Содержание

Убираем отеки под глазами: 6 простых способов

Как известно, вокруг глаз расположена очень тонкая кожа, которая отличается особой нежностью и тонкостью. Стоит тебе не выспаться, поплакать или посидеть на жёсткой диете – и твои опухшие веки сразу же расскажут об этом всему свету. Под глазами неминуемо появятся черные круги и отеки, что совсем тебя не украсит.

Не расстраивайся! Принимайся за дело: убрать отеки под глазами можно разными способами. Мы отобрали самые простые способы, которые можно применить в домашних условиях:

Чай

В черном и зеленом чае содержится весьма полезное вещество – танин, а также кофеин. Танин выступает в роли вяжущего компонента, уменьшая отеки под глазами, а кофеин делает меньше припухлости, потому что сужает кровеносные сосуды.

Вместо чая можно использовать отвар ромашки или такие же пакетики, как и с чаем, — они продаются в аптеках. Ромашка известна своими противовоспалительными свойствами: примочки из этой травки снимают покраснение и убирают отечность.

Приготовить лечебное средство очень просто. Достаточно залить небольшим количеством кипятка два пакетика любого чая и выдержать 3 минуты, после чего убрать пакетики и позволить жидкости остыть. На глаза нужно прикладывать холодные примочки. Можно предварительно добавить в отвар лед или подержать в холодильнике. Полежать с примочками на глазах советуют минут 10-15.

Молоко

Этот продукт имеется практически в каждом доме. Холодное молоко успешно помогает справиться с отеками и покраснениями. Кроме того, ты получишь дополнительный бонус, так как молоко увлажняет кожу и снимает раздражение.

Просто налей охлажденное молоко или сливки в мисочку, смочи в нем пару ватных диском и, чуть отжав их, положи на веки. Спустя несколько минут повтори процедуру, и так – несколько раз. Через 15 минут твои глаза будут выглядеть совсем по-другому!

Яичный белок

Вяжущие свойства белка помогают придать коже под глазами гладкость и повысить ее упругость. Кроме того, витамин В2, который содержится в куриных белках, отлично справляется с усталостью глаз и делает кожу молодой и красивой.

Взбей 2 белка в пену и наложи ее на участки под глазами. Приляг на 15 минут, отдохни, а через 10-15 минут, когда белок высохнет, аккуратно умойся холодной водой, стараясь не растягивать кожу.

Огурец

Нет ничего проще, чем снять отеки под глазами при помощи огурца. Нужно отрезать от свежего овоща две тонкие дольки и положить их на закрытые глаза. После этого рекомендуется полежать в течение 10-15 минут и снять огуречные кружочки. Ты сразу увидишь результат, потому что на уменьшение отеков работали сразу два «доктора» — кофейная кислота и витамин С, содержащиеся в сыром огурце.

Холодный металл

Охлажденные металлические предметы, приложенные к глазным впадинам, уменьшают отеки и сужают кровеносные сосуды, убирая покраснение. Самый простой способ – прикладывать к области глаз обыкновенные столовые ложки из нержавейки, предварительно охлажденные в стакане с ледяной водой.

Картофель

Можно положить на веки по ломтику очищенного сырого картофеля, а можно использовать с этой же целью кашицу – картофель, натертый на терке. Сверху положи марлю, смоченную в холодной воде. Полежи 20-25 минут, потом умойся.

Попробуй любое из перечисленных средств, чтобы убрать отеки под глазами. Для того, чтобы они подействовали, понадобится всего 10-20 минут.

Автор
Ольга Моисеева для Женского журнала «Прелесть»

Как убрать отеки на лице в домашних условиях – Красота – Домашний

Появление отеков на лице может быть вызвано разными причинами. Речь идет о нарушении работы сердечно-сосудистой или эндокринной системы, аллергии, злоупотреблении алкоголем, жирной и соленой пищей, переутомлении, неправильном распорядке дня.

Поэтому будьте готовы внести изменения в повседневный рацион. Употребляйте поменьше соли, жирной и острой пищи. За 4 часа до сна старайтесь съедать морковь, яблоко или апельсин, которые помогут вывести из организма излишки жидкости. Делайте контрастные компрессы (накладывайте марли с горячей и холодной водой попеременно).

О том, как правильно ухаживать за кожей вокруг глаз, смотрите в сюжете:

Лед

При отеках на лице народная медицина рекомендует периодически протирать лицо льдом, приготовленным на основе отвара чистотела, ромашки и лепестков роз. Можно натереть сырой картофель на мелкой терке и приложить к проблемным местам на 20 минут.

Секреты макияжа: маскировка темных кругов под глазами

Темные круги под глазами придают лицу усталый вид и визуально добавляют количество прожитых лет. Избавиться от них можно с помощью правильно нанесенного макияжа с использованием подходящего корректора, тонального крема, маскирующего карандаша и пудры.

Читать далее

Корень петрушки и зеленый чай

Положительного эффекта поможет добиться измельченный корень петрушки, который прикладывают к отекам. Нередко на здоровый вид кожи оказывает влияние зеленый чай. К примеру, можно смочить в чайном отваре салфетку (хлопчатобумажную) и положить на лицо минут на 15.

Отвар из ромашки

От припухлости вы можете избавиться посредством аптечной ромашки. Возьмите 3 ст. ложки цветков засушенной ромашки и заверните в обычный носовой платок. Затем сделайте из него мешочек и опустите в кипяток приблизительно на 7-10 минут. Достаньте и немного отожмите его. Протирайте кожу 2 раза в день, периодически смачивая в воде, в которой он находился.

Настой из березовых листьев

А вот еще один отличный рецепт. Возьмите 2 ст. ложки березовых листьев и залейте их стаканом прохладной воды. Настаивать данное средство следует примерно 9 часов. Полученное снадобье процедите, смочите в нем салфетку и прикладывайте к проблемным участкам кожи на лице.

Тыквенная маска

Тыквенная маска считается очень эффективным средством, которое борется с отеками.

Надо:
3 ст. ложки. измельченной сырой тыквы;
2 ч. ложки меда;
вода.

Как приготовить:
К измельченной сырой тыквы добавьте небольшое количество воды и варите на небольшом огне до образования однородной массы. В получившуюся смесь положите мед и хорошенько размешайте.

Свежий огурец

Отлично помогает при отеках и измельченный огурец, если его прикладывать к коже каждый день на 15 минут.

Компресс из молока

Быстро ликвидировать проблему поможет компресс из молока. Просто пропитайте небольшой кусок ваты в холодном молоке и приложите к отекам на 10 минут. Такой же компресс можно сделать и из настоя календулы.

Травяные настои

Рекомендуется использовать различные травяные настои для борьбы с отечностью лица. К примеру, можно взять по 3 ст. ложки сухой ромашки, шалфея и березовых почек, а потом залить их кипятком. Средство должно настаиваться 5 часов, после чего можно будет его процедить и использовать по назначению.

Укропная маска

Надо:
1 ч. ложка измельченного укропа;
2 ч. ложки сметаны.

Как приготовить:
Измельчите укроп и смешайте со сметаной. Полученную смесь прикладывайте к отекам примерно на 10 минут.

YON-KA.RU » Чем полезна ромашка для кожи лица?

Красивую ромашку можно встретить не толко в поле, но даже и в городской среде. Этот маленький и известный цветок оказался не таким уж простым, как может показаться на первый взгляд. Все дело в том, что его активно используют в косметических средствах по уходу за кожей лица. И мы расскажем вам, почему..

Дело в том, что ромашка обладает успокаивающим и целебным эффектами. Не зря тибетские целители принимали настойки из ромашки для омоложения. Настойки конечно в современном мире принимать не стоит, а вот косметические средства использовать просто необходимо.

Ромашка способна успокоить раздраженную кожу лица, увлажнить ее и придать бархатистую мягкость.

В состав ромашки входят:

-кислоты такие как каприловая, аскорбиновая, салициловая, стеариновая, линолевая и другие. Они способствуют омоложению кожи и мягкому отшелушивание.

-витамин С

-сахара

-эфирные масла

-каротин

-белковые вещества

-флавоноиды, отвечающие за молодость и красоту

При воздействии на кожу ромашка

-успокаивает

-заживляет

-нейтрализует реактивность

-мягко действует на эпидермис

Для какой кожи лучше всего подходя средства, содержащие в своем составе ромашку?

Мы особенно советуем использовать средства с ромашкой обладателям сухой и чувствительной кожи лица, так как они отлично смягчают и успокаивают, оказывая противовоспалительное действие, устраняя сухость и шелушение и делая кожу более эластичной.

В каких средствах от Yon-ka Paris используется?

Мицеллярная вода Eau Micellaire

Мицеллярная вода является эффективным и щадящим средством для очищения, снятия макияжа и предупреждения появления признаков старения благодаря входящему в состав эфирному маслу ромашки.

Благодаря наличию мицелл в составе она бережно удаляет очищения, тщательно очищает кожу лица, глаза и губы от косметики и при этом не требует смывания водой.

Флюид Hydra №1 Fluid

Матирующий флюид с гиалуроновой кислотой. Нежирный, быстро впитывающийся матирующий флюид, оказывающий интенсивное увлажняющее и антивозрастное действие, способен эффективно восполнять потребности нормальной и жирной кожи. Обеспечивает мягкость и эластичность, гладкость и упругость кожи. Состоит 89% натуральных компонентов, в том числе из эфирного масла ромашки, розы и жасмина.

Маска для чувствительной кожи Sensitive Masque

Успокаивающая, снимающая раздражение маска для чувствительной кожи с экстрактом арники смягчает и успокаивает, видимое снятие красноты. Обладает мягкой шелковистой текстурой, противовоспалительными и успокаивающими свойствами благодаря насыщенности фитоэкстрактами арники, конского каштана, гамамелиса и ромашки.

Скраб Guarana Scrub

Этот отшелушивающий крем мягко удаляет ороговевшие клетки и очищает поры: кожа деликатно шлифуется с помощью легких абразивных микрочастиц разного размера (гуарана и нешлифованный органический рис) и смягчается коктейлем из растительных экстрактов ромашки, известных своим успокаивающим действием.

Продукция Yon-ka Paris более чем на 90% состоит из натуральных ингредиентов. Заходите на сайт бренда Yon-ka Paris и подберите себе эффективную косметику, которая решит любые ваши проблемы с кожей.

Отек лица, отек глаз — как снять, причины, как убрать отек лица и глаз в домашних условиях — 29 января 2022

Отеки на лице, особенно по утрам — проблема, с которой знакома каждая девушка. Причины могут быть разные: от неправильного питания и недостатка сна до серьезных проблем со здоровьем. Перед началом борьбы с отечностью важно понять, из-за чего она появляется.

Причины появления отеков на лице

Отеки представляют собой задержку жидкости в глубоком, поверхностном и подкожно-жировом слое. Чаще всего они возникают в области глаз, скул и подбородка. В 80% случаях отеки на лице являются следствием неправильного питания и образа жизни. И только 20% случаев — это наследственные факторы, сбои в работе эндокринной системы или другие заболевания, вызывающие отечность.

shutterstock.com

Итак, рассмотрим все возможные причины появления отеков:

  • неправильное питание, употребление пищи, задерживающей жидкость;
  • вредные привычки — алкоголь, курение;
  • употребление большого количества жидкости перед сном;
  • нарушения сна, его недостаток;
  • неправильное положение во время сна, плохая подушка;
  • стрессы и переутомления;
  • аллергия на бытовую химию, косметику или пищевые продукты;
  • беременность или критические дни;
  • нарушения функций щитовидной железы;
  • заболевания, связанные с работой почек, сердца.

При появлении отеков на лице в первую очередь необходимо пересмотреть свой рацион питания, избавиться от вредных привычек и наладить режим дня. Если это не помогает, необходимо обратиться к врачу и проверить свое здоровье.

Как снять отек лица

Рассмотрим самые быстрые способы избавления от отеков. Если использовать их в комплексе, результат будет заметен уже через несколько минут!

shutterstock.com
Вода

Чаще всего отеки на лице вызваны задержкой или нехваткой воды в организме. Поэтому вода — оружие номер один в борьбе с ними. Выпиваем утром стакан чистой негазированной воды комнатной температуры и не забываем про нее в течение дня!

Зарядка

Еще одна популярная причина отечности на лице — неправильное положение головы во время сна. Очень часто застои в шее дают отеки по утрам. В таком случае поможет небольшая зарядка для головы и шеи — она расслабит мышцы и обеспечит правильный отток крови. Начните с банальных наклонов и поворотов головы в разные стороны. Делайте упражнения медленно, не задерживая дыхание при этом. Затем скрестите руки «в замок» на затылке, и медленно опускайте и поднимайте голову, растягивая каждую мышцу.

shutterstock.com
Кубики льда

Чтобы «разбудить» организм и привести в тонус кожу лица, воспользуйтесь кубиками льда. Они хорошо убирают отеки и улучшают кровообращение. Возьмите два кубика и проведите ими по лицу, сначала область вокруг глаз, затем по линиям скул и вокруг губ. Для получения наибольшего эффекта приготовьте кубики льда из отвара ромашки — она хорошо борется с отечностью. Повторяйте процедуру каждое утро.

shutterstock.com
Самомассаж

Отлично помогает избавиться от отеков массаж, который вы сможете сделать без особых навыков и гаджетов. Рекомендуется нанести на лицо крем или сыворотку, а затем двигаясь по массажным линиям выполнять пощипывающий массаж: от носа к вискам, от уголков рта к центру уха, от центра подбородка к мочкам уха. Затем вверх от кончика носа к центру лба и от центра лба к вискам. Не забудьте про зону подбородка, в этой области достаточно сделать легкие поглаживания вниз от подбородка к зоне декольте.

Травяной чай

После всех выполненных процедур, рекомендуем выпить травяной чай — он ускоряет выведение жидкости из организма. Чай с мелиссой, ромашкой или шиповником отлично подойдет для комплексной работы против отеков.

ЗОЖ-канал с лайфхаками, диетами, упражнениями в телеграме! Подписывайся

Каковы 6 лучших эфирных масел от отеков и воспалений?

Воспаление — это автоматическая защитная реакция организма на травму. Это происходит, когда клетки вырабатывают сигнал, который идет к нейтрофилам, присутствующим в пораженной области, вызывая быстрое воспаление. Воспаление позволяет более крупным лейкоцитам атаковать мертвые ткани и патогены.

После этого ваше тело начнет исцелять себя посредством ремонта и регенерации клеток. Отек всегда сопровождается воспалением.Колотые раны, растяжения связок и растяжения мышц чаще всего склонны к отеку. Использование эфирных масел при отеках может способствовать заживлению и уменьшению воспаления.

