин-креатинин мочи.

5.    Скрининг вторичных причнин артериальной гипертензии необходим в случае впервые возникшей или неконтролируемой АГ, включающих резистентность (к ≥ 3 препаратам), внезапное начало, возраст пациента менее 30 лет, выраженное поражение органов-мишеней (церебро-васкулярное заболевание, ретинопатия, гипертрофия левого желудочка, СН с сохраненной или сниженной ФВ ЛЖ, ишемическая болезнь сердца, хроническая болезнь почек (ХБП), заболевание периферических артерий, альбуминурия) либо появление диастолической гипертензии у лиц пожилого возраста, либо в случае наличия неспровоцированной или выраженной гипокалиемии. Скрининг в данном случае включает обследование на наличие ХБП, реноваскулярного заболевания, первичного альдостеронизма, синдрома обструктивного апноэ сна, АГ, спровоцированной приемом препаратов (нестероидные противовоспалительные средства, стероиды/андрогены, противоотечные препараты, кофеин, ингибиторы моноаминооксидазы) и алкоголь-ассоциированной АГ. При наличии характерных клинически признаков показан скрининг на редкие причины вторичной гипертензии (феохромоцитома, синдром Кушинга, врожденная гиперплазия коры надпочечников, гипотиреоидизм, гипертиреоидиз и коарктация аорты). В случае выявления данной патологии рекомендовано направление пациента в узкопрофильные центры.

6.    Нефармакологические вмешательства с целью снижения уровня АД включают: снижение массы тела пациентами с излишней массой тела либо ожирением путем здоровой диеты, ограничение потребления соли, обогащение рациона калием; повышение физической активности в рамках программ физических упражнений. Мужчины должны ограничивать потребление алкоголя до 2, а женщины – до 1 стандартной дозы в день. Обычно влияние каждого из компонентов модификации образа жизни выражается в снижении уровня САД на 4-5 мм рт.ст., а ДАД – на 2-4 мм рт.ст. Однако лишь низкосолевая диета, снижение потребления насыщенных жиров, увеличение потребления овощей, фруктов и злаков способны уменьшить уровень САД примерно на 11 мм рт.ст.

7.    Польза медикаментозной терапии в снижении уровня АД связана с риском атеросклеротического ССЗ. При снижении до указанных значений уровня АД меньшее количество пациентов с высоким риском атеросклеротического ССЗ будут требовать терапии для профилактики сердечно-сосудистого события (т.е. меньшее количество будут требовать лечения) – пожилые лица, пациенты с ИБС, сахарным диабетом, гиперлипидемией, курильщики и пациенты с ХБП. Применение антигипертензивных препаратов с целью вторичной профилактики сердечно-сосудистых событий показано пациентам с установленным ССЗ и средним уровнем САД ≥130 мм рт.ст. или ДАД ≥ 80 мм рт.ст; в плане первичной профилактики у лиц без ССЗ терапия показана, если 10-летний риск атеросклеротического ССЗ составляет от 10% и выше, а уровень САД ≥140 мм рт. ст., а ДАД ≥ 90 мм рт.ст. Распространенность АГ у женщин до 50 лет ниже, чем у мужчин, однако затем становится выше. Исходя из того, что на сегодняшний день нет рандомизированных исследований по изучению клинических исходов конкретно у женщин – помимо специфических рекомендаций по ведению пациентов с АГ во время беременности – отсутствуют данные касательно отличий в граничных уровня АД для инициации терапии, целевых значений АД, препарата выбора для инициации терапии или комбинаций антигипертензивных препаратов у мужчин и женщин. У взрослых пациентов с подтвержденной АГ и установленным ССЗ или 10-летним риском атеросклеротического ССЗ от 10% и выше целевой уровень АД составляет < 130/80 мм рт.ст. У лиц с подтвержденной АГ но без дополнительных маркеров повышенного сердечно-сосудистого риска целевые значения АД на уровне <130/80 мм рт.ст. считаются целесообразными.

8.    Наблюдение. У пациентов низкого риска с повышенным АД или пациентов с 1 степенью АГ и низким риском атеросклеротического ССЗ уровень АД следует повторно оценить через 3-6 месяцев немедикаментозной терапии. Лицам с 1 степенью АГ и высоким риском атеросклеротического ССЗ (10-летний риск ≥ 10%) следует назначать как немедикаментозную, так и медикаментозную терапию с повторной оценкой уровня АД через 1 месяц. Лица с 2 степенью АГ должны быть повторно обследованы через 1 месяц после установки диагноза. При этом им должна быть назначена как немедикаментозная терапия, так и комбинация двух антигипертензивных препаратов разных классов с повторной оценкой уровня АД через 1 месяц. У лиц с очень высокими средними показателями уровня АД (САД ≥ 160 мм рт.ст. или ДАД ≥ 100 мм рт.ст.) требуется незамедлительное проведение обследования и назначение медикаментозной терапии с последующим четким мониторингом и коррекцией дозы препаратов при необходимости.

Часть 2: принципы медикаментозной терапии и особые категории пациентов.

9.    Хлорталидон (в дозе 12.5-25 мг) является диуретиком выбора вследствие длительного периода полувыведения и доказанной эффективности в снижении риска ССЗ. Ингибиторы АПФ (иАПФ), блокаторы рецепторов ангиотензина (БРА) и прямые ингибиторы ренина не должны комбинироваться. ИАПФ и БРА повышают риск гиперклиемии у пациентов с ХБП и в случае дополнительного приема калия или калийсберегающих диуретиков. ИАПФ и БРА должны быть отменены а в период беременности. Дигибропиридиновые блокаторы калльциевых каналов (БКК) могут приводить к возникновению отеков. Применение недигидропиридиновых БКК ассоциировано с возможным развитием брадикардии и блокад сердца, назначение данных препаратов при СН со сниженной ФВ ЛЖ не рекомендовано. Назначение петлевых диуретиков показано при СН и в случае, если уровень скорости клубочковой фильтрации (СКФ) менее 30 мл/мин. Амилорид и триамтерен могут применяться в комбинации с тиазидными диуретиками у лиц с низким уровнем калия плазмы крови, но не должны назначаться в случае, если уровень СКФ менее 45 мл/мин. Применение спиронолактона или эплеренона предпочтительно при первичном гиперальдостеронизму и в случае резистентной АГ. Бета-блокаторы не являются препаратами первой линии в лечении АГ, за исключением случаев сопутствующей ИБС и СН со сниженной ФВ ЛЖ. Следует избегать резкой отмены бета-блокаторов. Бисопролол, карведилол и метопролола сукцинат показаны при АГ на фоне СН со сниженной ФВ ЛЖ. Бисопролол показан при АГ на фоне заболеваний легких с бронхоспастическим синдромом.

10.Применение блокаторов альфа1-адренорецепторов ассоциировано с ортостатической гипотензией; назначение данного класса препаратов следует рассматривать у мужчин с гиперплазией простаты. Назначения альфа-1 агонистов центрального действия следует избегать, они должны быть препаратами резерва вследствие побочных эффектов, следует избегать их резкой отмены. Назначение прямых вазодилятаторов ассоциировано с задержкой натрия и жидкости, назначать данную группу препаратов следует совместно с диуретиками и бета-блокаторами.

11.Препаратами первой линии для инициации антигипертензивной терапии при 1 степени АГ являются тиазидные диуретики, БКК и иАПФ или БРА. В случае АГ 2 степени и средним уровнем АД на 20/10 мм рт.ст. выше граничных значений следует назначать комбинацию двух препаратов первой линии разных классов. Улучшить приверженность к терапии можно при назначении препарата один раз в день и применении комбинированных препаратов.

12.У пациентов с подтвержденной АГ и стабильным ССЗ или уровнем 10-летнего риска атеросклеротического СЗЗ ≥ 10% целевым уровнем АД является < 130/80 мм рт.ст. Стратегия назначения антигипертензивных препаратов состоит в первичном назначении препаратов, требуемых согласно рекомендаций по лечению ИБС, СН со сниженной ФВ ЛЖ, ОИМ в анамнезе и стабильной стенокардии. В дальнейшем, при необходимости, дополнительно назначаются препараты для достижения целевых значений АД. При СН с сохраненной ФВ ЛЖ и симптомами гиперволемии первично назначаются диуретики, а затем подбираются дозы иАПФ или БРА и бета-блокаторов до достижения уровня САД < 130 мм рт.ст. Применение при АГ БРА оправдано с целью предотвращения рецидивов фибрилляции предсердий (ФП).

13.ХБП. Целевой уровень АД < 130/80 мм рт.ст. У пациентов с 3 или выше стадией ХБП либо 1- стадией ХБП с наличием альбуминурии (>300 мг/день) с целью замедления прогрессирования заболевания почек показана терапия иАПФ. В случае непереносимости иАПФ целесообразным является назначение БРА.

14.Ведение пациентов с инсультом и цереброваскулярными заболеваниями является сложным. С целью анализа различных факторов, относящихся к ведению пациента с инсультом, требуется оценка времени с развития инсульта, типа инсульта и терапевтические цели, которые, как и идеальный класс антигипертензивных препаратов в данной ситуации, в клинических исследованиях достаточно изучены не были. У взрослых лиц с острым внутричерепным кровоизлиянием и уровнем САД > 220 мм рт.ст. целесообразным является внутривенная инфузия антигипертензивного препарата с жестким контролем уровня АД. Резкое снижение уровня САД до < 140 мм рт.ст. от исходного уровня 150-220 мм рт.ст. не лучшает выживаемость, а может даже навредить. При остром ишемическом инсульте уровень АД должен быть постепенно снижен до < 185/110 мм рт.ст. перед проведением тромболизиса  и поддерживаться на уровне <180/105 мм рт.ст. как минимум сутки после начала терапии.

15.Начало или возобновление антигипертензивной терапии во время госпитализации стабильного пациента с ишемическим инсультом и уровнем АД >140/90 мм рт.ст. является целесообразным. В случае невозможности проведения тромболизиса или эндоваскулярного вмешательства, при уровне АД ≥ 220/120 мм рт.ст. польза от снижения АД является неясной, однако целесообразным является рассмотрение вопроса о снижении уровня АД на 15% в течение первых 24 часов после развития инсульта. Однако инициация или возобновление терапии при уровне АД < 220/120 мм рт.ст в течение 48-72 часов от развития инсульта является неэффективным.

16.Вторичная профилактика после инсульта или транзиторной ишемической атаки (ТИА) должна возобновиться после первых нескольких дней от индексного события с целью снижения риска рецидива. Рекомендовано назначение иАПФ или БРА в комбинации с тиазидным диуретиком. Лицам, ранее не получавшим медикаментов по поводу АГ, с уровнем АД ≥ 140/90 мм рт.ст. через несколько дней полсе индексного события следует назначить антигипертензивную терапию. Выбор препаратов должен основываться на сопутствующей патологии. Целевым уровнем АД у пациентов после инсульта, ТИА или лакунарного инсульта является < 130/80 мм рт.ст. У лиц с ишемическим инсультом, которые ранее не получали лечение по поводу АГ, в случае уровня АД менее 140/90 мм рт.ст. доказательств пользы антигипертензивной терапии на сегодняшний день нет.

17.Сахарный диабет и АГ. Назначать антигипертензивную терапию следует в случае уровня АД ≥ 130/80 мм рт.ст, целевые значения — < 130/80 мм рт.ст. В данном случае являются все препараты первой линии (диуретики, иАПФ, БРА, БКК) являются эффективными. В случае наличия альбуминурии следует рассматривать назначение иАПФ или БРА.

18.Метаболический синдром. Основой лечения метаболического синдрома является модификация образа жизни с целью улучшения чувствительности к инсулину, что подразумевает изменение рациона, снижение массы тела и повышение уровня физических нагрузок. Оптимальная антигипертензивная терапия у пациентов с АГ на фоне метаболического синдрома на сегодняшний день четко не определена. По результатам исследования ALLHAT хлорталидон оказался как минимум так же эффективен, как и другие антигипертензивные препараты, в снижении риска сердечно-сосудистых событий. Назначения бета-блокаторов следует избегать, за исключением случаев сопутствующей ишемической болезни сердца.

19.Клапанные заболевания сердца. Лечение пациентов с АГ и безсимптомным аортальным стенозом следует начинать с низких доз препаратов, постепенно повышая дозу. У пациентов с хронической недостаточностью аортального клапана лечение систолической АГ целесообразно проводить препаратами, не замедляющими частоту сердечных сокращений (т.е. следует избегать назначения бета-блокаторов).

20.Заболевания аорты. Бета-блокаторы являются препаратами выбора у пациентов с АГ и заболеваниями грудного отдела аорты.

21.Раса/этническая принадлежность. У афро-американцев с АГ, но без СН или ХБП, включая лиц с СД, инициальная антигипертензивная терапия должна включать тиазидный диуретик или БКК. С целью достижения целевых значений АД < 130/80 мм рт.ст. рекомендовано назначать 2 и более препарата у большинства лиц, особенно у афро-американцев.

22.Вопросы, связанные с возрастом. У пожилых лиц (от 65 лет и старше) с АГ и множественной сопутствующей патологией и/или ограниченной ожидаемой продолжительностью жизни с целью решения вопроса касательно величины снижения АД и выбора антигипертензивных препаратов целесообразно учитывать клиническую оценку, предпочтения пациента и решения команды специалистов. Снижение АД целесообразно с целью предотвращения снижения когнитивной функции и развития деменции.

23.Терапия в периоперационном периоде. Применение бета-блокаторов, как и других групп антигипертензивных препаратов, у пациентов, которым предстоит оперативное вмешательство, должно продолжаться до самого вмешательства. Может рассматриваться отмена иАПФ или БРА в периоперационном периоде. У пациентов с плановым хирургическим вмешательством при наличии уровня САД ≥ 180 мм рт.ст. или ДАД ≥ 110 мм рт.ст. может рассматриваться перенос вмешательства. Резкая предоперационная отмена баета-блокаторов или клонидина может нанести вред пациенту. При интраоперационной АГ следует применят внутривенные препараты до момента, когда возможно возобновление перорального приема медикаментов.

24.Каждый взрослый пациент с АГ должен иметь четкий, детальный и основанный на современных данных доказательной медицины план терапии, гарантирующий достижения собственных целей и целей терапии; эффективную терапию сопутствующей патологии; периодические осмотры команды врачей; приверженность к рекомендациям по лечению. Эффективные поведенческие и мотивационные сттратегии рекомендованы для обеспечения эффективного изменения образа жизни. Рекомендован комплексный командный подход с участием лечащего врача, медсестры и фармацевта наряду с применением возможностей телемедицины.

Сравнение рекомендаций JNC-7 и ACC/AHA 2017

САД, ДАД (мм рт.ст.)

JNC7

2017 ACC/AHA 

<120 и <80

Нормальное АД

Нормальное АД

120–129 и <80

Прегипертензия

Повышенное АД

130–139 или 80–89 

Прегипертензия

АГ 1 ст.

140–159 или 90–99

АГ 1 ст.

АГ 2 ст.

> 160 или >100

АГ 2 ст.

АГ 2 ст.

