Антитела к цитомегаловирусу класса lg g положительный: Антитела класса IgG к цитомегаловирусу

Спасибо за письмо.

Продукт, который я определил для вас, выглядит следующим образом;

ab108776
ab108778

ab108767
мы не против краснухи IgM Комплект

ab108724
ab108725

ab108737
ab108738

ab108739
ab108740

ab108742

Я связался со своим коллегой, который даст вам объемную цитату для этот комплект.Пожалуйста, дайте мне знать, если вы не получите от нас ответа в течение 24 часов с момента получения этого письма.

Надеюсь, эта информация будет вам полезна. Если вам потребуется дополнительная информация, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться ко мне.

Спасибо за ваш запрос.

Я рад подтвердить, что планшеты ab108724 покрыты антигенами штамма CMV AD-169.

Надеюсь, эта информация окажется полезной. Пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к ним снова с любыми дополнительными вопросами.

A1: CMV ELISA, ab108724, является качественным и поэтому не имеет известного предела обнаружения.Чувствительность анализа определяется как вероятность положительного результата анализа в присутствии определенного аналита. Чувствительность анализа для этого набора составляет 98%. A2: Контроль отсечки используется для определения порога оптической плотности, при котором образцы считаются положительными или отрицательными. Подробнее об этом расчете см. на вкладыше к продукту. A3: Элементы управления в этом наборе поставляются в жидкой форме, готовые к использованию.

Спасибо за терпение.Лаборатория, разработавшая ИФА, прислала следующую информацию. Если это не полностью отвечает на ваши вопросы, пожалуйста, свяжитесь со мной. CMV IgG ELISA – это качественный тест. Поэтому у нас нет данных о пределе обнаружения или всплесках. Тепловая инактивация образцов не рекомендуется, так как это отрицательно влияет на результаты испытаний. Перекрестной реактивности с антителами против HSV1-2, кори, эпидемического паротита или VZV не наблюдалось. Специфичность диагностики определяется как вероятность отрицательного результата анализа при отсутствии специфического аналита.Для этого он составляет 97,5%. Диагностическая чувствительность определяется как вероятность положительного результата анализа в присутствии определенного аналита. Чувствительность этого анализа составляет 98%. Интерференция с гемолитической, липемической или желтушной сыворотками не наблюдается до концентрации гемоглобина 10 мг/мл, триглицеридов 5 мг/мл и билирубина 0,2 мг/мл.

CMV IgG — DRG International, Inc.

Описание

ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ: Этот продукт содержит 350 96-луночных микротитровальных планшетов.

Набор для иммуноферментного анализа IgG вируса цитомегалии (CMV) DRG содержит материалы для количественного и качественного определения антител класса IgG к вирусу цитомегалии (CMV) в сыворотке и плазме человека.
Этот анализ предназначен только для диагностики in vitro.

Цитомегаловирус (ЦМВ) относится к группе герпесвирусов (подсемейство Бета, ДНК-вирус 150-200 нм).Эти вирусы обладают характерной способностью оставаться в организме в течение длительного периода времени. Начальная ЦМВ-инфекция, которая может иметь мало симптомов, всегда сопровождается длительной инаппарантной инфекцией, во время которой вирус находится в клетках, не вызывая заметного повреждения или клинического заболевания. Серьезное нарушение иммунной системы организма лекарствами или болезнью постоянно реактивирует вирус из латентного или спящего состояния. ЦМВ встречается повсеместно во всех географических точках и социально-экономических группах и поражает от 50% до 85% взрослых.ЦМВ-инфекция более широко распространена в развивающихся странах и в районах с более низкими социально-экономическими условиями. Для подавляющего большинства людей ЦМВ-инфекция не является серьезной проблемой, но она представляет опасность для определенных групп высокого риска: нерожденный ребенок во время беременности, люди, работающие с детьми, и лица с ослабленным иммунитетом, такие как реципиенты трансплантированных органов и лица, инфицированные ВИЧ. Наличие вируса соотв. инфекция может быть идентифицирована с помощью микроскопии, ПЦР, серологии: CBR и обнаружения антител с помощью ELISA. Антитела IgM первыми вырабатываются организмом в ответ на ЦМВ-инфекцию. Они присутствуют у большинства людей в течение недели или двух после первоначального воздействия. Продукция антител IgM повышается на короткий период времени, а затем снижается. Через несколько месяцев уровень антител CMV IgM обычно падает ниже определяемого уровня. При реактивации латентного ЦМВ образуются дополнительные антитела IgM. Антитела IgG вырабатываются организмом через несколько недель после начальной ЦМВ-инфекции и обеспечивают защиту от первичных инфекций.Уровни IgG повышаются во время активной инфекции, затем стабилизируются по мере разрешения ЦМВ-инфекции, когда вирус становится неактивным. После того, как человек подвергся воздействию ЦМВ, у него или нее будет некоторое измеримое количество антител ЦМВ IgG в крови на всю оставшуюся жизнь. Тестирование на антитела IgG ЦМВ может использоваться вместе с тестированием IgM, чтобы помочь подтвердить наличие недавней или предыдущей инфекции ЦМВ.

Набор DRG Cytomegaly Virus (CMV) IgG ELISA Kit представляет собой твердофазный твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). Лунки для микротитрования в виде твердой фазы покрывают антигеном инактивированного цитомегаловируса (ЦМВ) 2 степени (штамм AD-169). В эти лунки пипеткой вносят разведенные образцы пациентов и готовые к использованию контроли. Во время инкубации специфичные к цитомегалии (ЦМВ) антитела положительных образцов и контролей связываются с иммобилизованными антигенами. После этапа промывки для удаления несвязавшегося образца и контрольного материала в лунки вносят конъюгированные с пероксидазой хрена антитела против IgG человека. Во время второй инкубации этот конъюгат анти-IgG специфически связывается с антителами IgG, что приводит к образованию связанных с ферментами иммунных комплексов.После второго этапа промывки для удаления несвязавшегося конъюгата образовавшиеся иммунные комплексы (в случае положительных результатов) выявляют путем инкубации с субстратом ТМБ и появления синей окраски. Синий цвет превращается в желтый при остановке ферментативной реакции индикатора с серной кислотой. Интенсивность этого цвета прямо пропорциональна количеству специфичных к вирусу цитомегалии (ЦМВ) антител IgG в образце пациента. Поглощение при 450 нм считывают с помощью устройства для считывания микротитрационных планшетов ELISA.

Цитомегаловирусная (ЦМВ) инфекция. Диагностика и лечение

Диагностика

Лабораторные анализы, включая анализы крови и других биологических жидкостей или анализы образцов тканей, могут выявить CMV .

Во время беременности и после родов

Если вы беременны, важно провести тестирование, чтобы определить, были ли вы когда-либо инфицированы CMV . Беременные женщины, у которых уже выработались антитела CMV , имеют очень малую вероятность реактивации заражения их будущих детей.

Если ваш врач обнаружит новую инфекцию CMV во время беременности, пренатальный тест (амниоцентез) может определить, был ли инфицирован плод.В этом тесте ваш врач берет и исследует образец амниотической жидкости. Амниоцентез обычно рекомендуется, когда на УЗИ обнаруживаются аномалии, которые могут быть вызваны CMV .

Если ваш врач подозревает, что у вашего ребенка врожденный CMV , важно проверить ребенка в течение первых трех недель после рождения. Если у вашего ребенка CMV , ваш врач, вероятно, порекомендует дополнительные тесты для проверки здоровья органов ребенка, таких как печень и почки.

У людей с ослабленным иммунитетом

Тестирование на CMV также может быть важно, если у вас ослабленная иммунная система. Например, если у вас ВИЧ или СПИД, или если вы перенесли трансплантацию, ваш врач может захотеть регулярно наблюдать за вами.

Лечение

Лечение обычно не требуется для здоровых детей и взрослых. Здоровые взрослые, у которых развивается мононуклеоз CMV , обычно выздоравливают без лекарств.

Новорожденные и люди с ослабленным иммунитетом нуждаются в лечении при появлении у них симптомов инфекции CMV . Тип лечения зависит от признаков и симптомов и их тяжести.

Противовирусные препараты являются наиболее распространенным типом лечения. Они могут замедлить размножение вируса, но не могут его уничтожить. Исследователи изучают новые лекарства и вакцины для лечения и профилактики CMV .

Клинические испытания

Ознакомьтесь с исследованиями Mayo Clinic, в которых тестируются новые методы лечения, вмешательства и тесты в качестве средств для предотвращения, выявления, лечения или управления этим заболеванием.

Подготовка к приему

Вот некоторая информация, которая поможет вам подготовиться к приему.

Что вы можете сделать

Перед визитом выполните следующие действия:

• Запишите все симптомы, которые испытываете вы или ваш ребенок. Включите признаки и симптомы, даже если они кажутся незначительными, например субфебрилитет или утомляемость.
• Запишите вопросы, которые нужно задать своему врачу.Ваше время с врачом ограничено, поэтому может быть полезно подготовить список вопросов.

Для CMV вопросы, которые следует задать врачу, включают:

• Что, вероятно, вызывает мои симптомы?
• Какие анализы мне нужны?
• Является ли мое состояние временным или хроническим?
• Как лучше поступить?
• Буду ли я заражать других?
• Есть ли ограничения, которым я должен следовать?
• У меня другие проблемы со здоровьем.Как я могу лучше всего управлять ими вместе?

Чего ожидать от вашего врача

Ваш врач, скорее всего, задаст вам ряд вопросов, в том числе:

• Как давно у вас появились симптомы?
• Вы работаете или живете с маленькими детьми?
• Делали ли вы недавно переливание крови или трансплантацию органов, костного мозга или стволовых клеток?
• Есть ли у вас заболевание, которое может ослабить вашу иммунную систему, например, ВИЧ или СПИД?
• Вы проходите курс химиотерапии?
• Практикуете ли вы безопасный секс?
• Вы беременны или кормите грудью?

Кроме того, если вы считаете, что подвергались воздействию во время беременности:

• Как вы думаете, когда вы могли подвергнуться воздействию?
• Были ли у вас симптомы заболевания?
• Вы раньше проходили тестирование на CMV ?

Первичная цитомегаловирусная инфекция у беременных египтянок, подтвержденная тестом на авидность IgG к цитомегаловирусу — Полный текст — Медицинские принципы и практика 2014, Vol.

Цель: Определить частоту первичной цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции у беременных египтянок с помощью теста на авидность ЦМВ IgG. Субъекты и методы: Поперечное исследование было проведено в Университетской больнице Суэцкого канала, Исмаилия, Египет. В общей сложности 546 беременных женщин, поступивших на рутинный антенатальный скрининг, были протестированы на ЦМВ IgG и IgM с использованием имеющегося в продаже иммуноферментного анализа (ИФА).Сыворотки от CMV IgM-положительных женщин тестировали с помощью анализа авидности CMV IgG. Результаты: Все 546 беременных женщин были серопозитивными в отношении анти-ЦМВ IgG. Из 546 женщин 40 (7,3%) были положительными или сомнительными в отношении антител IgM. Все сыворотки 40 женщин (IgG+/IgM+) показали высокий или средний индекс авидности CMV IgG. Из 40 женщин 23 (57,5%) были во втором или третьем триместрах беременности, и у них была взята кровь первого триместра, а протестированный анализ авидности CMV IgG показал высокий индекс авидности. Заключение: У женщин с положительным IgM не было первичной ЦМВ-инфекции во время предполагаемой беременности, о чем свидетельствует тест на высокую авидность IgG ЦМВ.

© 2013 S. Karger AG, Базель

Введение

Цитомегаловирус человека (ЦМВ) является наиболее частой причиной врожденных пороков развития в результате вирусной внутриутробной инфекции в развитых странах [1]. Первичная ЦМВ-инфекция встречается в 0,15-2,0% всех беременностей и может передаваться плоду до 40% случаев [2].В развивающихся странах надежные оценки распространенности и исходов первичной ЦМВ-инфекции недоступны, а исследования в странах Ближнего Востока показали высокую серопревалентность ЦМВ IgG у беременных женщин и низкую распространенность ЦМВ IgM [3,4,5,6]. ,7]. Однако в большинстве этих исследований дальнейшая диагностическая оценка не проводилась у женщин с положительным результатом IgM ЦМВ, чтобы определить, было ли это связано с первичной или перенесенной ЦМВ-инфекцией.

Первичная инфекция определяется как ЦМВ-инфекция у ранее серонегативного человека; впоследствии вирус переходит в спящее состояние и существует в латентном состоянии, из которого может реактивироваться, вызывая рецидивирующую (вторичную) инфекцию [8].В дополнение к реактивации вируса, по-видимому, существует несколько штаммов ЦМВ, которые инфицируют людей, так что повторное заражение может произойти даже у иммунокомпетентных людей [9]. Точность материнских анти-ЦМВ IgM для прогнозирования первичной материнской инфекции осложняется тем фактом, что антитела IgM могут сохраняться в течение месяцев или даже лет после первичной инфекции, а также могут быть обнаружены в условиях реактивации или реинфекции другим штаммом ЦМВ. 9].

Более того, ложноположительные результаты на IgM ЦМВ могут возникать при заболеваниях, не связанных с ЦМВ, таких как первичная инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр, из-за мощной стимуляции В-клеток.Кроме того, исследования продемонстрировали высокую вариабельность специфичности и чувствительности среди анализов CMV IgM в дополнение к высокому уровню несоответствия [10,11]. Таким образом, тестирование на IgM, особенно у бессимптомных беременных, часто может создать проблему, а не решить ее.

Поскольку первичная ЦМВ-инфекция во время беременности связана с высоким риском передачи вируса плоду, различение между недавней первичной и перенесенной ЦМВ-инфекцией может быть важным инструментом в клиническом ведении беременных женщин [9].

Недавно было показано, что авидность антител, которая является косвенным показателем плотности связывания антител с антигеном-мишенью, увеличивается в первые недели после первичной инфекции. Антитела IgG низкой авидности к ЦМВ сохраняются до 20 недель после первичной ЦМВ-инфекции [12]. Эти антитела с низкой авидностью затем заменяются антителами с высокой авидностью. В настоящее время для диагностики первичной материнской инфекции используется сочетание наличия анти-ЦМВ IgM-антител и низкоавидных анти-ЦМВ IgG-антител наряду с материнскими или фетальными симптомами [13].

Распространенность первичной материнской ЦМВ-инфекции в Египте неизвестна из-за таких факторов, как отсутствие национального скрининга на ЦМВ для выявления серонегативных лиц и отсутствие доступного метода выявления первичной ЦМВ-инфекции. Поэтому в настоящем исследовании мы стремились определить риск первичной ЦМВ-инфекции с помощью теста авидности CMV IgG в образце женщин из района Суэцкого канала, Египет.

Субъекты и методы

Исследуемая популяция и образцы

Описательное поперечное исследование проводилось с июня 2011 г. по октябрь 2012 г.Для сбора социально-демографических данных использовались анкеты. В это исследование были включены в общей сложности 546 беременных женщин, обратившихся за плановой дородовой помощью в отделение акушерства и гинекологии Университетской больницы Суэцкого канала, Исмаилия, Египет. Отбирали образцы цельной крови, центрифугировали при 2000 g в течение 15 мин, сыворотки удаляли и хранили при -20°С. Образцы были закодированы по дате сбора и номеру образца.

Этическое разрешение на проведение исследования получено от Комитета по этике медицинского факультета Университета Суэцкого канала.Информированное согласие было получено от всех женщин до сбора образцов.