Покраснение, отек и жар, боль и потеря функции являются признаками воспаления. Эти симптомы следует обсудить с врачом, особенно если причина воспаления включает длительное выздоровление.

Тем не менее, использование эфирных масел при отеках может быть естественным и безопасным обезболивающим средством, способствующим долгосрочным преимуществам.Эфирные масла могут помочь уменьшить воспаление, способствуя заживлению. Они рекомендуются при различных проблемах со здоровьем, таких как:

  • Улучшение кровообращения
  • Мышечные боли

В отличие от безрецептурных лекарств от боли и чувствительности, эфирные масла не имеют неприятных побочных эффектов. Они натуральные, и некоторые из них обладают противовоспалительными свойствами. Вот некоторые популярные эфирные масла от отеков и болей:

Эфирное масло чайного дерева (Melaleuca)

Травмы, приводящие к повреждению кожи, позволяют бактериям попадать в кровоток, вызывая инфекцию. Масло чайного дерева используется для лечения и дезинфекции ссадин и мелких порезов. Кроме того, масло чайного дерева способствует более быстрому заживлению ран. Исследования показывают, что масло чайного дерева может помочь уменьшить отек и воспаление.

Он также запускает работу лейкоцитов и способствует процессу самовосстановления организма. Вы можете добавить несколько капель этого эфирного масла в только что наложенную повязку на рану. Это будет способствовать более быстрому заживлению ран.

Эфирное масло лаванды

Это эфирное масло также помогает при воспалениях и отеках.Вы можете использовать его, чтобы помочь с болью в суставах. Лаванда является мощным анальгетиком, который может справиться с легкой и сильной болью. Он также используется при грустных и тревожных чувствах и при лечении вторичных проблем, связанных с болью.

Масло можжевельника

Масло можжевельника можно использовать несколькими способами. Однако это эфирное масло более популярно для лечения воспалений и отеков. Он обладает спазмолитическими и антиревматическими свойствами, что делает его подходящим при мышечных спазмах и болях в суставах.

Эфирное масло герани

Широко используется в ароматерапии благодаря своим бесчисленным преимуществам для здоровья.Масло герани используется в качестве отличного комплексного лечения для улучшения вашего психического, эмоционального и физического здоровья. Египтяне использовали это масло, чтобы сделать кожу сияющей и красивой.

Сегодня это масло используется для уменьшения воспалений, тревожных ощущений и химического баланса. Масло герани пахнет сладко, поэтому оно может мгновенно улучшить ваше настроение, уменьшить усталость и поощрить эмоциональное благополучие.

Кроме того, это эфирное масло не вызывает раздражения, не токсично и не вызывает чувствительности.Его терапевтические свойства включают в себя антисептическое, антидепрессивное и антибактериальное действие. Это также хорошо для проблем с кожей, таких как перегруженная или жирная кожа, красная и зудящая кожа.

Масло римской ромашки

Это эфирное масло эффективно снимает головную боль напряжения. Чтобы использовать его, смочите ткань холодной водой и нанесите несколько капель этого эфирного масла. Лягте, положите мокрую ткань на лоб и расслабьтесь.

Помимо головной боли, масло римской ромашки также полезно при болях в мышцах и суставах.Смешайте две капли масла римской ромашки с двумя столовыми ложками. масла сладкого миндаля и добавьте две капли масла розмарина. Нанесите смесь на воспаленные участки и аккуратно помассируйте их, чтобы снять напряжение мышц и улучшить кровообращение.

Как использовать эфирные масла

при отеках ?

Эфирные масла могут работать вместе, чтобы сделать их более эффективными при лечении боли. Итак, не стесняйтесь делать свою собственную смесь эфирных масел от отеков и воспалений. Всегда разбавляйте эфирные масла сильным маслом-носителем, выпускаемым в различных формах, в том числе:

Эфирные масла прекрасно работают с любым маслом-носителем.

Теперь выберите эфирные масла и базовое масло. Например, вы можете смешать по две капли масел ромашки и ладана. Эти два эфирных масла нужно смешать с двумя столовыми ложками масла-носителя, такого как кокосовое, миндальное или масло жожоба. Эта смесь является хорошим средством от воспалений и отеков. Нанесите и осторожно помассируйте воспаленный участок, пока кожа не впитает масло.

Вы также можете использовать масляную смесь с горячими или холодными компрессами для облегчения боли в мышцах и суставах. Используйте новую ткань, чтобы впитать жидкость, отожмите излишки и приложите ткань к воспаленной области.Вы можете попеременно использовать горячие и холодные компрессы в зависимости от травмы.

Хотя эти лечебные масла действительно работают, их следует использовать с осторожностью. Эфирные масла от отеков и воспалений могут вызывать раздражение, поэтому не наносите их прямо на опухшую область. Точно так же эти лечебные масла могут быть опасны для вашего ребенка и для вас, если вы беременны. Поэтому вы должны сначала проконсультироваться с врачом, прежде чем пробовать какие-либо эфирные масла в целях безопасности.

 

 

 

*Эти утверждения не были оценены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов.Этот продукт не предназначен для диагностики, лечения, излечения или предотвращения каких-либо заболеваний.

Границы | Механизм действия ромашки аптечной (Matricaria recutita L.) при лечении экземы: на основе весового коэффициента «доза-эффект» Сетевая фармакология

Введение

Экзема — воспалительное заболевание кожи, обычно сопровождающееся инфильтрацией, гипертрофией и сильным зудом. Исследования показали, что возникновение экземы связано со многими факторами, включая иммунные, экологические и генетические факторы, а также инфекцию.Экзема имеет длительное течение и легко рецидивирует, серьезно влияя на качество жизни. В настоящее время в клинике широко используются антигистаминные, противоаллергические препараты, глюкокортикоиды. Однако эти препараты только временно облегчают симптомы и могут привести к побочным реакциям при длительном применении. Таким образом, для эффективного лечения экземы важно разработать натуральные препараты с минимальными побочными эффектами.

ГРАФИЧЕСКАЯ РЕЗЮМЕ

Ромашка ( Matricaria recutita L. ) является одним из старейших ароматических растений, и было показано, что цветок и эфирные масла обладают противовоспалительным и спазмолитическим действием. Ромашка широко используется в пищевых продуктах, косметике, дезинфицирующих средствах и лекарствах. Поэтому это лекарственное растение с большим потенциалом развития. Немецкая ромашка принадлежит к семейству сложноцветных, а ее эфирное масло часто используется в косметическом уходе для устранения воспалений, снятия раздражения кожи, уменьшения покраснения и отечности кожи. Это масло используется для заживления кожных ран и обладает антибактериальным, противовоспалительным и антиоксидантным действием. Было также показано, что циклические эфиры, флавоноиды и общее количество летучих масел в ромашке оказывают ингибирующее действие на рост грибков. Полисахариды, выделенные из его соцветий, также проявляют противовоспалительную активность. В нескольких исследованиях сообщалось о значительных эффектах эфирного масла немецкой ромашки при лечении экземы (Anderson et al., 2000; Patzelt-Wenczler and Ponce-Pöschl, 2000; Arsić et al., 2011; El-Salamouni et al., 2020). . Однако ни активные компоненты, ни фармакологический механизм его эфирного масла не ясны.В этом исследовании использовалась модель мыши с экземой, чтобы изучить терапевтические эффекты эфирного масла немецкой ромашки на экзему и определить терапевтический механизм. Результаты служат ориентиром для дальнейшего выяснения механизма действия в будущих исследованиях.

Сетевая фармакология объясняет развитие болезни посредством создания базы данных, сети, сетевого анализа и экспериментальной проверки. Он также пытается определить взаимодействие между лекарствами и организмом и направлять открытие новых лекарств. Однако в настоящее время в большинстве сетевых фармакологических исследований одинаково рассматривается содержание всех компонентов, игнорируя влияние как содержания лекарственного средства, так и концентрации на эффективность. Это может привести к идентификации компонентов с низким содержанием в качестве ключевых компонентов. При этом часто игнорируются компоненты с высоким содержанием, играющие ключевую роль в лечении. В результате существующие сетевые фармакологические исследования не смогли определить ингредиенты и механизм действия, ответственные за наблюдаемые эффекты.Сетевая фармакология обычно использует пероральную биодоступность (OB) и лекарствоподобность (DL) для скрининга активных ингредиентов в лекарствах. Однако этот метод не может быть применен для прогнозирования трансдермальной доставки лекарств, что приводит к невозможности получить мишени и механизмы трансдермальных лекарств. Для решения вышеуказанных проблем был разработан новый метод «метод весового коэффициента доза-эффект и метод сетевой фармакологии», который можно использовать для трансдермальных препаратов для извлечения компонентов, мишеней и путей. Содержание компонентов и коэффициент распределения масло-вода, а также показатель молекулярной стыковки объединяются для получения теоретического содержания чрескожной абсорбции каждого компонента. С помощью этого метода устанавливается оценка вклада соответствующего «весового коэффициента» по сравнению с сигнальными путями, обогащенными традиционной сетевой фармакологией, и выбираются ключевые пути. Для целей этого исследования была создана модель экземы у мышей с использованием динитрохлорбензола (DNCB) для изучения механизма действия и проверки эффективности эфирного масла немецкой ромашки при лечении экземы.

Материалы и методы

Определение химического состава летучих масел ромашки аптечной

Эфирное масло ромашки аптечной (приобретенное у Henan Feinari Aromatic Biotechnology Co., Ltd.) идентифицировали методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС). (Тай и др., 2020). Хроматографические условия: капиллярная колонка HP-5 MS (30 м × 250 мкм x 0,25 мкм), газ-носитель He, газ-носитель в шунтирующем режиме, ввод 1,0 мкл и скорость потока через колонку 1 мл/мин. Начальная температура составляла 40°С, и температуру повышали до 250°С со скоростью 6°С/мин. Условия масс-спектрометрии: режим полного сканирования, источник ионизации EI, энергия ионизации 70 эВ, температура линии передачи 280 °C, температура источника ионов 230 °C, температура квадруполя 150 °C, время задержки растворителя 3 мин и диапазон качества сканирования. 20–450 а.е.м. (Fu et al., 2018).

Идентификация эфирного масла

Данные были обработаны с использованием программного обеспечения для анализа данных.Для поиска использовалась стандартная спектральная база данных NIST, и компоненты были проверены в соответствии со степенью соответствия, индексом удерживания и соответствующей литературой. Индекс удерживания определяли как время удерживания н-алканов (С8–С40) в тех же условиях газовой хроматографии. По индексу удерживания н-алканов индекс удерживания эфирного масла ромашки немецкой был следующим:

RI=100Z+100[tR(X)−tR(Z)]tR(Z+1)−tR(Z) (1-1)

, где tR — время удерживания, X — анализируемое соединение, а Z и Z+ 1 — число атомов углерода двух н-алканов до и после аналита, а именно tR (Z) < tR (x) < tR (Z+ 1) (Yuandong et al. , 2017).

Фармакологический анализ сети «ингредиент-мишень»

Определение летучих масел ромашки немецкой

База данных Swiss Target Prediction (Le-qi et al., 2020) и базы данных Meta TarFisher использовались для прогнозирования целевых показателей летучих масел ромашки аптечной и мишеней активных компонентов эфирного масла ромашки аптечной.

Приобретение целей по заболеванию экземой

Взяв «экзему» в качестве ключевого слова и установив вид как человека, мы провели поиск в базе данных GeneCards (Liu et al., 2020 г.), базу данных DisGeNET (Wu et al., 2020 г.), базу данных OMIM (Kui et al., 2021 г.) и базу данных сравнительной токсикогеномики (CTD) (Tianmu et al., 2021 г.) для определения квалифицированной информации о генах и целевых белки, связанные с экземой.

База данных Gene Expression Omnibus (GEO) Чип Дифференциальная проверка генов

На основе данных обнаружения чипа GSE57225 в базе данных GEO (Liang et al., 2021) набор данных включал 23 пациента и 17 нормальных контрольных образцов. Дифференциальную экспрессию генов анализировали с использованием программного пакета Limma 15 компании R.Критерии отбора были | логФК | > 1,2 и р < 0,05.

Построение составной композиции-целевой сети

Мишень эфирного масла, мишень экземы и дифференциальный ген GEO немецкой ромашки пересекали с использованием Venny 2.1.0 (https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/ Венни/index.html). Активные компоненты эфирного масла ромашки немецкой и три перекрывающихся гена были введены в Cytoscape 3.7.1 (Shi et al., 2020) для построения сети составной компонент-мишень. Построение и анализ белок-белкового взаимодействия (PPI) 1 .3.5 (Сюй и др., 2020) сеть.

Потенциальные мишени активных компонентов эфирного масла, мишени болезни экземы и дифференциальные гены, добытые GEO, были интегрированы, пересечены и введены в базу данных STRING (Sang et al., 2020). Минимальный порог взаимодействия был установлен на «самую высокую достоверность». Свободный белок был скрыт, и была получена карта соотношения белков. n+1⋅w)i (1-2)

В формуле Z представляет собой расчетную оценку каждого активного компонента, T представляет собой сумму фракций связанных активных компонентов, содержащихся в каждой мишени, а N представляет собой сумму фракций мишеней, содержащихся в каждом пути .

Генная онтология – Анализ обогащения биологических процессов и Киотская энциклопедия анализа обогащения генов и путей геномов

Для дальнейшего выяснения функции генов эфирного масла немецкой ромашки и роли потенциальных целей сигнальных путей при экземе был использован профиль в Rstudio для анализировать ключевые мишени в GO-BP, основные биологические процессы и пути анализировали по пути KEGG, а результаты анализа обогащения переупорядочивали в соответствии с их весовыми коэффициентами.Весовые коэффициенты каждого пути представляли собой сумму весовых коэффициентов всех мишеней в конкретном пути.

Эксперименты на животных

Экспериментальные животные Ментальное животное

Самцы мышей Куньмин ( n = 42) весом 18–22 г были приобретены у компании Chengdu Dashuo Experimental Animal Co. , Ltd. в соответствии с лицензией на экспериментальных животных SCXK (Сычуань) 2020– 030. Это исследование было одобрено Комитетом по этике животных Шэньсийского университета китайской медицины.

Создание модели экземы

Для создания модели экземы все группы, кроме нормальной группы, были сенсибилизированы на спине 7% раствором DNCB.Вкратце, волосы на спине в области 2 см × 2 см были удалены, и все группы, кроме нормальной группы, были сенсибилизированы 100 мкл ацетонового раствора оливкового масла, содержащего 7% DNCB. Через 5 дней все группы, кроме нормальной группы, подверглись заражению 30 мкл ацетонового раствора оливкового масла, содержащего 1 % DNCB, на внутренней и внешней стороне правого уха. Задание повторялось трижды в течение двух дней подряд. В качестве контроля мышам в нормальной группе смазывали левое ухо таким же количеством ацетонового раствора оливкового масла.

