Биохимия ггтп: Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)

Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)

Гамма-глютамилтранспептидаза – фермент (белок) печени и поджелудочной железы, активность которого в крови повышается при заболеваниях печени и злоупотреблении алкоголем.

Синонимы русские

Гамма-глютаматтранспептидаза, гамма-глютаматтрансфераза, ГГТ, гамма-глутаматтранспептидаза, гамма-глутаматтрансфераза, ГГТП.

Синонимы английские

Gamma-glutamyl transferase, Gamma-glutamyl transpeptidase, GGTP, Gamma GT, GTP.

Метод исследования

Кинетический колориметрический метод.

Единицы измерения

Ед/л (единица на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную, капиллярную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение и не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Желчь образуется в клетках печени и выделяется по системе микротрубочек, которые называются желчными канальцами. Они затем объединяются в печеночные протоки, выходящие за пределы печени, и образуют общий желчный проток, впадающий в тонкий кишечник. Желчь необходима для всасывания жиров, поступающих с пищей. Также через желчь выделяются некоторые лекарственные вещества. Она образуется постоянно, но поступает в кишечник только во время и после приема пищи. Когда она не нужна – накапливается в желчном пузыре.

Гамма-глютамилтранспептидаза – фермент, который находится в клетках печени и желчевыводящих путей и является катализатором определенных биохимический реакций. В кровеносном русле она не содержится, только в клетках, при разрушении которых их содержимое попадает в кровь. В норме часть клеток обновляется, поэтому в крови обнаруживается определенная активность ГГТ. Если гибнет много клеток, ее активность может повышаться значительно.

Тест на ГГТ – самый чувствительный анализ в отношении застоя желчи – холестаза. Активность ГГТ при препятствии оттоку желчи, например при камнях в желчных протоках, повышается раньше, чем активность щелочной фосфатазы. Однако повышение это неспецифично, так как оно происходит при большинстве острых заболеваний печени и желчных ходов, например при остром вирусном гепатите или раке, и обычно такой результат не очень информативен при установлении конкретного заболевания или состояния, вызвавшего повреждение печени.

В отличие от других печеночных ферментов, производство ГГТ «запускается» алкоголем, поэтому у лиц, злоупотребляющих им, ее активность может быть повышена даже при отсутствии заболевания печени. Кроме того, выработка ГГТ стимулируется некоторыми лекарствами, включая фенобарбитал и парацетамол, поэтому на фоне их приема можно ожидать повышения ГГТ без повреждения печени.

ГГТ также содержится в почках, селезенке, поджелудочной железе, головном мозге, простате, и увеличение ее активности неспецифично только для нарушений печени.

Для чего используется исследование?

• Чтобы подтвердить заболевание печени и желчных ходов, особенно при подозрении на закупорку желчевыводящих путей при камнях в желчных протоках или при опухоли поджелудочной железы.
• Для наблюдения за эффективностью лечения алкоголизма или алкогольного гепатита.
• Для диагностики заболеваний, поражающих желчевыводящие пути, – первичного билиарного цирроза и первичного склерозирующего холангита.
• Чтобы определить, чем обусловлено повышение активности щелочной фосфатазы, – заболеванием печени или патологией костей.
• Для контроля за состоянием пациентов с заболеваниями, при которых ГГТ повышена, или для оценки эффективности их лечения.

Когда назначается исследование?

• При выполнении стандартных диагностических панелей, которые могут использоваться при плановых медицинских осмотрах, при подготовке к хирургическому вмешательству.
• При выполнении «печеночных проб», используемых для оценки функции печени.
• При жалобах на слабость, усталость, потерю аппетита, тошноту, рвоту, боли в животе (особенно в правом подреберье), желтуху, потемнение мочи или осветление кала, кожный зуд.
• При подозрении на злоупотребление алкоголем или при наблюдении за пациентами, которые проходят лечение от алкоголизма или алкогольного гепатита.

Что означают результаты?

Референсные значения

Возраст, пол		Референсные значения
5 дней — 6 мес.
6 — 12 мес.
1 — 3 года
3 — 6 лет
6 — 12 лет
12 — 17 лет	мужской
	женский
> 17 лет	мужской	10 — 71 Ед/л
	женский	6 — 42 Ед/л

Чаще всего справедливо следующее утверждение: чем выше активность ГГТ, тем тяжелее повреждение печени или желчных ходов.

Причины повышения активности ГГТ

• Поражение печени и желчевыводящих путей
  • Механическая желтуха, связанная с непроходимостью желчевыводящих протоков.
    • Камни желчных протоков, рубцы желчных протоков после хирургических вмешательств.
    • Опухоли желчных протоков.
    • Рак головки поджелудочной железы, рак желудка при механическом сдавливании общего желчного протока, через который желчь попадает в двенадцатиперстную кишку.
  • Алкоголизм. После отказа от алкоголя активность ГГТ приходит в норму через месяц. Хотя и у трети алкоголиков активность ГГТ в норме.
  • Рак печени, метастазы опухолей других органов в печень.
  • Цирроз печени – патологический процесс, в ходе которого происходит замещение нормальной печеночной ткани рубцовой, что угнетает все функции печени.
  • Острый и хронический гепатит любого происхождения, особенно алкогольный.
  • Инфекционный мононуклеоз. Это острая вирусная инфекция, которая обычно проявляется повышением температуры, воспалением зева и увеличением лимфоузлов. При этом в патологический процесс часто вовлекается печень.
  • Первичный билиарный цирроз и первичный склерозирующий холангит – редкие заболевания, встречающиеся у взрослых людей и связанные с аутоиммунным повреждением желчных ходов. Сопровождаются крайне высокой активностью ГГТ и щелочной фосфатазы.
• Другие причины
  • Панкреатит – острое воспаление поджелудочной железы. Часто провоцируется отравлением алкоголем.
  • Рак простаты.
  • Рак молочной железы и легких с метастазами в печень.
  • Системная красная волчанка – заболевание, при котором вырабатываются антитела к собственным тканям.
  • Инфаркт миокарда. В острой стадии инфаркта миокарда активность ГГТ обычно остается в норме, однако может повыситься через 3-4 дня, отражая вторичное вовлечение печени из-за сердечной недостаточности.
  • Сердечная недостаточность.
  • Гипертиреоз – повышение функции щитовидной железы.
  • Сахарный диабет.

Причины снижения активности ГГТ

• Гипотиреоз – состояние, при котором снижена функция щитовидной железы.

Что может влиять на результат?

• Активность ГГТ бывает повышена при ожирении.
• Аспирин, парацетамол, фенобарбитал, статины (препараты, снижающие уровень холестерина), антибиотики, гистаминоблокаторы (используемые для уменьшения секреции желудочного сока), противогрибковые препараты, антидепрессанты, оральные контрацептивы, тестостерон и ряд других лекарств могут повышать активность ГГТ.
• Длительный прием аскорбиновой кислоты способен приводить к снижению активности ГГТ.

 Скачать пример результата

Важные замечания

При патологии костной ткани активность ГГТ, в отличие от щелочной фосфатазы, остается в норме, так же как и при состояниях, связанных с ростом костей, при беременности и почечной недостаточности.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, гастроэнтеролог, инфекционист, гематолог, эндокринолог, хирург.

Сдать анализ крови на ГГТ (Гамма-глутамилтранспептидаза) в лаборатории KDL

ГГТ (гамма-глутамилтрансфераза или гамма- глутамилтранспептидаза) — фермент, участвующий в метаболизме аминокислот. В наибольшей концентрации содержится в почках, печени, поджелудочной железе, в меньшем количестве присутствует в других тканях организма. Самый высокий уровень ГГТ содержится в почечной ткани, фермент, присутствующий в сыворотке, поступает в основном из гепатобилиарной системы. Повышенная концентрация ГГТ в сыворотке крови чаще всего является маркером нарушения оттока желчи (холестаза), а также интоксикации, вызванной алкоголем или лекарственными препаратами.

В каких случаях обычно назначают исследование?

Анализ крови на ГГТ важен для диагностики патологии печени, с этой целью обычно назначается вместе со следующими исследованиями: АСТ, АЛТ, билирубин, щелочная фосфатаза. ГГТ высоко информативна при выявлении обструктивной желтухи, холангита и холецистита; рост уровня этого показателя начинается раньше, чем у других печеночных маркеров, и сохраняется дольше.

При вирусных гепатитах ГГТ повышается не сильно, и в этом случае более полезно определение трансаминаз (АЛТ, АСТ). Высокие отметки ГГТ наблюдаются при нарушении оттока желчи, обструктивных процессах в печени (в десятки раз выше нормы), при наличии первичных или вторичных (метастазы) новообразований, при циррозе.

Что означают результаты теста?

Нормы концентрации гамма-глутамилтрансферазы в крови различаются в зависимости от пола и возраста.

Повышение активности гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТ) наблюдается при разной печеночной патологии. Самые высокие отметки указывают на обструкцию желчных путей, которая может иметь печеночную или внепеченочную природу, алкогольную болезнь печени и цирроз. В сочетании с повышением щелочной фосфатазы характерно при гепатобилиарных заболеваниях. Повышенные значения также наблюдаются у пациентов, принимающих такие препараты, как фенитоин и фенобарбитал.

Одновременное повышение ГГТ и щелочной фосфатазы позволяет предположить холестаз. При длительном употреблении алкоголя ГГТ повышается изолированно от щелочной фосфатазы. Повышение щелочной фосфатазы при нормальных значениях ГГТ говорит о наличии заболеваний костной ткани. При мышечных заболеваниях, почечной недостаточности и при беременности с повышением щелочной фосфатазы отмечаются нормальные значения ГГТ.

Сроки выполнения теста.

Обычно результат анализа ГГТ можно получить уже на следующий день.

Как подготовиться к анализу?

Следует придерживаться общих правил подготовки к взятию крови из вены. С подробной информацией можно ознакомиться в соответствующем разделе.

Повышение ГГТП — Гамма-глютамилтранспептидаза при заболеваниях печени — анализы при заболеваниях печени

Гамма-глютамилтрансфераза (гамма-глютамилтранспептидаза) катализирует перенос гамма-глютамила на аминокислоту или пептид. ГГТП является мембрано-связанным ферментом.

Изменение активности ГГТП в сыворотке имеет большое диагностическое значение при заболеваниях печени и гепато-билиарного тракта. Этот фермент более чувствителен к нарушениям в клетках печени, чем АЛТ, АСТ, щелочная фосфатаза.

ГГТП многозначна в диагностическом отношении. По крайней мере, 5 процессов служат причиной повышения ее активности в крови:

— жировое перерождение печени — Жировой гепатоз

— некроз печеночных клеток;

— нарушение оттока желчи – холестаз;

— интоксикация алкоголем;

— опухолевый рост в печени;

— лекарственные повреждения печени.