 

#рекомендации, #AHA, #ACC, #guidelines, #hypertension

Литературные источники находятся в редакции www.WebCardio.org

Суточное мониторирование артериального давления

Суточное мониторирование артериального давления

11 Февраля 2016

На приеме у врача у Вас постоянно повышенные цифры артериального давления (АД)… Возможно, у Вас «гипертония белого халата» (своеобразная реакция на посещение медицинского учреждения) или истинная артериальная гипертензия (гипертоническая болезнь), которая требует незамедлительного лечения.

Суточное мониторирование АД– это автоматическое измерение артериального давления в течение суток через определенные интервалы, согласно заданной программе.

Не многие пациенты будут измерять АД каждые 30 мин. днем, и ни один человек не будет измерять его в ночное время — а это принципиально важно. Ночью артериальное давление должно снижаться, однако существует категория пациентов, у которых оно не только не снижается, но (что особенно опасно) еще и повышается. Такие пациенты имеют самый больший риск развития инсульта, и только суточное мониторирование АД позволяет выявить эту категорию пациентов и подобрать эффективное лечение.

Суточное мониторирование АД позволяет поставить диагноз артериальной гипертензии на ее начальной стадии. Периодические подъемы АД при нагрузке и эмоциях бывают и у здоровых людей, а средние показатели за сутки при суточном мониторировании позволяют провести грань между нормой и началом заболевания. А лечение важно начинать именно в начальной стадии, когда сосуды еще не имеют необратимых изменений, а значит легче избежать таких осложнений как инфаркт или инсульт.

Кроме того, опираясь на результаты суточного мониторирования АД, врач определяет степень тяжести артериальной гипертензии, риск развития осложнений и сможет подобрать индивидуальную гипотензивную терапию (наиболее адекватные препараты, их дозы, время и кратность приема). Повторное контрольное мониторирование АД оценивает эффективность и безопасность назначенного лечения.позволяет отвергнуть или установить наличие артериальной гипертонии у пациента (или, наоборот, гипотонии).

Методика проведения суточного мониторирования АД

На плечо пациента одевается манжета для измерения АД, соединенная с портативным монитором, который автоматически измеряет пульс, систолическое и диастолическое артериальное давление через установленные интервалы времени (аппарат измеряет АД каждые 20 мин днем и 30 ночью). Прибор крепится на ремне через плечо, его вес не превышает300 грамм. Измерения проводятся в амбулаторном режиме, в условиях обычной активности пациента. Общая продолжительность исследования от 24 до 48 часов. Программирование монитора перед установкой на пациента происходит с помощью компьютера. После окончания исследования монитор подключается к персональному компьютеру для обработки и отображения результатов измерений.

Дополнительно врач объясняет пациенту, как вести дневник самонаблюдения (выдается отпечатанная форма), в который вносятся данные о самочувствии, жалобы, эпизоды физической и эмоциональной активности, сведения о приеме медикаментов, времени сна, периодах плохого самочувствия и т.д.

Преимущества перед обычным измерением АД огромны — метод суточного мониторирования позволяет рассчитать средние показатели артериального давления и пульса, средние значения АД в дневной и ночной период, определяется степень ночного снижения и утреннего повышения АД, реакцию АД на физические нагрузки и психоэмоциональные стрессы, вариабельность АД и пульса в течение суток, определить эпизоды гипотонии.

Показания к проведению:

Подозрение на «гипертонию белого халата»

Пограничное или впервые выявленное повышение АД

Оценка проводимой медикаментозной терапии (при наличии сложностей в подборе медикаментозной терапии возможно проведение несколько процедур мониторирования)

Сочетание артериальной гипертонии с ишемической болезнью сердца, сосудистыми поражениями головного мозга с целью выявления критических колебаний АД

Подозрение на лабильную артериальную гипертензию у лиц молодого возраста с наследственной отягощенностью по гипертонической болезни;

Артериальная гипотония (снижение артериального давления)

Синкопальные (обморочные) состояния

Артериальная гипертония и ее классификация

22 июня 2020

Артериальная гипертензия (артериальная гипертония) – это длительное повышение артериального давления больше 140/90 мм рт.ст. 

 

Классификация артериальной гипертонии

Чаще всего встречается смешанная форма, при которой повышается как систолическое, так и диастолическое давление. Реже возникает изолированная АГ – повышение только одного из видов давления. Последняя форма характерна для людей пожилого возраста.

По причине возникновения можно выделить 2 вида артериальной гипертензии:

  1. Первичная – идиопатическая или эссенциальная, причина возникновения которой не может быть установлена. Встречается в 90% случаев. Диагноз первичной АГ устанавливают при исключении всех возможных причин повышения АД.

  2. Вторичная – является лишь симптомом какой-либо болезни, а не самостоятельной нозологией, то есть причина повышения давления при этом всегда ясна.

Все артериальные гипертензии можно разделить на 3 степени в зависимости от уровня повышения давления:

  1. Оптимальное АД – сАД < 120, дАД

  2. Нормальное – соответственно < 120-129/80-84 мм.рт.ст.

  3. Высокое нормальное – сАД находится в пределах 130-139 мм.рт.ст, а дАД – 85-89 мм.рт.ст.

  • I степень – 140-159/90-99 мм.рт.ст.

  • II степень – повышение сАД от 160 до 179 и дАД от 100 до 109 мм.рт.ст.

  • III степень – сАД от 180 и >, дАД > 110 мм.рт.ст.

Классификация по стадиям заболевания:

  • I стадия – поражения органов-мишеней не наблюдается;

  • II стадия – нарушение функционирования одного или нескольких органов-мишеней;

  • III стадия – сочетание поражения органов-мишеней с ассоциированными клиническими заболеваниями.

Виды изолированной артериальной гипертензии: систолическая – верхнее давление больше 141, нижнее – меньше 89, диастолическая – верхнее давление в норме, нижнее больше 91.

Формы артериальной гипертензии в соответствии с уровнем повышения давления:

  • мягкая АГ – соответствует I степени повышения АД;

  • умеренная АГ – соответствует II степени повышения АД;

  • тяжелая АГ – соответствует III степени повышения АД.

 

 

Гипертония. / Полезная информация / ФГБУЗ МСЧ №98

Гипертония.

Артериальная гипертония является одним из наиболее распространённых хронических неинфекционных заболеваний. Причем гипертония встречается также у детей и подростков.

Гипертония определяется как систолическое кровяное давление, равное или превышающее 140 мм рт. ст., и/или диастолическое кровяное давление, равное или превышающее 90 мм рт. ст. Нормальные уровни как систолического, так и диастолического кровяного давления особенно важны для эффективного функционирования жизненно важных органов, таких как сердце, головной мозг и почки, а также для состояния здоровья в целом.

Будучи нелеченым, это заболевание может привести к инсульту, инфаркту миокарда, сердечной и почечной недостаточности, слепоте и снижению умственных  способностей. Чем выше артериальное давление, и чем дольше артериальная гипертензия остается не компенсированной, тем больше вероятность развития осложнений. Если артериальная гипертензия сочетается с другими неблагоприятными факторами, такими как диабет, ожирение, табакокурение, риск повреждения органов и тканей значительно увеличивается.

Однако у большинства людей с гипертонической болезнью симптомы практически полностью отсутствуют. Это заболевание может оказаться безмолвным убийцей, и для каждого человека важно знать показатели своего кровяного давления.

Несмотря на это, среди пациентов с артериальной гипертонией распространено мнение, что любое повышение артериального давления может вызвать головную боль. И соответственно, если голова не болит – артериальное давление в норме.

Можно жить с артериальной гипертонией в течение нескольких лет и не знать об этом. Часто это состояние выявляется случайно при осмотре у врача. Проявления и симптомы появляются, как правило, только тогда, когда заболевание переходит в более тяжелую, возможно даже жизнеугрожающую стадию.

Головная боль и гипертония

Многими исследованиями подтверждается, что артериальная гипертония легкой и умеренной выраженности не является причиной головной боли. Важно отметить, что многих пациентов с артериальной гипертензией не беспокоит головная боль даже при длительном течении заболевания. Обнаружение повышения артериального давления у пациента с головной болью недостаточно для того, чтобы считать гипертонию причиной головной боли.

Часто возникающие головные боли у лиц с умеренной артериальной гипертонией носят разнородный характер: это наиболее часто головные боли напряжения, вызванные  психогенными факторами, мигрень и головные боли, связанные с изменениями в шейном отделе позвоночника.

Поэтому, единственный способ контролировать уровень артериального давления состоит в том, чтобы регулярно его измерять.

Стадии гипертонии и течение патологии.

Гипертония может быть доброкачественной либо злокачественной, быстропрогрессирующей, сопровождающейся или не сопровождающейся гипертоническими кризами. Тяжесть протекания заболевания зависит от стадии.

Существует три степени заболевания:

  1. Первая, или легкая, стадия гипертензии характеризуется повышением уровня давления от 140/90 до 159/99 мм рт.ст. Повышение давления случается нечасто. Симптомы, сопровождающие скачки давления, часто принимаются за усталость. Гипертония 1 степени хорошо поддается лечению. При правильной постановке диагноза, своевременной терапии и изменении образа жизни можно устранить все симптомы заболевания.
  2. Гипертензия 2 степени является следствием халатного отношения к своему здоровью Для второй, умеренной, стадии гипертензии характерно повышение давления от 160/100 до 179/109 мм рт.ст. Развитие заболевания сопровождается такими сопутствующими симптомами, как частные головные и сердечные боли, головокружения. На этой стадии велик риск поражения органов-мишеней. Самолечение второй стадии гипертонии может привести к усугублению ситуации. Лечение назначает кардиолог.
  3. Третья стадия патологии характеризуется устойчиво высоким АД и развитием патологий внутренних органов. Эта стадия заболевания опасна состояниями, которые могут привести к летальному исходу, поэтому пациент должен лечиться под строгим врачебным контролем.

Вторая и третья стадия гипертензии иногда осложняются гипертоническими кризами. Зачастую он случается, когда пациент, почувствовав улучшение, отказывается от приема медикаментов, выписанных кардиологом.

Лечение артериальной гипертонии после установки диагноза.

При постановке диагноза «Гипертония» врач назначает медикаментозное и немедикаментозное лечение. Как лечить гипертонию в каждом индивидуальном случае подскажет врач-терапевт или кардиолог. Среди основных рекомендаций — изменение образа жизни, предполагающее отказ от вредных пристрастий.

Немедикаментозная терапия — это:

  • соблюдение режима работы и отдыха;
  • нормализацию сна;
  • соблюдение диеты, богатой витаминами и антиоксидантами;
  • отказ от вредных привычек;
  • дыхательные упражнения;
  • массаж; практики релаксации.

Если изменение образа жизни не привело к стойкому положительному эффекту, доктор назначает прием лекарственных препаратов, понижающих давление. Пациенту подбирается одно или несколько лекарств, воздействующих на разные симптомы заболевания. На случай резкого повышения АД или гипертонического криза у больного всегда должны быть под рукой такие средства, как Деринат, Коринфар или Лофелин. Лечение гипертонии в домашних условиях подразумевает четкое предписание врача. Народные методы терапии допустимы только в тех случаях, когда диагноз не был поставлен, а давление повышается редко.

Людям, склонным к его повышению, подверженным факторам риска развития гипертонической болезни, таким как  курение,  потребление пищи, содержащей слишком много соли и жиров, отсутствие в рационе достаточного количества фруктов и овощей, опасное злоупотребление алкоголем, недостаточность физической активности, частые стрессовые состояния,  стоит быть особенно внимательными и измерять артериальное давление не реже 1 раза в месяц.

Остальным же вполне достаточно ежегодного контроля в период профилактического осмотра и диспансеризации. А вот тем, у кого диагноз артериальной гипертензии подтвержден, рекомендуется проверять уровень давления как минимум два раза в день – утром и вечером.

Специалисты Всемирной Федерации сердца уверены: люди сами должны следить за своим здоровьем и за состоянием близких людей. Внимание к собственному здоровью позволит на раннем этапе выявить гипертонию, более эффективно контролировать болезнь и своевременно обращаться к врачу в случае необходимости. А регулярные физические нагрузки, уменьшение потребления соли до 5 г. в сутки и снижение избыточного веса позволят в совокупности снизить артериальное давление на 20-25 мм. рт. ст. без применения лекарственных препаратов.

Артериальная гипертония и COVID-19 — МЦ «ЛОТОС»

Почему пациенты с артериальной гипертензией находятся в группе риска — узнайте экспертное мнение специалиста

Все статьи

Яковлева София Васильевна

Заведующая терапевтическим отделением, врач-терапевт, врач-кардиолог

Пациенты с артериальной гипертензией находятся в группе риска при заболевании СOVID-19. Почему это происходит? Экспертное мнение по этому вопросу высказывает заведующая терапевтическим отделением, врач-терапевт, врач-кардиолог высшей категории Яковлева София Васильевна.

Артериальная гипертензия (АГ) – стабильное повышение систолического давления более 140 мм рт. ст. или диастолического более 90 мм рт. ст. Это заболевание одно из наиболее распространенных хронических заболеваний в России. Им страдают около 48% мужчин и 40% женщин.

Факторы риска гипертонической болезни

Их условно можно разделить на неустранимые и устранимые.

Неустранимые факторы риска АГ:

  1. Возраст (частота встречаемости заболевания чаще после 45 лет).

  2. Пол (чаще подвержены гипертензии мужчины).

  3. Генетическая предрасположенность, наследственность (если один из родителей имел заболевание, вероятность составляет 50 – 60%, если болели оба родителя – вероятность практически 100%).

Устранимые факторы риска:

  1. Избыточный вес и ожирение (если окружность талии у мужчин – 94 см и более, а у женщин – 80 см и более). Известно, что на каждые 10 кг лишнего веса систолическое (верхнее) артериальное давление увеличивается на 2 -3 мм ртст, а диастолическое (нижнее) – на 1 – 3 мм рт ст.

  2. Курение.

  3. Неправильное питание (избыточное потребление поваренной соли, переедание, избыточное употребление жиров животного происхождения, недостаток молочных продуктов, овощей и фруктов).

  4. Злоупотребление алкоголем и кофе.

  5. Хронические стрессы.

  6. Гиподинамия–малоподвижный образ жизни (риск увеличивается на 20 – 50%).

  7. Наличие сопутствующих заболеваний (сахарный диабет, патология почек и атеросклероз).

Хочется обратить внимание на то, что неслучайно факторы называются устранимыми. С ними нужно справляться самому человеку: сбросить вес, отказаться от вредных привычек, пересмотреть свой рацион, заняться посильной физической активностью.

Длительно существующая Гипертоническая болезнь (особенно не леченная) — это всегда повреждение сердца, почек, сосудов головного мозга и легких. Поэтому, чем сильнее исходные нарушения, тем тяжелее течение болезни и выше риск осложнений (тромбозов сосудов, нарушений ритма сердца, декомпенсации сердечной недостаточности и прогрессирования хронической болезни почек).

Если у Вас или Ваших близких поставлен диагноз артериальная гипертензия, после перенесенной коронавирусной инфекции, необходимо постоянное наблюдение у кардиолога. Врач не только будет контролировать Ваше самочувствие, но и предложит курс реабилитации после COVID – 19.

Какова роль анионной щели (АГ) в диагностике метаболического ацидоза?

