Содержание

Салициловая кислота от лишая: лечение, применение

Если на коже появился лишай, не обязательно бежать в аптеку за дорогостоящими лекарствами. Есть мнение, что салициловая кислота от лишая избавляется не хуже, чем знаменитые дерматологические средства. Салициловая кислота — дешевое и эффективное лекарство против проблем с кожей. Этим и объясняется ее популярность среди населения.

Свойства и действие салицилового спирта

Салициловый спирт — это хороший антисептический раствор, обладающий следующими преимуществами:

  • успешно борется с бактериями и грибковыми инфекциями на эпителии, нарушая синтез белков в спорах грибов;
  • используется в лечении прыщей, угрей и других воспалительных кожных заболеваний, благодаря противовоспалительным свойствам спирта;
  • в маленькой концентрации действует отшелушивающе на верхний слой эпидермиса и помогает нормальному его образованию;
  • подавляет секрецию сальных желез, очищает скопившуюся в них грязь;
  • подавляет секрецию потовых желез и используется при гипергидрозе как отдельное средство или в комбинации с борной кислотой.

Неоспоримое преимущество салицилового спирта — то, что он не вызывает аллергии, в отличие от других мультикомпонентных препаратов.

Вернуться к оглавлению

Чем кислота отличается от спирта?

Салициловый спирт — это раствор из кристаллов кислоты, растворенных в медицинском этиловом спирте. Используется в медицине как антисептическое и противовоспалительное средство. Салициловая кислота выпускается в виде прозрачных кристаллов и применяется не только в медицине, а и в промышленном производстве, изготовлении красителей и лекарственных препаратов.

Вернуться к оглавлению

Что эффективней?

Кислота более эффективна в лечении лишая чем спирт.

По показаниям и действию оба раствора идентичны. Салициловый спирт от лишая не так эффективен, как кислота: она намного эффективней и действует быстрее, чем спирт. Кислота убивает грибки и споры, не позволяя им доходить до инкубационного периода. Поэтому для быстрого избавления от лишая, желательно, использовать салициловую кислоту или другие препараты с ней: растворы или мази на ее основе. Если достать кислоту не получается, то и применение спирта разрешено. Есть только один недостаток — ждать эффекта придется дольше.

Вернуться к оглавлению

Применение салициловой кислоты при разных видах лишая

Салициловый спирт борется с проявлениями лишая разных типов. Строгих указаний по применению при каждом типе лишая нет. При использовании соблюдают такие правила:

  • терапия сводится к локальной обработке зараженных поверхностей 2—4 раза в день;
  • обязательно перед применением кислоты провести тест на возможную аллергическую реакцию.
Вернуться к оглавлению

Избавление от стригущего лишая

Стригущий лишай — самый заразный и опасный вид грибкового заражения. Подхватить его можно после контакта с бездомными животными, в этом случае — с кошкой. Он делится на 2 разновидности:

  • микроспория — ею заражаются от животного;
  • трихофития — заражение возможно от человека-носителя.

Его называют стригущим, потому что чаще всего он возникает в волосах, которые обламываются, если не лечить грибок. В местах поражения видны круглые пятнышки розового цвета, которые иногда сопровождаются шелушением. Для успешного результата лучше комбинировать мазь от лишая и локально смазывать пораженные участки 2—3% раствором кислоты или серно-салициловой мазью.

Вернуться к оглавлению

Лечение красного лишая

Для нормализации состояния больного и быстрого выздоровления нужно повысить имунную защиту организма.

Этот вид заболевания кожи изучен меньше остальных, но доказано, что он возникает из-за пониженного иммунитета. Подтверждения что он возникает от бактерий и грибков пока что не найдено. Характеризуется сыпью из маленьких прыщиков, которая сильно зудит, пораженные области шелушатся и образуются трещины. Красный лишай — это не грибковое заболевание, но салициловый спирт — действенный метод борьбы с ним. Но для этого типа лучше использовать салициловую мазь — она не пересушит уже и так сухой эпителий. Для улучшения результативности терапии, ее комбинируют с серной мазью и дегтем. Но стоит быть осторожным и не переусердствовать с серной мазью, потому что в больших дозах она токсична.

Вернуться к оглавлению

Кислота от розового лишая Жибера

Его называют розовым лишаем, лишаем или болезнью Жибера. Возникнуть может из-за стресса, аллергии, пониженного иммунитета после ОРЗ. Лишай Жибера провоцирует появление пятен, среди которых одно-материнское, больше по размеру, все пятна розового цвета c шелушением. Не рекомендуется использовать салициловую кислоту от розового лишая Жибера, поскольку она раздражает эпителий. Но этому факту противоречат много положительных отзывов людей, использовавших кислоту при таком лишае. Чтобы обезопасить себя, лучше использовать раствор с мазью «Целестодерм». Сначала наносится кислота, а после нее — тонкий слой мази. После нанесения крема, это место лучше не мочить и переодеться в хлопковую вещь, чтобы не натирать.

Особенность этого типа грибка в том, что он самопроизвольно возникает, и так же исчезает через 6—8 недель, даже если его не лечить.

Вернуться к оглавлению

Выведение отрубевидного лишая

Салициловую мазь зачастую используют для лечения отрубевидного лишая.

Отрубевидный или цветной лишай не изучен до конца, но его грибковая природа возникновения не отрицается, потому что противогрибковые препараты хорошие помощники в избавлении от этого лишая. При лишае возникают маленькие пятна коричневатого цвета без зуда. При лечении салициловой кислотой отрубевидного лишая 3% раствор наносят на пораженные участки и покрывают тонким слоем питательного крема (желательно детского), чтобы не допустить шелушений. Успешно лечит отрубной лишай и салициловая мазь в концентрации 5%.

Вернуться к оглавлению

Противопоказания и побочные действия

Применение салициловой мази не желательно беременным, при лактации и маленьким детям — лучше подобрать в аптеке разрешенное лекарство от грибка. Нежелательно пользоваться кислотой людям с почечной недостаточностью и пациентам, склонным к аллергии. Салициловая кислота истончает эпителиальный покров, поэтому людям с куперозом и тонкой кожей лучше воздержаться от использования кислоты.

При наружном применении раствора у человека возможно появление следующих побочных эффектов:

  • аллергические реакции;
  • жжение, зуд, покраснение на обработанном участке;
  • в очень редких случаях возможна индивидуальная непереносимость компонента.
Вернуться к оглавлению

Симптомы передозировки

Передозировка чревата появлениями кровотечений разного характера.

Передозировка таким препаратом кажется невозможной, но в некоторых источниках зафиксированы случаи отравления и передозировки, характеризующиеся такими симптомами:

  • раны на слизистых оболочках, появление язв на них;
  • сильные, жгучие боли;
  • ухудшение слуха и поражение ушей;
  • возможно появление кровотечений из носа, десен, иногда даже внутренних органах — в желудке.
Вернуться к оглавлению

Чем заменить?

Если по некоторым причинам кислоту нельзя использовать против лишая, то главный ее аналог — салициловая мазь, которая используется для избавления от дерматологических инфекций и выпускается в концентрациях — 2%, 5%, 10% и 60%. Следующие мази — полноценные аналоги, используются вместо кислоты: салицилово-серная и серно-дегтярная мазь — в составе каждой из них есть салициловая кислота, но в меньшей концентрации. Иногда для лечения назначают борную кислоту, но с осторожностью, потому что ее антисептическое действие сильное и иногда она сильно пересушивает поврежденные участки на теле.

COSMEDIX Clarifying and Cleansing Kit 58g/15ml/30g/15g

Очищающий набор для жирной и проблемной кожи — это ежедневный ритуал ухода, состоящий из 4 компонентов, в который входят очищающая пенка, сыворотка, увлажняющий крем и маска, специально разработанные для радикального изменения внешнего вида жирной, склонной к появлению воспалений кожи.

В составе набора:
1. Пенка очищающая Clarify, 58 г | ПЕНКА ДЛЯ УМЫВАНИЯ С САЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТОЙ | Смойте с лица грязь, макияж и выделения кожи с помощью этого нежной многофункциональной очищающей пенки, которая делает тон кожи более чистым и здоровым, не лишая при этом кожи естественной липидной мантии. Без спирта и сульфатов.
2. Сыворотка очищающая для проблемной кожи Clarity, 15 мл | ОЧИЩАЮЩАЯ СЫВОРОТКА | Салициловая кислота, масло чайного дерева и экстракт ивовой травы очищают кожу и помогают сбалансировать выработку кожного сала, а алоэ вера успокаивает раздраженную кожу.
3. Маска для глубокого очищения Clear, 30 г | ГЛУБОКО ОЧИЩАЮЩАЯ МАСКА | Удалите загрязнения, закупоривающие поры, и абсорбируйте излишки кожного сала с помощью этой невероятно нежной, но эффективной маски, созданной на основе комбинации каолиновой глины и успокаивающих трав.

4. Увлажняющий крем против жирного блеска для проблемной кожи Shineless, 15 г | УВЛАЖНЯЮЩИЙ КРЕМ БЕЗ МАСЕЛ | Обеспечьте длительное увлажнение жирной и проблемной кожи с помощью этого легкого, не содержащего масел увлажняющего крема, который помогает улучшить внешний вид кожи, выровнять гиперпигментацию и убрать жирный блеск – с новым ароматом мяты и зеленого чая!

Бережно очищает кожу, склонную к появлению воспалений/li>
Увлажняет и балансирует кожу/li>
Помогает отшелушивать кожу, очищая закупоренные поры/li>
Поглощает излишки кожного сала, не нарушая естественной мантии кожи/li>
Успокаивает кожу, делая ее тон более ровным
Примите свой тип кожи и поприветствуйте ее более чистый ровный тон с этим незаменимым набором для очищения жирной и проблемной кожи, состоящим из 4 компонентов.

Этот удобный для путешествий набор, специально разработанный для жирной и проблемной кожи, уменьшает видимость воспалений, впитывает излишки кожного сала и удаляет грязь и выделения кожи, не лишая при этом кожу естественной липидной мантии. Он состоит из культовых продуктов по уходу за кожей, необходимых для очищения пор, снятия раздражений и покраснений, воздействия на проблемные участки и улучшения текстуры кожи для более чистого и ровного тона.

Ингредиенты в составе продуктов оказывают кондиционирующий эффект, притягивая и сохраняя драгоценную влагу.
Выравнивает общий тон кожи, минимизируя проявления постакне, пигментных пятен и участков с гиперпигментацией.
Антиоксиданты в составе помогают бороться со свободными радикалами, защищая кожу от негативного влияния окружающей среды, способного вызывать воспаление в коже и разрушать коллаген и эластин.

Акне появляются, когда волосяные фолликулы закупориваются секретом сальных желез и отмершими клетками эпителия. Такие ингредиенты, как салициловая кислота и комплекс AGP, стимулируют обновление верхнего слоя кожи, помогая держать воспаления под контролем.
Формула не содержит продуктов нефтехимии, благодаря чему становится возможным напитывать кожу, не забивая поры.
Благодаря эксфолиации текстура кожи выравнивается, а косметические продукты лучше впитываются. После того, как верхний слой кожи отшелушивается, активным компонентам становится легче работать.

Пенка очищающая Clarify
Салициловая кислота | Отшелушивает кожу и делает ее гладкой
Алоэ вера и D-пантенол | Успокаивают кожу
Лактококкус фермент лизат и изомерат сахарида | Полученные с помощью пробиотической технологии ингредиенты, которые помогают полезным защитным бактериям на поверхности кожи размножаться в необходимом количестве

Сыворотка очищающая для проблемной кожи Clarity
Салициловая кислота | Глубоко отшелушивает кожу, удаляя из пор загрязнения и балансируя выработку кожного сала
Кипрей, масло чайного дерева и алоэ вера | Успокаивают кожу и выравнивают тон, минимизируя красноту
Маска для глубокого очищения Clear
Каолин и сера | Помогают вытягивать и поглощать излишки кожного сала и загрязнения из пор
Масло чайного дерева | Балансирует кожу и выравнивает ее тон
Увлажняющий крем против жирного блеска для проблемной кожи Shineless
Стволовые клетки сирени | Помогают контролировать и балансировать выработку кожного сала и уменьшают покраснение.
L-карнитин | Отшелушивает кожу, улучшая удержание влаги, и делает кожу свежей, придавая ей ровный тон и текстуру.
D-трегалоза | Помогает обеспечить длительное увлажнение в течение дня.
Экстракт кактуса опунции | Успокаивает сухую кожу, уменьшает покраснение, способствует длительному увлажнению кожи и помогает коже со временем стать более упругой и гладкой.
Ниацинамид | Помогает улучшить естественную защитную функцию кожи, обеспечивая длительное увлажнение.
Пенка очищающая Clarify
AQUA, DECYL GLUCOSIDE, ETHOXYDIGLYCOL, SALICYLIC ACID, GLYCERIN, PROPANEDIOL, POLYSORBATE 20, TRIETHYL CITRATE, ALOE BARBADENSIS LEAF JUICE, LACTOCOCCUS FERMENT LYSATE, SACCHARIDE ISOMERATE, PANTHENOL (D), CAMELLIA SINENSIS LEAF EXTRACT, PANAX GINSENG ROOT EXTRACT, ELETTARIA CARDAMOMUM (CARDAMOM) SEED EXTRACT, PYRUS MALUS (APPLE) FRUIT EXTRACT, JASMINUM OFFICINALE (JASMINE) FLOWER EXTRACT, CUCUMIS MELO CANTALUPENSIS (CANTALOUPE) FRUIT EXTRACT, ROSE EXTRACT, LAVANDULA ANGUSTIFOLIA (LAVENDER) EXTRACT, CUCUMIS SATIVUS (CUCUMBER) FRUIT EXTRACT, CUCUMIS MELO (MELON) FRUIT EXTRACT, CITRUS AURANTIUM AMARA (BITTER ORANGE) FLOWER EXTRACT, CUPRESSUS SEMPERVIRENS LEAF EXTRACT, COFFEA ARABICA (COFFEE) LEAF/SEED EXTRACT, CANANGA ODORATA FLOWER EXTRACT, SALVIA OFFICINALIS (SAGE) LEAF EXTRACT, ROSMARINUS OFFICINALIS (ROSEMARY) LEAF EXTRACT, RUBUS IDAEUS (RASPBERRY) FRUIT EXTRACT, CITRUS AURANITUM BERGAMIA (BERGAMOT) FRUIT EXTRACT, SANTALUM ALBUM (SANDALWOOD) WOOD EXTRACT, CAPRYLYL GLYCOL, CAPRYLHYDROXAMIC ACID, ETHYLHEXYLGLYCERIN, PHENOXYETHANOL, LACTIC ACID, SODIUM CHLORIDE, POTASSIUM HYDROXIDE, SODIUM BENZOATE

Сыворотка очищающая для проблемной кожи Clarity
HAMAMELIS VIRGINIANA (WITCH HAZEL) WATER, ALCOHOL DENAT. , AQUA, ALCOHOL ,GLYCERIN, NIACINAMIDE, RETINOL, RETINYL ACETATE, GALACTOARABINAN, HYDROXYPROLINE (L), SALICYLIC ACID, ACETYLSALICYLIC ACID, SACCHARIDE ISOMERATE, HELIANTHUS ANNUUS (SUNFLOWER) SEED OIL, EPILOBIUM ANGUSTIFOLIUM (WILLOWHERB) FLOWER/LEAF/STEM EXTRACT, MELALEUCA ALTERNIFOLIA (TEA TREE) LEAF OIL, HYDROXYPROPYL METHYLCELLULOSE, PREGNENOLONE, COLLINSONIA CANADENSIS (STONE ROOT) EXTRACT, SERENOA SERRULATA FRUIT (SAW PALMETTO) EXTRACT, RUSCUS ACULEATUS (BUTCHER’S BROOM) ROOT EXTRACT, ALOE BARBADENSIS LEAF JUICE POWDER, CITRUS GRANDIS (GRAPEFRUIT) PEEL OIL, EUCALYPTUS GLOBULUS LEAF OIL, ROSMARINUS OFFICINALIS (ROSEMARY) LEAF OIL, CHAMOMILLA RECUTITA (MATRICARIA) FLOWER EXTRACT, XANTHAN GUM, POTASSIUM SORBATE

Маска для глубокого очищения Clear
AQUA, GLYCERIN, BENTONITE, KAOLIN, NIACINAMIDE, HAMAMELIS VIRGINIANA (WITCH HAZEL) WATER, SULFUR, CAPRYLIC/CAPRIC TRIGLYCERIDE, STEARIC ACID, ALCOHOL DENAT., GLYCERYL RICINOLEATE, GLYCOL DISTEARATE, SALICYLIC ACID, TITANIUM DIOXIDE (CI 77981), MENTHYL LACTATE (L), EPILOBIUM ANGUSTIFOLIUM FLOWER/LEAF/STEM EXTRACT, MELALEUCA ALTERNIFOLIA (TEA TREE) LEAF OIL, EUCALYPTUS GLOBULUS LEAF OIL, BRASSICA OLERACEA ITALICA (BROCCOLI) EXTRACT, MELIA AZADIRACHTA (NEEM) LEAF EXTRACT, MELIA AZADIRACHTA (NEEM) FLOWER EXTRACT, SOLANUM MELONGENA (EGGPLANT) FRUIT EXTRACT, ALOE BARBADENSIS FLOWER EXTRACT, COCCINIA INDICA FRUIT EXTRACT, CHAMOMILLA RECUTITA (MATRICARIA) FLOWER EXTRACT, OCIMUM SANCTUM LEAF EXTRACT, LAWSONIA INERMIS (HENNA) EXTRACT, OCIMUM BASILICUM (BASIL) LEAF EXTRACT, CURCUMA LONGA (TURMERIC) ROOT EXTRACT, CALENDULA OFFICINALIS FLOWER EXTRACT, PASSIFLORA INCARNATA (PASSIONFLOWER) FLOWER EXTRACT, TOCOPHERYL ACETATE (D-ALPHA), GLYCINE SOJA (SOYBEAN) OIL, AMINO ESTERS-1, ALLANTOIN, PEARL POWDER, SILICA, DIMETHICONE, ALCOHOL, CETYL ALCOHOL, XANTHAN GUM, CARBOMER, GUAIAZULENE, BENZYL ALCOHOL

Увлажняющий крем против жирного блеска для проблемной кожи Shineless
AQUA, GLYCERIN, ISODECYL NEOPENTANOATE, GLYCERYL STEARATE, COCONUT ALKANES, GLUCONOLACTONE, SODIUM LEVULINATE, NIACINAMIDE, SYRINGA VULGARIS (LILAC) EXTRACT, CARNITINE (L), TREHALOSE (D), OPUNTIA FICUSINDICA (CACTUS) STEM EXTRACT, ALOE BARBADENSIS LEAF JUICE POWDER, POLYGLYCERYL-4 CAPRATE, COCO-CAPRYLATE/ CAPRATE, XANTHAN GUM, CETYL ALCOHOL, STEARYL ALCOHOL, CARBOMER, MALTODEXTRIN, SODIUM BENZOATE, SODIUM HYDROXIDE, POTASSIUM SORBATE, SODIUM ANISATE, FARNESOL, CALCIUM GLUCONATE, PHENOXYETHANOL, LAVANDULA ANGUSTIFOLIA (LAVENDER) EXTRACT, CAPRYLIC/CAPRIC TRIGLYCERIDE, CAMELLIA SINENSIS (GREEN TEA) LEAF EXTRACT, CAMELLIA SINENSIS (BLACK TEA) LEAF EXTRACT, MENTHA PIPERITA (PEPPERMINT) EXTRACT, RUBUS OCCIDENTALIS FRUIT EXTRACT, CITRUS AURANTIUM AMARA (BITTER ORANGE) FLOWER EXTRACT, PYRUS MALUS (APPLE) FRUIT EXTRACT, ROSMARINUS OFFICINALIS (ROSEMARY) LEAF EXTRACT, SALVIA OFFICINALIS (SAGE) LEAF EXTRACT, CITRUS AURANTIUM BERGAMIA (BERGAMOT) FRUIT EXTRACT, CUPRESSUS SEMPERVIRENS LEAF EXTRACT

Сервис записи к врачу на прием в Киеве онлайн

Doc. ua — медицинский онлайн-хаб, который упрощает доступ ко всем медицинским услугам в режиме реального времени. С помощью Doc.ua пациенты могут найти врача онлайн и записаться к нему в клинику на прием. Нашим пользователям доступна база из более чем 12000 специалистов и 1800 медицинских учреждений по всей Украине.

