Как принимать аллохол при лямблиозе: Лечение лямблиоза у взрослых и детей: препараты, диета

ХОЛЕЛЕСАН отзывы

САМОЛЕЧЕНИЕ МОЖЕТ НАВРЕДИТЬ ВАШЕМУ ЗДОРОВЬЮ

Опасные паразиты лямблии. Специфические особенности протекания лямблиоза

Медицина знает до 200 видов паразитов, некоторые из которых могут представлять серьезную опасность для человеческого организма, и это помимо ощутимого дискомфорта. Одним из таковых микроорганизмов является паразит лямблия, наличие которого приводит к развитию лямблиоза. Данное глистное заболевание входит в список самых распространенных патологий. Для того чтобы избежать риска заражения, нужно знать, как передаются паразиты.

Общая информация

Как показывает статистика, заражению лямблиями подвержено до 10 % населения Земли, среди детей этот показатель еще больше — около 40 %. Об этих паразитах впервые люди узнали только в 1859 году. Ученым по имени Лямбль был выявлен и описан кишечный паразит. Также он определил, какие категории людей и животных больше всего подвержены заражению, то есть речь идет о взрослых и детях, которые проживают в антисанитарных условиях.

Этот паразит относится к одноклеточным микроорганизмам, его приблизительные размеры — 9 х 12 мкм. Его тело отличается симметричностью, с одной стороны тело паразита имеет закругленную форму, с другой – заостренную. Передвигаются они посредством жгутиков, причем весьма активно. Другая не менее интересная особенность – это присасывательный диск. За счет него паразиты крепятся к ворсинкам слизистой оболочки ЖКТ, надежно фиксируя свое тело. В то же время они ведут кочевой образ жизни и крепятся лишь на некоторое время.

Жизненный цикл

В организм паразиты лямблии попадают перорально, после чего достигают двенадцатиперстной кишки, где, собственно, и происходит процесс размножения. Постоянным местом их обитания является кишечник, где они забирают себе большую часть питательных веществ, поступающих в человеческий организм из пищи.

При этом их жизненный цикл делится на две стадии:

• Вегетативный период.
• Цисты.

Приведенное выше описание как раз относится к вегетативной стадии их развития. В этом виде они способны выжить в кишечнике в течение 40 дней, не более того. Попав в толстый кишечник из тонкой кишки, они находятся в неблагоприятной для себя среде. Воздействие высокой температуры (например, кипячение) либо дезинфицирующих средств их тоже убивает.

В то же время, попав в неблагоприятные условия обитания, они обращаются в цисты. Это уже другая стадия их жизненного цикла, при которой одноклеточные микроорганизмы принимают форму споры, при этом их жизнедеятельность замедляется. Принимать вид цисты могут неполовозрелые микроорганизмы.

В таком состоянии паразиты лямблии у детей или взрослых могут находиться длительный период времени (до 12 месяцев), не проявляя признаков жизни. Но с наступлением благоприятного момента особи оживают. Хоть постоянной зоной проживания паразитов является кишечник, они могут заселиться и в двенадцатиперстной кишке, желчном пузыре и даже печени. Последний вариант самый опасный из всех.

Способы распространения

Чтобы уберечь свой организм от проникновения опасных паразитов, необходимо знать их основные пути миграции.

Окружающая среда губительна для них, и поэтому они пребывают в ней в форме цист. В организм человека они могут попасть следующими путями:

• Посредством пищи.
• Через зараженную воду.
• Через общие бытовые предметы.
• Контакт с больным человеком.

Также заражение может произойти при употреблении грязных фруктов или овощей. Цисты сохраняются и в сырой нефильтрованной воде, поэтому подхватить паразиты лямблии человек может, купаясь в открытых водоемах, непроизвольно глотнув зараженную воду. Большую опасность представляют искусственные водные сооружения, где вода застаивается.

Лямблии могут попасть в организм в ходе общения человека со своими домашними питомцами. Риску заражения подвергаются и дети, когда играют между собой и один из них уже заражен лямблиозом. В некоторых случаях паразиты передаются от матери ребенку, в связи с чем данный недуг диагностируется даже у новорожденных.

Как развивается заболевание?

Сами паразиты в своей активной фазе не представляют опасности для человеческого организма, инвазию вызывают цисты. В большинстве случаев заражению этими паразитами мы обязаны нашим кошкам и собакам. А поскольку возбудители инфекции попадают лишь через рот, то зачастую происходит это посредством грязных рук после недавнего контакта с животным. Недаром наши мамы и бабушки всегда говорили нам мыть руки перед едой.

Попав в кишечник, цисты начинают закрепляться на его ворсинках. В результате такой деятельности паразитов происходит нарушение всасывания этого органа. В конечном итоге после закрепления и активного размножения лямблий начинаются воспалительные процессы кишечника. При этом изменяется его микрофлора.

Присутствие паразитов лямблии в организме человека приводит к тому, что пациенты испытывают постоянные боли в животе, которые усиливаются при употреблении жирных продуктов. Спустя определенное время после заражения появляются дистрофические, дегенеративные расстройства пищеварительного органа. А при наличии сопутствующих заболеваний патология переходит в хроническую стадию.

Особенности хронического лямблиоза

Хроническая стадия заболевания сопровождается целым комплексом характерных признаков, которые указывают на сбой в функционировании пищеварительной системы. Основным симптомом является нарушение стула. Всасывание пищи ухудшается, вместо диареи появляется запор, что приносит ощутимый дискомфорт.

Какие еще могут проявиться симптомы? Паразиты лямблии способны вызвать у человека:

• потерю аппетита;
• вялость;
• головные боли;
• частую смену настроения;
• ухудшение общего состояния.

Помимо этого, о наличии заболевания может свидетельствовать язык, обложенный налетом, и горечь во рту. В ходе осмотра у специалиста обнаруживается бледность кожи, шелушение на поверхности ладоней и стоп. Также можно наблюдать выпадение волос, повышение температуры тела. Это говорит о том, что инфекция присутствует в организме уже довольно долго.

Острая стадия заболевания

Симптомы и лечение паразитов лямблий во многом зависят от формы протекания заболевания. При остром лямблиозе характерные признаки немного отличаются от хронической стадии недуга:

• Частое расстройство желудка в виде жидкого стула в сопровождении неприятного затхлого запаха, но без кровяных прожилок и слизи.
• Резко повышается температура до 38 °C.
• Боли в области живота, причем они могут быть ноющего характера и практически незаметными. Но иногда случаются сильные схваткообразные боли.
• Тошнота с периодической рвотой.
• В ходе осмотра можно обнаружить резкое снижение массы тела, вплоть до анорексии.
• Появление метеоризма, причиной которого служит изменение микрофлоры кишечника, что приводит к скоплению газов в его полости.
• Высыпания на коже в виде фолликул наподобие краснухи или кори.
• Аллергические проявления в виде пупырчатых везикул в сопровождении зуда, локализованных около ануса либо носа.

Острая форма заболевания без должного внимания, своевременной диагностики, (включая анализы на паразитов лямблии) и надлежащего лечения длится в течение недели, а потом переходит в хроническую стадию.

Поэтому так важно обнаружить патологию именно в течение 7 дней после появления первых характерных признаков острого лямблиоза.

В чем опасность?

Примерно 30 % всего населения Земли являются, не по своей воле конечно, переносчиками лямблий. Причем большая часть людей живет с этими паразитами, даже не подозревая об их существовании, поскольку по большей части эти паразиты стараются себя не выдавать. Если у организма сильный иммунитет, то с патогенными микроорганизмами он сможет справиться самостоятельно.

Однако после заселения лямблий в организме могут проявиться некоторые изменения. Зачастую это энтерит – воспаление тонкого кишечника, удар от которого приходится на двенадцатиперстную кишку. В результате этого заболевания страдает слизистая оболочка кишечника, и она частично утрачивает свою функциональность. Нередко у больного появляется колит или гастрит.

Диагностирование

Как известно, прежде чем назначать необходимый курс лечения от паразитов лямблий, необходимо провести диагностику пациента. Как правило, чтобы удостовериться в присутствии патогенных паразитов, производится забор каловых масс. Из жидкой консистенции можно понять о наличии лямблии вегетативного периода их жизни, а в твердом кале могут обнаружиться цисты.