Серология

CMV IgM и IgG проверяли в сыворотке пациентов с помощью имеющегося в продаже иммуноферментного анализа с захватом (ELISA) (CMV IgM и CMV IgG, Dia.Pro; Diagnostic Bioprobes Srl, Италия).

Образцы с концентрацией >0,5 МЕ/мл (ВОЗ) считались положительными в отношении антител IgG к ЦМВ, тогда как образцы считались положительными на IgM, когда отношение оптической плотности образца при 450 нм к пороговому значению (сигнал к пороговому значению) составляло >1.2 и считались двусмысленными, когда отношение было между 1 и 1,2.

Каждую женщину с IgM-положительным статусом CMV затем тестировали с помощью анализа авидности IgG (VIDAS CMV IgG авидность; BioMérieux, Лион, Франция). Анализ авидности VIDAS CMV IgG (связанный с ферментом флуоресцентный анализ, ELFA) состоит из двух анализов с 6 М мочевиной и без нее для диссоциации антител с низкой авидностью, что позволяет дифференцировать антитела со слабой авидностью, продуцируемые на ранней стадии первичной инфекции, от антитела с высокой авидностью, характерные для перенесенной инфекции. Процедуры и интерпретация результатов проводились в соответствии с инструкциями производителя.

Индекс авидности представляет собой отношение относительного значения флуоресценции, полученного для образца с полоской, содержащей мочевинный буфер, к относительному значению флуоресценции без мочевинного буфера. По инструменту VIDAS индекс авидности ≥0,8 является убедительным индикатором первичной инфекции, начавшейся более 3 месяцев, а индекс <0,2 — сильным показателем первичной инфекции, начавшейся менее 3 месяцев.Индекс авидности от 0,2 до 0,8 не позволяет отличить недавнюю инфекцию от перенесенной. Результаты ИФА были проанализированы в трех триместрах беременности у всех женщин, включенных в исследование.

Результаты

Из 546 беременных женщин, участвовавших в этом исследовании, все (100%) были серопозитивными в отношении анти-ЦМВ IgG. Из этих женщин 40 (7,3%) были положительными на антитела IgM (17 диагностированы в первом триместре, 6 во втором триместре и 17 в третьем триместре). Результаты ИФА IgM и IgG у всех включенных в исследование женщин, разделенных на три группы (группа А: первый триместр, группа В: второй триместр и группа С: третий триместр), представлены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты определения IgM и IgG ЦМВ (с помощью ИФА) у беременных женщин по триместрам возраст женщин с отрицательным или положительным IgM ЦМВ (р = 0,9). Женщины, положительные на CMV IgG, показали нестатистически значимую разницу в сроках беременности на момент серологического тестирования по сравнению с теми, у кого были положительные результаты как на CMV IgG, так и на CMV IgM (p = 0.65). Среднее число беременностей составило 3 (от 1 до 9).

В тесте CMV IgM образцы, взятые у 32% женщин, показали положительные результаты, а еще у 8% образцов были обнаружены серые (сомнительные) результаты. Демографические и серологические характеристики для всех женщин с положительными результатами или серыми результатами на CMV IgM приведены в таблице 2. тест, проведенный на образцах от всех 40 женщин, у которых были положительные результаты как на тесты CMV IgG, так и на тесты IgM CMV, показал серую зону, как показано в таблице 3. Все 40 образцов показали высокий и средний индекс авидности CMV IgG. Из этих женщин 23% были во втором или третьем триместре, и у них была взята и протестирована кровь первого триместра, которая показала те же результаты.

Таблица 3

Результаты авидности CMV IgG у беременных женщин с положительной или серой зоной по данным анализа антител ELISA IgM к CMV

Обсуждение

В этом исследовании все беременные женщины имели CMV IgG. Предполагаемая серопревалентность CMV IgM была высокой, что указывает на вероятность эндемического характера инфекции в районе Суэцкого канала в Египте и подтверждает повсеместный контакт с инфекцией в районе Суэцкого канала в прошлом.Наши результаты также подтвердили данные предыдущих исследований в Египте и других странах Ближнего Востока [3,6,14,15]. В исследовании Bagheri et al., проведенном в Иране. [3], большинство беременных женщин (72,1%) были положительными на ЦМВ IgG и 2,5% были положительными на ЦМВ IgM. В секторе Газа, Палестина [4], анти-ЦМВ IgM составлял 6% среди беременных женщин, тогда как в Турции положительный результат на анти-ЦМВ IgG был 97,3%, в то время как 1% были положительными на анти-ЦМВ IgM [5]. . Суммарные IgG-антитела к ЦМВ обнаружены у 92,1% в Саудовской Аравии [6].В исследовании, проведенном в Египте [14], у 132 беременных женщин не было диагностировано случаев первичной ЦМВ-инфекции, и только у 4,5% этих женщин была диагностирована рецидивирующая ЦМВ-инфекция, которая определялась как IgG-позитивная до беременности, IgG-положительная во время беременности. первое посещение беременности без теста на IgM или положительный результат на IgM с высокой авидностью IgG. В Судане [15] сообщалось, что серопревалентность ЦМВ среди женщин в дородовой период составляла 84%.

Настоящее исследование проводилось в университетской больнице, которая характеризуется высокой посещаемостью пациентов с низким социально-экономическим статусом.В предыдущем исследовании [16] была обнаружена корреляция между социально-экономическим статусом в сообществе и риском инфицирования ЦМВ.

В настоящем исследовании средний возраст обследованных женщин составил 26,6 лет. В другом крупном перекрестном исследовании было обнаружено, что возраст матери 25 лет и старше связан с меньшей врожденной ЦМВ-инфекцией согласно Fowler et al. [17].

До сих пор не было данных о частоте первичной ЦМВ-инфекции среди меньшинства, у которых IgM-положительные во время беременности в Египте, из-за отсутствия простого в использовании метода выявления первичной ЦМВ-инфекции.Полимеразная цепная реакция ЦМВ, выделенного из амниотической жидкости, может быть возможным подходом [18]. Однако было показано, что его полезность ограничена из-за его инвазивного характера и низкой диагностической чувствительности 30-45% до 21 недели беременности [19].

В настоящее время анализ авидности CMV IgG кажется одним из наиболее доступных инструментов для дифференциации первичной и непервичной ЦМВ-инфекции [20]. В нашем исследовании использование теста на авидность CMV IgG было полезным для исключения первичного инфекционного статуса ЦМВ без необходимости дальнейших инвазивных диагностических процедур.Возможно, это уменьшит расходы на здравоохранение. Более того, женщины с высоким индексом авидности ЦМВ IgG могли сохранить беременность с меньшим риском передачи ЦМВ-инфекции своему потомству [13].

В наш план скрининга мы включили женщин с более поздним сроком гестации, у которых при получении и тестировании крови в первом триместре была обнаружена высокая авидность CMV IgG, что указывает на возможность применения этого анализа к беременным женщинам во втором и третьем триместре беременности. триместре для скрининга низкой авидности антител, которая связана с более высоким риском передачи инфекции плоду [21].

Ограничения этого исследования включали тот факт, что мы не использовали полимеразную цепную реакцию для обнаружения вирусной ДНК в IgM-положительных случаях с целью выявления распространенности активной инфекции, а также отсутствие последующего наблюдения за исходами беременности для исключения ЦМВ передачи плоду.

Заключение

IgM-положительные женщины в этом исследовании показали низкий риск первичной ЦМВ-инфекции, о чем свидетельствует тест на высокую авидность IgG. Это было первое исследование в Египте, в котором использовалось тестирование авидности IgG для дифференциации первичной и непервичной инфекции у CMV IgM-положительных пациентов.

Лицензия открытого доступа: Это статья открытого доступа, лицензированная в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial 3.0 Unported (CC BY-NC) (www.karger.com/OA-license), применимой к онлайн-версии только статья. Распространение разрешено только в некоммерческих целях.
Дозировка препарата: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор препарата и дозировка, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Тем не менее, в связи с продолжающимися исследованиями, изменениями в правительственных постановлениях и постоянным потоком информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на лекарства, читателю настоятельно рекомендуется проверять вкладыш в упаковке для каждого лекарства на предмет любых изменений в показаниях и дозировке, а также для дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендуемый агент является новым и/или редко используемым лекарственным средством.
Отказ от ответственности: заявления, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и участникам, а не издателям и редакторам.Появление рекламы и/или ссылок на продукты в публикации не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор(ы) отказываются от ответственности за любой ущерб, нанесенный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в содержании или рекламе.

Границы | Негативное влияние возраста, но не латентной цитомегаловирусной инфекции, на иммунный ответ на новый штамм вакцины против гриппа у здоровых взрослых

Введение

Старение населения представляет собой важную проблему общественного здравоохранения.С возрастом функция иммунной системы человека снижается, это явление также называют иммуносенесценцией (1). Глубокие изменения иммунной системы включают постепенную потерю наивных клеток, увеличение числа клеток памяти и снижение разнообразия репертуара Т- и В-клеток (1–3). Эти изменения способствуют снижению защиты от инфекционных заболеваний и уменьшению реакции на вакцину у пожилых людей. Действительно, заболеваемость вирусными инфекциями гриппа увеличивается и сопровождается большим количеством осложнений и более высокой смертностью у пожилых людей (4, 5).В большинстве развитых стран рекомендуется ежегодная вакцинация против гриппа у лиц старше 60 или 65 лет (6), чтобы предотвратить заражение вирусом гриппа путем индукции защитных антител (4, 7). Однако реакция антител на вакцинацию против гриппа у пожилых людей нарушена, что приводит к неоптимальной защите в этой уязвимой группе (7–9).

Накапливающиеся данные указывают на то, что латентная цитомегаловирусная (ЦМВ) инфекция связана с возрастными изменениями иммунной системы и может усиливать иммунное старение (2, 10, 11).ЦМВ является распространенным β-герпесвирусом с распространенностью 45–100% во всем мире, которая увеличивается с возрастом (12). ЦМВ-инфекция вызывает заболеваемость и смертность у пациентов с тяжелым иммунодефицитом, в то время как вирус редко вызывает клинические симптомы у здоровых людей. Несмотря на способность иммунной системы контролировать первичную инфекцию, вирус переходит в латентную форму с эпизодами реактивации вируса в течение жизни (13). Частая реактивация ЦМВ вызывает постоянный антигенный стресс для иммунной системы (3).Уровни анти-ЦМВ IgG увеличиваются с возрастом (14–16 лет) и, как считается, увеличиваются после эпизодов реактивации вируса, что отражает степень испытанного антигенного стресса ЦМВ в течение жизни (12, 14, 17). Глубокое влияние ЦМВ-инфекции на иммунную систему особенно проявляется в прогрессирующей большой экспансии олигоклональных ЦМВ-специфических CD8 Т-клеток и, в меньшей степени, CD4 Т-клеток. Кроме того, ЦМВ-серопозитивность тесно связана с инвертированным соотношением CD4/8 (18), смещением репертуара TCR (19) и увеличением высокодифференцированных Т-клеток (20).

Было высказано предположение, что иммуностарение, усиленное ЦМВ, может ослабить иммунный ответ на вакцинацию против гриппа (21, 22). Действительно, в нескольких исследованиях ЦМВ-серопозитивность или высокий титр анти-ЦМВ IgG были связаны с более низким ответом антител на вакцинацию против гриппа как у взрослых (23–25), так и у пожилых людей (25–28). Тем не менее, другие исследователи не обнаружили влияния ЦМВ-инфекции (29, 30) или даже сообщили об усилении гуморального ответа на вакцинацию против гриппа как у молодых (31, 32), так и у пожилых ЦМВ-серопозитивных лиц (33).

Общее влияние латентной ЦМВ-инфекции на индукцию антител противогриппозными вакцинами остается спорным и зависит, среди прочих факторов, от ранее существовавшего иммунитета к вирусу гриппа (34). В большинстве исследований изучался ответ антител на вакцинацию против сезонного гриппа; рекомендуемая ежегодно трехвалентная вакцина против гриппа, которая часто содержит перекрывающиеся штаммы вакцины против гриппа в последующие годы. Естественное воздействие вируса гриппа и предыдущая вакцинация вызывают ранее существовавший иммунитет, который влияет на последующий ответ на вакцину.Было показано, что более высокие титры антител до вакцинации (предварительные титры) действительно приводят к более низким титрам поствакцинальных антител к последующей вакцинации (7, 35). Кроме того, можно было бы ожидать большего влияния иммуностарения на иммунные реакции de novo (36, 37). Таким образом, вакцинация против сезонного гриппа является неоптимальным местом исследования для изучения влияния латентной ЦМВ-инфекции на реакцию антител против вакцины против гриппа.

Мы предполагаем, что влияние латентной ЦМВ-инфекции на гуморальный ответ на вакцинацию против гриппа можно лучше всего изучить, когда новый штамм вируса гриппа вводится в наивную популяцию.В этом исследовании у нас была уникальная возможность изучить влияние латентной ЦМВ-инфекции на иммунный ответ во время сезона пандемии 2009 г. на новый вакцинный штамм h2N1pdm в большой исследуемой популяции и в различные моменты времени после вакцинации. Это позволило разработать сложный дизайн исследования для проверки влияния латентной ЦМВ-инфекции на реакцию на вакцину против гриппа de novo путем сведения к минимуму ранее существовавшего иммунитета из-за предшествующего контакта с вакциной или естественной инфекцией. В качестве контроля также исследовали влияние латентной ЦМВ-инфекции на ответ антител памяти на вакцинацию в последующий год, которая включала как тот же вакцинный штамм h2N1pdm, так и вакцинный штамм h4N2.

Материалы и методы

Изучение населения и дизайна

Настоящее исследование является частью исследования, в котором оценивались иммунные реакции на вакцинацию против пандемического и сезонного гриппа, которое проводилось в 2009–2011 гг. (испытание вакцинации против пандемического гриппа, Регистр клинических испытаний Нидерландов NTR2070).Это исследование было проведено в соответствии с рекомендациями Надлежащей клинической практики с письменного информированного согласия всех субъектов. Все субъекты дали письменное информированное согласие в соответствии с Хельсинкской декларацией. Протокол был одобрен Центральным комитетом по исследованиям с участием человека в Нидерландах. Здоровые люди в возрасте от 18 до 52 лет были набраны среди медицинских работников в районе Утрехта в Нидерландах. Лица старше 52 лет не были включены из-за потенциально существовавшего ранее иммунитета из-за воздействия штамма гриппа A/h2N1, циркулировавшего до 1957 г. (38).Образцы сыворотки и анкеты были использованы из вакцинной группы когорты вакцинации против пандемического гриппа.

Вакцины

В сезон пандемии люди получали две дозы моновалентной адъювантной вакцины против гриппа MF59, содержащей вирус гриппа A/California/7/2009(h2N1pdm09), с 3-недельным интервалом (Focetria, Novartis, Италия). Образцы крови были собраны до вакцинации (Т1), через 3 недели после вакцинации, при которой также была введена вторая доза пандемической вакцины (Т2), через 6 недель после первой вакцинации (Т3), через 26 недель после первой вакцинации (Т4) и если участники продолжили исследование в течение сезона 2010–2011 гг., также через 52 недели после первой вакцинации (Т5) (рис. 1).Самооценка истории вакцинации (2006–2009 гг.) была извлечена из анкет. Если испытуемые получали сезонную трехвалентную вакцинацию в 2009–2010 гг. (Solvay, Нидерланды), она проводилась как минимум за 3 недели до исследования или в конце визита в момент времени 3 исследования. В сезоне 2010–2011 гг. лица получили сезонную трехвалентную субъединичную вакцину Influvac 2010–2011, содержащую вакцинные штаммы гриппа А A/California/7/2009(h2N1pdm09) и A/Perth/16/2009(h4N2) (Solvay, Нидерланды). ).Кровь собирали до вакцинации (Т1), через 3 недели после вакцинации (Т2) и через 20 недель после вакцинации (Т3).