Такая этиологическая разновидность механизмов повышения ГГТП требует очень осторожной и тщательной оценки причин этой гиперферментемии. Обнаружение высокой активности ГГТП заставляет искать причину этого повышения. Как «отсеивающий» тест и контроль за течением известного патологического процесса, исследование ГГТП буквально незаменимо по клиническому значению.

Особенно чувствительна ГГТП к влиянию на печень длительного потребления алкоголя. У лиц, злоупотребляющих алкоголем, сывороточный уровень ГГТП коррелирует с количеством принимаемого алкоголя. Тест особенно ценен для контроля лечения алкоголизма. Прекращение приема алкоголя снижает активность фермента приблизительно на 50% в течении 10 дней.

Определение активности ГГТП используется для установления факта повреждения печеночных клеток и обычно повыышается в 90% случаев заболеваний печени. В большинстве случаев у таких больных в крови наблюдается повышение активности АЛТ и ГГТП. Изолированное повышение активности ГГТП наблюдается у 6-20% больных с патологией гепато-билиарной системы.

При острых гепатитах активность ГГТП повышается раньше, чем активность АЛТ. На пике заболевания активность ГГТП ниже (повышена в 2-5 раз), чем активность АЛТ, и нормализуется значительно медленнее. Это позволяет использовать ГГТП в качестве контроля выздоровления больного.

Повышение активности ГГТП более чем в 3 раза вызывают антиконвульсантные препараты, жировая дистрофия печени и сердечная недостаточность.

Наиболее высокую активность ГГТП (в 5-30 раз выше референтного интервала) наблюдают при внутри- и внепеченочном холестазе. Несколько меньшие значения активности фермента регистрируют при первичных опухолях печени и метастазах в печень. Стойкое и длительно регистрируемое повышение ГГТП может быть единственным клинико-лабораторным признаком метастатического поражения печени.

Гамма-ГТ, сдать анализ на ГГТ в крови

Метод определения

Кинетический колометрический метод (Szasz).

Исследуемый материал Сыворотка крови

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация

Гамма-глутамилтранспептидаза – микросомальный фермент, участвующий в обмене аминокислот. 

Синонимы: Гамма-глутаматтранспептидаза; Гамма-глютаматтрансфераза; ГГТ; Гамма-глутаматтранспептидаза; Гамма-глутаматтрансфераза; ГГТП.
Gamma-glutamyl transferase; Gamma-glutamyl transpeptidase; GGTP; Gamma GT; GTP. 

Краткая характеристика Гамма-глутамилтранспептидаза 

Гамма-глутамилтранспептидаза относится к группе ферментов, катализирующих перенос глутамильной группы от глутамилпептида на аминокислоту, другой пептид или иную субстратную молекулу. Гамма-глутамилтранспептидаза присутствует в проксимальных почечных канальцах, печени, поджелудочной железе и кишечнике. В клетке гамма-глутамилтранспептидаза локализована в микросомах цитоплазмы, но большая часть находится в клеточной мембране. ГГТ обеспечивает поддержание адекватного уровня внутриклеточного глутатиона, играющего важную роль в защите клетки от свободных радикалов. Мембранная локализация гамма-глутамилтранспептидазы характерна для клеток с высокой секреторной, экскреторной или реабсорбционной способностью. 

При каких состояниях может повышаться уровень Гамма-глутамилтранспептидазы 

Источником гамма-глутамилтранспептидазы в сыворотке крови выступает преимущественно гепатобилиарная система.
Увеличение активности фермента считается чувствительным маркером заболеваний гепатобилиарной системы. При внутрипеченочной и внепеченочной обструкции желчных путей активность сывороточной ГГТ превышает нормальные значения в 5-30 раз. Это более чувствительный показатель патологии печени, чем АЛТ и АСТ, в диагностике механической желтухи, холангитов и холециститов.
Повышение уровня гамма-глутамилтранспептидазы в этих случаях наблюдается раньше и сохраняется дольше, чем активность других печеночных ферментов. Высокий уровень гамма-глутамилтранспептидазы отмечается при первичных и вторичных неопластических заболеваниях печени. Умеренное повышение гамма-глутамилтранспептидазы наблюдается при инфекционных гепатитах и у пациентов с жировым перерождением печени. Повышенный уровень ГГТ наблюдается в сыворотке крови у пациентов с алкогольным циррозом и у большинства людей, злоупотребляющих алкоголем. Поэтому гамма-глутамилтранспептидазу используют в диагностике алкоголизма, алкогольных повреждений печени и в мониторинге алкогольной абстиненции.
Преходящие умеренные изменения уровня сывороточной гамма-глутамилтранспептидазы наблюдаются при лекарственной интоксикации и любом окислительном стрессе, индуцирующем повышенную экспрессию фермента (в том числе при диабетическом кетоацидозе).
Концентрация ГГТ повышается при острых и хронических панкреатитах, при злокачественных заболеваниях поджелудочной железы и опухолевых процессах предстательной железы.
Сывороточная активность гамма-глутамилтранспептидазы не меняется при патологии костной ткани, поэтому одновременное исследование уровня щелочной фосфатазы и гамма-глутамилтранспептидазы используется для дифференциальной диагностики: одновременное повышение и щелочной фосфатазы, и ГГТ служит показателем поражения печени; если увеличена концентрация только ЩФ, это может свидетельствовать о поражении костной ткани. 

С какой целью проводят исследование крови на Гамма-глутамилтранспептидазу 

Определение уровня гамма-глутамилтранспептидазы в сыворотке крови используют преимущественно для выявления возможной патологии печени и желчевыводящих путей. 

Что может повлиять на результат исследования крови на Гамма-глутамилтранспептидазу

У новорожденных и детей до шести месяцев в связи с особенностями метаболизма уровень ГГТ превышает значения этого показателя у взрослых в 2-4 раза. У подростков от 13 до 17 лет, как и у взрослых, референсные значения гамма-глутамилтранспептидазы для женщин на 20-25% ниже, чем для мужчин.
Прием противосудорожных препаратов, таких как фенитоин и фенобарбитал, повышает активность ГГТ.

Литература

Гамма-глутамилтрансфераза, ГГТ в Москве недорого

Гамма-глутамилтрансфераза — это фермент, основная активность которого приходится на почки, печень и поджелудочную железу. Этот чувствительный показатель реагирует на замедление процессов продвижения желчи в печени и желчевыводящих путях, поэтому в диагностике его используют, в первую очередь, как маркер заболеваний печени.

ГГТ (гамма-глутамилтрансфераза) участвует в транспортировке аминокислот сквозь мембрану клеток. Наиболее высокая концентрация данного вещества наблюдается в лимфоцитах, поджелудочной железе, печени, яичках, головном мозге, почечных канальцах и эпителии желчных протоков.

Данный анализ является неспецифичным, так как фермент превышает норму  при болезнях сердечно-сосудистой системы, сахарном диабете, болезнях легких, поджелудочной железы и почек, а также при алкогольной зависимости и появлении метастаз в легких.

Для чего используется исследование ГГТ?

Данное исследование назначается для оценки функционального состояния печени и желчевыводящих путей. Показаниями к его проведению являются признаки желтухи, приступы тошноты, рвоты, кожного зуда. Также симптомами, при которых проводят анализ, являются изменение цвета мочи на более темный, обесцвечивание кала, быстрая утомляемость. Исследование также проводится пациентам с подозрениями на камни в желчном пузыре, токсические поражения печени, панкреатит, вирусный или хронический гепатит. Оно является частью диагностики при подозрениях на рак поджелудочной железы, простаты и печени. Измерение ГГТ используют при диагностике хронического алкоголизма и для контроля пациента во время абстиненции. В качестве метода мониторинга метод применяют для оценки успешности терапии печеночной патологии, а также он назначается пациентам, которые принимают медикаменты, способные вызвать холестаз.

В наших клиниках можно сдать анализ на ГГТ как отдельно, так и в составе следующих обследований:

• расширенного исследования или скрининга печени;
• расширенного биохимического анализа крови;
• комплекса анализов ЗОЖ;
• хирургического комплекса.

Показания к обследованию на ГГТ

Сдать кровь на определение уровня ГГТ рекомендуется в следующих случаях:

• при первых признаках желтухи — тошноте, рвоте, потемнению мочи, светлом оттенке каловых масс, сильном кожном зуде;
• при подозрениях на опухоль в печени, поджелудочной железе и простате;
• во время контроля над состоянием пациента при абстинентном синдроме;
• для мониторинга успешности медикаментозного лечения при токсическом поражении печени, хроническом или вирусном гепатите, панкреатите или камнях в желчном пузыре;
• при необходимости отличить заболевания печени от поражения скелетных мышц;
• во время мониторинга состояния пациентов, принимающих лекарственные препараты, способные вызвать холестаз.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К АНАЛИЗАМ КРОВИ

Кровь берется из вены. Необходимо соблюдать общие рекомендации:

• кровь сдается утром натощак или не ранее, чем через 2–4 часа после приема пищи;
• допускается употребление воды без газа;
• накануне анализа следует отказаться от алкоголя, исключить физическое и эмоциональное перенапряжение;
• отказаться от курения за 30 минут до исследования;
• не стоит сдавать кровь в период приема медикаментов, если врач не назначил иное.

Из рациона стоит исключить алкоголь за 5 дней до исследования – даже небольшая его доза способна повысить уровень фермента и держать его на этом уровне на протяжении 60 часов.

Гамма-глутамилтранспептидаза (ГГТ, глутамилтранспептидаза, GGT, Gamma-glutamyl transferase)

Что такое гамма-глутамилтранспептидаза (ГГТ)?

Гамма-глутамилтранспептидаза (ГГТ) – это фермент, который находится в клетках многих тканей, поэтому его уровень в крови повышается при повреждении различных органов, но в набольшей степени – печени и желчных протоков. 

Желчь необходима организму для нормального процесса пищеварения: она участвует в расщеплении жиров и помогает в усвоении жирорастворимых витаминов (А, Д, Е, К). Желчь вырабатывается клетками печени, собирается в желчных протоках и в желчном пузыре, а непосредственное участие в процессе пищеварения принимает в двенадцатиперстной кишке (участок тонкой кишки, следующий в пищеварительном тракте после желудка).

Для чего определяют уровень ГГТ в крови?

ГГТ является наиболее чувствительным тестом, помогающим выявить проблемы желчевыводящей системы. То есть именно этот показатель изменяется одним из первых.

Исследование ГГТ показано при наличии симптомов, указывающих на проблемы с печенью: к ним относятся выраженная слабость, повышенная утомляемость, бессонница, потеря аппетита, тошнота и/или рвота, вздутие живота и тянущая боль (чаще всего локализующаяся в правом подреберье), пожелтение склер глаз и кожи, изменение цвета мочи (на темный, почти коричневый) и стула (на бесцветный, практически белый), кожный зуд.