На сайте или в приложении Doc.ua вы можете быстро записаться к доктору, который проведет консультацию и подберет эффективный способ лечения заболевания. При этом рекомендованные врачом лекарства можно заказать непосредственно на сайте в разделе «Аптека».

Doc.ua предлагает забронировать медицинские препараты, выбрав самую лучшую цену среди аптек Украины. В описании к лекарствам вы найдете способ применения и дозы, фармакологические свойства, показания и противопоказания. Получайте заказы удобно: оформляйте курьерскую доставку на препараты в вашем городе или забирайте лекарства в ближайшей точке выдачи.

Если приехать на прием в клинику для вас затруднительно, вы можете воспользоваться услугой «Вызов врача на дом» или «Онлайн-консультация с врачом». После получения вашего обращения операторы колл-центра Doc.ua свяжутся с вами в ближайшее рабочее время и предложат специалистов, которые могут приехать к вам домой либо проконсультировать вас по телефону.

На нашем портале вы найдете проверенные отзывы пациентов, которые ранее побывали на приеме у врача. Каждый отклик, оставленный пользователем портала, учитывается при формировании рейтинга. Чем выше рейтинг специалиста, тем выше его профессионализм.

Doc.ua отличается огромным каталогом диагностических центров в любом городе Украины — Киев, Одесса, Харьков, Львов, Днепр и др. Диагностические центры предлагают широкий спектр исследований: МРТ, КТ, УЗИ, эндоскопические методы исследования и другие. Для быстрого поиска центра диагностики в вашем городе используйте фильтры, которые позволяют отсортировать список учреждений по нескольким параметрам: рейтингу, популярности, а также количеству отзывов и месторасположению.

Также на Doc. ua представлено большое количество лабораторий, где можно сдать все необходимые анализы. Лаборатории предлагают широкий выбор исследований: общеклинические, гематологические, гормональные, биохимические, аллергические, иммунологические и др.

Мы стараемся быть не только максимально удобными для вас, но также беречь ваше время и средства, поэтому на сайте Doc.ua в разделе «Акции» представлены специальные предложения на медицинские услуги, прием врачей, комплексные обследования и пакетные услуги.

Записывайтесь на прием к врачу, на анализы или диагностику через Doc.ua, ведь вместе с нами медицина становится простой, удобной и доступной.

Lichen Spinulosus Лекарства: кератолитические агенты, топический ретиноид

Автор

Christopher R Gorman, MD Дерматолог, Система здравоохранения штата Вирджиния, Центральная Вирджиния

Christopher R Gorman, MD является членом следующих медицинских обществ: Alpha Omega Alpha, Американская академия дерматологии, Ричмондская медицинская академия, Вирджинское общество дерматологов

Раскрытие информации: Нечего раскрывать.

Редакционная коллегия специалистов

Ричард П. Винсон, доктор медицинских наук  Ассистент клинического профессора, кафедра дерматологии, Центр медицинских наук Техасского технологического университета, Медицинская школа Пола Л. Фостера; Консультационный персонал, дерматология Маунтин-Вью, Пенсильвания

Ричард П. Винсон, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американская академия дерматологии, Техасская медицинская ассоциация, Ассоциация военных дерматологов, Техасское дерматологическое общество

Раскрытие информации: Ничего не раскрывается.

Розали Еленицас, доктор медицины Герман Бирман Профессор дерматологии Медицинской школы Пенсильванского университета; Директор службы патологии кожи Пенсильвании, отделение дерматологии, Система здравоохранения Пенсильванского университета

Розали Еленицас, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ: Американская академия дерматологии, Американская медицинская ассоциация, Американское общество дерматопатологии, Пенсильванская академия дерматологии

Раскрытие информации: получил гонорар от Липпинкотта Уильямса Уилкинса за редактора учебника.

Главный редактор

Уильям Д. Джеймс, доктор медицины  Пол Р. Гросс, профессор дерматологии, заместитель председателя, директор резидентуры, отделение дерматологии Медицинской школы Пенсильванского университета

Уильям Д. Джеймс, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американское Академия дерматологии, Общество дерматологов-исследователей

Раскрытие информации: Получен доход в размере, равном или превышающем 250 долларов США, от: Elsevier; WebMD
Выступал в качестве докладчика в различных университетах, дерматологических обществах и отделениях дерматологии.

Дополнительные участники

Джеймс Дж. Нордлунд, доктор медицины  Почетный профессор, кафедра дерматологии, Медицинский колледж Университета Цинциннати

Джеймс Дж. Нордлунд, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американская академия дерматологии, Sigma Xi, Общество чести научных исследований , Общество Исследовательской Дерматологии

Раскрытие информации: Нечего раскрывать.

Благодарности

Благодарности

Medscape Drugs & Diseases выражает благодарность Стивену Уайту, доктору медицины†, за его первоначальный вклад в эту статью.

Склероатрофический лихен с вовлечением влагалища и шейки матки

Справочная информация: Склероатрофический лихен (СЛ) — обычное заболевание вульвы, обычно наблюдаемое у женщин в постменопаузе. Он представляет собой атрофическую белую пятнистую область в виде восьмерки. Трещины также часто наблюдаются из-за хрупкости кожи. Диагноз ставится на основании анамнеза и клинической оценки, но обычно подтверждается биопсией. Лекарства от ЛС нет. Основой лечения являются сильнодействующие местные стероиды, а в некоторых случаях также могут использоваться пероральные иммунодепрессанты.Важно признать роль лазерной хирургии в лечении рубцов, вторичных по отношению к LS. Поскольку LS связан с повышенным риском развития плоскоклеточного рака у женщин с поражением гениталий, для пострадавших важно проходить скрининговые обследования на протяжении всей жизни, а также продолжать лечение, чтобы держать заболевание под контролем. Только шесть случаев вагинального LS, но в литературе нет ни одного случая цервикального LS.

Случай: Авторы представляют случай женщины в постменопаузе с 30-летней историей пролапса и инфекции мочевыводящих путей.При обследовании выявлено маточно-влагалищное выпадение 3 rd степени с обширным беловатым окрашиванием передней, задней и боковых стенок влагалища, включая шейку матки. После консультации с пациенткой и представления ей вариантов лечения она решила установить пессарий геллхорна в амбулаторной клинике. Биопсия влагалища и шейки матки была взята под местной анестезией, и гистология подтвердила LS. Пациент наблюдался в клинике и прописал стероиды.

Заключение: LS с поражением влагалища и шейки матки встречается редко, в отличие от красного плоского лишая, который может проявляться во влагалище. Длительное отсутствие лечения пролапса гениталий может играть роль в развитии. Поскольку это состояние встречается редко, каждый случай следует рассматривать индивидуально и в идеале после обсуждения на собрании MDT.

Склерозирующий лихен (СЛ) — хроническое воспалительное заболевание кожи неизвестной и плохо изученной этиологии. Впервые он был описан Hallopeau в 1887 году как атрофическая форма красного плоского лишая, хотя в настоящее время считается, что он представляет собой отдельную нозологическую единицу [1]. Аутоиммунитет, вероятно, играет роль в патогенезе, возможно, из-за генетических, гормональных, раздражающих и/или инфекционных факторов (или комбинации этих факторов).На протяжении многих лет СЛ носил множество названий, в том числе «ограниченная склеродермия», «крауроз вульвы», «лейкоплакический вульвит», «гипопластическая дистрофия вульвы», «склерозирующий и атрофический лихен» и (когда наблюдается у пациентов мужского пола) «баланит». xerotica obliterans» [2]. СЛ чаще всего поражает аногенитальную кожу и чаще встречается у женщин, чем у мужчин. Склероатрофический лихен может поражать все возрастные группы с более высокой частотой возникновения в раннем детстве и после менопаузы [1-3]. У некоторых пациентов СЛ может протекать бессимптомно; однако у других это может привести к сильному зуду, жжению, диспареунии и необратимым анатомическим изменениям, которые могут нарушать мочеиспускание и сексуальную функцию [4].

Мы сообщаем о случае вагинального и цервикального LS. Было зарегистрировано шесть случаев вагинального LS, но не было зарегистрировано ни одного случая цервикального LS. Это был случай с 30-летней историей пролапса. При осмотре выявлен маточно-влагалищный пролапс 3 rd степени с обширным беловатым изменением цвета передней, задней и боковых стенок влагалища, включая шейку матки (рис. 1-5). Не было никаких доказательств основного аутоиммунного заболевания или какого-либо значительного медицинского / хирургического анамнеза.Биопсия подтвердила склероз лихена из-за признаков многослойного плоского эпителия с гиперкератозом, паракератозом и нерегулярным акантозом наряду с инфильтратом лимфоцитов, плазматических клеток и эозинофилов в субэпителии. Фокально субэпителий показал заметную гиалинизацию коллагена.

Рисунок 1: Полное выпадение матки, выступающее за пределы входа. Шейный зев хорошо виден. Должна наблюдаться пятнистая белая поверхность слизистой оболочки.

Рис. 2: лоскутных лоскутов вокруг OS шейки матки.

Рисунок 3: Пластыри LS широко распространены на шейке матки.

Рисунок 4: Заплаты LS, расположенные по всей длине шейки матки.

Рисунок 5: LS над боковой поверхностью стенки матки.

Пациент решил установить пессарий геллхорна, чтобы облегчить симптомы пролапса, и лечился местными стероидами. Она наблюдалась в амбулаторной клинике через 3-4 месяца для оценки результатов местных стероидов.Ей также посоветовали хирургическое лечение выпадения матки и влагалища. Пациенту был предоставлен информированный выбор и дано время для рассмотрения вариантов. Преимущества хирургического лечения заключаются в следующем: 1) Минимизация риска изменений слизистой оболочки влагалища/шейки матки в плоскоклеточный рак. 2) Лечение ее маточно-вагинального пролапса и ее мочевых симптомов.

Основная причина LS до конца не изучена. Считается, что это состояние связано с аутоиммунным процессом, при котором антитела ошибочно атакуют компонент кожи.Сообщается, что другие аутоиммунные состояния возникают у людей с LS чаще, чем ожидалось [5]. Однако не было выявлено никаких доказательств в поддержку тестирования на аутоантитела без клинических показаний в соответствии с рекомендациями RCOG. Примерно у 10% женщин с СЛ вульвы также будут поражены негенитальные участки кожи [6], и до 20% могут иметь другие аутоиммунные заболевания, такие как дисфункция щитовидной железы, витилиго, псориаз или пернициозная анемия [5,6].

В некоторых случаях LS появляется на коже, которая была повреждена или покрыта рубцами от предыдущего повреждения или травмы [7].Местное раздражение или травма, по-видимому, играют роль в некоторых случаях LS, особенно у генетически предрасположенных людей [8]. Феномен Кёбнера, также называемый реакцией Кебнера или изоморфной реакцией, приписываемой Генриху Кёбнеру, представляет собой появление повреждений кожи на линиях травмы. Феномен Кебнера может быть результатом либо линейного воздействия, либо раздражения [9]. В этом случае раздражение обусловлено подтеканием мочи и трением о массы, лежащие вне влагалища. Тем не менее, последовательность событий, ведущих к изменению функции фибробластов, микрососудистым изменениям и накоплению гиалуроновой кислоты в верхних слоях дермы, все еще исследуется.Распространенность СЛ вульвы у пожилых женщин домов престарелых в одном исследовании составила 3% (1 из 30) [10].

Недостаточное знакомство с состоянием и неспособность должным образом осмотреть кожу половых органов могут привести к длительной задержке в постановке диагноза. Состояние обычно начинается с бледного участка с белыми, воскообразными и полигональными папулами, которые сливаются в блестящие бляшки. Кожа истончена и атрофична, ее обычная архитектура нарушена. Часто возникают эрозии и болезненные трещины в губных бороздах и перианальной области.При хроническом заболевании у многих пациентов наблюдается прогрессирующее рубцевание вульвы, ведущее к облитерации и сращению половых губ и периклиторальных структур. Наиболее распространенными симптомами являются зуд, болезненность, жгучая боль, диспареуния, дизурия или даже запор [1]. Поражения женских половых органов могут быть ограничены большими половыми губами, но обычно вовлекают и в конечном итоге облитерируют малые половые губы и стенозируют входное отверстие. Часто узор в виде песочных часов, бабочки или восьмерки поражает перивагинальную и перианальную области с минимальным вовлечением промежности между ними.Осложнения со стороны женских половых органов включают диспареунию, обструкцию мочевыводящих путей, вторичную инфекцию из-за хронических изъязвлений, вторичную инфекцию, связанную с применением стероидов, и плоскоклеточный рак (редко). По некоторым оценкам, пожизненный риск развития плоскоклеточного рака вульвы у пациентов с LS достигает 5% [11]. Среди пациенток с СЛ также был повышен риск развития рака влагалища [12]. Патогенез СЛ при развитии ПКР неясен. Было высказано предположение, что СЛ и ВПЧ могут не исключать друг друга, а действовать как кофакторы в патогенезе ПКР [13]. Существует отдаленный теоретический риск того, что местное применение кортикостероидов может индуцировать онкогенный ВПЧ [14].

LS может привести к значительному психосоциальному дистрессу и тревоге, серьезно влияющим на качество жизни [15]. Диагноз LS часто может быть поставлен на основании клинических проявлений, а дополнительные обследования, такие как вульвоскопия, могут помочь подтвердить диагноз [16]. В сомнительных случаях следует выполнять биопсию, а в последующем следует исследовать образцы биопсии из незаживающих изъязвлений или образований, чтобы исключить злокачественную трансформацию.Биопсия кожи (пункционная биопсия) является основным исследованием, выполняемым для диагностики СЛ.

Все случаи генитального LS следует лечить, даже если они бессимптомны, с целью предотвращения рубцевания и связанных с ним уродств, сексуальной и мочевой дисфункции и ее негативного влияния на качество жизни. Склерозирующий лихен исторически лечили кератолитическими, едкими или раздражающими агентами, включая салициловую кислоту, трихлоруксусную кислоту и тимол [2]. До 1950-х годов для лечения склероатрофического лихена использовались различные формы лучевой терапии [17] с последующим системным применением висмута [18].Хирургические подходы, включая вульвэктомию, криохирургию и вапоризацию лазером на углекислом газе, также рекомендуются в качестве вариантов лечения [19-21]. Однако частота рецидивов после этих терапевтических подходов была чрезвычайно высокой, достигая 85% [22]. Сегодня местное применение сильнодействующих кортикостероидных мазей считается методом выбора [23]. В то время как ингибиторы кальциневрина (пимекролимус или такролимус) зарезервированы для случаев неудачи. Успех лечения обычно оценивается каждые 3 месяца при активном изменении лечения в соответствии с комплаентностью пациента.

LS влагалища может быть более частым, чем предполагалось, и, следовательно, он очень часто не диагностируется или диагностируется неправильно. Пациентки в постменопаузе часто могут манифестировать СЛ влагалища в связи с атрофическими изменениями, происходящими в этот период. Вдобавок к этому, женщины с вялостью тазовых органов могут подвергаться более высокому риску, если стенки влагалища хронически обнажены из-за пролапса. Гинекологи, ведущие пациентов с СЛ вульвы, всегда должны исключать поражение влагалища, чтобы можно было диагностировать вагинальные поражения и проводить надлежащее наблюдение.

Усниновая кислота – обзор

4.2.2 Наночастицы магнетита, используемые для контроля прикрепления микроорганизмов и образования биопленки

Инфекции, связанные с биопленкой, имеют самые высокие показатели резистентности к антибиотикам; поэтому возможности лечения таких инфекций очень ограничены. Поскольку недавние результаты показывают, что наноматериалы могут быть эффективно использованы в медицине, и особенно в противоинфекционных подходах, исследователи стремились разработать нанобиоактивные магнетитовые системы для уничтожения и контроля образования биопленок.

Недавно методом осаждения была получена новая вододиспергируемая наноструктура на основе магнетита (Fe 3 O 4 ) и усниновой кислоты (UA) в хорошо сформированной сферической форме (Grumezescu et al. , 2013b) . Показано, что наночастицы хорошо индивидуализированы и однородны по размеру. UA был захвачен магнитными наночастицами во время приготовления. Эти наноструктуры были протестированы на рост планктонных клеток и развитие биопленки на грамположительных S.aureus и E. faecalis и на грамотрицательных эталонных штаммах E. coli и P. aeruginosa . Наночастицы Fe 3 O 4 , функционализированные UA, проявляли улучшенную антипатогенную активность в отношении тестируемых штаммов E. faecalis и E. coli по сравнению с контролем магнетита без UA. Эта магнитная наносистема также показала значительное влияние на ингибирование биопленки E. faecalis и E. coli в зависимости от концентрации.Несмотря на большую антибиопленочную активность, наблюдаемую для E. faecalis и E. coli , в случае биопленок P. aeruginosa не наблюдалось ингибирующего действия или наблюдалось очень слабое ингибирующее действие (Grumezescu et al. , 2013b). Функционализированные наночастицы магнетита также оказались эффективными против развития грибковой биопленки.

Недавно разработанные модифицированные раневые повязки, покрытые наночастицами магнетита, проявляют усиленное антиадгезионное действие и антибиопленочное действие в отношении универсального Candida tropicalis .Наномодифицированные поверхности раневой повязки не допускают образования биопленки C. tropicalis . Как ранняя, так и зрелая фазы формирования биопленки были значительно нарушены при использовании модифицированных раневых повязок. Кроме того, эффект наномодифицированных биоактивных материалов для ухода за ранами, по-видимому, очень стабилен во времени, поскольку его активность сохраняется не менее 3 дней (Holban et al., 2013a,b).

Гибридный наноматериал, состоящий из Fe 3 O 4 , ПЭГ 600 и C.maxima проявлял антибактериальную активность в отношении штаммов E. coli , S. aureus и E. faecalis . Анализ in vitro также демонстрирует влияние магнитного биоматериала на адгезию бактерий к клеточным и инертным субстратам и развитие биопленки, что позволяет предположить, что этот материал можно использовать для разработки новых противомикробных материалов с антиадгезивными свойствами (Saviuc et al. , 2011а).

Ангел и др. (2012a) сообщили об успешном изготовлении функционализированного магнетита (Fe 3 O 4 /C 18 ) со средним размером не более 20 нм, который был синтезирован путем осаждения солей трехвалентного и трехвалентного железа в водном растворе олеиновая кислота (C 18 ) и NaOH.Функционализированный магнетит в дальнейшем использовался для покрытия текстильных раневых повязок и предназначен для лечения различных ран. Результаты этого исследования показали, что наномодифицированные текстильные повязки более устойчивы к прикреплению Candida albicans и образованию биопленки по сравнению с повязками без покрытия. Эти данные свидетельствуют о том, что поверхности с нанопокрытием на основе магнетита могут быть полезны для предотвращения инфицирования ран, а также для лечения инфицированных ран (Anghel et al., 2012а).

Магнитные наночастицы Fe 3 O 4 /C 18 также препятствовали прикреплению к клеточным и инертным субстратам клинически изолированных видов Candida . Недавнее исследование показало, что наночастицы Fe 3 O 4 /C 18 обладают способностью по-разному разрушать дрожжевые биопленки в зависимости от вида. Результаты показали, что ингибирование биопленки уменьшается в следующем порядке: C. albicans > C.tropicalis > C. glabrata > S. cerevisiae > C. krusei > C. famata , и этот фенотип коррелирует с ранним образованием зародышевых трубок. Прикрепление гриба in vitro к клеточному субстрату также снижалось в присутствии наночастиц магнетита, что позволяет предположить, что их можно использовать для получения улучшенных поверхностных материалов с антиадгезионными свойствами (Chifiriuc et al. , 2013b).