В то же время данный способ диагностики актуален лишь в период их активной деятельности. А это от 1 до 3 недель после попадания паразитов в организм человека. Обычно за это время уже могут появиться характерные признаки заражения.

Обнаружение паразитов производится несколькими способами:

• Серологический метод.
• Дуоденальное обследование.
• Энтеротест.

При серологическом методе берется кровь на анализ на предмет наличия антител IgG или IgM. Их присутствие указывает на недуг, причем недавний, или острую форму болезни соответственно. В том случае, когда в крови обнаруживаются обе разновидности антител, это свидетельствует о протекании хронического заболевания.

Дуоденальное обследование подразумевает исследование желчи на предмет наличия цист (пассивное состояние простейших паразитов лямблий). Данный вид анализа в отношении детей младше 10 лет не применяется.

Энтеротест – это введение в желудок капсулы с капроновой либо нейлоновой нитью. Желатиновая оболочка рассасывается под воздействием желудочного сока, после чего к ней липнут патогенные микроорганизмы. И после того как капсула выйдет естественным путем, она исследуется с применением микроскопа.

Используя современные средства диагностики, можно с легкостью поставить точный диагноз и определиться, какое лечение необходимо в каждом конкретном случае.

Этапы лечения лямблиоза

Лечение данного заболевания проводится комплексно и включает в себя несколько важных этапов. Перечень необходимых медицинских препаратов подбирает лечащий врач исходя из степени тяжести заболевания. При этом начинать сразу с использования сильнодействующих средств крайне не рекомендуется во избежание серьезных последствий.

На первом этапе лечение от паразитов лямблий сводится к устранению признаков интоксикации кишечника. При этом улучшается процесс пищеварения, и корректируются защитные функции иммунитета. Терапия проводится в течение 14 суток при помощи желчегонных и антигистаминных средств. Важно при этом соблюдать диету. Питание должно быть таким, чтобы создать неблагоприятную микрофлору для паразитов. То есть употреблять каши, овощи, растительное масло. А вот от продуктов с богатым содержанием углеводов следует на период лечения отказаться.

Второй этап – это уже собственно сама противопаразитарная терапия, врач назначает медицинские препараты, которые направлены на уничтожение паразитов. В числе действенных средств числятся «Метронидозол», «Фуразолидон», «Ниморазол», «Альбендазол». Прием сорбентов и антигистаминных препаратов продолжается наравне с перечисленными таблетками от паразитов лямблий. Помимо этого, назначается «Аллохол». Действие этого лекарства направлено на усиление выработки желчи и снижение воздействия от противопаразитарных препаратов в отношении печени.

Третий этап можно считать поддерживающим. В этот период необходимо помочь человеческому организму восстановить свои защитные функции. Здесь также не обходится без помощи диеты, витаминных комплексов, растительных адаптогенов, пробиотиков, пребиотиков, ферментов. Это способствует восстановлению перистальтики кишечника. Продолжительность этого курса составляет около 3 недель.

Средства народной медицины

В народной медицине тоже есть свои средства по борьбе с незваными паразитами. Только использовать их стоит в сочетании с медикаментозным лечением. Желательно еще предварительно получить консультацию у специалиста. Самые действенные рецепты:

• Настойка хрена – она эффективно противостоит паразитам. Свежий корнеплод перекручивается в мясорубке, полученная смесь помещается в банку и заливается кипяченой водой (в охлажденном состоянии). Убрать на хранение в течение 3 дней, после чего процедить и можно принимать настойку по столовой ложке 3 раза в день перед приемом пищи.
• Пижма – способствует быстрому выведению паразитов лямблий. Настойка делается из высушенных цветков из расчета: 1 столовая ложка на 500 мл кипятка. Настаивается средство в термосе 2 часа. Принимать 5 суток по 1/3 стакана перед едой на завтрак, обед и ужин.
• Ржаной хлеб и деготь – такое сочетание тоже обладает лечебным эффектом. На кусочек хлеба нужно накапать немного березового дегтя, а сверху присыпать сахаром для улучшения вкуса. Принимать можно 1 раз в день в течение 5 суток. Только стоит принять к сведению развитие осложнений в отношении пищеварительной системы, может быть отравление. Детям это средство категорически противопоказано.
• Чеснок и молоко – все мы знаем, насколько полезны эти ингредиенты, а в сочетании тем более. 10 суток нужно употреблять теплое молоко, куда следует добавлять по зубчику измельченного чеснока. Принимать средство следует на голодный желудок.

Помимо этого, избавиться от паразитов лямблий можно, принимая капустный рассол и луковую кашицу.

Но это касается лишь взрослых пациентов, у детей они могут вызвать сильное расстройство кишечника.

Без профилактики никак нельзя

Чтобы не пришлось испытать дискомфорт, связанный с наличием в организме этих паразитов, следует придерживаться элементарной гигиены. Всегда мыть овощи и фрукты перед употреблением, а до еды — руки с мылом.

Если в семье кто-либо заболел, ему необходимо выделить индивидуальную посуду, включая предметы туалета. Регулярно проводить стирку и глажку постельного белья и банных принадлежностей. Если присутствуют домашние животные, время от времени давать им противоглистные средства.

Схема лечения лямблиоза — Вопрос инфекционисту

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 74 направлениям: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гериатра, гинеколога, гинеколога-эндокринолога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского онколога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, липидолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, подолога, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 97.44% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Лямблиоз народное лечение

В состав многих лекарственных растений входят вещества, обладающие антипаразитарным действием. К таким растениям относятся полынь, пижма, девясил, чистотел, спорыш, бессмертник, толокнянка. Эффективно в борьбе с лямблиями применение коры дуба и крушины, тыквенных и арбузных семечек. Препараты фитотерапии  характеризуются менее токсическим воздействием на организм человека по сравнению с химическими лекарственными средствами.

Лечение лямблиоза лекарственными растениями проходит в 3 этапа:

 1 этап

Уничтожение паразитов, ликвидация их токсического воздействия, повышение иммунитета. Продолжительность лечения на первом этапе составляет от 15  до 30 дней в зависимости от тяжести заболевания. 

 1 методика лечения

Вечером, перед сном на протяжении 7-10 дней жевать в течение двух минут 4-5 цветка пижмы. Затем проглотить и запить 100г теплой воды.

Утром натощак выпить ½ столовой ложки льняного масла холодного отжима. Количество масла к концу недели увеличивают до 3-4 столовых ложек (если вы нормально переносите льняное масло, то можно сразу начать с 2-3 ложек).

 2 методика лечения

Приготовить сбор: в равных частях взять цветки пижмы, кору дуба, кору крушины, полынь горькую. Вечером 1 чайную ложку сбора заварить 200 мл кипятка. Утром настой процедить, довести объем кипяченой водой до 200 мл. Натощак утром выпить полстакана, а оставшиеся 100 мл — перед сном. Затем лечь в постель и приложить на полчаса грелку на правый бок. Данный способ лечения способствует миграции лямблий из желчного пузыря и печени. Через 30 минут необходимо принять слабительное, запивая клюквенным, брусничным или калиновым настоем (лямблии не любят кислую среду). При опорожнении организм избавляется от паразитов.

Очищение организма

Один раз в неделю следует проводить процедуру очищения кишечника и желчного пузыря:

•          Утром натощак выпить 75-100 мл сернокислой магнезии (25% концентрации) или сорбита  (25- 50% концентрации).
•          В течение 1,5-2 часов после употребления слабительного необходимо выпить 500мл кипячёной воды.
•          После опорожнения кишечника соблюдать диету в течение суток: рисовая каша на воде без добавления масла, запеченные фрукты и овощи, большое количество жидкости.

Для нормализации деятельности желчного пузыря можно использовать лекарственные препараты (аллохол, хологон, синибор) или желчегонный сбор: 2 части травы тысячелистника, 3 части цветков календулы, 2 части берёзовых почек, 1 часть травы чистотела.  Полстоловой ложки сбора заварить 200 мл кипятка, настоять 30 минут, принимать по 50-70 мл 3-4 раза в день до еды.

Очищению организма от вредных веществ способствуют препараты – энтеросорбенты : активированный уголь, полифепан, полисорб.