При каких заболеваниях меняется уровень ГГТ в крови?

Уровень ГГТ в сыворотке крови повышается при нарушении оттока желчи – холестазе. Причиной этого состояния может быть желчнокаменная болезнь, когда расположенный внутри одного из желчных протоков камень перекрывает отток желчи; или опухолевый процесс, который может вызывать сужение желчных протоков.

Повышенный уровень ГГТ регистрируется вследствие вирусных гепатитов, опухолевых процессов в печени, хронической алкогольной интоксикации (у некоторых людей и при разовом употреблении алкоголя показатель ГГТ повышается), цирроза (когда из-за воспалительных изменений ткань печени заменяется на соединительную, что похоже на рубцовые изменения), приема токсичных для печени лекарств.

Реже значения ГГТ повышаются при сердечной недостаточности, диабете, панкреатите.

Исследование ГГТ назначают пациентам, в крови которых был выявлен высокий уровень щелочной фосфотазы (ЩФ) – еще одного маркера застоя желчи. Однако уровень ЩФ, в отличие от ГГТ, может увеличиваться и при заболеваниях костной системы.

При гипотиреозе уровень ГГТ может понижаться.

Почему результат анализа может быть некорректным?

На результат анализа может влиять прием ряда лекарственных препаратов (кортикостероидов, нестероидных противовоспалительных средств, некоторых антибиотиков и т.д.), витамина С (длительное применение).

Правила подготовки к анализу крови с целью определения уровня Гамма-глутамилтранспептидазы 

Взятие крови предпочтительно проводить утром натощак, после 8-14 часов ночного периода голодания (воду пить можно), допустимо днем через 4 часа после легкого приема пищи. Накануне исследования необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), приём алкоголя.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Трактовка результатов исследования при определении уровня Гамма-глутамилтранспептидазы в крови

Единицы измерения: Ед/л.

Референсные значения

Возраст	Гамма-глутамилтранспептидаза, Ед/л
до 5 дней	< 185
5 дней — 6 месяцев	< 204
6 — 12 месяцев	< 34
1 — 3 года	<18
3 — 6 лет	<23
6 — 12 лет	<17
мужчины: 12 — 17 лет	< 45
женщины: 12 — 17 лет	< 33
мужчины: старше 17 лет	< 49
женщины: старше 17 лет	< 32

Повышение значений 

1. Внутри- и внепечёночный холестаз (механическая желтуха при опухолях печени, при холангите, камнях в желчном пузыре). 
2. Острый вирусный гепатит, токсическое, радиационное поражение печени (ГГТ даёт возможность ранней диагностики). 
3. Хронический гепатит. 
4. Острые и хронические панкреатиты. 
5. Приём гепатотоксичных препаратов (барбитураты, фенитоин, рифампицин, цефалоспорины, эстрогены, оральные контрацептивы, ацетоаминофен). 
6. Алкоголизм. 
7. Патология почек (обострения хронических гломеруло- и пиелонефрита). 
8. Рак поджелудочной железы, простаты, гепатомы.

Анализ крови на ГГТ — Гаммаглутаминтрансфераза, ggt сдать в Самаре

Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ) — микросомальный фермент, участвующий в метаболизме аминокислот. Встречается во многих паренхиматозных органах, максимальная активность ГГТ отмечается в почках, печени, поджелудочной железе.
Чаще всего применяется в диагностике заболеваний печени.

Увеличение количества гамма-глутаминтрансферазы характерно для патологий печени и ряда других заболеваний. Образование желчи происходит в клетках печени. Она используется организмом в процессе всасывания жиров, которые поступают с продуктами питания. Синтезирование желчи происходит постоянно. Она накапливается в желчном пузыре, поступает в кишечник, когда в ней возникает необходимость (во время еды, и некоторое время после).

Фермент ГГТ запускает ряд биохимических реакций. Он содержится только в клетках, в кровотоке фермент в норме имеется в небольшом количестве. Он попадает в кровь, если клетка разрушается. Обновление клеток – это естественный процесс, им объясняется присутствие в кровотоке некоторого количества гамма-глутаминтрансфераза. Повышение активности фермента происходит, если по каким-либо причинам гибнет большое количество клеток.

Результаты анализа крови на ГГТ являются чувствительным маркером такого состояния, как холестаз. Он представляет собой застой желчи, вызванный различными причинами. При холестазе концентрация ГГТ повышается раньше, чем уровень щелочной фосфатазы. По результатам одного теста поставить точный диагноз невозможно. Повышение показателей характерно практически для всех патологий желчных путей и печени, а также для ряда других заболеваний, поэтому в ходе диагностики проводится комплексное обследование. Врач при установлении диагноза учитывает общую клиническую картину, результаты всех проведенных анализов, лабораторных исследований.

Данный тест назначается, чтобы подтвердить повреждения печени, патологии желчных путей (например, их закупорку камнями), наличие новообразований в поджелудочной железе. Также он назначается, если выявлены повышенные показатели щелочной фосфатазы, чтобы выяснить, чем это вызвано. В ходе лечения анализ проводится с определенной периодичностью, чтобы оценить эффективность терапии, при необходимости изменить методику. В большинстве случаев по количеству гамма-глутаминтрансферазы можно судить о тяжести повреждения желчевыводящих путей или печени.

Особенностью ГГТ является тот факт, что количество фермента значительно повышено у лиц, злоупотребляющих алкоголем. Его активность часто увеличена даже у пациентов, печень которых находится в нормальном состоянии и еще не разрушена алкоголем.

Тест на определение концентрации печеночных ферментов в крови назначается, чтобы отслеживать состояние пациентов, проходящих лечение от алкоголизма. После отказа от спиртных напитков показатели приходят в норму примерно через 30 дней. Необходимо учитывать, что в ряде случаев у пациентов с алкоголизмом количество фермента остается в пределах референсных значений.

Гамма-глутаминтрансфераза содержится не только в клетках печени, а и в других органах (например, в мозге, почках). Поэтому увеличение ее количества не может однозначно указывать на проблемы с печенью. Кроме того, аномальные значения могут быть вызваны ожирением или приемом ряда лекарственных препаратов. У детей до 12-ти лет при интерпретации результатов учитывается только возраст. Для пациентов старше 12 лет референсные значения зависят также от пола. Для самодиагностики тест не предназначен, для интерпретации результатов необходимо обратиться к врачу.

Программа обучения IID и GH

вооружить стажеров исследованиями, научными знаниями и навыками, чтобы стать выдающимся исследователей в области инфекционных болезней и глобального здравоохранения.

создать новый и стимулирующий междисциплинарный и поистине международная научно-исследовательская учебная среда , которая способствует творчество, возможности и инновации, требующие совершенства.

, чтобы воспользоваться уникальной возможностью, предоставляемой critical масса инфекционных заболеваний и глобальная инфраструктура здравоохранения, исследовательские возможности и выдающиеся ученые в подготовке новое поколение исследователей инфекционных болезней.

, чтобы сделать доступными совместных международные исследовательские площадки для первичных исследований стажеров проекты, сайты для исследовательской практики и предложения основных курсов.

предлагает совместное обучение среда , где стажеры и наставники из всех четырех Столпы исследований CIHR и четыре международных учебных центра работают совместно изучить вопросы международных инфекционных болезней и глобального здравоохранения. С целью разработки действительно международной программы обучения, ориентированной на по ВИЧ / СПИДу, возникающим инфекциям и устойчивости к микробам, а также по вопросам глобального здравоохранения в Области исследований будут включать:

* основы иммунологии, биохимии и генетики ВИЧ-инфекции и резистентности. к заражению
* профилактика ВИЧ-инфекции посредством поведенческого и структурного вмешательства программы и разработка вакцин и микробицидов
* эпидемиология, биология и реакция организма на возникающие инфекционные болезни и переносчики, передающие их
* масштабы, эпидемиология и механизмы микробной устойчивости
* понимание социальных, культурных и антропологических факторов, участвующих в глобальное здравоохранение
* оценка воздействия инфекционных заболеваний на уязвимые группы населения, такие как как общины аборигенов в Канаде, секс-работники и бедняки в развивающихся странах. страны