В 2011 году Савиук и его сотрудники получили наноструктуры Fe 3 O 4 /C 18 с использованием метода Массарта, адаптированного для микроволновых условий (Saviuc et al., 2011б). Для достижения улучшенной антиадгезионной активности экстра-оболочка, состоящая из разбавленного A.graveolens , была нанесена путем адсорбции при обработке вторичного покрытия (Saviuc et al., 2011b). Их динамическое исследование развития грибковых биопленок на покровных стеклах и, соответственно, на наносистемах на основе эфирных масел показало, что через 48 часов инкубации развитие грибковых биопленок на покровных стеклах с покрытием было намного более сниженным, и демонстрировала упрощенную архитектуру изображений КЛСМ. непокрытых покровных стекол, инокулированных C.тропический штамм- и показал зрелую и компактную биопленку с псевдогифами и плюристратифицированными зонами и редкими прикрепленными клетками к покрытому покровному стеклу, тогда как тестируемый штамм C. famata- показал характер прикрепления «в пятнах» для макроколоний, образованных прикрепленными грибковыми бактериями. клетки на непокрытых покровных стеклах и редкие изолированные клетки дрожжей, прилипшие к поверхности, покрытой наносистемой (Saviuc et al., 2011b).

Аналогичные наноструктуры магнетита, функционализированные УК, свидетельствовали о сниженном количестве прикрепленных бактерий и упрощенной структуре биопленки по сравнению с биопленкой, образовавшейся на покровных стеклах, покрытых наночастицами оксида железа, которая выявила более сложную архитектуру и неоднородное распределение на покровном стекле, с плотными многослойными макроколониями, разделенными свободными участками бактериальных клеток, вероятно, функционирующими как водные каналы (Grumezescu et al., 2011с).

Наночастицы, покрытые Ralvia officinalis , сильно ингибировали адгезионную способность и развитие биопленки на поверхности катетера штаммов C. albicans и C. tropicalis . Эти основанные на материалах подходы к контролю прилипания грибов могут предоставить новые инструменты для изучения механизмов вирулентности грибов и образования биопленок, а также новые подходы к дизайну поверхностей с пленочным покрытием или к обработке поверхностей твердых и волокнистых материалов, которые предотвращают или нарушают формирование грибковых биопленок (Chifiriuc et al., 2012б).

Недавние исследования были направлены на оценку новой нанобиосистемы на основе магнитной наножидкости и S. officinalis для покрытия поверхностей протезов голосовой секции Provox со свойствами антибиопленки. Синтезированная нанобиосистема, состоящая из Fe 3 O 4 /C 18 /эфирных масел, продемонстрировала выраженный фунгицидный эффект, а также изменила прилипание грибков и развитие биопленки, как показало исследование CLSM участков катетера, колонизированных тестируемым . С.albicans штаммов. Анализ показал, что тестируемая нанобиосистема проявляла интенсивный антибиопленочный эффект, о чем свидетельствует низкое количество дрожжевых клеток, прикрепившихся к покрытой поверхности (Anghel et al. , 2012b).

Лимбан и др. (2012) сообщили о синтезе новых 2-((4-этилфенокси)метил)- N -(замещенных фенилкарбамотиоил)бензамидов и их использовании в качестве покрытий для наноструктур ядро/оболочка. Целью данного исследования было разработать новую наносистему для функционализации поверхности катетера с повышенной устойчивостью к S.aureus и P. aeruginosa колонизация и последующее развитие биопленки. Подсчет жизнеспособных клеток и исследование с помощью СЭМ показали, что поверхности с нанопокрытием ингибируют как начальное прикрепление, так и развитие биопленки S. aureus и P. aeruginosa на функционализированных поверхностях катетера (Limban et al., 2012).

Натуральное эфирное масло Mentha piperita в сочетании с 5-нм улучшенной наносистемой поверхностью ядро/оболочка также продемонстрировали антиадгезионные и антибиопленочные свойства (Anghel and Grumezescu, 2013).Эта наносистема действует как машина с контролируемым высвобождением эфирного масла и очень эффективна для ингибирования образования биопленки; это хороший кандидат для дизайна поверхностей из новых материалов, используемых для протезов (Anghel and Grumezescu, 2013; Anghel et al. , 2013b).

По мере того, как лазерные методы продолжают распространяться, они были приняты в области химии, биотехнологии и биомедицины, где они в основном используются для нанесения тонких биоактивных пленок (рис. 4.3 и 4.4).

Рисунок 4.3. Различные методы покрытия медицинских изделий. Погружение в наножидкость по сравнению с методом MAPLE.

Рисунок 4.4. Микробный рост на поверхности обычного катетера и на модифицированных нанобиоактивных поверхностях, нанесенных в виде тонких пленок.

Михайеску и др. (2013) сообщили об изготовлении и осаждении тонких пленок магнетита/салициловой кислоты/кремниевой оболочки/антибиотиков (Fe 3 O 4 /SA/SiO 2 /ATB) с помощью импульсного лазерного испарения с использованием матрицы (MAPLE). к инертным субстратам.Тонкие пленки Fe 3 O 4 /SA/SiO 2 /ATB подавляли способность микробных штаммов инициировать и развивать зрелые биопленки в зависимости от штамма и антибиотика (Mihaiescu et al. , 2013).

В другом исследовании Grumezescu et al. (2014) сообщили, что магнитные микросферы из полимолочной и гликолевой кислот и поливинилового спирта (PLGA-PVA) были загружены UA, и эти наноструктуры использовались для получения покрытий методом MAPLE-осаждения тонких пленок. Бионаноактивно-модифицированная поверхность ингибировала начальное прикрепление S.aureus к поверхностям с покрытием, а также их контроль за образованием биопленок и их превращением в зрелые биопленки.

Домашняя страница антибиотиков для лишайников

Домашняя страница антибиотиков для лишайников

 

Майк Крокетт, Стейси Кагеяма, Дельфина Хомен, Кэрри Льюис, Джейн Осборн и Логан Сандер. Это исследование было проведено в рамках группового проекта по ботанике 465 лихенологии в Университете штата Орегон весной 2003 года.

ВВЕДЕНИЕ

Исторически сложилось так, что большая часть лекарств в мире была получена из растений и грибов. Салициловая кислота является активным ингредиентом аспирина, и эта кислота содержится в роде Salix. Важные антибиотики, такие как пенициллин, конечно, получены из грибов. Лишайники — еще один тип организмов, который может иметь потенциал для медицинских исследований. В прошлом коренные американцы использовали лишайники для древней медицины и церемониальных практик.Например, и Нитинахт, и Маках Тихоокеанского Северо-Запада использовали Usnea longissima в качестве дерматологического средства для перевязки ран. Индейцы шайенны, овикино и юрок использовали Letharia vulpina для изготовления желтого красителя. Изучая традиционное использование этих лишайников, современная наука получает основу для изучения видов лишайников и их химических составляющих.

Лишайники производят защитные вторичные метаболиты, которые служат для сдерживания травоядности и колонизации патогенами.Усниновая кислота, стиктовая кислота и вульпиновая кислота — это лишь некоторые из более чем 700 вторичных соединений, которые вырабатываются лишайниками. Исследователи обнаружили, что чистые экстракты усниновой кислоты, эверновой кислоты и вульпиновой кислоты ингибируют рост грамположительных бактерий Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, и Bacillus megaterium , но кислоты не влияют на грамотрицательные бактерии Escherichia coli. или Pseudomonas aeruginosa . Интерес к антибиотическому потенциалу соединений лишайников был чрезвычайно высок в период после Второй мировой войны и до конца 1950-х годов.Второстепенным соединением, вызвавшим большой интерес и значительные исследования, была усниновая кислота. Фактически, известно, что в период с 1950 по 1959 год об усниновой кислоте было опубликовано 64 статьи. В 1970-х годах сообщалось, что усниновая кислота обладает потенциалом в качестве противоопухолевого препарата. Снова возникает интерес к потенциальному использованию антибиотиков, полученных из лишайников, поскольку лишайники могут стать ценным источником антибиотиков для фармацевтической промышленности в будущем. Целью нашего исследования было определить потенциальные антибиотические свойства четырех видов лишайников северо-западной части Тихого океана: Hypogymnia apinnata , Letharia columbiana, Lobaria pulmonaria, и Usnea filipendula, , а также определить, какие вторичные соединения могут присутствовать в четыре вида лишайников с помощью тонкослойной хроматографии.Наряду с определением того, какие вторичные соединения присутствуют в четырех видах лишайников, настойку Usnea barbata , купленную в магазине здоровой пищи, также анализировали на присутствие соединений.

Hypogymnia apinnata ……………………………….. наверх

МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ

Виды лишайников.   Виды лишайников, выбранные для исследования H.apinnata, L. columbiana, L. pulmonaria, и U. filipendula были выбраны из-за продукции уникальных вторичных соединений, продуцируемых каждым лишайником. Материал свежих H. apinnata, L. columbiana, L. pulmonaria, и U. filipendula был собран на участках, перечисленных в таблице 1. Эти конкретные виды также были выбраны, поскольку они, вероятно, содержали меньше вторичных соединений. чем другие виды того же рода. Лишайники были идентифицированы с помощью Macrolichens of the Pacific Northwest by McCune and Geiser (1997).Образцы ваучеров были депонированы в Гербарии Университета штата Орегон.

Виды бактерий. В этом исследовании использовали четыре вида бактерий: две грамположительные бактерии, Micrococcus luteus и Staphylococcus aureus , и две грамотрицательные бактерии, Salmonella gallinarum и Serratia marcescens, источников этих бактерий перечислены в таблице 1.

Таблица 1. Лишайники и бактерии, использованные в исследовании.

Лишайник

Пункт сбора

Бактерии

Краситель по Граму

Источник

Гипогимния конечная

Майк Миллер Трейл, Ньюпорт, Орегон

Micrococcus luteus

Положительный

стр. Лаборатория Дж. Боттомли, Университет штата Орегон

Летария колумбийская

Река Метолиус, Орегон

Золотистый стафилококк

Положительный

Естествознание Уорда. #85 В 1178

Lobaria pulmonaria

Каньон Крик Роуд.и Fitton Green Co. Park, Corvallis, OR

Salmonella gallinarum

Отрицательный

Естествознание Уорда. #85 В 1913

Usnea filipendula

Blake Dr. , Hwy 99, Adair Village, OR и Canyon Creek Rd., Corvallis, OR

Серратия marcescens

Отрицательный

стр.Лаборатория Дж. Боттомли, Университет штата Орегон

Экстракция соединений лишайника.   Для выделения лишайниковых соединений лишайниковый материал сушили на воздухе и измельчали ​​в ступке пестиком. Один грамм измельченного материала лишайника замачивали в 50 мл ацетона и запечатывали в пробирках на ночь.

Идентификация соединений лишайников.   Для определения соединений, присутствующих в каждом из четырех лишайников, использовали тонкослойную хроматографию в соответствии с протоколом, использованным Калберсоном (1972).Шесть капель каждого экстракта лишайника помещали на пластины для тонкослойной хроматографии с силикагелем, покрытые алюминием, со стеклянными капиллярными трубками. Атранорин, норстиковая кислота и чистая усниновая кислота использовались в качестве контроля, а образец экстракта U. barbata , приобретенный в магазине здоровой пищи, также использовался для удовлетворения нашего потребительского любопытства. Планшеты прогоняли в системах растворителей Калберсона А и С, а затем проверяли с помощью УФ-света и оценивали на наличие различных соединений. Наконец, пластины опрыскивали мелкодисперсным туманом 10%-ной серной кислоты, а затем прокаливали в течение 3 минут при 100°С для проявления образцов.

Исследование антибактериальных свойств.  Чтобы определить наиболее оптимальную концентрацию концентрации экстракта лишайника для использования в этом исследовании, стерильные диски фильтровальной бумаги диаметром 7,5 мм обрабатывали только 40 90 127 микро 90 128 литрами ацетона (использовали в качестве контроля) и 40, 60 и 80 90 127 микролитров ацетона. литров каждого экстракта лишайника. Использовали три обработки: без бактерий (использовали в качестве контроля), грамположительные S. aureus, и грамотрицательные S. gallinarum. Бактерии инокулировали на полноценный питательный агар (Difco Laboratories, кат. 0069) путем подвешивания петель бактерий в стерильной деионизированной воде. Затем бактериальную суспензию наносили на чашки с агаром стерильной стеклянной палочкой, чтобы вся поверхность агара была равномерно покрыта бактериальной суспензией. Планшеты делили на 4 квадранта и в каждый квадрант помещали по одному диску из фильтровальной бумаги, так чтобы в каждом планшете было по одному диску для каждой обработки (контроль, 40, 60 и 80 микро литров экстракта лишайника).Затем инокулированные чашки инкубировали при 37°С в течение 48 часов. Образовавшиеся зоны ингибирования количественно определяли путем измерения диаметра зоны в самом широком месте, а затем вычитали 7,5 мм (ширина диска фильтровальной бумаги). Основываясь на этих результатах этой части исследования, мы решили использовать промежуточное количество экстракта, 60 90 127 микро 90 128 литров, для оставшейся части нашего исследования, поскольку мы заметили, что 80 90 127 микро 90 128 литров не оказали значительного эффекта больше, чем 60 90 127. микро литров.

После определения оптимальной концентрации экстракта лишайника для использования образцы лишайника были снова протестированы вместе с четырьмя видами бактерий: M. luteus, S. aureus, S. gallinarum, и S. marcescens . Новые чашки инокулировали с использованием протокола, описанного выше, и чашки снова делили на 4 квадранта. Один диск фильтровальной бумаги, обработанный 60 90 127 микро 90 128 литров каждого экстракта лишайника и 90 573 контроля, помещали в каждый квадрант инокулированных чашек.Для исследования использовали пять чашек на обработку экстрактом лишайника и бактериями. Засеянные чашки инкубировали в темноте при 37°С в течение 24 часов. Влияние соединений лишайника на рост бактерий количественно оценивали путем измерения диаметра зон ингибирования за вычетом размера дисков обработанной фильтровальной бумаги.

Статистический анализ.   Данные были проанализированы с помощью дисперсионного анализа (ANOVA) с использованием S-Plus 6. 1, и результаты перечислены в следующем разделе под антибактериальными свойствами лишайников.

Letharia columbiana ……………………………………. вернуться к топ

РЕЗУЛЬТАТЫ

Тонкослойная хроматография.  Результаты ТСХ показали, что образец H. apinnata содержал атранорин и слабый УФ+ неизвестный с классом Rf = 5 в растворителе A и классом Rf = 6 в растворителе C. Образец L. columbiana содержал вульпиновая кислота и неизвестное вещество с несколько более высоким классом Rf, чем вульпиновая кислота, в растворителе A и несколько более низким классом Rf в растворителе C.Образцы L. pulmonaria содержали стиктовую (основную), норстиктовую (минорную) и констиктовую (минорную) кислоты. Образцы, собранные из U. filipendula , содержали как усниновую, так и салазиновую кислоты (таблица 2 и рисунок 1). А образец настойки U. barbata , к нашему удивлению, не содержал усниновой кислоты.

Рис. 1. Экстракты лишайника анализировали в стандартных растворителях на пластинах для ТСХ, покрытых силикагелем.

 

Таблица2. Соединения, присутствие которых в экстрактах лишайников определено по результатам ТСХ.

Лишайник

Соединения присутствуют

H. apinnata

атранорин

л.колумбиана

вульпиновая кислота

L. pulmonaria

Стиктиковая кислота, констиктовая кислота и норстиктовая кислота

U. filipendula

Усниновая кислота и салазиновая кислота

 

Антибактериальные свойства лишайника:  После применения обработки и выдерживания инокулированных чашек в течение 24 часов мы смогли увидеть, что H.обработка apinnata оказала наибольшее влияние на чашки, инокулированные M. luteus, наблюдалась средняя зона ингибирования 9,15 мм. Обработка H. apinnata также оказала умеренное воздействие на S. aureus и S. gallinarum . Обработка L. columbiana оказала наибольшее влияние на S. aureus со средней зоной ингибирования 8,80 мм. Обработка L. pulmonaria оказала незначительное влияние на M. luteus и незначительное влияние на другие бактерии.Обработка U. filipendula оказала наибольшее влияние на S. gallinarum со средней зоной ингибирования 6,95 мм и показала многообещающий эффект на M. luteus (, рис. 2). Ни один из экстрактов лишайников или контроль не проявлял ингибирования S. marcescens , поэтому S. marcescens не был включен в рисунок 1. Результаты инокулированных обработок были статистически значимыми со значением p менее 0,0001 ( Таблица 3).

Таблица 3. Таблица дисперсионного анализа .

Степени свободы

Сумма квадратов

Значение F

P- Значение

Micrococcus luteus

4

1128. 067

123.7844

<0,0001

Золотистый стафилококк

4

1167.06

504.8757

<0,0001

Salmonella gallinarum

4

689.5914

154.0988

<0,0001

Серратия Марсесценс

4

0

нет данных

нет данных

 

Рис. 2.   Влияние обработки экстрактом лишайника на бактерии, использованные в этом исследовании, измеряемое по зоне ингибирования.

 

Lobaria pulmonaria ……………………………….. наверх

ОБСУЖДЕНИЕ

В ходе этого исследования эффект четырех обработок экстрактом лишайника ( H.apinnata, L. columbania, L. pulmonaria, и , U. filipendula ) тестировали на уровень их антибактериального потенциала в отношении двух грамположительных и двух грамотрицательных бактерий. Чтобы определить присутствующие соединения, которые могут оказывать ингибирующее действие на любой из двух разных классов бактерий, мы использовали тонкослойную хроматографию для анализа соединений, присутствующих в каждом используемом экстракте лишайника. Было обнаружено, что для каждого экстракта лишайника присутствуют различные соединения.Некоторые экстракты лишайников давали более одного соединения, например, экстракт U. filipendula содержал как салазиновую, так и усниновую кислоты. Мы наблюдали ингибирование как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий из экстракта U. filipendula . Возможно, что две кислоты работают вместе, подавляя рост как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий. Могут быть заданы дополнительные вопросы об обработке U. filipendula , например, оказывают ли две кислоты ингибирующее действие на бактерии по отдельности или они должны присутствовать обе, чтобы ингибировать рост бактерий.Экстракт H. apinnata , который содержал атранорин, а также вызывал ингибирование как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий, и в целом экстракт H. apinnata оказался наиболее последовательным средством для ингибирования бактерий из всех протестированных нами лишайников и гарантирует дальнейшие исследования. Вторичное соединение вульпиновой кислоты, обнаруженное в экстракте L. columbiana , было наиболее эффективным ингибитором роста S. aureus и может иметь потенциал для лечения инфекций, вызванных S.золотистый. Обработка L. pulmonaria оказалась очень мягким антибиотиком как для грамположительных, так и для грамотрицательных бактерий, хотя при ТСХ были обнаружены три разные кислоты (стиктиновая, норстиктовая и констиктовая кислоты). Никакого ингибирования не наблюдалось на S. marcescens при любой обработке лишайников . Все чашки, инокулированные S. marcescens , имели равномерный газон роста бактерий на поверхности агара.

В целом, наши результаты показывают, что соединения лишайников действительно обладают потенциалом в качестве источника антибиотиков. Результаты также показывают, что некоторые грамотрицательные бактерии могут быть более восприимчивы к воздействию соединений лишайника, чем считалось ранее. Кроме того, антибактериальный потенциал, который проявляют эти экстракты лишайников, свидетельствует о целесообразности проведения дальнейших исследований не только на этих видах лишайников, но и на других видах лишайников. Отдельные соединения этих видов лишайников в дополнение к комбинациям других видов лишайников следует рассматривать для дальнейших исследований и медицинских исследований.Наряду с более всесторонними исследованиями, направленными на определение полных антибиотических свойств соединений лишайников, также необходимо усовершенствовать оптимальные методы экстракции. В случае экстракта U. barbata , приобретенного в магазине здоровой пищи, был применен метод холодного отжима, и производитель экстракта заявил, что этот метод использовался для оптимального извлечения усниновой кислоты. После проведения ТСХ нам стало очевидно, что усниновой кислоты в экстракте нет и заявления производителя не соответствуют действительности.Хотя соединения лишайника действительно обладают антибактериальными свойствами, необходимо использовать надежные научные исследования, чтобы определить, какие соединения полезны и как лучше всего их извлекать, чтобы обеспечить некоторую легитимность потенциальной золотой жилы в медицине.