Экспериментальная группировка и введение

Мышей адаптивно кормили в течение 3 дней и случайным образом разделили на шесть групп ( n = 7/группа): нормальная группа, модельная группа, группа с положительным действием препарата, группа с низкой дозой ромашки (концентрация 0,15). %), группа средних доз (концентрация 0,3%) и группа высоких доз (концентрация 0,5%). Каждая группа выращивалась в отдельных клетках. Вышеупомянутые группы лечились путем смазывания кожи на месте экземы два раза в день в течение 14 дней подряд.Группу с эфирным маслом немецкой ромашки обрабатывали 80 мкл эфирного масла каждый раз в группе с положительным результатом лечения, а 80 мкл растворителя оливкового масла применяли в нормальной группе и экспериментальных группах.

Кожный тест на мышах и определение индекса селезенки

После завершения лечения с помощью многофункционального детектора кожи с интеллектуальным цифровым дисплеем (RBX-916) измеряли содержание воды в коже, содержание кожного сала и эластичность кожи в обработанной области. . Мышей в каждой группе взвешивали перед отбором проб, и селезенку удаляли после тщательного отделения соединительной ткани вокруг селезенки.После абсорбции остатков крови на поверхности органа абсорбирующей бумагой массу селезенки сразу же взвешивали на аналитических весах. Индекс селезенки рассчитывали следующим образом: индекс селезенки = (качество селезенки (мг))/(качество экспериментальной мыши (г)). Каждую группу сравнивали с контрольной группой и рассчитывали разницу.

Окрашивание гематоксилином-эозином

Образцы тканей фиксировали 4% параформальдегидом в течение 24 ч с градиентом дегидратации 75, 85 и 95% безводным этанолом до прозрачности и заливали в парафин, разрезали на срезы ткани толщиной 4 мкм, а затем распространяется в воде при 43°C (Zhang et al., 2020). Срезы ткани запекали при постоянной температуре и сушили в камере взрывной сушки при 60°C в течение 2-4 часов. После депарафинизации срезы ткани замачивали в градиентном спирте и гидратировали в дистиллированной воде в течение нескольких минут. Срезы тканей окрашивали гематоксилином и эозином. После обезвоживания срезы ткани запечатывали ксилолом и наблюдали за изменениями под микроскопом.

Окрашивание толуидиновым синим

Залитую парафином ткань нарезали (4 мкм) (Chen et al. , 2020). Каждый срез окрашивали 0,5% раствором красителя толуидинового синего при комнатной температуре в течение 30 минут и быстро промывали дистиллированной водой. Срезы помещали в 0,5% ледяную уксусную кислоту, дифференцировали на несколько минут и запечатывали дегидратацией спиртом, делали прозрачными ксилолом, запечатывали нейтральной смолой и исследовали под микроскопом.

Иммуногистохимия

Срезы инкубировали с 3% перекисью водорода в течение 25 мин и инкубировали с 10% нормальной козьей сывороткой при комнатной температуре в течение 30 мин.Сыворотку удаляли, добавляли первичное антитело и ткани инкубировали в течение ночи при 4°С. Затем ткани трижды промывали PBS по 5 минут на промывку. Добавляли вторичное антитело и ткани инкубировали при комнатной температуре в течение 50 мин. Хромогенный раствор DAB использовали для равномерного покрытия тканей, и ткани разрезали на гематоксилин в течение 2 минут и наблюдали под микроскопом после обезвоживания, прозрачности и уплотнения.

Иммуноферментный анализ

Содержание ИЛ-6, ФНО-α и ИЛ-17 в сыворотке мышей каждой группы определяли с помощью ИФА и строили стандартную кривую согласно инструкции к набору (Jiangsu Меймиан промышленная компания, Ltd) (Шутовска и др., 2021). Содержание цитокинов в сыворотке каждой группы определяли методом сэндвича с двойными антителами и инструментом для мечения ферментов.

Вестерн-блот-анализ (Gao et al., 2018).

Кожные ткани из вышеупомянутых групп собирали и лизировали буфером RIPA, а лизированные образцы помещали на лед на 5 мин. Супернатант центрифугировали в криоконсервированной центрифуге при 4°С, 12000 об/мин в течение 10 мин. Супернатант отделяли в виде белкового экстракта.В общей сложности 40 мкг белка было выделено с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE), а затем перенесено на поливинилиденфторидные (PVDF) мембраны. Мембраны запечатывали 5%-ным сухим обезжиренным молоком, а затем инкубировали с антителами к p38 (Wanleibio, WL00764, Китай), p-p38 (Wanleibio, WLP1576, Китай), p65 (Wanleibio, WL01980, Китай) и p-p65( Ванлейбио, WL02169, Китай). Затем мембраны промывали трис-буферным солевым раствором + твин (TBST) и инкубировали со вторичными антителами.Затем мембраны шесть раз промывали в TBST, равномерно обрызгивали фотолюминесцентным раствором для электрохемилюминесценции (ECL) и переносили в темный ящик для экспонирования. Пленку сканировали и рассчитывали оптическую плотность с помощью программного обеспечения Gel-Pro Analyzer. Относительное значение экспрессии целевого гена (значение серого гена-мишени/значение внутреннего эталона серого β-актина) определяли с использованием β-актина в качестве внутреннего стандарта.

Molecular Docking

В качестве лигандов были выбраны активные ингредиенты ромашки аптечной, в качестве мишеней использовались первые пять белков пути предсказания, а область, где располагался положительный лекарственный лиганд, представляла собой активный карман (Jia et al., 2021). Модуль LibDock в программном обеспечении Discovery Studio использовался для молекулярной стыковки активных ингредиентов с целевым белком. После того, как стыковка была завершена, по установленной формуле была рассчитана оценка каждого компонента, чтобы отсеять ключевые компоненты мишени.

В формуле S представляет окончательную оценку каждого компонента, Z представляет собой оценку каждого активного соединения, A представляет собой оценку каждого компонента, полученную путем молекулярного докинга, а B представляет собой оценку положительных лекарств.

Статистический анализ

Все экспериментальные данные были подвергнуты статистическому анализу с использованием программного обеспечения SPSS 19.0. Результаты выражены как среднее значение ± стандартное отклонение (SD). Однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) был применен для определения статистической значимости различий между группами, p < 0,05 и p < 0,01 считались значимо различными.

Результаты и анализ

Скрининг соединений и выбор потенциальных мишеней

Эфирное масло ромашки было проанализировано с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС) и был получен масс-спектр ионов эфирного масла (рис. 1А). ).Путем поиска в базе данных NIST и объединения с индексом удержания было получено 23 активных компонента и идентифицировано 20 квалифицированных компонентов. Конкретная информация о составе показана в таблице 1, а конкретные структуры соединений показаны на рисунке 2. В общей сложности 541 мишень эфирного масла немецкой ромашки была получена с использованием базы данных PubChem, онлайн-платформы скрининга мишеней Swiss TargetPrediction и метабазы ​​данных TarFisher. Кроме того, из баз данных GeneCards, DisGeNet, OMIM и CTD было получено 24 226 целевых показателей экземы.На основании пересечения было получено 509 потенциальных целей эфирного масла немецкой ромашки для лечения экземы.

РИСУНОК 1 . (А) Диаграмма полного ионного тока эфирного масла ромашки немецкой. (B) Дифференциальная генетическая карта вулкана экземы. (C) : Карта пересечения мишени эфирного масла немецкой ромашки, мишени экземы и дифференциального гена. (D) Целевая карта состава летучих масел немецкой ромашки. (E) Сетевая диаграмма ключевых целей PPI. (F,H) Результаты обогащения BP и KEGG перед сортировкой соответственно. (G,I) Результаты обогащения после сортировки БП и КЭГГ.

ТАБЛИЦА 1 . Качественные результаты анализа эфирного масла ромашки аптечной с помощью ГХ/МС

РИСУНОК 2 . (A–T) Химические структуры 20 активных компонентов.

Дифференциальная генетическая проверка чипа GEO

Данные чипа GSE57225 и платформы были загружены из базы данных GEO. Всего было собрано 62 образца, в том числе 17 нормальных образцов и 23 образца экземы.По условиям скрининга (| logFC | > 1,2 и p < 0,05) было получено 560 генов со значимыми различиями. Экспрессия гена с повышенной экспрессией (красный), экспрессия гена с пониженной регуляцией (зеленый) и график вулкана показаны на рисунке 1B. Пересечение между дифференциально экспрессируемыми генами (DEG) и возможными мишенями экземы эфирного масла немецкой ромашки дало 29 генов-кандидатов, как показано на рисунке 1C.

Построение и анализ сети

Сетевая фармакология предлагает новый взгляд на анализ действия лекарств.Он может анализировать характеристики сети через связи и отношения узлов в биологических сетях и дополнительно прояснять механизм действия лекарств. Мы проанализировали взаимосвязь между активными ингредиентами и ключевыми мишенями эфирного масла ромашки немецкой, а затем создали карту «компонент-мишень» с функцией слияния. Затем мы использовали программное обеспечение Cytoscape 3.7.1 для визуализации сети. Результаты показаны на рисунке 1D. Фиолетовый эллипс представляет ключевые компоненты, отфильтрованные эфирным маслом, розовый прямоугольник представляет собой отсеянные ключевые целевые точки, узел представляет собой активный ингредиент, а ребро используется для соединения мишени с активным ингредиентом. Большее количество ссылок указывает на то, что активный ингредиент или цель важнее в сети.

Немецкая ромашка-экзема-дифференциальный ген PPI Построение сети и скрининг ключевых целей

29 DEG были введены в STRING для построения карты сети, как показано на рисунке 1E. Благодаря скринингу заданных условий ключевые мишени были идентифицированы как IL-6, MMP1, MMP3, MMP9, JAK3, CCR1, CCR5, ZAP70 и PRKCQ. Диаграмма сети имела 29 узлов со средней степенью свободы 0.828. Размер узла на диаграмме представляет размер значения. Толщина края указывает на то, что чем толще край, тем больше значение комбинированной оценки и тем больше взаимодействие между узловым белком и другими белками.

Анализ обогащения GO-BP и KEGG

Благодаря анализу обогащения GO-BP выбранных ключевых мишеней было идентифицировано 145 биологических процессов и 16 сигнальных путей (рис. 1F-I). Они включали нейровоспалительную реакцию, разборку внеклеточного матрикса, реакцию на бета-амилоид, положительную регуляцию сигнального пути хемокинов пролиферации Т-клеток, дифференцировку клеток Th27, сигнальный путь IL-17 и взаимодействие вирусного белка с цитокином и цитокиновым рецептором, среди других сигнальных путей. пути.После пересчета формулы дифференциация клеток Th27 была определена как наиболее важная.

Эксперимент на животных и проверка эффективности

Сравнение степени воспаления

После индукции DNCB в каждой группе наблюдались эритема кожи, экссудация, утолщение, шероховатая поверхность и мшистые поражения, что позволяет предположить, что модель была успешной. После лечения положительными препаратами и различными дозами эфирного масла немецкой ромашки экссудат, покраснение и отек уменьшились.В группах с положительным результатом на препарат и высокую дозу эфирного масла ромашки немецкой экзема уменьшилась, как показано на рисунке 3A.

РИСУНОК 3 . (A) : Влияние эфирного масла ромашки аптечной на воспаление спины у мышей (A1: нормальная группа, A 2: экспериментальная группа, A 3: группа положительных препаратов, A 4: группа низких доз ромашки аптечной, A 5: группа ромашки немецкой со средними дозами и группа A 6: группа ромашки немецкой с высокими дозами). (B) : Результаты теста на содержание кожного сала в коже мышей. (C) : Результаты содержания воды в коже мышей. (D) : Результаты теста на эластичность кожи мышей. (E) : Результаты измерения индекса селезенки мышей (примечание: данные выражены как среднее ± SD ( n = 6), по сравнению с нормальной группой # p < 0,05, ## p < 0,01, по сравнению с модельной группой * p < 0,05, ** p < 0,01).

Результаты кожных тестов

Результаты кожных тестов показали, что по сравнению с нормальной группой содержание кожного сала (рис. 3B), содержание воды в коже (рис. 3C) и эластичность кожи (рис. 3D) в экспериментальной группе снизились.По сравнению с модельной группой содержание воды в коже, кожного сала и эластичность кожи в группах с разными дозами увеличились в разной степени со значительными различиями.

Сравнение индекса селезенки среди различных групп мышей

Влияние эфирного масла ромашки аптечной на иммунный ответ предварительно оценивали по индексу селезенки (рис. 3Е). На диаграмме показано, что селезеночный индекс в модельной группе был ниже, чем в нормальной группе, а селезеночный индекс в группах с разными дозами был выше, чем в модельной группе, со значительными различиями.

Результаты окрашивания гематоксилин-эозином

Результаты окрашивания гематоксилин-эозином (рис. 4А) показали, что структура эпидермиса и дермы в нормальной группе выглядит нормальной, без отека, гиперемии или лимфоцитарной инфильтрации. В модельной группе эпидермис пролиферировал, а шиповатый слой был гипертрофирован. В дерме выявлялась воспалительно-клеточная инфильтрация, сопровождающаяся вазодилатацией и гиперемией. В группе положительного препарата эпидермис немного пролиферировал, и большая часть дермы восстановилась.Отека, гиперемии, лимфоцитарной инфильтрации не выявлено. Эпидермальная гиперплазия и клеточный отек значительно уменьшились с увеличением дозы в группе лечения.

РИСУНОК 4 . (A) Результаты окрашивания гематоксилин-эозином тканей кожи мышей. (B) Подсчет тучных клеток с помощью окрашивания толуидиновым синим. (C) Результаты окрашивания клеток CD4. (D) Результаты окрашивания клеток CD8 (примечание 1: нормальная группа, 2: модельная группа, 3: группа с положительным результатом, 4: группа с низкой дозой, 5: группа со средней дозой и 6: группа с высокой дозой). (E) Иммуногистохимическое определение экспрессии клеток CD4 в кожных поражениях на спине мышей. (F) Иммуногистохимическое определение экспрессии клеток CD8 в кожных поражениях на спине мышей (примечание: данные выражены как среднее ± SD ( n = 3) по сравнению с нормальной группой ## p < 0,01, по сравнению с модельной группой, * p < 0,05, ** p < 0,01).