Эффективным действием для нейтрализации токсинов обладают микроклизмы. Для этого в прямую кишку вводят раствор льняного масла (1 столовая ложка масла+ 100мл кипяченой воды), закрывают анальное отверстие тампоном. Желательно задержать раствор в кишечнике на несколько часов.

Важное значение при ликвидации лямблий имеет диета. Продукты, богатые сахарами, стимулируют размножение паразитов. Поэтому во время прохождения курса лечения рекомендовано употреблять каши (перловую, гречневую, рисовую), отруби, отварные или запеченные овощи, кислые ягоды (калина, брусника, клюква), сухофрукты, растительные масла.

 2 этап –  проведение противолямблиозного лечения

 1 методика

В течение 2 недель принимать 3-4 раза в день по 100 мл отвара противопаразитарного сбора: 1 чайная ложка полыни горькой + 1 чайная ложка цветков пижмы, заваренные 2 стаканами кипятка.

 2 методика

В течение 2 недель принимать по 1 столовой ложке 3 раза в день тыквенное масло.

Сильно выраженными антипаразитарными свойствами обладают семена тыквы.

 3 этап 

Повышение защитных свойств организма, профилактика повторного заражения лямблиями

 1 методика

В течение 3 недель употреблять отвар почек березы.

 2 методика

На протяжении 3 недель применять отвар толокнянки.

!!! Данные лекарственные растения противопоказаны людям с заболеваниями почек.

Антигельминтное действие усиливают препараты прополиса, применяемые в виде настойки  на протяжении 1,5 – 2 месяцев.

После прохождения курса лечения  трижды сдать анализ на лямблиоз, при небходимости  пройти лечение повторно. Не забывайте об обследовании всех членов семьи, так как они могут являться источником повторного заражения.

Перед проведением лечения обязательно посоветуйтесь с лечащим врачом!

Также Вам помогут следующие статьи на данную тему:

Лямблиоз: симптомы, лечение и диагностика

Лечение аллергии травами

Пупавка: применение и рекомендации

Аллергия и паразиты: гигиеническая гипотеза и результаты исследования

Этанол и изопропанол в концентрациях, присутствующих в дезинфицирующих средствах для рук, резко снижают эксцистацию Giardia и Entamoeba и устраняют пероральную инфективность цист Giardia у песчанок

Цисты штамма h4 G. duodenalis (комплекс B), которые продуцируются у песчанок, были приобретены у Waterborne, Inc. (Новый Орлеан, Луизиана). Цисты (1000 цист/200 мкл) инкубировали при периодическом встряхивании в воде, 63% этаноле, 80% этаноле, 63% изопропаноле или 80% изопропаноле в течение 5 мин при комнатной температуре (∼21°C) с высушиванием или без высушивания в роторный испаритель (концентратор Savant SpeedVac SC110A Plus; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) в течение 5 мин.Это время, которое больше, чем время, используемое для мытья рук дезинфицирующим средством для рук на спиртовой основе, позволило нам обработать несколько образцов как группу и, таким образом, избежать изменчивости, которая могла бы возникнуть при последовательной обработке образцов. Составы ВОЗ для дезинфицирующих средств для рук доступны в Интернете (http://www.who.int/gpsc/5may/Guide_to_Local_Production.pdf). Стенки кисты метили в течение 1 ч при комнатной температуре моноклональным антителом против CWP1 (MAb) (Waterborne Inc. , Новый Орлеан, Луизиана), разведенным 1:500 в фосфатно-солевом буфере (PBS) (16).После трехкратной промывки в PBS цисты инкубировали с 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) (0,2 мкг/мл) и/или иодидом пропидия (PI) (0,2 мкг/мл) в течение 5 мин при комнатной температуре. температуры, а затем дважды промывали в PBS. DAPI — витальный краситель, проникающий через мембраны и связывающий ядра, хотя он может быть исключен стенками кисты. PI, который часто входит в наборы LIVE/DEAD, не может проникать через неповрежденные мембраны и поэтому метит только ядра мертвых клеток. Кисты и трофозоиты визуализировали с помощью деконволюционного микроскопа DeltaVision (Applied Precision, Issaquah, WA).Изображения были получены с объективом 100× и подвергнуты деконволюции с использованием программного обеспечения softWoRx компании Applied Precision (16).

Эксцистацию G. duodenalis индуцировали путем инкубации цист в среде для эксцистации, содержащей 1 мг/мл химотрипсина в растворе соли Тирода, в течение 30 мин при 37°C (23). Скорость эксцистирования определяли путем подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазово-контрастного микроскопа Labophot (Nikon Instruments, Inc., Мелвилл, Нью-Йорк) с использованием 20-кратного объектива. В каждом эксперименте для каждого образца подсчитывали аликвоты объемом 100 мкл, содержащие ~100 цист, и каждый эксперимент проводили не менее 3 раз.Скорость эксцистации для каждой обработки спиртом сравнивали со скоростью цист, инкубированных в воде, с использованием непарного теста t (программное обеспечение GraphPad Prism). Точно так же скорость эксцистации для каждой обработки спиртом плюс сушка на роторном испарителе сравнивалась со скоростью цист, инкубированных в воде, а затем высушенных. Статистических сравнений между группами, получавшими разные спирты, не проводилось. Эксцистированные трофозоита Giardia культивировали в среде TYI-S-33 при 37°C для подтверждения их жизнеспособности (33).

Самки песчанок в возрасте от 4 до 6 недель (Charles River Laboratories, Уилмингтон, Массачусетс), ни одна из которых не была инфицирована Giardia , были экспериментально инфицированы через желудочный зонд 1000 цист штамма h4 G. duodenalis на 100 мкл воды (34). Кисты не обрабатывали, инкубировали в 63% или 80% этаноле и сушили или инкубировали в 80% изопропаноле и сушили. Через 7 дней после заражения песчанок подвергали эвтаназии путем удушения CO ₂ , а двенадцатиперстную кишку удаляли, измельчали ​​и инкубировали в 1 мл среды TYI-S-33 в течение 60 мин для высвобождения трофозоитов Giardia , которые подсчитывали с помощью фазовая микроскопия и гемоцитометрия.С помощью гемоцитометра подсчитывали по три аликвоты от каждого животного. В каждой экспериментальной группе было по четыре животных, опыты проводили по два раза. Средние значения и стандартные отклонения для 8 животных в каждой группе представлены на рис. Статистический тест не использовался, так как мы не смогли идентифицировать какие-либо Giardia в просвете двенадцатиперстной кишки у песчанок, инфицированных кистами, обработанными этанолом или изопропанолом.

Этанол и изопропанол разрушают стенки кисты G. duodenalis , проницаемость мембран трофозоитов внутри кист, резкое снижение эксцистации in vitro и блокирование оральной инфекции песчанок. (A) Протоколы тестирования воздействия этанола на цисты G. duodenalis . (B и C) Витальная окраска DAPI (синяя), но не PI (окраска DEAD) (красная), маркирует ядра одних цист (B), но не других (C) в воде. Обратите внимание, что сушка после инкубации в воде не влияет на жизнеспособность. Стенки кисты были помечены зеленым моноклональным антителом против CWP1.(D-G) После обработки 63% этанолом (D), 80% этанолом (E), 63% изопропанолом (F) или 80% изопропанолом плюс сушка (G), ядра цист G. duodenalis были помечены PI и стены, казалось, рухнули. (H и I) Лечение алкоголем уменьшало эксцистацию (H) и блокировало пероральное заражение песчанок цистами G. duodenalis (I). (H) График эксцистации, показывающий средние значения и стандартные ошибки по крайней мере из 3 экспериментов с сотнями цист, подсчитанными за эксперимент. В каждом случае значения P были <0.001, когда сравнивались скорости эксцистирования для обработки этанолом (Eth) по сравнению с водой или для обработки этанолом плюс сушка по сравнению с водой плюс сушка. Изо, изопропанол. (I) Инфекции песчанок, показывающие средние значения и стандартные ошибки для восьми песчанок на обработку (выполнено в двух отдельных экспериментах). Поскольку нам не удалось выделить Giardia от песчанок, инфицированных цистами, обработанными спиртом, статистический анализ не проводился.