Автор

Антония Куинн, DO Доцент кафедры неотложной медицины, Медицинский центр Нижнего штата Нью-Йорка; Помощник директора резидентуры, лечащий врач, отделение неотложной медицины, Больничный центр округа Кингс, Медицинский центр SUNY Downstate

Антония Куинн, DO, является членом следующих медицинских обществ: Американский колледж врачей неотложной помощи, Общество академической неотложной медицины

Раскрытие информации : Нечего раскрывать.

Соавтор (ы)

Ричард Х. Синерт, DO Профессор экстренной медицины, доцент медицины, директор по исследованиям Медицинского колледжа Нью-Йоркского университета; Консультант, заместитель председателя по исследованиям, Департамент неотложной медицины, Госпитальный центр округа Кингс

Ричард Х. Синерт, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ: Американский колледж врачей, Общество академической неотложной медицины

Раскрытие информации: Нечего раскрывать.

Специальная редакционная коллегия

Франсиско Талавера, фармацевт, доктор философии Адъюнкт-профессор, Фармацевтический колледж Медицинского центра Университета Небраски; Главный редактор Medscape Drug Reference

Раскрытие информации: Получил зарплату от Medscape за работу. для: Medscape.

Говард Бессен, доктор медицины Профессор медицины, Департамент неотложной медицины, Калифорнийский университет, Лос-Анджелес, Медицинская школа Дэвида Геффена; Директор программы, Медицинский центр Harbour-UCLA

Говард А. Бессен, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американский колледж врачей скорой помощи

Раскрытие информации: не подлежит разглашению.

Главный редактор

Ромеш Кардори, доктор медицинских наук, FACP Профессор эндокринологии, директор учебной программы, отделение эндокринологии, диабета и метаболизма, Институт диабета и эндокринных заболеваний Стрелица, отделение внутренней медицины Медицинской школы Восточной Вирджинии

Ромеш Кардори, доктор медицинских наук , Доктор философии, FACP является членом следующих медицинских обществ: Американская ассоциация клинических эндокринологов, Американский колледж врачей, Американская диабетическая ассоциация, Эндокринное общество

Раскрытие: Ничего не разглашать.

Дополнительные участники

Эрик Д. Шрага, MD Штатный врач, Отделение неотложной медицины, Mills-Peninsula Emergency Medical Associates

Раскрытие информации: Ничего не разглашать.

Благодарности

Авторы и редакторы Medscape Reference выражают признательность предыдущему автору, Карен Л. Ставиле, доктору медицины, за вклад в разработку и написание этой статьи.

Временное руководство по тестированию антигенов на SARS-CoV-2

Сводка последних изменений

Ключевые моменты

  • Это временное руководство предназначено для медицинских работников, которые заказывают тесты на антигены, получают результаты тестов на антигены или проводят тестирование на месте, а также для лабораторных специалистов, которые проводят тестирование на антигены в лабораторных условиях или на месте. заботиться и сообщать об этих результатах.
  • Целью настоящего временного технического руководства является поддержка эффективного использования тестов на антигены в клинических условиях и в здравоохранении в различных ситуациях тестирования.
  • Это руководство применяется ко всем клиническим и культурным, доступным и доступным потребителям использования тестов на антигены и не является специфическим для какой-либо конкретной возрастной группы.
  • Это руководство включает рекомендации для людей, которые полностью вакцинированы, и должно использоваться вместе с Временными рекомендациями CDC в области общественного здравоохранения для полностью вакцинированных людей.

Тестирование антигена на SARS-CoV-2

Общие указания

Антигенные тесты обычно используются для диагностики респираторных патогенов, включая вирусы гриппа и респираторно-синцитиальный вирус.Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) предоставило разрешение на экстренное использование (EUA) для тестов на антигены, которые могут идентифицировать SARS-CoV-2. См. Список FDA значков EUAsexternal для диагностики in vitro.

Антигенные тесты — это иммуноанализы, которые выявляют присутствие определенного вирусного антигена, что указывает на текущую вирусную инфекцию. В настоящее время разрешено проводить тесты на антигены на образцах мазков из носоглотки или носа, помещенных непосредственно в буфер для экстракции или реагент для анализа. В настоящее время разрешенные тесты на антигены включают в себя тесты на месте, лабораторные тесты и самопроверки, и они применимы к людям любого возраста.См. Таблицу 1 для получения дополнительной информации о тестах на антигены.

Тесты на антиген

относительно недороги, и большинство из них можно использовать по месту лечения. Большинство утвержденных в настоящее время тестов возвращают результаты примерно через 15–30 минут. Антигенные тесты на SARS-CoV-2 обычно менее чувствительны, чем полимеразная цепная реакция обратной транскрипции (RT-PCR) в реальном времени и другие тесты амплификации нуклеиновых кислот (NAAT) для обнаружения присутствия вирусной нуклеиновой кислоты. Однако NAAT могут оставаться положительными в течение нескольких недель или месяцев после первоначального заражения и могут определять уровни вирусной нуклеиновой кислоты, даже если вирус не может быть культивирован, что позволяет предположить, что присутствие вирусной нуклеиновой кислоты не всегда может указывать на контагиозность.

Правильная интерпретация результатов тестов на антигены и NAAT (при наличии показаний) важна для точного клинического ведения пациентов или людей с подозрением на COVID-19 или для идентификации инфицированных людей при использовании их для скрининга.

Клиническая эффективность диагностических тестов во многом зависит от обстоятельств, в которых они используются. И тесты на антигены, и NAAT работают лучше всего, если человек проходит тестирование, когда его вирусная нагрузка обычно самая высокая. Поскольку тесты на антигены лучше всего работают у людей с симптомами и в течение определенного количества дней с момента появления симптомов, тесты на антигены часто используются у людей с симптомами.Тесты на антигены также могут быть информативными в ситуациях диагностического тестирования, когда человек имеет известное воздействие на человека с COVID-19.

Накопление данных об эффективности тестов на антигены в различных ситуациях помогло использовать эти тесты в качестве скрининговых тестов у бессимптомных людей для выявления или исключения инфекции SARS-CoV-2. См. Рекомендации FDA для медицинских работников, использующих диагностические тесты SARS-CoV-2 для выявления бессимптомных лиц на наличие внешнего значка COVID-19.Также см. Информацию из Центров услуг Medicare и Medicaid (CMS) об обновленном тесте CLIA SARS-CoV-2 на определение молекулярных и антигенов в пунктах оказания медицинской помощи.

Антигенные тесты использовались для скринингового тестирования на COVID-19 в условиях скопления людей , , таких как дома престарелых. Это повторное тестирование позволило быстро выявить людей с COVID-19, предоставив информацию о мерах по профилактике и контролю инфекции, что предотвратило передачу инфекции.В этом случае, когда время выполнения экспресс-теста имеет решающее значение, имеет смысл предоставить немедленные результаты с помощью тестов на антигены, даже если они могут иметь более низкую чувствительность, чем NAAT.

Медицинские работники и практикующие врачи должны понимать характеристики тестирования, чтобы распознавать потенциально ложноотрицательные или ложноположительные результаты тестов и проводить дополнительное подтверждающее тестирование и лечение пациента или человека. Специалисты лабораторий и тестировщиков, которые проводят тесты на антигены, должны понимать факторы, влияющие на точность тестирования на антигены, как описано в этом руководстве.Поставщики медицинских услуг, лабораторные специалисты и специалисты по тестированию, а также практикующие врачи должны также понимать различия между диагностическим, скрининговым и надзорным тестированием. См. Обзор тестирования на SARS-CoV-2 и Стратегии тестирования на SARS-CoV-2 CDC. Также см. Часто задаваемые вопросы FDA по тестированию внешнего значка SARS-CoV-2.

Это руководство дополняет и согласуется с «Обзором тестирования на SARS-CoV-2 и SARS-CoV-2» CDC «Обзор тестирования на места оказания медицинской помощи и руководства по быстрому тестированию» и соответствует ему. CDC также опубликовал руководство по тестированию антигена SARS-CoV-2 в учреждениях долгосрочного ухода, временное руководство по тестированию SARS-CoV-2 в исправительных учреждениях и следственных изоляторах, временное руководство по тестированию SARS-CoV-2 в приютах и ​​лагерях для бездомных, а также Руководство по профилактике COVID-19 в школах K-12.

Нормативные требования к использованию тестов на антиген для SARS-CoV-2

FDA регулирует устройства для диагностики in vitro и предоставило рекомендации и информацию о запросах EUA на диагностические тесты COVID-19 в Политике тестирования на коронавирусную болезнь-2019 во время чрезвычайной ситуации в области общественного здравоохранения (пересмотренной) («Политика в отношении тестов COVID-19»). значок и шаблоны EUA, указанные в этой политике. Тесты на COVID-19 и тест-системы, используемые для диагностического или скринингового тестирования, в том числе для тестирования антигенов, должны иметь EUA от FDA или предлагаться в соответствии с политикой FDA в отношении тестов COVID-19.Каждый тест на антиген SARS-CoV-2, разрешенный для использования FDA, включен в список FDA для диагностики in vitro EUAsexternal. Предполагаемое использование каждого теста, доступное в инструкции по применению и в разрешительном письме, определяет популяцию, в которой предполагается использовать тест, приемлемые типы образцов и способы использования результатов.

Специалисты лабораторий и тестировщиков, которые проводят диагностические или скрининговые тесты на SARS-CoV-2 с помощью тестов на антигены, также должны соблюдать правила внесения поправок в клинические лаборатории (CLIA).Любая лаборатория или центр тестирования, который намеревается сообщать результаты тестов конкретного пациента лицу или поставщику медицинских услуг, должны сначала получить сертификат CLIA и выполнить все требования для выполнения этого тестирования. Для получения дополнительной информации см. CMS ‘Как получить сертификат CLIApdf iconexternal icon. CMS предоставила дополнительную информацию о правоприменительных усмотрении для использования тестирования SARS-CoV-2 в местах оказания медицинской помощи у бессимптомных лиц. Pdf iconexternal icon

Проведение тестов на антиген SARS-CoV-2

Для поставщиков медицинских услуг и персонала тестирования важно понимать рабочие характеристики, включая чувствительность, специфичность, а также положительные и отрицательные прогностические значения конкретного используемого теста на антиген, а также следовать инструкциям производителя по применению, в которых обобщены рабочие характеристики.См. Значок FDA In Vitro Diagnostics EUAsexternal для получения подробной информации о конкретных авторизованных тестах.

«Золотым стандартом» клинической диагностики SARS-CoV-2 остаются лабораторные NAAT (средней и высокой сложности). Таким образом, может возникнуть необходимость подтвердить результат теста на антиген с помощью лабораторной NAAT, особенно если результат теста на антиген не соответствует клиническому контексту. В таблице 1 приведены различия между NAAT и тестами на антигены. Клиническая эффективность NAAT и тестов на антигены может отличаться от клинической применимости при рассмотрении вопросов доступности тестов, качества сбора и транспортировки образцов и сроков получения результатов.В соответствии с их инструкциями по применению некоторые приборы NAAT в местах оказания медицинской помощи нельзя использовать для подтверждающего тестирования. NAAT, дающие предполагаемые результаты, не подходят для подтверждающего тестирования.

Чувствительность тестов на антигены варьируется, но, как правило, она ниже, чем у большинства лабораторных NAAT. Уровень антигена в образцах, собранных либо до появления симптомов, либо на поздних этапах развития инфекции, может быть ниже предела обнаружения тестов. Это может привести к отрицательному результату теста на антиген, тогда как более чувствительный тест, такой как большинство NAAT, может дать положительный результат.Исследования внешнего вида показали, что тесты на антигены имеют сравнимую чувствительность с лабораторными NAAT, когда вирусная нагрузка в образце высока и человек, вероятно, наиболее заразен.

Специфичность тестов на антигены, как правило, такая же, как у большинства NAAT, что означает, что ложноположительные результаты маловероятны, если тест на антиген используется в соответствии с инструкциями производителя. Несмотря на высокую специфичность тестов на антигены, будут иметь место ложноположительные результаты, особенно при использовании в сообществах, где распространенность инфекции низка — обстоятельство, которое справедливо для всех диагностических тестов in vitro.В целом, для всех диагностических тестов, чем ниже распространенность инфекции в сообществе, тем выше доля ложноположительных результатов.

Положительные и отрицательные прогностические значения всех диагностических тестов in vitro (например, NAAT и тестов на антигены) различаются в зависимости от вероятности предварительного тестирования. Вероятность предварительного тестирования учитывает как распространенность целевой инфекции в тестируемой популяции, так и клинический контекст тестируемого человека. Если распространенность инфекции в сообществе высока, а тестируемый человек имеет симптомы, то вероятность предварительного тестирования обычно считается высокой.Если распространенность инфекции в сообществе низкая, а тестируемый человек не имеет симптомов и не имел никаких известных контактов с человеком с COVID-19, то вероятность предварительного тестирования обычно считается низкой. См. Раздел «Интерпретация результатов диагностических тестов CDC» для получения дополнительной информации о взаимосвязи между вероятностью предварительного тестирования и вероятностью получения положительных и отрицательных прогностических значений.

Чтобы оценить вероятность предварительного тестирования, CDC рекомендует, чтобы специалисты лабораторий и тестировщиков, которые проводят тестирование на антигены, определяли распространенность инфекции на основе скользящего среднего уровня положительности их собственного тестирования на SARS-CoV-2 за предыдущие 7–10 дней.Кроме того, государственные департаменты здравоохранения обычно публикуют данные о COVID-19 о показателях положительных результатов тестирования и заболеваемости в своих сообществах.

Обработка тестов на антиген SARS-CoV-2

Условия авторизации в EUA антигена указывают, что лаборатории и центры тестирования, сертифицированные CLIA, должны следовать инструкциям производителя по применению, которые обычно содержатся во вкладыше к упаковке, при выполнении теста и считывании результатов теста. Разрешенные инструкции по применению для каждого теста также можно найти на значке FDA In Vitro Diagnostics EUAsexternal.

Например, на эффективность тестов на антигены может повлиять неправильное хранение компонентов теста и неправильное обращение с ними. Их никогда не следует замораживать, и перед использованием всегда следует дать им нагреться до комнатной температуры (15-30 ° C). Вкладыш в упаковку для этих тестов включает инструкции по обращению с тестовым картриджем / картой, например, по обеспечению того, чтобы он оставался в запечатанном пакете непосредственно перед использованием.

Вкладыш в упаковку для тестов на антиген также включает инструкции о том, как читать результаты теста, в том числе о подходящем времени для чтения результатов и о том, следует ли интерпретировать результаты визуально или с помощью анализатора прибора.Считывание результатов теста до или после указанного времени может привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам.

Последовательная или пакетная обработка нескольких образцов может увеличить риск контаминации и усложнить задачу инкубации каждого образца в течение правильного периода времени перед считыванием результата. Обратитесь к вкладышу в упаковке, чтобы узнать правильное время инкубации для этого теста, а затем проверьте и обеспечьте правильное время для каждого образца во время тестирования и при считывании результатов.