Результаты окрашивания толуидиновым синим

Результаты окрашивания толуидиновым синим показаны на рис. 4В.Количество тучных клеток было низким в нормальной группе и высоким в модельной группе. Количество тучных клеток было значительно снижено в группе положительного препарата и уменьшалось дозозависимым образом в группах с низким, средним и высоким содержанием эфирного масла ромашки немецкой.

Результаты окрашивания CD4 и CD8

Клетки CD4 и CD8 расположены в цитоплазме и клеточной мембране. Клетки CD4 и CD8 были слабо положительными в тканях кожи спины мышей. По сравнению с нормальной группой, распределение клеток CD4 в цитоплазме и клеточной мембране поражений кожи на спине в группе с моделью экземы было уменьшено, окрашивание стало светлее, а положительная экспрессия клеток CD4 была снижена ( p < 0.001, n = 3). По сравнению с модельной группой с экземой различные дозы эфирного масла ромашки в разной степени увеличивали экспрессию клеток CD4, а средние и высокие дозы значительно отличались от экспериментальной группы ( p < 0,001, n = 3). .

По сравнению с нормальной группой, клетки CD8 в поражениях кожи на спине мышей в группе с моделью экземы показали коричневато-желтые частицы в клеточной мембране и цитоплазме, а положительный уровень экспрессии клеток CD8 увеличился ( p < 0. 001, n = 3). По сравнению с группой с моделью экземы, разные дозы эфирного масла ромашки немецкой вызывали разную степень снижения количества клеток, экспрессирующих CD8. Существовали значительные различия между группой с высокой дозой и модельной группой ( p <0,001, n = 3), как показано на рисунках 4C-F.

Уровни TNF-α, IL-6 и IL-17 в сыворотке

По сравнению с нормальной группой уровни TNF-α, IL-6 и IL-17 в сыворотке в группе модели экземы значительно увеличились ( p < 0.001, н = 6). По сравнению с модельной группой эти факторы были снижены в группе положительного препарата и группе эфирного масла немецкой ромашки. Результаты показаны на рисунках 5A-C.

РИСУНОК 5 . (A) ELISA обнаружение TNF-α. (B) ELISA для обнаружения IL-6. (C) ELISA обнаружение IL-17 (примечание: данные выражены как среднее ± SD ( n = 3), по сравнению с нормальной группой ## p < 0,01, по сравнению с модельной группой, * р < 0. 05, ** р < 0,01). (D-I) Вестерн-блоттинг использовали для определения уровней экспрессии белка p-p38, p38, p-p65, p65, p-p38/p38 и p-p65/p65. (D,E) Количественные уровни экспрессии белков p-p38, p38, p-p65 и p65. (F,G) Уровень экспрессии белка p38, p-P38, p65 и p-P65. (H,I) Соотношение p-P38/p38 и p-P65/p65 в поражениях кожи мыши. (x¯±s (n = 3) по сравнению с нормальной группой ### p < 0,001, ## p < 0.01, по сравнению с модельной группой *** p < 0,001,* p < 0,05).

Вестерн-блот-анализ

Уровни экспрессии белков p-P38 и p-P65 в группе с положительным результатом на лекарственное средство и в группе лечения были ниже, чем в экспериментальной группе. По сравнению с нормальной группой экспрессия белков p-P38/p38 и p-P65/p65 в группе с моделью мышиной экземы была выше, чем в группе с моделью мышиной экземы ( p <0,001, n = 3). .По сравнению с группой мыши с модельной экземой, как в группе лечения, так и в группе с положительным результатом на лекарство была снижена экспрессия белков p-P38/p38 и p-P65/p65 ( p <0,001, n = 3), что указывает на то, что Эфирное масло немецкой ромашки может ингибировать пути MAPK и NF-κB. Результаты показаны на рисунках 5D-I.

Проверка молекулярной стыковки

Результаты молекулярной стыковки показаны на рис. 6A–K. Молекулярную стыковку основного активного компонента и мишени проводили с использованием программного обеспечения Discovery, а показатель молекулярной стыковки рассчитывали с использованием новой формулы веса.Чем выше оценка компонента, тем выше важность компонента для мишени и тем выше роль компонента в пути дифференцировки клеток Th27. Результаты показаны на тепловой карте на рисунке 6L. Эти результаты свидетельствуют о том, что хамазулен, бисабололоксид А, (-)-α-бисабололоксид В и γ-элемен могут быть ключевыми активными компонентами эфирного масла ромашки немецкой при лечении экземы.

РИСУНОК 6 . (A–C) Результаты докинга JAK3 и компонентов (Z)-ен-ин-дициклоэфира, бисаболола оксида A, (-)-α-бисаболола оксида B. (D–F) Результаты докинга PKC8 и компонентов гермакрена D, γ-элемена и β-копаена. (G–I) Результаты стыковки мишени RORC с компонентами гермакрен D, хамазулен и цедр-8-ен. (J) Цель IL6 и компонент нафталин, 1,2,3,4,4a, 7-гексагидро-1,6-диметил-4-(1-метилэтил)-результат докинга. (K) ZAP70 мишень и компонент нафталин, 1,2,3,4,4a, 7-гексагидро-1,6-диметил-4-(1-метилэтил)-результат докинга. (L) Подробное отображение тепловой карты.

Механизм Описание

Мы использовали метод динитрохлорбензола (DNCB) для создания модели экземы у мышей. Модели обрабатывали низкими, средними и высокими дозами эфирного масла немецкой ромашки. Во время эксперимента за мышами наблюдали. Состояние кожи включает содержание кожного сала, содержание воды и индекс эластичности. Сывороточные уровни воспалительных факторов IL-6, IL-17 и TNF-α в разных группах мышей определяли с помощью ELISA, а воспалительные клетки, лимфоциты и тучные клетки в кожных поражениях мышей наблюдали с помощью окрашивания H&E. и окрашивание толуидиновым синим.Для определения уровня CD4 и CD8 клеток лимфоцитов применяли иммуногистохимию и, наконец, для выявления уровней экспрессии белков р38, р65, р-Р38 и р-Р65 в кожных поражениях использовали вестерн-блоттинг. В сочетании с результатами каждого эксперимента мы полагаем, что механизм действия эфирного масла немецкой ромашки при лечении экземы может заключаться в том, что эфирное масло немецкой ромашки может предотвращать дифференцировку клеток CD4 + в клетки Th27, регулируя лимфатические субпопуляции клеток. Т-клетки; ингибирование активации путей МАРК и NF-κB; снижение секреции факторов воспаления IL-6, IL-17 и TNF-α; и тем самым уменьшая воспалительную реакцию (рис. 7).

РИСУНОК 7 . Дисплей механизма.

Обсуждение

При лечении экземы трансдермально вводят эфирное масло ромашки немецкой. Поэтому наше исследование включало коэффициент распределения вода-нефть (log P) и состав в качестве ключевых параметров для прогнозирования всасывания в кровь. Мы установили «весовые коэффициенты», которые можно сравнить с сигнальными путями, обогащенными традиционной сетевой фармакологией. Это можно использовать для переоценки результатов анализа биологического обогащения для определения ключевых путей.До и после ранжирования баллов вклада «весового коэффициента» мы обнаружили, что пятью основными путями, обогащенными традиционной сетевой фармакологией, были дифференцировка клеток Th27, сигнальный путь IL-17, взаимодействие вирусного белка с цитокином и цитокиновым рецептором, NF Сигнальный путь -κB и нарушение регуляции транскрипции при раке. После расчета с использованием нового весового коэффициента пятью наиболее обогащенными путями были дифференцировка клеток Th27, сигнальный путь хемокинов, метаболизм азота, неправильная регуляция транскрипции при раке и сигнальный путь IL-17. На основе обзора литературы в сочетании с секвенированием путей мы определили, что дифференцировка клеток Th27 является ключевым путем для эфирного масла немецкой ромашки при лечении экземы.

Исследования (Liu et al., 2019) показали, что возникновение дерматита и экземы связано с дисбалансом лимфатических субпопуляций Т-клеток (Th2/Th3). TNF-α, секретируемый клетками Th2, индуцирует экспрессию ICAM-1 и L-селектина, заставляя Т-клетки и макрофаги инфильтрировать большое количество Т-клеток и макрофагов в очаг воспаления.При воспалительной стимуляции моноциты, макрофаги и эндотелиальные клетки высвобождают ИЛ-6 Th3-клетками. Избыточная секреция цитокинов Th3-типа является важным фактором, приводящим к экземе, а избыточная секреция цитокинов Th2-типа усугубляет заболевание (Zhou et al., 2019). Уровень Th27 в периферической крови больных экземой значительно выше, чем у здоровых людей (Fan et al., 2019), и эти клетки секретируют большое количество воспалительных цитокинов, вызывающих воспаление тканей. IL-17, секретируемый клетками Th27, может стимулировать кератиноциты кожи, увеличивать секрецию предвоспалительных цитокинов и усиливать воспаление кожи и разрушение тканей (Xu and Lv, 2020). Научные исследования показали, что уровни цитокинов TNF-α, IL-6 и IL-17 в сыворотке мышей, получавших эфирное масло ромашки немецкой, были ниже, чем в экспериментальной группе, что указывает на то, что снижение TNF-α, ИЛ-6 и ИЛ-17 могут быть одним противовоспалительным механизмом. После распознавания рецепторами IL-17 на клеточной поверхности, IL-17 может активировать нижестоящие сигнальные пути, такие как NF-κB и MAPK, что приводит к экспрессии провоспалительных хемокинов и цитокинов.

В многоклеточных организмах, особенно в клетках млекопитающих, множественные сигнальные пути часто должны работать вместе, чтобы точно выполнять клеточные функции (Yong and Xiao-Wei, 2000). Путь MAPK представляет собой общий путь пересечения путей передачи сигнала, влияющих на пролиферацию, дифференцировку, трансформацию и апоптоз клеток (Lei et al. , 2020). Некоторые препараты участвуют в активации, пролиферации и миграции иммунных клеток через сигнальный путь МАРК для облегчения кожных поражений, вызванных аллергическим заболеванием АД (Pfalzgraff et al., 2016). Окислительное повреждение клеток кожи может быть уменьшено с помощью ингибитора p38, который ингибирует подавление IL-6. Эффективные вещества могут ослаблять экспрессию NF-κB в кератиноцитах и ​​индуцировать регуляцию тромбоксана, что связано с подавлением воспалительных клеток (Chang et al., 2017; Sur et al., 2019). NF-κB играет важную роль в регуляции аутоиммунитета и воспаления Т-клеток. Фактор транскрипции p65 является членом семейства NF-κB, который может индуцировать продукцию провоспалительных хемокинов, индуцированную TNF-α/IFN-γ in vitro , а также может индуцировать аллергический воспалительный ответ.p38MAPK является вышестоящей киназой NF-κB. Это стресс-индуцированная протеинкиназа. Он активируется под действием воспалительных факторов и окислительного стресса и проникает в ядро ​​из цитоплазмы, чтобы далее индуцировать активацию NF-κB, что в конечном итоге приводит к продукции большого количества воспалительных факторов.

В этом исследовании модельная группа показала гиперплазию поврежденного эпидермиса, гипертрофию шиповатого слоя, инфильтрацию большого количества тучных клеток, инфильтрацию воспалительных клеток в дерме и явные экземоподобные проявления, такие как расширение сосудов.В группе с положительным результатом лечения и в группах, получавших различные дозы эфирного масла ромашки немецкой, гиперкератоз подавлялся, а инфильтрация воспалительных клеток в эпидермисе модели экземы уменьшалась. Также увеличилось содержание воды и липидов, а также эластичность кожи, что свидетельствует об аналогичном действии эфирного масла ромашки немецкой и положительных препаратов. В Т-лимфоцитах клетки CD4 + помогают макрофагам, В-лимфоцитам и Т-киллерам, тогда как клетки CD8 + оказывают прямое убивающее действие на клетки-мишени, несущие антиген.CD4 + и CD8 + регулируют друг друга для поддержания иммунного баланса. Результаты иммуногистохимии показали, что после обработки эфирным маслом положительная экспрессия CD4 + в кожных поражениях на спинах мышей увеличивалась, а положительная экспрессия CD8 + снижалась, подтверждая, что оно может уменьшать воспаление и инфекцию путем повышение иммунного статуса организма. Уровни IL-6, TNF-α и IL-17 в сыворотке в экспериментальной группе были выше, чем в нормальной группе.По сравнению с модельной группой положительные препараты и эфирное масло ромашки немецкой снижали содержание факторов воспаления в сыворотке крови. Кроме того, это исследование показало, что экспрессия белка P-p38/p38, p-p65/p65 увеличилась после моделирования, указывая на то, что, активируя пути MAPK и NF-κB, он способствует дифференцировке клеток CD4 + в клетки Th27 до вызывают воспалительную реакцию, при этом лечение эфирным маслом немецкой ромашки снижало их экспрессию, что свидетельствует об ингибировании сигнального пути MAPK посредством предотвращения фосфорилирования p38 (Shen et al., 2020). Мы пришли к выводу, что ромашка ромашка может уменьшать воспаление, регулируя дифференцировку клеток Th27, повышая уровень IL-17 и дополнительно влияя на пути MAPK и NF-κB.

Для дальнейшего определения ключевых активных компонентов эфирного масла ромашки немецкой, влияющих на путь дифференцировки клеток Th27, мы выбрали пять ключевых мишеней, а именно JAK3, RORC, PRKCQ, ZAP70 и IL6, а также их соответствующие активные компоненты и положительные препараты в качестве лиганды. Молекулярный докинг использовали для проверки взаимодействия между основными активными компонентами эфирного масла ромашки немецкой и потенциальными мишенями.Используя комбинацию фракции лиганда, положительной фракции лекарственного средства и веса компонента, была получена новая формула для оценки компонентов. Результаты показали, что хризантема, спирт красной мирры A, спирт красной мирры B и γ-элемен могут быть ключевыми компонентами эфирного масла немецкой ромашки при лечении экземы.

Заявление о доступности данных

В этом исследовании были проанализированы общедоступные наборы данных. Эти данные можно найти здесь: База данных Gene Expression Omnibus GSE57225 чип.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено. Это исследование было одобрено Комитетом по этике животных Шэньсийского университета китайской медицины.