Манипуляции с цистами G. duodenalis были одобрены Институциональным комитетом по биобезопасности Бостонского университета.Заражение песчанок цистами G. duodenalis было одобрено Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Бостонского университета.

Штамм IP-2 E. Inventions культивировали в среде TYI-SS при комнатной температуре и инцистировали трофозоиты (10 ⁵ /мл) путем переноса в среду с пониженным содержанием глюкозы, осмолярности и сыворотки. в течение 72 ч (20, 33, 35). После инцистации цисты суспендировали в стерильной воде и оставляли при 4°С на 6 ч для лизиса трофозоитов.Кисты E. investens обрабатывали спиртами, а затем проводили мечение кист DAPI и PI, как описано для Giardia , за исключением того, что стенки кисты метили 10 мкг/мл WGA, который связывается с хитиновыми фибриллами (21). Скорость эксцистирования E. investens определяли путем инкубации 10 ⁴ цист в 10 мл среды для эксцистирования, содержащей 40 мМ бикарбоната натрия и 1,25 мМ тауродезоксихолата, в течение 24 ч при комнатной температуре и подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазового микроскопа (24). .В качестве альтернативы, ∼10 ⁷ цист E.Вторжения в 1 мл воды наносили с помощью пипетки на указательный и указательный пальцы одной руки и вымывали руки досуха (∼2 мин) 1–2 мл коммерческое дезинфицирующее средство для рук (Purell; Gojo Industries, Акрон, Огайо). Purell содержит 70% этанола. Остаточные кисты элюировали 300 мл воды; концентрируют до 1 мл центрифугированием; и помечены PI, DAPI и WGA, как описано выше. Количество живых кист (с окрашиванием DAPI, но без окрашивания PI) и мертвых кист (с окрашенными PI ядрами или разорванными стенками), извлеченных из рук, сравнивали с количеством необработанных E.инвазирует кисты. Руки были тщательно вымыты водой с мылом, а все моющие растворы обеззаражены бактерицидным моющим средством Wescodyne (Steris, Mentor, OH).

Этанол и изопропанол в концентрациях, присутствующих в дезинфицирующих средствах для рук, резко снижают эксцистацию Giardia и Entamoeba и устраняют пероральную инфективность цист Giardia у песчанок

Цисты штамма h4 G. duodenalis (сборка B), которые продуцируются у песчанок, были приобретены у Waterborne, Inc.(Новый Орлеан, Луизиана). Цисты (1000 цист/200 мкл) инкубировали при периодическом встряхивании в воде, 63% этаноле, 80% этаноле, 63% изопропаноле или 80% изопропаноле в течение 5 мин при комнатной температуре (∼21°C) с высушиванием или без высушивания в роторный испаритель (концентратор Savant SpeedVac SC110A Plus; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) в течение 5 мин. Это время, которое больше, чем время, используемое для мытья рук дезинфицирующим средством для рук на спиртовой основе, позволило нам обработать несколько образцов как группу и, таким образом, избежать изменчивости, которая могла бы возникнуть при последовательной обработке образцов.Составы ВОЗ для дезинфицирующих средств для рук доступны в Интернете (http://www.who.int/gpsc/5may/Guide_to_Local_Production.pdf). Стенки кисты метили в течение 1 ч при комнатной температуре моноклональным антителом против CWP1 (MAb) (Waterborne Inc., Новый Орлеан, Луизиана), разведенным 1:500 в фосфатно-солевом буфере (PBS) (16). После трехкратной промывки в PBS цисты инкубировали с 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) (0,2 мкг/мл) и/или иодидом пропидия (PI) (0,2 мкг/мл) в течение 5 мин при комнатной температуре. температуры, а затем дважды промывали в PBS.DAPI — витальный краситель, проникающий через мембраны и связывающий ядра, хотя он может быть исключен стенками кисты. PI, который часто входит в наборы LIVE/DEAD, не может проникать через неповрежденные мембраны и поэтому метит только ядра мертвых клеток. Кисты и трофозоиты визуализировали с помощью деконволюционного микроскопа DeltaVision (Applied Precision, Issaquah, WA). Изображения были получены с объективом 100× и подвергнуты деконволюции с использованием программного обеспечения softWoRx компании Applied Precision (16).

Эксцистацию G. duodenalis индуцировали путем инкубации цист в среде для эксцистации, содержащей 1 мг/мл химотрипсина в растворе соли Тирода, в течение 30 мин при 37°C (23).Скорость эксцистирования определяли путем подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазово-контрастного микроскопа Labophot (Nikon Instruments, Inc., Мелвилл, Нью-Йорк) с использованием 20-кратного объектива. В каждом эксперименте для каждого образца подсчитывали аликвоты объемом 100 мкл, содержащие ~100 цист, и каждый эксперимент проводили не менее 3 раз. Скорость эксцистации для каждой обработки спиртом сравнивали со скоростью цист, инкубированных в воде, с использованием непарного теста t (программное обеспечение GraphPad Prism). Точно так же скорость эксцистации для каждой обработки спиртом плюс сушка на роторном испарителе сравнивалась со скоростью цист, инкубированных в воде, а затем высушенных.Статистических сравнений между группами, получавшими разные спирты, не проводилось. Эксцистированные трофозоита Giardia культивировали в среде TYI-S-33 при 37°C для подтверждения их жизнеспособности (33).

Самки песчанок в возрасте от 4 до 6 недель (Charles River Laboratories, Уилмингтон, Массачусетс), ни одна из которых не была инфицирована Giardia , были экспериментально инфицированы через желудочный зонд 1000 цист штамма h4 G. duodenalis на 100 мкл воды (34). Кисты не обрабатывали, инкубировали в 63% или 80% этаноле и сушили или инкубировали в 80% изопропаноле и сушили.Через 7 дней после заражения песчанок подвергали эвтаназии путем удушения CO ₂ , а двенадцатиперстную кишку удаляли, измельчали ​​и инкубировали в 1 мл среды TYI-S-33 в течение 60 мин для высвобождения трофозоитов Giardia , которые подсчитывали с помощью фазовая микроскопия и гемоцитометрия. С помощью гемоцитометра подсчитывали по три аликвоты от каждого животного. В каждой экспериментальной группе было по четыре животных, опыты проводили по два раза. Средние значения и стандартные отклонения для 8 животных в каждой группе представлены на рис.Статистический тест не использовался, так как мы не смогли идентифицировать какие-либо Giardia в просвете двенадцатиперстной кишки у песчанок, инфицированных кистами, обработанными этанолом или изопропанолом.

Этанол и изопропанол разрушают стенки кисты G. duodenalis , проницаемы для мембран трофозоитов внутри кист, резко снижают эксцистацию in vitro и блокируют пероральное инфицирование песчанок. (A) Протоколы тестирования воздействия этанола на цисты G. duodenalis .(B и C) Витальная окраска DAPI (синяя), но не PI (окраска DEAD) (красная), маркирует ядра одних цист (B), но не других (C) в воде. Обратите внимание, что сушка после инкубации в воде не влияет на жизнеспособность. Стенки кисты были помечены зеленым моноклональным антителом против CWP1. (D-G) После обработки 63% этанолом (D), 80% этанолом (E), 63% изопропанолом (F) или 80% изопропанолом плюс сушка (G), ядра цист G. duodenalis были помечены PI и стены, казалось, рухнули. (H и I) Лечение алкоголем уменьшало эксцистацию (H) и блокировало пероральное заражение песчанок G.duodenalis кисты (I). (H) График эксцистации, показывающий средние значения и стандартные ошибки по крайней мере из 3 экспериментов с сотнями цист, подсчитанными за эксперимент. В каждом случае значения P были <0,001 при сравнении скорости эксцистирования при обработке этанолом (Eth) по сравнению с водой или при обработке этанолом плюс сушка по сравнению с водой плюс сушка. Изо, изопропанол. (I) Инфекции песчанок, показывающие средние значения и стандартные ошибки для восьми песчанок на обработку (выполнено в двух отдельных экспериментах).Поскольку нам не удалось выделить Giardia от песчанок, инфицированных цистами, обработанными спиртом, статистический анализ не проводился.