Usnea filipendula ……………………………………….. вернуться к началу

БЛАГОДАРНОСТИ

Мы хотели бы поблагодарить Дейва Мирольда, Мелоди Патнэм и Брюса МакКьюна за разрешение использовать их лаборатории для этого исследования.Брюс МакКьюн также финансировал этот проект и был готов поделиться своей мудростью с несколькими новичками в изучении лишайников, а также предоставить все фотографии, используемые на этом сайте. Мы также хотели бы поблагодарить Джереми Рича за культуры и Стефани Бойл за советы по культивированию бактерий.

ССЫЛКИ

Benson, H. J. 1994. Microbiological Applications, Sixth edition, Wm. C. Brown Publishers: Dubuque, IA, 447 страниц.

Черный, J.G. 1996. Принципы и приложения микробиологии, 3-е издание. Prentice-Hall: Upper Saddle River, NJ, 790 страниц.

Кокьетто М., Н. Скерт и П. Л. Нимис. 2002. Обзор усниновой кислоты, интересного природного соединения. Naturwissenschaften 89: 137-146.

Culberson, C. F. 1972. Улучшенные условия и новые данные для идентификации продуктов лишайников с помощью стандартизированного метода тонкослойной хроматографии. Журнал хроматографии 72: 113-125.

Ingólfsdóttir, K. 2002. Интересующие молекулы: усниновая кислота. Фитохимия 61: 729-736.

Lawrey, JD 1989. Вторичные соединения лишайников: доказательства соответствия между антитравоядными и антимикробными функциями. Бриолог 92: 326-328.

Мэдиган, М. Т., Дж. М. Мартинко и Дж. Паркер. 1997. Брок Биология микроорганизмов, 8-е издание. Prentice-Hall: Upper Saddle River, NJ, 986 страниц.

МакКьюн Б. и Л. Гейзер. 1997. Макролишайники Тихоокеанского Северо-Запада. Издательство Орегонского государственного университета: Корваллис, Орегон, 386 страниц.

Moerman, D. 1999. Этноботаника коренных американцев , Timber Press: Portland, OR, 927 страниц.

Müller, K. 2001. Фармацевтически значимые метаболиты лишайников. Прикладная микробиология и биотехнология 56 : 9-6.

Рэйвен, П. Х., Р. Ф. Эверт и С. Э. Эйххорн. 1992. Биология растений, пятое издание. Worth Publishers: Нью-Йорк, 791 страница.

Уитон, Дж. К. и Дж. Д. Лоури. 1982. Ингибирование прорастания аскоспор Cladonia cristatella и Sordaria fimicola кислотами лишайника. Бриолог 85: 222-226.

Уитон, Дж. К. и Дж. Д. Лоури. 1984. Ингибирование прорастания спор коркового лишайника лишайниковыми кислотами. Бриолог 87: 42-43.

………………………………………………………. ……………………………наверх

 

Лечение подошвенных бородавок с использованием 2% ионофореза салицилата натрия | Физиотерапия

Аннотация

Предыстория и цель. Исследовано лечение подошвенных бородавок салицилатом натрия с помощью ионофореза. предметов. Было исследовано 20 пациентов со 104 подошвенными бородавками. Методы. Ионофоретически вводили двухпроцентный раствор салицилата натрия (22,5 мА-минута/электрод, 3 процедуры с интервалом от 6 до 9 дней). результатов. Велось наблюдение за девятнадцатью субъектами. Площадь бородавок уменьшилась у 15 человек (78,9%) и увеличилась у 2 человек (10,5%). У одного субъекта (5,3%) больше не было бородавок, а у 1 субъекта (5.3%) не изменились. В целом количество бородавок и их общая площадь уменьшились. Четверо из 6 пациентов (66,6%) с первоначальными жалобами на боль при нагрузке сообщили об уменьшении боли после лечения. Два субъекта, у которых увеличился размер бородавок, сообщили об увеличении боли в конце исследования. Обсуждение и заключение. Ионофорез салицилата натрия выгодно отличался от других амбулаторных вмешательств в уменьшении размера подошвенных бородавок и связанной с ними боли.Применение ионофореза к несущим поверхность у некоторых субъектов, по-видимому, уменьшало боль и рубцы, связанные с замораживанием и электрокоагуляцией, а также проблемы с фиксацией, связанные с лечебными пластырями.

Подошвенные бородавки (подошвенные бородавки) — это вирусные инфекции кожи, приводящие к небольшим доброкачественным опухолям на подошвах стоп. 1 Инфекционный агент представляет собой двухцепочечный ДНК-содержащий вирус папилломы человека (ВПЧ), при этом глубокие подошвенные бородавки связаны с ВПЧ-1, а большинство других распространенных бородавок на других участках тела связаны с ВПЧ-4. 2,3 ВПЧ проникает через поверхность кожи после прямого контакта с инфицированным человеком или с недавно выделенными вирусами, которые остались живыми в теплой влажной среде, например, на полу в раздевалке. 1 Инкубационный период составляет от 1 до 8 месяцев. 1 Бородавки могут быть болезненными, а также заразными. 4

Дети и молодые люди, особенно молодые спортсмены, особенно подвержены подошвенным бородавкам, но пожилые люди, не страдающие диабетом, редко заболевают ими. 1,5,6 Хотя данные о частоте инфицирования подошвенными бородавками отсутствуют, 7 предполагается, что от 7% до 10% детей и молодых людей могут быть поражены. 1,4,8 Подошвенные бородавки чаще встречаются у женщин, чем у мужчин.

Поражения представляют собой новообразования телесного цвета, характеризующиеся ограниченной гипертрофией сосочков кожи с утолщением зернистого и ороговевшего слоев эпидермиса. 9 В отличие от бородавок на других участках тела, подошвенные бородавки уплощаются под давлением, окружены гладким воротником из утолщенного рогового или ороговевшего эпителия и проникают глубоко в эпидермис (rete pegs). Этот тип бородавок обычно образуется под точками давления головок плюсневых костей или пятки. Бородавки, однако, могут появиться где угодно на подошве. 10

Подошвенные бородавки трудно диагностировать. Они могут быть очень болезненными, и их необходимо дифференцировать с мозолями, кератомами, красным плоским лишаем и инородными телами. 6,11 Подошвенные бородавки можно отличить от натоптышей или мозолей, поскольку бородавки болезненны при прикосновении или пощипывании, отсутствуют непрерывные кожные линии пораженной ткани, имеется четко очерченное округлое поражение с шероховатой ороговевшей поверхностью, окруженное гладким воротничком утолщенного рога, и есть множество маленьких черных точек (расширенные капиллярные петли) с тенденцией к точечному кровотечению после удаления рогового слоя (рис.1). 7,10 Размер и количество подошвенных бородавок могут варьироваться. Часто они находятся в скоплениях, называемых «мозаичными бородавками». Напротив, обработка мозоли показывает единственный «глаз» (так называемый «куриный глаз»). 1

Рисунок 1.

Типичный вид подошвенных бородавок.

Рисунок 1.

Типичный вид подошвенных бородавок.

Продолжительность подошвенных бородавок различна, и некоторые бородавки могут регрессировать спонтанно, тогда как у некоторых взрослых, детей старшего возраста и людей с ослабленным иммунитетом они могут сохраняться в течение многих лет. 7,10 Спонтанная регрессия у детей происходит раньше, чем у взрослых, за исключением случаев гипергидроза или ортопедической патологии. 12 У детей средняя продолжительность, вероятно, составляет менее 1 года, и от 30% до 50% бородавок исчезают спонтанно в течение 6-месячного периода. 7 Хотя некоторые бородавки могут регрессировать спонтанно, они могут быть источником физического дискомфорта и инфекционных заболеваний. Поэтому многие пациенты обращаются за медицинской помощью.

Для лечения подошвенных бородавок дерматологи и врачи первичной медико-санитарной помощи использовали многочисленные стратегии. Лечение можно разделить на «деструктивное» или «иммунологическое». 1 Деструктивная терапия включает криотерапию (например, жидкий азот, распылители), хирургию (например, электрокоагуляцию, лазерную абляцию, иссечение) и химиотерапию с помощью жидкостей и пластырей (например, пластырь с салициловой кислотой, молочную кислоту, трихлоруксусную кислоту, кантаридин, подофиллин, формалин, фторурацил). Иммунотерапия включает лечение динитрохлорбензолом (DNCB, иммунологический сенсибилизатор), интерфероном, экстрактом ядовитого плюща и так далее. 13 Наиболее распространенные амбулаторные процедуры включают замораживание жидким азотом и электрокоагуляцию. Хотя недавно сообщалось, что применение жидкого азота с помощью криопистолета приводит к заживлению в 92,5% случаев после 3 процедур, 14 криохирургия может быть болезненной. Электрокоагуляция может оставить атрофический рубец.

Кислотные составы бывают как жидкими, так и чрескожными. Пациенты могут предпочесть трансдермальную систему доставки из-за простоты замены пластыря каждые 48 часов, в то время как капли необходимо наносить каждую ночь. Кислота проникает на глубину от 3 до 4 мм при наложении пассивных пластырей. 15 Мы считаем, что самым большим недостатком применения как жидкости, так и пластыря является время лечения и требование строгого соблюдения пациентом режима лечения. Кроме того, по нашему опыту, заплаты могут скользить, если их положить на несущую поверхность.

В 1969 году Gordon и Weinstein 16 описали лечение, при котором подошвенные бородавки лечили 2% раствором салициловой кислоты натрия, доставляемым с помощью ионофореза.Их лечение было основано на использовании постоянного тока (DC), выталкивающего отрицательно заряженные ионы салицилата в ткани. Они исследовали 5 пациентов, применяя ток силой 1 мА в течение 10 минут 1 раз в неделю до исчезновения бородавок. У всех 5 пациентов бородавки исчезли в течение 2–3 процедур, но это было описательное исследование без контроля.

Мы утверждаем, что лечение ионтофорезом имеет несколько преимуществ по сравнению с другими традиционными методами лечения подошвенных бородавок. Лечение с помощью ионофореза кажется менее болезненным. Применяется слабый постоянный ток, при этом пациент испытывает легкое покалывание, которое ощущается только во время лечения. Напротив, жидкий азот обычно вызывает болезненное жжение во время лечения, которое сохраняется до 72 часов после лечения. 1 По нашему опыту, после лечения пациенты могут полностью опираться на стопу, что часто невозможно при других видах лечения подошвенных бородавок.Ионофорез не оставляет рубцов на обрабатываемой ткани, лечение менее трудоемкое и требует меньше процедур, чем при других стратегиях лечения.

Основываясь на статье Гордона и Вайнштейна, 16 , с 1970-х годов мы используем ионтофорез 2% натрия салициловой кислоты для лечения подошвенных бородавок. Мы рассматривали это лечение как эффективную альтернативу другим методам лечения подошвенных бородавок. Тем не менее, не было проведено никаких последующих исследований, изучающих эффективность ионофореза с 2% салицилатом натрия при лечении подошвенных бородавок. Цель этого описательного исследования состоит в том, чтобы сообщить об использовании ионофореза 2% салицилата натрия для лечения подошвенных бородавок при 20 последовательных обращениях в клинику физиотерапии. Однако мы, как и Гордон и Вайнштейн, не проводили клинического испытания со случайным распределением по группам и контролю.

Метод

субъектов

Исследуемая популяция состояла из пациентов, направленных в отделение физиотерапии Marshfield Clinic-Wausau Center для лечения подошвенных бородавок.Пациентов подвергали скринингу для включения с использованием следующих критериев: у них были подошвенные бородавки в течение 6 месяцев или более, у них не было предшествующего лечения бородавок (кондилом) ионофорезом и они не получали лечения бородавок (бородавок) в течение 1 месяца после участие в исследовании. Кроме того, у участников не должно было быть в анамнезе иммунодефицита, диабета, нарушений кровообращения или чувствительности, и они дали согласие на участие в исследовании. В случае несовершеннолетних согласие дает родитель или ответственный опекун.Двадцать пациентов (13 женщин, 7 мужчин) соответствовали критериям включения и были выбраны для участия. Пятнадцать из 20 пациентов были моложе 20 лет. Все 20 пациентов выполнили протокол лечения, но 1 пациент отказался вернуться для последующей оценки, оставив 19 пациентов для анализа в этом отчете (таблица 1).

Таблица 1.

Исходные характеристики участников

6 (
Пол . Возраст (лет) . Продолжительность бородавок (мес.) .
Х . SD . Ассортимент . Медиана . н (%) . Х̅ . SD . Ассортимент . Медиана .
Мужской 18,8 3.5-41.8 41.8 6 (31,6%) 6 (31,6%) 37.0 45.2 45.2 6-120 15
Женский 20.2 13.7 6.2-55,0 13 ( Пол . Возраст (лет) . Продолжительность бородавок (мес.) .
Х . SD . Ассортимент . Медиана . н (%) . Х̅ . SD . Ассортимент . Медиана .
Самец 18,8 17,2 3,5–41,8 41,8
66%)
37.3 20.2 13.7 6.2-55,0 16.2 13 (68,4%) 21.5 30.8 6–120 12
Таблица 1.

Исходные характеристики участников

0 4 9040 9
Пол . Возраст (лет) . Продолжительность бородавок (мес.) .
Х . SD . Ассортимент . Медиана . н (%) . Х̅ . SD . Ассортимент . Медиана .
Самец 18,8 17,2 3,5–41,8 37.3 45.2 6-120 15 Женский 20.2 13.7 6.2-55,0 16.2 13 (68,4%) 21.5 30.8 6–120 12
0 6-120 6-120

Пол . Возраст (лет) . Продолжительность бородавок (мес.) .
Х . SD . Ассортимент . Медиана . н (%) . Х̅ . SD . Ассортимент . Медиана .
18.8 17.2 17. 2 3.5-41.8 41.8 6 (31,6%) 37.3 45.2 15
Женский 20 .2 13.7 13.7 6.2-55.0 16.2 13 (68,4%) 13 (68,4%) 21.5 30.8 30.8 12

Семь субъектов (37%) сообщают о одном или нескольких неудачных лечение по удалению бородавок, включая использование безрецептурных лекарств (4 субъекта), жидкого азота (4 субъекта), лейкопластырей с салициловой кислотой и электрохирургическую диссекцию (по 1 субъекту). Один субъект сообщил о 5 предшествующих процедурах, включая инъекцию, кантаридин в ацетоне и лазер.Два субъекта сообщили о неуказанных других методах лечения.

Протокол лечения

Пациентов укладывали на постамент в полулежачем положении с обнаженной голенью. Расположение и размер (диаметр в миллиметрах) подошвенных бородавок регистрировали и фотографировали. Пациентов просили оценить свою боль при нагрузке в результате подошвенных бородавок с использованием восходящей визуальной аналоговой шкалы от 0 до 10 (0 = отсутствие боли, 10 = мучительная боль). Каждую бородавку очистили спиртом, а рог бородавки обрезали скальпелем, чтобы уменьшить импеданс кожи.Ткани с глубокими трещинами заполняли вазелином, чтобы препятствовать току тока, оставляя неповрежденную кожу, окружающую бородавку, свободной от желе, чтобы обеспечить проникновение салициловой кислоты.

Дисперсионную прокладку размером 7,62 × 15,24 см (3 × 6 дюймов) смачивали водопроводной водой и закрепляли на средней части живота ипсилатеральной икроножной мышцы эластичными ремнями. Активный электрод был создан путем увлажнения двух 12-слойных марлевых прокладок размером 5,08 × 5,08 см (2 × 2 дюйма) 2% раствором салицилата натрия. Затем марлевые подушечки сложили дважды, чтобы получилась цифра 2. 54 × 2,54 см (1 × 1 дюйм), 8-слойный электрод. Сложенный электрод пропитывали 2% раствором салицилата натрия и протирали бородавку (е) для обеспечения влажности и уменьшения импеданса. Затем электрод помещали на поверхность бородавки или скопления бородавок. Металлический свинец и марлевую подушечку закрепляли скотчем (рис. 2). Пациенты были проинформированы о том, что они могут ощущать зуд или покалывание во время лечения под активным или дисперсионным электродом. Любое ощущение жжения указывало на потенциальное жжение кожи, вторичное по отношению к воздействию постоянного тока, и ток уменьшался.

Рис. 2.

Схема лечения ионтофорезом с использованием аппарата электростимуляции Mettler в режиме постоянного тока.

Рис. 2.

Схема лечения ионтофорезом с использованием аппарата электростимуляции Mettler в режиме постоянного тока.

Использовался аппарат для электростимуляции Mettler (Sys-Stim Model 206A*). Выходной токоподвод был модифицирован путем пропускания его через делитель тока для увеличения числа активных выходных каналов с 1 до 8 потенциальных каналов (рис. 2). Это позволило обрабатывать более одной области подошвенной бородавки одновременно. Изначально стимулятор был настроен на следующие переменные: непрерывный постоянный ток, продолжительность 25 минут. Ток увеличивали медленно, чтобы приспособиться к ощущению постоянного тока. После достижения максимального тока, переносимого пациентом, рассчитывалось общее время лечения и устанавливался таймер лечения. Затем переменные были скорректированы таким образом, чтобы общая обработка составляла 22,5 мА-мин на электрод, при этом максимальный ток никогда не превышал 0.23 мА/см 2 (1,5 мА/дюйм 2 ) для активного электрода (рис. 3).

Рисунок 3.

Рисунок 3.

В конце лечения участки кожи проверяли на цвет и чистоту кожи. Мы ожидали найти легкую розоватость кожи. Любое ярко-розовое пятно или образование волдырей указывало бы на ожог ДК, и было бы начато соответствующее лечение ожога. Однако случаев образования пузырей или ожогов не произошло. Пациентов просили оценить их боль после лечения.

Процедуры повторяли один раз в неделю, всего 3 сеанса с интервалом от 6 до 9 дней между сеансами. После заключительного сеанса никакое другое лечение не разрешалось в течение 3 месяцев. Период в 3 месяца был выбран потому, что время обновления эпидермиса в нормальной коже составляет от 52 до 75 дней. 7 Пациент был проинформирован о том, что бородавки могут стать черными или темно-коричневыми в течение 3 месяцев после лечения в результате некроза бородавок. От четырнадцати до 26 недель (X = 16,7, SD = 2,8, медиана = 15.7) после первичного визита пациентку повторно проверили на наличие бородавок. Обработанный участок бородавки фотографировали и измеряли размер бородавки, если бородавка все еще присутствовала. Пациентов снова попросили оценить свою боль при нагрузке по возрастающей шкале от 0 до 10.

Анализ данных

Анализ данных состоял из описательных сводок размеров бородавок и результатов обследования. Изменения с течением времени оценивали по количеству и общей площади бородавок и тестировали на статистическую значимость с использованием знакового рангового критерия Уилкоксона для парных различий ( P =. 05).

Результаты

Среднее количество бородавок на одного пациента первоначально составляло 5,5 (SD = 4,9, диапазон = 1–17), всего было пролечено 104 бородавки. У пациентов эти бородавки были от 6 до 120 месяцев (X = 26,5, SD = 35,5, медиана = 12) (таблица 1).

Средняя общая площадь бородавок до лечения составляла 95,1 мм 2 (диапазон = 14–256 мм 2 ) (табл. 2). Во время последующей оценки только один субъект продемонстрировал 100% снижение (с 75 до 0.00 мм 2 ). У трех субъектов наблюдалось значительное уменьшение: 99,9% (с 150,45 до 0,79 мм 2 ), 97,7% (с 69,41 до 1,57 мм 2 ) и 89,2% (с 43,24 до 4,67 мм 2 ). У двенадцати других субъектов также наблюдалось заметное уменьшение площади бородавок (рис. 4). У одного пациента, у которого изначально была одна бородавка, изменений не было. У двух пациентов бородавки увеличились в размерах (рис. 5). Только у 1 из 19 пациентов не было бородавок после лечения, но у 15 из 19 пациентов (78,9%) отмечалось уменьшение площади бородавок. Среднее изменение площади в процентах от исходного измерения на пациента составило уменьшение на 30% (X = 27,4%, SD = 72,8%, диапазон = от -100% до +228%). Со временем уменьшалось как количество бородавок, так и площадь бородавок. Нежелательных явлений, связанных с лечением, не было.

Рисунок 4.

Демонстрация уменьшения размера и внешнего вида бородавок при лечении ионофорезом: (A) до лечения, (B) после лечения и 3-месячного периода ожидания.

Рисунок 4.