Все тесты на SARS-CoV-2, включая тестирование на антигены, зависят от целостности образца, на которую влияют процедуры как сбора образцов, так и обращения с ними. Неправильный сбор образцов, например слишком быстрое взятие мазка из ноздри, может вызвать недостаточный сбор образцов, что приведет к ограниченному количеству вирусного генетического или антигенного материала для обнаружения. Время от сбора образца до тестирования должно быть минимизировано, и температура образца в течение этого времени должна контролироваться.См. Временные рекомендации CDC по сбору и обращению с клиническими образцами для тестирования на COVID-19.

Следует соблюдать процедуры обеспечения качества, чтобы предотвратить перекрестное загрязнение и неточные результаты испытаний. Например, пользователи должны следовать инструкциям производителя, а также государственным и местным руководствам в отношении того, когда и как часто проводить испытания контрольных образцов. Если тестирование на антиген дает несколько неожиданных положительных результатов, может быть целесообразно прекратить тестирование образцов пациентов, пересмотреть все процедуры, продезинфицировать все поверхности, сменить перчатки и запустить контрольные образцы перед возобновлением тестирования образцов пациентов.В таких обстоятельствах следует рассмотреть возможность проведения подтверждающего тестирования для людей, получивших неожиданные результаты, независимо от вероятности предварительного тестирования.

Регулярно очищайте рабочие поверхности и оборудование (ежедневно или по мере необходимости) с мылом или моющим средством. Если необходима регулярная дезинфекция, используйте одобренное EPA дезинфицирующее средство для SARS-CoV-2, следуя рекомендациям производителя по использованию, таким как разбавление, время контакта и безопасное обращение. См. Значок «Список дезинфицирующих средств от COVID-19» Агентства по охране окружающей среды.Перед сбором, обработкой и обработкой нового образца в системе тестирования антигена следует сменить перчатки. Отсутствие смены перчаток может увеличить риск перекрестного заражения и ложных результатов теста на антиген. См. Руководство CDC по тестированию в местах оказания медицинской помощи и Временное руководство по лабораторной биобезопасности при обращении с образцами, связанными с коронавирусным заболеванием, 2019 (COVID-19).

Некоторые тесты на антигены исследовали использование вирусной транспортной среды (VTM) во время сбора образцов, но использование VTM может привести к ложным результатам теста либо из-за перекрестной реактивности с захватывающими антителами, либо из-за разведения образца, которое снижает чувствительность теста. .Лаборатории и центры тестирования должны ссылаться на инструкции по применению и вкладыш в упаковку, относящиеся к используемому ими тесту, в отношении использования VTM.

См. Также значок «Письмо FDA сотрудникам клинических лабораторий и поставщикам медицинских услуг» о возможности получения ложноположительных результатов при тестах на антигены, а также руководство CDC по тестированию на месте.

Оценка результатов тестирования на антиген SARS-CoV-2

Оценка результатов теста на антиген SARS-CoV-2 зависит в первую очередь от клинического и эпидемиологического контекста человека, который прошел тестирование (например,g., симптомы, контакт с другими людьми с COVID-19, вакцинационный статус, предыдущий инфекционный статус или условия, в которых они живут). Дополнительные сведения о рекомендациях по тестированию см. В руководстве для полностью вакцинированных людей. Особенно важным аспектом эпидемиологического контекста является то, является ли проверяемый резидентом или сотрудником общежития. Кроме того, при оценке результатов теста на антиген на SARS-CoV-2 следует учитывать рабочие характеристики (например, чувствительность, специфичность) и инструкции по использованию теста, одобренного FDA, а также распространенность инфекции SARS-CoV-2. в этом конкретном сообществе (процент положительных результатов за предыдущие 7–10 дней или количество случаев в сообществе по отношению к размеру популяции).

При оценке результата теста на антиген следует учитывать, испытывал ли человек симптомы, и если да, то как долго. Как правило, медицинские работники могут полагаться на положительный результат теста на антиген у пациента с симптомами, потому что специфичность текущих тестов на антиген, утвержденных FDA, высока.

Чувствительность текущих разрешенных FDA тестов на антигены варьируется, поэтому отрицательные результаты диагностических тестов следует обрабатывать в зависимости от обстоятельств. В большинстве случаев в инструкциях производителей по использованию тестов на антигены указано, что отрицательные результаты тестов следует рассматривать как «предполагаемые», то есть они являются предварительными результатами.См. Значок FDA для диагностики in vitro EUAsexternal .

Может оказаться целесообразным подтвердить результаты теста на антиген с помощью лабораторного NAAT. Для подтверждающего тестирования CDC рекомендует использовать лабораторный NAAT, который был оценен по контрольной панели FDA на аналитическую чувствительность. См. Внешний значок сравнительных данных справочной панели FDA по SARS-CoV-2. NAAT, дающие предполагаемые результаты, не подходят для подтверждающего тестирования.

CDC разработала два общих алгоритма тестирования на антигены, чтобы учесть две широкие категории использования тестов на антигены.CDC рекомендует следовать одному из этих двух алгоритмов тестирования на антигены, чтобы определить, когда рекомендуется подтверждающее тестирование.

Первый алгоритм разработан для тех, кто живет в местах скопления людей, таких как учреждения длительного ухода, исправительные учреждения и места содержания под стражей, приюты для бездомных и другие приюты для групп. В этих условиях правильная идентификация случаев особенно важна из-за необходимости группировать изолированных людей вместе или в непосредственной близости, поэтому ложноположительные результаты теста могут иметь серьезные негативные последствия.См. Рис. 1, также доступный в виде значка PDFpdf. Этот алгоритм не предназначен для сотрудников коллективных жилых домов, которые при необходимости могут изолировать и изолировать за пределами учреждения.

Второй алгоритм разработан для тестирования сообщества среди людей, которые не живут в условиях скопления людей. Основная цель этого тестирования — снизить передачу SARS-CoV-2 в обществе, где есть опасения по поводу его распространения и широкого распространения, путем быстрого выявления и изоляции инфицированных людей.См. Рис. 2, также доступный в виде значка PDFpdf.

Быстрый анализ антигена SARS-CoV-2 в сравнении с анализом ОТ-ПЦР в реальном времени для лабораторной диагностики COVID-19 в Таиланде | Virology Journal

Молекулярные тесты — это стандартный лабораторный диагноз для подтверждения инфекции SARS-CoV-2; Анализы ОТ-ПЦР для обнаружения РНК SARS-CoV-2 в клинических образцах широко используются в диагностических лабораториях COVID-19. В Таиланде насчитывается 183 клинических лаборатории, включая нашу лабораторию в больнице Сирирадж, которые прошли внешний контроль качества тестов ОТ-ПЦР Департаментом медицинских наук (DMSC) Министерства здравоохранения и получили разрешение на диагностическую лабораторию COVID-19 [ 15, 16].Быстрые иммуноанализы на антигены с чувствительностью и специфичностью, эквивалентной ОТ-ПЦР в реальном времени, помогут ускорить скрининг болезней. В этом исследовании коммерчески доступный набор для быстрого обнаружения антигена SARS-CoV-2 (стандартный тест Q COVID-19 Ag) сравнивался с анализом RT-PCR (Allplex ™ 2019-nCoV Assay) для выявления инфекции SARS-CoV-2. .

Чувствительность и специфичность теста Standard Q COVID-19 Ag для быстрого обнаружения антигена SARS-CoV-2, о котором сообщил производитель (всего n = 202; положительные n = 32; отрицательные n = 170), составили 84.38% (95% ДИ, 67,21–94,72%) и 100,00% (95% ДИ, 97,85–100%) соответственно. Чувствительность этого теста оценивалась в исследовательском центре в Малайзии с использованием 32 RT-PCR-положительных мазков из носоглотки от пациентов с симптомами. Специфичность этого теста была оценена группой НИОКР SD Biosensor с использованием 170 ОТ-ПЦР-отрицательных образцов. Моноклональные антитела, специфичные к антигену SARS-CoV-2 N, покрытые тестом Standard Q COVID-19 Ag, были получены из штамма WUHAN-01, который генетически близок к штамму SARS-CoV-2, обнаруженному в Таиланде [17, 18 ].Наши результаты показали более высокую чувствительность (98,33% против 84,38%), но меньшую специфичность (98,73% против 100,00%), чем результаты производителя. Разница в производительности нашего теста от производителя может быть связана с различными факторами, включая партию реагентов набора, качество образца и уровень экстрагированного антигена, а также методы обработки и обработки образцов. Мы уменьшили вязкость образца с помощью стеклянных шариков и встряхивания перед добавлением буфера для экстракции. Крышка сопла фильтра, входящая в комплект, также сводила к минимуму клейкость образцов.Отрицательный результат теста может быть связан с более низким уровнем извлеченного антигена, чем предел обнаружения теста. Наша партия клинических образцов, как правило, может иметь более высокую вирусную нагрузку (низкое значение Ct), чем у испытательного центра производителя, что увеличивает вероятность обнаружения антигена в нашем исследовании.

Из 60 образцов с положительной реакцией на ОТ-ПЦР в нашем исследовании единственный ложноотрицательный результат был получен при анализе НП и мазка из горла пациентки с пневмонией, проверенной на антиген SARS-CoV-2 через семь дней после начала заболевания (ОТ-ПЦР- положительный случай нет.39). Результат ОТ-ПЦР этого образца имел относительно высокие значения Ct: 31,18 для гена E , 39,2 для гена RdRp и 35,54 для гена N , что может объяснить отрицательный результат Standard Q COVID-19. Ag-тест. Однако тест Standard Q COVID-19 Ag правильно обнаружил антиген SARS-CoV-2 от другой пациентки, у которой также были относительно высокие значения Ct: 33,49 для гена E , 36,94 для гена RdRp и 37,17 для N ген (ОТ-ПЦР-положительный случай №23). У этого пациента была диагностирована инфекция верхних дыхательных путей (URI), и его обследовали через четыре дня после появления симптомов [см. Дополнительный файл 1]. Вирусная нагрузка SARS-CoV-2 в образцах из верхних дыхательных путей была обнаружена на более высоком уровне вскоре после появления симптомов [19]; таким образом, можно предположить более высокую вероятность обнаружения положительного антигена на ранней стадии. Этот набор для обнаружения антигена SARS-CoV-2 может быть рекомендован пациентам на ранней стадии после появления симптомов, когда ожидается более высокая вирусная нагрузка.Как упоминалось выше, некоторые другие факторы, такие как клинические проявления, продолжительность от начала заболевания до лабораторного исследования, тип образцов и способ сбора и обработки образцов (обработка образцов и методы обработки) потенциально влияют на интерпретацию результатов. Из 394 ОТ-ПЦР-отрицательных образцов из дооперационных случаев, пять мазков из горла и НП были положительными на антиген SARS-CoV-2 с использованием теста Standard Q COVID-19 Ag. Хотя неясно, что вызвало противоречивый результат, мы наблюдали, что толстая и очень вязкая слизистая имеет тенденцию давать ложноположительные результаты при тестировании с помощью набора для обнаружения антигена.Для пациентов с отрицательным обнаружением SARS-CoV-2 с помощью ОТ-ПЦР клинические данные (такие как основные заболевания или инфекция другими патогенами) не были включены в исследование. Следовательно, нельзя исключить возможность перекрестной реактивности с другими антигенами.

Наши результаты показали более высокую чувствительность экспресс-теста на антиген SARS-CoV-2 (98,33% по стандартному Q-тесту COVID-19 Ag), чем другие быстрые тесты на антиген, о которых сообщалось ранее. Предыдущие исследования сообщили о чувствительности 93,9% (95% ДИ, 86,5–97.4%) с помощью флуоресцентного иммунохроматографического анализа для теста 2019-nCoV Ag (Bioeasy Biotechnology Co., Шэньчжэнь, Китай), 50,0% с помощью COVID-19 Ag Respi-Strip CORIS® и 11,1–45,7% с помощью BIOCREDIT COVID-19 Ag (BioVendor Исследования и диагностические продукты) [10,11,12]. Положительные и отрицательные прогностические значения (PPV и NPV) анализа невозможно было бы точно рассчитать без нынешней распространенности COVID-19 в популяции. Тем не менее, было пять ложноположительных образцов, проверенных тестом Standard Q COVID-19 Ag.Мы можем оценить, что в регионе с низкой распространенностью COVID-19 PPV для этого теста низок. Гипотетически, при 10% -ном уровне распространенности COVID-19 PPV по сравнению с NPV в тесте Standard Q COVID-19 Ag будет 89,59% (95% ДИ, 78,27–95,37%) по сравнению с 99,81% (95% ДИ, 98,71–99,97). %). В то время как при уровне распространенности COVID-19 1%, PPV по сравнению с NPV стандартного Q-теста COVID-19 Ag составит 43,91% (95% ДИ, 24,66–65,17%) по сравнению с 99,98% (95% ДИ, 99,88–100,00%). ). Таким образом, стандартный тест Q COVID-19 Ag может быть полезен в регионах с высокой распространенностью.

Преимущество теста Standard Q COVID-19 Ag в качестве скрининга на COVID-19 заключается в его простой процедуре и быстрых результатах с высоким NPV, но его недостатком является низкий PPV в зоне с низкой распространенностью. Таким образом, тест на нуклеиновую кислоту (NAT) для обнаружения гена SARS-CoV-2, который более чувствителен и специфичен, чем этот иммуноферментный анализ с боковым потоком, по-прежнему является стандартным тестом для диагностики COVID-19. Даже с учетом своих ограничений, экспресс-тест на антиген SARS-CoV-2 может принести пользу всем медицинским работникам в плане эффективного своевременного лечения инфицированных людей, особенно в сельских районах и в районах вспышек.Поэтому перед его внедрением следует провести проспективное исследование экспресс-теста на антиген SARS-CoV-2 в этих областях.

Чему тестирование на коронавирус может научить вас о диагностике Ag

Вирус COVID-19 обрушился на сообщества по всему миру с беспрецедентными проблемами и трагедиями. Миллионы людей заболели, пострадали и / или умерли. Невообразимое количество людей потеряли доход, работу и поддержку. Будущее систем образования, бизнеса и медицины остается неопределенным.Все эти последствия от нового вирусного патогена — новый опыт для нашего поколения, которое стремится выжить в этой пандемии.

Предыдущий Начать слайд-шоу Следующий
  • Увеличение изображения

    Специальные тесты на основе ДНК позволяют идентифицировать новую агрессивную расу возбудителя сельдерея Fusarium.
    Фото любезно предоставлено Стивеном Т. Койке

  • Увеличение изображения

    Небольшие кусочки пораженной ткани удаляются и помещаются в агаровую среду, чтобы можно было обнаружить патогены растений.
    Фото любезно предоставлено Стивеном Т. Койке

  • Увеличение изображения

    Используя микробиологические среды, можно выделить и идентифицировать такие патогены, как Armillaria.
    Фото любезно предоставлено Стивеном Т. Койке

  • Увеличение изображения

    Серологические методы позволяют обнаруживать белки многих патогенов растений.
    Фото любезно предоставлено Стивеном Т. Койке

  • Увеличение изображения

    Инкубация пораженной ткани может вызвать появление и идентификацию скрытого патогена, например, рост Botrytis на позвоночнике винограда.
    Фото любезно предоставлено Стивеном Т. Койке

  • Увеличение изображения

    Исследование под микроскопом позволяет обнаружить патогены, такие как гриб черной корневой гнили, поражающий многие овощные культуры.
    Фото любезно предоставлено Стивеном Т. Койке

1 из 6

2 из 6

3 из 6

4 из 6

5 из 6

6 из 6

Однако один аспект этой пандемии COVID-19 для нас не нов.COVID-19 напоминает нам о том, что мы уже знали: тестирование на патогены чрезвычайно важно для здоровья и благополучия человека.