Манипуляции с цистами G. duodenalis были одобрены Институциональным комитетом по биобезопасности Бостонского университета. Заражение песчанок цистами G. duodenalis было одобрено Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Бостонского университета.

Штамм IP-2 E.Inventions культивировали в среде TYI-SS при комнатной температуре, а трофозоиты (10 ⁵ /мл) индуцировали инцистировать путем переноса в среду с пониженной глюкозой, осмолярностью и сывороткой в ​​течение 72 ч (20, 33, 35). После инцистации цисты суспендировали в стерильной воде и оставляли при 4°С на 6 ч для лизиса трофозоитов. Кисты E. investens обрабатывали спиртами, а затем проводили мечение кист DAPI и PI, как описано для Giardia , за исключением того, что стенки кисты метили 10 мкг/мл WGA, который связывается с хитиновыми фибриллами (21).Скорость эксцистирования E. investens определяли путем инкубации 10 ⁴ цист в 10 мл среды для эксцистирования, содержащей 40 мМ бикарбоната натрия и 1,25 мМ тауродезоксихолата, в течение 24 ч при комнатной температуре и подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазового микроскопа (24). . В качестве альтернативы, ∼10 ⁷ цист E.Вторжения в 1 мл воды наносили с помощью пипетки на указательный и указательный пальцы одной руки и вымывали руки досуха (∼2 мин) 1–2 мл коммерческое дезинфицирующее средство для рук (Purell; Gojo Industries, Акрон, Огайо).Purell содержит 70% этанола. Остаточные кисты элюировали 300 мл воды; концентрируют до 1 мл центрифугированием; и помечены PI, DAPI и WGA, как описано выше. Количество живых кист (с окрашиванием DAPI, но без окрашивания PI) и мертвых кист (с окрашенными PI ядрами или разорванными стенками), извлеченных из рук, сравнивали с числом необработанных кист E. Inventions . Руки были тщательно вымыты водой с мылом, а все моющие растворы обеззаражены бактерицидным моющим средством Wescodyne (Steris, Mentor, OH).

Этанол и изопропанол в концентрациях, присутствующих в дезинфицирующих средствах для рук, резко снижают эксцистацию Giardia и Entamoeba и устраняют пероральную инфективность цист Giardia у песчанок

Цисты штамма h4 G. duodenalis (комплекс B), которые продуцируются у песчанок, были приобретены у Waterborne, Inc. (Новый Орлеан, Луизиана). Цисты (1000 цист/200 мкл) инкубировали при периодическом встряхивании в воде, 63% этаноле, 80% этаноле, 63% изопропаноле или 80% изопропаноле в течение 5 мин при комнатной температуре (∼21°C) с высушиванием или без высушивания в роторный испаритель (концентратор Savant SpeedVac SC110A Plus; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) в течение 5 мин.Это время, которое больше, чем время, используемое для мытья рук дезинфицирующим средством для рук на спиртовой основе, позволило нам обработать несколько образцов как группу и, таким образом, избежать изменчивости, которая могла бы возникнуть при последовательной обработке образцов. Составы ВОЗ для дезинфицирующих средств для рук доступны в Интернете (http://www.who.int/gpsc/5may/Guide_to_Local_Production.pdf). Стенки кисты метили в течение 1 ч при комнатной температуре моноклональным антителом против CWP1 (MAb) (Waterborne Inc. , Новый Орлеан, Луизиана), разведенным 1:500 в фосфатно-солевом буфере (PBS) (16).После трехкратной промывки в PBS цисты инкубировали с 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) (0,2 мкг/мл) и/или иодидом пропидия (PI) (0,2 мкг/мл) в течение 5 мин при комнатной температуре. температуры, а затем дважды промывали в PBS. DAPI — витальный краситель, проникающий через мембраны и связывающий ядра, хотя он может быть исключен стенками кисты. PI, который часто входит в наборы LIVE/DEAD, не может проникать через неповрежденные мембраны и поэтому метит только ядра мертвых клеток. Кисты и трофозоиты визуализировали с помощью деконволюционного микроскопа DeltaVision (Applied Precision, Issaquah, WA).Изображения были получены с объективом 100× и подвергнуты деконволюции с использованием программного обеспечения softWoRx компании Applied Precision (16).

Эксцистацию G. duodenalis индуцировали путем инкубации цист в среде для эксцистации, содержащей 1 мг/мл химотрипсина в растворе соли Тирода, в течение 30 мин при 37°C (23). Скорость эксцистирования определяли путем подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазово-контрастного микроскопа Labophot (Nikon Instruments, Inc., Мелвилл, Нью-Йорк) с использованием 20-кратного объектива. В каждом эксперименте для каждого образца подсчитывали аликвоты объемом 100 мкл, содержащие ~100 цист, и каждый эксперимент проводили не менее 3 раз.Скорость эксцистации для каждой обработки спиртом сравнивали со скоростью цист, инкубированных в воде, с использованием непарного теста t (программное обеспечение GraphPad Prism). Точно так же скорость эксцистации для каждой обработки спиртом плюс сушка на роторном испарителе сравнивалась со скоростью цист, инкубированных в воде, а затем высушенных. Статистических сравнений между группами, получавшими разные спирты, не проводилось. Эксцистированные трофозоита Giardia культивировали в среде TYI-S-33 при 37°C для подтверждения их жизнеспособности (33).

Самки песчанок в возрасте от 4 до 6 недель (Charles River Laboratories, Уилмингтон, Массачусетс), ни одна из которых не была инфицирована Giardia , были экспериментально инфицированы через желудочный зонд 1000 цист штамма h4 G. duodenalis на 100 мкл воды (34). Кисты не обрабатывали, инкубировали в 63% или 80% этаноле и сушили или инкубировали в 80% изопропаноле и сушили. Через 7 дней после заражения песчанок подвергали эвтаназии путем удушения CO ₂ , а двенадцатиперстную кишку удаляли, измельчали ​​и инкубировали в 1 мл среды TYI-S-33 в течение 60 мин для высвобождения трофозоитов Giardia , которые подсчитывали с помощью фазовая микроскопия и гемоцитометрия.С помощью гемоцитометра подсчитывали по три аликвоты от каждого животного. В каждой экспериментальной группе было по четыре животных, опыты проводили по два раза. Средние значения и стандартные отклонения для 8 животных в каждой группе представлены на рис. Статистический тест не использовался, так как мы не смогли идентифицировать какие-либо Giardia в просвете двенадцатиперстной кишки у песчанок, инфицированных кистами, обработанными этанолом или изопропанолом.

Этанол и изопропанол разрушают стенки кисты G. duodenalis , проницаемость мембран трофозоитов внутри кист, резкое снижение эксцистации in vitro и блокирование оральной инфекции песчанок. (A) Протоколы тестирования воздействия этанола на цисты G. duodenalis . (B и C) Витальная окраска DAPI (синяя), но не PI (окраска DEAD) (красная), маркирует ядра одних цист (B), но не других (C) в воде. Обратите внимание, что сушка после инкубации в воде не влияет на жизнеспособность. Стенки кисты были помечены зеленым моноклональным антителом против CWP1.(D-G) После обработки 63% этанолом (D), 80% этанолом (E), 63% изопропанолом (F) или 80% изопропанолом плюс сушка (G), ядра цист G. duodenalis были помечены PI и стены, казалось, рухнули. (H и I) Лечение алкоголем уменьшало эксцистацию (H) и блокировало пероральное заражение песчанок цистами G. duodenalis (I). (H) График эксцистации, показывающий средние значения и стандартные ошибки по крайней мере из 3 экспериментов с сотнями цист, подсчитанными за эксперимент. В каждом случае значения P были <0.001, когда сравнивались скорости эксцистирования для обработки этанолом (Eth) по сравнению с водой или для обработки этанолом плюс сушка по сравнению с водой плюс сушка. Изо, изопропанол. (I) Инфекции песчанок, показывающие средние значения и стандартные ошибки для восьми песчанок на обработку (выполнено в двух отдельных экспериментах). Поскольку нам не удалось выделить Giardia от песчанок, инфицированных цистами, обработанными спиртом, статистический анализ не проводился.

Манипуляции с цистами G. duodenalis были одобрены Институциональным комитетом по биобезопасности Бостонского университета.Заражение песчанок цистами G. duodenalis было одобрено Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Бостонского университета.