Программа обучения IID и GH

Росс Упшур	Университет Объединенного центра биоэтики Торонто	Международный Этика исследований	Столб 4 наставника / инструктора
Эрик Меслин	Индиана Университетский центр биоэтики	Международный Этика исследований	Столб 4 наставника / инструктора
Екатерина Повар	Центр по охране здоровья аборигенов, Университет Манитобы,	Аборигены Исследования и обучение	Столб 4 наставника / инструктора
Кэти Эйвери Кинью	Сборка руководителей Манитобы	Политика здравоохранения и проблемы коренных народов	Столб 4 наставника / инструктора
Михаил Eze	Университет Колледжа глобального здравоохранения Виннипега	Глобальный Здоровье, биохимия	Столб 1 наставник / инструктор
Майк Дребот	Общественный Агентство здравоохранения Канады, Университет Манитобы,	Зоонозный инфекции	Столб 1 наставник / инструктор
Роббин Линдси	Общественный Агентство здравоохранения Канады, Университет Манитобы	Векторы по трансмиссивным болезням	Столб 1 наставник / инструктор
Т.Блейк Болл	Общественный Агентство здравоохранения Канады, Университет Манитобы	ВИЧ иммунология	Столб 1 наставник / инструктор
Кэрол Бодуан	Общественный Агентство здравоохранения Канады, Университет Манитобы	ВИЧ эпидемиология	Столб 3 наставника / инструктора
Стефани Стенд	Общественный Агентство здравоохранения Канады, Университет Манитобы	Прион / хост взаимодействия	Столб 1 наставник / инструктор
Уолтер Яоко	U Найроби, Кенийская инициатива по созданию вакцины против СПИДа	ВИЧ испытания вакцины, клинические испытания	Столб 2 наставника / инструктора
Ому Анзала	U Найроби, Кенийская инициатива по созданию вакцины против СПИДа	ВИЧ испытания вакцин, клинические испытания, фундаментальные науки	Столб 1, 2 наставник / инструктор
Элайджа Маритим Сонгок	Кенийский Медицинский научно-исследовательский институт У Мамитобы	ВИЧ испытания вакцины, ВИЧ патогенез	Столб 1, 3 наставник / инструктор
Соломон Мпоке	Кенийский Медицинский научно-исследовательский институт	Возникающий Инфекционные болезни	Столб 1 наставник / инструктор
Б.М. Рамеш	Karnataka Health Promotion Trust (KHPT), Индия	ВИЧ интервенционные исследования, глобальное здравоохранение	Столб 4 наставника / инструктора
Сушена Реза-Пол	Ассоциация больниц Эммануаль, Майсур, Индия	ВИЧ интервенционные исследования, глобальное здравоохранение	Столб 4 наставника / инструктора
Мария Тереза ​​Ругелес	Universidad де Антиокия в Медельине, Колумбия	Натуральный устойчивость к ВИЧ и иммунопатогенез	Столб 1 наставник / инструктор
Джоанн Embree	U Манитобы (Med Micro, педиатрия)	Вакцины и детские инфекционные болезни	Столб 2 наставника / инструктора
Ларри Гельмон	U из Манитобы (Med Micro), штат Найроби, штат Найроби,	Программа Оценка, Международная политика здравоохранения	Столб 2, 4 наставник / инструктор
Пэм Orr	U Манитобы (Med Micro, внутренняя медицина)	Инфекционный Болезни, Здоровье аборигенов	Столб 2, 4 наставник / инструктор
Дэррил Хобан	U Манитобы (Med Micro)	Противомикробное средство сопротивление	Столб 1 наставник / инструктор
Джордж Жанель	U Манитобы (Med Micro)	Противомикробный сопротивление	Столб 1 наставник / инструктор
Сяоцзянь Яо	U Манитобы (Med Micro)	ВИЧ патогенез	Столб 1 наставник / инструктор
Си Ян	U Манитобы (Med Micro, иммунология)	Хламидиоз инфекционная иммунология	Столб 1 наставник / инструктор
Бренда Элиас	U Манитобы (CHS), Центр здоровья аборигенов Res	Аборигены медицинские исследования	Столб 4 наставника / инструктора
Шарон Брюс	U Манитобы (Comm Health Sciences)	Медицинский антропология	Столб 4 наставника / инструктора
Пат. Мартенс	U Манитобы (Comm Health Sciences)	Количественный Исследования с использованием административных баз данных	Столб 4 наставника / инструктора
Джоди Ягода	CanGene Corp, U of Manitoba (Med Micro)	Коммерциализация, Биология В-клеток	Столб 1 наставник / инструктор
Маргарет Быстро	Национальный Сотрудничающий центр по инфекционным болезням	Знание Перевод	Столб 2, 4 наставник / инструктор
Крис Зеленый	пров. ветеринарной лаборатории MB Veterinary Lab, U of Manitoba (CHS)	Географический Информационные системы	Столб 3 наставника / инструктора
Михаил Уильямс	Аде и патентные агенты компании	Исследования коммерциализация	инструктор
Даррен Быстро	Солтарис Консультанты	Исследования коммерциализация	инструктор
Линда Ларкомб	Внутренняя медицина, Университет Манитобы	Здоровье аборигенов	Наставник / инструктор столпа 1
Джуд Узонна	Университет Манитобы (иммунология)	Взаимодействие хозяин-патоген; Иммунопаразитология; Регуляция иммунного класса; иммунологическая память	Наставник / инструктор столпа 1
Кевин Кумбс	Университет Манитобы (Med Micro, Proteomics, вице-президент по исследованиям)	Возникающая болезнь, вирус гриппа; молекулярная биология, противовирусные препараты, клеточный патогенез	Наставник / инструктор столпа 1
Джойс Слейтер	Университет Манитобы (CGPH, CHS)	Общественное здравоохранение, питание; Пищевые системы; Планирование программ; Перевод знаний	Столп 4 Наставник / инструктор
Роб Лорвей	Университет Манитобы (CGPH, Med Micro)	Медицинская антропология, передача ВИЧ	Столб 1 Наставник
Мишель Дридгер	Университет Манитобы (CHS)	Перевод знаний	Столб 4 Наставник

Вакансии | Центр карьеры ISPE CaSA

{{* Больница, государственная и частная}} {{Академическая медицинская группа}} {{Организация по подотчетной медицинской помощи (ACO)}} {{Консультативная / Регулирующая}} {{Правозащитная / Некоммерческая}} {{Центр амбулаторной хирургии}} {{Вооруженные силы}} {{Дом престарелых / Дом престарелых}} {{Центр родовспоможения}} {{CCRC-Сообщество по продолжению ухода за пенсионерами}} {{Колледж / Университет}} {{Общественный центр здоровья / Общественная клиника}} {{ Исправительное учреждение здравоохранения / Медицина}} {{Правительство}} {{HMO}} {{Система здравоохранения}} {{Поставщик медицинских информационных технологий}} {{План медицинского обслуживания}} {{Поставщик медицинских услуг на дому}} {{Хоспис}} {{Больничные, государственные и частные}} {{Независимые медицинские / диагностические лаборатории}} {{Независимые медицинские группы}} {{Независимая ассоциация практик (IPA)}} {{Интегрированная система предоставления медицинских услуг}} {{Медико-биологические и биофармацевтические компании }} {{Medical Group}} {{Medical Review Organization}} {{Производитель медицинского испытательного оборудования}} {{Office of Dentists}} {{Office of Healthcare Practitioners}} {{Office of Physitors}} {{Optical Chain ( или розничная сеть)}} {{Центр амбулаторной помощи} } {{PBM}} {{Паллиативная помощь}} {{Pre-k — 12 School}} {{Private Industry}} {{Private Practice}} {{Public Health}} {{Организация по улучшению качества}} {{Исследования Объект}} {{Специализированная аптека}}

{{Academic / Research}} {{Academic / Faculty}} {{Admin / Clerical}} {{Allied Health}} {{Biological Engineering}} {{Biomedical Engineering}} {{Clinical Research}} {{Engineering}} {{Executive}} {{General Nursing}} {{Гостиничное дело, объекты, экологическая поддержка}} {{In-House}} {{Industrial Engineering}} {{Психическое здоровье / социальные услуги}} {{Operations}} {{ Оптометрия}} {{Внешний юрисконсульт}} {{Аптека}} {{Врачи / Хирурги}} {{Качественная инженерия}} {{Управление качеством / рисками}} {{Персонал / Администрация}}

{{Контракт}} {{Преподаватели}} {{Полный рабочий день}} {{Полный рабочий день (только удаленно)}} {{Полный рабочий день}} {{Выпускник}} {{PGY1 и PGY2 вместе}} {{Неполный рабочий день }} {{Неполный рабочий день}} {{Суточные}} {{От временного до полного рабочего дня}}

{{Начальный уровень}} {{Исполнительный}} {{Опытный}} {{Стажировка}} {{Средний (старший продюсер, репортер, редактор)}} {{Старший уровень}}

Молекулярная основа ингибирования полиубиквитинирования, связанного с Lys-63, за счет взаимодействия между человеческим деубиквитинирующим ферментом OTUB1 и убиквитин-конъюгирующим ферментом UBC13

OTUB1 вмешивается между дистальным и проксимальным слизистыми оболочками Ub, чтобы предотвратить транслокация

цепи ди-Ub в тот же комплекс UBC13-MMS2 / UEV1a,

, таким образом дополнительно блокируя следующий перенос Ub от E1 к UBC13,

для следующего раунда образования изопептида.Эти модели кэпирования

и ингибирования транслокации постулируют, что концентрация OTUB1 должна быть сравнима с концентрацией заряженного Ub-

UBC13, что было показано Durocher и соавторами

(23). OTUB1 более распространен, чем UBC13 в клетках U2OS

,

и 293T.

В клетках со сверхэкспрессией OTUB1 моноубиквитинирование his-

тонов во время реакции на повреждение ДНК может быть обнаружено, но ди-

убиквитинирование не может быть обнаружено, возможно, из-за присущей клеткам высокой активности DUB

.С другой стороны, структуры комплекса OTUB1-E2

показывают, что поверхности связывания OTUB1 E2 перекрывают

с поверхностями связывания E3 RING, что подразумевает мультивалентные стратегии ингибирования

для регуляции ответов на повреждение ДНК. Дальнейшее обсуждение

ожидает будущих исследований взаимоотношений E2-E3 и роли

специфических типов и / или длин Ub цепей во время повреждений ДНК

возрастных ответов, которые все еще остаются спорными.

ССЫЛКИ

1.Гликман, М. Х., Цехановер, А. (2002) Протеолитический путь убиквитин-протеасома

. Разрушение ради строительства. Physiol. Rev.

82, 373–428

2. Grabbe, C., Husnjak, K., and Dikic, I. (2011)

пространственная и временная организация сетей убиквитина. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 12,

295–307

3. Хофманн, Р. М. и Пикарт, К. М. (1999) Неканонический MMS2-кодируемый фермент

, конъюгирующий с убиквитином, функционирует в сборке новых полиубикви-

оловянных цепей для репарации ДНК.Cell 96, 645–653

4. ВанДемарк, А. П., Хофманн, Р. М., Цуй, К., Пикарт, С. М., и Воль-

, Бергер, К. (2001) Молекулярное понимание сборки полиубиквитиновых цепей.

Кристаллическая структура гетеродимера Mms2 / Ubc13. Cell 105, 711–720

5. Эддинс, MJ, Карлайл, CM, Гомес, KM, Pickart, CM, and Wolberger,

C. (2006) Mms2-Ubc13, ковалентно связанный с убиквитином, обнаруживает структуру основа образования цепей полиубиквитина, специфичных для связывания.Nat. Struct.

Мол. Биол. 13, 915–920

6. Kim, H., Chen, J., and Yu, X. (2007) Убиквитин-связывающий белок RAP80

опосредует BRCA1-зависимую реакцию на повреждение ДНК. Science 316,

1202–1205

7. Собхиан, Б., Шао, Г., Лилли, Д. Р., Калхейн, А. С., Моро, Л. А., Ся, Б.,

Ливингстон, Д. М., и Гринберг, Р. А. ( 2007) RAP80 нацелен на BRCA1 до

специфических структур убиквитина в сайтах повреждения ДНК. Science 316,

1198–1202

8.Wang, B., Matsuoka, S., Ballif, BA, Zhang, D., Smogorzewska, A., Gygi,

SP, и Elledge, SJ (2007), Abraxas и RAP80 образуют комплекс белка BRCA1

, необходимый для Ответ на повреждение ДНК. Science 316, 1194–1198

9. Kinner, A., Wu, W., Staudt, C., and Iliakis, G. (2008) Gamma-h3AX в

распознавании и передаче сигналов двухцепочечных разрывов ДНК в контекст хроматина