Фактически, дискуссии и дебаты относительно тестирования COVID-19 могут служить ориентиром для динамики тестирования, связанной с диагностикой болезней растений и управлением ими в сельском хозяйстве.

Подтверждение болезни основано на тестировании

Это редкий пример практически всеобщего консенсуса: люди понимают, что тестирование абсолютно необходимо для подтверждения наличия COVID-19.Если тест не проводится, то нет никакого возможного подтверждения того, что заражение COVID-19 имело место. Симптомы могут присутствовать или отсутствовать, легкие или тяжелые, но если нет теста, остаются только предположения.

Как правило, подтверждение наличия патогенного микроорганизма в культуре также зависит от тестирования. Как и COVID-19, патогены, поражающие растения, не видны невооруженным глазом. Микроскопические грибы, бактерии, нематоды и субмикроскопические вирусы должны быть подтверждены соответствующими тестами.Опытные производители и другой полевой персонал могут иметь очень образованное, опытное представление о возможном присутствии и роли патогена; тем не менее, диагностика болезни урожая без проведения теста остается в некоторой степени предположением.

Не следует переоценивать эту зависимость от тестирования, поскольку есть исключения из этого правила подтверждения-требования-тестирования. Как известно полевым специалистам, настоящая мучнистая роса на овощных и фруктовых культурах приводит к очень заметному развитию мицелия и роста спор на поверхности растений.Вы можете легко распознать такие признаки без формального лабораторного теста. Большинство возбудителей ржавчины сельскохозяйственных культур приводят к появлению на листве растений характерных грибковых пустул от оранжевого до коричневого цвета. Вы можете диагностировать болезнь ржавчины на большинстве культур без клинических испытаний, хотя определение точного вида ржавчины снова требует лабораторной работы.

Разнообразие патогенов: на что тестировать?

Несмотря на то, что в эту эпоху COVID-19 требуется мало споров, тестирование необходимо, но то, что именно тестировать, — это немного сложнее.

Во всем мире вирус COVID-19 существует в виде нескольких различных мутировавших штаммов. Из-за существования штаммов вирусов медицинские диагносты и исследователи должны тщательно проводить исследования, чтобы убедиться, что диагностические тесты COVID-19 реагируют на все известные варианты.

Эта пандемия первоначально началась в Китае со штаммом L вируса. Чиновники здравоохранения вскоре обнаружили штамм S, первый обнаруженный мутировавший вариант COVID-19. Попутно обнаружился штамм V. В настоящее время штамм G и его разновидности штаммы GR и GH в основном поражают мир.

Медицинские исследователи должны убедиться, что диагностические тесты COVID-19 реагируют на все известные штаммы. В противном случае они рискуют получить ложноотрицательные результаты, если один или два штамма останутся незамеченными.

Еще одна сложность? Помимо нынешних опасений по поводу пандемии, COVID-19 — далеко не единственный респираторный патоген, который беспокоит нас. Некоторые симптомы COVID-19 могут имитировать любое из множества вирусных заболеваний простуды и гриппа, что усложняет диагностику.

Болезни сельскохозяйственных культур также требуют широкого тестирования

Что мы проверяем в сельскохозяйственном мире? Широкий спектр патогенов, которые могут вызывать похожие симптомы, затрудняет диагностику болезней растений.Любой из нескольких грибковых, бактериальных или вирусных агентов может вызвать определенные проблемы с листвой, цветами или фруктами.

Различные грибковые или нематодные захватчики могут повредить корни и сосудистую систему, что приведет к наложению симптомов. Следовательно, сельскохозяйственный диагност часто должен отсортировать симптомы и составить короткий список возможных причинных факторов.

Ради тщательности специалисты по сельскому хозяйству часто проводят несколько тестов, чтобы ничего не пропустить.

Например, они могут проверить образец пятен на листьях на наличие грибкового агента, а также на наличие двух различных бактериальных агентов.Они будут подвергать искаженные, деформированные листья или цветы нескольким различным вирусным тестам, чтобы убедиться, что они не пропустили причинный вирус. Другой пример? Они могут проверять больные корни на наличие переносимого через почву патогена грибка, а также проверять на паразитических почвенных нематод с помощью процесса экстракции.

Параллельно с человеческими патогенами, которые встречаются в виде различных штаммов, патогены растений также могут существовать в формах различных видов, штаммов, рас, патотипов и других разновидностей микробной тематики.

Стратегии тестирования иногда необходимо учитывать такое разнообразие. Бактерия Xanthomonas вызывает бактериальную пятнистую болезнь перца и томата. Исследователи документально подтвердили, что этот патоген довольно разнообразен и состоит из четырех видов, каждый из которых выглядит идентично в культуральных пластинах. Некоторые из этих изолятов Xanthomonas заражают только перец, некоторые — только томаты, а другие могут вызывать заболевание на обеих культурах. Дифференциация между различными видами требует определенных тестов и анализов.

Почвенный патоген Fusarium oxysporum вызывает фузариозную желтизну сельдерея. В последние годы новая агрессивная раса 4 этого патогена сельдерея вызывает серьезные заболевания этой культуры. Производители сельдерея не могут точно знать, есть ли у них проблема четвертой расы, без специального молекулярного теста, который используется на симптоматической растительной ткани.

Сложная механика тестирования: как это сделать?

Тема тестирования COVID-19 напомнила нам о сложном и сложном мире тестирования на патогены.Наши медицинские эксперты и исследователи должны ответить на три основных вопроса.

  1. Какой тип теста использовать? Методы ОТ-ПЦР могут точно определять нуклеиновую кислоту вируса, но дают результаты медленнее. Кроме того, спрос на ОТ-ПЦР в больших объемах может превысить доступность. Еще один, возможно, более быстрый вариант — тесты на антигены. Но они менее чувствительны и могут привести к большему количеству ложноотрицательных результатов.
    Исследователи изучают тесты на антитела для анализов крови, но пока обнаруживают противоречивые результаты.
  2. Как собрать подходящие образцы? Если медицинский персонал не соберет образец надлежащим образом, это может сделать даже самый лучший тест на COVID-19 ненадежным. Если они не введут ужасный мазок из носоглотки достаточно глубоко, они могут пропустить вирус.
  3. Когда тестировать людей? Вирус COVID-19 должен присутствовать в организме человека в достаточном количестве, чтобы его можно было обнаружить. Исследователи обнаружили, что у недавно инфицированного человека, у которого еще не проявляются симптомы, высока вероятность того, что тест на COVID-19 будет отрицательным.Однако, если этот человек проходит тестирование примерно на пятый день (когда симптомы могут начать проявляться) после первого заражения, процентная вероятность ложноотрицательного теста значительно снижается. Эти данные показывают нам, что время является важным аспектом тестирования COVID-19.

При тестировании на патогены растений возникают те же три вопроса:

1. Какой тип теста?

У сельскохозяйственных диагностов есть выбор из различных методов тестирования. Поиск жизнеспособных культивируемых микроорганизмов обычно проводится путем помещения продезинфицированных кусочков ткани с симптомами на одну или несколько микробиологических сред на основе агара.Патологи растений также имеют доступ к молекулярным (например, ПЦР) и серологическим (ИФА) инструментам для поиска ДНК / РНК и белковых антител соответственно. Методы инкубации, при которых ткани растений с симптомами хранятся в теплой и влажной камере, могут позволить патогену вырасти и стать видимым для исследования. Исследование пораженных тканей растений или грибковых культур на чашках Петри под микроскопом является ключевым этапом в процессе тестирования.

2. Как собрать подходящие образцы?

Сбор образцов растений для анализа — непростой процесс.Как и отбор образцов COVID-19, образец растения, который не собран должным образом, может привести к отрицательным результатам и ложным диагнозам.

Распространенная ошибка возникает, когда сборщик не подает нужную часть симптоматического растения. У больного растения могут быть признаки заболевания листвы из-за пожелтевших или испорченных листьев и побегов. Полевой инспектор может обрезать эти побеги и отправить их на тестирование.

Однако в некоторых случаях патоген, вызывающий корень или крону, может препятствовать попаданию достаточного количества воды и питательных веществ в верхний полог растения, что приводит к пожелтению и появлению болезней; отказ выкопать и отправить все растение, включая корни, приведет к ошибочному диагнозу.

Напротив, некоторые полевые работники могут выкопать корневую систему для тестирования, а затем срубить листву для облегчения транспортировки или транспортировки. Лаборатория-получатель действительно может обнаружить корневой патоген, но не сможет проверить листья на наличие вируса, который также может влиять на рост сельскохозяйственных культур.

3. Когда проводить испытания культур?

Этот вопрос может быть немного проще ответить по сравнению с тестированием на COVID-19. Как правило, появление симптомов болезни — это подходящее время для фермеров и полевого персонала для сбора и отправки образцов растений для тестирования.

Однако можно откладывать и ждать слишком долго. Растения, находящиеся на поздних стадиях развития болезни, начнут разрушаться и разлагаться от патогена, а также от организмов вторичной гнили, которые не являются настоящими патогенами. Тестирование передовых, разложившихся образцов может привести только к извлечению этих вторичных агентов.

Эти проблемы относятся к тестированию старого материала. А как насчет другого конца спектра — материала, который еще не проявляет никаких симптомов?

Министерство сельского хозяйства США и университетские исследователи проводят интересный исследовательский проект по ложной мучнистой росе шпината.Используя молекулярные методы, эта команда пытается обнаружить возбудителя ложной мучнистой росы в листьях, которые еще не проявляют симптомов. Раннее, предсимптоматическое обнаружение может позволить производителям собрать урожай раньше и снизить потери.

Движение вперед с тестированием

В эпоху COVID-19 методы тестирования и внедрения будут продвигаться вперед. Мы увидим, как будут разработаны улучшенные методы. Возможности тестирования увеличатся. Медицинские исследователи научат нас оптимальным способам развертывания тестов, как собрать лучшие образцы и когда их собирать.Мы надеемся, что сельскохозяйственные диагносты будут также продвигать науку и практику тестирования и диагностики патогенов растений. Фактически, зачастую именно медицина делает новые и улучшенные достижения, а за ними следует сельскохозяйственная промышленность. Затем отрасль принимает и адаптирует такие достижения, чтобы помочь тем, кто производит нашу пищу и клетчатку.

10 10 5 Чему тестирование на коронавирус может научить вас диагностике Ag

Стивен Т. Койк — директор компании TriCal Diagnostics, расположенной в Холлистере, Калифорния.Посмотреть все рассказы авторов можно здесь.

Оценка эффективности автоматического теста SARS-CoV-2 Ag для диагностики инфекции COVID-19 на мазках из носоглотки

Цели

Выявление SARS-CoV-2 у инфицированных людей является ключевым инструментом в борьбе с COVID- 19 пандемия. Подобно быстрым антигенным тестам, могут быть интересны автоматизированные тесты на антигены, которые обладают преимуществом более высокой пропускной способности. Тест LIAISON ® SARS-CoV-2 Ag был оценен для количественной оценки нуклеокапсидного антигена SARS-CoV-2 в мазках из носоглотки по сравнению с RT-PCR.

Методы

В исследовании участвовало 378 образцов из носоглотки (UTM ® и FLOQSwab ™, Copan Diagnostics), в том числе 46 мазков, положительных на SARS-CoV-2 с помощью ОТ-ПЦР. Эти образцы были получены от бессимптомных (n = 99, 26,2%) людей или людей с симптомами (n = 279, 73,8%) в разное время с момента появления симптомов. Образцы анализировали на LIAISON ® XL.

Результаты

Общая специфичность составила 99,4% (ДИ 95% [98,6–100]). Отрицательная прогностическая ценность достигает 100% у бессимптомных людей.Среди 46 положительных образцов общая чувствительность составила 84,8% (ДИ 95% [74,4–95,2]), достигала 91,9% (ДИ 95% [83,1–100]) в первые четвертые дни после появления симптомов и составляла 100% для значений Cq ≤ 25. Антиген не обнаружен в образцах со значениями Cq> 25. Аналогичные результаты наблюдались на мазках из носоглотки, взятых от пациентов, инфицированных вариантом 20I / 501Y.V1 или вариантом 20H / 501Y.V2.

Выводы

Согласно техническим характеристикам, тест LIAISON ® SARS-CoV-2 Ag может быть полезным инструментом для диагностики COVID-19, особенно в течение первых четырех дней появления симптомов.

Введение

В декабре 2019 года в китайском Ухане появился новый коронавирус (тяжелый острый респираторный синдром, коронавирус 2 — SARS-CoV-2) [1]. Этот новый патоген, ответственный за COVID-19, быстро распространился по всему миру и привел к пандемии, которую еще трудно контролировать через год. В марте 2021 года на балансе находится до 135 миллионов инфицированных людей во всем мире и 3 миллиона смертей [2]. Борьба с пандемией включает массовый скрининг с целью изолировать инфицированных людей и разорвать цепь заражения.

Золотым стандартом вирусологического подтверждения COVID-19 является ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР), проводимая на мазке из носоглотки или нижних дыхательных путях в случае тяжелых симптомов. Однако диагностика с помощью ОТ-ПЦР относительно медленная (3-4 часа) и требует наличия квалифицированных специалистов. Для оптимизации массового скрининга была предложена стратегия объединения в сочетании с ОТ-ПЦР [3], но с риском снижения чувствительности.

Чтобы увеличить возможности скрининга, тесты на антиген (Ag) были предложены в качестве дополнения к панели методов, используемых для диагностики COVID-19.Они состоят из прямых тестов, позволяющих обнаруживать вирусные белки (в основном белки капсида). Среди них диагностические тесты, основанные на методах иммунохроматографии, быстрые (15–20 мин) и могут выполняться вне биологических лабораторий. Тем не менее, как унитарные тесты, они непригодны для массового просмотра. Кроме того, хорошо описанная недостаточная чувствительность единичных тестов на антиген может привести к ложноотрицательным результатам, что может поставить под угрозу стратегию массового скрининга.

Таким образом, полезной альтернативой является использование чувствительных автоматизированных тестов на антигены.Даже если время анализа больше по сравнению с иммунохроматографическими тестами (например, 45 минут), они требуют небольшого количества персонала и позволяют проводить серийный анализ. Здесь мы оцениваем недавно разработанный автоматический тест (LIAISON ® SARS-CoV-2 Ag) на основе иммуноферментного анализа хемилюминесценции (CLEIA), используемый для количественного определения антигена SARS-CoV-2 в мазке из носоглотки. Чтобы оценить специфичность и чувствительность теста, результаты по уровню антигена сравнивали с золотым стандартом количественной ОТ-ПЦР.

Материалы и методы

Пациенты и образцы

В исследование было включено 378 мазков из носоглотки от того же числа пациентов, собранных в рамках массового скрининга в Университетской больнице Нанси, Франция (DC-2020-4006 Covi-Lor collection ). Все образцы были получены с использованием FLOQSwabs ™ и вирусной транспортной среды (2 мл) в UTM ® (Copan Diagnostics, CA, США).