Рисунок 1 . График учебы. Участники получили в сезон пандемии две моновалентные вакцины против гриппа h2N1pdm с 3-недельным интервалом (A) . Всего было вакцинировано 263 цитомегаловирусных (ЦМВ)-серопозитивных и ЦМВ-серонегативных лиц. 155 участников продолжили участие в исследовании на следующий год (сезон 1 T5). В сезоне 2010–2011 гг. 128 человек были вакцинированы (T1 сезон 2) сезонной трехвалентной вакциной против гриппа, которая содержала, среди прочего, тот же вакцинный штамм h2N1pdm и вакцинный штамм h4N2 (B) . Стрелки (↓) указывают момент вакцинации. Точки времени (Т) указывают момент забора крови. Для каждой временной точки указано количество ( N ) лиц с данными об уровнях антител к гриппу.

Оценка титров антител к CMV в сыворотке

к CMV измеряли с использованием коммерческого ELISA (IBL international GMBH, Гамбург, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Участники с уровнем антител к ЦМВ ≥12 ЕД/мл или выше считались ЦМВ-серопозитивными, уровень ≤8 ЕД/мл считался ЦМВ-серонегативным, а уровень от 8 до 12 ЕД/мл считался сомнительным, и эти участники были исключены для дальнейшего анализа.ЦМВ-серопозитивные лица были разделены на группы с низким уровнем анти-ЦМВ (≤30 ЕД/мл), средним уровнем анти-ЦМВ (>30 ЕД/мл, ≤90 ЕД/мл) или высоким уровнем анти-ЦМВ (>90 ЕД/мл). мл) по нормам набора CMV ELISA.

Анализ ингибирования гемагглютинации (HI)

Анализы ингибирования гемагглютинации были выполнены в сезон пандемии для A/California/7/2009(h2N1pdm09) и в сезоне 2010–2011 для A/California/7/2009(h2N1pdm09) и A/Perth/16/2009(h4N2) определение титров антител к вирусу гриппа до и после вакцинации. Вкратце, серию разведений образцов сыворотки, обработанных холерным фильтратом, инкубировали с четырьмя единицами гемагглютинина (ГАЕ) вируса гриппа в течение 20 минут, 0,25% эритроцитами индейки в течение 45 минут и оценивали агглютинацию (39). Титр гриппозных антител обратно пропорционален последнему разведению сыворотки, полностью подавляющему гемагглютинацию. Определяемый титр антител к гриппу определяется как >5 HAU.

Статистический анализ

Реакция антител на вакцинацию против гриппа h2N1pdm в сезон пандемии выражалась двумя разными способами: (1) титр антител против гриппа и (2) степень защиты (титр антител ≥40 HAU).Для всех статистических анализов титры антител к гриппу преобразовывались в логарифм (по основанию 2) и представлялись как средний геометрический титр (GMT) с 95% доверительным интервалом (ДИ) на рисунках.

Сначала для изучения групповых различий в титрах антител к гриппу (например, между низким, средним и высоким группы CMV IgG). Для двустороннего теста T равенство дисперсий было проверено с помощью теста Левена на равенство. Групповые различия в категориальных переменных сравнивались с точным критерием Фишера.

Во-вторых, мы исследовали влияние латентной ЦМВ-инфекции в многомерном контексте; влияние ЦМВ-инфекции на титры антител к гриппу было скорректировано с учетом потенциальных искажающих факторов с использованием регрессионной модели обобщенного оценочного уравнения (GEE) (таблица S1 в дополнительных материалах) (40). Эта модель учитывает повторные измерения одних и тех же людей. Для непрерывно изменяющегося исхода (титр антител к гриппу) использовалось нормальное распределение, а для категориальной переменной (уровень защиты от гриппа) использовалось биномиальное распределение модели.Влияние ЦМВ-инфекции исследовали двумя способами: (а) ЦМВ-серостатус: ЦМВ-серопозитивные лица сравнивали с ЦМВ-серонегативными индивидуумами и (б) группы анти-ЦМВ IgG: низкий, средний и высокий уровни анти-ЦМВ IgG. сравнивались среди ЦМВ-серопозитивных лиц. Включенными вмешивающимися факторами были возраст, пол, время и различные переменные, касающиеся истории вакцинации (см. Таблицу S1 в дополнительном материале). Модель дала коэффициент бета-регрессии для каждой переменной, который отражает то, как категория (например,(например, самая старшая возрастная группа) по сравнению с эталонной категорией (например, самая низкая возрастная группа). Коэффициенты регрессии моделей GEE приведены в таблицах S2–S7 в дополнительных материалах. Модель также давала скорректированные результаты (т. е. титры гриппозных антител или степени защиты) для каждой временной точки, в которой проводились сравнения между CMV-серостатусом или группой анти-CMV IgG, путем включения члена взаимодействия между временем и ЦМВ-серостатусом или анти-ЦМВ-серостатусом или анти-ЦМВ IgG. Группа CMV IgG в моделях GEE. Скорректированные результаты моделей и попарных сравнений представлены на рисунках.Эти анализы также проводились для ответа на вакцину против гриппа в сезоне 2010–2011 гг. для h2N1pdm и h4N2. P значения ≤0,10 считались тенденцией, а ≤0,05 считались значимыми. Данные были проанализированы с использованием статистики SPSS 22 для Windows (SPSS Inc. , Чикаго, Иллинойс, США) и R 3.4.0 (https://www.r-project.org/).

Результаты

Характеристики исследуемой популяции

Всего в сезон пандемии вакциной против пандемического гриппа было вакцинировано 288 человек (рис. 1).Был определен ЦМВ-серостатус, и 25 человек с сомнительным ЦМВ-статусом были исключены из дальнейшего анализа. Из оставшихся 263 человек 171 был ЦМВ-серопозитивным (65%). Группы ЦМВ-серопозитивных и ЦМВ-серонегативных лиц были сопоставимы по полу, возрасту и предшествующим вакцинациям против гриппа (табл. 1). В сезоне 2010–2011 гг. 128 из 263 участников были привиты сезонной вакцинацией, из них 76 (59,4%) были ЦМВ-серопозитивными. Также в последующий сезон различий по полу, возрасту и предшествующим вакцинациям против гриппа между ЦМВ-серопозитивными и ЦМВ-серонегативными особями не наблюдалось (табл. 1).

Таблица 1 . Характеристика исследуемой популяции для сезона пандемии и сезона 2010–2011 гг.

Негативное влияние возраста на титры гриппа после вакцинации против пандемического гриппа

Мы исследовали влияние возраста на индукцию антител к вакцинации против пандемического гриппа в нашей исследуемой популяции. После пандемической вакцинации титры антител, специфичных к вирусу гриппа h2N1pdm, отрицательно коррелировали с возрастом во все моменты времени после вакцинации, кроме T5 (см. Таблицу S8 в дополнительных материалах).Репрезентативные данные показаны для T2 на рисунке 2A (T2, p = 0,0013, R = -0,198). Для дальнейшего анализа индивидуумы разделены на три возрастные группы примерно с 10-летним интервалом. Значительные различия также наблюдались между возрастными группами в титрах h2N1pdm (например, T2, p = 0,016), с более низкими ответами в самой старшей возрастной группе по сравнению с двумя самыми молодыми возрастными группами (например, T2, 19–30 лет по сравнению с 40–40 лет). 52 года p = 0,007) (рис. 2B) (см. таблицу S8 в дополнительных материалах).Аналогичные результаты наблюдались для разных возрастных групп при анализе данных по уровню защиты, определяемому по достижению титра ≥40 HAU (данные не показаны). Эти данные указывают на то, что у людей среднего возраста уже есть признаки ослабленных реакций вакцины, вызванных иммуностарением, на новую антигенную провокацию.

Рисунок 2 . Влияние возраста на титры специфических антител к вирусу гриппа после вакцинации против гриппа. Репрезентативная цифра титров антител против гриппа h2N1pdm после вакцинации против пандемии в зависимости от возраста (T2) (A) .Горизонтальная пунктирная линия представляет защитный титр гриппа 40 единиц гемагглютинина (ГАЕ). Среднее геометрическое титра гриппозных антител (В) после вакцинации приведено для разных возрастных групп после вакцинации h2N1pdm для T2 ( p = 0,016 ANOVA). Корреляции проверяются с помощью корреляции Пирсона. Различия между двумя возрастными группами проверяют с помощью теста Стьюдента t для логарифмически преобразованных титров антител к гриппу. ** р < 0,010. GMT, средние геометрические титры.

Отсутствие влияния ЦМВ-серопозитивности на титры антител после вакцинации против пандемического гриппа

Затем было исследовано влияние латентной ЦМВ-инфекции на специфический ответ антител против вируса гриппа на вакцину с недавно введенным вакцинным штаммом против гриппа h2N1pdm. ЦМВ-серопозитивных лиц сравнивали с ЦМВ-серонегативными индивидуумами по титрам вируса гриппа до и после вакцинации. Никаких различий между ЦМВ-серопозитивными и ЦМВ-серонегативными людьми в титре гриппа в любой момент времени в оба сезона обнаружено не было (рисунок S1A в дополнительном материале).Некоторые люди уже демонстрировали обнаруживаемый пандемический титр до вакцинации, хотя в среднем предварительный титр был очень низким (GMT 9,4 HAU). Чтобы скорректировать этот и другие потенциальные искажающие факторы, титры гриппа у ЦМВ-серопозитивных и ЦМВ-серонегативных лиц были проанализированы с поправкой на предварительный титр, пол, возраст и предыдущие вакцинации против гриппа с помощью модели GEE (таблица S2 в дополнительном материале). Не было обнаружено существенных различий между ЦМВ-серопозитивными и ЦМВ-серонегативными людьми в титрах антител в каждый отдельный момент времени (рис. 3А).Таким образом, несмотря на то, что возраст оказывает негативное влияние на ответ антител против нового пандемического вируса h2N1pdm, свидетельствующий об иммунном старении на ответ de novo (рис. 2), никакого влияния CMV-серостатуса на титр вируса гриппа не наблюдается после пандемической вакцинации у взрослых (рис. 3А). .

Рисунок 3 . Влияние латентной цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции на титр специфических антител к вирусу гриппа и уровень защиты от пандемической инфекции гриппа. Среднее геометрическое и 95% доверительный интервал (ДИ) титров антител к гриппу и процент защиты (определяемый как титр ≥40 HAU) показаны для ЦМВ-серопозитивных и ЦМВ-серонегативных лиц (A,B) и для ЦМВ-серопозитивных лица с низким, средним и высоким уровнями анти-ЦМВ IgG (C, D) до и после пандемической вакцинации h2N1pdm в 2009 г.Стрелки (↓) указывают момент вакцинации. Горизонтальная пунктирная линия представляет защитный титр гриппа 40. Результаты скорректированы с учетом пола, возрастной группы и предыдущих вакцинаций против гриппа с помощью регрессионной модели обобщенного оценочного уравнения (GEE). Значимые различия проверяют путем попарного сравнения между CMV-серопозитивными и CMV-серонегативными индивидуумами или группами анти-CMV IgG с высоким и низким уровнем в отдельные моменты времени. * р < 0,05.

Более высокие уровни остаточной защиты после вакцинации против пандемического гриппа у ЦМВ-серопозитивных лиц, чем у ЦМВ-серонегативных лиц

Впоследствии мы исследовали влияние CMV-серостатуса на степень защиты, определяемую титром антител ≥40 HAU, против вируса гриппа после вакцинации против гриппа (41).Вскоре после вакцинации влияния ЦМВ-серостатуса на степень защиты не наблюдалось. Тем не менее, ЦМВ-серопозитивность была связана с повышенной степенью защиты через 6 месяцев и 1 год после пандемической вакцинации. Процент лиц, защищенных от гриппа, значительно выше среди ЦМВ-серопозитивных лиц, чем среди ЦМВ-серонегативных лиц, как через 26 недель ( p = 0,047), так и через 52 недели ( p = 0,044) после пандемической вакцинации (рис. 3B) (нескорректированные данные). на рисунке S1B в дополнительном материале).В совокупности это говорит о том, что латентная ЦМВ-инфекция не нарушала степень защиты после вакцинации против гриппа, но, во всяком случае, может способствовать сохранению защиты после вакцинации против гриппа de novo .

Высокие уровни анти-ЦМВ IgG в качестве суррогатного маркера реактивации ЦМВ не связаны с нарушением реакции на вакцину против пандемического гриппа у ЦМВ-серопозитивных лиц

Для изучения у CMV-серопозитивных индивидуумов того, оказывает ли частота реактивации CMV отрицательное влияние на реакцию антител против гриппа, уровни анти-CMV IgG использовались в качестве суррогатного маркера реактивации CMV (25, 42) и были связаны с антителами против гриппа. реакция на вакцинацию.С этой целью, ЦМВ-серопозитивные лица с низкими уровнями IgG к ЦМВ (≤30 ЕД/мл), средними уровнями IgG к ЦМВ (>30 ЕД/мл, ≤90 ЕД/мл) или высокими уровнями IgG к ЦМВ (> 90 ЕД/мл) сравнивали по титру антител к гриппу и степени защиты как без поправок (рисунки S1C,D в дополнительном материале), так и с моделью GEE (таблица S3 в дополнительном материале). Не наблюдалось никаких различий между группами анти-ЦМВ IgG в титрах вируса гриппа h2N1pdm или степени защиты после пандемической вакцинации (рис. 3C, D). Это свидетельствует о том, что, несмотря на негативное влияние возраста на гуморальный ответ на противопандемическую вакцинацию (рис. 2), признаков нарушения реактивации ЦМВ не наблюдалось. Это также показывает, что положительное влияние CMV-статуса на долговременную защиту после вакцинации против пандемического гриппа (рис. 3B) нельзя объяснить различиями в группах анти-CMV IgG у CMV-серопозитивных лиц.

Отсутствие влияния возраста или CMV-серостатуса на сезонную вакцинацию против гриппа h2N1pdm и h4N2

Такие же анализы влияния возраста и латентной ЦМВ-инфекции на вакцинацию против гриппа были проведены для 128 человек, которые продолжили исследование и были вакцинированы в сезоне 2010–2011 гг. вакциной против сезонного гриппа, содержащей тот же штамм h2N1pdm и штамм h4N2.Наблюдалась тенденция отрицательного влияния возраста на ответ памяти h2N1pdm, но не было обнаружено существенных различий в титрах антител к h2N1pdm или h4N2 между возрастными группами в любой момент времени после вакцинации в сезоне 2010–2011 гг. (например, Т2, соответственно, р = 0,101 и р = 0,434) (рис. 4А). Как титр антител к гриппу, так и степень защиты не различались между ЦМВ-серопозитивными и ЦМВ-серонегативными людьми (рис. 4B-D; таблицы S4 и S6 в дополнительном материале).Удивительно, но титры гриппозных антител и уровень защиты после сезонной вакцинации были выше как для h2N1pdm, так и для h4N2 в группе с высоким уровнем анти-ЦМВ IgG по сравнению с группой с низким уровнем анти-ЦМВ IgG среди ЦМВ-серопозитивных лиц в большинстве моментов времени после вакцинации ( Рисунки 4E-G; Таблицы S5 и S7 в дополнительном материале). Таким образом, несмотря на отсутствие явного влияния возраста или ЦМВ-серостатуса, высокие уровни анти-ЦМВ IgG, по-видимому, связаны с высокими титрами гриппозных антител и степенью защиты у ЦМВ-серопозитивных лиц.