Вклад авторов

WW, XZ и YS участвовали в разработке этого исследования, а также провели статистический анализ. JZ, YW, JL, CW и YW провели исследование и собрали важную справочную информацию. WW, YJ, MY, JS и DG составили рукопись. ZW и FW переработали для нас рукопись.Компания LW поставляет нам эфирное масло немецкой ромашки. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Финансирование

Этот проект был поддержан Национальным фондом естественных наук Китая (грант № 81703720), Проектом группы инноваций в дисциплинах Университета китайской медицины Шэньси (2019-YL11), Программой продвижения инновационных талантов провинции Шэньси-Наука. и группа технологических инноваций (грант № 2018TD005), Проект строительства двойного первоклассного дисциплины Университета традиционной китайской медицины Цзянси (JXSYLXK-ZHYAO008, JXSYLXK-ZHYAO083, JXSYLXKZHYAO084), Крупный научно-технический научно-исследовательский проект в провинции Цзянси (20194ABC28009) и 2017 г. Открытый фонд ключевой лаборатории современной китайской медицины, подготовленный Министерством образования (2017003), провинция Шэньси. 2021 г. Центральный ведущий местный инновационный проект в области науки и технологий (2021ZY2-CG-03).

Конфликт интересов

Автор LW работал в компании Henan Feinari Aromatic Biotechnology Co., Ltd. интерес.

Примечание издателя

Все претензии, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций или издателя, редакторов и рецензентов.Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fphar.2021.706836/full#supplementary-material

Сокращения

BP, биологический процесс ; DEG — дифференциально экспрессируемые гены; DL, похожий на наркотик; ECL, электрохемилюминесценция; ГХ-МС, газовая хроматография-масс-спектрометр; GEO, комплексная база данных экспрессии генов; ГО, онтология генов; HE – окраска гематоксилин-эозином; ИЛ-6, интерлейкин 6; ИЛ-17, интерлейкин 17; JAK3, Янус-киназа 3; KEGG, Киотская энциклопедия генов и геномов; MMP1, матриксные металлопротеиназы 1; NF-κB, ядерный фактор каппа-бета; OB, пероральная биодоступность; PPI, сети белок-белковых взаимодействий; PRKCQ, протеинкиназа С; ПВДФ, поливинилиденфторид; RORC, (человеческий) рекомбинантный белок С; SDS-PAGE, электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия; SMILES, упрощенная спецификация ввода строки молекулярного ввода; TBST, трис-буферный раствор + твин; TNF-α, фактор некроза опухоли альфа; ZAP70, дзета-цепь 70.

Ссылки

Андерсон, К., Лис-Балчин, М., и Кирк-Смит, М. (2000). Оценка массажа с эфирными маслами при атопической экземе у детей. Фитотер Рез. 14 (6), 452–456. doi:10.1002/1099-1573(200009)14:6<452::aid-ptr952>3.0.co;2-4

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Арсич И., Тадич В., Влаович Д., Хомшек И., Весич С., Исайлович Г. и др. (2011). Получение новых обогащенных апигенином липосомальных и нелипосомных противовоспалительных составов для местного применения в качестве заменителей кортикостероидной терапии. Фитотер Рез. 25 (2), 228–233. doi:10.1002/ptr.3245

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Чанг Т. М., Цен Дж. Х., Йен Х., Ян Т. Ю. и Хуанг Х. К. (2017). Экстракт Periostracum Cicadae ингибирует окислительный стресс и воспаление, вызванное ультрафиолетовым облучением кератиноцитов HaCaT. Эвид. Дополнение на основе. альтернативная мед. 2017, 8325049. doi:10.1155/2017/8325049

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Чен Р., Ye, B., Xie, H., Huang, Y., Wu, Z., Wu, H., et al. (2020). миР-129-3p облегчает апоптоз хондроцитов при остеоартрите, вызванном переломом коленного сустава, через CPEB1. Дж. Ортоп. Surg. Рез. 15 (1), 552. doi:10.1186/s13018-020-02070-1

CrossRef Full Text | Google Scholar

Эль-Саламуни, Н.С., Али, М.М., Абдельхади, С.А., Кандил, Л.С., Эльбатути, Г.А., и Фарид, Р.М. (2020). Оценка ромашкового масла и наноэмульгелей как многообещающего варианта лечения атопического дерматита, вызванного у крыс. Экспертное заключение. Наркотик Делив. 17 (1), 111–122. doi:10.1080/17425247.2020.1699054

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Фан Ю., Ляньчэн Г., Цзэсинь З., Зеюй К., Вэнь Л. и Чжэнхуай Т. (2019). Обсуждение механизма воздействия крема Snake Huang на кожный барьер экземы на основе дрейфа Th27/Treg. J. Guiyang Coll. Традиционный чин. Мед. 41 (02), 41–45. doi:10.16588/j.cnki.issn1002-1108.2019.02.012

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Фу, К., Ву Д., Ван В., Ван Ю., Чжан Л. и Ли Дж. (2018). ГХ-МС анализ летучих масел Anthemis Nobilis из разных регионов. J. Аньхой Агрик. науч. 46 (21), 172–174. doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2018.21.049

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Gao, C.J., Ding, P.J., Yang, L.L., He, X.F., Chen, M.J., Wang, D.M., et al. (2018). Оксиматрин повышает чувствительность клеток HaCaT к пути IFN-γ и подавляет MDC, ICAM-1 и SOCS1 путем активации P38, JNK и Akt. Воспаление 41 (2), 606–613. doi:10.1007/s10753-017-0716-0

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Jia, Y., Zou, J., Wang, Y., Zhang, X., Shi, Y., Liang, Y., et al. (2021). Механизм действия римской ромашки при лечении тревожного расстройства на основе сетевой фармакологии. J. Food Biochem. 45 (1), е13547. doi:10.1111/jfbc.13547

Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Куи Ф., Гу В., Гао Ф., Ню Ю., Ли В., Zhang, Y., et al. (2021). Исследование влияния и механизма отвара Xuefu Zhuyu на ИБС на основе метаанализа и сетевой фармакологии. Эвид. Дополнение на основе. альтернативная мед. 2021, 9473531. doi:10.1155/2021/9473531

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ле-ци В., Юнь-фань З., Ша-ша Л., Юань-фан С., Цзя-на Х., Сюэ X. и др. (2020). Исследование множественной интерактивной сети «компонент-мишень-путь» для выявления механизма действия Salvia Miltiorrhiza при лечении нарушений микроциркуляции. Подбородок. Традиционные растительные препараты 51 (02), 439–450.

Google Scholar

Лэй, Л., Чжан, Ю., Цзянь, К., Лей, Л., Лв, Н., Уильямсон, Р., и др. (2020). Устойчивость клеток остеосаркомы к проапоптотическим эффектам карфилзомиба связана с активацией митоген-активируемых протеинкиназных путей. Экспл. Физиол. 106 (2), 438–449. doi:10.1113/ep088762

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Лян Ф. К., Гао Дж. Ю. и Лю Дж.В. (2021). Хемокин 16 с мотивом C-X-C, модулируемый микроРНК-545, усугубляет повреждение миокарда и влияет на воспалительные реакции при инфаркте миокарда. Гул. Genomics 15 (1), 15. doi:10.1186/s40246-021-00314-7

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Li, L., Zhao, J., Wang, X., Yong, T., Jiang, M., Lv, C., et al. (2013). Биоинформатический анализ молекулярного механизма отвара максинга шигана при лечении гриппа А h2N1. Chin. Дж.Эксп. Формулы 19 (13), 346–350.

Google Scholar

Лю Т., Моу Ю., Хоу X., Лю В., Ван Ю. и Ван Л. (2019). Идентификация, иммунный уровень и анализ прогрессирования патогенной инфекции поражений кожи у пациентов с дерматитом и экземой Китайский . Дж. Патог. биол. 14 (11), 1342–1345. doi:10.13350/j.cjpb.1

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Liu, Y., Ma, Y., Li, Z., Yang, Y., Yu, B., Zhang, Z., et al. (2020).Исследование ингибирующего действия госсипол-уксусной кислоты на клетки рака желудка на основе подхода сетевой фармакологии и экспериментальной проверки. Наркотики Des. Девель Тер. 14, 3615–3623. doi:10.2147/DDDT.S256566

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Patzelt-Wenczler, R., and Ponce-Pöschl, E. (2000). Доказательство эффективности крема Kamillosan® при атопической экземе. евро. Дж. Мед. Рез. 5 (4), 171–175.

Google Scholar

Пфальцграфф, А., Heinbockel, L., Su, Q., Gutsmann, T., Brandenburg, K., и Weindl, G. (2016). Синтетические противомикробные и нейтрализующие ЛПС пептиды подавляют воспалительные и иммунные реакции в клетках кожи и способствуют миграции кератиноцитов. Науч. Rep. 6, 31577. doi:10.1038/srep31577

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Санг Л. , Сун Л., Ван А., Чжан Х. и Юань Ю. (2020). Особенности N6-метиладенозина мРНК и аберрантная экспрессия модифицированных генов m6A при раке желудка и их потенциальное влияние на риск и прогноз. Перед. Жене. 11, 561566. doi:10.3389/fgene.2020.561566

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Шэнь Ю., Фэн Ф., Сунь Х., Ли Г. и Сян З. (2020). Количественная и сетевая фармакология: тематическое исследование рейна, облегчающего патологическое развитие почечного интерстициального фиброза. J. Ethnopharmacol 261, 113106. doi:10.1016/j.jep.2020.113106

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ши Л., Хань X., Ли Дж. X., Liao, Y.T., Kou, F.S., Wang, Z.B., et al. (2020). Идентификация дифференциально экспрессируемых генов при язвенном колите и проверка на модели колита на мышах с помощью биоинформатического анализа. Мир Дж. Гастроэнтерол. 26 (39), 5983–5996. doi:10.3748/wjg.v26.i39.5983

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Сур Б. , Канг С., Ким М. и О С. (2019). Облегчение поражений атопического дерматита производным бензилиденацетофенона через сигнальный путь MAPK. Воспаление 42 (3), 1093–1102. doi:10.1007/s10753-019-00971-w

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Шутовска М., Коцмалова М., Казимерова И., Форсберг С., Йошкова М., Адамков М. и др. (2021). Влияние ингаляции антагониста STIM-Orai SKF 96365 на индуцированное овальбумином ремоделирование дыхательных путей у морских свинок . США: Достижения экспериментальной медицины и биологии.

Тай, Ю., Хоу, X., Лю, К., Сунь, Дж., Го, К., Су, Л. и др. (2020). Фитохимический и сравнительный анализ транскриптома выявил различные регуляторные механизмы в путях биосинтеза терпеноидов между Matricaria Recutita L. и Chamaemelum Nobile L. BMC genomics 21 (1), 169. | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Tianmu, H., Qihong, C., Sha, Y., jIanyong, Z., и Xiaifei, L. (2021). Исследование молекулярного механизма нефротоксичности, вызванной кантаридином, на основе сетевой фармакологии. Вестник Мед. 40 (02), 180–187.

Google Scholar

Wu, X., Liu, J., Zhu, C., Ma, M., Chen, X., Liu, Y., et al. (2020). Идентификация потенциальных биомаркеров связанных с прогнозом длинных некодирующих РНК (днРНК) при детской рабдоидной опухоли почки на основе сетей ceRNA. Мед. науч. монитор: внутр. Мед. Дж. Эксп. клин. Рез. 26, е927725. doi:10.12659/msm.927725

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Сюй Ф., Гао Дж., Мунхсайхан У., Li, N., Gu, Q., Pierre, J.F., et al. (2020). Генетическое вскрытие вариации экспрессии Ace2 в сердце генетической эталонной популяции мышей. Перед. Кардиовас. Мед. 7, 582949. doi:10.3389/fcvm.2020.582949

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Сюй, Р., и Лв, Х. (2020). Экспрессия и клиническое значение Th27 и регуляторных Т-клеток в периферической крови и кожных поражениях пациентов с экземой Shanxi . Мед. Дж. 49 (05), 510–512.

Google Scholar

Юн, Дж., и Сяо-Вэй, Г. (2000). Регуляция воспалительных реакций путями передачи сигнала MAPK. Acta Physiologica Sinica 52 (4), 267–271. doi:10.3321/j.issn:0371-0874.2000.04.001

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Юаньдун Л., Сюмин Л., Цзюйсин Дж., Цзяньцзюнь X., Лижи Д., Яньцин Д. и др. (2017). Анализ компонентов аромата в апельсиновом масле с помощью ГХ/МС в сочетании с индексом удерживания. J. Food Sci. Биотехнолог. 36 (04), 438–442. doi:10.3969/j.issn.1673-1689.2017.04.018

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Чжан В., Тан Р., Ба Г., Ли М. и Линь Х. (2020). Противоаллергические и противовоспалительные эффекты ресвератрола посредством ингибирования TXNIP-пути окислительного стресса в мышиной модели аллергического ринита. Всемирный орган аллергии. J. 13 (10), 100473. doi:10.1016/j.waojou.2020.100473

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Чжоу Ю. , Цао, Л., и Вэнь, X. (2019). «Влияние лечения пимекролимусом кремом на сывороточные воспалительные факторы и уровни иммунной функции у пациентов с дерматитом и экземой», Национальная академическая конференция по проказе и кожным заболеваниям, 2019 г., (Далянь, Ляонин, Китай: проказа), 7.

Google Scholar

(PDF) Противовоспалительное действие эфирного масла ромашки у мышей

116

ССЫЛКИ

ABE, S. — MARUYAMA, N. — HAYAMA, K. — ISHIBASHI,

H.- INOUE, S. — OSHIMA, H. — YAMAGUCHI, H.

2003. Подавление фактора некроза опухоли-альфа-

, индуцированного реакциями прикрепления нейтрофилов эфирными маслами

. Медиаторы Infamm., 2003, vol. 12, с. 323-328.

AL-HINDAWI, M.K. — AL-DEEN, I.H. — NABI, M.H.

— ISMAIL, MA 1989. Противовоспалительная активность

некоторых иракских растений с использованием интактных крыс. J. Ethnopharmacol.,

1989, vol. 26, с. 163-168.

БУКОВСКАЯ, А.- ЧИКОШ, Ш. — ЮХАС, Ш. — IĽKOVÁ,

G. — REHÁK, P. — KOPPEL, J. 2007. Влияние комбинации

эфирных масел тимьяна и орегано на

TNBS-индуцированный колит у мышей. Медиаторы Infamm.,

2007, ID статьи 23296, 9 страниц.

ЧЕРВЕНКА, Л. — ПЕСКОВА, И. — ФОЛТЫНОВА,

Е. — ПЕЙЧАЛОВА, М. — БРОЗКОВА, И. —

ВЫТРАСОВА, Дж. 2006. Ингибирующее действие некоторых

экстрактов специй и трав против Arcobacter butz ,

А.cryaerophilus и A. skirroi. Курс. микробиол.,

2006, т. 1, с. 53, с. 435-439.