. Nucleic Acids Res. 36, 5678–5694

10. Ян Дж., Джеттен А.M. (2008) RAP80 и RNF8, ключевые игроки в привлечении

белков репарации к участкам повреждения ДНК. Cancer Lett. 271,

179–190

11. Дойл, К., Майланд, Н., Беккер-Йенсен, С., Менар, П., Ларсен, Д.Х., Пеп-

перкок, Р., Элленберг, Дж. , Panier, S., Durocher, D., Bartek, J., Lukas, J. и

Lukas, C. (2009) RNF168 связывает и амплифицирует конъюгаты убиквитина на

поврежденных хромосомах, обеспечивая накопление репарационных белков. Мобильный

136, 435–446

12.Panier, S., and Durocher, D. (2009) Регуляторное убиквитилирование в ответ

на двухцепочечные разрывы ДНК. Ремонт ДНК 8, 436–443

13. Стюарт, Г.С., Панье, С., Таунсенд, К., Аль-Хаким, А.К., Колас, Н.К.,

Миллер, Е.С., Накада, С., Иланко, Дж. , Olivarius, S., Mendez, M., Oldreive, C.,

Wildenhain, J., Tagliaferro, A., Pelletier, L., Taubenheim, N., Durandy, A.,

Byrd, PJ, Stankovic , T., Taylor, AM, and Durocher, D. (2009). Белок синдрома

RIDDLE опосредует убиквитин-зависимый сигнальный каскад

в местах повреждения ДНК.Cell 136, 420–434

14. Sims, J. J., and Cohen, R. E. (2009) Связывающе-специфическая авидность определяет предпочтение связывания

лизин-63-связанного полиубиквитина rap80. Мол. Cell 33,

775–783

15. Сато, Ю., Йошикава, А., Мимура, Х., Ямасита, М., Ямагата, А., и

Фукаи, С. (2009) Структурная основа для специфическое распознавание Lys-63-связанных

полиубиквитиновых цепей тандемными UIM RAP80. EMBO J. 28, 2461–2468

16. Huen, M. S., Grant, R., Manke, I., Minn, K., Yu, X., Yaffe, MB, and Chen,

J. (2007) RNF8 трансдуцирует сигнал повреждения ДНК через повсеместное связывание гистонов и сборка белка контрольной точки. Cell 131, 901–914

17. Майланд, Н., Беккер-Йенсен, С., Фауструп, Х., Меландер, Ф., Бартек, Дж., Лу-

, кас, К., и Лукас, Дж. . (2007) RNF8 убиквитилирует гистоны по двойным разрывам цепи ДНК —

и способствует сборке белков репарации. Ячейка 131,

887–900

18.Колас, Н.К., Чепмен, Дж., Накада, С., Иланко, Дж., Чахван, Р., Суини,

Ф. Д., Панье, С., Мендес, М., Уилденхейн, Дж., Томсон, Т.М., Пеллетье, L.,

Джексон, С.П., и Дюрохер, Д. (2007) Оркестровка реакции на повреждение ДНК

с помощью убиквитинлигазы RNF8. Science 318, 1637–1640

19. Стюарт, Г.С., Станкович, Т., Берд, П.Дж., Векслер, Т., Миллер, Е.С., Хьюис-

,

Скоро, А., Дрейсон, М.Т., Вест, Южная Каролина, Элледж , SJ, и Тейлор, А.M. (2007)

RIDDLE Синдром иммунодефицита связан с дефектами передачи сигналов повреждения ДНК, опосредованного 53BP1-

. Proc. Natl. Акад. Sci. США 104,

16910–16915

20. Командер Д., Клэг М. Дж. И Урбе С. (2009) Разрыв цепей.

Структура и функции деубиквитиназ. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 10,

550–563

РИСУНОК 6. Ингибирование кэпирования и транслокации синтеза цепи Lys-63

sis посредством OTUB1.Схемы рисунков такие же, как на рис. 1. Ub окрашены в голубой,

розовый и красный цвета соответственно.

Кристаллическая структура комплекса OTUB1-UBC13-MMS2 человека

27 ИЮЛЯ, 2012 • ТОМ 287 • НОМЕР 31 ЖУРНАЛ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ 25867

гостем 21 декабря 2015 г. http://www.jbc.org/Скачано с

Кенийский исследователь получил престижную международную стипендию в UCT

Д-р Надя Чанзу будет исследовать, почему ВИЧ-положительные беременные женщины, получающие антиретровирусную терапию, подвергаются особому риску преждевременных родов, во время двухлетней стажировки в докторантуре UCT, спонсируемой Исследовательским фондом AXA.

По оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), в 2013 году около миллиона младенцев умерли из-за осложнений, связанных с преждевременными (преждевременными) родами. Для ВИЧ-инфицированных матерей риск преждевременных родов чрезвычайно высок, что подвергает этих детей риску учащения случаев заболеваний и смерти. Чтобы разработать альтернативные методы лечения, чтобы противостоять этому риску, ученым необходимо лучше понять хрупкий иммунный баланс между ВИЧ-инфицированной матерью и ее развивающимся ребенком.Именно для этого Исследовательский фонд AXA предоставил д-ру Надии Чанзу, в настоящее время научному сотруднику детской больницы Гертруды в Кении, престижную двухлетнюю стипендию для младших (постдокторских) в Институте инфекционных болезней и молекулярной медицины UCT.

AXA Research Fund, подразделение глобального страхового бренда, занимающееся финансированием исследований, стремится внести свой вклад в лучшее понимание и предотвращение рисков во всем мире, включая экологические, жизни и социально-экономические риски.Стипендии — один из инструментов, с помощью которых они пытаются достичь этой цели. Чанзу — первый африканский исследователь в африканском университете, удостоенный этой престижной и конкурентоспособной стипендии.

Научный совет AXA, присуждая стипендию Чанзу, охарактеризовал ее как «очень многообещающего молодого ученого» со «значительным потенциалом».

«Это большая честь», — говорит Чанзу, которая среди лучших в своем классе окончила университет Найроби в Кении по медицинской биохимии, получила степень магистра биомедицинских наук в Кингстонском университете в Лондоне (Великобритания) и продолжила учебу. защитила докторскую диссертацию в Институте тропических и инфекционных болезней Университета Найроби, получив грант Международного исследовательского центра развития (IDRC), Канада.Чанзу также является выпускником престижной Международной программы по инфекционным заболеваниям и глобальной медицинской помощи (IID & GHTP) престижных канадских институтов исследований в области здравоохранения, которая спонсирует выдающихся стажеров со степенью доктора философии в Канаде, Колумбии, Кении и Индии.

«Я использую это время, чтобы улучшить свои знания, навыки и опыт и в конечном итоге внести свой вклад в продвижение исследовательской программы в моей стране».

По статистике ВОЗ, тридцать пять миллионов человек во всем мире ВИЧ-инфицированы: из них почти 71% живут в странах Африки к югу от Сахары, что делает исследования Чанзу особенно актуальными для континента.

Сегодня с ВИЧ можно успешно справиться с помощью антиретровирусной терапии (АРТ): однако, по словам Чанзу, воздействие АРТ, наряду с ВИЧ, по-видимому, увеличивает риск преждевременных родов.

«Плацента — единственное связующее звено между развивающимся ребенком и его матерью», — объясняет она. «Но поскольку ребенок унаследует некоторые компоненты от своего отца — компоненты, чуждые матери, — ребенок и мать рискуют отвергнуть друг друга».

Следовательно, для успешной беременности требуется хрупкий иммунный баланс между матерью и ребенком — баланс, который может нарушить ВИЧ и АРТ.

«Мое исследование направлено на выявление некоторых измененных иммунных механизмов в плаценте ВИЧ-инфицированных женщин по сравнению с таковыми у ВИЧ-отрицательных матерей, чтобы лучше понять иммунную основу преждевременных родов у ВИЧ-инфицированных женщин».

Исследование Чанзу окажет прямое влияние на общественное здоровье, и мы надеемся, что оно станет основой для информирования об альтернативных методах лечения и снижения рисков, связанных с беременностью у ВИЧ-инфицированных матерей. Она говорит, что Южная Африка и, в частности, UCT — идеальное место для нее для продолжения этого исследования.

«Южная Африка превратилась в центр новаторских исследований в области профилактики ВИЧ, в которых работают некоторые из ведущих мировых экспертов по инфекционным заболеваниям в Университете Кейптауна», — говорит она. «Возможность пройти стипендию AXA в UCT в отделении иммунологии под руководством профессора Клайва Грея и доктора Хизер Джаспан даст мне доступ к передовым технологиям и опыту, которых в настоящее время не хватает в моей родной стране, Кении. . »

По рассказу Натали Саймон

---

---

Молекулярное клонирование и функциональная характеристика переносчика глюкозы, CaHGT1, Candida albicans | Письма о микробиологии FEMS

Аннотация

Мы клонировали первый переносчик глюкозы CaHGT1 ( C andida a lbicans h high-affinity g luosis t ransporter) патогенных дрожжей Candida albicans 969.Анализ последовательности ДНК (номер доступа GenBank Y16834) выявил ORF, кодирующую новый белок из 545 аминокислот с предсказанной молекулярной массой 60,67 кДа. Предполагаемый белок с 12 трансмембранными доменами имеет 51% идентичность с высокоаффинным переносчиком глюкозы Kluyveromyces lactis , HGT1 . Белковые сигнатуры, которые являются консервативными и отличительными от переносчиков сахара, принадлежащих к суперсемейству основных фасилитаторов (MFS), также были обнаружены в CaHgt1p. При гетерологичной экспрессии ORF функционально дополняла мутантный штамм Saccharomyces cerevisiae RE700A, который был удален в семи генах транспортера гексозы и, таким образом, был неспособен расти или транспортировать глюкозу.Экспрессия CaHGT1 в C. albicans показала транскрипт размером 1,6 т.п.н., который усиливался в ответ на стероидный гормон человека прогестерон. Интересно, что уровни транскриптов также повышались в присутствии лекарств, например циклогексимид, хлорамфеникол и беномил. Результаты показывают, что CaHGT1 , который кодирует белок MFS, может быть связан с феноменом лекарственной устойчивости у C. albicans .

1 Введение

Candida albicans — это условно-патогенные, инфекционные патогенные дрожжи, которые особенно поражают пациентов с ослабленным иммунитетом, таких как СПИД, и пациентов с трансплантацией органов [1,2].Представляет значительный интерес понимание механизмов регуляции роста и морфогенеза этих дрожжей, на которые влияют несколько факторов, включая источники углерода [2,3]. Имеются данные, позволяющие предположить, что C. albicans накапливает ряд сахаров, таких как L-сорбоза, D-ксилоза, D- и L-арабиноза, против градиентов концентрации [4,3]. Однако, в отличие от других дрожжей, работа над транспортом сахара и транспортерами C. albicans все еще находится на начальной стадии, и требуется глубокое исследование, чтобы понять механизмы, лежащие в основе транспорта сахаров.