Штамм IP-2 E. Inventions культивировали в среде TYI-SS при комнатной температуре и инцистировали трофозоиты (10 ⁵ /мл) путем переноса в среду с пониженным содержанием глюкозы, осмолярности и сыворотки. в течение 72 ч (20, 33, 35). После инцистации цисты суспендировали в стерильной воде и оставляли при 4°С на 6 ч для лизиса трофозоитов.Кисты E. investens обрабатывали спиртами, а затем проводили мечение кист DAPI и PI, как описано для Giardia , за исключением того, что стенки кисты метили 10 мкг/мл WGA, который связывается с хитиновыми фибриллами (21). Скорость эксцистирования E. investens определяли путем инкубации 10 ⁴ цист в 10 мл среды для эксцистирования, содержащей 40 мМ бикарбоната натрия и 1,25 мМ тауродезоксихолата, в течение 24 ч при комнатной температуре и подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазового микроскопа (24). .В качестве альтернативы, ∼10 ⁷ цист E.Вторжения в 1 мл воды наносили с помощью пипетки на указательный и указательный пальцы одной руки и вымывали руки досуха (∼2 мин) 1–2 мл коммерческое дезинфицирующее средство для рук (Purell; Gojo Industries, Акрон, Огайо). Purell содержит 70% этанола. Остаточные кисты элюировали 300 мл воды; концентрируют до 1 мл центрифугированием; и помечены PI, DAPI и WGA, как описано выше. Количество живых кист (с окрашиванием DAPI, но без окрашивания PI) и мертвых кист (с окрашенными PI ядрами или разорванными стенками), извлеченных из рук, сравнивали с количеством необработанных E.инвазирует кисты. Руки были тщательно вымыты водой с мылом, а все моющие растворы обеззаражены бактерицидным моющим средством Wescodyne (Steris, Mentor, OH).

Этанол и изопропанол в концентрациях, присутствующих в дезинфицирующих средствах для рук, резко снижают эксцистацию Giardia и Entamoeba и устраняют пероральную инфективность цист Giardia у песчанок

Цисты штамма h4 G. duodenalis (сборка B), которые продуцируются у песчанок, были приобретены у Waterborne, Inc.(Новый Орлеан, Луизиана). Цисты (1000 цист/200 мкл) инкубировали при периодическом встряхивании в воде, 63% этаноле, 80% этаноле, 63% изопропаноле или 80% изопропаноле в течение 5 мин при комнатной температуре (∼21°C) с высушиванием или без высушивания в роторный испаритель (концентратор Savant SpeedVac SC110A Plus; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) в течение 5 мин. Это время, которое больше, чем время, используемое для мытья рук дезинфицирующим средством для рук на спиртовой основе, позволило нам обработать несколько образцов как группу и, таким образом, избежать изменчивости, которая могла бы возникнуть при последовательной обработке образцов.Составы ВОЗ для дезинфицирующих средств для рук доступны в Интернете (http://www.who.int/gpsc/5may/Guide_to_Local_Production.pdf). Стенки кисты метили в течение 1 ч при комнатной температуре моноклональным антителом против CWP1 (MAb) (Waterborne Inc., Новый Орлеан, Луизиана), разведенным 1:500 в фосфатно-солевом буфере (PBS) (16). После трехкратной промывки в PBS цисты инкубировали с 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) (0,2 мкг/мл) и/или иодидом пропидия (PI) (0,2 мкг/мл) в течение 5 мин при комнатной температуре. температуры, а затем дважды промывали в PBS.DAPI — витальный краситель, проникающий через мембраны и связывающий ядра, хотя он может быть исключен стенками кисты. PI, который часто входит в наборы LIVE/DEAD, не может проникать через неповрежденные мембраны и поэтому метит только ядра мертвых клеток. Кисты и трофозоиты визуализировали с помощью деконволюционного микроскопа DeltaVision (Applied Precision, Issaquah, WA). Изображения были получены с объективом 100× и подвергнуты деконволюции с использованием программного обеспечения softWoRx компании Applied Precision (16).

Эксцистацию G. duodenalis индуцировали путем инкубации цист в среде для эксцистации, содержащей 1 мг/мл химотрипсина в растворе соли Тирода, в течение 30 мин при 37°C (23).Скорость эксцистирования определяли путем подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазово-контрастного микроскопа Labophot (Nikon Instruments, Inc., Мелвилл, Нью-Йорк) с использованием 20-кратного объектива. В каждом эксперименте для каждого образца подсчитывали аликвоты объемом 100 мкл, содержащие ~100 цист, и каждый эксперимент проводили не менее 3 раз. Скорость эксцистации для каждой обработки спиртом сравнивали со скоростью цист, инкубированных в воде, с использованием непарного теста t (программное обеспечение GraphPad Prism). Точно так же скорость эксцистации для каждой обработки спиртом плюс сушка на роторном испарителе сравнивалась со скоростью цист, инкубированных в воде, а затем высушенных.Статистических сравнений между группами, получавшими разные спирты, не проводилось. Эксцистированные трофозоита Giardia культивировали в среде TYI-S-33 при 37°C для подтверждения их жизнеспособности (33).

Самки песчанок в возрасте от 4 до 6 недель (Charles River Laboratories, Уилмингтон, Массачусетс), ни одна из которых не была инфицирована Giardia , были экспериментально инфицированы через желудочный зонд 1000 цист штамма h4 G. duodenalis на 100 мкл воды (34). Кисты не обрабатывали, инкубировали в 63% или 80% этаноле и сушили или инкубировали в 80% изопропаноле и сушили.Через 7 дней после заражения песчанок подвергали эвтаназии путем удушения CO ₂ , а двенадцатиперстную кишку удаляли, измельчали ​​и инкубировали в 1 мл среды TYI-S-33 в течение 60 мин для высвобождения трофозоитов Giardia , которые подсчитывали с помощью фазовая микроскопия и гемоцитометрия. С помощью гемоцитометра подсчитывали по три аликвоты от каждого животного. В каждой экспериментальной группе было по четыре животных, опыты проводили по два раза. Средние значения и стандартные отклонения для 8 животных в каждой группе представлены на рис.Статистический тест не использовался, так как мы не смогли идентифицировать какие-либо Giardia в просвете двенадцатиперстной кишки у песчанок, инфицированных кистами, обработанными этанолом или изопропанолом.

Этанол и изопропанол разрушают стенки кисты G. duodenalis , проницаемы для мембран трофозоитов внутри кист, резко снижают эксцистацию in vitro и блокируют пероральное инфицирование песчанок. (A) Протоколы тестирования воздействия этанола на цисты G. duodenalis .(B и C) Витальная окраска DAPI (синяя), но не PI (окраска DEAD) (красная), маркирует ядра одних цист (B), но не других (C) в воде. Обратите внимание, что сушка после инкубации в воде не влияет на жизнеспособность. Стенки кисты были помечены зеленым моноклональным антителом против CWP1. (D-G) После обработки 63% этанолом (D), 80% этанолом (E), 63% изопропанолом (F) или 80% изопропанолом плюс сушка (G), ядра цист G. duodenalis были помечены PI и стены, казалось, рухнули. (H и I) Лечение алкоголем уменьшало эксцистацию (H) и блокировало пероральное заражение песчанок G.duodenalis кисты (I). (H) График эксцистации, показывающий средние значения и стандартные ошибки по крайней мере из 3 экспериментов с сотнями цист, подсчитанными за эксперимент. В каждом случае значения P были <0,001 при сравнении скорости эксцистирования при обработке этанолом (Eth) по сравнению с водой или при обработке этанолом плюс сушка по сравнению с водой плюс сушка. Изо, изопропанол. (I) Инфекции песчанок, показывающие средние значения и стандартные ошибки для восьми песчанок на обработку (выполнено в двух отдельных экспериментах).Поскольку нам не удалось выделить Giardia от песчанок, инфицированных цистами, обработанными спиртом, статистический анализ не проводился.

Манипуляции с цистами G. duodenalis были одобрены Институциональным комитетом по биобезопасности Бостонского университета. Заражение песчанок цистами G. duodenalis было одобрено Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Бостонского университета.