Рисунок 4 . Влияние возраста и латентной цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции на титр специфических антител к вирусу гриппа и уровень защиты от сезонной инфекции гриппа. Среднее геометрическое и 95% доверительный интервал (ДИ) титров антител к гриппу показаны для каждой возрастной группы для h2N1pdm (левая панель) и h4N2 (правая панель) для репрезентативной временной точки T2 (3 недели) после вакцинации против сезонного гриппа 2010–2011 гг. ( А) . Среднее геометрическое и 95% ДИ титров антител к гриппу (B,C) и процент защищенных [определяется как титр ≥40 единиц гемагглютинина (ГАЕ)] (D) показаны для ЦМВ-серопозитивных и ЦМВ-серонегативных лиц. для штаммов h2N1pdm и h4N2 до и после сезонной вакцинации 2010–2011 гг.Для CMV-серопозитивных лиц с низким, средним и высоким уровнями анти-CMV IgG среднее геометрическое и 95% ДИ титров гриппозных антител (E,F) и процент защищенных (определяется как титр ≥40 HAU) (G ) показаны для штаммов h2N1pdm и h4N2 до и после сезонной вакцинации 2010–2011 гг. Стрелки (↓) указывают момент вакцинации. Пунктирная горизонтальная линия представляет защитный титр гриппа 40 HAU. Результаты влияния латентной ЦМВ-инфекции скорректированы с учетом пола, возрастной группы и предыдущих вакцинаций против гриппа с помощью регрессионной модели обобщенного оценочного уравнения (GEE).Значимые различия проверяют путем попарного сравнения между CMV-серопозитивными и CMV-серонегативными индивидуумами или группами анти-CMV IgG с высоким и низким уровнем в отдельные моменты времени. Значимые различия между возрастными группами тестировали с помощью ANOVA, а различия между двумя возрастными группами тестировали с помощью критерия Стьюдента t для (логарифмически преобразованных) титров антител. * р < 0,05.

Обсуждение

В этом исследовании мы исследовали влияние возраста и латентной ЦМВ-инфекции на иммунный ответ на новый штамм противогриппозной вакцины у здоровых взрослых.Мы обнаружили признаки иммуносенесценции у этих взрослых в возрасте от 40 лет. Однако латентная ЦМВ-инфекция не нарушала ответ антител на вакцину против гриппа de novo . Интересно, что наблюдались признаки обратного: CMV-серопозитивные лица даже демонстрировали более высокий уровень долгосрочной защиты от гриппа после вакцинации против пандемического гриппа. Эти результаты свидетельствуют о том, что латентная ЦМВ-инфекция не всегда еще больше ослабляет возрастное ослабление иммунитета, но во всяком случае может быть полезной.

Наше исследование не выявило отрицательной связи между латентной ЦМВ-инфекцией и реакцией антител на вакцинацию против гриппа. В других исследованиях сообщалось о негативных эффектах у взрослых (23, 25, 32) и пожилых людей (25, 26, 28, 43). Однако в большинстве этих исследований изучалось влияние латентной ЦМВ-инфекции на ответ на противогриппозную вакцину при наличии ранее существовавшего иммунитета. В одном исследовании все субъекты были даже серозащищены (титр антител к гриппу >40 HAU) до вакцинации против гриппа (26).Известно, что у лиц с высокими пре-титрами после вакцинации против гриппа наблюдается более низкий рост антител к гриппу (7, 19, 35, 44). Следовательно, высокие пре-титры связаны с более низкой сероконверсией (титр антител ≥40 HAU и ≥4-кратное увеличение) и более высокой степенью защиты (>40 HAU). Кроме того, во всех исследованиях, кроме двух (25, 43), история вакцинации не принималась во внимание, в то время как предшествующая вакцинация связана с более низкой сероконверсией независимо от предварительных титров (7). Таким образом, неучет ранее существовавшего иммунитета в реакциях на вакцину против гриппа может запутать результаты и привести к различным выводам о влиянии латентной ЦМВ-инфекции.Здесь мы контролировали ранее существовавший иммунитет, исследуя влияние латентной ЦМВ-инфекции на пандемическую вакцинацию, для которой ранее существовавший иммунитет был низким, и выполняя анализ с поправкой на предварительные титры и вакцинный анамнез. Таким образом, мы обнаружили, что латентная ЦМВ-инфекция не влияет на реакцию вакцины против гриппа. Во всяком случае, у ЦМВ-серопозитивных лиц наблюдались признаки повышенной стойкости защиты после противогриппозной вакцинации. Мы наблюдали аналогичные результаты, когда анализировали влияние латентной ЦМВ-инфекции на уровень сероконверсии.Не было обнаружено ухудшения реакции на вакцину, вызванной латентной ЦМВ-инфекцией, но у ЦМВ-серопозитивных лиц наблюдалась более высокая частота сероконверсии через 6 месяцев и 1 год после вакцинации (Т4, р = 0,044; Т5, р = 0,02) (данные не показано).

Было показано положительное влияние латентной ЦМВ-инфекции на иммунную систему (10), и предполагается, что оно отражает более высокий статус активации врожденных клеток после первичной ЦМВ-инфекции или реактивации. Соответственно, наблюдался повышенный титр антител вскоре после вакцинации против гриппа у молодых ЦМВ-серопозитивных по сравнению с молодыми ЦМВ-серонегативными индивидуумами (31–33), и предполагалось, что это зависит от бустерной реакции при вялотекущем воспалении и высоких уровнях циркулирующего IFNγ в ЦМВ- серопозитивных молодых особей (31, 33).Насколько нам известно, о благотворном влиянии латентной ЦМВ-инфекции на долговременное сохранение защиты после вакцинации у взрослых не сообщалось. Ослабление защиты считается наиболее значительным у лиц старше 65 лет (45) и ускоряется при латентной ЦМВ-инфекции (46). Наши результаты могут свидетельствовать о положительном влиянии ЦМВ-инфекции у взрослых на степень защиты. Таким образом, наши данные соответствуют сценарию, в котором латентная ЦМВ-инфекция имеет положительный эффект у взрослых и может стать вредной с возрастом.

Два исследования, в которых сообщалось о краткосрочном негативном влиянии латентной ЦМВ-инфекции на взрослых, принимали во внимание фактор ранее существовавшего иммунитета либо путем поправки на титры антител до вакцинации (24), либо путем изучения влияния латентной ЦМВ-инфекции на новая пандемическая вакцина (23). Однако эти исследования отличаются от нашего исследования типом вакцины и анализом реакции антител. Тернер и др. изучали кратное увеличение титров антител к гриппу до сезонной вакцинации с поправкой на предварительные титры до вакцинации (24).Они сообщили об отрицательном влиянии на кратное увеличение антител к гриппу в одном штамме трехвалентной вакцины у ЦМВ-серопозитивных взрослых с высокими уровнями анти-ЦМВ IgG по сравнению с ЦМВ-серонегативными взрослыми. Уолд и др. (23) также сообщили об отрицательном влиянии серопозитивности на ЦМВ у взрослых, исследуя тот же ответ на пандемическую вакцину h2N1pdm в 2009 г., что и мы. Однако они не учитывали вмешивающиеся факторы в анализе (23). Эти различия в данных о влиянии латентной ЦМВ-инфекции на ответ на противогриппозную вакцину в отсутствие ранее существовавшего иммунитета необъяснимы.Мы предполагаем, что дозировка вакцины и использование адъюванта могут быть причиной этих различий. Тернер и др. использовали половину рекомендуемой дозы (24). Точно так же моновалентная вакцина без адъюванта (47) использовалась в исследовании Wald et al., тогда как в нашем исследовании вакцина была дополнена адъювантом. Ожидается, что использование адъюванта MF59 активирует CD4+ Т-клетки и дополнительно усиливает выработку антител, тем самым вызывая более сильный иммунный ответ по сравнению с вакциной без адъюванта. В целом, возможно, что только с менее сильными противогриппозными вакцинами присутствует краткосрочный негативный эффект латентной ЦМВ-инфекции.

Корреляция более низкого ответа антител на новую вакцину против пандемического гриппа с возрастом указывает на ослабленный иммунный ответ, вызванный старением организма. Как правило, более низкий гуморальный ответ на вакцинацию против гриппа связан с пожилым возрастом (старше 60 лет). Интересно, что мы уже наблюдали влияние возраста в этой группе не пожилых людей (18–52 года), хотя и небольшое. Этот эффект возраста был обусловлен более низким иммунным ответом на грипп, начиная с 40-летнего возраста.Предполагается, что различия между возрастными группами в реакции на вакцинацию против гриппа могут также объясняться импринтингом HA (48). Импринтинг HA подразумевает, что иммунный ответ направлен на группу антигенов HA штамма гриппа, который впервые встречается в детстве. Однако это было не так, и импринтинг ГК можно было исключить как объяснение возрастных различий.

Аналогичные анализы были проведены для изучения влияния возраста и латентного ЦМВ на ответ на вакцинацию против сезонного гриппа в сезоне 2010–2011 гг. Сезонная вакцинация в 2010–2011 гг. содержала тот же штамм h2N1pdm, что и в сезон пандемии, и штамм h4N2 с антигенным дрейфом, серологический ответ которого в значительной степени совпадает с предыдущими штаммами h4N2 (49). Таким образом, оба сезонных штамма вызывают реакцию иммунологической памяти. Иммуностарение в основном влияет на иммунные реакции de novo (36, 37). В соответствии с этим влияние возраста на ответ на противогриппозную вакцину уменьшается после дальнейшей вакцинации тем же штаммом (34), что объясняет разные результаты в отношении влияния возраста между сезоном пандемии и сезоном 2010–2011 гг.Удивительно было обнаружить, что люди с высокими уровнями анти-ЦМВ IgG демонстрировали более высокий титр вируса гриппа и уровень защиты от сезонной вакцинации. Мы не можем исключить, что эти люди могут быть в целом продуцентами высоких антител, как ранее было показано для респираторно-синцитиального вируса и в ответ на другие респираторные вирусы (50). Кроме того, общая группа, продолжавшая сезон 2010–2011 гг. с исследованием, была меньше (90 667 n 90 668 = 128) и имела большее количество предыдущих вакцинаций, чем группа сезона пандемии (90 667 n 90 668 = 263), что усложняло скорректированную анализ.Различные результаты были получены при использовании коэффициента сероконверсии вместо коэффициента защиты в качестве определения респондента на сезонную вакцинацию. Положительного влияния группы с высокими уровнями анти-ЦМВ на уровень сероконверсии не наблюдалось (данные не показаны). Это показывает важность корректировки этих факторов в нашей статистической модели и настоятельно требует осторожности при интерпретации эффектов, вызванных ЦМВ, в небольших группах исследований или нескорректированных исследованиях, как сообщается в литературе.

Важными преимуществами нашего исследования по сравнению с другими являются использование нового штамма вакцины против гриппа, относительно большие группы субъектов исследования в сезон пандемии и скорректированный анализ с использованием модели GEE. Поскольку считается, что старение и латентная ЦМВ-инфекция влияют на иммунную систему как независимо, так и взаимодействуя друг с другом, разделение этих факторов при анализе имеет решающее значение (51). Ограничением исследования является то, что исследуемая популяция состоит из медицинских работников, ранее неоднократно вакцинированных против гриппа. Лица с неоднократными предыдущими вакцинациями против сезонного гриппа обычно показывают более высокие титры до вакцинации, чем лица, вакцинированные впервые (44). Даже в сезон пандемии сообщалось о перекрестной реактивности штамма h2N1pdm (52, 53).Вместе с потенциальным естественным контактом со штаммом h2N1pdm непосредственно перед исследованием это может объяснить обнаруживаемые титры до пандемической вакцинации в этом исследовании. Сезонная вакцинация 2009 г. за 3 недели до исследования в сезон пандемии действительно повысила предтитр пандемии (данные не представлены). Тем не менее, история вакцинации за последние годы, предшествовавшие испытанию вакцины субъектов исследования, была зарегистрирована и скорректирована в анализе. Важно отметить, что предварительные титры не влияли на результаты исследования, поскольку лица в нашем исследовании без обнаруживаемых предварительных титров ( n = 203) для вакцинации против пандемического гриппа показали сопоставимые результаты по влиянию ЦМВ-инфекции в сезон пандемии (данные не показаны). ).

Реакция человека на грипп сложна, и возникает вопрос, является ли вакцинация против гриппа лучшей моделью для изучения влияния латентной ЦМВ-инфекции на реакцию на вакцину. лучший дизайн исследования для этого вопроса. Тем не менее, мы считаем, что вакцинация против гриппа является наиболее актуальной из-за ее высокой общественной значимости. Поэтому знания о влиянии ЦМВ-инфекции на иммунный ответ гриппа имеют большое значение.

В заключение, мы использовали новый штамм противогриппозной вакцины для изучения влияния возраста и латентной ЦМВ-инфекции на иммунный ответ de novo на грипп. Мы действительно обнаружили уже нарушенный гуморальный ответ на вакцинацию у взрослых с возрастом, но латентная ЦМВ-инфекция не нарушила специфический гуморальный иммунный ответ. Таким образом, мы показываем, что ЦМВ-инфекция не сама по себе усиливает возрастное ослабление иммунитета, как это предполагалось, а во всяком случае может давать противоположные эффекты.Модель, в которой ЦМВ-инфекция укрепляет иммунную систему во взрослом возрасте, в то время как у пожилых людей ЦМВ-инфекция усиливает старение иммунной системы, может быть подходящей. Эти результаты важны для принятия решения об инвестировании в профилактику латентной ЦМВ-инфекции у здоровых людей с помощью таких стратегий, как вакцинация против ЦМВ.

Заявление об этике

Это исследование было проведено в соответствии с рекомендациями Надлежащей клинической практики с письменного информированного согласия всех субъектов.Все субъекты дали письменное информированное согласие в соответствии с Хельсинкской декларацией. Протокол был одобрен Центральным комитетом по исследованиям с участием человека в Нидерландах.

Вклад авторов

SB, DB и JB разработали концепцию исследования. С.Б., М.Х. и Р.Дж. выполнили лабораторные эксперименты. SB и AW провели статистический анализ. SB, AW, DB и JB интерпретировали данные и написали рукопись. Все авторы критически пересмотрели рукопись.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Финансирование

Работа выполнена при поддержке Министерства здравоохранения Нидерландов.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу http://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2018.00082/full#supplementary-material.