Демонстрация уменьшения размера и внешнего вида бородавок при лечении ионофорезом: (A) до лечения, (B) после лечения и 3-месячного периода ожидания.

Рисунок 5.

Общая площадь бородавок у пациентов при первоначальном и последующем осмотре. Каждый закрашенный кружок (•) показывает начальную область одного пациента и соединен с незакрашенным кружком (○), показывающим область последующего наблюдения того же пациента.

Рисунок 5.

Общая площадь бородавок у пациентов при первоначальном и последующем осмотре. Каждый закрашенный кружок (•) показывает начальную область одного пациента и соединен с незакрашенным кружком (○), показывающим область последующего наблюдения того же пациента.

Таблица 2.

Количество и размер бородавок (размер выборки = 19)

0 № Verrucae 0-15
. Начальный визит . 3 месяца после лечения . .
. Х̅ . SD . Ассортимент . Х̅ . SD . Ассортимент . Р и .
5.5 4.9 49 3-17 3.7 3.8 0-15 .016
Общая площадь (мм 2 ) 74.7 14-256 62.6 77.7 77.7 0-308 .007
0 № Verrucae 0-15 .007 
. Начальный визит . 3 месяца после лечения . .
. Х̅ . SD . Ассортимент . Х̅ . SD . Ассортимент . Р и .
5.5 4.9 49 3-17 3.7 3.8 0-15 .016
Общая площадь (мм 2 )
Таблица 2.

Количество и размер бородавок (размер выборки = 19)

0 № Verrucae 0-15 0 0-308 9119
. Начальный визит . 3 месяца после лечения . .
. Х̅ . SD . Ассортимент . Х̅ . SD . Ассортимент . Р и .
5.5 4.9 49 3-17 3.7 3.8 0-15 .016
Общая площадь (мм 2 ) 95.1 74.7 14-256 62,6 77.7 0-007
0 1-17 14 –256
. Начальный визит . 3 месяца после лечения . .
. Х̅ . SD . Ассортимент . Х̅ . SD . Ассортимент . Р и .
№Verrucae 5.5 5.5 49 3.7 3.8 3.8 0-15 .016 .016
Общий пострадавший район (мм 2 ) 95.1 74.7 62,6 77,7 0–308 Обсуждение

После отчета Гордона и Вайнштейна, 16 , не появилось никаких других сообщений, описывающих использование ионофореза для доставки салициловой кислоты к подошвенным бородавкам. Несмотря на то, что наш опыт не показал скорость заживления, о которой первоначально сообщали Гордон и Вайнштейн, 16 , мы обнаружили, что наши результаты лучше по сравнению с результатами других видов лечения в амбулаторных условиях. 17 Из 15 пациентов с бородавками, покрывающими самые большие площади, у 2 пациентов площадь бородавок увеличилась, у 1 пациента не было видимых изменений, а у 12 пациентов площадь бородавок значительно уменьшилась (рис. 5).

У одного 4-летнего пациента с 3 подошвенными бородавками (рис. 6А) было заметное уменьшение площади бородавок с исчезновением одной бородавки (рис. 6В) во время наблюдения (исходная средняя площадь = 23,14 мм 2 , минимум = 14,54, максимум = 35,26, средняя площадь наблюдения = 0,52 мм 2 , минимум = 0.00, максимум=0,79). В связи с улучшением состояния этого пациента было проведено дополнительное наблюдение через 1 месяц после окончательной оценки. У пациентки через 5 недель было полное исчезновение всех бородавок.

Рисунок 6.

Подошвенные бородавки 4-летнего пациента (A) во время начальной оценки и (B) после лечения и 3-месячного периода ожидания.

Рисунок 6.

Подошвенные бородавки у 4-летнего пациента (A) во время начальной оценки и (B) после лечения и 3-месячного периода ожидания.

У двух пациентов во время последующего наблюдения были обнаружены расширенные подошвенные бородавки. Ни одно вмешательство никогда не было на 100% эффективным для лечения вирусных бородавок; поэтому наши результаты не были неожиданными. Бородавки могут даже рецидивировать в 20-40% случаев при хирургическом иссечении или электрокоагуляции. 10 Вирус папилломы человека (вирусный белок и инфекционные частицы) может существовать в субклиническом состоянии в тканях, окружающих очаг поражения, что приводит к изменениям кожи, невидимым невооруженным глазом.В этом случае электрод размером 2,54 × 2,54 см (1 × 1 дюйм) мог не покрыть достаточную площадь поверхности невидимой пораженной ткани. Таким образом, в некоторых случаях лечение только аномально выглядящей кожи не обязательно приводит к лечению области вирусных частиц вокруг каждого поражения. 4 Рецидив такого рода известен как «феномен Кебнера», также называемый «изоморфной реакцией», и относится к появлению новых поражений вдоль места повреждения. 14

Мы считаем, что использование салициловой кислоты остается одним из самых безопасных способов лечения бородавок.Он способствует кератолизу инфицированных вирусом тканей. 13 Часто используемая в сочетании с другими кислотами, такими как молочная кислота, недавно было показано, что салициловая кислота, скорее всего, является активным ингредиентом. Спектроскопия комбинационного рассеяния с преобразованием Фурье использовалась, чтобы показать, что салициловая кислота (а не молочная кислота или гибкий коллодий) связывается с тканью бородавок, содержащей ВПЧ. 18

Поскольку подошвенные бородавки обычно располагаются на опорных поверхностях стоп, возможности лечения ограничены.Мы утверждаем, что ионофорез имеет то преимущество, что он безболезненный, и большинство пациентов могут безболезненно переносить вес на пораженную область сразу после лечения. Кроме того, лечение не оставляет шрамов. У одного из наших пациентов, 4-летнего ребенка, бородавки располагались на пятке, из-за чего пациент ходил на носках. После третьего сеанса у этого пациента появилась совершенно нормальная походка. Это резко контрастирует с болью, которая может возникнуть после лечения жидким азотом.

Агрессивные деструктивные методы лечения (например, криодеструкция, электрокоагуляция), по нашему мнению, нежелательны из-за возникающего в результате дискомфорта и вмешательства в повседневную деятельность пациента. Мы считаем, что менее агрессивные химические методы лечения часто не дают желаемых результатов из-за недостаточной приверженности пациента или способности поддерживать контакт лечебного средства с бородавкой.

Ионофорез можно использовать для доставки кислоты в ткани за 20-30-минутные сеансы всего за несколько процедур. Считается, что кислота проникает на глубину 10 мм при ионтофоретическом применении. 19 Таким образом, может оказывать благоприятное воздействие на глубоко концентрированные бородавки. Кроме того, не требуется никакой приверженности пациента, кроме явки на запланированные встречи.Ионофорез как клинический вариант используется физиотерапевтами и дерматологами более 50 лет без документально подтвержденных серьезных побочных реакций. 19–22 Наше исследование показывает, что ионофоретическое применение салициловой кислоты к подошвенным бородавкам представляет собой жизнеспособный вариант лечения.

Ограничения

Мы не включали контрольную группу или группу сравнения, поэтому реакцию на лечение можно оценить только косвенно, и на нее могут влиять искажающие факторы. Необходимо рандомизированное контролируемое клиническое исследование. Часто бывает трудно отличить заживший рубец от бородавки от рецидивирующей бородавки. 1 Кроме того, бородавки, которые не рассасываются, часто разрастаются. 1 Оба эти феномена исказили бы результаты в сторону более низкой частоты заживления, чем в случае только реагирующих поражений.

Предложения по дальнейшим исследованиям

Количество сеансов лечения и частота лечения, которые мы использовали, были основаны на статье Гордона и Вайнштейна, 16 , а не на периоде полувыведения лекарства или физиологической реакции на DC.Изменение как количества, так и частоты процедур может привести к улучшению клинических результатов. Поскольку ВПЧ может существовать в субклиническом состоянии, мы предлагаем увеличить размер активного электрода, чтобы более тщательно покрыть и обработать поле вирусных частиц вокруг каждого поражения. Сравнение ДК с не-ДК доставкой салициловой кислоты кажется оправданным. Недавняя литература по ионтофорезу предполагает, что применение непрерывного постоянного тока может быть ограничивающим. Сообщается, что использование обратного или импульсного постоянного тока уменьшает раздражение кожи и, таким образом, позволяет использовать более высокие дозы лекарств. 23

Выводы

Основываясь на нашей серии из 19 пациентов, мы считаем, что ионофорез салициловой кислоты является предпочтительным вариантом лечения, который дает результаты, сравнимые с результатами других более инвазивных, болезненных, трудоемких и дорогостоящих вмешательств, таких как замораживание, электрокоагуляция и лечебные пластыри. . Лечение подошвенных бородавок салициловой кислотой требует минимальной приверженности пациента, безопасно и, по-видимому, имеет минимум вредных побочных эффектов.

Каталожные номера

1

Болтон

РА

.

Негенитальные бородавки: классификация и варианты лечения

.

Семейный врач

.

1991

;

43

:

2049

2056

.2

Роман

А

,

Файф

КХ

.

Вирусы папилломы человека: готовы ли мы ввести

?

Клин Микробиол Ред.

.

1989

;

2

:

166

190

.3

Массирование

утра

,

Эпштейн

WL

.

Естественное течение бородавок

.

Арч Дерматол

.

1963

;

87

:

306

310

.4

Дрейк

ЛА

,

Ceilley

RI

,

Cornelison

RL

, и др..

Руководство по лечению бородавок: вирус папилломы человека

. Комитет по рекомендациям по уходу.

J Am Acad Дерматол

.

1995

;

32

:

98

103

.5

Конклин

РДЖ

.

Общие кожные заболевания у спортсменов

.

Спорт Мед

.

1990

;

9

:

100

119

.6

Эстеровиц

Д

,

Greer

KE

,

Cooper

PH

,

Edlich

RF

.

Подошвенные бородавки у спортсменов

.

Am J Emerg Med

.

1995

;

13

:

441

443

.7

Чемпион

РХ

,

Бертон

ДЖЛ

,

Эблинг

ФДЖГ

.

Rook/Wilkinson/Ebling Учебник дерматологии

.

Бостон, Массачусетс

:

Blackwell Scientific Publications

;

1992

:

847

. 8

Бентон

С

.

Лечение вирусных бородавок

.

Практик

.

1988

;

232

:

933

938

.9

Стедман

турецких лир

.

Медицинский словарь Стедмана, иллюстрированный

. 24-е изд.

Балтимор, Мэриленд

:

Williams & Wilkins

;

1982

.10

Арнольд

ГЛ

,

Эндрюс

ГК

,

Одом

РБ

,

Джеймс

WD

.

Болезни кожи Эндрюса: клиническая дерматология

.

Филадельфия, Пенсильвания

:

WB Saunders Co

;

1990

.11

Шах

КАК

,

Колдирон

БМ

.

Гранулема инородного тела из-за неожиданного деревянного шипа

.

Семейный врач

.

1992

;

45

:

673

674

.12

Соллитто

РДЖ

,

Пиццано

DM

.

Блеомицина сульфат при лечении мозаичных подошвенных бородавок: последующее исследование

.

Журнал хирургии стопы и голеностопного сустава

.

1996

;

35

:

169

172

.13

Гольдфарб

МТ

,

Гупта

АК

,

Гупта

МА

,

Савчук

ВС

.

Офисная терапия папилломавирусной инфекции негенитальных локализаций

.

Дерматол Клин

.

1991

;

9

:

287

296

.14

Бакли

Д

.

Криохирургическое лечение подошвенных бородавок

.

Ир Мед J

.

2000

;

93

:

140

143

.15

Сингх

Дж

,

Робертс

MS

.

Ионофоретическая трансдермальная доставка салициловой кислоты и лидокаина в местные подкожные структуры

.

Дж Фарм Науки

.

1993

;

82

:

127

131

.16

Гордон

АХ

,

Вайнштейн

МВ

.

Ионофорез салицилата натрия при лечении подошвенных бородавок

.

Физ Тер

.

1969

;

49

:

869

870

.17

Банни

МЗ

,

Нолан

МВт

,

Уильямс

DA

.

Оценка методов лечения вирусных бородавок путем сравнительных испытаний лечения на основе стандартного дизайна

.

Бр Дж Дерматол

.

1976

;

94

:

667

679

.18

Лоусон

ЕЕ

,

Эдвардс

HG

,

Барри

BW

,

Уильямс

AC

.

Взаимодействие салициловой кислоты с бородавками, оцененное с помощью FT-рамановской спектроскопии

.

J Наркологическая мишень

.

1998

;

5

:

343

351

.19

Костелло

КТ

,

Йеске

АХ

.

Ионофорез: применение для трансдермальной доставки лекарств

.

Физ Тер

.

1995

;

75

:

554

563

.20

Кассан

ДГ

,

Линч

АМ

,

Стиллер

МДж

.

Физическое усиление доставки дерматологических препаратов: ионофорез и фонофорез

.

J Am Acad Дерматол

.

1996

;

34

:

657

666

.21

Калия

г.н.

,

Меринос

V

,

Парень

RH

.

Трансдермальная доставка лекарств: клинические аспекты

.

Дерматол Клин

.

1998

;

16

:

289

299

.22

Гарнизон

Дж

.

Ионофорез: альтернативная система доставки лекарств

.

Med Device Technol

.

1998

;

9

:

32

36

.23

Ховард

JP

,

Drake

TR

, Kellogg DL Jr.

Влияние ионофореза переменного тока на доставку лекарств

.

Arch Phys Med Rehabil

.

1995

;

76

:

463

466

.

© 2002 Американская ассоциация физиотерапии

Lichen Simplex Chronicus Состояние, лечение и фотографии для родителей — обзор

51861 33 Информация для РебенокВзрослый подпись идет сюда…
Изображения Lichen Simplex Chronicus

Обзор

Простой хронический лишай (LSC), также известный как обрамляющий нейродермит, представляет собой кожное зудящее состояние, вызывающее утолщение кожи на участках кожи, поврежденных повторяющимися царапинами и трением.

Простой хронический лишай является не первичным заболеванием, а реакцией кожи на хроническое физическое повреждение (травму). Постепенное утолщение кожи, вызванное повторяющимся расчесыванием и трением, называется лихенизацией.

Простой хронический лишай начинается с кожного зуда. Зуд приводит к расчесыванию и натиранию, что вызывает утолщение кожи. Утолщенная кожа зудит, что вызывает большее расчесывание и, следовательно, большее утолщение кожи. Этот цикл царапин и зуда продолжается, если его не лечить.

Кто в опасности?

Простой хронический лишай может возникать у людей любого возраста, любой расы и любого пола. Тем не менее, это чаще встречается у женщин, чем у мужчин. Хотя это редко наблюдается у детей, простой хронический лишай может возникать у подростков и чаще появляется у людей среднего и старшего возраста.

Условия, которые могут привести к лишайнику Simplex Chronicus, включают в себя:

  • Укусы насекомых
  • Scares
  • Scares
  • Eczema (атопический дерматит)
  • Сухой кожа (ксероз)
  • Плохое распространение в ногах (венозная недостаточность)
  • стресс

Признаки и симптомы

Хотя простой хронический лишай может возникать на любом участке тела, чаще всего он наблюдается в следующих областях:

  • Внутренняя поверхность запястий, предплечий и локтей
  • Бока и задняя часть шеи
  • Голени, лодыжки и верх стопы
  • Аногенитальные области (вульва или мошонка, анус)
Каждое пятно простого хронического лишая выглядит как кожистая, утолщенная кожа, в которой нормальные кожные линии преувеличены. Утолщенная кожа темнее окружающей кожи (гиперпигментирована). Эта гиперпигментация еще более заметна у темнокожих людей.

Люди с простым хроническим лишаем сообщают о периодическом зуде, который наиболее интенсивен ночью и в другое время, когда они спокойны и неподвижны.

Руководство по уходу за собой

Основное лечение — остановить расчесывание. Тем не менее, это может быть очень сложно, если начался цикл зуда и расчесывания. Возможно, вам придется прикрывать области простого хронического лишая на ночь, чтобы ребенок не расчесывал их во время сна.

Используйте увлажняющие средства, чтобы уменьшить зуд кожи. При выборе увлажняющего крема для ребенка ищите кремы и мази на масляной основе, которые работают лучше, чем лосьоны на водной основе. Наносите увлажняющие средства сразу после купания ребенка, пока кожа еще влажная.

Нанесите безрецептурный крем с гидрокортизоном, чтобы уменьшить зуд. Обратите внимание, что если зуд ограничен областью паха, у вашего ребенка может быть грибковая инфекция (зуд качка, дерматомикоз), а не простой хронический лишай. Не наносите гидрокортизон на область паха, если это не рекомендовано врачом.

Если на коже вашего ребенка есть повреждения или трещины, нанесите мазь с антибиотиком, чтобы предотвратить инфекцию.

Когда обращаться за медицинской помощью

Обратитесь к врачу вашего ребенка, если зуд не уменьшается с помощью мер по уходу за собой, если появляются новые поражения или если у вашего ребенка появляются симптомы инфекции, такие как боль, покраснение, выделение гноя или лихорадка.

Лечение, которое может назначить ваш врач

Если нет уверенности в наличии у вашего ребенка простого хронического лишая, врач может выполнить биопсию кожи для подтверждения диагноза. Процедура включает:

  1. Обезболивание кожи инъекционным анестетиком.
  2. Взятие образца небольшого кусочка кожи с помощью гибкого лезвия бритвы, скальпеля или крошечной формочки для печенья (так называемая «пункционная биопсия»). Если проводится пункционная биопсия, может быть наложен один или два шва, которые необходимо будет снять через 6–14 дней.
  3. Исследование образца кожи под микроскопом специально обученным врачом (дерматопатологом).
Если вы уверены, что у вашего ребенка простой хронический лишай, важно разорвать цикл «чесание-зуд». В дополнение к вышеуказанным мерам по уходу за собой врач вашего ребенка может порекомендовать одно или несколько из следующих средств для уменьшения зуда и расчесов:
  • Агрессивное увлажнение
  • Кремы или мази с кортикостероидами (кортизоном)
  • Кремы, содержащие салициловую кислоту или мочевину для улучшения проникновения местного кортикостероида
  • Пероральные антигистаминные препараты, особенно для использования перед сном
  • Инъекция раствора кортикостероида непосредственно в очаги поражения простым хроническим лишаем
  • Терапия ультрафиолетовым светом
  • Доксепин или крем с капсаицином
  • Местно или перорально инфекция присутствует

Доверенные ссылки

Клиническая информация и дифференциальная диагностика простого хронического лишая

Каталожные номера

Болонья, Жан Л. , изд. Дерматология , стр.117-118. Нью-Йорк: Мосби, 2003.

Фридберг, Ирвин М., изд. Дерматология Фитцпатрика в общей медицине . 6 изд., стр.1196-1197. Нью-Йорк: Макгроу-Хилл, 2003.

.

границ | Салициловая кислота, растительный гормон, подавляет иммунный ответ растительноядных насекомых, прерывая HMG-подобный DSP1

Введение

Белки группы высокой подвижности представляют собой негистоновые ДНК-связывающие белки эукариот. Эти белки группы высокой подвижности (HMG) включают по крайней мере три неродственные группы белков: HMGA, HMGB и HMGN (Reeves, 2003).Белки группы А с высокой подвижностью связываются с A/T-богатыми последовательностями ДНК и способствуют связыванию др. факторов транскрипции, в то время как белки HMGN связываются с нуклеосомами и способствуют деконденсации хроматина (Bustin, 2001). С другой стороны, белки HMGB характеризуются наличием ДНК-связывающего бокса с кислым хвостом, который может неспецифически связываться с ДНК и индуцировать резкие изгибы, обеспечивая легкое присоединение факторов транскрипции и комплексов ремоделирования хроматина (Thomas and Travers, 2001). . У млекопитающих известны четыре белка HMGB (HMGB1–4).Они повсеместно экспрессируются во время эмбриогенеза, хотя обнаруживают разные паттерны пространственной экспрессии на взрослой стадии (Stros, 2010).