Появление устойчивости к противогрибковым препаратам у C. albicans стало серьезной угрозой эффективности химиотерапии при лечении инфекции. К настоящему времени идентифицировано несколько генов, экспрессия которых связана с устойчивостью к азолам [5–7]. То, как эти гены регулируются, активно исследуется, и такие факторы транскрипции, как FCR (устойчивость к флуконазолу) 1,2,3 и CAP1 ( C. albicans AP-1 ), регулирующие гены MDR C. albicans , имеют идентифицированы [8].Хорошо изученные дрожжи Saccharomyces cerevisiae , геном которых полностью секвенирован, выявили несколько генов, участвующих в устойчивости к плейотропным препаратам (PDR), а также несколько факторов транскрипции, которые регулируют их экспрессию [9,10]. Интересно, что два предполагаемых транспортера сахара, то есть HXT9 и HXT11 , регулируются факторами транскрипции, PDR1 и PDR3 , которые, как известно, регулируют PDR генов S. cerevisiae [11].Также было показано, что облегчающий переносчик глюкозы GLUT1 участвует в развитии лекарственной устойчивости в клетках млекопитающих [12].

В этой статье описывается молекулярное клонирование первого гена переносчика глюкозы, CaHGT1 ( C andida a lbicans h с высоким сродством g luosis t 6869 C. albicans 69 C. albicans). . Используя гетерологичную экспрессию в мутантном штамме S. cerevisiae RE700A, продемонстрирована функциональность CaHGT1 .Он кодирует высокоаффинный переносчик глюкозы. Кроме того, показано усиление транскрипта CaHGT1 в ответ на человеческий стероидный гормон прогестерон и лекарства. Результаты предполагают, что CaHGT1 , который кодирует белок суперсемейства главного фасилитатора (MFS), может быть связан с феноменом лекарственной устойчивости у C. albicans .

2 Материалы и методы

2.1 Штаммы и среды

С.albicans ATCC 10261 выращивали на среде YEPD (2% бакто-пептон, 1% дрожжевой экстракт и 2% D-глюкоза). Мутант с дефицитом транспорта глюкозы S. cerevisiae RE700A ( MAT a ura3-52 hxt1 Δ :: HIS3 :: Δ hxt4 hxt5 :: LEU2 hxt2 ΔIS hxt3 Δ :: LEU2 :: Δ hxt6 hxt7 :: HIS3 ) [13] поддерживали на среде YEP, содержащей 2% мальтозы. RE700A трансформировали вектором экспрессии pYEX-BX, содержащим CaHGT1 ниже промотора CUP 1.Трансформант отбирали на минимальной среде YNB, состоящей из 0,67% дрожжевого азотного основания и 2% источника углерода (мальтоза или D-глюкоза) с добавлением соответствующих аминокислот без урацила. Плазмиду pYEX-BX индуцировали добавлением 0,5 мМ сульфата меди. Трансформацию S. cerevisiae RE700A и выделение плазмиды из трансформантов проводили, как описано в другом месте [14].

2.2 Маркировка методом ПЦР и DIG

CaHGT1 клонировали путем амплификации C.albicans с помощью ПЦР с использованием праймеров: прямой праймер: 5′-ATGATGTTAGGTTTTGATATTTCTTCAATG-3 ‘, обратный праймер: 5′-CCCAATAATCAATTGAGCACGATTTTGAAC-3’, созданный из неопубликованной частичной последовательности предполагаемого транспортера сахара (http: //www.alces.med.umn.edu). Продукт ПЦР (260 п.н.) лигировали в виде фрагмента с тупым концом (Sure Clone Ligation Kit, Pharmacia, Фрайбург, Германия) с pUC18, расщепленной Sma I (Pharmacia). Его секвенировали и использовали в качестве зонда для гибридизации по Саузерну.Все зонды, использованные в Саузерн-блоттинге, были помечены дигоксигенин-11-dUTP (DIG) с использованием метода случайных праймеров с помощью набора для маркировки ДНК DIG от Boehringer Mannheim.

2.3 Субклонирование и секвенирование

Геномная ДНК Фрагменты Hin dIII были лигированы с Hin, dIII-гидролизованная pUC18 и Hin cII-фрагменты из фосмид были лигированы с Sma I-расщепленной pUC18. Конструкции использовали для трансформации клеток Escherichia coli XL1 Blue.Плазмиды, выделенные из полученных трансформированных колоний, подвергали скринингу методом гибридизации по Саузерну. Субклоны были получены с использованием сайтов рестрикционных ферментов, очерченных рестрикционным картированием. Эти положительные субклоны секвенировали методом терминации дидезоксигруппы с использованием двухцепочечной плазмидной ДНК в качестве матрицы [15].

Сайт Bam HI был размещен перед предполагаемым стартовым кодоном CaHGT1 ATG (5′-ATAATCTCAA GGATCC ATGTCGTCCAA), а сайт Pst IATAT был размещен ниже стоп-кодона 3G’-UATAGA CTGCAG CTTCAATTCTTCA) путем ПЦР-амплификации клона pAV- CaHGT1 , содержащего полную ORF CaHGT1. Полученный продукт ПЦР дважды расщепляли Bam HI и Pst I, а затем лигировали с вектором экспрессии дрожжей pYEX-BX, дважды расщепленным Bam HI и Pst I ниже CUP 1 промоутер.

2.4 Экстракция РНК и Нозерн-блоттинг

Выделение тотальной РНК из клеток C. albicans и и Нозерн-анализы были, как описано ранее [5].

2.5 Анализы поглощения и накопления глюкозы

Клетки выращивали до средней экспоненциальной фазы (15–16 ч), собирали, промывали дистиллированной водой и инкубировали при 30 ° C в течение 2 часов в свежей среде, содержащей 0,1% D-глюкозы. Потребление D-глюкозы из среды оценивали ферментативно, как описано Bergmeyer [16].

2.6 Регистрационный номер нуклеотидной последовательности

Нуклеотидной последовательности CaHGT1 присвоен номер доступа GenBank Y16834.

3 Результаты и обсуждение

3.1 Выделение

гена C. albicans CaHGT1

Частичная неопубликованная последовательность ДНК (http://www.alces.med.umn.edu) предполагаемого переносчика глюкозы HGT1 из C. albicans была использована для создания двух олигонуклеотидных праймеров. В условиях высокой строгости эти праймеры использовали для ПЦР-амплификации с геномной ДНК C. albicans ATCC 10261. Очищенный продукт ПЦР ожидаемого размера (260 п.н.) клонировали в вектор pUC18.Два положительных клона были секвенированы и оказались идентичными, оба показали 85% идентичность последовательности с высокоаффинным переносчиком глюкозы HGT1 из Kluyveromyces lactis . Вставку из одного из этих клонов использовали в качестве зонда для гибридизации геномной ДНК по Саузерну. Положительную полосу размером ~ 3 т.п.н. клонировали в pUC18 (pAV1) и использовали для дальнейшей характеристики. Анализ последовательности ДНК pAV1 выявил неполную ORF в клонированной вставке размером 3 т.п.н. с гомологией с HGT1 из K.lactis и гены транспортера гексозы ( HXT s) из S. cerevisiae [17,18], и было обнаружено, что они локализованы на хромосоме I. Для клонирования полной ORF соответствующая фосмидная библиотека C. albicans [19], содержащий фрагменты хромосомы I, подвергали скринингу с использованием субфрагмента 1 kb Eco RI- Hin dIII pAV1 (pAV4, фиг. 1A) в качестве зонда. Саузерн-анализ дал две положительные полосы размером 4,2 т.п.н. и 2 т.п.н. от фосмид 11D6 и 18B4. 4.Фрагмент Hin cII размером 2 kb был дополнительно субклонирован в pUC18 по сайту Sma I (pAV2) (фиг. 1A). Анализ последовательности ДНК pAV2 показал, что pAV1 и pAV2 имели 100% идентичность в перекрывающейся области (фиг. 1A). Чтобы реконструировать полную ORF, Eco RV- Kpn I фрагмент pAV1 был лигирован с pAV2, расщепленным Eco RV- Kpn I ( Kpn I MCS pUC18), что привело к pAV- CaHGT1 , который при анализе последовательности показал полную открытую рамку считывания, содержащую 545 аминокислот (рис.1Б). Расчетная молекулярная масса белка составляет 60,67 кДа.

1

Последовательность и гидрофобность CaHGT1 . A: Ограничительная карта CaHGT1 из C. albicans . Жирная стрелка указывает на открытую рамку считывания. Плазмида pAV1 представляет собой усеченный геномный клон, pAV2 представляет собой хромосомный фрагмент, полученный после скрининга библиотеки фосмид. Плазмида pAV4 представляет собой субклон, используемый в качестве зонда в анализе по Саузерну.pAV- CaHGT1 представляет собой плазмиду, содержащую полную ORF, полученную после лигирования Eco RV- Kpn I фрагмента pAV1 в pAV2, расщепленную Eco RV- Kpn I. E: Eco RI; ERV: Eco RV; H: Hin dIII; Hc: Hin cII; K: Kpn I; *: стоп-кодон. B: нуклеотидная и выведенная аминокислотная последовательность CaHGT1 . Поле TATA выделено жирным шрифтом и подчеркнуто. Различные предполагаемые элементы выделены жирным шрифтом, а стоп-кодон обозначен *.C: График гидрофобности CaHGT1 из C. albicans . График был построен на основе значений гидрофобности, определенных для каждого остатка методом Eisenberg et al. [20] с использованием окна размером 15 остатков.

1

Последовательность и гидрофобность CaHGT1 . A: Ограничительная карта CaHGT1 из C. albicans . Жирная стрелка указывает на открытую рамку считывания. Плазмида pAV1 представляет собой усеченный геномный клон, pAV2 представляет собой хромосомный фрагмент, полученный после скрининга библиотеки фосмид.Плазмида pAV4 представляет собой субклон, используемый в качестве зонда в анализе по Саузерну. pAV- CaHGT1 представляет собой плазмиду, содержащую полную ORF, полученную после лигирования Eco RV- Kpn I фрагмента pAV1 в pAV2, расщепленную Eco RV- Kpn I. E: Eco RI; ERV: Eco RV; H: Hin dIII; Hc: Hin cII; K: Kpn I; *: стоп-кодон. B: нуклеотидная и выведенная аминокислотная последовательность CaHGT1 .Поле TATA выделено жирным шрифтом и подчеркнуто. Различные предполагаемые элементы выделены жирным шрифтом, а стоп-кодон обозначен *. C: График гидрофобности CaHGT1 из C. albicans . График был построен на основе значений гидрофобности, определенных для каждого остатка методом Eisenberg et al. [20] с использованием окна размером 15 остатков.