Каталожные номера

4. McElhaney JE, Kuchel GA, Zhou X, Swain SL, Haynes L. Т-клеточный иммунитет к гриппу у пожилых людей: патофизиологическая основа для разработки более эффективных вакцин. Фронт Иммунол (2016) 7:41. doi:10.3389/fimmu.2016.00041

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

5. Loubet P, Samih-Lenzi N, Galtier F, Vanhems P, Loulergue P, Duval X, et al. Факторы, связанные с неблагоприятными исходами среди взрослых, госпитализированных по поводу гриппа во Франции: трехлетнее проспективное многоцентровое исследование. J Clin Virol (2016) 79:68–73. doi:10.1016/j.jcv.2016.04.005

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

6.ван Эссен Г.А., Палаш А.М., Форлео Э., Федсон Д.С. Вакцинация против гриппа в 2000 г.: рекомендации и применение вакцины в 50 развитых и быстро развивающихся странах. Вакцина (2003) 21(16):1780–5. дои: 10.1016/S0264-410X(03)00072-0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

7. Goodwin K, Viboud C, Simonsen L. Реакция антител на вакцинацию против гриппа у пожилых людей: количественный обзор. Вакцина (2006) 24(8):1159–69. doi:10.1016/j.vaccine.2005.08.105

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

8. Пера А., Кампос С., Лопес Н., Хассун Ф., Алонсо С., Тарасона Р. и др. Иммуностарение: последствия для ответа на инфекцию и вакцинации у пожилых людей. Maturitas (2015) 82(1):50–5. doi:10.1016/j.maturitas.2015.05.004

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

9. Джефферсон Т., Ди Пьетрантонж С., Аль-Ансари Л.А., Феррони Э., Торнинг С., Томас Р.Э. Вакцины для профилактики гриппа у пожилых людей. Cochrane Database Syst Rev (2010) 2:CD004876. дои: 10.1002/14651858.CD004876.pub3

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

10. Аренс Р., Реммерсваль Э.Б., Бош Дж.А., ван Лиер Р.А. 5(й) Международный семинар по ЦМВ и иммуностарению – тень цитомегаловирусной инфекции на иммунологическую память. Eur J Immunol (2015) 45(4):954–7. doi:10.1002/eji.201570044

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

12. Кэннон М.Дж., Шмид Д.С., Хайд Т.Б.Обзор распространенности цитомегаловируса и демографических характеристик, связанных с инфекцией. Rev Med Virol (2010) 20(4):202–13. дои: 10.1002/rmv.655

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

13. Стоу Р.П., Козлова Е.В., Йетман Д.Л., Уоллинг Д.М., Гудвин Дж.С., Глейзер Р. Реактивация хронического герпесвируса происходит при старении. Exp Gerontol (2007) 42(6):563–70. doi:10.1016/j.exger.2007.01.005

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

14.Korndewal MJ, Mollema L, Tcherniaeva I, van der Klis F, Kroes AC, Oudesluys-Murphy AM, et al. Цитомегаловирусная инфекция в Нидерландах: серопревалентность, факторы риска и последствия. J Clin Virol (2015) 63:53–8. doi:10.1016/j.jcv.2014.11.033

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

15. Кэннон М.Дж., Хайд Т.Б., Шмид Д.С. Обзор выделения цитомегаловируса в жидкостях организма и связи с врожденной цитомегаловирусной инфекцией. Rev Med Virol (2011) 21(4):240–55.дои: 10.1002/rmv.695

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

17. Lustig A, Liu HB, Metter EJ, An Y, Swaby MA, Elango P, et al. Укорочение теломер, воспалительные цитокины и антицитомегаловирусные антитела следуют определенным возрастным траекториям у людей. Фронт Иммунол (2017) 8:1027. doi:10.3389/fimmu.2017.01027

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

18. Викби А., Йоханссон Б., Олссон Дж., Лёфгрен С., Нильссон Б.О., Фергюсон Ф.Расширение субпопуляций CD8 T-лимфоцитов периферической крови и связь с серопозитивностью к цитомегаловирусу у пожилых людей: шведское иммунное исследование NONA. Exp Gerontol (2002) 37 (2–3): 445–53. дои: 10.1016/S0531-5565(01)00212-1

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

19. Hadrup SR, Strindhall J, Køllgaard T, Seremet T, Johansson B, Pawelec G, et al. Продольные исследования клонально размноженных Т-клеток CD8 выявили сокращение репертуара, предсказывающее смертность, и увеличение числа дисфункциональных Т-клеток, специфичных к цитомегаловирусу, у очень пожилых людей. J Immunol (2006) 176(4):2645–53. doi:10.4049/jиммунол.176.4.2645

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

20. Аппай В., Роуленд-Джонс С.Л. Уроки изучения дифференцировки Т-клеток при персистирующей вирусной инфекции человека. Semin Immunol (2004) 16(3):205–12. doi:10.1016/j.smim.2004.02.007

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

21. McElhaney JE, Zhou X, Talbot HK, Soethout E, Bleackley RC, Granville DJ, et al.Неудовлетворенные потребности пожилых людей: как старение иммунитета, ЦМВ-инфекция, сопутствующие заболевания и слабость являются проблемой для разработки более эффективных вакцин против гриппа. Вакцина (2012) 30(12):2060–7. doi:10.1016/j.vaccine. 2012.01.015

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

22. Saurwein-Teissl M, Lung TL, Marx F, Gschösser C, Asch E, Blasko I, et al. Отсутствие выработки антител после иммунизации в пожилом возрасте: связь с клональной экспансией CD8(+)CD28(-) Т-клеток и дисбалансом продукции цитокинов Th2 и Th3. J Immunol (2002) 168(11):5893–9. doi:10.4049/jиммунол.168.11.5893

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

23. Wald A, Selke S, Magaret A, Boeckh M. Влияние инфекции цитомегаловируса человека (CMV) на иммунный ответ на вакцину против пандемического гриппа h2N1 2009 года у здоровых взрослых. J Med Virol (2013) 85(9):1557–60. дои: 10.1002/jmv.23642

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

24. Turner JE, Campbell JP, Edwards KM, Howarth LJ, Pawelec G, Aldred S, et al.Рудиментарные признаки иммуносенесценции у здоровых молодых людей с серопозитивным цитомегаловирусом. Age (Дордр) (2014) 36 (1): 287–97. дои: 10.1007/s11357-013-9557-4

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

25. Trzhonkowski P, Mysliwska J, Szmit E, Wieckiewicz J, Lukaszuk K, Brydak LB, et al. Ассоциация между цитомегаловирусной инфекцией, усиленным провоспалительным ответом и низким уровнем антигемагглютининов при противогриппозной вакцинации – влияние иммуностарения. Вакцина (2003) 21(25–26):3826–36. дои: 10.1016/S0264-410X(03)00309-8

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

26. Фраска Д., Диас А., Ромеро М., Ландин А.М., Бломберг Б.Б. Цитомегаловирусная (ЦМВ) серопозитивность снижает ответ В-клеток на противогриппозную вакцину. Вакцина (2015) 33(12):1433–9. doi:10.1016/j.vaccine.2015.01.071

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

27. Дерхованесян Э., Майер А.Б., Хенел К., МакЭлхани Дж.Е., Слагбум Э.П., Павелец Г.Латентная инфекция цитомегаловирусом связана с плохой реакцией памяти CD4 на коровые белки гриппа А у пожилых людей. J Immunol (2014) 193(7):3624–31. doi:10.4049/jиммунол.1303361

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

28. Alonso Arias R, Moro-García MA, Echeverría A, Solano-Jaurrieta JJ, Suárez-García FM, López-Larrea C. Интенсивность гуморального ответа на цитомегаловирус связана с фенотипическим и функциональным статусом иммунной системы. J Virol (2013) 87(8):4486–95. doi:10.1128/ОВИ.02425-12

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

29. den Elzen WP, Vossen AC, Cools HJ, Westendorp RG, Kroes AC, Gussekloo J. Цитомегаловирусная инфекция и реакция на вакцинацию против гриппа у пожилых жителей учреждений длительного ухода. Вакцина (2011) 29(29–30):4869–74. doi:10.1016/j.vaccine.2011.03.086

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

30.Хак К., Фулоп Т., Теддер Г., Джентльмен Б., Гарно Х., Менейли Г.С. и др. Цитомегаловирусная серопозитивность предсказывает снижение Т-клеточного, но не гуморального ответа на грипп у вакцинированных пожилых людей независимо от диабета 2 типа. J Gerontol A Biol Sci Med Sci (2016) 72(9):1163–70. doi:10.1093/gerona/glw216

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

31. Furman D, Jojic V, Sharma S, Shen-Orr SS, Angel CJ, Onengut-Gumuscu S, et al. Цитомегаловирусная инфекция усиливает иммунный ответ на грипп. Sci Transl Med (2015) 7(281):281ra43. doi:10.1126/scitranslmed.aaa2293

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

32. Strindhall J, Ernerudh J, Mörner A, Waalen K, Löfgren S, Matussek A, et al. Гуморальный ответ на вакцинацию против гриппа в зависимости от титров антител до вакцинации, истории вакцинации, серостатуса цитомегаловируса и соотношения CD4/CD8. Infect Dis (Лондон) (2016) 48(6):436–42. дои: 10.3109/23744235.2015.1135252

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

33.McElhany JE, Garneau H, Camous X, Dupuis G, Pawelec G, Baehl S, et al. Предикторы ответа антител на вакцинацию против гриппа у пожилых людей с диабетом 2 типа. BMJ Open Diabetes Res Care (2015) 3(1):e000140. doi: 10.1136/bmjdrc-2015-000140

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

34. Мостерин Хёппинг А., МакЭлхани Дж., Фонвилл Дж. М., Пауэрс Д. С., Бейер В.Э.П., Смит Д.Дж. Смешанные эффекты возраста и истории экспозиции в ответ на вакцинацию против гриппа. Вакцина (2016) 34(4):540–6. doi:10.1016/j.vaccine.2015.11.058

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

35. Beyer WE, Palache AM, Sprenger MJ, Hendriksen E, Tukker JJ, Darioli R, et al. Влияние повторной ежегодной вакцинации против гриппа на серологический ответ на вакцину у молодых и пожилых людей. Вакцина (1996) 14(14):1331–9. дои: 10.1016/S0264-410X(96)00058-8

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

37.Ланг П.О., Аспиналл Р. Иммуностарение и коллективный иммунитет: в условиях постоянно растущего старения населения нужно ли нам пересматривать схемы вакцинации? Expert Rev Vaccines (2012) 11(2):167–76. doi:10.1586/erv.11.187

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

38. Miller E, Hoschler K, Hardelid P, Stanford E, Andrews N, Zambon M. Заболеваемость пандемическим гриппом A h2N1 2009 года в Англии: поперечное серологическое исследование. Ланцет (2010) 375(9720):1100–8.дои: 10.1016/S0140-6736(09)62126-7

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

39. Luytjes W, Enouf V, Schipper M, Gijzen K, Liu WM, van der Lubben M, et al. Реакции HI, вызванные вакцинацией против сезонного гриппа, связаны с клинической защитой и с серопротекцией против негомологичных штаммов. Вакцина (2012) 30(35):5262–9. doi:10.1016/j.vaccine.2012.05.060

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

42.Wang GC, Dash P, McCullers JA, Doherty PC, Thomas PG. Разнообразие алфавита Т-клеточных рецепторов обратно коррелирует с уровнями патоген-специфических антител при цитомегаловирусной инфекции человека. Sci Transl Med (2012) 4(128):128ra42. doi:10.1126/scitranslmed.3003647

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

43. Derhovanessian E, Theeten H, Hähnel K, Van Damme P, Cools N, Pawelec G. Связанное с цитомегаловирусом накопление поздно дифференцированных Т-клеток CD4 коррелирует с плохим гуморальным ответом на вакцинацию против гриппа. Вакцина (2013) 31(4):685–90. doi:10.1016/j.vaccine.2012.11.041

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

44. Хуан К.А., Чанг С.К., Хуан Ю.С., Чиу Ч., Лин Т.И. Антительный ответ на трехвалентную инактивированную гриппозную вакцину у медицинского персонала, ранее вакцинированного и вакцинированного впервые. Научный представитель (2017) 7:40027. дои: 10.1038/srep40027

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

45.Кастилья Х., Мартинес-Баз И., Мартинес-Артола В., Рейна Г., Посо Ф., Гарсия Сенос М. и др. Снижение эффективности вакцины против гриппа со временем после вакцинации, Наварра, Испания, сезон 2011/12. Euro Surveill (2013) 18(5). doi:10.2807/ese.18.05.20388-en

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

46. Рид Р.Г., Гринберг Р.Н., Сегерстром С.К. Серостатус цитомегаловируса, воспаление и ответ антител на вакцинацию против гриппа у пожилых людей: сдерживающий эффект бета-блокады. Brain Behav Immun (2017) 61:14–20. doi:10.1016/j.bbi.2016.09.025

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

47. Chen WH, Winokur PL, Edwards KM, Jackson LA, Wald A, Walter EB, et al. Фаза 2 оценки безопасности и иммуногенности двух инактивированных пандемических моновалентных вакцин h2N1 у взрослых в качестве компонента плана США по обеспечению готовности к пандемии в 2009 г. Vaccine (2012) 30(28):4240–8. doi:10.1016/j.vaccine.2012.04.044

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

48.Гостик К.М., Эмброуз М., Воробей М., Ллойд-Смит Дж.О. Мощная защита от гриппа H5N1 и H7N9 посредством импринтинга детского гемагглютинина. Наука (2016) 354(6313):722–6. doi:10.1126/science.aag1322

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

49. Ann J, Papenburg J, Bouhy X, Rhéaume C, Hamelin MÈ, Boivin G. Молекулярная и антигенная эволюция вирусов гриппа человека A/h4N2 в Квебеке, Канада, 2009–2011 гг. J Clin Virol (2012) 53(1):88–92.doi:10.1016/j.jcv.2011.09.016

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

50. Оранж Дж. С., Дю В., Фолси А. Р. Терапевтический иммуноглобулин, отобранный по высокому титру антител к РСВ, также содержит высокие титры антител к другим респираторным вирусам. Фронт Иммунол (2015) 6:431. doi:10.3389/fimmu.2015.00431

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

51. Wertheimer AM, Bennett MS, Park B, Uhrlaub JL, Martinez C, Pulko V, et al.Старение и цитомегаловирусная инфекция по-разному и совместно влияют на разные субпопуляции циркулирующих Т-клеток у людей. J Immunol (2014) 192(5):2143–55. doi:10.4049/jиммунол.1301721

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

52. Wrammert J, Koutsonanos D, Li GM, Edupuganti S, Sui J, Morrissey M, et al. Антитела с широкой перекрестной реактивностью доминируют в ответе В-клеток человека на инфекцию пандемического вируса гриппа h2N1 2009 года. J Exp Med (2011) 208(1):181–93.doi:10.1084/jem.20101352

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

53. Центры по контролю и профилактике заболеваний. Реакция сывороточных перекрестно-реактивных антител на новый вирус гриппа A (h2N1) после вакцинации вакциной против сезонного гриппа. MMWR Morb Mortal Wkly Rep (2009) 58 (19): 521–4.

Реферат PubMed | Академия Google

Цитомегаловирус при беременности | СВЕЧЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Цитомегаловирус (ЦМВ), член группы вирусов герпеса, является наиболее частой причиной врожденной вирусной инфекции ^{1 , 2} и наиболее распространенной инфекционной причиной задержки развития и нейросенсорной тугоухости в Соединенных Штатах. ³ Во всем мире 1% всех живорожденных инфицированы ЦМВ. ЦМВ вездесущ, обладает высокой видоспецифичностью и, как и другие члены его семейства, поражает почти всех людей в какой-то момент их жизни. ⁴ Возраст заражения варьирует в зависимости от географических и социально-экономических факторов, что приводит к большим различиям в распространенности среди групп.