Человеческая группа высокой подвижности Box 1 представляет собой повсеместно экспрессируемый и высококонсервативный ядерный белок, который играет важную роль в организации хроматина и регуляции транскрипции у млекопитающих (Bianchi et al., 2017). Впервые он был обнаружен в тимусе теленка как ассоциированный с хроматином белок с высоким содержанием кислых и основных аминокислот (Goodwin and Johns, 1977).Более того, HMGB1 состоит из двух HMG-боксов (боксов A и B) и длинного кислотного хвоста (Stros et al., 2007). Два HMG-бокса имеют разные функции и свойства: бокс A распознает предварительно изогнутую и линейную ДНК (Muller et al., 2001), тогда как бокс B связывается с мини-кольцевой ДНК или изогнутой линейной ДНК (Webb et al., 2001). Дополнительные мотивы были обнаружены в HMGB1. Например, спиральная спиральная область может опосредовать белок-белковые взаимодействия для контроля транскрипции генов-мишеней через ядерные рецепторы (Parry et al., 2008). Область низкой сложности содержит повторы одиночных или коротких повторяющихся мотивов аминокислот. Он играет различные функциональные роли в модуляции белок-белковых взаимодействий, белок-нуклеиновых кислот и внутриклеточной локализации белка (Salichs et al., 2009).

Высокоподвижный групповой бокс 1 может высвобождаться при стрессе либо пассивно из мертвых клеток (Bianchi et al., 2017), либо активно секретироваться из активированных иммунных клеток, энтероцитов, гепатоцитов и, возможно, некоторых других типов клеток (Tsung et al., 2007). Высвобожденный HMGB1 может действовать как молекулярный паттерн, ассоциированный с повреждением (DAMP), и активировать врожденную иммунную систему, взаимодействуя с рецепторами распознавания паттерна (Jong and Dong, 2018).

Белок 1 дорсального переключателя Drosophila melanogaster является гомологом HMGB1, впервые идентифицированным у насекомых (Mosrin-Huaman et al. , 1998). В дополнение к сигнатурным мотивам HMGB1, дорсальный переключатель белка 1 (DSP1) обладает двумя богатыми глутамином доменами на своем N-конце (Canaple et al., 1997).Нуль-мутанты DSP1 обнаруживают гомеотические трансформации, связанные с подавлением экспрессии , редуцированной Sex combs (Decoville et al., 2001). Кроме того, DSP1 действует как фактор транскрипции и фактор ремоделирования хроматина, усиливая другие факторы транскрипции, такие как белок Hox (Zappavigna et al., 1996), p53 (Jayaraman et al., 1998) и рецептор стероидного гормона (Boonyaratanakornkit et al. ., 1998). Другой гомолог HMGB1 был обнаружен у комара Aedes aegypti .Он показывает высокую гомологию с HMGB1 и Drosophila DSP1 (Ribeiro et al., 2012). Этот комар HMGB1 может способствовать связыванию транскрипционного фактора Rel с промотором ядерного фактора каппа B (NF-kB) для экспрессии противовирусных генов против вирусной инфекции денге (de Mendonça Amarante et al., 2017). В дополнение к двукрылым насекомым, чешуекрылое насекомое ( Plodia interpunctella ) также обладает HMGB1-подобными белками (Aleporou-Marinou et al. , 2003). Т.о., HMGB1 может быть высококонсервативным у насекомых, как и у млекопитающих, и играть решающую роль в иммунных реакциях насекомых, способствуя организации хроматина и регуляции транскрипции.Однако мало что известно о роли HMGB1 в качестве DAMP и в последующих реакциях, связанных с иммунитетом, у насекомых.

Салициловая кислота — растительный гормон, который может опосредовать защиту растений от микробных патогенов. Он также может регулировать рост и развитие растений (Koo et al., 2020). В частности, сигнал салициловой кислоты (СК) связан с устойчивостью к биотрофным микробным патогенам за счет индукции экспрессии генов, связанных с патогенезом, которые кодируют противомикробные или другие защитные белки, и за счет активизации активных форм кислорода (Ton et al., 2006). Что касается устойчивости к насекомым, растения могут использовать сигнал СК против насекомых, питающихся флоэмой, хотя эффективность СК остается спорной (Zarate et al., 2007). Существует мало информации о сигнале SA во взаимодействиях между растениями и грызущими насекомыми, такими как чешуекрылые (Wu and Baldwin, 2009). Между тем, HMGB1 может связываться с SA и терять свою провоспалительную активность (Choi et al., 2015). Тот факт, что СК является метаболитом аспирина (= ацетилированный СК) у людей, свидетельствует о новом нестероидном противовоспалительном лекарственном (НПВП) действии аспирина, который, как известно, ингибирует циклооксигеназу 2 (ЦОГ-2) для выключения воспалительного простагландина. PG) производство (Choi et al., 2015). Ингибиторы циклооксигеназы, такие как аспирин, эффективно подавляют иммунный ответ насекомых (Stanley and Kim, 2011). Мы предположили, что SA растений может участвовать в защите растений от насекомых-фитофагов, взаимодействуя с гомологами HMGB1 насекомых. Таким образом, это может привести к подавлению иммунных реакций насекомых против микробных энтомопатогенов. Таким образом, целью данного исследования было проведение функциональной характеристики DSP1 (Se-DSP1) у чешуекрылых насекомых Spodoptera exigua и последующий анализ Se-DSP1 для определения его функциональной связи с SA растений. Наши результаты предлагают новый механизм защиты растений, использующий СА против насекомых-вредителей, чтобы такие насекомые могли быть восприимчивы к микробным энтомопатогенам, влияя на их иммунную систему.

Материалы и методы

Разведение насекомых и культивирование бактерий

Личинки S. exigua были выращены с использованием метода Goh et al. (1990) при 25 ± 1°С, при которых личинки прошли пять возрастов («L1–L5»). Для иммунного заражения Escherichia coli Top10 (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США) культивировали с помощью метода, описанного ранее (Hasan et al., 2019). Бактериальные клетки ресуспендировали в дистиллированной воде, чтобы получить 4,5 × 10 4 клеток/мкл для обработки. Для теста на патогенность Bacillus thuringiensis subsp. aizawai (Bt) и Xenorhabdus hominickii ANU101 (Xh) культивировали с помощью метода, описанного ранее (Mollah et al., 2020a).

Химикаты

Был приготовлен антикоагулянтный буфер (ACB) из 186 мМ NaCl, 17 мМ Na 2 ЭДТА и 41 мМ лимонной кислоты, а затем pH был доведен до 4. 5 с HCl. Приготовили фосфатно-солевой буфер (PBS) со 100 мМ фосфорной кислоты и довели рН до 7,4. Реагент для трансфекции Metafectene Pro был приобретен у Biontex (Plannegg, Германия). Салициловую кислоту (2-гидроксибензойная кислота: SA, ≥99%) получали от Sigma-Aldrich (Сеул, Корея) и растворяли в диметилсульфоксиде.

Биоинформатика и анализ последовательностей

Последовательность (Se-DSP1) из S. exigua , гомологичная человеческому HMGB1 (инвентарный номер GenBank: CAG33144.1) был получен из транскриптома (инвентарный номер GenBank: GAFU01017850.1). Его открытая рамка считывания (ORF) была депонирована в GenBank (инвентарный номер: MK737894). Филогенетический и доменный анализы проводили с использованием программ MEGA6 и Clustal W Европейского института биоинформатики Европейской лаборатории молекулярной биологии (EMBL-EBI) (www.ebi.ac.uk). Значения начальной загрузки были получены с 1000 повторений для поддержки ветвей. Белковые домены были предсказаны с использованием SMART (http://smart. embl-heidelberg.de/) программа поиска.

Экстракция РНК и RT-qPCR

Экстракцию тотальной РНК, получение комплементарной ДНК (кДНК) и количественную ПЦР с обратной транскрипцией (RT-q) проводили в соответствии с методами, описанными ранее (Mollah et al., 2020a,b). Синтезированную первую цепь кДНК использовали в качестве матрицы для ПЦР-амплификации с 35 циклами 94°С в течение 30 с, 58,8°С в течение 30 с и 72°С в течение 30 с после начальной термообработки при 94°С в течение 2 min с геноспецифическими праймерами, перечисленными в дополнительной таблице S2.

РНК-интерференция (РНКи) экспрессии

Se-DSP1

Матрицу ДНК амплифицировали с ген-специфическими праймерами Se-DSP1 (дополнительная таблица S2), содержащими промоторную последовательность Т7 (5′-TAATACGACTCACTATAGGGAGA-3′) на 5′-конце. Двухцепочечную РНК (дцРНК) получали по методу, описанному ранее (Mollah et al., 2020b). Вирусный ген CpBV302 использовали в качестве контрольной dsRNA («dsCON»).

Анализ иммунного ответа

Для клеточного иммунного анализа гемоцитарные узелки оценивали с помощью метода, описанного ранее (Mollah et al., 2020а). Для гуморального иммунного ответа уровни экспрессии шести генов противомикробных пептидов (AMP) (дополнительная таблица S2) оценивали с помощью метода RT-qPCR, как описано выше.

Очистка рекомбинантного

Se-DSP1 и аффинности связывания SA

ORF Se-DSP1 клонировали в вектор экспрессии pET (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США). После сверхэкспрессии изопропил-β-D-тиогалактопиранозидом рекомбинантный белок, содержащий метку 6×His, очищали с помощью метода, описанного ранее (Mollah et al., 2021). Полученные белки содержали частично расщепленные фрагменты, которые удаляли гель-фильтрационной хроматографией со смолой Sephadex G-100 (Sigma-Aldrich, Сеул, Корея). Для обнаружения связывания Se-DSP1 с SA был проведен анализ теплового сдвига (Симеонов, 2013) с использованием набора красителей Protein Thermal Shift (Applied Biosystem, Foster City, CA, США) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, реакционная смесь состояла из 5 мкл белкового термосдвигающего буфера, 2,5 мкл белкового термосдвигающего красителя (8×, приготовленный с помощью набора), 10 мкл (500 нг) очищенного белка (Se-DSP1) и 2.5 мкл лигандов в различных конечных концентрациях (0, 5, 10, 15 и 20 мкМ). Тип эксперимента с кривой плавления был установлен с использованием системы ПЦР в реальном времени StepOne (Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния, США) с режимом непрерывного линейного изменения (2,96°C/мин), при котором два предельных значения температуры составляли 25°C для 2 мин на начальном этапе и 99°С в течение 2 мин на заключительном этапе. Температуры плавления, полученные в результате эксперимента, наносили на график с помощью SigmaPlot 10.0 (Systat Software, Сан-Хосе, Калифорния, США). Константу диссоциации (Kd) рассчитывали с использованием категории уравнения связывания лиганда.

Фосфолипаза А

2 (PLA 2 ) Ферментативная активность, вестерн-блоттинг и иммунофлуоресцентное окрашивание

Активность фермента фосфолипазы А2 измеряли с помощью набора для анализа PLA 2 (Cayman Chemical, Анн-Арбор, Мичиган, США) с использованием дигептаноилтиофосфатидилхолина в качестве субстрата секреторной фосфолипазы А2 (sPLA 2 ) и арахидонилтиофосфатидила. холин для клеточного субстрата PLA 2 (cPLA 2 ) после подготовки образца, как описано ранее (Vatanparast et al., 2018). Вкратце, личинкам L5 S. exigua вводили dsDSP1 и dsCON (1 мкг/личинка) с помощью микрошприца (Hamilton, Reno, NV, United States), инкубировали при комнатной температуре в течение 24 часов, а затем заражали . E. coli (10 4 клеток/личинка). Через 8 ч после инъекции бактерий собирали жировые тела. Реакционный объем состоял из 10 мкл экстракта жировых тел, 10 мкл 5,5-дитио-бис-(2-нитробензойной кислоты), 5 мкл буфера для анализа и 200 мкл субстрата.Изменение поглощения при 405 нм отслеживали в трех биологически независимых повторах.

Для вестерн-блоттинга образцы гемолимфы были собраны из личинок L5 S. exigua . После центрифугирования при 800×g в течение 3 мин при 4°С получали образцы надосадочной плазмы, которые использовали для анализа. Поликлональное антитело против крысиного HMGB1 (NB100-2322; Abcam, Уолтем, Массачусетс, США) использовали после 5000-кратного разведения. α-Тубулин использовали в качестве эталонного белка и обнаруживали с помощью поликлонального антитела (GTX112141; GeneTex, Ирвин, Калифорния, США) после 1000-кратного разведения.Первичные антитела выявляли с помощью вторичного антитела против кроличьего иммуноглобулина G (IgG) и щелочной фосфатазы (WP20007; Sigma-Aldrich, Сеул, Корея) после инкубации с субстратом (BICP/NBT; Sigma-Aldrich, Сеул, Корея). Это антитело показало специфическую перекрестную реактивность с Se-DSP1 (дополнительная фигура S1).

Иммунофлуоресцентный анализ (ИФА) проводили в соответствии с описанным ранее методом (Mollah et al., 2021). Вкратце, гемоциты и жировые ткани были собраны у личинок L5 S.эксигуа . Кроме того, Se-DSP1 наблюдали с антителом HMGB1. Цитоплазму и ядро ​​окрашивали фаллоидином Alexa Fluor 555 и 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI, 1 мкг/мл) (Thermo Fisher Scientific, Рокфорд, Иллинойс, США) соответственно. Впоследствии клетки наблюдали под флуоресцентным микроскопом (DM2500; Leica, Wetzlar, Германия) при 400-кратном увеличении в условиях параметров микроскопа (дополнительная таблица S3).

Биоанализ на бактериальные патогены

Для определения вирулентности Bt личинки L4 подвергали анализу питания с использованием метода погружения листьев.Вкратце, кусок капустного листа (3 × 3 см) замачивали в 250 ppm суспензии Bt, содержащей разные концентрации СК, в течение 5 мин. Затем обработанные листья давали личинкам для кормления в течение 24 часов. Для определения вирулентности Xh личинки L4 подвергали инъекционным анализам. Каждой личинке с помощью микрошприца (Hamilton, Reno, NV, USA) вводили 100 живых бактериальных клеток, содержащих различные концентрации SA. Затем обработанные личинки инкубировали еще 4 дня в условиях выращивания и отслеживали смертность.Каждая повторность состояла из 10 личинок. Каждую обработку повторяли трижды.

Влияние растений томата на чувствительность

S. exigua к бактериальным патогенам

Были использованы две линии Solanum esculantum , «M82» и «IL2-2». Семена были получены из Ресурсного центра генетики томатов Калифорнийского университета (Дэвис, Калифорния, США) (http://tgrc.ucdavis.edu/). Для проведения биотестов личинки L2 S. exigua выращивали на 4-недельных растениях томата в течение 7 сут при 16-часовом световом/8-часовом темном периоде при температуре 25 ± 2°С.Затем личинок использовали для оценки иммунных ответов, определяемых образованием клубеньков и экспрессией AMP, как описано выше. Личинки также использовали для определения вирулентности бактерий, как описано выше.

Количественное определение SA в листьях томатов

Приблизительно 300 мг тканей листьев собирали с каждой линии растений томатов, а затем экстрагировали и анализировали на уровни СК, как описано ранее (Bowling et al., 1994). Концентрацию СК определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на колонке с органической кислотой ARH-601 (100×6.5 мм; Transgenomic Inc., Омаха, Небраска, США) проводят при 45°C, 0,01 Н H 2 SO 4 и скорости потока 0,6 мл/мин.

Результаты

Предсказание гомолога DSP1

(Se-DSP1) Из S. exigua

Путем опроса последовательности D. melanogaster DSP1 (инвентарный номер GenBank: NP_727960.1) в качестве запроса было предсказано Se-DSP1 из транскриптома (инвентарный номер GenBank: GAFU 01017850.1). Его ORF состояла из 1518 п.н., кодирующих 505 аминокислот. Se-DSP1 имеет 95,1, 77,1, 73 и 52,1% сходства аминокислотной последовательности с генами DSP Helicoverpa armigera, Leptinotarsa ​​decemlineata, D. melanogaster и HMGB1 Homo sapiens соответственно. Филогенетический анализ показал, что Se-DSP1 был тесно связан с другими чешуекрылыми в кластере насекомых (дополнительная фигура S2A). Как и HMGB1 млекопитающих, Se-DSP1 содержал HMG-боксы A и B и кислотный хвост (дополнительная фигура S2B).Сайты фосфорилирования и дисульфидной связи часто расположены в боксе А по сравнению с другими доменами. В двух боксах HMG человеческие HMGB1 и Se-DSP1 продемонстрировали более высокую идентичность последовательностей (69,9%) в блоке A, чем в блоке B (39,4%). В отличие от HMGB1 млекопитающих, DSP1 насекомых обладают дополнительными N-концевыми доменами, такими как спиральная спираль, низкая сложность и РНКаза.

Профиль экспрессии

Se-DSP1

На всех стадиях развития Se-DSP1 экспрессировался, демонстрируя высокие уровни экспрессии на стадиях L5 и взрослых особях.У него были низкие уровни экспрессии на стадии куколки (дополнительная фигура S3A). На личиночной стадии L5 Se-DSP1 экспрессировался во всех протестированных тканях, таких как гемоциты, жировое тело, кишечник и эпидермис (дополнительная фигура S3B). Базовые уровни экспрессии Se-DSP1 были значительно повышены после иммунного заражения E. coli в гемоцитах и ​​жировом теле (дополнительная фигура S3C). Такая активация была более острой в гемоцитах, чем в жировом теле.

Транслокация

Se-DSP1 при иммунологическом заражении

У наивных личинок Se-DSP1 был локализован в ядрах гемоцитов (рис. 1А). При бактериальном заражении некоторые белки Se-DSP1 мигрировали в цитозоль. Точно так же Se-DSP1 был локализован в ядрах жирового тела и выделен из наивных личинок, хотя некоторые из них были обнаружены в цитозоле после иммунного заражения (рис. 1В). Интересно, что Se-DSP1 был обнаружен в плазме личинок с иммунодефицитом, хотя он был незначительно обнаружен в плазме, собранной у наивных личинок (рис. 1С).

Рисунок 1 . Высвобождение белков дорсального переключателя 1 (DSP1) Spodoptera exigua (Se-DSP1) из ядер в ответ на иммунный вызов. (А) Мобилизация Se-DSP1 в гемоцитах. (B) Мобилизация Se-DSP1 в жировом теле. Цитозоль и ядра окрашивали фаллоидином против F-актина и 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) против ядерной ДНК. Se-DSP1 был обнаружен с помощью поликлонального антитела, выработанного против блока 1 группы высокой подвижности млекопитающих (HMGB1).В дополнительной таблице S3 описаны значения настроек флуоресцентного микроскопа для получения изображений иммунофлуоресценции. (C) Вестерн-блоттинг против различных тканевых белков гемоцитов («HC»), жирового тела («FB») и средней кишки («GT»). Для иммунного заражения каждой из личинок L5 вводили 4,5 × 10 4 убитых нагреванием (HK) клеток Escherichia coli . Образцы плазмы собирали через 6 ч после инъекции (PI). Однородная интенсивность иммуноблоттинга против α-тубулина указывает на равное количество загрузки образца белка на каждой дорожке.

РНКи

Se-DSP1 Экспрессия приводит к иммуносупрессии

Чтобы проанализировать роль Se-DSP1 в связи с иммунными ответами, его экспрессией манипулировали с помощью РНКи с ген-специфической дцРНК (рис. 2А). Такая обработка РНКи значительно снижала уровни экспрессии Se-DSP1 более чем на 90% в гемоцитах и ​​жировом теле через 24 часа. Снижение уровней мРНК было подтверждено более слабыми полосами вестерн-блоттинга против Se-DSP1. При таком сниженном уровне экспрессии DSP1 клеточный иммунный ответ измеряли путем подсчета гемоцитарных узелков (= клеточный иммунный ответ, секвестрирующий небольшие патогены с гемоцитами и последующей меланизацией) после бактериального заражения (фиг. 2В).У личинок, обработанных РНК-интерференцией, наблюдалось значительное ( P <0,05) нарушение клеточного иммунного ответа, основанное на образовании клубеньков. Кроме того, бактериальное заражение повышало уровни экспрессии генов шести AMP у контрольных личинок (рис. 2C). Снижение экспрессии гена AMP у личинок, обработанных РНКи, было значительным ( F = 997; df = 1, 144; P <0,0001) по сравнению с таковым у контрольных личинок.