3.2 Анализ последовательности гена

CaHGT1

Существенное сходство последовательностей наблюдалось между клонированной ORF и членами семейств переносчиков глюкозы S.cerevisiae и Schizosaccharomyces pombe [17,18]. Наибольшее сходство (51% идентичность) наблюдалось с HGT1 , высокоаффинным переносчиком глюкозы K. lactis , и поэтому ген был обозначен CaHGT1 . Значения гидрофобности, определенные для каждого остатка методом Eisenberg et al. использование окна размером 15 остатков [20] показало присутствие 12 предполагаемых трансмембранных (TM) доменов (Fig. 1C), характерную черту суперсемейства главных фасилитаторов [21].Выравнивание аминокислотных последовательностей CaHGT1 (инвентарный номер Y16834) C. albicans с HGT1 (инвентарный номер U22525) K. lactis ; GHT1 (инвентарный номер X

), GHT2 (инвентарный номер AF017180) и GHT3 (инвентарный номер AF051139) из S. pombe ; HXT1 (инвентарный номер U00060) и HXT2 (инвентарный номер M33270) S. cerevisiae; Датчик глюкозы S.cerevisiae [24], сгенерированный с использованием программы CLUSTALW (данные не показаны), выявил консервативную подпись (IDKVGRRPLLIGG), типичную для сахарных фасилитаторов (MFS) [21]. Сходство последовательностей переносчиков глюкозы от дрожжей к человеку оправдывает тесную связь CaHgt1p с высокоаффинным переносчиком глюкозы Hgt1p K. lactis . На дендрограмме (данные не показаны) CaHGT1 и HGT1 из K. lactis образуют отдельное семейство транспортеров, которое меньше связано с группой Hxtp из S.cerevisiae , чем кластер переносчиков гексозы, представленный членами Ghtp из S. pombe [23,24]

Анализ нуклеотидной последовательности выявил присутствие ТАТА-подобного мотива в положении -107 с коррелированным сигналом CAP, как оценивалось с использованием Алгоритм EUKPROM (PC Gene, IntelliGenetics). Было обнаружено, что 5′-область, расположенная выше кодона инициации, является A + T-богатой и несет в себе ряд регуляторных элементов. Наиболее поразительным было присутствие предполагаемого элемента ответа прогестерона / глюкокортикоидов (PRE, GRE: AGAACA) при -718 и предполагаемого элемента ответа эстрогена (ERE: TGACAT) при -453 по отношению к ATG [22].Предполагаемый элемент феромонного ответа (PhRE: TGTAAAAA) также был обнаружен в положении -991. Предполагаемые элементы PDR1 и PDR3 , которые присутствуют в HXT9 и HXT11 из S. cerevisiae , отсутствовали в промоторе CaHGT1 .

3,3

CaHGT1 может дополнять дефект транспорта глюкозы при экспрессии в S. cerevisiae

Чтобы проверить функциональность клонированного предполагаемого переносчика глюкозы, штамм RE700A S.cerevisiae , который лишен HXT1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7 [13], был использован для гетерологичной экспрессии гена CaHGT1 . ORF CaHGT1 помещали под индуцируемый медью промотор ( CUP1 ) в векторе экспрессии pYEX-BX с URA3 в качестве ауксотрофного селектируемого маркера. Конструкцию экспрессии pYEX- CaHGT1 использовали для трансформации RE700A, получая несколько колоний на среде, содержащей 2% мальтозы без урацила.Затем эти колонии проверяли на рост на глюкозе. Трансформанты показали рост на глюкозе, в то время как RE700A и его трансформант, содержащий пустой вектор pYEX-BX, не показали роста на глюкозе (фиг. 2A). Чтобы подтвердить, что фенотип основан на плазмиде, один из трансформантов, AVY701, выращивали в неселективных условиях (2% мальтоза + урацил) в течение нескольких поколений, а затем высевали на глюкозосодержащую среду без урацила, где несколько колоний не работали. расти (данные не показаны).Это подтвердило, что рост AVY701 на глюкозе обеспечивается плазмидой pYEX- CaHGT1 .

2

Функциональный анализ CaHGT1 . A: Рост AVY701. Сравнение роста трансформантов AVY701, RE700A и RE700A + вектор (pYEX-BX) на 2% глюкозе без урацила. B: потребление D-глюкозы векторами AVY701, RE700A и RE700A +. (▿) RE700A; (●) AVY701; (▪) RE700A + вектор; (♦) потребление D-глюкозы AVY701 в присутствии трехкратного избытка D-галактозы.Трансформированный штамм AVY701 выращивали в среде YNB, содержащей 2% глюкозы без урацила; RE700A, содержащий пустой вектор, выращивали в YNB, содержащем 2% мальтозу без урацила; и RE700A выращивали в YNB, содержащем 2% мальтозы с урацилом. После сбора клетки промывали YNB и переносили в свежий YNB на 2 часа. Ферментативный анализ потребления D-глюкозы проводили, как описано Бергмейером [16].

2

Функциональный анализ CaHGT1 . A: Рост AVY701.Сравнение роста трансформантов AVY701, RE700A и RE700A + вектор (pYEX-BX) на 2% глюкозе без урацила. B: потребление D-глюкозы векторами AVY701, RE700A и RE700A +. (▿) RE700A; (●) AVY701; (▪) RE700A + вектор; (♦) потребление D-глюкозы AVY701 в присутствии трехкратного избытка D-галактозы. Трансформированный штамм AVY701 выращивали в среде YNB, содержащей 2% глюкозы без урацила; RE700A, содержащий пустой вектор, выращивали в YNB, содержащем 2% мальтозу без урацила; и RE700A выращивали в YNB, содержащем 2% мальтозы с урацилом.После сбора клетки промывали YNB и переносили в свежий YNB на 2 часа. Ферментативный анализ потребления D-глюкозы проводили, как описано Бергмейером [16].

Транспорт и специфичность глюкозы определяли ферментативно, отслеживая ее потребление из среды (рис. 2В). Стабильное потребление глюкозы было продемонстрировано трансформантом AVY701, которое было сопоставимым даже в присутствии трехкратного избытка D-галактозы. Это подтвердило, что наблюдаемое потребление D-глюкозы опосредовано конкретным гетерологично экспрессируемым C.albicans переносчик глюкозы, CaHgt1p. Кажущееся значение K _T в диапазоне 1 мМ было получено из графика Лайнуивера-Берка (данные не показаны). Основываясь на значениях K _T других переносчиков гексозы [25,26], это могло бы означать, что продукт гена CaHGT1 кодирует высокоаффинный переносчик глюкозы.

3,4

Экспрессия CaHGT1 может быть индуцирована прогестероном и лекарствами

Нозерн-блот-анализ показал, что C.albicans , инкубированные с 1 мМ прогестероном в течение 15 мин, демонстрировали повышенную экспрессию CaHGT1 (фиг. 3A, дорожка 3) по сравнению с контролем (дорожка 1). β-Эстрадиол, с другой стороны, не влиял на экспрессию CaHGT1 (дорожка 2). Интересно, что когда клеток C. albicans были предварительно инкубированы с различными лекарственными средствами, а именно. беномил, хлорамфеникол, циклогексимид, миконазол и 4-нитрохинолин- N -оксид, экспрессия CaHGT1 повышалась при инкубации только с циклогексимидом, беномилом и хлорамфениколом.Для сравнения, увеличение экспрессии было максимальным при использовании циклогексимида (фиг. 3B).

3

Исследования экспрессии CaHGT1 . A: Экспрессия CaHGT1 в ответ на стероидные гормоны человека. Клетки C. albicans выращивали до средней экспоненциальной фазы (10 ч) в YEPD при 30 ° C и индуцировали 1 мМ β-эстрадиолом или 1 мМ прогестероном в течение 15 мин. Тотальную РНК выделяли из индуцированных клеток [5]. Дорожка 1: контрольная РНК без какой-либо стероидной индукции; полоса 2: образец РНК из клеток, обработанных β-эстрадиолом; дорожка 3: образец РНК из клеток, обработанных прогестероном.На нижней панели (ii) показана нагрузка геля (25S рРНК) панели i. B: Экспрессия CaHGT1 в ответ на лекарства. Клетки C. albicans выращивали до средней экспоненциальной фазы (10 ч) в YEPD при 30 ° C и индуцировали различными лекарственными средствами, например беномилом (Бен) 75 мкг мл ^-1 , хлорамфениколом (Chl) 1 мг мл ^-1 , циклогексимид (Cyh) 1 мкг мл ^-1 , миконазол (Mic) 100 мкг мл ^-1 и 4-нитрохинолин- N -оксид (Nqo) 10 мкг мл ¹ в течение 30 мин.Тотальную РНК выделяли из индуцированных клеток [10]. Дорожка 1: контрольная РНК; дорожка 2: Бен-индуцированная РНК; полоса 3: Chl-индуцированная РНК; полоса 4: Cyh-индуцированная РНК; дорожка 5: Mic-индуцированная РНК; полоса 6: Nqo-индуцированная РНК. На нижней панели (ii) показана нагрузка геля (25S рРНК) панели i.

3

Исследования экспрессии CaHGT1 . A: Экспрессия CaHGT1 в ответ на стероидные гормоны человека. Клетки C. albicans выращивали до средней экспоненциальной фазы (10 ч) в YEPD при 30 ° C и индуцировали 1 мМ β-эстрадиолом или 1 мМ прогестероном в течение 15 мин.Тотальную РНК выделяли из индуцированных клеток [5]. Дорожка 1: контрольная РНК без какой-либо стероидной индукции; полоса 2: образец РНК из клеток, обработанных β-эстрадиолом; дорожка 3: образец РНК из клеток, обработанных прогестероном. На нижней панели (ii) показана нагрузка геля (25S рРНК) панели i. B: Экспрессия CaHGT1 в ответ на лекарства. Клетки C. albicans выращивали до средней экспоненциальной фазы (10 ч) в YEPD при 30 ° C и индуцировали различными лекарственными средствами, например беномилом (Бен) 75 мкг мл ^-1 , хлорамфениколом (Chl) 1 мг мл ^-1 , циклогексимид (Cyh) 1 мкг мл ^-1 , миконазол (Mic) 100 мкг мл ^-1 и 4-нитрохинолин- N -оксид (Nqo) 10 мкг мл ¹ в течение 30 мин.Тотальную РНК выделяли из индуцированных клеток [10]. Дорожка 1: контрольная РНК; дорожка 2: Бен-индуцированная РНК; полоса 3: Chl-индуцированная РНК; полоса 4: Cyh-индуцированная РНК; дорожка 5: Mic-индуцированная РНК; полоса 6: Nqo-индуцированная РНК. На нижней панели (ii) показана нагрузка геля (25S рРНК) панели i.

Более ранние исследования показали, что белок MFS и способствующий переносчик глюкозы (Glut1p) клеток млекопитающих [12] могут участвовать в развитии лекарственной устойчивости. Кроме того, HXT9 и HXT11 регулируются факторами транскрипции PDR1 и PDR3 , которые регулируют переносчики ABC, необходимые для устойчивости дрожжей к лекарствам.Индуцированная экспрессия CaHGT1 лекарственными средствами указывает на общность этих белков MFS. Остается установить, регулируются ли CaHgt1p и несколько др. Предполагаемых переносчиков глюкозы C. albicans (http://www.alces.med.umn.edu) регуляторами ABC. Возникает соблазн предположить, что изучение генов-переносчиков сахара и их регуляции приведет к лучшему пониманию регуляции лекарственной чувствительности C. albicans .