CLARKE, J. O. — MULLIN, G. E., 2008. Обзор

дополнительных и альтернативных подходов к

иммуномодуляции. Нутр.Клин. Практ., 2008, т. 1, с. 23,

с. 49-62.

FERNANDES, ES — PASSOS, GF — MEDEIROS, R. —

DA CUNHA, FM — FERREIRA, J. — CAMPOS, M.

M. — PIANOWSKI LF — CALIXTO JB 2007. Anti-

воспалительные заболевания эффекты соединений альфа-гумулена

и (-)-транс-кариофиллена, выделенных из эфирного масла Cordia verbenacea

. Евро. J. Pharmacol., 2007,

vol. 569, с. 228-36.

GANZERA, M. — SCHNEIDER, P. — STUPPNER,

H. 2006. Ингибирующее действие эфирного масла

ромашки (Matricaria recutita L.) и ее основных компонентов

на ферменты цитохрома P450 человека.

Науки о жизни, 2006, том. 18, с. 856-861.

JAGTAP, A.G. — SHIRKE, S.S. — PHADKE, A.S. 2004.

Влияние составов политрав на экспериментальные

модели воспалительных заболеваний кишечника.J.

Ethnopharmacol., 2004, vol. 90, с. 195-204.

ЮХАС, Ш. — БУЙЧАКОВА, Д. — РЕХАК, П. — ЧИКОШ,

С. — ЧИККОВА, С. — ВЕСЕЛА, Й. — ИЛКОВА, Г.

— КОППЕЛЬ, Й. 2008. Противовоспалительные эффекты

эфирное масло тимьяна у мышей. Акта Вет. Брно, 2008, вып.

77, с. 327-334.

ЮХАС, Ш. — БУКОВСКАЯ, А. — ЧИКОШ, Ш. —

CZIKKOVÁ, S. — FABIAN, D. — KOPPEL, J. 2009.

Противовоспалительные эффекты эфирного масла Rosmarinus officinalis

у мышей. Акта Вет. Брно, 2009, вып. 78,

с. 411-417.

MCKAY, D.L. — BLUMBERG, J.B. 2006. Обзор

биологической активности и потенциальной пользы для здоровья

ромашкового чая (Matricaria recutita L.). Фитотер.

Рез., 2006, том. 20, с. 519-530.

САФАЙХИ, Х. — САБЬЕРАДЖ, Дж. — СЕЙЛЕР, Э. Р. —

АММОН, Х.П. 1994. Хамазулен: антиоксидант типа

, ингибитор образования лейкотриена B4.Планта

Мед., 1994, вып. 60, с. 410-413.

ШИПОЧЛИЕВ Т. — ДИМИТРОВ А. — АЛЕКСАНДРОВА,

Е. 1981. Противовоспалительное действие группы растительных

экстрактов. Вет. Мед. науки, 1981, т. 1, с. 18, с. 87-94.

SRIVASTAVA, J. K. — PANDEY, M. — GUPTA, S. 2009.

Ромашка, новый селективный ингибитор ЦОГ-2

с противовоспалительным действием. Науки о жизни, 2009, т. 1, с.

85, с. 663-669.

ВАН ДРОСС, Р.- XUE, Y. — KNUDSON, A. — PELLING,

J.C. 2003. Химиопрофилактический биофлавоноид

апигенин модулирует пути передачи сигнала в

кератиноцитах и ​​клеточных линиях карциномы толстой кишки. J. Nutr.,

2003, vol. 133, с. 3800С-3804С.

VERBEEK, R. — PLOMP, AC — VAN TOL, EA —

VAN NOORT, JM 2004. Флавоны лютеолин и

апигенин ингибируют in vitro антиген-специфическую пролиферацию

и интерферон-гамма продукцию и

аутоиммунных Т-клеток человека.Биохим. Pharmacol.,

2004, vol. 15, с. 621-629.

WALLACE, J. L. — MACNAGHTON, W. K. — MORRIS,

G. P. — BECK, P. L. 1989. Ингибирование синтеза лейкотриена

заметно ускоряет заживление воспалительного заболевания кишечника у крыс с моделью

. Гастроэнтерология,

1989, вып. 96, с. 29-36.

WESELER, A. — GEISS, HK — SALLER, R. —

REICHLING, J. 2005. Новый колориметрический бульон

метод микроразведения для определения минимальной

ингибирующей концентрации (МПК) антибиотиков и

эфирных масел против хеликобактер пилори.Pharmazie,

2005, vol. 60, с. 498-502.

YAMADA, K. — MIURA, T. — MIMAKI, Y. — SASHIDA,

Y. 1996. Влияние вдыхания паров ромашкового масла

на уровень АКТГ в плазме у овариэктомированных крыс при

рестриктивном стрессе. Биол.Фарм. Бык., 1996, вып. 19, с.

1244-1246.

Оригинальная бумага Slovak J.Аним. Sci., 44, 2011 (3): 111-116

Польза ромашкового чая и другие способы применения ромашки

Когда я была маленькой девочкой и росла в Миннесоте, мама и бабушки давали мне ромашковый чай, когда я болела. Он хорошо рос на Среднем Западе, и его можно было найти в большинстве садов. Я и не подозревал, что растения могут быть чем-то большим, чем помощь при проблемах с желудком.

Польза ромашки

1. Успокаивает проблемы с желудком

Это, наверное, то, чем ромашка наиболее известна.Он помогает успокоить проблемы с желудком и желудочно-кишечным трактом. Это также может помочь при утреннем недомогании во время беременности.

2. Лечит раны

Мазь из ромашки ускоряет заживление ран. (Прокрутите вниз, чтобы увидеть инструкции по приготовлению мази!) Его использовали еще в Древней Греции, Риме и Египте.

3. Уменьшает отек

Ромашка — отличное противовоспалительное средство. Его можно использовать для уменьшения отека на ранах, и его можно даже безопасно использовать в глазах.При розовом глазе (конъюнктивите) заварите слабый чай и дайте ему остыть. Лягте и промокните глаз влажным ватным тампоном, смоченным в чае. Обязательно попадите в сам глаз. Оставьте на несколько минут. Делайте это несколько раз в день.

4. Антиоксидантные свойства

Ромашка не только вкусный чай, но и богата антиоксидантами.

5. Стабилизирует уровень сахара в крови

Ромашка может помочь снизить уровень сахара в крови у людей с диабетом. Он также может быть эффективен для повышения уровня сахара в крови у людей с гипогликемией.

6. Антибактериальные свойства

Ромашка может помочь убить бактериальные инфекции. Его также можно использовать для промывания ран, чтобы убить бактерии в царапинах и порезах.

7. От простуды и гриппа

Ромашка, используемая в качестве пара, в дополнение к чаю, может помочь сократить продолжительность простуды или гриппа.

8. Уменьшает мышечные спазмы

Ромашка содержит аминокислоту глицин, которая помогает снять мышечные спазмы. Это особенно полезно при менструальных спазмах.Он одновременно успокаивает желудок и может помочь облегчить симптомы ПМС.

9. Способствует сну

Чай из ромашки уже давно используется для улучшения сна в течение более длительного периода времени.

10. Снимает геморрой

Ромашка, принимаемая внутрь, может помочь при геморрое. Его также можно использовать в качестве промывания или наносить непосредственно на геморроидальные узлы влажными ватными тампонами.

11. При раке

Доказано, что ромашка не только содержит антиоксиданты, но и убивает некоторые виды рака.Принятый в виде чая, он также может помочь очистить лимфатические узлы. Он успокаивает желудок и помогает при некоторых аспектах химиотерапии.

12. Проблемы с кожей

Поскольку ромашка лучше всего работает в виде чая, а жидкости перерабатываются печенью, ромашка может помочь при некоторых проблемах с кожей. Считается, что некоторые проблемы с кожей, такие как экзема и прыщи, начинаются в печени. Когда печень находится в хорошей форме, эти проблемы кажутся менее серьезными.

13. Мягкое очищающее средство

Ромашку можно использовать для промывания ран и глаз, но ее также можно использовать для младенцев и очень ослабленных людей, таких как пожилые люди.Это очень мягкое очищающее средство, которое можно использовать практически в любой ситуации.

14. Без кофеина

Ромашка не только отличный напиток, но и не содержит кофеина!

15. Кубики льда

Каждое лето я обнаруживаю, что у меня больше ромашки, чем я могу использовать. Я сушу его, чтобы использовать позже, но я также делаю из него чай и делаю из него кубики льда. Они отлично подходят для питья, и они не будут его разбавлять. Я также использую кубики, если я получаю пчелиный укус . Просто поместите кубик на жало и подержите его там несколько минут.Лед, настоянный на чае, успокоит укус, облегчит зуд и вытянет любые яды.

Самодельная ромашковая мазь для ран

Вот рецепт простой мази, которую можно использовать практически для любой раны:

Ингредиенты

Мне нравится использовать настоянное масло ромашки в бальзаме. Это тоже очень просто. Возьмите небольшую баночку и наполните ее наполовину сушеными цветками ромашки. Не используйте свежий, так как это может увеличить вероятность образования плесени. (Найдите органические цветы ромашки здесь.) Покройте легким маслом, таким как миндальное или мое новое любимое масло из виноградных косточек. Закрутите плотно закрывающуюся крышку и оставьте на солнце на неделю или две, каждый день осторожно встряхивая. Когда он будет готов, и вы это узнаете по изменению цвета и запаха, процедите через воронку с кофейным фильтром. Используйте это настоянное масло для приготовления мази.

Инструкции к мази

Создайте импровизированную пароварку, наполнив небольшую кастрюлю водой на несколько дюймов и поместив внутрь кастрюлю стеклянную мерную чашку.Смешайте пчелиный воск, сливочное масло и растительное масло в стеклянном мерном стакане. Нагрейте ингредиенты на среднем огне, пока пчелиный воск полностью не растает. После расплавления возьмите ложку, окуните кончик и вытащите. Подождите несколько минут, пока он затвердеет, а затем проверьте, нравится ли вам консистенция. Если слишком жестко, добавьте еще немного масла. Если он слишком мягкий, добавьте еще немного воска и продолжайте нагревать, пока он не растает. Когда вы добьетесь нужной консистенции, осторожно выньте мерный стакан из кастрюли и дайте смеси немного остыть.Чтобы добавить мази дополнительные терапевтические свойства, при желании добавьте 10-15 капель эфирного масла ромашки. Перелейте смесь в чистый тюбик из-под бальзама для губ или небольшую баночку. (Мне нравится тюбик, потому что его легко носить с собой.) Полностью остудить и закрыть крышкой. Не забудьте хорошо пометить контейнер.

*ПРИМЕЧАНИЕ. У некоторых людей может развиться аллергия на ромашку. Если у вас аллергия на что-либо из семейства маргариток или астр, вам следует избегать этого. Он также содержит кумарин и может действовать как разжижитель крови.Будьте осторожны с ромашкой, если вы уже принимаете препараты для разжижения крови.

По большей части ромашка очень безопасна в использовании, как это было на протяжении веков. Вы уже пробовали?

*******

изображение предоставлено finklez здесь и здесь

Научные статьи, журналы, авторы, подписчики, издатели

 
 
Как крупный международный издатель академических и исследовательских журналов, Science Alert публикует и разрабатывает игры в партнерстве с самыми престижные научные общества и издательства. Наша цель заключается в проведении высококачественных исследований в максимально широком аудитория.
   
 
 
Мы прилагаем все усилия, чтобы поддержать исследователей которые публикуются в наших журналах. Существует огромное количество информации здесь, чтобы помочь вам опубликоваться у нас, а также ценные услуги для авторов, которые уже публиковались у нас.
   
 
  Доступны цены
2022 года. Ты может получить личную / институциональную подписку на перечисленные журналы непосредственно из Science Alert. В качестве альтернативы вы возможно, вы захотите связаться с предпочитаемым агентством по подписке. Пожалуйста, направляйте заказы, платежи и запросы в службу поддержки клиентов в службу поддержки клиентов журнала Science Alert.
   
 
 
Science Alert гордится своим тесные и прозрачные отношения с обществом. Так как некоммерческий издатель, мы стремимся к самому широкому возможное распространение материалов, которые мы публикуем, и на предоставление услуг самого высокого качества нашим издательские партнеры.
   
 
 
Здесь вы найдете ответы на наиболее часто задаваемые вопросы (FAQ), которые мы получили по электронной почте или через веб-форму обратной связи. В соответствии с характером вопросов мы разделили часто задаваемые вопросы на разные категории.
   
 
 
Азиатский индекс научного цитирования (ASCI) обязуется предоставлять авторитетный, надежный и значимая информация путем охвата наиболее важных и влиятельные журналы для удовлетворения потребностей глобального научное сообщество.База данных ASCI также предоставляет ссылку до полнотекстовых статей до более чем 25 000 записей с ссылка на цитируемые источники.
   
 

Таблица 4 | Эффекты Matricaria Recutita (L.