Рисунок 2 . Влияние интерференции рибонуклеиновой кислоты (РНКи) на экспрессию Se-DSP1 и иммунные ответы S.эксигуа . (A) Временное изменение уровня экспрессии Se-DSP1 после обработки личинок L5 двухцепочечной (дц)РНК, специфичной к Se-DSP1 (1 мкг на личинку). Вирусный ген CpBV302 использовали в качестве контрольной dsRNA («dsCON»). Нижние панели показывают вестерн-блоттинг против экстрактов HC и FB. Однородная интенсивность иммуноблоттинга против α-тубулина указывает на равное количество загрузки образца белка на каждой дорожке. (B) Подавление образования узелков гемоцитов.Для бактериального заражения HK E. coli (4,5 × 10 4 клеток на личинку) вводили в каждую личинку через 24 ч после обработки дцРНК. Через 8 ч PI оценивали количество узелков. (C) Подавление экспрессии шести генов AMP после обработки РНКи. В качестве внутреннего контроля использовали рибосомный белок RL32. Относительные уровни экспрессии определяли путем нормализации по сравнению с уровнями экспрессии контрольного гена с последующим расчетом относительных отношений по сравнению с самым низким уровнем.Каждую обработку повторяли трижды. Звездочки над столбцами SD указывают на значительную разницу между средними при ошибке типа I = 0,05 (наименее значимое различие, LSD, тест).

Se-DSP1 Активирует биосинтез эйкозаноидов для активации иммунных реакций

Эйкозаноиды опосредуют различные иммунные реакции насекомых (Stanley and Kim, 2011). Чтобы понять иммунное опосредование Se-DSP1, его активацию иммунной сигнализации эйкозаноидов проверяли путем измерения активности PLA 2 , катализирующей обязательный этап биосинтеза эйкозаноидов, после обработки РНКи против Se-DSP1 (рис. 3).Для измерения активности фермента PLA 2 использовали два субстрата, арахидонатный фосфолипид и неарахидонатный фосфолипид. В частности, активность PLA 2 , полученная из неарахидонатного фосфолипида, была обозначена как активность sPLA 2 . Напротив, активность cPLA 2 была получена из активности PLA 2 с использованием арахидонатного фосфолипида. Иммунная провокация значительно ( P <0,05) повышала активность обеих PLA и 2 (фиг. 3A, B).Однако личинки, обработанные РНКи, специфичной к экспрессии Se-DSP1 , не индуцировали активности PLA 2 . Такие подавленные иммунные ответы при лечении РНКи были значительно ( P <0,05) восстановлены арахидоновой кислотой (AA) или простагландином E 2 (PGE 2 ) в клеточном (рис. 3C) или гуморальном иммунитете (рис. 3D).

Рисунок 3 . Se-DSP1 активирует биосинтез эйкозаноидов, опосредуя клеточный и гуморальный иммунный ответ S.эксигуа . Подавление индуцированной бактериями активности (A) секреторной фосфолипазы A2 (sPLA 2 ) и (B) клеточного PLA2 (cPLA 2 ) с помощью РНКи, специфичной для экспрессии Se-DSP1 . Вирусный ген CpBV302 использовали в качестве контрольной dsRNA («dsCON»). Для иммунного заражения каждой из личинок L5 вводили 4,5 × 10 4 клеток HK E. coli через 24 ч после инъекции дцРНК, специфичной к Se-DSP1 (dsDSP1) (1 мкг на личинку).Через 8 часов после иммунного заражения собирали жировые тела и использовали их для анализа ферментов. Звездочка на столбцах стандартного отклонения указывает на значительную разницу между средними значениями при ошибке типа I = 0,05 (критерий LSD). «NS» означает отсутствие существенной разницы. (C) восстанавливающий эффект эйкозаноидов на иммунные реакции, подавленные обработкой РНК-интерференцией при образовании гемоцитарных узелков. (D) Экспрессия гена антимикробного пептида (AMP). Вместе с НК Е вводили арахидоновую кислоту (АК) или простагландин Е 2 (ПГЕ 2) в дозе 10 мкг на личинку.coli (4,5 × 10 4 клеток на личинку) через 24 ч после инъекции дцРНК. Оценивали образование узелков, собирали ткани жирового тела и использовали для анализа экспрессии гена AMP через 8 ч после инъекции E. coli . Рибосомный белок RL32 использовали в качестве внутреннего контроля. Каждую обработку повторяли трижды. Различные буквы над столбцами стандартного отклонения указывают на значительную разницу между средними значениями при ошибке типа I = 0,05 (критерий LSD).

Se-DSP1 Сам по себе индуцирует PLA 2 Активность

Рекомбинантный белок Se-DSP1 был создан с использованием бактериальной системы экспрессии.Затем рекомбинантный белок очищали с использованием системы аффинной хроматографии, содержащей смолу никель-нитрилотриуксусной кислоты (Ni-NTA), и дополнительно очищали с помощью системы гель-фильтрационной хроматографии, содержащей сефадекс G-100 (Sigma-Aldrich, Сеул, Корея) (рис. 4А). Во время очистки полноразмерного Se-DSP1 был также очищен частичный белок, который был подтвержден вестерн-анализом против эпитопа V5 (фиг. 4В). Усеченный белок был оценен с помощью жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС) и показал его частичную структуру с удалением N-концевого домена удлинения (дополнительная фигура S4).Инъекция Se-DSP1 значительно увеличила активность PLA 2 наивных личинок (рис. 4C). Однако частичный Se-DSP1 не индуцировал ферментативную активность. Индукцию фермента полноразмерным Se-DSP1 предотвращали добавлением антитела HMGB1, распознающего Se-DSP1 (рис. 4C).

Рисунок 4 . Активация активности фермента PLA 2 жирового тела с помощью Se-DSP1. (A) Очистка рекомбинантного Se-DSP1 с помощью аффинной хроматографии («Ni-NTA») и эксклюзионной хроматографии («G-100»).Очищенный белок подтверждали с помощью моноклонального антитела, специфичного к метке V5 рекомбинантного Se-DSP1, с помощью вестерн-блоттинга. (B) очистка частичного Se-DSP1. Сравнение белковых доменов между полным и частичным Se-DSP1. Частичный белок был подтвержден в его последовательностях с помощью жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС) (дополнительная фигура S4). (C) Повышение активности sPLA 2 личинок S. exigua путем инъекции полной длины Se-DSP1 (1 мкг/личинка).Активность фермента в жировом теле измеряли через 8 ч после инъекции. Парциальный Se-DSP1 вводили в том же количестве. Контроль («CON») представлял собой инъекцию фосфатно-солевого буфера (PBS). Для добавления антитела («Ab») (2 мкл/личинка) использовали коммерческое поликлональное антитело, которое распознавало Se-DSP1. Каждую обработку повторяли трижды. Различные буквы над столбиками SD указывают на значительную разницу между средними значениями при ошибке типа I = 0,05 (критерий LSD).

Салициловая кислота (SA), растительный гормон, противодействует опосредующим эффектам

Se-DSP1 в иммунных реакциях насекомых

Известно, что салициловая кислота связывается с HMGB1 человека и прерывает иммунное посредничество (Choi et al., 2015). Это предполагает, что он может противодействовать иммуноопосредующей роли Se-DSP1, который является насекомым-гомологом HMGB1 человека. Для проверки этой гипотезы личинкам вводили различные дозы СК. Затем оценивали иммунный ответ личинок (рис. 5). Шесть генов AMP, экспрессируемых в ответ на бактериальную провокацию, демонстрировали значительное ( P <0,05) снижение уровня их экспрессии после обработки РНК-интерференцией с использованием дцРНК, специально направленной на экспрессию Se-DSP1 (фиг. 5A).Среди шести AMP, регулируемых Se-DPS1, SA значительно ( P <0,05) предотвращал активацию экспрессии генов AMP, за исключением аттацина 1 ( Att ).

Рисунок 5 . Иммуносупрессия насекомых, вызванная растительным гормоном салициловой кислотой (SA) у S. exigua . (A) Подавление экспрессии гена AMP SA в ответ на бактериальную инфекцию. Эффект СК сравнивали с эффектом РНКи, специфичной к экспрессии Se-DSP1 .Обработку РНКи проводили путем инъекции дцРНК, специфичной к Se-DSP1 (dsDSP1) (1 мкг на личинку). СК вводили личинкам L5 в дозе 10 мкг на личинку вместе с бактериальной инъекцией через 24 ч после инъекции dsDSP1. Для бактериального заражения личинкам инъецировали HK E. coli (5,5 × 10 4 клеток на личинку). Через 6 ч жировые тела собирали и использовали для оценки уровней экспрессии шести генов AMP: аполипофорина III («Apol»), аттацина I («Att»), цекропина («Cec»), дефензина I («Def»). , галлеримицин («Gal») и трансферрин I («Tra»).Рибосомный белок RL32 использовали в качестве внутреннего контроля. Каждую обработку повторяли трижды. Бактериальное заражение личинок, обработанных РНК-интерференцией, проводили через 24 часа после инъекции dsDSP1. (B) Подавление клеточного иммунного ответа при лечении СА. Образование узелков гемоцитов оценивали путем инъекции HK E. coli в количестве 4,5 × 10 4 клеток на личинку. Узелки (см. фотографии, сделанные при увеличении ×50) подсчитывали через 8 часов после инъекции E. coli . (C) Повышенная бактериальная патогенность при лечении СА. В патогенном тесте использовали два бактериальных патогена: Bacillus thuringiensis subsp. aizawai (Bt) путем кормления и Xenorhabdus hominickii (Xh) путем инъекции. Каждую обработку повторяли трижды. Для биоанализа использовали по 10 личинок на повторность. Различные буквы над столбцами SD указывают на значительную разницу между средними значениями при ошибке типа 1 = 0,05 (тест LSD).

Иммунодепрессивная роль СК в иммунных реакциях была дополнительно подтверждена совместным лечением СК и энтомопатогенами.Образование узелков в ответ на бактериальное ( X. hominickii ) воздействие подавлялось инъекцией СК дозозависимым образом (фиг. 5В). Добавление SA к X. hominickii также усиливало бактериальную патогенность с помощью анализа гемоцелевой инъекции (рис. 5C). Подавляющий эффект СК также наблюдался после лечения кормлением СК. Добавление SA к лечению Bacillus thuringiensis значительно повышало бактериальную патогенность после перорального введения.

Иммуносупрессивная роль SA позволяет предположить, что он может связываться с Se-DSP1 и ингибировать его иммунное посредничество. Кроме того, Se-DSP1-подобный HMGB1 человека (Choi et al., 2015) обладает высококонсервативными остатками Arg и Lys для взаимодействия с SA (дополнительная фигура S5). Чтобы проверить гипотезу прямого связывания, очищенный белок Se-DSP1 оценивали на его аффинность связывания с SA с помощью анализа термостабильности (фиг. 6A). Когда концентрация SA была увеличена, температура плавления (средняя температура диссоциации между SA и Se-DSP1 после денатурации) увеличилась (см. вставку «полный» рисунок на рисунке 6A).Напротив, частичный Se-DSP1 не показал теплового сдвига точек плавления при различных концентрациях SA (см. вставку «частичный» рисунок на рисунке 6A). Кривая теплового сдвига полноразмерного Se-DSP1 использовалась для оценки его константы диссоциации (Kd) с SA: 1,28 ± 0,05 мкМ. Связывание SA с Se-DSP1 приводило к ингибированию индукции PLA 2 (фиг. 6B). Кроме того, ингибирование активности PLA 2 при лечении СК приводило к подавлению клеточного иммунного ответа, оцениваемого по образованию узелков (рис. 6С).Эффект обработки СК был аналогичен эффекту обработки РНКи в отношении экспрессии Se-DSP1 . Поскольку SA ингибирует Se-DSP1 и последующую активность PLA 2 (см. диаграмму), добавление AA значительно ( P <0,05) восстанавливает клеточный иммунный ответ.

Рисунок 6 . Связывание салициловой кислоты с Se-DSP1 и подавление иммунного посредничества. (A) Аффинность связывания SA с Se-DSP1 с помощью анализа теплового сдвига (цифры на вставке для полного и частичного Se-DSP1). (B) Подавление активности sPLA 2 , индуцированное Se-DSP1 (1 мкг/личинка). Активность фермента в жировом теле измеряли через 8 ч после инъекции. СК вводили личинкам L5 в дозе 10 мкг на личинку. Контроль («CON») представлял собой инъекцию PBS. (C) Спасение клубеньков, подавленных SA, путем добавления AA (10 мкг на личинку). Для анализа клубеньков HK E. coli вводили в дозе 4,5 × 10 4 клеток на личинку. Через 8 ч после инъекции бактерий оценивали образование узелков.Каждую обработку повторяли трижды. Различные буквы над столбиками SD указывают на значительную разницу между средними значениями при ошибке типа I = 0,05 (критерий LSD).

Содержание SA в растениях томата повышает восприимчивость насекомых к энтомопатогенам

Иммунодепрессивное действие СК на иммунитет насекомых свидетельствует о том, что растения могут использовать СК для подавления иммунных реакций насекомых-фитофагов, в результате чего насекомые становятся восприимчивыми к энтомопатогенам. Прежде чем мы проверили эффективность СК на растении-хозяине, искусственную диету, содержащую СК, давали S.exigua и продемонстрировали значительное подавление клеточного иммунного ответа (рис. 7А). Затем, чтобы проверить роль СК в защитной реакции растений от насекомых, были выбраны изогенная линия томата и ее родительская линия из-за разного содержания в них СК (рис. 7В). В частности, IL2-2 представляет собой изогенную линию, полученную путем интрогрессии сегмента хромосомы 2 от Solanum pennellii «LA716» к разновидности S. lycopersicum «M82» путем последовательных обратных скрещиваний (Eshed and Zamir, 1995).Кроме того, IL2-2 обладает значительно более высоким количеством SA M82.

Рисунок 7 . Влияние различных сортов томатов на иммунные реакции и восприимчивость личинок S. exigua к энтомопатогенам. (A) Подавление клеточного иммунного ответа путем добавления СК к искусственной диете («АД + СК»). AD погружали в 1000 частей на миллион раствора SA и использовали для кормления личинок L5 в течение 3 дней. Контрольную диету (AD) обрабатывали диметилсульфоксидом (ДМСО).Для оценки клеточного иммунного ответа после инъекции HK E. coli определяли образование узелков гемоцитов в количестве 4,5 × 10 4 клеток на личинку. Образование узелков оценивали через 8 часов после инъекции E. coli . (Б) Содержание СА в М82 и ИЛ2-2 ( n = 5). (C) Подавление узелков с высокой линией SA, IL2-2. (D) Подавление гуморального иммунного ответа с высоким уровнем СА, IL2-2. Для оценки гуморального иммунного ответа HK E.coli (4,5 × 10 4 клеток на личинку). Через 6 ч жировые тела собирали и использовали для оценки уровней экспрессии шести генов AMP: аполипофорина III («Apol»), аттацина 1 («Att»), цекропина («Cec»), дефензина I («Def»). , галлеримицин («Gal») и трансферрин I («Tra»). Рибосомный белок RL32 использовали в качестве внутреннего контроля. Каждую обработку повторяли трижды. (E,F) Влияние M82 и IL2-2 на чувствительность S.exigua к энтомопатогенам Bt и Xh. Чтобы определить патогенность, для Bt был проведен тест на кормление, а для Xh была проведена гемоцелическая инъекция. Каждую обработку повторяли трижды. Для каждой повторности использовали 10 личинок L2. Звездочки указывают на значительную разницу между контролем и лечением при ошибке типа I = 0,05 (критерий LSD).

Личинок S. exigua кормили листьями томата. Затем их иммунные ответы оценивали после бактериального заражения.Наблюдалась значительная ( P <0,05) разница в клеточном иммунитете, основанная на образовании клубеньков, между личинками, которых кормили M82, и личинками, которых кормили IL2-2 (фиг. 7C). Уровни экспрессии шести генов AMP, регулируемых Se-DSP1, затем сравнивали у личинок, которых кормили двумя разными линиями томатов. Уровни экспрессии AMP, за исключением галлеримицина , демонстрировали значительное ( P <0,05) снижение после бактериального заражения, когда личинок кормили IL2-2 (фиг. 7D).

Чтобы изучить роль СК в защитной реакции растений путем подавления иммунной системы насекомых, личинок S. exigua , которых кормили M82 или IL2-2, обрабатывали энтомопатогенами (рис. 7E, F). Обе энтомопатогенные бактерии ( B. thuringiensis и X. hominickii ) демонстрировали значительно различающиеся уровни вирулентности по отношению к личинкам, которых кормили либо M82, либо IL2-2. Личинки, которых кормили IL2-2, были более восприимчивы к обоим бактериальным патогенам по сравнению с личинками, которых кормили M82, что указывает на то, что эндогенный SA в растениях может эффективно подавлять иммунную защиту насекомых от двух разных энтомопатогенных бактерий.

Обсуждение

HMGB1 млекопитающих, основной игрок в организации хроматина и регуляции транскрипции, может активировать врожденные иммунные ответы, действуя как DAMP. Хотя HMGB1-подобные белки, также известные как DSP1, были обнаружены и изучены у различных насекомых, их вклад во врожденный иммунный ответ еще недостаточно изучен. Это исследование охарактеризовало иммунологическую роль Se-DSP1, действуя как DAMP, и его значение в коэволюционном контексте растений-хозяев.

Молекулярная характеристика с помощью филогенетического анализа и анализа доменов показала, что DSP1 насекомых, такие как Se-DSP1, отличаются от других HMGB1. DSP1 насекомых были отдельно сгруппированы в филогенетическом анализе. Они обладали дополнительными уникальными доменами в дополнение к доменам (два HMG-бокса и С-концевой кислотный хвост), обычно общим для HMGB1. Удлиненный N-концевой хвост в DSP1 содержит спиральную спираль, низкую сложность и домены PH РНКазы. Самой длинной HMGB1-подобной молекулой в этом анализе была Bm-DSP1 (625 аминокислотных остатков) по сравнению с HMGB1 человека (215 остатков).Еще одним отличием является длина С-концевого кислотного хвоста. HMGB1 человека имеет более длинный кислый хвост из 30 остатков по сравнению с кислым хвостом Bm-DSP1 и Se-DSP1, который имеет только 15 и 18 остатков соответственно. Несмотря на структурные вариации, Dm-DSP1 проявляет свойства связывания с ДНК, подобные HMGB млекопитающих (Zappavigna et al., 1996; Boonyaratanakornkit et al., 1998; Jayaraman et al., 1998). Кроме того, было обнаружено, что мутантный DSP1, лишенный дополнительных N-концевых доменов, и Dm-DSP1 дикого типа обладают сходной активностью в отношении связывания ДНК и последующего изгиба (Janke et al., 2003). Это указывает на то, что дополнительные домены могут иметь физиологические функции, отличные от организации хроматина. Наше текущее исследование показало, что делеция N-концевого домена расширения приводит к нарушению иммунного посредничества Se-DSP1. Это предполагает, что N-концевой домен играет решающую роль в активации каталитической активности PLA 2 для опосредования иммунных ответов у насекомых.

После иммунного заражения экспрессия Se-DSP1 была в высокой степени индуцируемой.Затем этот белок высвобождается в гемолимфу. Кроме того, Se-DSP1 экспрессировался на всех стадиях развития S. exigua и в четырех тканях личинок, протестированных в этом исследовании. Это связано с тем, что Se-DSP1, подобно другим HMGB1, может быть негистоновым компонентом хроматина в ядре (Andersson and Tracey, 2011). Его базальная экспрессия была сильно усилена бактериальной нагрузкой у личинок S. exigua в жировом теле и гемоцитах (см. Дополнительную фигуру S3).Кроме того, иммунная провокация индуцировала транслокацию Se-DSP1 из ядра во внеклеточный гемоцель. У наивных личинок S. exigua белки Se-DSP1 были локализованы в ядре. Однако бактериальное воздействие стимулировало транслокацию этого белка в цитоплазму и внеклеточную среду. Это предполагает, что Se-DSP1 секретируется клетками, которые распознают сигнал, связанный с инфекцией. У млекопитающих сигналы, которые могут индуцировать секрецию HMGB1, включают патогенную инфекцию, повреждение и другие стрессы, такие как гипоксия (Andrassy et al., 2008), медикаментозное лечение (Ditsworth et al., 2007) и смертельное облучение (Apetoh et al., 2007). Для секреции требуется транслокация HMGB1 из ядра в цитоплазму. Для такой транслокации используется везикулярный тип транспорта для секреции HMGB1 (Wang, 1999; Bianchi et al., 2017). Кроме того, экзосома, по-видимому, является еще одним путем секреции HMGB1 в макрофагах (Liu et al., 2006) или тромбоцитах (Goetzl et al., 2016). Это предполагает, что при иммунном воздействии Se-DSP1 может транслоцироваться из ядра в цитоплазму, где транслоцированные белки включаются в везикулы, чтобы ассоциироваться с экзосомами для секреции, чтобы опосредовать иммунные ответы S.эксигуа .