Было обнаружено, что стероидные гормоны млекопитающих из микроокружения влияют на рост и морфогенез вторгшихся C.albicans [27]. Кроме того, эстроген-связывающие белки (EBP) были идентифицированы в C. albicans [28], которые связывают эстроген с высоким сродством, стимулируя переход от дрожжевой к мицелиальной форме [27]. Также было высказано предположение о взаимодействии некоторых азолов, таких как кетоконазол, с рецептором кортикостероидов и связывающим белком. Ранее мы сообщали, что стероидные гормоны человека могут активировать экспрессию транспортера ABC, CDR1 (устойчивость к лекарствам Candida ) [5,14].В этом исследовании мы также показываем, что прогестерон также может транскрипционно активировать экспрессию транспортера MFS CaHGT1 . Механизм, лежащий в основе стероид-опосредованной регуляции генов у дрожжей, не ясен. Стоит отметить, что элементы стероидного ответа действительно существуют в генах Candida (http://www.alces.med.umn.edu), хотя, в отличие от их аналогов у млекопитающих, они существуют не в виде палиндромных повторов, а только как половина одного. Это, однако, может означать, что Candida может нести уникальный каскад стероидных рецепторов, который остается неидентифицированным.Этот аспект регуляции генов, опосредованный стероидными гормонами человека в C. albicans , исследуется.

Благодарности

Работа в лаборатории RP поддержана грантами Департамента биотехнологии (DBT) (BT / R и D / 15/02/94), Департамента науки и технологий (SP / SO / D57 / 97), Совета of Scientific, Industrial Research (60 (0028) / 98-EMR-II), Индия, и из совместного гранта RP и MH от Европейской комиссии (TS3-CT94-0279).Работа в лаборатории B.B.M. был поддержан грантом Национального института аллергии и инфекционных заболеваний (AI16567). СРЕДНИЙ. и Н.К. являются получателями стипендий для старших исследователей, присуждаемых Комиссией по университетским грантам правительства Индии.

Список литературы

[1]

(

1994

)

Надзор за инфекционными заболеваниями: фундамент рушится

.

Наука

264

,

368

—

370

.[2]

(

1991

)

Candida albicans : Клеточная и молекулярная биология

.

Springer-Verlag

,

Берлин

. [3]

(

1987

)

Транспорт питательных веществ в Candida albicans , патогенных дрожжах

.

Дрожжи

3

,

209

—

221

. [4]

(

1969

)

Активный и пассивный транспорт моносахаридов в Candida albicans

.

Antonie van Leeuwenhoek

Yeast Symposium

(

Suppl.

),

11

—

12

. [5]

(

1998

)

Экспрессия CDR1 , гена множественной лекарственной устойчивости Candida albicans : активация транскрипции тепловым шоком, лекарствами и стероидными гормонами человека

.

FEMS Microbiol. Lett.

160

,

191

—

197

. [6]

(

1997

)

Клонирование Candida albicans генов, придающих устойчивость к азольным противогрибковым агентам: характеристика CDR2, нового гена-переносчика ABC с множеством лекарственных препаратов

.

Микробиология

143

(

2

),

405

—

416

. [7]

(

1998

)

Клинические, клеточные и молекулярные факторы, способствующие устойчивости к противогрибковым препаратам

.

Clin. Microbiol. Ред.

11

,

382

—

402

. [8]

(

1999

)

Выделение предполагаемого регулятора транскрипции Candida albicans , участвующего в устойчивости к плейотропным лекарственным средствам, путем функциональной комплементации мутации pdr1 pdr3 в Saccharomyces cerevisiae

.

J. Bacteriol.

181

,

231

—

240

. [9]

(

1995

)

Множественная лекарственная устойчивость дрожжей: сеть PDR

.

J. Bioenerg. Биомембр.

27

,

71

—

76

. [10]

(

1994

)

PDR3 , новый регуляторный ген дрожжей, гомологичен PDR1 и контролирует феномен множественной лекарственной устойчивости

.

Мол. Genet Genet.

244

,

501

—

511

. [11]

(

1997

)

Феномен множественной лекарственной устойчивости у дрожжей Saccharomyces cerevisiae : участие двух транспортеров гексозы

.

Мол. Клетка. Биол.

17

,

5453

—

5460

. [12]

(

1991

)

Возможная роль облегчающего переносчика гексозы млекопитающих в развитии устойчивости к лекарственным средствам

.

Мол. Клетка. Биол.

11

,

3407

—

3418

. [13]

(

1995

)

Идентификация новых генов HXT в Saccharomyces cerevisiae показывает влияние отдельных переносчиков гексозы на гликолитический поток

.

Мол. Microbiol.

16

,

157

—

167

. [14]

(

1995

)

Молекулярное клонирование и характеристика нового гена C.albicans , CDR1 , придающие множественную устойчивость к лекарствам и противогрибковым средствам

.

Curr. Genet.

27

,

320

—

329

. [15]

(

1977

)

Секвенирование ДНК с помощью ингибиторов обрыва цепи

.

Proc. Natl. Акад. Sci. США

74

,

5463

—

5467

. [16]

(

1962

)

Methoden der Enzymatischen Analyze

.

Verlag Chemie

,

Weinheim

. [17]

(

1997

)

Молекулярная генетика транспорта гексозы у дрожжей

.

FEMS Microbiol. Ред.

21

,

85

—

111

. [18]

(

1998

)

Единый перечень установленных и предполагаемых переносчиков, закодированных в полном геноме Saccharomyces cerevisiae

.

FEBS Lett.

00

,

1

—

10

. [19]

(

1993

)

Построение Sfi I макрорестрикционной карты генома Candida albicans

.

J. Bacteriol.

175

,

6637

—

6651

. [20]

(

1984

)

Анализ последовательностей мембранных и поверхностных белков с графиком гидрофобного момента

.

J. Mol. Биол.

179

,

125

—

142

. [21]

(

1993

)

Основное суперсемейство трансмембранных фасилитаторов, которые катализируют унипорт, симпорт и антипорт

.

Trends Biochem. Sci.

18

,

13

—

20

. [22]

(

1994

)

Молекулярные механизмы действия членов суперсемейства стероидных / тироидных рецепторов

.

Annu. Rev. Biochem.

63

,

451

—

486

. [23]

(

1997

)

Свойства и гетерологичная экспрессия переносчика глюкозы GHT1 из Schizosaccharomyces pombe

.

Дрожжи

13

,

215

—

224

. [24]

(

1996

)

Два транспортера глюкозы в Saccharomyces cerevisiae являются сенсорами глюкозы, которые генерируют сигнал для индукции экспрессии гена

.

Proc. Natl. Акад. Sci. США

93

,

12428

—

12432

. [25]

(

1996

)

Поглощение глюкозы Kluyveromyces lactis : роль гена HGT1 в транспорте глюкозы

.

J. Bacteriol.

178

,

5860

—

5866

. [26]

(

1997

)

Кинетическая характеристика индивидуальных переносчиков гексозы Saccharomyces cerevisiae и их связь с запускающими механизмами репрессии глюкозы

.

Eur. J. Biochem.

176

,

953

—

958

. [27]

(

1997

)

Candida albicans на морфогенез влияет эстроген

.

Cell Mol. Life Sci.

53

,

744

—

749

. [28]

(

1989

)

Характеристика связывающего эстроген белка в дрожжах Candida albicans

.

Эндокринология

124

,

1965

—

1972

.

© 2000 Федерация европейских микробиологических обществ

Болезнь Паркинсона. От клинических аспектов к молекулярной основе

Об этих разбирательствах

Введение

В этой статье рассматриваются последние достижения в исследованиях болезни Паркинсона.Он содержит обзорные статьи от фундаментальных до клинических исследований, включая историческое введение и молекулярно-биологический подход к болезни Паркинсона. Болезнь Паркинсона — наиболее типичное нейродегенеративное заболевание, связанное с возрастом. Клинически он характеризуется двигательными нарушениями, такими как мышечная ригидность, акинезия и тремор. Выяснение его биохимических и молекулярных механизмов быстро продвигается и, как ожидается, внесет вклад в понимание нормального старения мозга в целом.Этот проект поддерживается грантом на научные исследования в приоритетных областях «Молекулярная биология двигательной системы» Министерства образования, науки и культуры Японии в течение 3 лет с 1987 по 1989 год. Мы благодарны за предоставленную информацию. служба поддержки. Эти обзоры являются частью работ, поддержанных грантом. Характерными чертами этого исследовательского проекта по болезни Паркинсона являются междисциплинарный подход от фундаментальной молекулярной биологии до клинической медицины, и ожидается, что молекулярно-биологический подход будет наиболее многообещающим для выяснения патогенеза.Сотрудничество и обсуждение фундаментальных и клинических исследователей в рамках этого проекта приоритетной области было эффективным и продуктивным. Мы надеемся, что эта книга может ознаменовать еще одну новую веху в исследованиях болезни Парка, болезни Озона и нейробиологии. Мы очень благодарны Nippon Schering за их щедрую поддержку публикации этой книги. И последнее, но не менее важное: мы благодарим компанию Springer-Verlag Wien New York за отличное издание этой книги и прекрасное сотрудничество.

Ключевые слова

Болезнь Паркинсона, метаболизм дофамина, патофизиология, физиология, исследование, трансплантация

Редакторы и сотрудники

• Тошихару Нагацу
• Хиротаро Нарабаяши
• Мицуо Йошида

1. 1.Кафедра нейрохимии Университет здоровья Фудзита Айти, Япония
2. 2. Неврологическая клиника, Токио, Япония
3. 3. Кафедра неврологии, Медицинская школа Джичи, Точиги-кен, Япония,
,

Библиографическая информация

• Название книги Болезнь Паркинсона. От клинических аспектов к молекулярной основе
• Редакторы Тошихару Нагацу
  Хиротаро Нарабаяши
  Мицуо Ёсида
  
• Название серии Ключевые темы исследований мозга
• DOI https: // doi.org / 10.1007 / 978-3-7091-9146-0
• Информация об авторских правах Springer-Verlag Вена 1991
• Имя издателя Шпрингер, Вена
• электронные книги Архив книг Springer
• ISBN в мягкой обложке 978-3-211-82272-2
• электронная книга ISBN 978-3-7091-9146-0
• Серия ISSN 0934-1420
• Номер издания 1
• Число страниц VIII, 220
• Количество иллюстраций 54 ч / б иллюстрации, 0 цветных иллюстраций
• Темы Неврология
  Неврология
  Фармакология / токсикология
  
• Купить эту книгу на сайте издателя

.

Биохимия ггтп: Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)