) При лечении устного мукозита


9095 учебные группы 9095
6
[23]

2 токсичность, вызванная лекарством поражения длительное применение вызвало токсичность на слизистой оболочке языкаSaline
Группа 2. Ромашка

6 6 3 [25]
9095 [26] 911 [27]
Группа 1. Без лечения
Группа 2. Ромашка
Группа 2. Ромашка
9995 мазь с 10% экстракта ромашки
Интервенция Продолжительность эксперимента результаты


9095 [21] Albino Mare Rats (Wistar) Изъязвление слизистой оболочки, оставленные истирание со скальпелью и маркером диаметром 8 мм Группа 1.Обработанные с солевым раствором
Группа 2. Обработанные с экстрактом ромашки
Группа 3. Обработанные Triamcinolone
10 дней 10 дней Epithelium Восстановленное отсутствие воспаления
↑ Коллагеновая осаждение
↓ апоптоз и TNF- α


[22] Крысы-самцы альбиносы (Вистар) Ранение глубиной 1 мм в центральной области языка Группа 1. Мазь ромашка
Группа 2.Без лечения
тематическое применение 2 мл экстракт ромашки с концентрацией 10% 10 дней ↑ эпителиализация и коллагеновые волокна
↑ фибробласты
↓ воспаление

(Wistar) Внутрибрюшинное введение 5-фторурацила Группа 1. Управление дистиллированной водой
Группа 2. Экстракт ромашки
Зондовое внутрижелудочное введение спиртового экстракта ромашки 12 дней Экстракт MeOH ромашки 16 дней ↓ Разработка артрита
↓ Гистамин

2 ↓

9095 Животных трихотомировали электробритвой на участке кожи спины примерно 10 см Группа 1. Спиртовой экстракт ромашки
Группа 2. Неочищенный экстракт ромашки
Местное применение на коже крыс Вистар с каррагенан-индуцированным отеком лап 12 дней не обеспечивают противовоспалительные действия на индуцированном отеке




[9] [9] Мужчины Золотые сирийские хомяки Внутрибрюшинное введение 5-флурурацила Группа 1.Без лечения
Группа 2. Ромашка
Группа 3. Кортикостероиды
Группа 3. Кортикостероиды
мазь с 100 г экстракта ромашки 14 дней ↑ Уровни TNF- α на 5-й день
↓ Серьезность
↓ Уровни IL-1 β и TNF- α

[26]
[26]
[26] [26] Женские сирийские Золотые хомяки Внутрибрюшинное введение 5-флурурацила Группа 1. Без лечения
Группа 2.ChamoMile
Группа 3. Кортикостероиды
мазь с 100 г экстракта ромашки 16 дней ↓ Заболеваемость устной мукозитом
↓ Серьезность
↓ сосудистые гиперемии
↓ воспалительная инфильтрация

Albino мужские крысы (Wistar) внутрибрюшинному введение 5-флуругацила 10 дней ↑ репителизализация
↓ коллагеновые волокна
↓ воспалительного процесса
↓ по размеру раны

[28] Крысы-самцы-альбиносы (Вистар) Травматические язвы на языке 9 8 мм5 909.Без наркотиков
Группа 2. Ромашка
Группа 3. Ацетон триамцинолона Актуальные
Тематическая композиция ромашки 14 дней ↑ Заживление
↑ Ремонт эпителия и соединительной ткани Всего в 5 дней
↓ воспалительные клетки

[29] Крысы-самцы-альбиносы (Wistar) Погружение в кипящую воду на 8 секунд, приводящее к ожогу 20% площади тела Группа 1. Без лечения
Группа 2. Нанесение оливкового масла
Группа 3. Ромашка
Группа 3. Ромашка
ромашка цветы папка добавлена ​​в оливковое масло 67 дней ↑ регенерация тканей
↓ воспалительная инфильтрация

6

противовоспалительные эффекты эфирных масел, извлеченных из Chamaecyparis obtusa, на мышиных моделях воспаления и клетках RAW 264.7

Введение

Воспаление, которое является реактивной реакцией организм к экзогенным микробам или вредоносным повреждениям, преимущественно достигается за счет повышенного рекрутирования иммунных клеток к поврежденным или инфицированные ткани (1).Воспаление регулируется каскадом многочисленных молекулярных взаимодействий и биохимические реакции, ответственные за размножение и созревание воспалительной реакции. Различные цитокины и провоспалительные медиаторы, в том числе интерлейкин (IL)-1β, опухолевые фактор некроза-α (TNF-α), IL-6, оксид азота (NO) и простагландины (ПГ) участвуют в воспалительной реакции. IL-1β, исследован на его лихорадочное и воспалительное действие. свойствами, считается типичным провоспалительным цитокином (2).Кроме того, TNF-α является считается центральным цитокином в развитии нескольких аутоиммунные заболевания (3). способность подавлять продукцию IL-1β и TNF-α in vitro и in vivo широко применяется для скрининга противовоспалительных агенты (4). ИЛ-6 является плейотропным цитокин, участвующий в регуляции иммунных реакций, острая фаза реакции воспаления и кроветворения (5). Ингибиторы этих цитокинов широко используются в лечении многочисленных аутоиммунных заболеваний. Циклооксигеназы (ЦОГ) являются ключевыми ферментами, ответственными за воспаление, и превращение арахидоновой кислоты в ПГ и тромбоксан.PG получают из арахидоновой кислоты, превращение которой катализируется ЦОГ-2 (6) и необходим для генерации воспалительной реакции (7). ЦОГ-2 индуцируется несколькими воспалительные стимулы, включая цитокины и факторы роста, тогда как ЦОГ-1 конститутивно экспрессируется в различных тканях (8). Кроме того, индуцируемый азотный оксидсинтаза (iNOS) стабильно вырабатывает большое количество NO, что является важной воспалительной реакцией при активированном макрофаги (9).

Макрофаги имеют решающее значение для инициации, поддержание и разрешение воспалительной реакции, в том числе перепроизводство провоспалительных медиаторов, таких как TNF-α, IL-1β, IL-6, NO и PGE2 (10).Chamaecyparis obtusa – это тип тропических пород деревьев, произрастающих в Японии и на юге регионов Южной Кореи. Эфирное масло, извлеченное из обрезков листья и ветки C. obtusa (EOCO) содержат различные типы монотерпенов, включая α-терпинилацетат, β-фелландрен, β-мирцен, лимонен, борнилацетат, γ-терпинен, β-туджаплицин и α-терпинеол (11,12). Хотя биологическая активность EOCO еще предстоит выяснить, противомикробные, противогрибковые и ранее сообщалось о противовоспалительных эффектах (13,14).Было продемонстрировано, что EOCO снижает производство PGE2 и уровни экспрессии мРНК TNF-α и COX-2 в LPS-стимулированных мононуклеарных клетках периферической крови крыс (15). Кроме того, β-тужаплицин, активный компонент C. obtusa, как сообщается, снижают уровни NO, PGE2, IL-6 и TNF-α и подавляют Экспрессия iNOS, COX2 и ядерного фактора-κB в RAW, стимулированном LPS 264,7 кл. (16). Однако противовоспалительные эффекты C. obtusa еще предстоит изучить. подтверждено на животных моделях воспаления.

В настоящем исследовании противовоспалительные эффекты EOCO были исследованы на каррагинан-индуцированный отек лапы и Мышиные модели индуцированного тиогликолатом перитонита. Уровни IL-1β, IL-6 и TNF-α затем были обнаружены в гомогенатах лап и перитонеальная жидкость. Кроме того, ингибирующие эффекты EOCO были определяют секрецию провоспалительных медиаторов и экспрессия iNOS и ЦОГ-2 в LPS-стимулированных клетках RAW 264.7.

Материалы и методы
Животные

Самцы мышей C57BL/6 (B6) и ICR (масса 20–30 г) были приобретены у Orient Bio, Inc.(Соннам, Корея). Мыши содержались в специфических свободных от патогенов условиях на Католический научно-исследовательский институт медицинских наук католического Университет Кореи (Сеул, Корея) и кормили стандартной мышью. еда и вода. Мышей содержали в клетках из плексигласа при постоянная температура 22±2°С и относительная влажность 55±5%, с 12-часовым циклом темноты-света в течение как минимум 1 недели до экспериментальный сеанс. Все экспериментальные методики были одобрены Комитет по этике исследований на животных Католического университета Корея.

Обработка ЭКОО

EOCO, использованный в настоящем исследовании, был получен из Компания Fosto (Сеул, Корея). EOCO эмульгировали в диметил сульфоксид (ДМСО; 1:1, об./об.; Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) и вводили внутрибрюшинно (в/б) в двух разных концентрации (5 или 10 мг/кг) в дистиллированной воде. ЭКОО был вводят за 1 ч до инъекции одного из химические вещества, вызывающие воспаление: каррагинан (n=7 в группе) или тиогликолят (n=6 на группу). Контрольных мышей лечили с тем же объемом дистиллированной воды, содержащей ДМСО.

Модель отека лапы, вызванного каррагинаном

Исходная толщина задней лапы мышей ICR была определяется с помощью карманного толщиномера (0–5 мм) (17). Каждая группа мышей получала субплантарное введение 50 мкл каррагинана (2% мас./об.; Sigma-Aldrich) в физиологическом растворе в правую заднюю лапу через 1 ч после инъекция с EOCO или транспортным средством. Мыши в контрольной группе (каррагинан-отрицательная группа) вводили эквивалент объем солевого раствора в тот же момент времени, что и каррагинан. назначены другим группам.Толщина лап измерялась до до введения каррагинана и через 1, 2, 3, 4 и 5 ч после инъекции каррагинана. Степень набухания, вызванная каждым момент времени рассчитывали как разницу между начальным толщина задней лапы и толщина в соответствующий час после инъекции каррагинана.

Через 5 часов мышей умерщвляли шейным вывих и кожные ткани были удалены с инъецированные каррагинаном правые задние лапы каждой экспериментальной группы. После промывания ледяным фосфатно-солевым буфером (PBS) ткань гомогенизировали, из нее выделяли белки. 150 мг ткани/мл PBS, содержащего 0.4 М NaCl, 0,05% твин 20, 0,1 мМ фенилметилсульфонилфторид (PMSF), 10 мМ ЭДТА и полный коктейль ингибиторов протеаз (1 таблетка/50 мл; Roche Diagnostics, Индианаполис, Индиана, США) при 4°C (18). После двукратного центрифугирования при 12000×g в течение 15 мин при 4°С, супернатант хранили при -70°С для определения уровня цитокинов.

Тиогликолят-индуцированный перитонит модель

Мышам внутрибрюшинно вводили 5 или 10 мг/кг EOCO за 1 ч до инъекции тиогликолята.Мыши C57BL/6 вводили и.п. инъекции 2 мл стерильного 3% тиогликолят (BD Biosciences, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США) или PBS в качестве контроль (19). Через 4 ч, мышей умерщвляли путем смещения шейных позвонков, а брюшины полость промывали 1,0 мл забуференного солевого раствора Хэнкса без Mg2+ и Ca2+ (Велген, Сеул, Южная Корея). После центрифугирования при 1000×g в течение 5 мин при комнатной температуре температуры, супернатант хранили при -20°C для цитокинового измерение с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) и осажденные перитонеальные клетки собирали для подсчета клеток числа.Чтобы собрать больше перитонеальных клеток, брюшную полость снова промывали 10 мл забуференного солевого раствора Хэнкса. То собранные перитонеальные клетки из каждого образца ресуспендировали в 5 мл забуференного солевого раствора Хэнкса, число клеток определяют вручную на гемоцитометре с использованием трипанового синего (Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc.) (20).

Культура клеток

Клеточная линия мышиных макрофагов RAW 264.7 была получен из Американской коллекции типовых культур (Манассас, Вирджиния, США).Клетки культивировали в среде RPMI-1640 (Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc.) с добавлением 10 % инактивированного нагреванием эмбриона. бычьей сыворотки (Wisent, Inc., Сент-Бруно, Квебек, Канада) и хранят во влажном инкубаторе при 37°C, содержащем 5% СО2.

Измерение образования NO

Количество нитрита в культуральной среде было измеряется как показатель продукции NO. Для количественной оценки НЕТ Клетки RAW 264.7 высевали с плотностью 5×105. клеток/лунку в 6-луночных планшетах и ​​предварительно обрабатывали EOCO (1, 10, 50 или 100 мкг/мл) в течение 1 ч с последующей инкубацией в течение 24 ч с ЛПС (1 мкг/мл; Sigma-Aldrich), как описано ранее (21). Через 24 ч. стимуляции, собирали по 100 мкл каждого супернатанта, смешивали с тем же объемом реактива Грисса (1% сульфаниламида и 0,1% дигидрохлорид нафтилэтилендиамина в 2,5% фосфорной кислоте), и инкубировали 5 мин при комнатной температуре. Количество нитрита определяли путем измерения оптической плотности при длине волны 540 нм с помощью устройства для чтения планшетов ELISA (Synergy™ MX, BioTek Instruments, Inc., Винуски, Вирджиния, США). Концентрация нитрита была рассчитано с использованием стандартных растворов нитрита натрия (NaNO2).

Анализ жизнеспособности клеток

клеток RAW 264,7 (2×104 клеток/лунку) высевали на 96-луночные планшеты с плоским дном и предварительно инкубировали в течение 15–18 ч. Клетки не обрабатывали или обрабатывали различными концентрации EOCO (1, 10, 50 или 100 мкг/мл) и были инкубируют при 37°С во влажной атмосфере, содержащей 5% СО2 в течение 24 часов. Всего 10 мкл МТТ (2,5 мг/мл; Sigma-Aldrich) добавляли в каждую лунку и клетки инкубировали. еще на 4 ч. Затем МТТ удаляли, а клетки лизируют добавлением в каждую лунку 100 мкл ДМСО. оптическую плотность измеряли на длине волны 540 нм с помощью Считыватель микропланшетов Synergy™ MX.

ИФА

Уровни экспрессии IL-1β, TNF-α и IL-6 были определяют в гомогенатах лап, перитонеальной жидкости и надосадочной жидкости лизированных LPS-стимулированных клеток RAW 264.7 с использованием наборов ELISA (R&D Systems, Inc., Миннеаполис, Миннесота, США), согласно протоколы производителя.

Вестерн-блот анализ

Стимулированные клетки RAW 264.7 дважды промывали с PBS и лизировали в лизирующем буфере [(0.5 М NaCl, 20 мМ Трис-HCl, 0,25% Тритон Х-100, 1 мМ этиленгликоль тетрауксусная кислота, 1 мМ ЭДТА, 10 мМ β-глицерофосфат, 10 мМ NaF, 1 мМ бензамидин, 300 мкМ Na3VO4, 2 мкМ ФМСФ, 1 мМ дитиотреитол и одна коктейльная таблетка ингибитора протеазы] на льду в течение 1 ч с последующим центрифугированием при 12 000 g в течение 20 мин при 4°С. Концентрацию белка в лизатах определяли с помощью анализ связывания красителя Брэдфорда (Bio-Rad Laboratories, Inc. , Геркулес, Калифорния, США). Всего 50 мкг белка из супернатанты разделяли 8% раствором додецил натрия электрофореза в сульфатно-полиакриламидном геле и переносили в нитроцеллюлозные мембраны (GE Healthcare Life Sciences, Чалфонт, Великобритания) в течение 130 мин при 100 В.Впоследствии мембраны были заблокированы. с 5% обезжиренным молоком в трис-буферном солевом растворе с твином 20 (TBS-T; 20 мМ Трис, 500 мМ NaCl, KCl, pH 7,5 и 0,05% Tween 20) в течение 2 ч при комнатная температура. Затем мембраны встряхивали для блокирования буфер, содержащий кроличий анти-iNOS-иммуноглобулин (Ig)G (1:1000 разбавление; Santa Cruz Biotechnology, Inc., Даллас, Техас, США; Кот. нет. sc-8310), поликлональный анти-ЦОГ-2 кролика (1:1000; Cayman Chemical Компания, Анн-Арбор, Мичиган, США; Кот. нет. 160106) или мышиный моноклональный анти-β-актин (1:10 000; ABM, Inc., Ричмонд, Британская Колумбия, Канада) антитела ночь в холодном помещении. Мембраны промывали TBS-T при 10 мин интервалами в течение 30 мин, а затем инкубировали с хреном козий антикроличий IgG, конъюгированный с пероксидазой (HRP) (1:1000; Санта Круз Биотехнология, Инк. ; Кот. нет. sc-2004) или HRP-конъюгированный козел антимышиный IgG (1:10 000; Santa Cruz Biotechnology, Inc., № по каталогу sc-2005) в течение 2 ч при комнатной температуре. Иммунореактивные белки были визуализируется с помощью улучшенной системы обнаружения хемилюминесценции (GE Healthcare Life Sciences) на LAS-4000 (Fujifilm, Токио, Япония).Денситометрические значения для каждой полосы были определены с использованием Программное обеспечение ImageJ, версия 1.48 (Национальные институты здравоохранения, Bethesda, MD, USA) и подверглись статистическому анализу.