Активируя биосинтез эйкозаноидов, Se-DSP1 может опосредовать клеточные и гуморальные иммунные ответы. Образование узелков гемоцитов представляет собой клеточный иммунный ответ у насекомых, который эффективно избавляется от микробных патогенов. Различные гемоциты кооперируются, образуя черные узелки, заключая инфицирующие микробы в гранулоциты и плазматоциты. Последующая меланизация фенолоксидазой происходит из эноцитоидов (Lavine and Strand, 2002; Shrestha and Kim, 2008). У личинок, обработанных РНКи, специфически нацеленной на экспрессию Se-DSP1 , образование узелков было значительно нарушено.Кроме того, личинки, обработанные РНКи, не смогли эффективно индуцировать экспрессию гена AMP. Эти данные подтверждают, что Se-DSP1 выполняет иммуноассоциированную функцию. Такая иммунная опосредующая функция Se-DSP1 может выполняться за счет активации биосинтеза эйкозаноидов, поскольку личинки, обработанные РНК-интерференцией, демонстрировали значительное снижение активности PLA 2 . Кроме того, PLA 2 катализирует обязательный этап биосинтеза эйкозаноидов, высвобождая АК из фосфолипидов (Kim et al., 2018; Mouchlis and Dennis, 2019).Затем эйкозаноиды опосредуют клеточные и гуморальные иммунные ответы против различных микробных патогенов, таких как бактерии, грибы и вирусы (Stanley and Kim, 2020). Таким образом, активация PLA 2 с помощью Se-DSP1 может повышать уровень эйкозаноидов, опосредуя иммунный ответ. Роль DSP1 в опосредовании иммунных ответов посредством эйкозаноидов была продемонстрирована на жесткокрылых насекомых Tenebrio molitor (Mollah and Kim, 2021). Однако остается неясным, как Se-DSP1 активирует PLA 2 в S.эксигуа . У млекопитающих внеклеточный HMGB1 связан с множественными рецепторами, такими как Toll-подобные рецепторы (TLR), для активации NF-kB (Andersson and Tracey, 2011). Иммунные сигнальные пути Toll законсервированы у S. exigua (Hwang et al., 2013). В передаче сигналов платных услуг адаптер Pelle необходим для активации NF-kB и PLA 2 в S. exigua (Hwang et al., 2013), что позволяет предположить, что Se-DSP1, высвобождаемый в гемолимфе, может связываться с рецептором платных услуг. чтобы активировать Пелле, сигнальный компонент.Затем Pelle активирует PLA 2 , вероятно, путем фосфорилирования. Это предполагает, что Se-DSP1 может связываться с рецептором toll для активации активности PLA 2 .

Рекомбинантный Se-DSP1 проявляет относительно высокое сродство (Kd = 1,28 мкМ) к SA на основе анализа теплового сдвига. Однако оценки аффинности связывания, по-видимому, различаются в зависимости от методов анализа связывания. Например, SA продемонстрировал аффинность связывания в наномолярном диапазоне с восстановленной формой HMGB1 человека в анализе поверхностного плазмонного резонанса, хотя другой метод титрования показал гораздо более низкую аффинность в миллимолярном диапазоне (Choi et al., 2015). Чой и др. (2015) также показали, что сайт связывания SA расположен в боксах A и B HMGB1, где аминокислотные остатки в этих двух боксах, участвующих в связывании с SA, хорошо консервативны в Se-DSP1, особенно в Arg и Lys ( см. дополнительный рисунок S5). Связывание салициловой кислоты с Se-DSP1 имело физиологическое значение, поскольку обработка СК значительно снижала иммунный ответ насекомых. Кроме того, SA уже давно используется для уменьшения воспаления (Volt et al., 2009). Аспирин, производное СА, используется для облегчения боли.Это противовоспалительный препарат, который путем необратимого ингибирования через ацетилирования ЦОГ-2 подавляет уровни PG (Ekinci, 2011). Салициловая кислота является метаболитом аспирина в организме человека и может усиливать противовоспалительный эффект аспирина (Choi et al., 2015). Иммуносупрессию вызывали либо инъекцией, либо скармливанием SA личинкам S. exigua . Как упоминалось ранее, проглоченный SA может связываться с внеклеточным Se-DSP1, но не может активировать активность PLA 2 при иммунной провокации.В условиях иммунодепрессии у личинок, обработанных СК, повышалась восприимчивость к энтомопатогенным микробам. Действительно, личинки, обработанные СК, проявляли повышенную восприимчивость к энтомопатогенам. Это было дополнительно подтверждено анализами с использованием личинок, которых кормили эндогенным SA в planta . Личинки, которых кормили листьями томатов с более высоким уровнем СА, становились более восприимчивыми к энтомопатогенным микробам, чем контрольные личинки, которых не кормили такими листьями томатов. Это предполагает, что растительный гормон SA может играть косвенную роль в защите насекомых-фитофагов, вызывая тритрофические взаимодействия.Эндогенная растительная SA может сделать насекомых более уязвимыми для их бактериальных патогенов ( B. thuringiensis или X. hominickii ), что приводит к эффективной стратегии растений по защите от насекомых-фитофагов. Со времени появления первого сообщения, показывающего, что СК может индуцировать устойчивость табака к вирусу табачной мозаики, было обнаружено, что СК может действовать как фитогормон-опосредующий активатор защиты растений, так и регулятор роста различных растений (Koo et al., 2020). В частности, СК может индуцировать устойчивость растений к различным микробным патогенам, таким как вирусы, бактерии, грибки и оомицеты.Хорошо продемонстрирована положительная корреляция между эндогенными уровнями СА и резистентностью к биотрофным и гемибиотрофным патогенам (Glazebrook, 2005). Это исследование представило новое тритрофическое взаимодействие, организованное СА среди растительно-насекомо-энтомопатогенных микробов. Высокие уровни растительного эндогенного SA, потребляемого травоядным насекомым ( S. exigua ), вызывали значительную иммуносупрессию насекомого. Такой эффект был опосредован взаимодействием между SA и Se-DSP1, что делало насекомое уязвимым для энтомопатогенных бактерий.Повышение содержания СА может стать новой стратегией селекции сельскохозяйственных культур на устойчивость к насекомым.

Заявление о доступности данных

Наборы данных, представленные в этом исследовании, можно найти в онлайн-репозиториях. Названия репозитория/репозиториев и инвентарные номера можно найти в статье/дополнительных материалах.

Вклад авторов

MM и YK провели эксперимент и написали рукопись при поддержке HC, IY и JL. YK задумал оригинальную идею.YK, IY, HC и JL руководили проектом. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Авторы получили финансирование из следующих источников: грант (№ 2017R1A2133009815) Национального исследовательского фонда (NRF), финансируемый Министерством науки, ИКТ и планирования будущего Республики Корея.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Примечание издателя

Все претензии, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций или издателя, редакторов и рецензентов. Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fphys.2021.744272/full#supplementary-material

Каталожные номера

Алепору-Марину, В., Дросос, Ю., Ниниос, Ю., Агелопулу, Б., и Патаргиас, Т. (2003). Высокоподвижные группоподобные белки насекомого Plodia interpunctella . Биохим. Жене . 41, 39–46. дои: 10.1023/A:1020

2440

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Андерссон, У., и Трейси, К. Дж. (2011). HMGB1 является терапевтической мишенью для стерильного воспаления и инфекции. год. Rev. Иммунол . 29, 139–162. doi: 10.1146/annurev-immunol-030409-101323

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Andrassy, ​​M., Volz, H.C., Igwe, J.C., Funke, B., Eichberger, S.N., Kaya, Z., et al. (2008). Высокомобильная группа бокс-1 при ишемически-реперфузионном поражении сердца. Тираж 117, 3216–3226. doi: 10.1161/РАСПИСАНИЕAHA.108.769331

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Апетох, Л., Ghiringhelli, F., Tesniere, A., Obeid, M., Ortiz, C., Criollo, A., et al. (2007). Толл-подобный рецептор-зависимый вклад иммунной системы в противораковую химиотерапию и лучевую терапию. Нац. Мед . 13, 1050–1059. doi: 10.1038/nm1622

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Бьянки, М.Е., Криппа, М.П., ​​Манфреди, А.А., Меццапель, Р., Керини, П.Р., и Венеро, Э. (2017). Высокоподвижный белок group box 1 управляет реакцией на повреждение тканей посредством воспаления, врожденного и адаптивного иммунитета и восстановления тканей. Иммунол. Версия . 280, 74–82. doi: 10.1111/imr.12601

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Boonyaratanakornkit, V., Melvin, V., Prendergast, P., Altmann, M., Ronfani, L., Bianchi, M.E., et al. (1998). Высокоподвижные группы хроматиновых белков 1 и 2 функционально взаимодействуют с рецепторами стероидных гормонов, усиливая их связывание с ДНК in vitro и транскрипционную активность в клетках млекопитающих. Мол. Клеточный Биол . 18, 4471–4487.doi: 10.1128/MCB.18.8.4471

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Bowling, S.A., Guo, A., Cao, H., Gordon, A.S., Klessig, D.F., и Dong, X. (1994). Мутация в Arabidopsis , которая приводит к конститутивному выражению системной приобретенной устойчивости. Растительная клетка 6, 1845–1857 гг. doi: 10.1105/tpc.6.12.1845

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Канапл Л., Дековиль М., Ленг М. и Локер Д.(1997). Ген DSP1 Drosophila , кодирующий HMG 1-подобный белок: геномная организация, эволюционная консервация и экспрессия. Ген 184, 285–290. doi: 10.1016/S0378-1119(96)00616-6

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Choi, H.W., Tian, ​​M., Song, F., Venereau, E., Preti, A., Park, S.W., et al. (2015). Активный метаболит аспирина салициловая кислота нацелен на высокоподвижную группу 1, чтобы модулировать воспалительные реакции. Мол.Мед . 21, 526–535. doi: 10.2119/molmed.2015.00148

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

де Мендонса Амаранте, А., Жупатанакул, Н., де Абреу да Силва, И.С., Карнейро, В.К., Висентино, А.Р.Р., Димополус, Г., и др. (2017). ДНК-шаперон HMGB1 усиливает транскрипционную активность Rel1A у комара Aedes aegypti . Биохимия насекомых. Мол. Биол . 80, 32–41. doi: 10.1016/j.ibmb.2016.11.006

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Дековиль, М., Джакомелло, Э., Ленг, М., и Локер, Д. (2001). DSP1, HMGB1-подобный белок, участвует в регуляции гомеозисных генов. Генетика 157, 237–244. doi: 10.1093/генетика/157.1.237

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ditsworth, D., Zong, W.X., and Thompson, C.B. (2007). Активация поли(АДФ)-рибозополимеразы (PARP-1) вызывает высвобождение провоспалительного медиатора HMGB1 из ядра. J. Biol. Химия . 282, 17845–17854.doi: 10.1074/jbc.M701465200

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Эшед Ю. и Замир Д. (1995). Популяция интрогрессивной линии Lycopersicon pennellii в культивируемом томате позволяет идентифицировать и точно картировать QTL, связанные с урожайностью. Генетика 141, 1147–1162. doi: 10.1093/генетика/141.3.1147

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Глейзбрук, Дж. (2005). Контрастные механизмы защиты от биотрофных и некротрофных патогенов. год. Преподобный Фитопат . 43, 205–227. doi: 10.1146/annurev.phyto.43.040204.135923

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Гетцль, Э. Дж., Гетцль, Л., Карлинер, Дж. С., Танг, Н., и Пуллиам, Л. (2016). Экзосомы, полученные из тромбоцитов плазмы человека: эффекты аспирина. FASEB J . 30, 2058–2063 гг. дои: 10.1096/fj.201500150R

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Го, Х.Г., Ли, С.Г., Ли, Б.П., Чой, К.М., и Ким, Дж.Х. (1990). Простое массовое разведение свекловичной совки Spodoptera exigua (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) на искусственном рационе. Корейский J. Appl. Энтомол . 29, 180–183.

Академия Google

Гудвин, Г. Х., и Джонс, Э. У. (1977). Выделение и очистка негистоновых хромосомных белков группы высокой подвижности (HMG). Методы Cell Biol . 16, 257–267. doi: 10.1016/S0091-679X(08)60104-1

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хасан, М.А., Ахмед С. и Ким Ю. (2019). Путь биосинтеза арахидоновой кислоты у Spodoptera exigua в ответ на бактериальное воздействие. Биохимия насекомых. Мол. Биол . 111, 1–15. doi: 10.1016/j.ibmb.2019.103179

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хван Дж., Пак Ю., Ким Ю. и Ли Д. (2013). Энтомопатогенная бактерия Xenorhabdus nematophila подавляет экспрессию антимикробных пептидов, контролируемых путями Toll и Imd, блокируя биосинтез эйкозаноидов. Арх. Биохимия насекомых. Физиол . 83, 151–169. doi: 10.1002/arch.21103

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Янке, К., Мартин, Д., Жиро-Панис, М.Дж., Дековиль, М., и Локер, Д. (2003). Drosophila DSP1 и крысиный HMGB1 обладают эквивалентными свойствами связывания ДНК и имеют аналогичную вторичную укладку. Дж. Биохим . 133, 533–539. дои: 10.1093/jb/mvg063

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Джаяраман, Л., Moorthy, N.C., Murthy, K.G.K., Manley, J.L., Bustin, M., и Prives, C. (1998). Белок группы высокой подвижности-1 (HMGB1) является уникальным активатором p53. Гены Дев . 12, 462–472. doi: 10.1101/gad.12.4.462

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Liu, S., Stolz, D.B., Sappington, P.L., Macias, C.A., Killeen, M.E., Tenhunen, J.J., et al. (2006). HMGB1 секретируется иммуностимулированными энтероцитами и способствует индуцированной цитомиксом гиперпроницаемости монослоев Caco-2. утра. Дж. Физиол. Селл Физиол . 290, C990–C999. doi: 10.1152/ajpcell.00308.2005

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Молла, М.М.И., Ахмед, С., и Ким, Ю. (2021). Иммунное опосредование HMG-подобного DSP1 через путь Toll-Spatzle и его специфическое ингибирование аналогами салициловой кислоты. PLoS Pathog. 17:e1009467. doi: 10.1371/journal.ppat.1009467

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Молла, М.М. И., Декебо А. и Ким Ю. (2020a). Иммунодепрессивная активность новых ингибиторов PLA 2 из Xenorhabdus hominickii , энтомопатогенной бактерии. Насекомые 11:505. doi: 10.3390/insects11080505

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Молла, М.М.И., и Ким, Ю. (2021). HMGB1-подобный белок 1 дорсального переключателя мучного червя, Tenebrio molitor , действует как молекулярный паттерн, связанный с повреждением. Арх.Биохимия насекомых. Физиол . 107:e21795. doi: 10.1002/arch.21795

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Mollah, M.M.I., Roy, M.C., Choi, D.Y., Hasan, M.A., Baki, M.A.A., Yeom, H.S., et al. (2020б). Вариации метаболитов индола и локусов NRPS-PKS в двух различных вирулентных штаммах Xenorhabdus hominickii . Фронт. Микробиол . 11:583594. doi: 10.3389/fmicb.2020.583594

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мосрин-Хуаман, с., Канапл Л., Локер Д. и Дековиль М. (1998). Ген DSP1 Drosophila melanogaster кодирует белок домена HMG, который играет роль в развитии. Дев. Жене . 23, 324–334. doi: 10.1002/(SICI)1520-6408(1998)23:4<324::AID-DVG7>3.0.CO;2-T

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Парри, Д. А., Фрейзер, Р. Д., и Сквайр, Дж. М. (2008). Пятьдесят лет спиральных α-спиральных связок: тесная связь между последовательностью и структурой. Дж. Структура. Биол . 163, 258–269. doi: 10.1016/j.jsb.2008.01.016

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рибейро, Ф. С., де Абреу да Силва, И. К., Карнейру, В. К., душ Сантос Бельграно, Ф., Мохана-Борхес, Р., де Андраде Роса, И., и другие. (2012). Вектор денге Aedes aegypti содержит функциональный белок группы 1 с высокой подвижностью (HMGB1) с уникальным регуляторным С-концом. PLoS ONE 7:e40192. doi: 10.1371/журнал.пон.0040192

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Салихс, Э., Ледда, А., Муларони, Л., Альба, М.М., и де ла Луна, С. (2009). Полногеномный анализ гистидиновых повторов показывает их роль в локализации белков человека в компартменте ядерных спеклов. ПЛОС Жене . 5:e1000397. doi: 10.1371/journal.pgen.1000397

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шреста, С., и Ким, Ю. (2008).Эйкозаноид опосредует высвобождение профенолоксидазы из эноцитоидов свекловичной совки, Spodoptera exigua . Биохимия насекомых. Мол. Биол . 38, 99–112. doi: 10.1016/j.ibmb.2007.09.013

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Симеонов А. (2013). Последние разработки в области использования дифференциальной сканирующей флуорометрии для обнаружения и характеристики белков и малых молекул. Экспертное заключение. Препарат, средство, медикамент. Дисков . 8, 1071–1082. дои: 10.1517/17460441.2013.806479

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Стэнли Д. и Ким Ю. (2020). Почему у большинства насекомых очень низкий процент полиненасыщенных жирных кислот C20: гипотеза окислительного стресса. Арх. Биохимия насекомых. Физиол . 103:e21622. doi: 10.1002/arch.21622

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Строс, М., Лаунхолт, Д., и Грассер, К. Д. (2007). HMG-box: универсальный белковый домен, встречающийся в большом количестве ДНК-связывающих белков. Сотовый. Мол. Науки о жизни . 64, 2590–2606. doi: 10.1007/s00018-007-7162-3

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Тон, Дж., Питерс, К.М.Дж., и ван Лун, Л.К. (2006). «Взаимосвязь между базовой и индуцированной резистентностью у арабидопсиса», в Мультигенная и индуцированная системная резистентность растений , редакторы С. Тузун и Э. Бент (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Springer), 197–224. дои: 10.1007/0-387-23266-4_9

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Цунг, А., Klune, J.R., Zhang, X., Jeyabalan, G., Cao, Z., Peng, X., et al. (2007). Высвобождение HMGB1, индуцированное ишемией печени, включает зависимую от Toll-подобного рецептора 4 продукцию активных форм кислорода и опосредованную кальцием передачу сигналов. Дж. Экспл. Мед . 204, 2913–2923. doi: 10.1084/jem.20070247

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ватанпараст М., Ахмед С., Эрреро С. и Ким Ю. (2018). Неядовитый sPLA 2 чешуекрылого насекомого: его физиологические функции в развитии и иммунитет. Дев. Комп. Иммунол . 89, 83–92. doi: 10.1016/j.dci.2018.08.008

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Вольт, AC, Демпси, Д.А., и Клесиг, Д.Ф. (2009). Салициловая кислота, многогранный гормон для борьбы с болезнями. год. Преподобный Фитопат . 47, 177–206. doi: 10.1146/annurev.phyto.050908.135202

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Уэбб М., Пайет Д., Ли К. Б., Трэверс А. А.и Томас, Дж. О. (2001). Структурные требования для кооперативного связывания HMG1 с миникольцами ДНК. Дж. Мол. Биол . 309, 79–88. дои: 10.1006/jmbi.2001.4667

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Zappavigna, V., Falciola, L., Citterich, M.H., Mavilio, F., and Bianchi, M.E. (1996). HMGB1 взаимодействует с белками HOX и усиливает их связывание с ДНК и активацию транскрипции.

Салициловая кислота от лишая отзывы: Салициловая кислота — инструкция по применению, дозы, побочные действия, противопоказания, цена, где купить

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.