Штамм IP-2 E.Inventions культивировали в среде TYI-SS при комнатной температуре, а трофозоиты (10 ⁵ /мл) индуцировали инцистировать путем переноса в среду с пониженной глюкозой, осмолярностью и сывороткой в ​​течение 72 ч (20, 33, 35). После инцистации цисты суспендировали в стерильной воде и оставляли при 4°С на 6 ч для лизиса трофозоитов. Кисты E. investens обрабатывали спиртами, а затем проводили мечение кист DAPI и PI, как описано для Giardia , за исключением того, что стенки кисты метили 10 мкг/мл WGA, который связывается с хитиновыми фибриллами (21).Скорость эксцистирования E. investens определяли путем инкубации 10 ⁴ цист в 10 мл среды для эксцистирования, содержащей 40 мМ бикарбоната натрия и 1,25 мМ тауродезоксихолата, в течение 24 ч при комнатной температуре и подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазового микроскопа (24). . В качестве альтернативы, ∼10 ⁷ цист E.Вторжения в 1 мл воды наносили с помощью пипетки на указательный и указательный пальцы одной руки и вымывали руки досуха (∼2 мин) 1–2 мл коммерческое дезинфицирующее средство для рук (Purell; Gojo Industries, Акрон, Огайо).Purell содержит 70% этанола. Остаточные кисты элюировали 300 мл воды; концентрируют до 1 мл центрифугированием; и помечены PI, DAPI и WGA, как описано выше. Количество живых кист (с окрашиванием DAPI, но без окрашивания PI) и мертвых кист (с окрашенными PI ядрами или разорванными стенками), извлеченных из рук, сравнивали с числом необработанных кист E. Inventions . Руки были тщательно вымыты водой с мылом, а все моющие растворы обеззаражены бактерицидным моющим средством Wescodyne (Steris, Mentor, OH).

Этанол и изопропанол в концентрациях, присутствующих в дезинфицирующих средствах для рук, резко снижают эксцистацию Giardia и Entamoeba и устраняют пероральную инфективность цист Giardia у песчанок

Цисты штамма h4 G. duodenalis (комплекс B), которые продуцируются у песчанок, были приобретены у Waterborne, Inc. (Новый Орлеан, Луизиана). Цисты (1000 цист/200 мкл) инкубировали при периодическом встряхивании в воде, 63% этаноле, 80% этаноле, 63% изопропаноле или 80% изопропаноле в течение 5 мин при комнатной температуре (∼21°C) с высушиванием или без высушивания в роторный испаритель (концентратор Savant SpeedVac SC110A Plus; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) в течение 5 мин.Это время, которое больше, чем время, используемое для мытья рук дезинфицирующим средством для рук на спиртовой основе, позволило нам обработать несколько образцов как группу и, таким образом, избежать изменчивости, которая могла бы возникнуть при последовательной обработке образцов. Составы ВОЗ для дезинфицирующих средств для рук доступны в Интернете (http://www.who.int/gpsc/5may/Guide_to_Local_Production.pdf). Стенки кисты метили в течение 1 ч при комнатной температуре моноклональным антителом против CWP1 (MAb) (Waterborne Inc. , Новый Орлеан, Луизиана), разведенным 1:500 в фосфатно-солевом буфере (PBS) (16).После трехкратной промывки в PBS цисты инкубировали с 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) (0,2 мкг/мл) и/или иодидом пропидия (PI) (0,2 мкг/мл) в течение 5 мин при комнатной температуре. температуры, а затем дважды промывали в PBS. DAPI — витальный краситель, проникающий через мембраны и связывающий ядра, хотя он может быть исключен стенками кисты. PI, который часто входит в наборы LIVE/DEAD, не может проникать через неповрежденные мембраны и поэтому метит только ядра мертвых клеток. Кисты и трофозоиты визуализировали с помощью деконволюционного микроскопа DeltaVision (Applied Precision, Issaquah, WA).Изображения были получены с объективом 100× и подвергнуты деконволюции с использованием программного обеспечения softWoRx компании Applied Precision (16).

Эксцистацию G. duodenalis индуцировали путем инкубации цист в среде для эксцистации, содержащей 1 мг/мл химотрипсина в растворе соли Тирода, в течение 30 мин при 37°C (23). Скорость эксцистирования определяли путем подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазово-контрастного микроскопа Labophot (Nikon Instruments, Inc., Мелвилл, Нью-Йорк) с использованием 20-кратного объектива. В каждом эксперименте для каждого образца подсчитывали аликвоты объемом 100 мкл, содержащие ~100 цист, и каждый эксперимент проводили не менее 3 раз.Скорость эксцистации для каждой обработки спиртом сравнивали со скоростью цист, инкубированных в воде, с использованием непарного теста t (программное обеспечение GraphPad Prism). Точно так же скорость эксцистации для каждой обработки спиртом плюс сушка на роторном испарителе сравнивалась со скоростью цист, инкубированных в воде, а затем высушенных. Статистических сравнений между группами, получавшими разные спирты, не проводилось. Эксцистированные трофозоита Giardia культивировали в среде TYI-S-33 при 37°C для подтверждения их жизнеспособности (33).

Самки песчанок в возрасте от 4 до 6 недель (Charles River Laboratories, Уилмингтон, Массачусетс), ни одна из которых не была инфицирована Giardia , были экспериментально инфицированы через желудочный зонд 1000 цист штамма h4 G. duodenalis на 100 мкл воды (34). Кисты не обрабатывали, инкубировали в 63% или 80% этаноле и сушили или инкубировали в 80% изопропаноле и сушили. Через 7 дней после заражения песчанок подвергали эвтаназии путем удушения CO ₂ , а двенадцатиперстную кишку удаляли, измельчали ​​и инкубировали в 1 мл среды TYI-S-33 в течение 60 мин для высвобождения трофозоитов Giardia , которые подсчитывали с помощью фазовая микроскопия и гемоцитометрия.С помощью гемоцитометра подсчитывали по три аликвоты от каждого животного. В каждой экспериментальной группе было по четыре животных, опыты проводили по два раза. Средние значения и стандартные отклонения для 8 животных в каждой группе представлены на рис. Статистический тест не использовался, так как мы не смогли идентифицировать какие-либо Giardia в просвете двенадцатиперстной кишки у песчанок, инфицированных кистами, обработанными этанолом или изопропанолом.

Этанол и изопропанол разрушают стенки кисты G. duodenalis , проницаемость мембран трофозоитов внутри кист, резкое снижение эксцистации in vitro и блокирование оральной инфекции песчанок. (A) Протоколы тестирования воздействия этанола на цисты G. duodenalis . (B и C) Витальная окраска DAPI (синяя), но не PI (окраска DEAD) (красная), маркирует ядра одних цист (B), но не других (C) в воде. Обратите внимание, что сушка после инкубации в воде не влияет на жизнеспособность. Стенки кисты были помечены зеленым моноклональным антителом против CWP1.(D-G) После обработки 63% этанолом (D), 80% этанолом (E), 63% изопропанолом (F) или 80% изопропанолом плюс сушка (G), ядра цист G. duodenalis были помечены PI и стены, казалось, рухнули. (H и I) Лечение алкоголем уменьшало эксцистацию (H) и блокировало пероральное заражение песчанок цистами G. duodenalis (I). (H) График эксцистации, показывающий средние значения и стандартные ошибки по крайней мере из 3 экспериментов с сотнями цист, подсчитанными за эксперимент. В каждом случае значения P были <0.001, когда сравнивались скорости эксцистирования для обработки этанолом (Eth) по сравнению с водой или для обработки этанолом плюс сушка по сравнению с водой плюс сушка. Изо, изопропанол. (I) Инфекции песчанок, показывающие средние значения и стандартные ошибки для восьми песчанок на обработку (выполнено в двух отдельных экспериментах). Поскольку нам не удалось выделить Giardia от песчанок, инфицированных цистами, обработанными спиртом, статистический анализ не проводился.

Манипуляции с цистами G. duodenalis были одобрены Институциональным комитетом по биобезопасности Бостонского университета.Заражение песчанок цистами G. duodenalis было одобрено Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Бостонского университета.