Естественная история ЦМВ-инфекции сложна и характеризуется пожизненной латентностью, перемежающейся эпизодами рецидивирующей инфекции после первичной инфекции.После первичной инфекции экскреция вируса из нескольких разных мест может сохраняться в течение нескольких недель или лет, прежде чем вирус станет латентным. Эпизоды рецидивирующей инфекции с возобновлением выделения часто представляют собой реактивацию латентного вируса, но также могут быть вызваны реинфекцией антигенно отличным штаммом ЦМВ. Независимо от стадии инфекции, большинство эпизодов ЦМВ-инфекции протекают бессимптомно и не представляют значительной угрозы для здоровья иммунокомпетентных хозяев. Однако инфицирование матери во время беременности может привести к серьезным необратимым последствиям для плода.Несмотря на потенциально разрушительный характер врожденной инфекции, эффективного лечения не существует.

МИКРОБИОЛОГИЯ

Цитомегаловирус является крупнейшим представителем семейства вирусов герпеса, которое также включает типы простого герпеса 1 и 2, вирус Эпштейна-Барр (EBV) и ветряную оспу. Его геном состоит из 240 килобаз двухцепочечной ДНК, кодирующей более 100 белков. ⁵ Вирус состоит из ядра размером 64 нм, окруженного икосаэдрическим капсидом размером 110 нм, состоящим из 162 капсомеров.Свободно нанесенная двухслойная липидная оболочка окружает слабо выраженный тегумент, который, в свою очередь, окружает вирусный капсид. Зрелая вирусная частица с оболочкой имеет диаметр примерно 200 нм. ⁶ Существует много антигенно различных штаммов вируса, но часто встречается перекрестная реактивность. Геномные исследования с использованием расщепления эндонуклеазами рестрикции показали, что средняя гомология между штаммами составляет 80%; однако распознаются тысячи различных штаммов. ⁷ Латентный ЦМВ был обнаружен в моноцитах, легких, селезенке, почках, секреторных железах, ⁸ и шейке матки. ⁹

Трехфазный цикл репликации ЦМВ, ограниченный клетками человека, характеризуется ранней, ранней и поздней фазами. ¹⁰ Подобно другим вирусам герпеса, каскадный синтез мРНК и белков, коррелирующий с тремя фазами цикла (названными α, β, γ соответственно), строго контролирует временную экспрессию вирусного генома. ^{7 , 11} Цикл репликации относительно длинный, требуется примерно 96 часов для высвобождения потомства вируса из клеток, инфицированных in vitro. Репликация вирусной ДНК происходит в ядре инфицированной клетки, а оболочка приобретается путем почкования через ядерную мембрану в цитоплазматическую вакуоль. ¹²

Цитопатология ЦМВ характеризуется увеличением и округлением клеток, базофильными внутриядерными включениями и эозинофильными парануклеарными включениями, которые часто придают инфицированным клеткам характерный вид «совиного глаза». ¹² Помимо продуктивной инфекции, которая приводит к высвобождению активных вирусных частиц, ЦМВ может вызывать латентную инфекцию, при которой вирусная ДНК сохраняется в организме хозяина без активной репликации.

Рост вируса в культуре тканей может быть трудным и трудоемким. Фибробласты человека являются единственными клетками, в которых ЦМВ надежно растет in vitro, несмотря на тропность вируса к эпителиальным клеткам in vivo. ² Характерный цитопатический эффект развивается в течение нескольких часов или недель после инокуляции в зависимости от количества ЦМВ, присутствующего в образце. ¹³

ИММУНОЛОГИЯ

Контроль хозяина над репликацией ЦМВ включает как неспецифические, так и специфические защитные механизмы.Индукция естественных клеток-киллеров и индукция интерферона сразу после заражения ЦМВ, по-видимому, являются наиболее важными аспектами неспецифической защиты хозяина от вируса. Наиболее важные аспекты специфической иммунной защиты от ЦМВ опосредованы клетками, поскольку функционирующие Т-лимфоциты необходимы для контроля латентного вируса. ¹⁴ Гуморальный иммунный ответ на ЦМВ, по-видимому, не является важной защитой от инфекции. Например, плод может быть инфицирован в результате внутриутробной передачи ЦМВ от женщины, о которой известно, что антитела присутствовали до зачатия, а новорожденный может быть инфицирован ЦМВ через грудное молоко, несмотря на наличие пассивно приобретенных материнских антител.Следовательно, наличие антител следует рассматривать не как меру иммунитета, а скорее как маркер предшествующей инфекции ЦМВ. Хотя специфические антитела не могут предотвратить заражение ЦМВ, они, по-видимому, снижают его патогенность. ⁷

ПЕРЕДАЧА

Сохранение большого резервуара ЦМВ в человеческом населении в отсутствие каких-либо известных нечеловеческих переносчиков представляет собой чрезвычайно успешную форму паразитизма. Этот успех обусловлен длительной персистенцией вирусной экскреции после первичной инфекции, многочисленными очагами вирусной экскреции, прерывистой реактивацией и экскрецией вируса, а также относительно вялым течением инфекции, что позволяет иммунокомпетентному хозяину жить с вирусом неопределенное время. Прямая или непрямая горизонтальная передача происходит главным образом при контакте со слюной, мочой, цервикальным или вагинальным секретом, спермой, грудным молоком или кровью. ^{15 , 16 , 17}

Тесный или интимный контакт между людьми обычно необходим для передачи вируса. Соответственно, к распространению ЦМВ причастны половой путь, грудное вскармливание и использование детских садов. Серопозитивность выше среди лиц с несколькими половыми партнерами и заболеваниями, передающимися половым путем. ¹⁸ Грудное вскармливание является потенциальным источником передачи инфекции новорожденному, поскольку серопозитивные женщины могут выделять вирус с грудным молоком. ¹⁹ Детские сады способствуют распространению ЦМВ, способствуя тесному контакту детей, многие из которых выделяют вирус. ^{20 , 21 , 22} Дети раннего возраста, в частности, являются основным источником инфекции. Адлер и его коллеги ²³ обнаружили, что от 20% до 40% детей ясельного возраста, посещающих детские учреждения, выделяют ЦМВ.Горизонтальная передача ЦМВ от ребенка к ребенку происходит путем переноса вируса со слюной на руки и игрушки. ^{24 , 25}

Перинатальная передача ЦМВ происходит посредством нескольких механизмов. Трансплацентарная передача вируса внутриутробно и воздействие на плод ЦМВ, секретируемого во влагалище во время прохождения через родовые пути во время родов, являются основными путями вертикальной передачи. В постнатальном периоде инфекция может передаваться через грудное молоко или при прямом контакте между людьми. ²⁶ В отличие от in utero (врожденная) инфекция, околородовая инфекция (интранатальная или послеродовая) не наносит серьезного вреда развитию новорожденного, за исключением детей с массой тела менее 1500 г. ²⁷

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ

Распространенность антител к цитомегаловирусу увеличивается с возрастом, но характер их приобретения сильно различается среди населения в зависимости от географических и социально-экономических факторов. В целом распространенность ЦМВ-инфекции выше в развивающихся странах и среди лиц с низким социально-экономическим статусом.В Соединенных Штатах от 40% до 60% детей с низким социально-экономическим статусом инфицированы к возрасту 5 лет, а к возрасту от 20 до 25 лет почти от 80% до 100% заразились. ²⁸ Для сравнения, только от 40% до 60% взрослых людей среднего и высшего класса являются серопозитивными по ЦМВ. ²⁹ Инфекция передается постоянно на протяжении всей жизни, так что к возрасту 60–70 лет большинство людей являются серопозитивными в отношении ЦМВ независимо от социально-экономического статуса. ²⁸

Процент серологически восприимчивых женщин репродуктивного возраста также варьируется в зависимости от географического положения и социально-экономического статуса: более низкие показатели восприимчивости в Швеции и более высокие показатели в Соединенном Королевстве и Соединенных Штатах.В среднем показатели восприимчивости колеблются от 28% до 48% среди населения со средним уровнем дохода в развитых странах. ^{30 , , , , 32 , 33 , , 34 Материнская серопозитивность также коррелировала с многогранной, старшему возрасту, первой беременности до 15 лет и большее общее число половых партнеров. 18 Проспективные исследования женщин в Соединенных Штатах показывают, что частота заражения ЦМВ среди женщин детородного возраста со средним и высоким социально-экономическим статусом составляет примерно 2% в год по сравнению с 6% среди женщин с низким социально-экономическим статусом. 35 Поскольку самый высокий уровень сероконверсии происходит в возрасте от 15 до 35 лет, а значительная часть репродуктивного населения восприимчива, вероятность того, что первичная инфекция совпадает с беременностью, относительно высока. 36}

Исследования заражения ЦМВ во время беременности в таких разных регионах, как Техас, Алабама, Великобритания и Швеция, выявили аналогичные показатели от 0,7% до 3,7% пренатальной первичной инфекции среди восприимчивых женщин. ²⁹ Факторы риска сероконверсии во время беременности включают молодой возраст матери, наличие дома маленьких детей, ³⁷ наличие дома детей в возрасте от 12 до 18 лет, ²⁹ и небелую расу. ³⁸

Особое беспокойство вызывает риск для серонегативных матерей, воспитывающих детей в детских садах, а также серонегативных работников детских садов, которые забеременеют, поскольку в детских садах были зарегистрированы высокие показатели передачи ЦМВ. ³⁹ Исследования показали, что родители детей, посещающих детские сады, более склонны к сероконверсии, чем родители, дети которых не посещают детские сады. ^{23 , 40} Adler и коллеги ⁴¹ обнаружили, что 30% матерей детей ясельного возраста, инфицированных в детских садах, заразились сами в течение 1 года по сравнению с только 3% матерей неинфицированных малышей.Таким образом, рождение детей в возрасте до 3 лет с ЦМВ-инфекцией, полученной в детском саду, является важным фактором риска материнского заражения ЦМВ. Работники дневного ухода также подвергаются повышенному риску заражения ЦМВ. Adler и соавт. ⁴² сообщили о годовой частоте сероконверсии в 11% для работников дневного стационара по сравнению с 2,2% для сотрудников больниц того же возраста, расы и семейного положения. Для женщин, работающих с детьми младше 3 лет, риск первичного инфицирования возрастает до 30% в год. ³⁹

Работники больниц, контактирующие с новорожденными, детьми или пациентами с ослабленным иммунитетом, также могут подвергаться повышенному риску первичной ЦМВ-инфекции. Хотя в нескольких исследованиях была обнаружена тенденция к более высокому уровню сероконверсии среди работников больниц, контактировавших с пациентами из группы высокого риска, четкая взаимосвязь не установлена. Yeager ⁴³ задокументировал уровень сероконверсии 4,1% и 7,7% в год для неонатальных и педиатрических медсестер, соответственно, по сравнению с 0% для внебольничных работников.Точно так же Фридман и его коллеги ⁴⁴ обнаружили, что уровень сероконверсии среди персонала детской больницы выше среди сотрудников, контактировавших с пациентами, по сравнению с теми, кто не контактировал с пациентами. Тем не менее, два других когортных исследования не смогли обнаружить существенно различающихся показателей сероконверсии среди неонатальных медсестер, других медицинских работников и беременных женщин в сообществе. ^{45 , 46} Учитывая совокупность данных, педиатрический уход или уход за трансплантатами не обязательно следует рассматривать как профессиональный риск инфицирования ЦМВ.

Частота и тяжесть внутриутробной инфекции варьируются в зависимости от того, перенесла ли мать первичную или рецидивирующую ЦМВ-инфекцию во время беременности. На рисунке 1 представлена ​​блок-схема, которая подчеркивает более высокий уровень заболеваемости, более высокий уровень симптоматической врожденной инфекции и худший прогноз врожденной инфекции среди младенцев, подвергшихся первичной инфекции, по сравнению с рецидивирующей материнской инфекцией. Приблизительно от 1% до 4% серонегативных беременных женщин переносят первичную ЦМВ-инфекцию во время беременности. ²⁹ Частота инфицирования плода после первичного инфицирования матери составляет от 30% до 50%. ^{33 , 35} При рождении у 10% этих врожденно инфицированных детей обнаруживаются признаки болезни включения ЦМВ (CID). Остальные 90% этих врожденно инфицированных младенцев при рождении не имеют симптомов; однако даже у 10–15% детей, у которых не было симптомов при рождении, наблюдаются долгосрочные последствия. ^{3 , 47}

Напротив, рецидив материнской инфекции во время беременности, встречающийся с частотой от 1% до 14% среди серопозитивных женщин, встречается чаще, чем первичная материнская инфекция во время беременности. Однако, в отличие от первичной материнской инфекции, только от 0,2% до 2% рецидивирующих инфекций вызывают врожденную инфекцию, и неонатальные последствия этих врожденных инфекций, как правило, менее тяжелые. Более 99% младенцев, врожденно инфицированных после рецидива материнского заболевания, при рождении не имеют симптомов.Бессимптомные новорожденные могут по-прежнему испытывать долгосрочные последствия, но с более низкой частотой (от 5% до 10%), чем у врожденно инфицированных во время первичной материнской инфекции. ³

МАТЕРИНСКАЯ ИНФЕКЦИЯ

Симптомы и признаки

У большинства иммунокомпетентных взрослых первичная или рецидивирующая инфекция ЦМВ протекает бессимптомно и самокупируется. Симптоматические люди могут иметь заболевание, похожее на мононуклеоз, подобное заболеванию, вызванному ВЭБ. Болезнь длится от нескольких дней до нескольких недель и характеризуется лихорадкой, сильной усталостью, миалгией, легким фарингитом, кашлем, тошнотой, диареей и головной болью.Повышение температуры до 39–40°C не является редкостью и может длиться более 2 недель. Усталость и недомогание могут сохраняться в течение 4 недель и дольше. ¹² Физикальное обследование показывает шейную или генерализованную лимфаденопатию. Редко может развиться гепатомегалия, спленомегалия или сыпь. Желтуха бывает редко. У 90% пациентов с ЦМВ-мононуклеозом уровень печеночных ферментов умеренно повышен и может оставаться ненормальным в течение нескольких месяцев. Во время беременности лабораторные отклонения, указывающие на острую инфекцию, включают лимфопению или лимфоцитоз, связанный с атипичными лимфоцитами, и тромбоцитопению. ²⁶

Дифференциальный диагноз ЦМВ-мононуклеоза включает мононуклеоз ВЭБ, первичную инфекцию вирусом иммунодефицита человека и токсоплазмозную инфекцию. ЦМВ-гепатит необходимо дифференцировать от гепатита, вызванного вирусом гепатита А, В или С. Мононуклеоз, вызванный ЦМВ, с меньшей вероятностью вызывает тяжелый фарингит, тонзиллит или значительную спленомегалию, и он не продуцирует гетерофильные антитела по сравнению с EBV-индуцированным мононуклеозом. ⁴⁸

Лабораторная диагностика

Преимущества и недостатки лабораторных тестов, используемых для диагностики ЦМВ, представлены в таблице 1. Лабораторные исследования являются полезным дополнением к клиническим данным, но, к сожалению, они не могут окончательно отличить первичную инфекцию от рецидивирующей. Лабораторная диагностика ЦМВ-инфекции основывается на серологических признаках инфекции и прямой идентификации ЦМВ. Отличие первичного ЦМВ от рецидивирующего основано на серологии материнского ЦМВ, поскольку выделение вируса из мочи, глотки или генитальных выделений может происходить как при первичном, так и при рецидивирующем заболевании. Определение роли ЦМВ в клинических условиях затруднено, потому что многие взрослые без анамнеза симптоматического заболевания серопозитивны к ЦМВ-иммуноглобулин G (IgG), а прерывистое выделение ЦМВ может происходить в течение многих лет после первичной инфекции и не иметь никакого отношения к болезни. .Ни присутствие антител IgG, ни экскреция вируса не определяют недавнюю инфекцию. Таким образом, для точного диагноза необходима комбинация лабораторных тестов, интерпретируемых в клиническом контексте.