ОТ-ПЦР использовалась в качестве золотого стандарта для определения, были ли люди инфицированы или нет.Таким образом, когорта состояла из 46 пациентов, инфицированных SARS-CoV-2, и 332 неинфицированных. Среди них 99 были бессимптомными (26,2%), 221 имели симптомы (например, лихорадка, кашель, головная боль, астения, аносмия или агевзия) в течение менее 4 дней (58,5%), 30 — между 5 и 7 днями (7,9%) и 15 более 8 дней (4,0%) (таблица 1).

Таблица 1:

Описание характеристик образца.

33 9042 9042 9042 Нет 9042 9042 904 9028
Всего = 378 n %
RT-PCR SARS-CoV-2
7
Отрицательный 332 87,83
Медицинский работник
Да 205 54,23
14 3,70
Время от появления симптомов
День 1 или за день до 17 4.50
2–4 дня 204 53,97
5–7 дней 30 7,94
8–14 дней 12 3,14 дней 3 0,79
Бессимптомное течение 99 26,19
Неизвестно 13 3,44

Обнаружение вируса SARS-CoV2 9 acidha n с использованием набора для экстракции вирусной ДНК / РНК (ref 100021043, MGI Tech Co.Ltd, Шэньчжэнь, Китай) на устройстве MGISP-960, следуя рекомендациям производителя (200 мкл образца экстрагируют до 30 мкл буфера для элюции). Затем была проведена одноэтапная ОТ-кПЦР в соответствии с протоколом, разработанным Институтом Пастера для поиска двух мишеней, областей IP2 и IP4 гена

RdRp [4]. Ген человека GAPDH также использовался в качестве внутреннего контроля, связанного с присутствием эпителиальных клеток. Анализы повторяли в случае несовпадения результатов (значения Cq) между целевыми значениями IP2 и IP4.

Обнаружение нуклеокапсидного антигена SARS-CoV-2

Обнаружение антигена SARS-CoV-2 проводили с использованием анализа LIAISON ® SARS-CoV-2 Ag. В соответствии с рекомендациями поставщика и после кратковременного встряхивания 1 мл транспортной среды носоглоточного мазка собирали менее чем через 12 часов после отбора пробы, добавляли в пробирку с буфером для инактивации объемом 1 мл, предоставленную производителем, и хранили при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем образцы хранили при 4 ° C (максимум 5 дней) или при -20 ° C до анализа.Пробирки с буфером для инактивации центрифугировали (400 × g, , 10 мин) перед анализом на платформе LIAISON ® XL.

Анализ LIAISON ® SARS-CoV-2 Ag представляет собой прямой двухэтапный иммуноферментный хемилюминесцентный иммуноферментный анализ (CLEIA). Специфические кроличьи поликлональные антитела к нуклеокапсидному антигену SARS-CoV-2 используются для покрытия магнитных частиц (твердая фаза) и связаны с производным изолюминола (конъюгат изолюминолантитело). Во время первой инкубации вирусный антиген SARS-CoV-2, присутствующий в образцах, связывается с конъюгатом.Во время второй инкубации твердая фаза реагирует с вирусным антигеном SARS-CoV-2, уже связанным с конъюгатом. После второй инкубации несвязанный материал удаляется с помощью цикла промывки. Затем добавляются стартовые реагенты и, таким образом, индуцируется мгновенная реакция хемилюминесценции.

В данных анализа, проведенных производителем, указан предел обнаружения 22,0 TCID 50 / мл, чувствительность 98,6% (ДИ 95% [92,5–99,7]) для образцов, положительных на ОТ-ПЦР в течение 10 дней с появлением симптомов. , и специфичность 99.5% (ДИ 95% [97,4–99,9]). Внутрилабораторная и межлабораторная точность составляла 2,7, 1,7, 2,0, 1,4, 1,2% для низкого, среднего и высокого уровней антигена соответственно.

Статистический анализ

Статистический анализ выполняли с использованием Prism 5 (GraphPad Software, Калифорния, США) и программы Excel (Microsoft Corp., Вашингтон, США). Анализ кривой рабочих характеристик приемника (ROC) был выполнен с использованием Prism 5 (GraphPad Software, Калифорния, США) для определения оптимального порогового уровня антигена, позволяющего отличить статус инфекции SARS-CoV-2.Кривая ROC была построена путем построения графика отношения истинно положительных результатов (чувствительности) к количеству ложных положительных результатов (1 — специфичность) при различных настройках пороговых значений.

Непараметрический тест Краскела-Уоллиса использовался для сравнения SARS-CoV-2 Ag и уровней генома. Для оценки уровней генома значения цикла количественной оценки, полученные с помощью RT-qPCR (Cq), были преобразованы в единицы ПЦР, с учетом того, что значение Cq, равное 38, соответствует 1 единице ПЦР (то есть пределу обнаружения) следующим образом: Cq значение 38 = 1 Единица ПЦР, значение Cq 37 = 2 единицы ПЦР, значение Cq 36 = 4 единицы ПЦР и т. Д.

Результаты

Чувствительность и специфичность автоматизированного теста на антиген LIAISON

® SARS-CoV-2

Определение Ag SARS-CoV-2 было выполнено на 378 мазках из носоглотки, включая 46 положительных образцов, определенных с помощью RT-qPCR (средний Cq значение: 19,4 ± 4,8; медиана 18,8; IQR = 4,4) и 332 отрицательных образца. Аналитические характеристики на месте оценивались на положительном контроле и соответствовали данным поставщика (вариабельность внутри анализа: CV = 9,90 против 10,1%)

Среди 46 положительных образцов 39 были положительными на обнаружение SARS-CoV-2 Ag в соответствии с к правилам интерпретации производителя (т.е. отсечка 200 TCID 50 / мл), что означает общую чувствительность 84,8% (ДИ 95% [74,4–95,2]). Среди семи ложноотрицательных образцов один расположен в серой зоне 100–200 TCID 50 / мл, определенной производителем (161,9 TCID 50 / мл), а три близки (95,9, 94,1 и 88,8 TCID 50). / мл). Из 332 отрицательных образцов 330 были отрицательными на обнаружение антигена SARS-CoV-2, что означает общую специфичность 99,4% (ДИ 95% [98,6–100]).

Положительное прогнозное значение достигло 95.1%, а отрицательная прогностическая ценность достигла 97,9%. Принимая во внимание распространенность вируса, обычно наблюдаемую в разное время эпидемии (т. Е. 2% в качестве базовой скорости, 5% в среднем и 15% во время пика эпидемии), прогностическая ценность положительного результата достигает 74,2, 88,1 и 96,1% соответственно, а отрицательная. прогнозная ценность остается выше 97%.

Средний уровень SARS-CoV-2 Ag среди 46 положительных образцов RT-qPCR составлял 6433,2 TCID 50 / мл (диапазон от <22 до> 100000 TCID 50 / мл), а уровень RT-qPCR отрицательный. образцов было 26.7 TCID 50 / мл (диапазон от <22 до 341,5 TCID 50 / мл) (рисунок 1A). Средний уровень антигена в ПЦР-положительных образцах был значительно выше, чем в ПЦР-отрицательных образцах (p <0,001, t-критерий Стьюдента). Анализ кривой ROC был проведен для определения оптимального порогового уровня антигена, позволяющего отличить статус инфекции SARS-CoV-2. Точность теста была наивысшей при использовании порогового значения 57 TCID 50 / мл, что привело к чувствительности 95,8% (CI95% [93.0–97,7]) и специфичность 95,2% (ДИ 95% [85,2–99,5]) (рис. 1B).

Рисунок 1:

Сравнение результатов обнаружения антигена SARS-CoV-2 (Ag) и результатов RT-qPCR.

(A) Все данные: всего 378 мазков из носоглотки, включая 46 положительных образцов и 332 отрицательных образца, определенных методом RT-qPCR. (B) Анализ кривой рабочих характеристик приемника (ROC). При обнаружении Ag-теста площадь под кривой составила 0,970 ± 0,020. Точность теста была максимальной при использовании порогового значения 57 TCID 50 / мл.(C) Симптомы ≤4 дней: всего 221 мазок из носоглотки, включая 37 положительных образцов и 184 отрицательных образца, определенных методом RT-qPCR. (D) Анализ кривой рабочих характеристик приемника (ROC). При обнаружении Ag-теста площадь под кривой составила 0,998 ± 0,001. Точность теста была наивысшей при использовании порогового значения 82 TCID 50 / мл.

Обнаружение антигена и время появления симптомов

Образцы были классифицированы в соответствии со временем между взятием образцов и днем ​​появления симптома (таблица 1).Образцы собирали накануне или в первый день появления симптомов (n = 17; 4,5%), на 2–4 дни (n = 204; 53,97%), на 5–7 дни (n = 30; 7,94%), на 8–14-й (n = 12; 3,17%) и на 15–28-й дни (n = 3; 0,8%) после появления симптомов. Информация отсутствовала для 13 образцов, а 99 образцов были собраны у бессимптомных добровольцев.

В первые четыре дня (от D-1 до D + 4) чувствительность обнаружения SARS-CoV-2 Ag достигла 91,9% (CI95% [83,1–100,0]) при среднем уровне 11 040.0 TCID 50 / мл для положительных образцов RT-qPCR (диапазон от 58,2 до> 100000 TCID 50 / мл) (рисунок 1C). Точность теста была наивысшей при использовании порогового значения 82 TCID 50 / мл, повышая чувствительность до 98,4% (ДИ 95% [95,3–99,7]) для специфичности 97,3% (ДИ 95% [85,8–99,9]. ]) (Рис. 1D). Затем чувствительность снизилась при рассмотрении образцов от D-1 до D + 7 до 89,7% (CI95% [80,2–99,3]) и до 85,4% (CI95% [74,6–96,2]) при анализе образцов от D-1 до D. +14.Что касается бессимптомных пациентов, отрицательная прогностическая ценность обнаружения SARS-CoV-2 Ag достигла 100%, поскольку ни один образец не оказался положительным.

Сравнение результатов теста на антиген и RT-qPCR

Чувствительность оценивали в соответствии со значением Cq, полученным при нацеливании на область IP4 с помощью RT-qPCR. Чувствительность обнаружения SARS-CoV-2 Ag составила 100% при рассмотрении образцов с Cq <25 (n = 39). Средний уровень SARS-CoV-2 Ag составил 6 689,3 TCID 50 / мл (диапазон 366.От 6 до> 100000 TCID 50 / мл).

Семь образцов со значениями Cq выше 25 оказались отрицательными при обнаружении SARS-CoV-2 Ag. Для них отбор образцов проводился через 2–4 дня после заражения (n = 3), через 5–7 дней после заражения (n = 1) или после 8-го дня (n = 3) (Таблица 2).

Таблица 2: Обнаружение

антигена в соответствии со значениями Cq RT-qPCR (SD = стандартное отклонение).

Обнаружение антигена SARS-CoV-2
Диапазон значений Cq n Положительный Отрицательная чувствительность 904 SD
<18 21 21 0 100.1% 3 1 2 33,3% 95,1% 358,95 406,29
26–30 5 0 5 8% 59,31 35,43

Не наблюдалось корреляции между уровнем Ag SARS-CoV-2 и вирусной нагрузкой, оцененной с помощью ПЦР (r 2 = 0,068 при рассмотрении всех положительных образцов, r 2 = 0,405 при рассмотрении значений Cq выше 15, данные не показаны). Однако для обоих параметров уровни были значительно выше для положительных образцов, собранных в течение первых 4 дней после появления симптомов (рис. 2, таблица 3). Следовательно, даже при отсутствии строгой корреляции более высокие уровни антигена связаны с более высокими количествами генома (p <10 -6 , таблица 2).

Рисунок 2:

Чувствительность обнаружения антигена SARS-CoV-2 в зависимости от времени отбора проб.

Черные кружки представляют совокупную чувствительность.

Таблица 3:

Тест Краскела-Уоллиса с множественным сравнением Данна post hoc для сравнения SARS-CoV-2 Ag и уровней генома (выраженных в единицах ПЦР) в зависимости от времени от появления симптомов.

Дни после появления симптомов Разница в сумме рангов Значимость (p <0.05)
Уровни антигена D1 (n = 3) против D2 – D4 (n = 34) 8.206 Нет
D1 (n = 3) vs.> D5 (n = 5) 25,17 Да
D2 – D4 (n = 34) по сравнению с> D5 (n = 5) 16,96 Да
Установки PCR D1 (n = 3) по сравнению с D2 – D4 (n = 34) 4,667 Нет
D1 (n = 3) по сравнению с> D5 (n = 5) 21,33 Да
D2 – D4 (n = 34) vs.> D5 (n = 5) 16,67 Да

Обнаружение вариантов SARS-CoV-2

Супернатант клеточной культуры клеток VERO-E6, инфицированных исходным штаммом SARS-CoV-2 (выделен в марте 2020 во Франции и подтверждено полногеномным секвенированием, n = 2), вариант 20I / 501Y.V1 «UK», линия B1.1.7 (n = 1) [5], вариант 20H / 501Y.V2 «южноафриканский» , линия B1.351 (n = 2) [6] и линия 19B / 501Y, линия A.27 (n = 1) были протестированы. Антиген SARS-CoV-2 был обнаружен во всех образцах.

Кроме того, были протестированы мазки из носоглотки, полученные от пациентов, инфицированных вариантом 20I / 501Y.V1 (n = 14) или вариантом 20H / 501Y.V2 (n = 4). Опять же, все образцы со значением Cq <25 (n = 17/18) были положительными на обнаружение SARS-CoV-2 Ag.

Обсуждение

С момента появления нового коронавируса, SARS-CoV-2, тестирование инфицированных людей является ключевым моментом в борьбе с пандемией. ОТ-ПЦР на образце из носоглотки по-прежнему является золотым стандартом, учитывая чувствительность и специфичность.Однако были предложены другие стратегии, основанные на анализе образцов другого типа (например, слюна, которую легче взять, мазок из носа самостоятельно [7]), или использование других методов обнаружения, таких как антигенные тесты. С тестами на антигены в глобальном масштабе проще работать, и для этого не требуются квалифицированные лаборанты или специальные устройства. Это почти верно для большинства тестов на антигены, то есть унитарных быстрых прямых тестов, которые недавно обсуждались Международной федерацией клинической химии и лабораторной медицины (IFCC).Преимущества внедрения включают быстрое время выполнения работ, потенциально дешевое оборудование и превентивную идентификацию случаев [8]. Однако первые исследования показали, что экспресс-тест на антигены может быть в 10 2 –10 5 раз менее чувствительным, чем ОТ-ПЦР [9, 10], с чувствительностью, близкой к 58,1%, при сосредоточении внимания на бессимптомных пациентах [8]. В настоящее время также доступны автоматизированные тесты на антигены. Они должны выполняться в специализированной лаборатории, но привлекательны своей быстротой (более 100 образцов / час), низкой стоимостью и простотой использования [11].Таким образом, они заслуживают того, чтобы их также оценили по сравнению с ОТ-ПЦР, методом золотого стандарта.

Оценка теста LIAISON ® SARS-CoV-2 Ag была проведена на 378 мазках из носоглотки, взятых у бессимптомных и симптоматических пациентов в разное время с момента появления симптомов. Они были классифицированы как положительные на инфекцию SARS-CoV-2 на основании результатов ОТ-ПЦР [4].