Штамм IP-2 E. Inventions культивировали в среде TYI-SS при комнатной температуре и инцистировали трофозоиты (10 ⁵ /мл) путем переноса в среду с пониженным содержанием глюкозы, осмолярности и сыворотки. в течение 72 ч (20, 33, 35). После инцистации цисты суспендировали в стерильной воде и оставляли при 4°С на 6 ч для лизиса трофозоитов.Кисты E. investens обрабатывали спиртами, а затем проводили мечение кист DAPI и PI, как описано для Giardia , за исключением того, что стенки кисты метили 10 мкг/мл WGA, который связывается с хитиновыми фибриллами (21). Скорость эксцистирования E. investens определяли путем инкубации 10 ⁴ цист в 10 мл среды для эксцистирования, содержащей 40 мМ бикарбоната натрия и 1,25 мМ тауродезоксихолата, в течение 24 ч при комнатной температуре и подсчета интактных и эксцистированных стенок с помощью фазового микроскопа (24). .В качестве альтернативы, ∼10 ⁷ цист E.Вторжения в 1 мл воды наносили с помощью пипетки на указательный и указательный пальцы одной руки и вымывали руки досуха (∼2 мин) 1–2 мл коммерческое дезинфицирующее средство для рук (Purell; Gojo Industries, Акрон, Огайо). Purell содержит 70% этанола. Остаточные кисты элюировали 300 мл воды; концентрируют до 1 мл центрифугированием; и помечены PI, DAPI и WGA, как описано выше. Количество живых кист (с окрашиванием DAPI, но без окрашивания PI) и мертвых кист (с окрашенными PI ядрами или разорванными стенками), извлеченных из рук, сравнивали с количеством необработанных E.инвазирует кисты. Руки были тщательно вымыты водой с мылом, а все моющие растворы обеззаражены бактерицидным моющим средством Wescodyne (Steris, Mentor, OH).

» Страница не найдена

Кристофер Кейс, доктор медицины, и Алан Рауба, доктор медицины, запустили программы «Новое направление» и «Перспективы» в феврале 2003 года в Медицинской группе Джефферсон-Сити. До того, как открыть свою практику в Джефферсон-Сити, доктор Кейс работал в программе «Новое направление», одновременно получая стипендию и проводя исследования в Медицинском колледже Бейлора в Хьюстоне, штат Техас.Он был настолько впечатлен медицинскими улучшениями участников программы, что был вынужден найти способ предоставлять такие услуги в сочетании со своей местной практикой. Мы с гордостью сообщаем, что всего через год работы наша программа была признана корпорацией Robard как Центр передового опыта.

Доктор Кристофер Кейс также вносит свой вклад на национальном уровне; он является членом медицинской консультативной группы, которая обеспечивает руководство, обучение и экспертизу для руководящих принципов программы New Direction and Outlook под медицинским наблюдением Робарда.

Мы гордимся тем, что у нас есть квалифицированные и преданные своему делу сотрудники, которые сотрудничают с нами, чтобы обеспечить сострадательный, деликатный и исключительный уход за участниками нашей программы. В дополнение к нашим наблюдающим врачам, наш штат состоит из зарегистрированных диетологов, бихевиористов и административного помощника — все они посвящены поддержке участников нашей программы, когда они открывают для себя более здоровую, сбалансированную и счастливую жизнь!

Позвоните нам, чтобы узнать больше!

Познакомьтесь с координатором нашей программы Адамом Уивером

Адам Уивер присоединился к команде Центра лечения лишнего веса JCMG в качестве координатора нашей клиники осенью 2021 года. Он страстно любит здоровье и хорошее самочувствие, всегда ставя общее психическое и физическое здоровье своих пациентов превыше всего. Вот что он говорит:

Выросший в Мид-Миссури, я был очарован сильными корнями сельского хозяйства в нашем штате. Я вспоминаю бескрайние кукурузные и соевые поля вдоль шоссе Миссури, когда наши семейные поездки проходили по дну рек Среднего Запада. В то время я не оценил пленительный мир сельского хозяйства.

От семян до фруктов, сельское хозяйство и питание объединяет общая тема: продукты питания.Именно в школьные годы я осознал существенную связь между этими двумя понятиями. В то время я изо всех сил пытался понять концепции питания в своих усилиях «быть здоровее».

По мере того, как я начинал ослаблять свою личную связь с едой, во мне росло жгучее желание и любопытство узнать больше о питании и здоровье. Во время учебы в магистратуре Получив диплом диетолога в Университете Миссури, я также обнаружил страсть к обучению и поддержке других в их стремлении к здоровью. Я нашел это особенно полезным в практической области медицинского управления весом.

Как зарегистрированный диетолог я знаю, что существует множество факторов, влияющих на управление весом, а не только еда и физические упражнения. Эти факторы вступают в игру на протяжении всего нашего юношеского начала и продолжаются во взрослой жизни. Факторы могут включать генетику, гормоны, лекарства, поведение, сон, стресс и, конечно же, выбор продуктов питания. Несмотря на то, что эти области деятельности имеют большое значение, также верно и то, что каждый человек имеет уникальную историю и опыт в отношении еды.Таким образом, можно себе представить, что не существует шаблонного подхода к долгосрочному успешному управлению весом.

Подобно мультидисциплинарному аспекту нашего личного отношения к еде, междисциплинарный подход к снижению веса является эффективной стратегией для достижения долгосрочного успеха. При различной степени факторов, влияющих на управление весом, «балансирование» еды и питания может быть затруднено. Теперь, занимая должность координатора Центра лечения лишнего веса в JCMG, я еще раз свидетельствую о ценности междисциплинарной команды врачей, медсестер, психологов и дипломированных диетологов, работающих с клиентами для изучения их отношений с едой и здоровьем.

Таким образом, обеспечение комфортного, уважительного и непредвзятого подхода в условиях многопрофильного лечения помогает пациентам встречать и преодолевать препятствия на пути успешного изменения образа жизни, необходимого для достижения успеха в управлении весом.

Что такое инфекция лямблий?

Вопрос

После возвращения из отпуска в Доминиканской Республике я страдаю от быстрой диареи, а теперь перемежающейся.

Я пробовал лекарства, отпускаемые по рецепту и без рецепта, но все, что они делали, это останавливало симптомы на 24 часа, прежде чем они вернулись.Мне сделали два анализа кала, а также несколько анализов крови.

Теперь мой врач считает, что у меня может быть инфекция, вызванная лямблиями. Что это? Это заразно? Как долго это продлится в моей системе?

Мне прописали метронидазол. Поможет ли это и есть ли побочные эффекты, о которых мне нужно знать?

Ответить

Giardia является причиной очень многих случаев диареи и расстройства желудка у путешественников, а также портит отдых многим.

Ваше описание простого облегчения симптомов с помощью отпускаемых без рецепта лекарств довольно типично, и симптомы имеют тенденцию становиться менее серьезными с течением времени, даже если они сохраняются и повторяются.

Организм, вызывающий гастроэнтерит, представляет собой простейшее, заражение которым происходит при употреблении пищи или воды, загрязненных фекалиями.

Симптомов может не быть вообще, или могут быть вялость, вздутие живота и диарея, которые могут быть взрывоопасными и сопровождаться ужасными болями в животе.

Может быть чрезвычайно трудно выделить цисты или лямблии из стула, и ваш лечащий врач мудро посоветовал вам пройти курс метронидазола в качестве терапевтического испытания.

Это нормальное правильное и подходящее лечение для этого состояния, которое часто требует лечения по подозрению.

Есть несколько причудливых тестов, которые могут подтвердить ваш диагноз, один из которых называется ИФА, но обычно в этом нет необходимости.

Вам следует избегать алкоголя и молочных продуктов в течение нескольких недель, так как плохая доза лямблии часто вызывает временную непереносимость молочной лактозы.

Метронидазол обладает высокой эффективностью против простейших организмов, таких как лямблии. Очень редко это может вызывать неприятный вкус или даже рвоту, или обложенный язык.

Моча может быть немного темнее, и в очень редких случаях это может вызвать более серьезные побочные эффекты. Но это лекарство хорошо испытано и проверено, и оно используется во всем мире с большой пользой в течение многих лет.

Ваш жидкий стул, вероятно, сохранится в течение нескольких недель, но вы почувствуете себя лучше после того, как метронидазол избавит вас от лямблий.