Таблица 1. Тесты, используемые для обнаружения ЦМВ инфекции *

Вирусная культура

5

5

5

Демонстрация недавней инфекции Seroconversion

Serum

5

Демонстрация острого инфекции

ЦМВ, цитомегаловирус; ЦСЖ, спинномозговая жидкость; IgG, иммуноглобулин G; IgM, иммуноглобулин М; EBV, вирус Эпштейна-Барр
(адаптировано из Rawlinson WD: Диагностика цитомегаловирусной инфекции и заболевания человека. Pathology 31:110, 1999.)

Ранее для диагностики первичной ЦМВ-инфекции использовали повышение титра анти-ЦМВ-антител за счет фиксации комплемента. Однако более эффективный и точный иммуноферментный анализ (ИФА) заменил тест связывания комплемента. Серологический диагноз основывается на выявлении паттернов иммуноглобулинов M (IgM) и IgG, соответствующих первичной инфекции. Наличие IgM, первоначальный гуморальный ответ на инфекцию, указывает на первичную инфекцию, но его следует интерпретировать с осторожностью, поскольку анти-ЦМВ IgM можно обнаружить в течение 2 лет у 5% людей после первичной инфекции.Реинфекция и реактивация вируса связаны с положительным IgM и/или повышением титра связывающих комплемент антител примерно в 30% случаев. Иногда биологические ложноположительные результаты могут возникать из-за перекрестной реактивности с антителами, связанными с EBV или аутоиммунными заболеваниями. ⁴⁹ В среднем определение специфических к ЦМВ антител IgM с помощью ИФА имеет чувствительность только 75% для первичной инфекции. Это оставляет 25% женщин с первичной ЦМВ без определяемых уровней IgM и ложноотрицательным результатом. ⁵⁰

Демонстрация сероконверсии антител IgG или четырехкратное увеличение титра антител CMV-IgG в образцах, собранных с интервалом от 2 до 4 недель и протестированных в одно и то же время, часто считается золотым стандартом для диагностики первичной ЦМВ-инфекции, но, как и определение IgM , не всегда точен. В некоторых случаях нарастание титра антител может задерживаться до 4 недель с момента острого заболевания. ⁵¹

Тесты на авидность можно использовать в дополнение к ИФА. Антитела IgG с низкой авидностью вырабатываются на ранних стадиях инфекции и могут использоваться в качестве еще одного маркера недавней первичной инфекции.Совпадение между антителами IgG хозяина и антигенами-мишенями улучшается по мере того, как хозяин реагирует на патоген. Эта характеристика использовалась для датирования острой инфекции с использованием индекса авидности (AI). ⁵² ИА менее 30% свидетельствует о недавней первичной инфекции (менее 3 месяцев). AI от 30% до 50%, возможно, связан с недавней инфекцией, а AI более 50% несовместим с недавней первичной инфекцией. ⁵³ Тесты на авидность обычно используются в качестве дополнения к ИФА, поскольку они технически более сложны в выполнении и трудоемки. ⁵⁴

Диагностика рецидивирующей ЦМВ-инфекции зависит от выделения вируса из мочи, слюны или шейки матки, а не от серологических методов, поскольку уровни антител обычно не изменяются у иммунокомпетентного хозяина. Прямое обнаружение вируса осуществляется с помощью вирусной культуры, амплификации нуклеиновых кислот, прямого флуоресцентного теста на антитела и, реже, путем обнаружения антигена pp65 в крови. ⁴⁹

Вирусный посев можно проводить с мочой, лейкоцитарной пленкой периферических клеток, образцами бронхоальвеолярного лаважа, аспиратом из носоглотки, смывами из горла, спермой, цервикальным и вагинальным секретом, калом, слезами, амниотической жидкостью и грудным молоком. Образцы для культивирования следует инокулировать на клетки как можно скорее после сбора, предпочтительно в течение 4 часов. Образцы, взятые в нерабочее время, или образцы, отправленные в другие лаборатории для посева, могут храниться при 4°C до 1 недели, но их выход снижается. Через 10–14 дней после инокуляции в инфицированных клетках наблюдается цитопатический эффект, хотя для получения отрицательного результата требуется 21–28 дней инкубации. К сожалению, вирусная культура сложна, дорога и требует много времени, для получения окончательных результатов требуется до 4 недель.Продолжительность времени, необходимого для диагностики с помощью посева, может повлиять на принятие клинического решения, особенно в случае беременности.

Прямой флуоресцентный тест на антитела обеспечивает более быстрое обнаружение ЦМВ. Этот метод основан на ограниченной культуре вируса, но вирусные антигены могут быть обнаружены на поверхности клеток в течение 48 часов. ⁵⁵ Вирус центрифугируют на монослоях клеточных культур, хранящихся в небольших флаконах с оболочкой под покровным стеклом, и инкубируют от 24 до 48 часов. Добавляют пул моноклональных антител к немедленным ранним и ранним антигенам и вторичное антитело, конъюгированное с флуоресцеином, и очаги инфекции идентифицируют с помощью флуоресцентного микроскопа. ⁵⁶ По сравнению с вирусной культурой этот метод имеет чувствительность от 80% до 90% и специфичность от 95% до 100%.

Амплификация нуклеиновых кислот с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) является новейшим и наиболее многообещающим быстрым методом обнаружения вируса. Этот метод требует специфических праймеров, комплементарных последовательностям ДНК по обе стороны от целевого сегмента ДНК ЦМВ.Одна копия гена может быть амплифицирована до 1 миллиона раз. ⁵⁷ ПЦР имеет чувствительность от 80% до 100% по сравнению с культурой; однако эта высокая чувствительность может привести к ложноположительным результатам, основанным на амплификации посторонних вирусных контаминантов или дефектных неинфекционных вирусных частиц. ПЦР также можно использовать для количественного определения уровней вируса. ⁴⁹

Таким образом, первичную и рецидивирующую ЦМВ-инфекцию можно различить только с помощью серологических исследований. Сероконверсия CMV-специфических IgG-антител из отрицательных в положительные является отличительной чертой первичной инфекции, но, к сожалению, образцы до инфекции редко доступны в обычной клинической практике.IgG-антитела ЦМВ могут указывать либо на прошлую, либо на текущую инфекцию, и один высокий титр не помогает определить разницу. Повышение титра от низкого до очень высокого титра в двух образцах сыворотки, полученных с интервалом в 2–3 недели, свидетельствует о недавней первичной инфекции, но не является диагностическим признаком, поскольку рецидивирующая инфекция также может повышать титр антител. Наличие антител CMV-IgM предполагает недавнюю первичную ЦМВ-инфекцию, ⁵⁸ , но, опять же, результаты следует интерпретировать с осторожностью, поскольку антитела IgM могут сохраняться в течение 10–12 недель или дольше после первичной инфекции. ⁵⁹

ВРОЖДЕННАЯ ИНФЕКЦИЯ

Врожденная ЦМВ-инфекция возникает путем гематогенного распространения в плаценту с последующим плацентарным инфицированием и последующей инфекцией плода. Передача может произойти в любое время во время беременности. Влияние гестационного возраста на момент заражения матери ЦМВ-инфекцией не столь очевидно, как при других врожденных инфекциях. Однако наихудшие последствия для плода были связаны с инфекцией в первом триместре, ^{26 , 48} , а клинически значимые нарушения чаще связаны с первичной инфекцией до 27 недель беременности. ³⁵ Младенцы, рожденные от матерей, инфицированных на ранних сроках беременности, также с большей вероятностью будут малы для гестационного возраста и будут иметь микроцефалию и внутричерепные кальцификаты, в то время как дети, рожденные от матерей, инфицированных на более поздних сроках беременности, с большей вероятностью будут иметь гепатит, пневмонию, пурпуру и тяжелая тромбоцитопения. ⁶⁰ Как отмечалось ранее, первичная материнская инфекция чаще приводит к внутриутробной передаче, чем рецидивирующая инфекция.

Пренатальная диагностика

Несмотря на распространенность первичной материнской ЦМВ-инфекции и значительный риск осложнений для потомства инфицированных матерей, рутинный пренатальный скрининг матерей не рекомендуется, поскольку не существует надежного и простого метода диагностики внутриутробной инфекции.К сожалению, пациенты часто должны принимать решения относительно ведения беременности, основываясь только на эмпирических цифрах риска.

Поскольку большинство первичных и рецидивирующих инфекций протекают бессимптомно, диагноз ЦМВ-инфекции во время беременности часто не ставится. Подозрение на материнскую инфекцию должно быть подтверждено соответствующими серологическими тестами, поскольку выявление первичной или рецидивирующей инфекции имеет решающее значение для предсказания неонатального прогноза. Сероконверсию или рост титров IgG или IgM часто трудно выявить, поскольку большинство женщин не знают свой серологический статус по ЦМВ до беременности.Парные образцы, анализируемые с интервалом от 1 до 4 недель, могут показывать рост титров, но время, необходимое для этого диагностического теста, не позволяет быстро принять клиническое решение. Тестирование авидности IgG может помочь в диагностике первичного ЦМВ, но эти тесты, как правило, доступны только в исследовательских лабораториях.

Прямая диагностика внутриутробной инфекции затруднена, и нет единого мнения относительно золотого стандарта диагностики. Клиническое суждение лежит в основе точного диагноза. Интеграция материнских симптомов, физикальных данных и серологии вместе с посевом амниотической жидкости и/или результатами ПЦР, определением IgM плода и данными УЗИ составляют основу пренатальной диагностики.К сожалению, окончательный диагноз плода часто можно поставить только при вскрытии или родоразрешении.

ВЫДЕЛЕНИЕ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСА ИЗ АМНИОТИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ.

Первая пренатальная диагностика ЦМВ-инфекции плода была проведена в 1971 г. путем выделения вируса из амниотической жидкости. ⁶¹ Поскольку эпителий почечных канальцев является основным местом репликации вируса, инфицированный плод предположительно выделяет ЦМВ в амниотическую жидкость с мочой плода. ⁶² Исследования подтвердили полезность культур амниотической жидкости для выявления внутриутробной инфекции, и многие считают культуру амниотической жидкости оптимальным местом для пренатальной диагностики врожденной инфекции. ^{63 , 64} Анализ амниотической жидкости после 20 недель беременности рекомендуется для уменьшения количества ложноотрицательных результатов посева. Чувствительность посева ЦМВ амниотической жидкости колеблется от 80% до 100%, ^{64 , 65 , 66} , а специфичность близка к 100%. ⁶⁵ Недавно в качестве быстрого средства обнаружения была добавлена ​​ПЦР амниотической жидкости, но результаты следует интерпретировать с осторожностью из-за возможных ложноположительных результатов.

ЗАБОР ВОРУЗИН ХОРИОНА.

Проба ворсин хориона (CVS) была предложена в качестве варианта диагностики врожденной ЦМВ в первом триместре. Диагностика внутриутробной ЦМВ-инфекции в первом триместре позволит более раннее и безопасное прерывание беременности по желанию пациентки. Поскольку вирус, по-видимому, первоначально заражает плаценту с последующей амплификации и проникновением к плоду, ⁶⁷ плацентарная ткань теоретически является потенциальным источником для выявления внутриутробной инфекции.Однако существуют ограниченные данные о чувствительности и специфичности культуры или ПЦР плацентарной ткани или того и другого. Hogge и коллеги ⁶⁸ выполнили CVS при четырех из шести беременностей, осложненных первичной материнской ЦМВ-инфекцией. Все четверо имели отрицательные результаты ПЦР, которые были подтверждены при рождении отрицательными культурами мочи новорожденных. Необходимы дополнительные исследования, прежде чем CVS будет рутинно использоваться для диагностики ЦМВ-инфекции в первом триместре.

КОРДОЦЕНТЕТ ДЛЯ СЕРОЛОГИИ ПЛОДА.

Иммунная система плода способна к устойчивому ответу на определенные антигенные стимулы к 22-й неделе беременности, и для диагностики некоторых врожденных инфекций использовалась оценка сыворотки плода на наличие специфических для организма IgM.Однако производство специфических IgM, по-видимому, связано с инфекционным организмом. Например, хотя большинство плодов с врожденной инфекцией краснухи продуцируют специфические IgM через 22 недели, ⁶⁹ только 15% плодов с врожденным токсоплазмозом продуцируют специфические IgM между 24 и 29 неделями. ⁷⁰ Lynch и соавт. ⁷¹ обнаружили, что хотя уровни общего IgM были повышены у инфицированных плодов, отобранных на 21 и 23 неделе беременности, CMV-специфические IgM присутствовали только у одного из пяти протестированных плодов.Это контрастирует с распространенностью от 50% до 95% среди инфицированных новорожденных ⁷² и, вероятно, свидетельствует о незрелости иммунной системы плода в этом гестационном возрасте.

Несмотря на изменчивость продукции IgM плода, определение специфичных к ЦМВ IgM с помощью ИФА можно попытаться провести в крови плода, полученной с помощью кордоцентеза. Для повышения чувствительности этого анализа и исключения ложноположительных результатов, связанных с ревматоидным фактором, сыворотку следует предварительно абсорбировать модифицированным препаратом стафилококкового протеина А. ⁵⁰ Несколько исследований, посвященных диагностической ценности фетальных CMV-специфических IgM, дали разные результаты. Hogge и коллеги ⁶⁸ провели кордоцентез вместе с амниоцентезом у трех беременных женщин с первичной инфекцией ЦМВ у матери. По сравнению с неонатальным посевом все три результата кордоцентеза были неверными: два ложноотрицательных и один ложноположительный в сроке от 22,5 до 25 недель. Напротив, Hohlfeld и его коллеги ⁶⁴ сообщили только о двух ложноотрицательных результатах и ​​ни об одном ложноположительном результате у 16 ​​обследованных пациентов.Примечательно, что в обеих сериях диагноз был точно поставлен с помощью амниоцентеза, а определение IgM плода дало мало дополнительной информации. Истинная чувствительность и специфичность определения IgM плода неизвестны, но в небольших сериях чувствительность составляет от 69% до 75%. ^{65 , 73} На основании этих данных становится очевидным, что только IgM плода нельзя использовать для исключения или подтверждения врожденной ЦМВ-инфекции.

Хотя определение IgM плода может не дать полезной диагностической информации, кровь плода, полученная при кордоцентезе, может дать прогностическую информацию, если ее отправляют для оценки гематологических и печеночных параметров.Экстремальная тромбоцитопения, анемия или повышенные показатели функции печени, зарегистрированные в крови плода, указывают на более тяжелое заболевание; однако, как эти параметры соотносятся с детскими недостатками, остается неизвестным. ⁶⁴

УЗИ.