Общая специфичность оцениваемого здесь метода составила 99,4% (ДИ 95% [98.6–100]) у симптомных и бессимптомных пациентов. У двух пациентов с положительным результатом SARS-Cov-2 Ag, но отрицательных в отношении ОТ-ПЦР, о которых здесь сообщается, симптомы проявились в течение 2–4 дней перед взятием образцов. Образцы из носоглотки были повторно протестированы с использованием другого молекулярного метода (Xpress SARS-CoV-2, GeneXPert ® , Cepheid), который подтвердил первый отрицательный результат ОТ-ПЦР. Такие неспецифические реакции наблюдаются пунктуально и заложены в используемой иммунологической методике [12]. Другие антигенные методы, либо быстрые тесты на антигены, либо автоматические методы, были ранее оценены.Специфичность автоматизированных антигенных методов обычно достигала 96–100% по прибору [11, 13]. Специфичность экспресс-тестов на антигены приближается к 98–99% [14, 15].

Согласно информации поставщика, порог для различения положительного образца установлен на 200 TCID 50 / мл, с серой зоной в диапазоне от 100 до 200 TCID 50 / мл. Анализ ROC показал, что точность теста была наивысшей, когда использовалось пороговое значение 57 TCID 50 / мл при рассмотрении всех образцов или пороговое значение 82 TCID 50 / мл при рассмотрении раннего отбора образцов после появления симптомов (≤ 4 дня).

Недавно еще один автоматизированный метод был оценен на предмет его чувствительности. В одном исследовании тест lumipulse presto SARS-CoV-2 Ag показал чувствительность 75,7% и корреляцию 0,74 между концентрацией антигена и уровнем РНК [11]. В другом исследовании чувствительность, оцененная на 58 образцах от 11 инфицированных пациентов, достигла 55,2% [13]. В этой последней работе кинетическое исследование продемонстрировало, что уровень антигена становится отрицательным до 8 дня после появления симптомов, как это наблюдалось в нашей оценке.Быстрые унитарные прямые тесты, в свою очередь, имеют более низкую и неодинаковую чувствительность в диапазоне от 30,77% [14] до 68,6% [15] или 80,2% [16]. Как и в нашем исследовании, чувствительность была выше в первые дни от появления симптомов [15, 16].

Более того, определение антигена более чувствительно при высокой вирусной нагрузке, соответствующей низким значениям Cq при ОТ-ПЦР [11, 13]. Что касается оцениваемого здесь теста на антиген LIAISON ® SARS-COV-2, чувствительность достигла 100% для образцов со значениями Cq ниже 25.Это «отсечение» также обычно наблюдалось при быстром унитарном прямом тесте [8, 14, 15]. Даже если обнаружение антигена SARS-CoV-2 нельзя сопоставить с обнаружением инфекционного вируса и риска передачи [17], скорость передачи, как правило, выше для высоких вирусных нагрузок, когда чувствительность антигенного метода максимальна, и хотя пороговые значения Cq зависят от конкретного анализа, значения 30 можно рассматривать как точку отсечения для определения инфекции в образце пациента [18]. Таким образом, автоматизированный метод обнаружения антигенов должен быть эффективным инструментом для выявления положительных людей с риском передачи SARS-CoV-2.

Предел исследования состоит в том, что не было протестировано ни одного положительного бессимптомного человека и никаких образцов со значениями Cq выше 30. Однако отбор пациентов согласовывался с населением центра скрининга COVID-19, где можно было имплантировать автоматизированные методы антигена. Другой момент заключается в том, что добровольцы сами сообщили о наличии симптомов, а тип симптомов не был собран.

Тесты на антигены предназначены для обнаружения спайкового или нуклеокапсидного белка SARS-CoV-2.Схема пандемии изменилась за последние месяцы в связи с появлением новых вирусных вариантов. Хорошо известные варианты проблем, означающие 20I / 501Y.V1, 20H / 501Y.V2 и 20J / 501Y.V3, демонстрируют характерные мутации в белке-шипе, которые могут привести к ускользанию от иммунной системы, особенно мутация A484K, присутствующая в V2 и V3 [5 , 6]. Таким образом, тесты на антигены, основанные на обнаружении белка-шипа, могут не выявить эти варианты, и их использование более не рекомендуется. Оцениваемый здесь тест на антиген SARS-CoV-2 разработан на нуклеокапсидном белке и был проверен поставщиком на британских штаммах (данные не показаны).Однако мутации также могут влиять на ген нуклеокапсида, как мутации D3L и S235F, обнаруженные в 20I / 501Y.V1 [5], мутации T205I, обнаруженные в 20H / 501Y.V2 [6], и мутации P80R, обнаруженные в 20J / 501Y. V3 [19]. Во-первых, чтобы подтвердить способность теста LIAISON ® SARS-CoV-2 Ag обнаруживать вирусные белки, несмотря на эти мутации, супернатант клеток из культуры SARS-CoV-2, а также образцы носоглотки, взятые у инфицированных людей. SARS-CoV-2 были протестированы варианты.Антигенные белки были обнаружены для всех штаммов, то есть для 20I / 501Y.V1, 20H / 501Y.V2, а также для интересующего варианта 19B / 501Y. Вариант концерна 20J / 501Y.V3 не тестировался из-за отсутствия образца.

Характеристики антигенного метода LIAISON ® SARS-CoV-2 соответствуют рекомендациям ВОЗ. Чувствительность оптимальна для людей с симптомами, особенно в течение первых 4 дней после появления симптомов, когда значения Cq ОТ-ПЦР ниже (<25 Cq).Этот метод менее чувствителен, чем ОТ-ПЦР, но более чувствителен, чем экспресс-тест на антигены, с большей производительностью рабочего процесса. Однако 2-часовая инкубация образца в буфере для инактивации перед анализом является обременительной и медленной обработкой в ​​контексте массового скрининга, даже если задержка сокращается до 30 минут при использовании сухого тампона без транспортной среды. Однако он может стать дополнительным инструментом для кампаний по скринингу COVID-19 в рамках ряда методов, включая ОТ-ПЦР или обнаружение антигена в слюне, носоглоточном мазке или самостоятельно взятом мазке из носа.Что касается совмещения различных диагностических и / или типов образцов, IFCC указывает, что образцы из носоглотки продемонстрировали превосходство с точки зрения чувствительности и что результаты тестов следует тщательно интерпретировать с учетом клинического контекста, особенно при использовании антигенных тестов [8]. Следовательно, принимая во внимание их более низкую чувствительность, отрицательный результат антигенного теста не исключает окончательно наличие SARS-CoV-2 и требует подтверждения традиционной ОТ-ПЦР у лиц с клиническими симптомами [8].


Автор, ответственный за переписку: Доктор Элен Жулин , Университет Лотарингии, CNRS, LCPME, Нанси, Франция; и Лаборатория вирусологии, Служба микробиологии, CHRU de Nancy Brabois, 4 allée du Morvan, 54500Vandoeuvre-lès-Nancy, France, E-mail: [email protected]


Ссылки

1. Zhou , P, Lou, YX, Wang, XG, Hu, B, Zhang, L, Zhang, W и др. Вспышка пневмонии, связанная с новым коронавирусом, вероятно, происхождения летучих мышей. Природа 2020; 579: 270–3.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2012-7. Искать в Google Scholar

2. Всемирная организация здравоохранения. Еженедельное эпидемиологическое обновление COVID-19. Мировой исцеляющий орган 2021: 1–3. Искать в Google Scholar

3. Hogan, CA, Sahoo, MK, Pinsky, BA. Объединение выборок как стратегия выявления передачи SARS-CoV-2 в сообществе. J Am Med Assoc 2020; 323: 1967. https://doi.org/10.1001/jama.2020.5445. Искать в Google Scholar

4. Etievant, S, Bal, A, Escuret, V, Brengel-Pesce, K, Bouscambert, M, Cheynet, V, et al.. Оценка эффективности ПЦР-тестов SARS-CoV-2, разработанных справочными лабораториями ВОЗ. J Clin Med 2020; 9: 1871. https://doi.org/10.3390/jcm71. Искать в Google Scholar

5. Общественное здравоохранение Англии. Исследование нового вызывающего беспокойство варианта SARS-COV-2 202012/01 обнаружение эпидемиологического кластера, связанного с новым вызывающим озабоченность вариантом Номенклатура вариантов в Великобритании текущие эпидемиологические данные ; 2020: 1–11 с. Искать в Google Scholar

6.Тегалли, Х., Уилкинсон, Э, Джованетти, М., Иранзаде, А., Фонсека, В., Джандхари, Дж. И др .. Возникновение и быстрое распространение нового коронавируса 2, связанного с тяжелым острым респираторным синдромом (SARS-CoV-2) линия с множественными мутациями шипов в Южной Африке. MedRxiv 2020; 2. https://doi.org/10.1101/2020.12.21.20248640. Искать в Google Scholar

7. Линднер, AK, Николай, O, Kausch, F, Wintel, M, Hommes, F, Gertler, M, et al .. Прямое сравнение антигена SARS-CoV-2 — обнаружение экспресс-теста с помощью самостоятельно собранного мазка из носа по сравнению с профессионально собранным мазком из носоглотки. Eur Respir J 2021; 57: 2003961. https://doi.org/10.1183/13993003.03961-2020. Поиск в Google Scholar

8. Bohn, MK, Lippi, G, Horvath, AR, Erasmus, R, Grimmler, M, Gramegna, M, et al .. Временные рекомендации IFCC по экспресс-тестированию на антигены в местах оказания медицинской помощи на SARS -ОбнаружениеCoV-2 у бессимптомных и симптоматических лиц. Clin Chem Lab Med 2021; 2. https://doi.org/10.1515/cclm-2021-0455. Искать в Google Scholar

9. Мак, GC, Cheng, PK, Lau, SS, Wong, KK, Lau, C, Lam, ET, et al.. Оценка экспресс-теста на антиген для обнаружения вируса SARS-CoV-2. J Clin Virol 2020; 129: 104500. https://doi.org/10.1016/j.jcv.2020.104500. Искать в Google Scholar

10. Mak, GCK, Lau, SSY, Wong, KKY, Chow, NLS, Lau, CS, Lam, ETK, et al .. Оценка набора для быстрого обнаружения антигенов из Списка ВОЗ по чрезвычайным ситуациям для обнаружения SARS-CoV-2. J Clin Virol 2021; 134: 104712. https://doi.org/10.1016/j.jcv.2020.104712. Искать в Google Scholar

11. Kobayashi, R, Murai, R, Asanuma, K, Fujiya, Y, Takahashi, S.Оценка нового высокочувствительного количественного реагента для обнаружения антигена SARS-CoV-2. J Infect Chemother 2021; 27: 800–7. https://doi.org/10.1016/j.jiac.2021.01.007. Искать в Google Scholar

12. Ватанабе, Т., Хашида, С. Иммуноферментный анализ иммунного комплекса: механизм повышенной чувствительности по сравнению с обычным сэндвич-иммуноферментным анализом. J Immunol Methods 2018; 459: 76–80. https://doi.org/10.1016/j.jim.2018.05.010. Искать в Google Scholar

13.Hirotsu, Y, Maejima, M, Shibusawa, M, Nagakubo, Y, Hosaka, K, Amemiya, K, и др .. Сравнение автоматического теста на антиген SARS-CoV-2 на инфекцию COVID-19 с количественной RT-PCR с использованием 313 мазки из носоглотки, в том числе от семи пациентов, находящихся под последовательным наблюдением. Int J Infect Dis 2020; 99: 397–402. https://doi.org/10.1016/j.ijid.2020.08.029. Искать в Google Scholar

14. Ciotti, M, Maurici, M, Pieri, M, Andreoni, M, Bernardini, S. Проведение экспресс-теста на антигены при диагностике инфекции SARS-CoV-2. J Med Virol 2021: 1–4. https://doi.org/10.1002/jmv.26830. Искать в Google Scholar

15. Merino, P, Guinea, J, Muñoz-Gallego, I, González-Donapetry, P, Galán, JC, Antona, N, и др. Многоцентровая оценка быстрого антигена PanbioTM COVID-19 -тест для диагностики инфекции SARS-CoV-2. Clin Microbiol Infect 2021; 27: 758–61. https://doi.org/10.1016/j.cmi.2021.02.001. Искать в Google Scholar

16. Торрес, И, Пужу, С, Альберт, Э, Альварес, Дж, Коломина, Дж.Оценка в месте оказания медицинской помощи экспресс-теста на антиген (экспресс-тест на антиген COVID-19 CLINITEST) для диагностики инфекции SARS-CoV-2 у лиц с симптомами и бессимптомно Уважаемый. J Заразить 2020: 1-2. https://doi.org/10.1101/2021.02.02.21250984. Искать в Google Scholar

17. Вельфель, Р., Корман, В.М., Гуггемос, В., Сейлмайер, М., Занге, С., Мюллер, М.А. и др .. Вирусологическая оценка госпитализированных пациентов с COVID-2019. Nature 2020; 581: 465–9. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2196-x.Искать в Google Scholar

18. Sonnleitner, ST, Dorighi, J, Jansen, B, Schönegger, C, Gietl, S, Koblmüller, S, и др .. Модель in vitro для оценки инфекционности SARS-CoV-2 с помощью определение корреляции между выделением вируса и количественным значением ПЦР: успешное выделение SARS-CoV-2 из мазков из ротоглотки отрицательно коррелирует со значением Cq. Вирол J 2021; 18:71. https://doi.org/10.1186/s12985-021-01542-y. Поиск в Google Scholar

19. Фариа, Нуно Р., Меллан, Томас А., Уиттакер, Чарльз, Кларо, Ингра М., Кандидо, Дарлан да С., Мишра, Свапнил и др.. Геномика и эпидемиология линии P.1 SARS-CoV-2 в Манаусе, Бразилия. Наука 2021; 372: 815–21. https://doi.org/10.1126/science.abh3644. 33853970. Поиск в Google Scholar

Получено: 2021-05-12

Принято: 2021-07-21

Опубликовано в Интернете: 2021-07-30

© 2021 Walter de Gruyter GmbH, Berlin / Бостон

Предел обнаружения в различных матрицах из 19 коммерчески доступных экспресс-тестов на антигены для обнаружения SARS-CoV-2

Этическое заявление

Поскольку исследование включает только данные, основанные на образцах с добавлением SARS-CoV-2, а не Используются клинические образцы и образцы тканей, этическое одобрение для этого исследования не требуется.