Статистический анализ

Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Сравнения между группами проводились с U-критерий Манна-Уитни. Все данные были проанализированы с использованием программного обеспечения SAS 9.1. (Институт SAS, Кэри, Северная Каролина, США) и P<0,05 считалось указывают на статистически значимое различие.

Результаты
Влияние EOCO на каррагинан-индуцированный отек лапы

Для определения противовоспалительного действия EOCO, была использована модель мышей с отеком лапы, вызванным каррагинаном. Мыши были обработанные EOCO (внутрибрюшинно, 5 или 10 мг/кг) или растворителем (контроль) 1 ч перед инъекцией каррагинана и индуцированной каррагинаном лапе измеряли толщину. Как показано на рис. 1, толщина лапы резко увеличилась 1 ч после субплантарного введения каррагинана и последовательно увеличивается до 5 ч после инъекции.Введение 5 мг/кг EOCO (внутрибрюшинно) значительно уменьшал отек лапы через 2 и 5 часов после инъекции каррагинана по сравнению с контрольной группой (Р<0,05). Кроме того, лечение 10 мг/кг EOCO значительно ингибирует вызванный каррагинаном отек лапы через 4 и 5 часов после инъекции (P<0,05 и P<0,01 соответственно).

Чтобы исследовать механизм, лежащий в основе ингибирующее действие ЭОКО на развитие каррагинан-индуцированный отек лап, уровни провоспалительных определяли цитокины в ткани лапы.В лапе гомогенатов уровни IL-1β, IL-6 и TNF-α значительно увеличивается при введении каррагинана по сравнению с физиологическим раствором (Р<0,01; рис. 2). введение 10 мг/кг EOCO заметно ингибировало индуцированное каррагинаном повышение уровней IL-1β и IL-6 по сравнению с с контрольной группой (P<0,05 и P<0,01 соответственно). И наоборот, 5 мг/кг EOCO значительно снижали только уровни IL-6. Однако лечение EOCO не влияло на уровни TNF-α. (рис. 2С).

Эффекты EOCO на тиогликолят-индуцированный перитонит

Для изучения противовоспалительного действия EOCO на мышиной модели перитонита мышам предварительно вводили EOCO (я.р.) за 1 ч до инъекции 2 мл 3% тиогликолята (в/б) до вызвать перитонит. Через 4 часа мышей забивали и была собрана перитонеальная жидкость. Всего клеток, завербованных в брюшной полости после инъекции тиогликолята были заметно увеличилось по сравнению с мышами, которым вводили PBS (рис. 3А, P<0,01). Лечение 5 или 10 мг/кг EOCO значительно уменьшили общее количество клеток рекрутируется в брюшную полость, по сравнению с контролем группа (P<0,01 и P<0,0.05 соответственно). В дополнение уровни ИЛ-1β, ИЛ-6 и ФНО-α в жидкости перитонеального лаважа были значительно снижается при обработке EOCO по сравнению с контрольная группа (рис. 3B-D; Р<0,05).

Эффекты EOCO на RAW, стимулированные LPS 264,7 ячейки

Для изучения противовоспалительных эффектов EOCO при тиогликолят-индуцированном перитоните были обусловлены ингибирование функции макрофагов, LPS-стимулированный RAW 264. 7 мышиный клетки макрофагов обрабатывали EOCO.Клетки RAW 264.7 были культивировали с ЛПС (1 мкг/мл) в присутствии или в отсутствие EOCO (1, 10, 50 и 100 мкг/мл). EOCO уменьшила продукция NO, IL-6 и TNF-α стимулированными LPS клетками RAW 264.7 дозозависимым образом, а ингибирование было статистически значимо при дозе 100 мкг/мл (P<0,001, P<0,01 и P<0,05 соответственно; Инжир. 4А-С). Цитотоксичность EOCO на клетках RAW 264.7 была определяют с помощью МТТ-анализа. Клетки, культивированные в присутствии EOCO (1–100 мкг/мл) в течение 24 ч не показал изменений жизнеспособность по сравнению с инкубированными только в питательных средах.Однако жизнеспособность клеток была значительно снижена примерно на 78,8%. после обработки 200 мкг/мл EOCO (рис. 4D).

Чтобы выяснить, ингибирует ли NO продукция была обусловлена ​​снижением экспрессии белков iNOS и ЦОГ-2, влияние EOCO на уровни экспрессии белков iNOS и COX-2 анализировали вестерн-блоттингом. Как показано на рис. 5, уровни экспрессии белка iNOS и ЦОГ-2 в клетках RAW 264. 7 значительно увеличивались при ЛПС. Стимулированные ЛПС уровни экспрессии iNOS и ЦОГ-2 белки значительно ингибировались при обработке 50 и 100 мкг/мл EOCO (рис.5).

Обсуждение

Результаты настоящего исследования продемонстрировали противовоспалительные эффекты EOCO in vivo и in vivo витро. Администрация EOCO значительно подавлена каррагинан-индуцированный отек лапы и продукция IL-1β и IL-6 в лапах. В модели тиогликолят-индуцированного перитонита общее количество клеток, а уровни IL-1β, IL-6 и TNF-α были значительно снижается в перитонеальной жидкости. каррагинан-индуцированный Воспаление лапы является широко используемой моделью для исследования новые противовоспалительные средства (22).Развитие отека лап у мышей предполагается, что после инъекции флогистического агента двухфазный механизм, первые 1–2 часа которого обусловлены выброс гистамина или серотонина и вторая фаза отека образование происходит за счет высвобождения PGs/протеазы и лизосомы, которые пики через 3 часа (22). Локальный релиз провоспалительных цитокинов, в том числе TNF-α, IFN-γ и IL-1β. также вызван инъекцией каррагинана (23). В настоящем исследовании EOCO продемонстрировал значительные ингибирующие эффекты через 2 часа после обработки каррагинаном, который продолжался до 5 ч.Эти результаты свидетельствовали о том, что в основе механизм действия EOCO может включать блокирование синтеза PG. и/или высвобождение провоспалительных цитокинов.

Мышиный перитонит, вызванный тиогликолятом, представляет собой подходящую модель для изучения воспалительных явлений, которые сопровождаются образованием медиаторов воспаления и лейкоцитарной накопление. В этой модели количество нейтрофилов начинает увеличиваться. и достигают пиковых уровней между 4 и 24 часами после лечения, тогда как количество макрофагов начинает увеличиваться через 24 часа и достигает пикового уровня через 3-4 дня (24).Кроме того к рекрутированию лейкоцитов, еще одному первичному ответу на воспаление секреция провоспалительных цитокинов, таких как IL-1β, IL-6 и TNF-α резидентными или рекрутированными макрофагами. Результаты настоящее исследование показало, что введение EOCO может облегчить тиогликолят-индуцированный перитонит, угнетая функцию внутрибрюшинные макрофаги.

Настоящее исследование также обнаружило эффекты EOCO на макрофаги. Обработка EOCO ингибировала продукцию NO, IL-6 и TNF-α в RAW 264, стимулированном LPS.7 кл. В дополнение уровни экспрессии iNOS и ЦОГ-2 подавлялись EOCO лечение.

В заключение, результаты настоящего исследования продемонстрировали, что EOCO может оказывать противовоспалительное действие на животных моделей благодаря своей способности уменьшать производство медиаторов воспаления и цитокинов. Эти данные говорят о том, что EOCO может быть терапевтически полезен для лечения воспалительные заболевания.

Благодарности

Настоящее исследование было проведено при поддержке Лесные научно-технические проекты (проект №.S111114L020100), предоставленный Корейской лесной службой.

Сокращения:

С. obtusa

Chamaecyparis obtusa

ФНО-α

фактор некроза опухоли-α

Ил-1β

интерлейкин-1β

Ил-6

интерлейкин-6

НЕТ

оксид азота

ЦОГ-2

циклооксигеназа-2

iNOS

индуцибельная синтаза оксида азота

ЛПС

липополисахарид

Каталожные номера

1

Помин В.Х.: Сульфатированные гликаны в воспаление.Eur J Med Chem. 92:353–369. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

2

Люгер Т.А., Штадлер Б.М., Люгер Б.М., Мэтисон BJ, Mage M, Schmidt JA и Oppenheim JJ: Мышиный эпидермальный клеточный фактор активации тимоцитов напоминает мышиный интерлейкин 1. J Immunol. 128:2147–2152. 1982. PubMed/NCBI

.

3

Кеффер Дж., Проберт Л., Казларис Х., Георгопулос С., Касларис Э., Киусис Д. и Коллиас Г.: трансгенные мыши, экспрессирующие фактор некроза опухоли человека: прогностический генетический модель артрита.EMBO J. 10: 4025–4031. 1991. PubMed/NCBI

.

4

Dinarello CA: Противовоспалительные средства: Настоящее и будущее. Клетка. 140:935–950. 2010. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

5

Tilg H, Trehu E, Atkins MB, Dinarello CA и Mier JW: интерлейкин-6 (IL-6) в качестве противовоспалительного цитокина: Индукция циркулирующего антагониста рецептора IL-1 и растворимой опухоли Рецептор фактора некроза p55.Кровь. 83:113–118. 1994. PubMed/NCBI

.

6

Вейн Дж. Р., Бахле Ю. С. и Боттинг Р. М.: Циклооксигеназы 1 и 2. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 38:97–120. 1998. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

7

Риччиотти Э. и Фитцджеральд Г.А.: Простагландины и воспаление. Артериосклеры Тромб Васк Биол. 31:986–1000. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

8

Ким Х. С., Ким Т., Ким М.К., Сух Д.Х., Чанг Х.Х. и Song YS: Циклооксигеназа-1 и -2: молекулярные мишени для неоплазия шейки матки.J Рак Пред. 18:123–134. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

9

Pokharel YR, Liu QH, Oh JW, Woo ER и Kang KW: 4-гидроксикобузин ингибирует индукцию оксида азота синтазы путем ингибирования активации NF-kappaB и AP-1. Биол Фарм Бык. 30:1097–1101. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

10

Моссер Д.М. и Эдвардс Дж.П.: Изучение Полный спектр активации макрофагов.Нат Рев Иммунол. 8:958–969. 2008. Посмотреть Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI

11

Bae D, Seol H, Yoon HG, Na JR, Oh K, Choi CY, Lee DW, Jun W, Youl Lee K, Lee J и др.: Вдыхание эфирного масла от Chamaecyparis obtuse улучшает когнитивные нарушения функцию, индуцированную инъекцией β-амилоида у крыс. Фарм Биол. 50:900–910. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

12

Joo SS, Yoo YM, Ko SH, Choi W, Park MJ, Kang HY, Choi KC, Choi IG и Jeung EB: Влияние эфирного масла от Chamaecypris obtusa на развитие атопического дерматитоподобные поражения кожи и подавление цитокинов Th.Дж Дерматол Науки. 60:122–125. 2010. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

13

Hong EJ, Na KJ, Choi IG, Choi KC и Jeung ЭБ: ​​Антибактериальное и противогрибковое действие эфирных масел из хвойные деревья. Биол Фарм Бык. 27:863–866. 2004. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

14

Ли Кью, Кобаяши М, Вакаяма Ю, Инагаки Х, Кацумата М., Хирата Ю., Хирата К., Симидзу Т., Кавада Т., Пак Б.Дж. и др. al: Влияние фитонцидов с деревьев на естественные клетки-киллеры человека. функция.Int J Immunopathol Pharmacol. 22:951–959. 2009.

15

Ан Б.С., Кан Дж. Х., Ян Х., Юнг Э. М., Кан Х. С., Choi IG, Park MJ и Jeung EB: Противовоспалительные эффекты эфирные масла Chamaecyparis obtusa через циклооксигеназу-2 пути у крыс. Mol Med Rep. 8: 255–259. 2013. PubMed/NCBI

.

16

Ши М.Ф., Чен Л.И., Цай П.Дж. и Чернг Д.Ю.: In vitro и in vivo терапия β-тужаплицином при индуцированном ЛПС воспаление в макрофагах и септический шок у мышей.Международный J Иммунопатол Фармакол. 25:39–48. 2012. PubMed/NCBI

.

17

Пол С., Шин Х.С. и Канг С.К.: Ингибирование воспаления и активация макрофагов изолированным гинзенозидом-Re из корейского женьшеня (Panax ginseng C. A. Meyer). Пищевая химическая токсикол. 50:1354–1361. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

18

де Лима Ф.О., Алвес В., Барбоза Филью Х.М., Almeida JR, Rodrigues LC, Soares MB и Villarreal CF: Антиноцицептивный эффект лупеола: доказательства роли цитокинов ингибирование.Фитотер Рез. 27:1557–1563. 2013.

19

Звоните Д.Р., Немзек Дж.А., Эбонг С.Дж., Болгос Г.Л., Newcomb DE и Remick DG: соотношение местных и системных хемокинов концентрация регулирует рекрутирование нейтрофилов. Ам Джей Патол. 158: 715–721. 2001. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

20

Луи К.С. и Сигель А.С.: Жизнеспособность клеток анализ с использованием трипанового синего: ручной и автоматический методы. Методы мол биол. 740:7–12. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

21

Хуан Г.Дж., Хуан С.С. и Дэн Д.С.: Противовоспалительная активность инотилона из Phellinus linteus за счет ингибирования активации MMP-9, NF-kB и MAPK в пробирке и в естественных условиях. ПЛОС Один. 7:e359222012. Просмотр статьи : Академия Google

22

Посадас И., Буччи М., Ровеццо Ф., Росси А., Parente L, Sautebin L и Cirino G: Мышиная лапка, индуцированная каррагинаном отек носит двухфазный характер, зависит от возраста и массы тела и проявляется дифференциальным экспрессия циклооксигеназы-2 оксида азота.Бр Дж. Фармакол. 142: 331–338. 2004. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

23

Ван Дж.П., Чжоу Ю.

От отеков ромашка: Убираем отеки под глазами: 6 простых способов

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.