Часто подозрение на врожденную ЦМВ-инфекцию возникает из-за аномальных результатов при обычном акушерском УЗИ. Расширение желудочков, микроцефалия, церебральные кальцификации и водянка считаются подозрительными на ЦМВ-инфекцию. Эта информация получена из серии случаев, в которых оценивались плоды матерей с подтвержденным первичным цитомегаловирусом или плоды с аномальными результатами при обычном УЗИ, которые привели к обследованию на врожденную инфекцию.Ультразвуковые данные, связанные с ЦМВ-инфекцией, разнообразны и могут меняться со временем у данного плода. Например, могут исчезнуть асцит, перикардиальный или плевральный выпот; однако это не обязательно предсказывает улучшение прогноза. ^{62 , 71} Любой плод с признаками необъяснимой водянки следует обследовать на ЦМВ. ⁷¹ Аномалии, такие как дилатация желудочков, олигогидрамнион, ⁷¹ перикардиальные выпоты, ⁶² водянка и асцит, подтвержденные ультразвуком, были связаны с более тяжелыми синдромами. ⁶⁴

ОГРАНИЧЕНИЯ ПРЕНАТАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ.

Хотя культура амниотической жидкости чувствительна, ее использование в качестве единственного метода диагностики проблематично. ПЦР, примененная к образцам амниотической жидкости, дополнительно повышает чувствительность анализа амниотической жидкости и обеспечивает более быструю диагностику. Однако из-за сообщений о ложноотрицательных результатах посева амниотической жидкости и ложноположительных результатов ПЦР амниотической жидкости сочетание амниоцентеза и забора крови плода может обеспечить оптимальные средства для диагностики ЦМВ-инфекции плода.

Кордоцентез также позволяет получить кровь плода для анализа с целью определения прогноза плода. Гематологические признаки системной инфекции связаны с худшим прогнозом. ⁷⁴ Точно так же отклонения на УЗИ указывают на неблагоприятный прогноз; тем не менее, несколько случаев в литературе указывают на то, что системная цитомегаловирусная инфекция плода не всегда приводит к тяжелой инвалидности новорожденного. ^{63 , 75 , 76} Таким образом, консультирование матери относительно возможного неблагоприятного прогноза для ее ребенка должно быть оформлено соответствующим образом.Необходимо дальнейшее исследование для определения показателей плода, позволяющих прогнозировать тяжелую инвалидность.

Неонатальная диагностика врожденной инфекции

При рождении у большинства ЦМВ-инфицированных младенцев симптомы отсутствуют, и только около 10% обнаруживают признаки ЦИД. Клинические признаки CID чаще всего включают гепатоспленомегалию, микроцефалию, желтуху и петехии. Гепатоспленомегалия обусловлена ​​экстрамедуллярным кроветворением и легким гепатитом, который обычно связан с повышением активности печеночных ферментов и прямой и непрямой гипербилирубинемией.Петехии являются результатом тромбоцитопении и обычно проходят в течение от нескольких недель до месяцев. Другие менее распространенные признаки включают пурпуру, пневмонию, хориоретинит, церебральные кальцификации, гемолитическую анемию и паховые грыжи у мужчин. ¹³

Поскольку признаки и симптомы симптоматической ЦМВ-инфекции у новорожденных часто совпадают с симптомами других заболеваний новорожденных, для окончательного диагноза требуется лабораторное исследование. Выделение вируса у младенцев в течение первых 3 недель жизни считается доказательством врожденной инфекции и наиболее чувствительным методом диагностики.Обычным местом выделения является моча, но вирус также выделяют из спинномозговой жидкости, слюны, лейкоцитарной пленки, образцов биопсии или ткани вскрытия. ⁷⁷

Прогноз

Частота и тяжесть последствий у врожденно инфицированных младенцев связаны с наличием или отсутствием симптомов при рождении и стадией (первичной или рецидивирующей) материнской ЦМВ-инфекции, перенесенной во время беременности.

СИМПТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОТИВ БЕССИМПТОМАТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ ПРИ РОЖДЕНИИ.

В таблице 2 представлена ​​частота осложнений у младенцев с симптомами по сравнению с бессимптомными младенцами при рождении. Прогноз для младенцев с CID при рождении неблагоприятный. Более 90% младенцев с симптомами имеют серьезные последствия, такие как смерть (5,8%), хориоретинит (20,4%), нейросенсорная тугоухость (58%) и умственная отсталость (55%). Boppana и соавт., ⁷⁸ на основании данных 106 новорожденных с симптоматической врожденной ЦМВ-инфекцией подтвердили мультисистемный характер заболевания и связанные с ним заболеваемость и смертность.Клинико-лабораторные отклонения свидетельствовали о поражении гептобилиарной, кроветворной и центральной нервной систем у большинства обследованных детей первого месяца жизни. Более двух третей этих младенцев имели по крайней мере один неонатальный признак заболевания центральной нервной системы ( например, микроцефалия, вялость/гипотония, плохое сосание, судороги). Было обнаружено, что эти признаки коррелируют с умственной отсталостью у детей школьного возраста. ⁷⁴

Таблица 2. Sequelae у детей После врожденной инфекции CMV в соответствии с симптомами при рождении * и типа материнской инфекции †

IQ, спецификация.
*Данные Stagno S, Whitley RJ: Герпесвирусные инфекции у новорожденных и детей: цитомегаловирус и вирус простого герпеса. In Holmes KK (ed): Заболевания, передающиеся половым путем, стр. 1197, McGraw Hill, 1999.
†Данные Fowler KB, Stagno S, Pass RF et al: Исход врожденной цитомегаловирусной инфекции по отношению к материнскому статусу антител.N Engl J Med 326:665, 1992.
‡Для лучшего слуха.
§После периода новорожденности.

Смертность среди наиболее тяжело пораженных младенцев может достигать 30%. Смерть в течение первого месяца жизни обычно вызвана полиорганной системной болезнью, которая вызывает тяжелую дисфункцию печени, диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови и вторичные инфекции. Среди младенцев, изученных Боппаной и его коллегами, ⁷⁸ 12% умерли в течение первых 6 недель жизни. Смерть, наступающая вне этого периода, но в течение 1 года жизни, обычно вызвана прогрессирующей печеночной недостаточностью и задержкой развития.Смерть после 1 года жизни обычно происходит от недоедания и инфекции среди лиц с инфекцией центральной нервной системы и неврологической инвалидностью. ⁷⁹

Напротив, прогноз относительно благоприятен для врожденно инфицированных младенцев, которые при рождении не имеют симптомов. Лишь у 5-15% бессимптомных врожденно инфицированных младенцев развиваются отдаленные последствия, которые проявляются в течение первых 2 лет жизни. Нейросенсорная тугоухость является наиболее частым последствием у этих младенцев, встречаясь примерно в 7 случаях.5% инфицированных младенцев бессимптомны при рождении. ^{80 , , 81 , 82 82 , 83 , 84 84} Обеспечение — это двустороннее в течение почти половины случаев и имеет достаточную серьезность для ухудшения устных коммуникаций и обучения. Тем не менее, другие неврологические осложнения, такие как умственная отсталость, микроцефалия, судороги и паралич, встречаются примерно у 2-3% врожденно инфицированных детей, у которых при рождении не было симптомов. ⁸⁵

Таким образом, вероятность того, что младенцы, пережившие симптоматическую врожденную ЦМВ-инфекцию, будут иметь нормальное интеллектуальное развитие и слух, невелика. ¹ Напротив, прогноз для инфицированных младенцев, у которых при рождении нет симптомов, благоприятный.

ПЕРВИЧНАЯ И РЕЦИДИВНАЯ МАТЕРИНСКАЯ ИНФЕКЦИЯ.

Большинство младенцев с зарегистрированными последствиями родились от матерей с первичной инфекцией во время беременности. ⁵¹ Врожденные ЦМВ-инфекции у детей женщин с иммунитетом, приобретенным до беременности, с меньшей вероятностью будут иметь симптомы при рождении, чем инфекции, вызванные первичной инфекцией. ^{33 , 35}

Эти дети также менее склонны к тяжелым последствиям (см. рис. 1). Fowler и соавт. ⁵¹ сравнили исходы у 125 ЦМВ-инфицированных детей, рожденных от матерей, которые заразились первичной ЦМВ-инфекцией во время беременности, с 64 ЦМВ-инфицированными детьми, рожденными от матерей с рецидивирующим заболеванием. Результаты, представленные в таблице 2, указывают на то, что существовавшие ранее материнские антитела к ЦМВ защищают плод и уменьшают тяжесть последствий врожденной ЦМВ-инфекции.Дети, инфицированные после первичной материнской инфекции, с большей вероятностью имели функционально значимую сенсоневральную тугоухость и более вероятно имели коэффициент интеллекта менее 70, чем дети, инфицированные после рецидивирующей материнской инфекции. Дети в первичной группе также были более склонны к тяжелым повреждениям, о чем свидетельствует распространенность множественных последствий (6%) в этой группе по сравнению с повторной группой (0%).

ВЕДЕНИЕ МАТЕРИНСКОЙ/ВРОЖДЕННОЙ ИНФЕКЦИИ

Консультирование

Консультирование женщины с первичной цитомегаловирусной инфекцией во время беременности является сложной задачей, а рациональный пренатальный протокол для оценки состояния плода осложняется капризами диагностических исследований и отсутствием последовательного прогностического показателя для плода .Рекомендуется риск-ориентированный подход. Априори, риск тяжело пораженного ребенка после первичной ЦМВ-инфекции у матери составляет от 3% до 6%, исходя из 40% вероятности врожденной инфекции, 10%-15% вероятности наличия симптомов у ребенка при рождении и 90% % вероятности осложнений среди новорожденных с симптомами, как показано на рис. 1.

Если диагностическое исследование подтверждает врожденную инфекцию, риск тяжелых неврологических нарушений у младенца увеличивается примерно до 10%. И наоборот, у оставшихся 90% младенцев прогноз отличный.Таким образом, у 60-70% женщин с первичной ЦМВ во время беременности пренатальное тестирование плода дает обнадеживающий отрицательный результат и предотвращает ненужное прерывание беременности. У оставшихся 30-40% женщин будет положительный результат. Внутриутробно прогнозирование того, что 10% этих плодов будут серьезно поражены, проблематично. Следует обсудить серийное ультразвуковое исследование и, возможно, кордоцентез в 22 недели для оценки плода на наличие гематологических или печеночных аномалий в качестве прогностических показателей.Некоторые из этих женщин предпочтут аборт, а не будут ждать дополнительной информации, полученной с помощью ультразвука или кордоцентеза. ⁶⁸ Если кордоцентез показывает тяжелую тромбоцитопению, следует рассмотреть переливание тромбоцитов вместе с серийными заборами крови плода для подтверждения разрешения. Если тромбоцитопения плода сохраняется, способ родоразрешения может быть изменен. ⁷⁵

Значение внутриутробной инфекции при отсутствии УЗИ-признаков и аномальных лабораторных показателей остается неясным, но, учитывая высокий процент бессимптомных врожденных ЦМВ-инфекций при рождении, разумно позволить этим беременностям продолжать серийный ультразвуковой мониторинг.При рождении все инфицированные младенцы должны находиться под пристальным наблюдением, включая последовательную оценку слуха и психомоторного развития в течение нескольких лет. ⁶⁴

Лечение

Лечение ЦМВ-инфекции во время беременности не известно. Два антиретровирусных препарата, ганцикловир и фоскарнет, доступны для лечения тяжелых ЦМВ-инфекций, угрожающих жизни или зрению, у пациентов с ослабленным иммунитетом. Системное лечение ганцикловиром не дало значительных клинических преимуществ у врожденно инфицированных младенцев и связано со значительной токсичностью. ^{86 , 87 , 88} Вариативный характер врожденного ЦМВ и необратимые повреждения, возникающие пренатально, затрудняют послеродовое лечение. В настоящее время проводятся контролируемые клинические испытания ганцикловира для лечения врожденного ЦМВ. ⁷⁹

Вакцина

Младенцы, рожденные от женщин с первичной ЦМВ-инфекцией во время беременности, чаще тяжело болеют при рождении, имеют двустороннюю тугоухость и умственную отсталость, чем дети, рожденные от женщин с рецидивирующей ЦМВ-инфекцией во время беременности . ⁵¹ В отличие от первичной ЦМВ-инфекции, только небольшой процент женщин с рецидивирующей инфекцией передает ЦМВ своим младенцам, и у этих младенцев редко возникают тяжелые последствия. ^{33 , 51} Таким образом, вакцинация восприимчивых женщин для предотвращения первичной ЦМВ-инфекции во время беременности может обеспечить защиту от повреждений, вызванных врожденной ЦМВ-инфекцией. ⁸⁹

Две живые аттенуированные вакцины (штаммы AD-169 и Towne) прошли испытания эффективности на иммунных и неиммунных здоровых людях и реципиентах почечного трансплантата. ^{90 , 91 , 92} Среди пациентов с трансплантацией почки, иммунизированных вакциной из штамма Towne, заболеваемость, связанная с первичной ЦМВ-инфекцией, была снижена, но инфекция не была предотвращена. ⁹³ Однако, что более важно, вакцинный вирус не реактивировался у носителей с ослабленным иммунитетом. Вакцина для предотвращения первичной инфекции среди беременных женщин в идеале не должна вызывать латентность или реактивацию во время беременности. Из-за этого теоретического потенциала живые аттенуированные вакцины обычно избегают при беременности.

Хотя исследования живого аттенуированного вируса следует продолжать, более безопасный подход предполагает использование субъединичной вакцины, провоцирующей образование антител к белку оболочки вируса. Гилкопротеин gB является наиболее распространенным белковым комплексом оболочки вируса, экспрессируемым на поверхности инфицированных клеток. Нейтрализующие антитела появляются вскоре после заражения и сохраняются в течение фазы выздоровления. ⁹⁴ В настоящее время проводятся ранние испытания на людях. ⁷⁹

Профилактика

В отсутствие подходящей вакцины единственной доступной в настоящее время мерой по предотвращению ЦМВ-инфекции является предотвращение заражения.ЦМВ не очень заразен, и горизонтальная передача требует тесного контакта с инфицированными выделениями или иногда с фомитами. Основными источниками заражения женщин детородного возраста являются половые контакты и дети, выделяющие вирус. Поведенческие интервенционные испытания, направленные на улучшение гигиены среди женщин с маленькими детьми, не показали статистически значимой разницы в частоте сероконверсии среди небеременных женщин. Однако из 14 беременных женщин, прошедших образовательное вмешательство, ни у одной из них не произошло сероконверсии в течение 9-месячного периода наблюдения.Это говорит о том, что обучение основным мерам гигиены может уменьшить первичное инфицирование беременных женщин с маленькими детьми дома. ⁹⁵ Беременным женщинам также следует рекомендовать избегать тесных контактов с лицами, которые могут выделять ЦМВ, например, со взрослыми с симптомами, характерными для мононуклеоза, и детьми младшего возраста, посещающими группы дневного ухода.

Пренатальный скрининг на антитела к ЦМВ остается спорным. Некоторые исследователи рекомендуют проводить скрининг женщин детородного возраста для определения статуса антител.Затем серонегативные женщины могут принять меры предосторожности, чтобы избежать заражения ЦМВ, такие как избегание сексуальных контактов с людьми, которые могут распространять ЦМВ, тщательное мытье рук после контакта с детскими выделениями и избегание использования общей посуды. ^{95 , 96 , 97} Однако эта рекомендация может оказаться невыгодной с точки зрения затрат, поскольку эффективность профилактического консультирования окончательно не доказана.