Проверенные Ag-RDT

Девятнадцать Ag-RDT, основанные на принципе бокового потока, были оценены в этом исследовании (Таблица 2): (1) ActivXpress + COVID-19 Ag Complete Kit (Edinburgh Genetics Ltd), называемый ActivXpress +, ( 2) Biocredit COVID-19 Ag (Rapidgen Inc.), именуемое Biocredit, (3) Bioeasy 2019-nCoV Ag (Shenzhen Bioeasy Biotechnology), именуемое Bioeasy, (4) Espline SARS-CoV-2 (Fujirebio Diagnostics Inc .), именуемой Espline, (5) Genedia W COVID-19 Ag (Green Cross Medical Science), именуемым Genedia, (6) iChroma COVID-19 Ag Test (Boditech Medical Inc.), именуемой iChroma, (7) Innova SARS-CoV-2 Antigen Rapid (Innova Medical Group Ltd.), именуемым Innova, (8) Тестовое устройство Mologic COVID-19 Ag (Mologic Ltd), именуемое Mologic , (9) Тест NowCheck COVID-19 Ag (Bionote Inc.), именуемый NowCheck, (10) Тест Panbio COVID-19 Ag Rapid Test (Abbott Rapid Diagnostics), именуемый Panbio, (11) Rapid SARS-CoV- 2 Тестовая карта на антиген (Excalibur Healthcare Services), именуемая Excalibur, (12) Respi-Strip COVID-19 Ag (Coris Bioconcept), именуемая Respi-Strip, (13) Набор для быстрого тестирования антигенов SARS-CoV-2 ( Joysbio Biotechnology Ltd.), называемый Joysbio, (14) SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (совместно разработанный SD Biosensor Inc и Roche Diagnostics, распространяемый Roche Diagnostics), именуемый Roche, (15) Standard-F COVID-19 Ag FIA (SD Biosensor Inc), именуемое Standard-F, (16) Standard-Q COVID-19 (SD Biosensor Inc), именуемое Standard-Q, (17) Тест на антигенную карту Sure Status COVID-19 (Premier Medical Corporation), именуемой Sure-Status, (18) Coronavirus Ag Rapid Test (Zhejiang Orient Gene Biotech Ltd.), именуемым Orient, (19) Тест на антиген Wondfo 2019-nCoV (Guangzhou Wondfo Biotech Co.), именуемой Wondfo. Выбор Ag-RDT был основан на выражении интереса через Консорциум инноваций в области инфекций (iiCON) и Фонд новых диагностических средств (FIND). Компании не принимали участия в разработке или составлении отчетов по исследованию.

Таблица 2 Характеристики испытанного Ag-RDT.

Серийные разведения SARS-CoV-2 и количественная оценка номеров копий

Изолят SARS-CoV-2 REMRQ0001 / Human / 2020 / Liverpool размножали в клетках Vero E6 (C1008; клетки почек африканской зеленой мартышки), поддерживаемых в DMEM с 2% фетальной телячьей сыворотки (FBS) и 0.05 мг / мл гентамицина. Десятикратные серийные разведения исходного материала SARS-CoV-2 проводили, начиная с 1,0 × 10 6 БОЕ / мл до 1,0 × 10 2 БОЕ / мл, используя культуральную среду в качестве разбавителя (DMEM с 2% FBS% и 0,05 мг / мл гентамицина). Для уточнения LOD были сделаны двукратные разведения ниже десятикратного разведения LOD. Для количественной оценки вирусную РНК экстрагировали с помощью мини-набора QIAmp Viral RNA (Qiagen, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Количество копий генома / мл (gcn / мл) рассчитывали с использованием набора COVID-19 Genesig RT-qPCR (PrimerDesign, UK).Тестирование RT-qPCR проводили с использованием Rotor-Gene Q (Qiagen, Германия) с десятикратным серийным разведением с использованием количественно определенной специфической транскрибируемой in vitro РНК 38 . Всего было протестировано пять повторов для каждой точки стандартной кривой, и экстрагированная РНК из каждого разведения культуры была испытана в трех повторах, и gcn / мл рассчитали из среднего значения Ct этих повторов.

Подготовка матриц образцов SARS-CoV-2 и протокол тестирования LOD

Были протестированы три типа матриц образцов (1) прямой супернатант вирусной культуры, (2) сухие тампоны с добавками и (3) влажные тампоны с добавками в среде Эмиса.

Для матрицы прямой вирусной культуры определенный объем серийных разведений добавляли непосредственно в буферы для экстракции в соотношении 1:10, за исключением Respi-Strip, которые добавляли в соотношении 1: 1 с буфером для экстракции после IFU.

Для тестирования сухих мазков использовались патентованные носоглоточные (NP) или назальные (N) мазки, включенные в каждый индивидуальный набор, за исключением Respi-Strip, в который не входят мазки, и вместо них использовался рекомендованный Eswab (Copan, Италия). . Чтобы приготовить сухую матрицу тампона, тампон замачивали в 1 мл серии разведений вирусной культуры на 6–8 с с последующим погружением в предписанное количество запатентованного буферного раствора для реакции.

Для приготовления влажных тампонов с добавками во всех тестах использовали Eswab в среде Amies (Копан, Италия). Сначала мазок погружали в серийные разведения вируса на 6–8 с, затем помещали в среду Эмиса, чтобы имитировать стадию сбора образца. Ag-RDT оценивали, затем погружая тот же тампон в буфер для экстракции, за исключением тестируемого Respi-Strip, где 100 мкл Amies смешивали в соотношении 1: 1 с буфером для экстракции после его IFU.

Для всех Ag-RDT и матриц применяемые объемы образцов и процедуры выполнялись, как указано в IFU для конкретных тестов.

LOD был определен как наименьшее разведение, при котором все три повтора были положительными. Каждое разведение тестировали в трех экземплярах и в культуральных средах без добавок, и Amies использовали в качестве отрицательного контроля. Результаты интерпретировались двумя операторами, каждый из которых не видел результата другого. Если был получен противоречивый результат, третий оператор считывал все несоответствующие тесты для получения 2/3 результата.

Влияние абсорбции тампона и объема буфера для экстракции в LOD сухих тампонов

Мы исследовали влияние поглощения патентованных тампонов и буфера для экстракции, поставляемых с набором Ag-RDT в LOD, с использованием сухих тампонов, т.е.е. если менее абсорбирующий тампон и большие объемы буфера для экстракции привели к худшему LOD на сухом тампоне по сравнению с прямым культуральным супернатантом. Чтобы сравнить эффективность каждого тампона NP и N для извлечения образца, было измерено количество жидкости, абсорбированной тампоном. Пять повторов мазков каждой марки погружали в культуральную среду на 6–8 с, затем наклеивали лентой на внутреннюю часть центрифужной пробирки на 50 мл. Затем их центрифугировали в течение 5 минут при 1000, г, , и количество высвободившейся жидкости измеряли с помощью микропипетки.

Степень корреляции разницы между уровнем детализации сухих мазков и прямым культивированием для одного и того же Ag-RDT с объемом, извлеченным по типу мазка, и объемом патентованного мазка исследовали с помощью коэффициента корреляции Спирмена rho (ρ). Статистическая значимость была установлена ​​на уровне P <0,05.

LOD через 7 дней при -80 ° C и один цикл замораживания-оттаивания

После проведения экспериментов LOD разведения вирусных культур хранили при -80 ° C в течение 7 дней, а затем снова проводили эксперименты LOD с использованием сухого Мазки NP и N.Это поможет оценить использование сохраненных клинических образцов, которые могут быть использованы для облегчения оценки Ag-RDT.

Диагностика in vitro EUA — тесты для диагностики антигена для SARS-CoV-2

21.10.2021 Celltrion USA, Inc. Celltrion DiaTrust COVID-19 Ag Home Test
21.10.2021
Боковой поток, визуальное считывание, внебиржевое домашнее тестирование, серийный скрининг Дом, H, M, W HCP, IFU, IFU (Домашний тест) Нет Нет
19.10.2021 ACON Laboratories, Inc Домашний тест на антиген COVID-19 Flowflex
04.10.2021
Боковой поток, визуальное считывание, внебиржевое тестирование Home, H, M, W HCP, IFU, IFU (Домашний тест) Нет
24.09.2021 ANP Technologies, Inc Набор для экспресс-теста на антиген NIDS COVID-19 24.09.2021 Боковой поток, визуальное считывание, последовательное сканирование H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
24.08.2021 Becton, Dickinson and Company (BD)

Тест BD Veritor At-Home на COVID-19
24.08.2021

Боковой поток, цифровое считывание, внебиржевое тестирование в домашних условиях, серийный скрининг Дом, H, M, W Медицинский работник здравоохранения, частные лица, IFU, IFU (Домашний тест) Нет Нет
11.06.2021 Quidel Corporation Софийский антиген SARS FIA
08.05.2020
Боковой поток, флуоресценция, считывание показаний прибора, последовательное сканирование H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
14.04.2021 Becton, Dickinson and Company (BD) Система BD Veritor для быстрого обнаружения SARS-CoV-2
02.07.2020
Хроматографический цифровой иммуноанализ, считывание с помощью прибора, серийный скрининг H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
15.04.2021 LumiraDx UK Ltd. LumiraDx SARS-CoV-2 Ag Test
18.08.2020
Микрожидкостный иммунофлуоресцентный анализ, считывание прибора H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
20.04.2021 Abbott Diagnostics Scarborough, Inc. Карта BinaxNOW COVID-19 Ag
26.08.2020
Боковой поток, визуальное считывание H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
10.02.2020 Quidel Corporation София 2 Антиген гриппа + SARS FIA
02.10.2020
Боковой поток, флуоресценция, считывание прибора, мультианализ H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
16.07.2021 Access Bio, Inc. Тест на антиген CareStart COVID-19
10.08.2020
Боковой поток, визуальное считывание, последовательное сканирование H, M, W HCP, Пациенты, IFU

Нет

23.10.2020 Celltrion USA, Inc. Сампинутный антиген COVID-19 MIA
23.10.2020
Магнитный силовой электрохимический иммуноанализ (MESIA) H, M HCP, Пациенты, IFU Нет
07.12.2020 Luminostics, Inc. Clip COVID Rapid Antigen Test
12.07.2020
Иммунолюминесцентный анализ с боковым потоком, считывание прибора H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
11.02.2021 Ellume Limited Домашний тест Ellume COVID-19
15.12.2020
Боковой поток, флуоресценция, считывание показаний прибора, внебиржевое тестирование (OTC) Домашнее тестирование, скрининг Дом, H, M, W HCP, IFU, IFU (Домашний тест), FAQ Нет
12.04.2021 Abbott Diagnostics Scarborough, Inc. Тест BinaxNOW COVID-19 Ag Card Home
16.12.2020
Боковой поток, визуальное считывание, домашнее тестирование по рецепту Дом, H, M, W HCP, IFU, IFU (Домашний тест) Нет
26.07.2021 Quidel Corporation Тест на антиген QuickVue SARS
18.12.2020
Боковой поток, визуальное считывание, последовательное сканирование H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
10.09.2021 Корпорация Quanterix Тест на белковый антиген Simoa SARS-CoV-2 N
01.05.2021

Иммуноанализ на основе парамагнитных микрошариков, серийный скрининг, слюна

H, M HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
16.03.2021 Ortho Clinical Diagnostics, Inc. VITROS Immunodiagnostic Products Пакет реагентов для антигена SARS-CoV-2
11.01.2021
Хемилюминесцентный иммуноанализ, считывание прибора H, M HCP, Пациенты, IFU Нет
04.02.2021 Princeton BioMeditech Corp. Статус COVID-19 / Flu
04.02.2021
Боковой поток, визуальное считывание, мультианализ H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
01.03.2021 Quidel Corporation Тест QuickVue At-Home на COVID-19
01.03.2021
Боковой поток, визуальное считывание, домашнее тестирование по рецепту Дом, H, M, W HCP, Пациенты, IFU, IFU (Домашний тест) Нет
24.03.2021 Becton, Dickinson and Company (BD) Система BD Veritor для быстрого обнаружения SARS-CoV-2 и гриппа A + B
24.03.2021
Хроматографический цифровой иммуноанализ, считывание с помощью прибора, мультианализ H, M, W HCP, Пациенты, IFU Письмо о пересмотре вирусных мутаций — 23 сентября 2021 г. Нет
21.10.2021 Quidel Corporation QuickVue Домашний внебиржевой тест на COVID-19
31.03.2021
Боковой поток, визуальное считывание, внебиржевое домашнее тестирование, серийный скрининг Дом, H, M, W Медицинский работник здравоохранения, частные лица, IFU, IFU (Домашний тест) Нет
10.08.2021 Abbott Diagnostics Scarborough, Inc. Самотестирование антигена BinaxNOW COVID-19
31.03.2021
Боковой поток, визуальное считывание, внебиржевое домашнее тестирование, серийный скрининг Дом, H, M, W Медицинский работник здравоохранения, частные лица, IFU, IFU (Домашний тест) Нет Нет
31.03.2021 Abbott Diagnostics Scarborough, Inc. Домашний тест BinaxNOW COVID-19 Ag Card 2
31.03.2021
Боковой поток, визуальное считывание, внебиржевое домашнее тестирование, телемедицинское наблюдение под наблюдением, последовательное сканирование Дом, H, M, W

Медицинский работник здравоохранения, частные лица, IFU, IFU (Домашний тест)

Нет
31.03.2021 Abbott Diagnostics Scarborough, Inc. Карта BinaxNOW COVID-19 Ag 2
31.03.2021
Боковой поток, визуальное определение, тестирование без рецепта, серийный скрининг H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
12.07.2021 DiaSorin, Inc. СВЯЗЬ SARS-CoV-2 Ag
26.03.2021
CLIA H, M HCP, Пациенты, IFU Нет
13.04.2021 Корво Биотехнологии, ООО. Тест на антиген Omnia SARS-CoV-2
13.04.2021
Биосенсор объемных акустических волн (BAW), считывание прибора H, M HCP, Пациенты, IFU Нет
01.09.2021 Celltrion USA, Inc. Celltrion DiaTrust COVID-19 Ag Rapid Test
16.04.2021
Боковой поток, визуальное считывание, последовательное сканирование H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
09.03.2021 InBios International, Inc. Экспресс-тест SCoV-2 Ag Detect
06.05.2021
Боковой поток, визуальное считывание, последовательное сканирование H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
20.05.2021 Salofa Oy Кассета для экспресс-теста на антиген Sienna-Clarity COVID-19
20.05.2021
Боковой поток, визуальное считывание H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
06.04.2021 OraSure Technologies, Inc. InteliSwab COVID-19 Rapid Test Rx
06.04.2021
Боковой поток, визуальное считывание, домашнее тестирование по рецепту Дом, H, M, W HCP, IFU, IFU (Домашний тест) Нет
06.04.2021 OraSure Technologies, Inc. Экспресс-тест InteliSwab COVID-19
04.06.2021
Боковой поток, визуальное считывание, внебиржевое домашнее тестирование, серийный скрининг Дом, H, M, W Медицинский работник здравоохранения, частные лица, IFU, IFU (Домашний тест) Нет
06.04.2021 OraSure Technologies, Inc. InteliSwab COVID-19 Rapid Test Pro
06.04.2021
Боковой поток, визуальное считывание, последовательное сканирование H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет
08.07.2021 Ellume Limited ellume.lab Тест на антиген COVID
08.07.2021
Боковой поток, флуоресценция, считывание прибора H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
24.09.2021 GenBody Inc. GenBody COVID-19 Ag
13.07.2021
Боковой поток, визуальное считывание H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
28.07.2021 PHASE Scientific International, Ltd. Быстрый тест на антиген INDICAID COVID-19
28.07.2021
Боковой поток, визуальное считывание H, M, W HCP, Пациенты, IFU Нет Нет
23.08.2021 Access Bio, Inc. CareStart Домашний тест на антиген COVID-19
02.
Диагноз аг: Карта сайта

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *